UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIS

CAMPUS DE JATA
CENTRO DE CINCIAS AGRRIAS
CURSO DE MEDICINA VETERINRIA

ANDROLOGIA E TECNOLOGIA DE SMEN EM BOVINOS

Fernanda Monique Rezende Faria

Orientador: Prof. Msc. Marco Antnio de Oliveira Viu

Jata
2008

ii

FERNANDA MONIQUE REZENDE FARIA

ANDROLOGIA E TECNOLOGIA DE SMEN EM BOVINOS

Trabalho

de

concluso

de

curso

de

graduao para obteno do ttulo de Mdica

Veterinria junto Universidade Federal de
Gois.
rea de concentrao: Reproduo de
Bovinos de Corte.

Orientador: Prof. Msc. Marco Antnio de Oliveira Viu

Supervisora: Mdica Veterinria Cntia Maria G. Oliveira

JATA
2008

iii

FERNANDA MONIQUE REZENDE FARIA

Trabalho de Concluso de Curso defendido e aprovado em ____ de ______ de

2008, pela seguinte Banca Examinadora:

_______________________________________
Prof. MSc. Marco Antnio de Oliveira Viu
UFG - Jata/GO
Presidente da banca

_______________________________________
Prof. MSc. Ana Lusa Aguiar de Castro
Membro da banca

_______________________________________
Prof. Dr. Slvio Luiz de Oliveira
Membro da banca

Jata
2008

iv

Dedico este trabalho a minha me, Dilma

Lcia de Rezende, exemplo de garra, fora
e determinao, que proporcionou os meios
para que eu alcanasse mais esse objetivo;
a minha irm, Gabriella Rezende Moura,
pela pacincia e carinho nos momentos de
estresse; aos meus avs (In memorian), que
me ensinaram a viver com alegria e f; aos
tios e tias, pelo incentivo; aos primos e
primas pelas horas de diverso.

vi

Agradecimentos
Agradeo a Deus por iluminar sempre o meu caminho.
A todos os professores que durante os anos de faculdade, alm do
ensinamento, me deram lio de vida (em especial professora Vera Banys, Ana
Lusa, Alana, Vera Fontana, Lorena e Carla).
Aos colegas e companheiros de faculdade que proporcionaram tantos
momentos de alegria (Vanessa, Eduardo, Tiago, Danilo Almeida, Danilo Vilela, Yara
Luza, Cnara, Heriton, Liane, Hlida, Hiarrane Poliane e Talita), compartilharam
outros de trabalho, dificuldades e aprendizado (Joz Tiago, Raquel, Raphael,
Marcondes e Bruno Rosa).
Aos colegas que tambm me ensinaram (Felipe, Renato e Sebastio Carlos).
As amigas Ana Paula, Ana Caroline e Alyne pela amizade verdadeira.
Ao Medico Veterinrio Andr Lus, pelos ensinamentos, pacincia e exemplo
determinao e profissionalismo.
minha supervisora Cntia Maria G. Oliveira, pela a oportunidade,
aprendizado, amizade e exemplo a seguir de fora, luta e dedicao a carreira.
Ao meu orientador, Prof. Msc. Marco Atnio de Oliveira Viu, por dar condies
para a concluso deste trabalho.
Aos meus tios (Rubens e Mara) e meu padrasto Sebastio Geraldo pela ajuda
na realizao deste trabalho.
Aos meus tios (Joo Eudes e Leodete), pelo apoio, carinho e incentivo nos
momento de dificuldades.
E a todos que acreditaram na minha conquista, pelo incentivo.

vii

SUMRIO
1 INTRODUO

.....................................................................................1

2 DESCRIO DO LOCAL DE ESTGIO ..................................................3

2.1 Descrio das Atividades Desenvolvidas no Campo de Estgio ....3
CAPTULO I
AVALIAO ANDROLGICA ....................................................................5
1 INTRODUO ..........................................................................................6
2 EXAME ANDROLGICO .........................................................................7
2.1 Identificao .........................................................................................7
2.2 Histrico e Anamnese..........................................................................7
2.3 Exame Clnico Geral.............................................................................8
2.4 Exame Fsico dos rgos Reprodutivos............................................8
3 ESPERMIOGRAMA..................................................................................13
3.1 Mtodo de Colheita do Smen ............................................................13
3.2 Caractersticas Fsicas do Smen ......................................................14
3.3 Caractersticas Morfolgicas ..............................................................17
4 AVALIAO DO COMPORTAMENTO SEXUAL ....................................22
5 EMISSO DO LAUDO..............................................................................25
6 DETERMINAO DO POTENCIAL FECUNDANTE ...............................25
CAPTULO II
TECNOLOGIA DO SMEN .........................................................................29
1 INTRODUO ..........................................................................................30
2 COLETA DO SMEN ...............................................................................31
2.1 Instalaes e Preparao dos Animais ..............................................31
2.2 Obteno do Ejaculado........................................................................32
2.3 Avaliao do Smen ............................................................................33
2.4 Processamento do Smen...................................................................34
2.4.1 Adio do Diluente ............................................................................35
2.4.2 Resfriamento e Envase .....................................................................37
2.4.3 Tcnica de Congelamento ................................................................37
3 CRIOPROTETORES.................................................................................40
3.1 Ao dos Crioprotetores .....................................................................40
3.2 Crioprotetores Penetrantes .................................................................40

viii

3.3 Crioprotetores No-Penetrantes .........................................................41

4 AVALIAO DO SMEN CONGELAMENTO ........................................42
CAPTULO III
CONSIDERAES FINAIS ........................................................................44
1 CONSIDERAES FINAIS ......................................................................45
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ...........................................................48
ANEXOS ......................................................................................................55
Anexo I Planilha de coleta de smen a campo .....................................56
Anexo II Frmula do Diluidor Tris-Gema-Glicerol ................................57
INSTRUO NORMATIVA .........................................................................58

ix

LISTA DE TABELAS

TABELA 1 Classificao androlgica de touros zebu baseado na

circunferncia escrotal (cm)..................................................13
TABELA 2 Classificao

androlgica

sugerida

para

touros

zebu,

baseada na circunferncia escrotal (cm) e nas caractersticas

fsico-morfolgicas do smen...............................................31

LISTA DE FIGURAS

FIGURA 1
Leitura da medida de circunferncia escrotal envolvendo os
dois testiculos em seu maior perimetro ..................................

12

Defeitos da cabea do espermatozide..................................

24

Defeitos de cauda do espermatozide ...................................

25

FIGURA 2

FIGURA 3

11

1 INTRODUO
Na pecuria de corte, diversas alternativas de manejo tm como objetivo
principal a otimizao do desempenho reprodutivo e produtivo do rebanho de cria,
de forma racional, econmica e sem promover degradao ambiental. Para tanto, a
contribuio do touro, seja por monta natural ou pelo uso da inseminao artificial,
de grande importncia, porque cada touro representa a metade da composio
gentica de suas prognies.
Para se obter informaes confiveis sobre a fertilidade dos touros, que
pode ser definida como a capacidade de se gerar filhos normais, essencial para o
progresso gentico e a alta produtividade animal, estes deveriam ser utilizados em
monta natural ou artificial, para emprenharem grande nmero de vacas, sob
condies uniformes de manejo e meio ambiente, sendo avaliada pela taxa de
prenhez / ano. Porm, em razo do limitado nmero de vacas disponveis, no
possvel garantir a fertilidade do grande nmero de touros jovens que so lanados
ao servio (SILVA et al., 1993).
Assim, como alternativa para avaliar a capacidade reprodutiva dos touros,
tm sido propostos vrios parmetros, envolvendo as medidas testiculares e a
qualidade do smen (SILVA et al., 2002; OLIVEIRA et al., 2005).
Uma das medies normalmente utilizada e correlacionada com a
capacidade reprodutiva a medida da circunferncia escrotal (QUIRINO e
BERGMANN, 1997; CYRILLO et al., 1998).
Mesmo

havendo

correlaes

favorveis

entre

as

medidas

da

circunferncia escrotal dos touros com o poder fecundante do smen, a

circunferncia escrotal no deve ser a nica caracterstica utilizada para avaliar a
qualidade de smen. Estudos que associem o poder fecundante do smen e a
circunferncia escrotal dos touros com a fertilidade de suas prognies devem ser
realizados para obter melhores resultados (MARTINEZ et al., 2000).
Portanto, a alternativa mais interessante para determinar o potencial
reprodutivo do touro atravs do exame de suas funes reprodutivas (SILVA et al.,
1993; PIMENTEL, 2000).

