PAULA ANDREA GUERRERO GOMEZ

KELLY YOANA FUENTES NOVA

GUA DE PRCTICA DE LABORATORIO

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1. IDENTIFICACIN
INGENIERAQUMICA

PROGRAMA ACADMICO

BIOQUMICA
PROYECTOEXPERIMENTAL

UNIDAD DE ESTUDIO

PURIFICACINYCARACTERIZACINDELADNDELA
CEBOLLA

PRACTICA DE
LABORATORIO

2. MEDIDAS DE SEGURIDAD PARA LAS PERSONAS Y EL AMBIENTE A TENER EN

CUENTA EN EL DESARROLLO DE LA PRCTICA

REACTIVOS
Cantidad

Nombre

Clase de
riesgo*
Qumico

15m
L

Agua
desionizada

100m
L
100m
L

EDTA
Dodecilsulfato
de sodio (SDS)
al0.1%.
Difenilalanina
Etanolal95%
cido sulfrico

5g
20m
L
4m
L

En caso de
accidente
Pedir
atencin
mdica.

Qumico
Qumico

Medidas de
seguridad
Por ingestin de
grandes
cantidades
puede presentar
malestar.
Adjunto
Adjunto

Qumico
Qumico
Qumico

Adjunto
Adjunto
Adjunto

Adjunto
Adjunto
Adjunto

Adjunto
Adjunto

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100m
L
150m
L
10m
L
EQUIPOS
Cantidad
1
1
1

MATERIALES
Cantidad

concentrado
(H2SO4)
cidoactico
Qumico
glacial
Solucindelisis Qumico
Reactivo
de Qumico
difenilamina
Nombre

Clase de
riesgo *
Elctrico
Elctrico
Elctrico

Balanza
Baomaria
Nevera
Nombre

Cebolla

Beakerde250
mL
vasode
precipitadode
250Ml
Tubosd
e
ensayo
Micropipetas
automticas
Varillad
e
vidrio.
Puntas
desechables
Pipeteador

10
2
2
5

Adjunto

Adjunto

Adjunto
Adjunto

Adjunto
Adjunto

Medidas de
seguridad

En caso
accidente

Clase de
Medidas de
riesgo*
seguridad
Biolgico grado Noaplica
1
Noaplica
Noaplica

En caso
accidente
Noaplica

Noaplica

Noaplica

Noaplica

Noaplica

Noaplica

Noaplica

Noaplica

Noaplica

Noaplica

Noaplica

Noaplica

Noaplica

Noaplica.

Noaplica.

Noaplica.

Noaplica.

Noaplica.

Noaplica.

de

de

Noaplica

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1
1
1

1
1
1

Probetade20
mL
embudode
filtracin
papelfiltro
Algodn
Gradilla
Bistur
pipetagraduada
de20mL

Noaplica.

Noaplica.

Noaplica.

Noaplica.

Noaplica.

Noaplica.

Noaplica.
Noaplica.
Noaplica.
Fisico
Noaplica.

Noaplica.
Noaplica.
Noaplica.
Noaplica.
Noaplica.

Noaplica.
Noaplica.
Noaplica.
Noaplica.
Noaplica.

*Clasederiesgo:Biolgico grado 1, Qumico, Elctrico, Fsico, ninguno

3. BUENAS PRCTICAS DE SOSTENIBILIDAD AMBIENTAL EN EL MANEJO DE

RESIDUOSA TENER EN CUENTA EN EL DESARROLLO DE LA PRACTICA

Nombreresiduo

Clasificacindela Manejodelresiduo
peligrosidad*
Sustancia
no Se desaconseja su
peligrosa
vertido a cursos de
agua.

En
caso
de
accidente
Aguadestilada
Por ingestin de
grandes cantidades:
En caso de malestar,
pedir
atencin
mdica.
*Clasificacindepeligrosidad:segnlaGua de almacenamiento de sustancias qumicas y
residuos qumicos.
EDTARIESGOSPARALASALUD
Ingestinaccidental:Puedecausarirritacineneltractodigestivopuedecausarreaccin
alrgicaDeabeberinmediatamenteaguaoleche.
Contactoconlosojos:PuedeprovocarIrritacinenlosojosLavarsuavementeconagua
corrientedurante15minabriendoocasionalmentelosprpados.Solicitaratencinmdicade
inmediato.

