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CURSO
: MICROBIOLOGIA I
INTEGRANTES
CICLO
: 2016 0
I.
INTRODUCCION
III.
3.1.
MARCO TEORICO.
Principales mtodos de recuento del nmero bacterias en una
muestra
El nmero de bacterias puede determinarse directamente por recuento del
nmero total de clulas o indirectamente por la estimacin del nmero ms
probable, por filtracin o por el recuento de clulas viables en placa (clulas
capaces de dividirse en un medio de cultivo slido, tambin se refieren como
unidades formadoras de colonias, UFCs).
3.1.1. Recuento directo de bacterias al microscopio
Es una tcnica para determinar el nmero total de organismos de una muestra:
Se utilizan cmaras de recuento (cmara de Petroff-Hauser) y visualizacin al
microscopio. Es un mtodo rpido del nmero total de clulas de una muestra
pero no distingue entre viables o no viables.
3.1.2. Recuento directo con contadores electrnicos
Se utiliza el contador Coulter recuenta el nmero de clulas suspendidas en un
lquido, a su paso por un orificio por donde fluye la corriente elctrica. Se puede
determinar a su vez el tamao de las clulas pero tampoco distingue entre
viables, muertas o partculas.
3.1.3. Recuento en filtros de membrana
En este mtodo el recuento se realiza por filtracin de un volumen de la
muestra a travs de un filtro de membrana de tamao adecuado para retener a
las bacterias (0.22-0.45 m). Una vez filtrada la muestra, el filtro se coloca
sobre un medio de cultivo slido y se incuba. El recuento del nmero de
colonias formadas sobre el filtro determina el nmero total de bacterias en la
muestra filtrada. Es un mtodo til cuando el nmero de bacterias presentes en
la muestra es muy bajo. Se utiliza con frecuencia para determinar el nmero de
bacterias en agua.
un
perodo
de
adaptacin,
cuando
un
cultivo
de
utiliza
para
determinar
el
nmero
de
clulas
aisladas
IV.
MATERIALES Y METODOS
Cuentacolonias.
Agar plate count.
Diluyente: agua peptonada al 0.1%
Muestra de alimentos (QUESO).
B. Procedimiento:
i. Preparacin de las diluciones:
Si la muestra es
10
para
ambos casos.
Tomar 1mL del primer tubo o frasco de dilucin e introducirlo en un
segundo tubo de ensayo conteniendo 9mL de diluyente y proceder
igual a los descritos anteriormente. Este tubo corresponde a la dilucin
102 .
Para las dems diluciones repetir lo descrito anteriormente. Realizar
tantas diluciones como corresponde de acuerdo el estado de
contaminacin de la muestra.
ii. Recuento estndar en placas:
Tomar 1mL de las tres ltimas diluciones y colocarlas en placas de
petri vacas identificadas, hacerlo por duplicado (de acuerdo al grfico).
Realizar de igual modo con las otras diluciones.
Adicionar a cada placa petri con el inoculo, 15mL de medio de cultivo
fundido y temperado a
mediante
B. Procedimiento:
Colocar 1mL de solucin de azul de metileno en un tubo de ensayo
esterilizado.
Agregar 10mL de leche cruda.
Colocar los tubos con la muestra en bao mara a 36 - 37
asegurando que el agua cubra toda la muestra.
Cronometrar el inicio del periodo de la prueba de reduccin del azul
de metileno e invertir los tubos a cada 30min para redistribuir las
bacterias y la grasa.
Hacer la siguiente lectura 1h despus y as sucesivamente hasta que
la leche presente decoloracin.
Despus de cada observacin invierta, lentamente en su posicin
inicial.
V.
RESULTADOS Y DISCUSIN
XFd
(1)
inoculo
1
(2)
dilucion
Eje:
4
Dilucin = 10
Fd=
1
=104
4
10
Numero de microorganismos
Dilucione
s
Promedio en base
placa
1
placa
2
Promedio
10
328
315
321.5
321.5* 10
104
252
245
248.5
248.5* 10
105
157
165
161
161* 10
106
6
Media
Aritmtica
335.75 10
248.510 colonia
N=
1 mL
N=248.5104
Clase de leche
1 a 3 Horas
Regular
VI.
CONCLUSIONES
VII.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
http://www.pomif.com/pages/practicas/bacteriologia/recuento-de-
bacterias-viables/recuento-text
http://www.buenastareas.com/ensayos/Recuento-De-
Colonias/6099513.html
http://www.unad.edu.co/fac_ingenieria/pages/Microbiologia_mutimedia/3
_4_3recuento.htm
http://es.scribd.com/doc/38138496/Recuento-y-Cuantificacion-de-
Microorganismos#download
http://www.unavarra.es/genmic/micind-2-3.htm.
http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20general/12-
metodos%20de%20recuento.htm
http://www.buenastareas.com/ensayos/An%C3%A1lisis-De-La-LechePrueba-De/3517332.html