12

A empresa Precoce Assistncia Pecuria dedica-se ao aprimoramento da

eficincia reprodutiva dos rebanhos que assiste. Portanto, o potencial reprodutivo
dos touros uma preocupao constante.
Durante o estgio, houve possibilidade de amadurecer os conhecimentos
tericos adquiridos durante os anos de graduao, principalmente aqueles
relacionados ao manejo reprodutivo, especialidade da empresa, garantindo, assim,
maior sedimentao de conhecimento e preparo para o exerccio posterior da
profisso de Mdico Veterinrio.

13

2 DESCRIO DO LOCAL DE ESTGIO

O estgio curricular supervisionado, num total de 480 horas foi realizado
na empresa Precoce Assistncia Pecuria, localizada no municpio de Barra do
Garas-MT, situada na Rua Simeo Arraia, n 1670, Bairro Unio, tendo como
proprietria e fundadora a Medica Veterinria Cntia Maria G. Oliveira.
A empresa especializada no atendimento de manejo reprodutivo e
biotecnologias aplicadas reproduo, sendo constituda por um escritrio de
atendimento aos clientes, um laboratrio para realizao de exames rotineiros e uma
propriedade rural localizada a 22 km do municpio.
Para prestar melhores servios aos seus clientes, a empresa terceiriza
alguns procedimentos, como a coleta de smen, para outras empresas que so
especializadas, mas que utilizam sua estrutura.
O objetivo principal da empresa o de atender aos produtores rurais na
rea de manejo reprodutivo.

2.1. Descrio das atividades desenvolvidas no campo de estgio

Durante o estgio curricular, sob a superviso da Mdica Veterinria
Cntia Maria G. Oliveira foram acompanhados atendimentos a vrias propriedades
rurais por toda regio do Vale do Rio Araguaia, em Municpios localizados no estado
de Mato Grosso.
Foram realizadas vrias atividades nas reas de reproduo animal,
cirurgia e aplicao de tcnicas de manejo. Dentre as atividades acompanhadas
durante o estgio curricular supervisionado, realizado no perodo de 24 de setembro
a 30 de novembro de 2007, destacam-se:

341 avaliaes androlgicas;

43 preparaes cirrgicas de rufies;

3.000 diagnsticos de gestao por palpao retal

14

avaliao morfolgica;

43 acasalamentos de gado PO;

exames de brucelose;

rastreamento bovino;

curso de inseminao artificial participando como monitora;

congelamento de smen e manejo reprodutivo em geral.

A andrologia e tecnologia do smen sero detalhadas neste trabalho, pois

foram as atividades que apresentaram maior freqncia durante o perodo de
estgio.

15

Captulo I
________________________________________________________

Avaliao Androlgica de Bovinos

16

1. Introduo
Para melhorar a eficincia reprodutiva importante ressaltar que o nvel
de manejo da propriedade fator imprescindvel, uma vez que as caractersticas
reprodutivas so de baixa herdabilidade (PEREIRA, 1999).
No sculo passado, na dcada de 20, WILLIAMS et al (1920), com
particularidade para a espcie bovina, deram incio a uma srie de pesquisas
demonstrando que a percentagem de machos imprprios ou falhos na reproduo
era relativamente elevada.
Vrios fenmenos esto relacionados fertilidade do reprodutor, como
por exemplo, a produo, viabilidade e capacidade fertilizante dos espermatozides,
desejo sexual e habilidade de realizar a cobertura. Neste contexto, possvel
identificar com certa facilidade os animais infrteis, porm, aqueles que apresentam
fertilidade reduzida so de difcil deteco e ocasionam perdas econmicas
considerveis (JAINUDEEN & HAFEZ, 2004).
O impacto da fertilidade reduzida do touro no desempenho reprodutivo do
rebanho diversas vezes maior que o da vaca, pois a expectativa de que cada
touro cubra pelo menos 25 vacas, e porque estes permanecem no rebanho por
longos perodos, causando grandes prejuzos na produtividade (MARTINS, 2007).
Atualmente, possvel determinar se o touro apto a reproduo e ainda
estimar seu grau de fertilidade potencial com certa exatido (VIU et al., 2006). Para
isto, um exame androlgico criterioso imprescindvel para touros que se destinam
reproduo (FITZPATRICK et al., 2002), garantindo, assim, que no ocorra menor
nmero de prenhez do que o esperado.
Um exame androlgico criterioso imprescindvel para touros que se
destinam reproduo (FITZPATRICK et al., 2002), garantindo, assim, que no
ocorra menor nmero de prenhez do que o esperado.
A avaliao androlgica avalia o animal para que este possa ser julgado
eficiente ou no na utilizao como reprodutor, sendo observado se o mesmo
apresenta bom estado de sade, sinais genticos indesejveis que possam ser

17

transmitidos, a qualidade do smen por ele produzido e ainda o desejo sexual do

mesmo.
Se forem observados anormalidades ou valores indesejveis nos
parmetros seminais, deve-se avaliar, com muito bom senso, se estes podem
acarretar conseqncias na fertilidade individual e do rebanho, decidindo se o touro
pode ser liberado ou no para a reproduo. A avaliao pode envolver a
compreenso da causa, patognese e curso possvel das diversas doenas do
touro. Portanto, o julgamento do animal em apto ou inapto deve ser de grande
responsabilidade por parte do profissional.

2 Exame Androlgico
Para padronizao dos mtodos de avaliao androlgica, o Colgio
Brasileiro de Reproduo Animal (CBRA) criou o manual para exame androlgico e
avaliao de smen animal, sendo a edio mais recentemente atualizada datada
de 1998. De acordo com o CBRA, a avaliao androlgica adota o protocolo que
ser mostrado nos prximos tpicos.

2.1. Identificao
Deve ser preenchida uma ficha contendo o nome do animal, raa, idade,
nmero de registro e procedncia do touro, e que tambm contenha o nome do
proprietrio e propriedade onde este se encontra, ou seja, onde o exame esta sendo
realizado (CBRA, 1998).

2.2. Histrico e anamnese

Deve-se considerar o tipo de utilizao do reprodutor, o motivo do exame,
o nmero de fmeas cobertas por ele e a percentagem de gestantes, se este tem
servido recentemente, bem como o sistema de monta (solto com as fmeas a

18

campo, monta controlada, estao de monta, etc.), alimentao administrada, sade

geral e antecedente de doena (CBRA, 1998).

2.3 Exame clnico geral

Examinar aparelhos respiratrio, circulatrio, digestivo e, principalmente, o
locomotor.
Para servir, um bom reprodutor dever caminhar, ver, cheirar e ter a
necessidade e habilidade para detectar fmeas no cio e, se possvel, cobrir mais de
uma vez todas elas. Deste modo, a verificao das condies de aprumos,
articulaes e casco e da condio corporal so importantes. Qualquer fator que
diminua a eficincia das atividades realizadas pelo touro pode afetar a performance
reprodutiva e a lucratividade da atividade de cria do rebanho.
Portanto, o touro dever ser observado criticamente pela conformao e
facilidade de movimento, de forma que possa transparecer a real situao do animal
quanto sua aptido reprodutiva na referida data do exame. Quando ocorrer
suspeita de alterao, o animal deve ser submetido a exame clnico mais
aprofundado.
Alteraes estruturais, como defeitos hereditrios, podem conduzir a
falhas de cobertura e, por serem herdveis, deve ser dada ateno especial (CBRA,
1998).

2.4 Exame fsico dos rgos reprodutivos

Cordo espermtico
Pela inspeo e palpao, verificar a existncia de cistos, formao
varicoclica, processo inflamatrio, processo irritativo e etc, que se tornam notveis
pelo aumento de volume. O encurtamento pode afetar a posio testicular, a

19

incapacidade de retrao pode prejudicar a termo-regulao testicular, ainda devese considerar o grau de disteno dos cordes espermticos com a condio
climtica no momento do exame (CBRA, 1998).

Escroto
Com o animal em estao, pela inspeo, verificar as condies de pele,
a inexistncia de leses, verrugas, abcessos, mobilidade, sensibilidade, espessura,
temperatura e aderncis. As alteraes de forma devem ser registradas (CBRA,
1998).