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Contactoconlapiel:Puedeprovocarirritacindelapiel.Lavarconaguacorrientedurante
15min.Almismotiempoquitarselaropacontaminadaycalzado.Soliciteatencinmdica
AbsorcinNingunoidentificadoNosedisponedeinformacinInhalacinPuedecausar
Irritacinenlasvastractorespiratorias.Trasladeaunlugarconventilacinadecuada,Si
respiracondificultadsuministraroxigeno.Soliciteatencinmdicadeinmediato.

DodecilsulfatodesodioDeclaracionesdepeligro
Slidoinflamable.
Nocivoencasodeingestin.
Provocairritacincutnea.
Provocalesionesocularesgraves.
Puedeirritarlasvasrespiratorias.
Nocivoparalosorganismosacuticos,conefectosnocivosduraderos.
Manteneralejadodefuentesdecalor.
Evitarsuliberacinalmedioambiente.
Llevargafasdeproteccin.
DifenilalaninaIdentificacindelospeligros
Noesunasustanciaomezclapeligrosa.Encasodecontactoconlapiel,lavarconjabny
abundanteaguadurante,almenos,15minutos,yquitarlaropaycalzadocontaminados.
Llamaraunmdicosipersistelairritacin.Trascontactoconlosojos:aclararconabundante
aguadurante,almenos,15minutos,manteniendoabiertoslosprpados.Llamaraunmdico
sipersistelairritacin.Encasodeinhalacin:sacaralsujetoalairelibre.Sirespiracon
dificultad,llamaraunmdico.Trasingestin:enjuagarlabocaconagua.Noprovocarel
vmito.Siseingiereengrancantidad,llamaraunmdico.Ligerairritacinenojos.Nosehan
observadoefectosnocivoshastalafechaconlacorrectamanipulacindeesteproducto.
EtanolIdentificacindelospeligros
Riesgos de fuego y explosin:Porserunproductoinflamable,losvaporespuedenllegaraun
punto de ignicin, prenderse y transportar el fuego hacia el material que los origin. Los
vapores pueden explotar si se prenden en un rea cerrada y pueden generar mezclas
explosivaseinflamablesconelaireatemperaturaambiente.
Inhalacin: Los efectos no son serios siempre que se use de manera razonable. Una
inhalacin prolongada de concentraciones altas (mayores de5000ppm)produceirritacinde
ojos y tracto respiratorio superior, nuseas, vmito, dolor de cabeza, excitacin o depresin,
adormecimientoyotrosefectosnarcticos,comaoincluso,lamuerte.
Contacto con ojos: Se presenta irritacinsoloenconcentracionesmayoresa5000a10000
ppm.

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Contacto con la piel: El lquido puede afectar la piel, produciendo dermatitis caracterizada
por resequedad y agrietamiento. Ingestin: Dosis grandes provocan envenenamiento
alcohlico,mientrasquesuingestinconstante,alcoholismo.
Primerosauxilios:
Inhalacin: Traslade a la vctima a un lugar ventilado. Aplicar respiracinartificialsistaes
dificultosa,irregularonohay.Proporcionaroxgeno.
Ojos:Lavarinmediatamenteconaguaodisolucinsalinademaneraabundante.
Piel: Eliminar la ropa contaminada y lavar la piel con agua y jabn. Ingestin: No inducir el
vmito.
Indicacionesgenerales:Encasodeprdidadelconocimientonuncadarabeberni
provocarelvmito.
4.2Inhalacin:Trasladaralapersonaalairelibre.Encasodequepersistaelmalestar,pedir
atencinmdica.
4.3Contactoconlapiel:Lavarabundantementeconagua.Quitarselasropascontaminadas.
Extraerelproductoconunalgodnimpregnadoenpolietilenglicol400.4.4
Ojos:Lavarconaguaabundante(mnimodurante15minutos),manteniendolosprpados
abiertos.Pediratencinmdica.
4.5Ingestin:Beberaguaabundante.Evitarelvmito(existeriesgodeperforacin).Pedir
inmediatamenteatencinmdica.Noneutralizar.
cidosulfricodeclaracionesdepeligro
Provocaquemadurasgraves.
Indicacionesgenerales:Encasodeprdidadelconocimientonuncadarabeberni
provocarelvmito.
4.2Inhalacin:Trasladaralapersonaalairelibre.Encasodequepersistaelmalestar,pedir
atencinmdica.
4.3Contactoconlapiel:Lavarabundantementeconagua.Quitarselasropas
contaminadas.Extraerelproductoconunalgodnimpregnadoenpolietilenglicol400.
4.4Ojos:Lavarconaguaabundante(mnimodurante15minutos),manteniendolos
prpadosabiertos.Pediratencinmdica.
4.5Ingestin:Beberaguaabundante.Evitarelvmito(existeriesgodeperforacin).Pedir
inmediatamenteatencinmdica.Noneutralizar.
Efectospeligrososparalasalud:
Porinhalacindevapores:Irritacionesenvasrespiratorias.Sustanciamuycorrosiva.
Encontactoconlapiel:Provocaquemaduras.
Porcontactoocular:quemaduras,ceguera(lesinirreversibledelnervioptico).
Poringestin:Quemadurasenelaparatodigestivo.Fuertesdolores,conriesgode

