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Laboratorio de Bioqumica II

Practica # 10. Determinacin de colesterol srico y HDL colesterol


Universidad Autnoma de Ciudad Jurez Instituto de Ciencias Biomdicas
Licenciatura en Qumica Laboratorio de Bioqumica II
Adriana Lucely Euan Ku 91883 Equipo No. 4

Introduccin
Los lpidos se clasifican de acuerdo a si
son saponificables o no saponificables, dentro
de esta ultima clasificacin se encuentra los
esteroles al cual pertenece el colesterol, este
lpido se encuentra en tejidos corporales y en el
plasma sanguneo de lo vertebrados. Se
encuentra en altas concentraciones en el hgado,
medula espinal, pncreas y cerebro. Desempea
diversas funciones dentro del cuerpo humano,
ya se estructural y como precursor de la
vitamina D, hormonas sexuales, hormonas
corticoesteroidales, sales biliares y de las balsas
de lpidos 2.
Debido a su insolubilidad en agua, el
colesterol plasmtico solo existe en la forma de
complejo llamado lipoprotenas, principalmente
LDL y HDL, que tiene la capacidad de fijar y
transportar grandes cantidades de colesterol; el
primero se relaciona mucho con la
arteriosclerosis. Las lipoprotenas plasmticas
son partculas que solubilizan y transportan el
colesterol en el torrente sanguneo. La funcin
principal de las lipoprotenas de alta densidad o
HDL en el metabolismo lipdico es la captacin
y transporte de colesterol desde los tejidos
perifricos al hgado en un proceso conocido
como transporte reverso de colesterol
(mecanismo cardioprotectivo). El HDL
colesterol bajo, est asociado con un alto riesgo
de enfermedad cardaca. Por este motivo la
determinacin de HDL colesterol es una
herramienta til en la identificacin de
individuos de alto riesgo 1.
La concentracin aceptada como normal
de
colesterol
en
plasma
sanguneo
(colesterolemia) de personas sanas es de 150 a
280 mg/dL, sin embargo varan mucho las
concentraciones. Cuando la concentracin
aumenta se habla de hipercolesterolemia 1.
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Objetivo
Determinar la concentracin de colesterol total
srico y el de HDL, y su influencia en
implicaciones clnicas
Materiales y reactivos
Suero
Solucin patrn
Reactivo de colesterol
Sobrenadante II
Metodologa
Para preprara el sobrenadante: se tom 0.05
ml de suero + 0.05 ml de reactivo precipitante
de HDL- COLESTEROL, se mezcl , se dejo
reposar 5 min y se centrifug 5 min a 3000
rpm

Se prepararon 6 tubo de acuerdo a la


sigueiente tabla

Reactivos
(ml)
Suero
(ml)
Patrn
(ml)
Agua
(ml)
Sobrenad
ante II
R
Colestero
l
(ml)

Blanc
o
---

Patrn

HDL

P1

P2

P3

---

---

0.05

0.05

0.05

---

0.05

---

---

---

----

0.05

---

---

---

---

---

---

----

0.05

---

---

---

Laboratorio de Bioqumica II
Todos los tubo se mezclaron y se dej que se
lleve a cabo la reaccion durante 20 min y se
anadi 0.2 ml de H2SO4
Todo lo anterior se realizo sobre hielo y luego
se suavemente

Se leyeron las absorbancias a una longitud de


onda de 640 nm

Clculos
[Colesterol T]=Abs Prob/Abs patrn x [patrn]
[HDL colest.]=absProb/abs patrn x [patrn]
Factor de riesgo coronario=colesterol T/HDL
Resultados
Tabla 1. Absorbancias de los diferentes parmetros
medidos

Parmetros
Blanco
Patrn
HDL-colesterol
Problema 1
Problema 2
Problema 3

Absorbancia
0
0.012
0.150
0.162
0.152
0.173

Tabla 2. Resultado de los diferentes parmetros


determinados

Parmetros
Problema 1
Problema 2
Problema 3
HDL colesterol (p. 2)
FRC

Resultados (mg/dL)
2491.08
2267.33
2580.58
2237.5
1.013

Discusin
De acuerdo con los resultados obtenidos
es posible observar que los valores de las tres
muestras problemas estn mu fuera del rango
normal (> 280 mg/dL) 2, debido a que hubo una
falla en el equipo (espectrofotmetro) y por eso
los resultados de las Absorbancias nos arrojaron
valores indeseados, lo mismo que para el
patrn, al salir muy baja la Absorbancia
(0.012). Ver tabla 1 y 2.
De acuerdo a la bibliografa los valores
de referencia de colesterolemia son: por debajo
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de los 200 mg/dL es la concentracin deseable


ya que se relaciona con un bajo riesgo de
enfermedad cardiovascular, cuando los valores
estn entre los 240 y 270 mg/dl hay un riesgo
intermedio y, cuando es mayor a los 280 mg/dL
se dice que hay un alto riesgo cardiovascular
muy alto, por ello es recomendando iniciar un
cambio en el estilo de vida (dieta y ejercicio) 1.
Los valores normales de colesterol HDL son de
40-60 mg/dL, sin embargo si los valores
sobrepasan un poco, es muy aceptable debido a
que las HDL son consideradas como Factor
Protector, ya que es el encargado de recolectar
el colesterol de los tejidos y llevarlos al hgado
para su procesamiento, por otro lado estn las
LDL (Low Density Lipoproten), consideradas
como Factor de Riesgo y cuyos valores estn
por debajo de los 140 mg/dL.
Con respecto al factor de riesgo
coronario, el valor es muy bajo (1.033 mg/dL)
lo que indica que no se relaciona con un factor
de riesgo cardiovascular, sin embargo el
promedio normal en hombres es de 3.43 y en
mujeres de 3.27.
Conclusin
El colesterol srico total tiene una
utilidad comprobada en el diagnstico de
hiperlipoproteinemia,
arteriosclerosis,
enfermedades hepticas y tiroidales. El
colesterol total y el colesterol HDL, junto con
una determinacin de triglicrido proveen una
informacin valiosa para la prediccin de la
enfermedad coronaria del corazn, y para el
genotipo de lipoprotena de acuerdo a la
clasificacin de Fredickson.
Altos niveles de colesterol se asocian a
riesgo
de
padecer
enfermedades
cardiovasculares, en especial aquel unido a las
LDL (colesterol malo), en cambio el colesterol
HDL (colesterol bueno) se transporta al hgado
para su metabolizacin y excrecin por va
biliar y por tanto no se asocia con riesgo de
enfermedades coronarias.
Bibliografa
1. Ferri, Fred. Consultor Clnico de Medicina
Interna: Claves Diagnosticas y Tratamientos.

Laboratorio de Bioqumica II

Editorial Ocano Mosby. Cuarta edicin.


Barcelona, Espaa. 2006. Pg.421, 1271
2. Murray, Robert; Mayes, Peter A, et al.
Harper, Bioqumica Ilustrada. Editorial Manual

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Moderno. 16 Edicin. Mxico, D.F. 2005. Pg.


125, 131.