Testculos
Para a avaliao os testculos devem ser imobilizados, um ao lado do
outro, tracionados distendendo o escroto, em condies normais so simtricos e de
forma oval e alongada.
o Consistncia
Normalmente, a consistncia dos testculos deve ser tenso-elstica, com
variaes de flcida at firme (CBRA, 1998). Casos em que ela flcida
(possibilidade de degenerao testicular) ou rgida (fibrose devido cronificao por
uma orquite, entre outros) devem ser anotados, pois as duas condies podem
indicar alteraes na produo de espermatozides e sero relacionadas com o
quadro espermtico encontrado (SILVA et al., 1993).
VIU et al (2006) citam a existncia de um sistema de pontuao numrica
para aferi-la, onde a firmeza pontuada de um a cinco, baseado nos seguintes
detalhes: 1- muito mole, 2- mole, 3- moderado, 4- firme e 5- muito firme, sendo
desejadas as pontuaes 3 e 4. Embora subjetiva extremamente til para o
profissional experiente.

20

o Posio
A posio normal a de dois testculos vertical e paralelamente situados
um em relao ao outro e em igual plano basal, ou seja, as caudas dos epiddimos
devem se situar na mesma altura. Alteraes ocorrem nos casos de tores dos
cordes espermticos, devendo-se indicar qual o testculo afetado e em que grau.
As tores de at 40 no prejudicam a capacidade reprodutiva; a partir da, maior
ateno deve ser dada ao resultado das patologias encontradas no semn. Podem
ocorrer alteraes tambm nos casos de encurtamento de um ou dos dois cordes
espermticos (CBRA, 1998).

o Mobilidade e sensibilidade
Pela palpao, os testculos devem deslizar com naturalidade entre as
capas escrotais, mostrando ser mveis em todas as direes, dentro dos limites
fisiolgicos, no devendo apresentar sensibilidade ao toque ou ligeira presso dos
dedos como sinais de dor. necessrio saber diferenciar a sensibilidade dolorosa
da simples reao do animal (CBRA, 1998).

o Biometria testicular (circunferncia, comprimento e largura)

Neste ponto, devem ser considerado dois aspectos: a seleo de
indivduos de maior volume testicular e diagnstico de alteraes. Esta uma
medida prtica e de fcil execuo e grande importncia dada ao seu sentido,
principalmente porque h uma alta correlao entre o dimetro escrotal e a
produo espermtica (SILVA et al, 2002). Nenhum animal deve ser liberado desse
exame.
Para executar as medies testiculares, das quais a mais importante a
circunferncia escrotal, deve-se tracionar os testculos com as duas mos, fazendoos ultrapassar os limites das pernas do reprodutor. Nessa posio, so aferidos o
permetro, o comprimento, descontando a cauda do epiddimo, e a largura, porm,
nos exames acompanhados, foi realizada somente a medida de permetro escrotal.

21

A leitura da medida de circunferncia escrotal feita com fita mtrica

envolve os dois testculos em seu maior permetro (PINTO, 1994), como demonstra
a Figura 1.

Figura 1 Esquema de mensurao da circunferncia escrotal de bovinos.

Fonte: adaptado de PINTO (1994)

FONSECA

(1989),

correlacionou

circunferncia

escrotal

desenvolvimento androlgico de bovinos (Tabela 1).

TABELA 1

- Classificao androlgica

de

touros

zebu baseado na

circunferncia escrotal (cm).

Idade (meses)

Excelente

Muito Bom

Bom

Questionvel

24-35

>32

30-32

28-30

<28

36-47

>34

32-34

30-32

<30

48-59

>36

34-36

32-34

<32

>60

>38

36-38

34-36

<33

Fonte: FONSECA (1989).

22

Epiddimos
Ajustados aos testculos pelo mesoepiddimo e ligamento testicular
prprio. Para avaliao seguem-se os mesmos itens utilizados para exame testicular
diferenciado os aspectos de forma, tamanho e posio (CBRA,1998).

o Cabea
Examinada por palpao. No deve apresentar aumento de volume,
granulomas, sinais de inflamao ou sensibilidade aumentada (CBRA, 1998).

o Corpo
Tambm por palpao, deve apresentar-se como uma fita, apenas
palpvel (CBRA, 1998).

o Cauda
Uma boa cauda deve ser cheia, densa, de boa consistncia (consistncia
de vescula) e simtrica em relao adjacente. Sua posio anatmica a de
apndices verticais e bem delimitados (CBRA, 1998).

Prepcio
Considerar a situao da pele e tecido subcutneo em relao presena
de aumentos de volume, de temperatura e existncia de ferimentos. Considerar
tambm as alteraes na cicatriz umbilical, presena de aderncias, fibrose,
ferimentos, inflamaes e vsceras, pois, em alguns casos, podem provocar desvios
na exposio do pnis e predisposio a acrobustite. O prepcio excessivamente
grande tambm se torna indesejvel (CBRA, 1998).

23

Pnis
Avaliar o pnis retrado quando em repouso e exposto, aps excitao
sexual. Este deve deslizar perfeitamente entre as capas prepuciais e no apresentar
alteraes de m formao ou papilomas, fraturas, sinais cirrgicos. Verificar
tamanho e secrees (CBRA, 1998).

Genitlia interna
Inspeo realizada atravs de exame retal, as vesculas semimais devem
apresentar, no animal adulto, de seis a 14 centmetros de comprimento, simtricas,
alongadas, duro-elsticas, bem lobuladas, com ndulos uniformemente distribudos.
Aderncias, sensibilidade elevada, elevao de temperatura e assimetrias devem
ser anotadas e correlacionadas com achados no ejaculado para o diagnstico final.
As ampolas dos ductos deferentes, situadas no vrtice interno do ngulo
formado pelas vesculas seminais, devem ser ntidas, simtricas, com consistncia
tensa-elstica e lobuladas, com espessura variando desde um lpis at um dedo,
conforme a idade do touro. No devem apresentar aderncias e nem sinais de
processos inflamatrios.
A prstata apenas palpvel, sem sinais de hipersensibilidade ou
hipertrofia. A glndula bulbo-uretral est presente mas em condies normais no
palpvel (CBRA, 1998).

3 Espermiograma

3.1. Mtodos de colheita do smen

A colheita do smen no touro feita preferencialmente por dois mtodos:
eletroejaculao e vagina artificial. Secundariamente, em casos em que no

24

possvel a obteno do smen pelos mtodos anteriores, admite-se a massagem

das ampolas que, de um modo geral, propicia ejaculao parcial (CBRA, 2007).
O mtodo da eletroejaculao quase sempre acarreta ejaculado de boa
qualidade, porm, mais volumoso que o obtido pela vagina artificial. Isto se deve ao
estmulo de uma corrente eltrica alternada sobre as vesculas seminais que
respondem liberando quantidades maiores de fluidos de sua elaborao. A vagina
artificial por sua vez produz um ejaculado com maior concentrao que os outros
mtodos, pois uma falsa monta e a presena da fmea em cio estimulam a ejeo
mxima de espermatozides (JOSEY, 1974).
O mtodo da eletroejaculao foi utilizado em todos os exames
androlgicos acompanhados durante o estgio curricular, era tambm coletado
sangue para realizao de exame de brucelose.

3.2 Caractersticas fsicas do smen

Segundo o CBRA (1998), os aspectos fsicos ou macroscpicos so
volume, aspecto, colorao e odor. J os microscpicos so motilidade de massa ou
turbilhonamento,

motilidade

individual

progressiva,

vigor

espermtico

concentrao.
As anlises fsicas microscpicas devem ser realizadas em vidraria praquecida a 37C para se evitar o choque a frigore, que provocaria defeitos
espermticos tercirios (devido manipulao do smen) (FRENEAU, 2000).

Volume
O volume no tem um valor biolgico intrnseco e sim pela quantidade de
clulas fecundantes que possa conter. A variao entre animais pode ser devido ao
mtodo de coleta, ao regime de servios prvio coleta, ao tempo de excitao, e
outros. O ejaculado obtido pelo mtodo da vagina artificial apresentar valores mais

25

prximos dos fisiolgicos. O volume medido em mililitros (mL) com utilizao de

tubos graduados (CBRA, 1998).

Aspecto
uma avaliao visual e mensura a cor e a aparncia do smen, que
reflete a concentrao de espermatozides no ejaculado podendo variar de
cremoso, leitoso, opaco ou at aquoso (CBRA, 1998).

Cor
Normalmente, a cor do smen esbranquiada, branca, marfim ou
amarelada. As cores que representam anormalidades so o vermelho ou o marrom
(sangue), sujo (poeira) ou ainda amarelo esverdeado (pus) (CBRA, 1998).

Turbilhonamento
Expressa-se por ondas de evoluo dos espermatozides e o resultado
de uma concentrao elevada, associada a motilidade e vigor elevados.
Portanto turbilhonamento alto revela qualidade fsica elevada do smen.
Ele avaliado numa escala de zero a cinco. Para se proceder a avaliao do
turbilhonamento, coloca-se uma gota de smen recm colhido sobre uma lmina
previamente aquecida que levada ao microscpio com um aumento de 100 vezes.
A interpretao subjetiva e exige treinamento para que essa caracterstica seja
avaliada. Este item no considerado como desclassificatrio, embora se deseje um
turbilhonamento com pontuao trs ou mais (CBRA, 1998).