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perforacin.Puedeprovocarnuseas,vmitos,diarreas.
Despusdeunperiododelatencia:estenosisdelploro.

cido acticodeclaracionesdepeligro

Lquidoincoloropeligro!Lquidoyvaporinflamable.Corrosivo,puedesernocivosise
absorbeatravsdelapiel.Causaseverairritacinyquemadurasdepiel,ojostracto
respiratorioydigestivo.
Inhalacin:Irritacinseveradelanarizylagarganta,nuseas,resfriado,dolorenelpechoy
dificultadrespiratoria.Altasconcentracionespuedecausarinflamacinenlasvas
respiratorias(bronconeumona)yacumulacindefluidosenlospulmones(edema)
Contactoconlosojos:Puedecausarquemadurasirreversiblesdelacrnea.Vaporesde
cidoactico,olquidopuedencausarirritacin.
Contactoconlapiel:Escorrosivo,producequemaduras,altamenteirritante.
Ingestin:Quemaduraseinflamacindelaboca,elabdomenylagarganta,vmitoy
deposicinconsangre.Irritacintractogastrointestinal(esfagoyestmago),espasmos
estomacales,tambinpuederesultarvmitoconsangre,daosenlosriones.
4.PRIMEROSAUXILIOS
Inhalacin:Trasladaralairefresco.Sinorespiraadministrarrespiracinartificial.Evitarla
reanimacinbocaaboca.Sirespiracondificultadsuministraroxgeno.Contactoconlos
ojos:Lavarconabundanteagua,mnimodurante15minutos.Levantaryseparelos
prpadosparaasegurarlaremocindelqumico.
Contactoconlapiel:Retirarlaropaycalzadocontaminados.Lavarlazonaafectadacon
abundanteaguayjabn,mnimodurante15minutos.Silairritacinpersisterepetirellavado.
Ingestin:Lavarlabocaconagua.Siestconsciente,suministrarabundanteagua.No
inducirelvmito.Mantenerlavctimaabrigadayenreposo.Buscaratencinmdica
Solucindelisisdeclaracionesdepeligro
Encasodeinhalacindelproducto:Suministrarairefresco.Encasodetrastornos,
consultaralmdico.
Encasodecontactoconlapiel:Aclararconabundanteagua.Encasodeirritaciones
continuasdelapiel,consultarunmdico.
Encasodeconlosojos:Limpiarlosojosabiertosdurantevariosminutosconagua
corriente.Proporcionarasistenciamdicaalapersonaafectada.
Encasodeingestin:Enjuagarlaboca.Consultarunmdicosilostrastornospersisten
Mediosdeextincin:Mediosdeextincinapropiados.Usarmedidasdeextincinquesean
apropiadasalascircunstanciasdellocalyasusalrededores.Mediosdeextincinno

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apropiadosNoexistenlimitacionesdeagentesextinguidoresparaestasustancia/mezcla.
PeligrosespecficosderivadosdelasustanciaolamezclaNocombustible.
Recomendacionesparaelpersonaldeluchacontraincendios
EquipodeproteccinespecialparaelpersonaldeluchacontraincendiosEncasodefuego,
protjaseconunequiporespiratorioautnomo
Medidasdeproteccinindividual:Lostiposdeauxiliaresparaproteccindelcuerpodeben
elegirseespecficamentesegnelpuestodetrabajoenfuncindelaconcentracinycantidad
delasustanciapeligrosa.Deberaaclararseconelsuministradorlaestabilidaddelosmedios
protectoresfrentealosproductosqumicos.
Precaucionespersonales:equipodeproteccinyprocedimientosdeemergencia
Indicacionesparaelpersonalquenoformapartedelosserviciosdeemergencia:Norespirar
losvapores,aerosoles.Evaceelreadepeligro,respetelosprocedimientosdeemergencia,
consulteconexpertos