26

Motilidade
Constitui-se num dos mais importantes aspectos fsicos do smen. A
motilidade dada em porcentagem e significa o nmero de espermatozides com
motilidade progressiva.
Merece maior importncia considerar apenas os espermatozides com
motilidade retilnea ou progressiva, no devendo ser considerado mveis aqueles
com movimentos circulatrios e oscilatrios. Sobre uma lmina coloca-se uma gota
do smen recm colhido, cobrindo-o com uma lamnula e levando-se ao microscpio
em aumentos de 200 a 400 vezes. Para o smen fresco, colhido de touros em
servio de monta natural, em exames sob condies de campo, a motilidade mnima
recomendvel de 50% (CBRA, 1998).

Vigor
O vigor representa a intensidade de movimentao dos espermatozides
e classificado numa escala de zero a cinco. Para o smen fresco colhido em
touros em servio de monta natural, em condies de campo, o vigor mnimo
aceitvel trs (CBRA, 1998).

Concentrao
Representa o nmero de espermatozides por milmetros ou centmetros
cbico. O procedimento mais comum para se obter a concentrao de
espermatozides do ejaculado aquele onde se utiliza a tradicional cmara de
Neubauer, seguindo-se as etapas: com uma micropipeta (0,02 mL) dosadora
automtica, aspira-se o smen imediatamente aps a colheita. Verte-se o contedo
da pipeta em um frasco contendo 4mL de soluo formol-salina tamponada,
obtendo-se uma diluio de 1:200. Homogeiniza-se essa mistura e retira-se uma
gota dela passando-a para a cmara de Neubauer, de ambos os lados da cmara,
permitindo-se uma contagem dupla. A cmara levada ao microscpio com
aumento de 100 a 400 vezes para a contagem dos espermatozides. Realiza-se a

27

contagem em pelo menos cinco quadrados grandes em cada lado da cmara. O

nmero de espermatozides obtidos (mdia das duas partes da cmara)
multiplicado por uma constante de 10.000.000. O resultado multiplicado pelo
volume coletado de smen chegando-se concentrao total de espermatozides
no ejaculado.

3.3 Caractersticas Morfolgicas do Smen

CASAGRANDE (1973) encontrou uma relao constante entre o quadro
microscpico (avaliao morfolgica) do smen e a porcentagem de concepes
seguintes aos acasalamentos. Verificou, tambm, que havia variaes marcantes na
aparncia das amostras do smen do mesmo touro, coletados em pocas diferentes
e que seria impossvel determinar, com um nico exame, a sua eficincia
reprodutiva.
Aps a avaliao fsica do smen, elabora-se esfregao corado para
avaliao morfolgica espermtica, faz-se uso de uma micropipeta para depositar
sobre uma lmina devidamente limpa uma gota do ejaculado. Com o auxlio de outra
lmina posicionada obliquamente quela num ngulo de 45o puxa-se a gota pela
extenso da lmina formando o esfregao para posterior colorao e leitura em
microscopia ptica (CBRA, 1998).
Para avaliao morfolgica dos espermatozides em cmara mida,
utiliza-se um frasco contendo um 1 mL de soluo de formol-citrato-tamponado,
onde se deposita uma quantidade considervel do ejaculado que deve ser mantida
em repouso, sem a ocorrncia de movimentos abruptos para evitar que se forme
artefatos que possam por em risco a veracidade das condies morfolgicas do
ejaculado, com por exemplo, elevada contagem de cabea decapitada normal. No
laboratrio deve-se homogeneizar cuidadosamente o contedo do frasco e depositar
uma gota deste em uma lmina limpa e seca, colocando-se sobre a gota uma
lamnula, pressiona-se levemente um leno descartvel para retirada do excesso de
contedo, realizando-se a leitura da amostra em microscopia de contraste de fase
(VIU et al., 2006).

28

Tanto a leitura das lminas coradas como as preparaes em cmara

mida so feitas ao microscpio em aumento de 1000 vezes para a contagem de
200 clulas e verificao da percentagem de defeitos, classificando-os em maiores e
menores (CBRA, 1998).
LAGERLOF (1936), citado por CASAGRANDE (1973), demonstrou que as
anormalidades do smen e a patologia testicular esto estreitamente relacionadas,
refletindo com perfeio a condio dos tbulos seminferos.
BLOM (1950) classificou as anormalidades celulares dos ejaculados em
trs grupos:
a) anomalias espermticas primrias: este grupo rene anomalias que
tiveram origem devido a desordens do epitlio seminfero, a saber: formas anormais
de cabea; anomalias do desenvolvimento do acrossomo e certas anomalias da
pea intermediria e da cauda;
b) anomalias espermticas secundrias: afetam o espermatozide
formado, como resultado de condies no fisiolgicas, possivelmente desde o
epiddimo at o momento da ejaculao. As anomalias secundrias compreendem:
cabeas normais destacadas, espermatozides com gotas citoplasmticas, caudas
dobradas ou enroladas e desprendimento da galea capitis. Verificou tambm que
nos touros normais, as cabeas destacadas apareciam em porcentagem baixa e que
uma elevao nesta percentagem era achado inicial de degenerao testicular;
c) no terceiro grupo, o autor reuniu outras clulas primitivas, comumente
verificadas em touros com degenerao testicular, tais como hemcias (em casos de
acidentes), picitos (em casos de processo inflamatrio) e considerando normais as
propores de 1: 1.000 e 1: 10.000 espermatozides, respectivamente para as
clulas epiteliais e as medusas expelidas com o smen.
RAO (1971), citado por MIES FILHO (1982), estudando a morfologia
espermtica em touros normais e em touros com espermatognese deficiente, fez
restries conceituao de BLOM (1950). Segundo o autor, somente certas
anormalidades primrias da cabea deveriam ser levadas em conta, tais como
cabea piriforme, delgada na base (estreita na base), contorno anormal, cabea

29

pequena

anormal,

espermatozides

micro-cabea

(microcefalia),

subdesenvolvidos.

bem

Considerou

como

ainda

as

difcil

formas

de

caracterizar

corretamente o que o referido autor entendeu por anormalidades primrias e

secundrias, como no caso da gota citoplasmtica proximal, e por isso achou ser
mais conveniente uma classificao que tivesse por base a anatomia espermtica,
ou seja, a indicao da parte do espermatozide que apresentasse o defeito.
Segundo MIES FILHO (1982), foram minimizadas por Rao as seguintes
atipias de cabea: cabea estreita; pequena normal, curta e grossa e cabea
gigante. Acrescentou ainda que Blom admitiu a dificuldade de se manter a
classificao de formas primrias e secundrias, propondo nova classificao
visando a avaliao dos defeitos espermticos do touro.
BLOM (1973) apresentou esta nova classificao para as anomalias
espermticas baseada na importncia dos defeitos, dividindo as anormalidades em
defeitos maiores, defeitos menores e defeitos totais.
O autor agrupou as anomalias de maior gravidade dentro de defeitos
maiores, incluindo os defeitos graves de cabea, sendo eles, cabea piriforme,
pequena anormal e cabea isolada anormal. Os outros defeitos maiores so:
contorno anormal; subdesenvolvido; acrossoma defeituoso (knobbed sperm);
diadema (pouch formation); defeitos da pea intermediria; gota citoplasmtica
proximal e cauda fortemente dobrada ou enrolada (dag defect).
Os defeitos menores so os de menor gravidade e incluem: cabea
delgada; cabea pequena anormal; cabea gigante; cabea curta ou larga, perda da
membrana acrossmica; implantao abaxial; gota citoplasmtica distal; cabea
decapitada normal (isolada); cauda simplesmente dobrada ou enrolada. Outros
defeitos compreendem: formao de medusa; clulas espermiognicas primitivas;
clulas gigantes e prepuciais; leuccitos e hemcias.
Por meio do exame morfolgico dos espermatozides, na avaliao do
smen procura-se demonstrar a relao entre o tipo e a prevalncia de
espermatozides anormais com a fertilidade do animal (Mc GOWAN et al., 2002;
FITZPATRICK et al., 2002;).

30

Independentemente do que se possa encontrar em um espermiograma,

tambm deve ser levada em conta uma srie de fatores, a finalidade do reprodutor,
idade, poca do ano em que se fez o exame, seriao de coletas, mtodo de coleta
empregado, alm da individualidade (Mc GOWAN et al., 2002).

3.3.1 Defeitos de cabea

Segundo o manual CBRA (1998), os defeitos de cabea foram
classificados em: defeitos de acrossoma (knobbed, cratera e outros); cabea
pequena (normal e anormal); cabea gigante; subdesenvolvido; cabea isolada
(normal e anormal); cabea delgada; cabea piriforme; presena de vacolos
nucleares na cabea (pouch formation e cratera); contorno anormal da cabea;
cabeas duplas. Os defeitos de cabea dos espermatozides so mostrados na
figura 2, segundo o guia de defeitos adaptado por CHCON (2001).

3.3.2 Defeitos de cauda

A classificao dos defeitos de cauda preconizada pelo manual do CBRA
(1998), se divide em defeitos de pea intermediria, defeitos de pea principal e
outros defeitos associados cauda. Os defeitos de cauda dos espermatozides so
mostrados na figura 3, segundo o guia de defeitos adaptado por CHCON (2001).
Objetivando o melhor entendimento descrever-se- cada uma destas
parties em particular:
a) defeitos da pea intermediria colo irregular, dobrada (com ou sem
reteno de gota), dobrada na extremidade (com ou sem reteno de gota),
enrolada, parcialmente desnuda, totalmente desnuda, em forma de saca-rolha,
espessada, irregular e outras;
b) defeitos na pea principal simplesmente dobrada, fortemente
dobrada, enrolada e outras;

31

c) outros defeitos associados cauda pseudo-gotas, gota

citoplasmtica proximal, gota citoplasmtica distal, retro-axial, dupla, insero
abaxial e enrolada na cabea.

3.3.3 Outros elementos

De acordo com o manual do CBRA (1998), os outros elementos devero
ser citados no laudo, quando presentes. A quantidade dever ser expressa como
raros, freqentes e muito freqentes. Estes defeitos foram assim classificados,
medusas, clulas primordiais, clulas gigantes, leuccitos, hemcias e clulas
epiteliais.
3.3.4 Guia de defeitos
Legenda:
a)

Espermatozide normal;

b)

Defeitos de acrossoma;

c)

Defeito de cabea (Knobbed);

d)

Seta: Knobbed observar diadema

(pouch-formation) no plo equatorial;

e)

Seta: defeito de acrossoma observar

diadema (pouch-formation) no plo
equatorial

gota

citoplasmtica

proximal;
f)

Seta: Defeito de cabea (crista)

observar gota citoplasmtica proximal;

g)
h)

Seta: perda do acrossomo;

Seta: cabea decaptada normal
observar cabea decaptada anormal;

i)

Seta: cratera na regio acrossomial

observar diadema (pouch-formation) e
gota citoplasmtica distal;

j)

Seta: diadema (pouch-formation)

observar gota citoplasmtica livre;

k)

Cratera no plo equatorial;

l)

Cabea pequena anormal com gota

citoplasmtica proximal;

m)

Depresso anterior ao plo equatorial

(defeito de cabea);

FIGURA 2 - Defeitos da cabea do espermatozide

n)

Cabea piriforme;

o)

Delgado na base;

p)

Seta preenchida: delgado na base

Seta

sem

preenchimento:

cauda

32

Legenda:
a)

Gota citoplasmtica proximal;

b)

Gota citoplasmtica distal;

c)

Pea intermediria desnuda com presena

de desfibrilao;

d)

Pea intermediria dupla;

e)

Gota citoplasmtica proximal;

f)

Seta preenchida: implantao para-retroaxial Seta sem preenchimento: pea

intermediaria dupla (double-tail);

g)

Cauda

fortemente

enrolada

sobre

cabea;
h)

Cauda

fortemente

enrolada

com

desnuda

com

pseudogota;
i)
j)

Pseudogota;
Pea

intermediria

espessamento da poro terminal;

k)

Cauda enrolada;

l)

Cauda enrolada com pseudogota.

FIGURA 3 - Defeitos de cauda do espermatozide (Adaptado de CHCON, 2001).

4 Avaliao do Comportamento Sexual

A habilidade sexual deve seguir um padro caracterizado pela seqncia:
cortejo, ereo, protuso do pnis, monta, procura, introduo, ejaculao

33

(caracterizada pelo arranque final), desmonta e perodo refratrio ou de

tranquilizao (SILVA et al., 1993). O cortejo deve ser rpido, no mximo dez
minutos. O salto deve ser feito com o abraamento da fmea na altura do arco costal
ou nos flancos ou tuberosidade ilaca. A procura quanto mais rpida acontece revela
habilidade sexual superior. Nos ruminantes o arranque final deve ser rpido,
profundo e potente, simultneo com a ejaculao e sem perda de lquido (PINEDA,
1996). Para a avaliao da libido o touro dever ser colocado com uma ou duas
vacas em cio e observado durante dez minutos. Todas as atitudes sero anotadas e,
posteriormente, aplicar-se-lhes- uma nota conforme o desempenho do touro de
acordo com uma classificao especfica para taurinos (CHENOWETH, 1974) ou
uma outra especfica para zebunos (PINEDA, 1996). Os sistemas de pontuao
variam de zero a dez e so utilizados da seguinte forma:

a) Segundo CHENOWETH (1974):

0= o touro no demonstrou interesse sexual;

1= demonstrou interesse sexual somente uma vez (ex:

cheirando a regio perineal);

2= interesse sexual positivo na fmea em mais de uma

ocasio;

3= busca ativa da fmea com persistente interesse sexual;

4= uma monta ou inteno de monta, sem servio;

5= duas montas ou intenes de monta, sem servio;

6= mais de duas montas ou intenes de monta, sem servio;

7= um servio seguido por nenhum interesse sexual;

8= um servio seguido por interesse sexual, incluindo

intenes de monta;

9= dois servios seguidos por nenhum interesse sexual;

34

10= dois servios seguidos por interesse sexual, incluindo

montas, intenes de montas ou servios posteriores.

b) Segundo PINEDA (1996):

0= sem interesse sexual;

1= interesse pela fmea em cio;

2= cheiro e perseguio insistente;

3= tentativa de monta sem salto, com mugido, deslocamento

ou masturbao;

4= tentativa de monta sem salto, com pnis exposto;

5= tentativa de monta com salto, sem o pnis exposto;

6= duas ou mais tentativas de monta com salto, sem pnis

exposto;

7= tentativa de monta com salto e pnis exposto;

8= duas ou mais tentativas de monta com salto e pnis

exposto;

9= uma monta com servio completo;

10= duas ou mais montas com servio completo.

Baseado na pontuao que o touro recebeu, os zebunos podem ser

classificados da seguinte forma: 0 3: questionvel; 4 6: bom; 7 8: muito bom; 9
dez: excelente ou superior (FONSECA, 1989).

35

5 Emisso do Laudo
Para a emisso do laudo dever ser descriminada, individualmente, a
incidncia de anormalidades encontradas. Em casos particulares em que podero
estar presentes anormalidades no citadas pelo manual, estas devero ser
includas. Quanto s anormalidades citadas pelo manual, estas podero ser
suprimidas do laudo, caso no sejam identificadas no exame. Poder ser contada
mais de uma anormalidade por espermatozide, desde que a proporo de
espermatozides seja corretamente estimada. Dever aparecer no laudo a
proporo exata de espermatozides normais e anormais no ejaculado (CBRA,
1998).
Baseando-se em outro tipo de classificao, como por exemplo, defeitos
maiores e menores sugerida por BLOM (1973), a ordenao das anormalidades
poder ser apresentada no laudo a critrio do tcnico responsvel.
A discriminao das anormalidades encontradas com sua respectiva
freqncia de ocorrncia permitir, a qualquer tcnico, usar este ou aquele mtodo
de classificao de anormalidades para fazer sua prpria interpretao de um laudo
(CBRA, 1998).