4. PRACTICA DE LABORATORIO

4.1 OBJETIVO
PurificarelDNAdeclulasvegetales.
ObservarlaestructurafibrilardelADN.

4.2 FUNDAMENTOS TERICOS

INTRODUCCIN
El ADN constituye el material hereditario de un individuo. En l estn escritas las
instrucciones que deben seguir las clulas para construir un organismo y mantenerlo
vivo. Todas las clulas que forman un individuocontienenunacopiaidnticadeADN.
Cada una de ellas, sin embargo, lee una parte de estas instrucciones y por eso hay
clulas con diferentes formas y funciones. En este experimento os proponemos
extraer el ADN de las clulas que forman una cebolla. Las clulas eucariotas, como
las nuestras o las de las cebollas, contienen el ADN en el interior de un
compartimento llamado ncleo celular. Por ello, para extraer el ADN, deberemos
romper la membrana celular y tambin la membrana nuclear. Las clulas vegetales,
adems, cuentan con una pared rgida de celulosa que tambin tendremos que
romper para liberarelADN.Entodomomentosermuyimportantequeprotejamosel
ADNdelosenzimasquepuedandegradarlo.Y,porltimo,harfaltaaislarlo.

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Elcidodesoxirribonucleico(ADN),frecuentementeabreviadocomoADN,esuncido
nucleicoquecontieneinstruccionesgenticasusadaseneldesarrolloyfuncionamientode
todoslosorganismosvivosconocidosyalgunosvirus,yesresponsabledesutransmisin
hereditaria.ElpapelprincipaldelamolculadeADNeselalmacenamientoalargoplazode
informacin.Muchasveces,elADNescomparadoconunplanoounareceta,ouncdigo,ya
quecontienelasinstruccionesnecesariasparaconstruirotroscomponentesdelasclulas,
comolasprotenasylasmolculasdeARN.

LossegmentosdeADNquellevanestainformacingenticasonllamadosgenes,perolas
otrassecuenciasdeADNtienenpropsitosestructuralesotomanparteenlaregulacindel
usodeestainformacingentica.Desdeelpuntodevistaqumico,elADNesunpolmerode
nucletidos,esdecir,unpolinucletido.Unpolmeroesuncompuestoformadopormuchas

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unidadessimplesconectadasentres,comosifueraunlargotrenformadoporvagones.Enel
ADN,cadavagnesunnucletido,ycadanucletido,asuvez,estformadoporunazcar
(ladesoxirribosa),unabasenitrogenada(quepuedeseradeninaA,timinaT,citosinaC
oguaninaG)yungrupofosfatoqueactacomoenganchedecadavagnconelsiguiente.
Loquedistingueaunvagn(nucletido)deotroes,entonces,labasenitrogenada,yporello
lasecuenciadelADNseespecificanombrandoslolasecuenciadesusbases.
Ladisposicinsecuencialdeestascuatrobasesalolargodelacadena(elordenamientode
loscuatrotiposdevagonesalolargodetodoeltren)eslaquecodificalainformacin
gentica:porejemplo,unasecuenciadeADNpuedeserATGCTAGATCGC.Enlos
organismosvivos,elADNsepresentacomounadoblecadenadenucletidos,enlaquelas
doshebrasestnunidasentresporunasconexionesdenominadaspuentesdehidrgeno.
Componentes
Estructuradesoporte:LaestructuradesoportedeunahebradeADNestformada
por unidades alternas de grupos fosfato y azcar. El azcar en el ADN es una
pentosa,concretamente,ladesoxirribosa.
cido fosfrico: Su frmula qumica es H3PO4 . Cada nucletido puede contener
uno (monofosfato: AMP), dos (difosfato: ADP)otres(trifosfato:ATP)gruposdecido
fosfrico, aunque como monmeros constituyentes de los cidos nucleicos slo
aparecenenformadenuclesidosmonofosfato.

Desoxirribosa: Es unmonosacridode5tomosdecarbono(unapentosa)derivado
de la ribosa, que forma parte de la estructura de nucletidos del ADN.Sufrmulaes
C5H10O4 . Una de las principales diferencias entre el ADN y el ARN es el azcar,
pues en el ARN la 2desoxirribosa del ADN es reemplazada por una pentosa
alternativa, la ribosa.25 Las molculas de azcar se unen entre s atravsdegrupos
fosfato, queformanenlacesfosfodisterentrelostomosdecarbonotercero(3,tres
prima)yquinto(5,cincoprima)dedosanillosadyacentesdeazcar.Laformacin
de enlaces asimtricos implica que cada hebra de ADN tiene una direccin. En una

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doble hlice, la direccin de los nucletidos en una hebra (3 5) es opuesta a la

direccin en la otra hebra (5 3). Esta organizacin de las hebras de ADN se
denomina antiparalela son cadenas paralelas, pero con direcciones opuestas. De la
misma manera, los extremos asimtricos de las hebras de ADN se denominan
extremo5(cincoprima)yextremo3(tresprima),respectivamente.

Basesnitrogenadas:Lascuatrobasesnitrogenadasmayoritariasqueseencuentran
enelADNsonlaadenina(A),lacitosina(C),laguanina(G)ylatimina(T).Cadauna
deestascuatrobasesestunidaalarmazndeazcarfosfatoatravsdelazcar
paraformarelnucletidocompleto(baseazcarfosfato).Lasbasessoncompuestos
heterocclicosyaromticoscondosomstomosdenitrgeno,y,dentrodelasbases
mayoritarias,seclasificanendosgrupos:lasbasespricasopurinas(adeninay
guanina),derivadasdelapurinayformadaspordosanillosunidosentres,ylas
basespirimidnicasobasespirimdicasopirimidinas(citosinaytimina),derivadasdela
pirimidinayconunsoloanillo.Enloscidosnucleicosexisteunaquintabase
pirimidnica,denominadauracilo(U),quenormalmenteocupaellugardelatiminaen
elARNydifieredestaenquecarecedeungrupometiloensuanillo.Eluracilono
seencuentrahabitualmenteenelADN,sloapareceraramentecomounproducto
residualdeladegradacindelacitosinaporprocesosdedesaminacinoxidativa.

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4.3 PROCEDIMIENTO

1. PROCEDIMIENTO:Preparacindelosreactivos:SolucionesStockybuffer

ObtencindeSolucindeLisis:

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ObtencindeReactivodedifenilamina:

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4.4 CUESTIONARIO

a) Cul es la funcin de los dos componentes de la solucin de lisis ?.

Explique.
b) b A qu se debe la diferencia de viscosidades del DNA observada en los
experimentos?
RECOMENDACIONES
Tener los EPP bsicosparaentraraloslaboratorios(Bata,guantes,gafas),y
cumplirconlasnormasdevertimientosderesiduos

4.5 BIBLIOGRAFA.

hp://tux.uis.edu.co/quimica/sites/default/les/paginas/archivos/V00Man10Bioqca_MFOQBQ.01_0

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8072013.pdf
hps://es.wikipedia.org/wiki/Embudo_de_ltraci%C3%B3n
hps://www.google.com.co/search?q=Bases+nitrogenadas:&rlz=1C1NHXL_esCO711CO711&espv=2&
biw=1920&bih=974&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwib5pzk5pfQAhUW5WMKHb0DCo8
Q_AUIBigB#imgrc=WqWUvnZhb2vWEM%3A
hps://es.wikipedia.org/wiki/Balanza
hps://www.google.com.co/search?q=Desoxirribosa&rlz=1C1NHXL_esCO711CO711&espv=2&biw=1
920&bih=974&tbm=isch&imgil=uHd7N8gQsO66vM%253A%253Bjvw4h5s0__nTtM%253Bhps%2525
3A%25252F%25252Fes.wikipedia.org%25252Fwiki%25252FDesoxirribosa&source=iu&pf=m&r=uHd
7N8gQsO66vM%253A%252Cjvw4h5s0__nTtM%252C_&usg=__DCHwBl5b9Mx6F6WT3qCmEOhJgi8%3
D&ved=0ahUKEwiu2M_45fQAhULwWMKHTiYCGoQyjcIOQ&ei=YgshWK6fD4uCjwO4sKLQBg#tbm=isc
h&q=desoxirribosa+alimentos&imgrc=semjet77zc0ApM%3A
hps://www.google.com.co/search?q=EPP&espv=2&rlz=1C1NHXL_esCO711CO711&biw=1920&bih=
974&tbm=isch&imgil=8iFtMhtSop4n3M%253A%253BnGwWXT3ySVn_mM%253Bhp%25253A%2525
2F%25252Fwww.vdppanama.com%25252FSeguridad.html&source=iu&pf=m&r=8iFtMhtSop4n3M%
253A%252CnGwWXT3ySVn_mM%252C_&usg=__svAzb8PXh5qxmrOPPJuYdiIRZ0k%3D&ved=0ahUKE
wiRivA95fQAhVW12MKHXGxBckQyjcIOA&ei=1x8hWNHCJdaujwPx4pbIDA#imgrc=mRh5o_TaWuFPg
M%3A

ELABORA
DOCENTE

REVISA
COORDINADOR

APRUEBA
DIRECTOR

DIANAANGELICAVARELA

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