6 Determinao do Potencial Fecundante

A fertilidade deve ser considerada uma caracterstica do tipo ser ou no
ser, isto , o indivduo frtil ou no. A rigor no existem animais com baixa
fertilidade, mas o que existe so indivduos com diferentes graus de fecundidade.
Para o animal ser fecundo obrigatoriamente ter que ser frtil (GIANONI & GIANONI,
1989).
O smen de alto poder fecundante, apresenta alta concentrao de
espermatozide (acima de 10 bilhes) por ejaculao, motilidade com mais de 70%
dos gametas com a movimentao retilnea progressiva e alto vigor (motilidade
progressiva individual). Quanto aos aspectos morfolgicos (tipo e percentual de
defeitos) apresentados pelos espermatozides, CASAGRANDE (1973) afirma que
ejaculados com alto poder de fecundao apresentam at 10% de anomalias

36

espermticas totais, entretanto, no podem apresentar mais que 7% de anomalias

primrias ou 7% de anomalias secundrias. J MIES FILHO (1982) considera que
um touro pode ter at 20% de defeitos totais. O manual do CBRA (1998) considera
um padro seminal desejvel para touros destinados monta natural, que os
mesmos apresentem at 30% de defeitos totais e menos que 10% de uma mesma
anomalia.
O smen de baixo poder fecundante pode ser resultado da limitao na
secreo das glndulas acessrias (como insuficincia de aucares), ou na
incapacidade dos espermatozides de utilizar estes acares na combusto
energtica, sendo a motilidade insuficiente nestes casos. O smen de baixo poder
fecundante pode ser resultado do nmero de espermatozides anormais, ou de
baixa condio metablica (VALE FILHO, 1997).
Quando o smen tem espermatozides anormais em altas quantidades, o
problema poder estar relacionado com:
a) a gametognese, sendo que neste caso elevado nmero de gametas
iro se apresentar com patologias na cabea, principalmente dos tipos delgada na
base e piriforme, podendo em casos mais graves apresentar formas abortivas
(subdesenvolvidas), ou ainda outras formas (pouch formation ou diadema),
inclusive com a descamao do epitlio germinativo e formao de clulas do tipo
gigante (VALE FILHO, 1997);
b) a maturao espermtica e, neste caso, o smen apresentar elevado
nmero de espermatozides com a gota citoplasmtica proximal, podendo ainda
haver fraturas da pea intermediria, sendo elas total ou parcial (BARTH & OKO,
1989);
c) a estocagem de gametas, sendo que neste caso o smen apresentar
elevado nmero de espermatozides com a cauda dobrada e gota citoplasmtica
distal (BARTH & OKO, 1989);
d) o plasma seminal bioquimicamente alterado, detectando a presena de
poucos espermatozides anormais, mas a motilidade mostra-se baixa (VALE FILHO,
1997);

37

e) aspectos imunolgicos, podendo haver baixa motilidade se os

anticorpos so observados no plasma, ou aglutinao de cabeas e/ou de caudas,
quando os anticorpos so observados na membrana celular (BARTH & OKO, 1989).
Buscou-se descrever basicamente todos os defeitos observados nos
espermatozides e a origem destas anomalias. Entretanto, possvel haver
alteraes em mais de uma estrutura, alm das associaes de tipos de defeitos
espermticos nos gametas de um mesmo ejaculado, podendo ento acarretar os
mais diversos tipos de quadros anmalos da espermatognese (VALE FILHO,
1997).
Para ilustrar a proposta de FONSECA et al., (1993), colocou-se a Tabela
2, que classifica os touros pela sua avaliao androlgica, tornando compreensvel a
quantificao do poder fecundante de um touro.

38

TABELA 2 Classificao androlgica sugerida para touros zebu, baseada na

circunferncia escrotal (cm) e nas caractersticas fsico-morfolgicas do
smen.
Parmetros

Excelente

Muito Bom

Bom

Questionvel

Motilidade (%)

70

60-70

50-60

<50

Vigor (0-5)

4-5

3-4

<3

Defeitos Maiores (%)

10

10-15

15-20

>20

Total de Defeitos (%)

15

15-20

20-30

>30

Circunferncia Escrotal (cm) e Idade em meses

24-35 meses

>32

30-32

28-30

<28

36-47 meses

>34

32-34

30-32

<30

48-59 meses

>36

34-36

32-34

<32

>60 meses

>38

36-38

34-36

<33

Fonte: FONSECA et al. (1993).

Os exames androlgicos realizados durante o estgio seguiram todas as

etapas e a metodologia supracitadas, a no ser pela avaliao da libido e pela
concentrao que no foram realizadas. A concentrao espermtica era
subjetivamente avaliada levando-se em considerao apenas o aspecto do smen
(leitoso, cremoso, opalescente, serosa ou aquosa).
Os exames fsicos do smen eram realizados no prprio curral e uma
amostra conservada em formol-salina-tamponado e levada ao laboratrio da
empresa para fixao, colorao e leitura da morfologia espermtica.

39

Captulo II
________________________________________________________

Tecnologia do Smen

40

1 Introduo
A moderna indstria bovina, em todo o mundo, baseada na utilizao da
inseminao artificial (IA) com smen congelado (AIRES et al., 2003). O
desenvolvimento de tcnicas adequadas para preservao de smen um dos
passos mais importantes no avano da reproduo animal nas diferentes espcies,
conseguida atravs da aplicao de biotcnias cada vez mais modernas (PAPA et
al., 2000).
O interesse na reproduo dos bovinos para melhoramento gentico,
obteno de maior nmero de filhos de um determinado reprodutor, introduo de
uma raa no rebanho e formao de banco de smen comercial, faz necessrio o
aprimoramento de biotecnologias de avaliao, manipulao e conservao do
smen. Tambm o congelamento do smen que permite o transporte destes
gametas pode servir para transpor barreiras de distncia e tempo.
O objetivo do congelamento de smen a produo de um banco de
clulas espermticas utilizadas para biotcnicas da reproduo, o que uma
importante ferramenta para potencializar o aprimoramento gentico da espcie
(AMIRAT et al., 2004).
A criopreservao do smen bovino teve grandes avanos na dcada de
40, aps a descoberta da funo crioprotetora do glicerol (POLGE, 1985). Porm, o
congelamento de smen bovino recebeu poucas inovaes nos ltimos vinte anos,
devido aos resultados j alcanados serem considerados satisfatrios.
O processamento tecnolgico de smen bovino engloba os processos de
diluio,

controle

microbiano,

resfriamento,

envasamento

congelamento

(BEARDEN et al., 1997).

Considerando-se o embasamento da pecuria mundial na utilizao de
inseminao artificial, as tcnicas para preservao de smen se tornam passo
importante no avano da indstria bovina. Conseqentemente, o intuito dos
protocolos

de

congelamento

visam

espermatozides (KUMAR et al., 2003).

minimizar

os

efeitos

deletrios

aos

41

O processamento tecnolgico do smen bovino tem como principal

objetivo aumentar o nmero de fmeas fertilizadas com um nico ejaculado, como
tambm conservar a capacidade fertilizante do espermatozide, quer seja por um
curto perodo, atravs de uso do smen refrigerado, quer seja por um perodo
indeterminado, atravs da utilizao da tcnica de congelamento do smen
(GONALVES et al., 2002).

2 Coleta do Smen

2.1 Instalaes e preparao dos animais

As coletas de semn na propriedade rural da empresa Precoce
Assistncia Pecuria, a Fazenda Vale da Serra, ocorrem esporadicamente a pedido
de seus clientes. A coleta, acompanhada no estgio curricular, foi terceirizada a
empresa Gentec de Cuiab-MT, porm realizada na Fazenda Vale da Serra.
Foram recebidos 17 touros provados vindos de outra propriedade rural
assistida pela empresa supra citada, os animais foram divididos em lotes de quatro a
cinco animais e alojados em piquetes, alimentando-se basicamente de capim, sal
mineralizado e gua ad libitum.
Os touros no passaram por perodo de quarentena ou qualquer outra
restrio, por se tratar de animais provenientes de propriedades que contam com
assistncia fixa da mesma empresa, porm so observadas datas de validade de
exames de brucelose, teste de tuberculose, alm do histrico vacinal e ocorrncia de
doenas na propriedade antes que estes sejam recebidos na fazenda.
As coletas de smen ocorreram diariamente, sendo coletados lotes de
oito a dez animais por dia, sendo metade pela manh e a outra parte no incio da
tarde, de modo que intercalando os lotes, todos os animais tinham descanso de no
mnimo dois dias entre as coletas.

42

O perodo de permanncia do animal na empresa depende do rendimento

de nmero de doses dos mesmos, obedecendo as clusulas contratuais com a
empresa, no tocante ao total de doses a serem congeladas.
Antes da coleta realizou-se a higienizaao do prepcio. O animal foi
contido em brete apropriado, ento procedeu-se a higienizao externa, cortando os
pelos excedentes ao redor do stio, lavando com gua quando necessrio, e
enxugando com papel toalha.
Para higiene interna do prepcio utilizou-se uma soluo a base de KilolL que foi diluida em gua at atingir cor amarela escura. Esta soluo foi injetada ao
prepcio com uma seringa acoplada a uma pipeta plstica. Segurando o stio
prepucial com a mo, massageia-se desgrudando as sujidades internas, deixando
ento a soluo escorrer, repetindo novamente o processo e, logo aps, o prepcio
enxuto com papel toalha.
Realizou-se, tambm, o exame dos testculos: visual e por palpao,
procura de qualquer alterao fora do padro morfolgico (leses, tores,
abcessos). Com fita mtrica, mediu-se o permetro escrotal, sendo o valor anotado
na ficha do animal.
Terminada a higienizao, realizou-se o toque retal e palpao das
glndulas acessrias, para se resguardar de que no tinha qualquer alterao. Isto
deve ocorrer com a mo adequadamente protegida com luva de palpao, deixando
o animal pronto para a coleta, que foi realizada por meio de estimulaao eltrica
(eletroejaculador).

2.2 Obteno do ejaculado

A principal funo do espermatozide a fertilizao do vulo, e para que
isso ocorra, o espermatozide necessita de habilidades que so adquiridas a cada
passo da maturao espermtica. A maturao de um espermatozide se inicia nos
tbulos seminferos e s finalizada quando se d o encontro e a unio do gameta
masculino com o gameta feminino (WATSON, 1995).

43

Para que a preservao da clula espermtica seja realizada com

sucesso, cada passo desta maturao celular deve ser respeitada e viabilizada e,
ainda, necessrio que cada etapa seja realizada exatamente em seu devido
momento (KIRK, 2001). importante dar ateno a todo o processo, para se obter
um smen livre de sujidades, realizar manipulao adequada e respeitar a
temperatura que este se encontra.
Aps a limpeza do reto do touro, foi introduzido por via retal o eletrodo
(banana), para a estimulao das glndulas acessrias e ejaculao. O ejaculado foi
retido em um tubo de ensaiograduado, de 15 mL, encaixado em funil plstico, este
acoplado a uma haste, facilitando o alcance do prepcio. O tubo foi protegido por
isopor, mantendo assim a temperatura do smen.

2.3 Avaliao do smen

O tubo contendo smen foi levado sala de manipulao. Inicialmente,
anota-se o volume do ejaculado em uma planilha de coleta (anexo I), que
preenchida com todos os dados necessrios medida que as etapas de produo
vo sendo executadas.
O smen coletado foi avaliado em suas caractersticas fsicas (volume,
aspecto, motilidade, vigor) e, como no exame androlgico, a avaliao do
turbilhonamento no foi realizada. O julgamento dos dados obtidos nos exames foi
procedido com base em exigncias mnimas para os diferentes parmetros,
baseadas nos valores descritos no manual para exame androlgico do CBRA, ou
seja, motilidade 50%, vigor 3, movimento de massa 3 e total de espermatozides
anormais 30%.
Mesmo se essas exigncias mnimas no forem atendidas, no se deve
concluir, com certeza, que um determinado touro apresenta fertilidade reduzida ou
que infrtil.
Para a avaliao morfolgica espermtica, colocou-se o ejaculado em
1mL de formol-salina-tamponada at turvar a amostra. A realizao da avaliao

44

morfolgica foi realizada como descreve o Manual para exame androlgico ( CBRA,
1998).
Para a avaliao da concentrao, foi retirado 20 microlitros do ejaculado,
com o auxlio de uma pipeta de Sahli, diluindo-o na proporo de 1:200, em 4mL de
soluo

de formol-citrato.

Prosseguiu-se

com

clculo

da

concentrao

espermtica, ou seja, o nmero de clulas presentes no ejaculado, realizado em

cmara de Neubauer. Para a contagem, utiliza-se um microscpio com lentes
objetivas de 10x e 40x, sendo contados os espermatozides de cinco quadrados
grandes nos dois lados da cmara (CBRA, 1998).
Juntamente com o exame androlgico e a avaliao do estado geral dos
touros, devem ser realizados os testes para brucelose, campilobacteriose,
tricomonose, bem como viroses, rinotraquete infecciosa bovina (IBR) e diarria viral
bovina (BVD), cuja ocorrncia pode influenciar na capacidade reprodutora do touro.
(ANDREOTTI et al., 2005).

2.4 Processamento do Smen

Aps avaliao do smen, as amostras apropriadas ao congelamento,
respeitando-se os padres mnimos aceitveis pelo CBRA, so processadas.
Uma primeira diluio ocorreu depois de retiradas as alquotas
necessrias para a avaliao morfolgica e concentrao. A diluio inicial feita
em becker na proporo de 1:1 com diluete Tris-gema-glicerol (anexo II), O diluidor
foi trazido pronto e congelado, sendo descongelado no dia do uso, e aps este as
sobras eram descartadas.
Este volume de smen com diluidor reservado em banho-maria, a uma
temperatura de 35 C. O becker e o diluidor usados tambm estavam previamente
aquecidos na mesma temperatura.
Aps o calculo da concentrao de espermatozides na cmara de
Neubauer, foi efetuado o clculo da quantidade de diluente a ser acrescentado,
respeitando razo de 20 x 106 espermatozides por dose de 0,25 mL.

45

Executou-se, ento, a segunda diluio, usando o mesmo diluidor inicial,

descontando a quantidade j adicionada do diluente na primeira diluio, obtendo o
volume total a ser processado.

2.4.1 Adio de diluente

Bons meios diluidores devem proporcionar nutrientes (energia), proteger
contra o efeito deletrio do resfriamento rpido, prevenir mudanas danosas de pH
medida que formado cido lctico, manter apropriada a presso osmtica e
balano eletroltico, inibir o crescimento bacteriano, aumentar o volume de smen de
modo que possa ser usado em mltiplas inseminaes e proteger as clulas
espermticas durante o congelamento (HAFEZ, 1995).
Os diluentes protegem os espermatozides dos choques trmicos e
osmticos que ocorrem durante o processo de congelamento, j que este pode
causar danos irreversveis aos espermatozides, devido formao de cristais de
gelo intracelular, que afetam a estrutura fsicoqumica da clula, causando danos
principalmente membrana, ao acrossoma, motilidade progressiva e ao
metabolismo para produo de energia, como descreveram PICKETT et al. (1987),
afetando, assim, o tempo de sobrevivncia no trato reprodutivo da fmea
(VALCARCELL et al., 1996).
Tanto para a refrigerao como para o congelamento do smen,
diluidores so utilizados com o intuito de proteger os espermatozides de todos os
efeitos crticos do processo de congelao. Para tanto, devero ser adicionadas aos
diluidores macromolculas como lipoprotenas e fosfolipdios, que atuaro como
estabilizadores da membrana plasmtica e como crioprotetores. O desenvolvimento
de um meio diluidor est sempre voltado para a obteno de uma boa estabilizao
dos componentes da membrana plasmtica (PARKS e GRAHAM, 1992; JASKO,
1994).
De acordo com VISHWANATH & SHANNON (2000), para um meio diluente
ser completo e eficiente, algumas substncias so necessrias na sua composio:

substncias inicas e no inicas que mantm a osmolaridade;

46

lipoprotenas ou material de alto peso molecular, que previne o

choque frio, como a gema de ovo ou leite;

glicerol, propanediol, ou dimetilsulfoxide (DMSO) como agentes

crioprotetores intracelulares;

glicose ou frutose como fonte de energia;

outros aditivos como enzimas e antibiticos.

Os

meios

diluidores

maneira

como

interagem

com

os

espermatozides devem ser minuciosamente avaliados, devido aos possveis efeitos

adversos que podem causar aos espermatozides. O meio diluidor utilizado para o
congelamento do smen deve fornecer energia metabolizvel para que os
espermatozides mantenham-se viveis aps o processo de descongelao,
apresentar pH e osmolaridade compatveis com os espermatozides de cada
espcie, levando-se em considerao que a habilidade dos espermatozides em
resistir refrigerao e ao congelamento difere entre as espcies animais
(FARSTAD, 1996).
Para o congelamento do smen, o diluidor deve, ainda, conter um
crioprotetor, sendo o glicerol (7%) o mais utilizado.
A incluso de um crioprotetor ao meio diluidor de vital importncia para
o sucesso da preservao pelo frio. O crioprotetor mais utilizado quando se deseja
congelar smen canino o glicerol, porm, o mesmo agente de crucial importncia
no processo de congelao exerce efeito txico sobre a clula espermtica
(ENGLAND, 1992). A concentrao de glicerol, utilizada como crioprotetor, limitada
pela sua toxicidade, a qual depende da taxa de resfriamento, velocidade de
congelamento, composio do diluidor e mtodo de adio do glicerol (FAHY, 1986;
WOELDERS, 1997).

47

2.4.2 Refrigerao e envase

Aps a diluio, a soluo contida no becker foi mantida em refrigerador
por duas horas at alcanar a temperatura de 2 C, para que ocorresse o
resfriamento gradativo da mesma, depois mantida por mais cinco horas na
refrigerao, alcanando o tempo de equilbrio.
ENGLAND (1992) sugeriu que o smen de vrias espcies animais
necessitam de uma pausa de algumas horas antes do congelamento para que
desenvolva uma mxima resistncia aos efeitos da congelao. Concluiu, ainda, que
o tempo de equilbrio pode ser extremamente varivel, de acordo com o protocolo de
congelao/descongelao e ainda de acordo com a espcie em questo.
O resfriamento da clula espermtica de (39~25 C at ~0 C) o
primeiro momento crtico dentro do processo de preservao pelo frio. Dentro deste
procedimento, alteraes na membrana espermtica, ocasionando danos estrutura
e funo, podem ocorrer. Estas modificaes so conhecidas como efeito de fase
transicional (GENNIS, 1989; ZCCARI, 1998).
O resfriamento leva a clula a um estado de quiescncia, reduzindo o
metabolismo e proporcionando diminuio nos gastos energticos e na produo de
catablitos txicos, contribuindo para a preservao celular.
WATSON (1979) sugeriu que este tempo no s importante para
permitir a entrada do glicerol, como se acreditava anteriormente, mas tambm
permite que as membranas espermticas se acomodem ou que influxos inicos
ocorram.
Dentro do prprio refrigerador procedeu-se o envase do smen em
palhetas de 0,5 mL, devidamente identificadas e lacradas com lcool polivinlico.

2.4.3 Tcnica de congelamento

De

acordo

com WATSON (1979) e JASKO

(1994),

antes

do

congelamento, os espermatozides devem permanecer por um determinado perodo

48

de tempo a uma temperatura de equilbrio, para que ocorra diminuio do

metabolismo espermtico e para que iniciem as interaes com os componentes do
meio diluidor antes do estresse do congelamento, diminuindo, dessa forma, os riscos
de choque trmico.
Com o declnio constante da temperatura, as clulas espermticas
estaro expostas temperatura de congelamento (abaixo de 0 C) e, com isto, sero
expostas s alteraes de osmolaridade do meio que as circunda. A gua presente
no meio extracelular encontra-se sob a forma de soluo. Com o congelamento de
parte desta gua, a saturao de solutos aumenta, tornando hipertnico o meio
externo. Neste momento, para que um equilbrio osmtico seja atingido, ocorre um
eflvio de gua da clula a ser congelada para o meio externo. Levando a clula
desidratao e exposio a um meio extremamente saturado. Este efeito
chamado de Efeito de Soluo e considerado um dos pontos crticos no processo
de congelao das clulas espermticas (MAZUR et al. 1972; WATSON, 1981;
WATSON, 1995; HOLT, 2000).
Um protocolo de preservao adequado deve manter o potencial
fertilizante das clulas espermticas que devero, ao final de todo o processo,
apresentar a vitalidade necessria para atingir o local da fertilizao e estarem aptas
a concluir a capacitao e a reao acrossmica, que constituem o estgio final de
maturao espermtica e possibilitam a fecundao de um ocito (WATSON, 1995;
ROTA, 1998; STRM HOLST, 1999; PEA, 2000).
Dando seqncia ao processo de congelamento, as palhetas eram prcongeladas em vapor de nitrognio lquido, sendo colocadas em caixa de isopor de
15 litros, com dimenses internas de 30 cm (altura) x 19 cm (largura) x 39 cm
(comprimento), contendo 5 cm de nitrognio lquido. Com o auxlio de uma
plataforma de isopor de 3 cm acima do nvel do nitrognio, contendo as palhetas
distribudas uniformemente, na posio horizontal, estas eram mantidas a uma
temperatura em torno de 150 C negativos.
As palhetas permaneciam na caixa por 10 minutos. Logo aps, as
mesmas eram imersas no nitrognio liquido (- 196 C) e, posteriormente, com o

49

auxlio de pinas, realizou-se a colocao das palhetas em suas respectivas racks,

identificadas com o nmero do touro coletado.
Aps esse procedimento, as racks preenchidas so colocadas nas
canecas e conduzidas at o botijo criognico, onde permanecero armazenadas,
concluindo-se o processo de congelamento.
Da mesma maneira que o congelamento pode diminuir ou paralisar
algumas reaes bioqumicas celulares, ela pode, tambm, acelerar outras, levando
a danos ou mesmo morte celular (MAZUR et al. 1972, WATSON, 1981; WATSON,
1995; HOLT, 2000).
Se o congelamento se d rapidamente, no ocorre grande alterao no
volume de gua no interior da clula e microcristais de gelo sero formados. A
descongelao, neste caso, deve ser realizada tambm de maneira rpida, pois, se
realizada lentamente, a gua intracelular se descongela enquanto a temperatura
ainda est baixa e h recristalizao da gua recm descongelada. Se isto
acontecer, grandes cristais, advindos da recristalizao, se formaro, expondo a
clula ao risco de sofrer perfuraes por estes grandes cristais de gelo (MAZUR et
al. 1972, WATSON, 1981, WATSON, 1995, HOLT, 2000).
Para que um protocolo de congelamento de smen seja estabelecido, as
diferenas de volume de smen obtido de cada animal, que conseqentemente
levaro a uma diferena de concentrao espermtica por mililitro de ejaculado,
devem ser eliminadas, possibilitando, desta forma, um tratamento semelhante a
cada clula espermtica no que diz respeito diluio, concentrao de
crioprotetor no meio que a circunda, ao envase e ao volume da dose inseminante
(PAPA, 1987; LOPES & PAPA, 1998; DELLACQUA JNIOR, 2000).

50

3 Crioprotetores

3.1 Ao dos crioprotetores

A eficcia e praticidade dos crioprotetores permeveis ou no s clulas,
que diminuem a formao e o tamanho dos cristais de gelo intracelulares, tm sido
testadas quanto a sua utilizao no resfriamento de clulas espermticas (DE
LEEUW et al,1993).
As clulas espermticas necessitam, para sua sobrevivncia ao processo
de congelamento, de um ou mais agentes crioprotetores, classificados como
agentes crioprotetores no penetrantes (extracelulares) e agentes crioprotetores
penetrantes (intracelulares) (MAZUR, 1980).

3.2 Crioprotetores penetrantes

Os crioprotetores penetrantes so substncias que tm a capacidade de
proteo intracelular das clulas espermticas (NASH, 1966). Diminuem as leses
de origem qumica ou mecnica que o congelamento causa sobre as clulas, agindo
de forma a reduzir o dano celular causado pelos efeitos da concentrao de sais no
meio.
O mecanismo de ao destes crioprotetores baseia-se em estruturas que
promovem ligaes de hidrognio com as molculas da gua. Estas ligaes
mudam a orientao da molcula da gua nos cristais de gelo, criando um ambiente
menos nocivo para as clulas (DALIMATA & GRAHOM, 1997).
A habilidade de um crioprotetor em se ligar ao hidrognio da molcula de
gua, sua caracterstica mais importante (NASH, 1966).
Diferentes componentes so usados como agentes crioprotetores para o
congelamento de smen, como os alcois etanol, etilenoglicol, glicerol, metanol e
polietilenoglicol e tambm amidas, incluindo a acetamida, formida, lactamida, bem
como o dimetilsulfoxido (ASHWOOD SMITH, 1987).

51

O glicerol foi o crioprotetor eleito na produo das doses de smen pelo

profissional acompanhado no estgio supervisionado, provavelmente por se tratar do
mais utilizado e de melhor eficcia.
O glicerol um crioprotetor intracelular e sabe-se que sua principal funo
como crioprotetor se d na regulao do fluxo de gua para a clula espermtica,
controlando, desta forma, a desidratao, minimizando o efeito de soluo, que um
dos pontos crticos do processo de congelamento celular (PEA, 1997).
Alm da regulao osmtica do glicerol, existem ainda evidncias de que
ele se liga aos grupos hidroflicos da cabea dos fosfolipdios, regulando a fluidez
das membranas e s protenas integrais e glicoprotenas, causando agrupamento
das partculas intramembranosas (PARKS e GRAHAM, 1992).
A descoberta do glicerol foi um grande avano na tecnologia do smen,
pois este levou reduo dos danos mecnicos ao espermatozide durante o
processo de congelao (VISHWANATH & SHANNON, 2000).
O glicerol e os outros crioprotetores penetrantes, como o DMSO, reduzem
os danos celulares por prevenir os efeitos de concentrao do meio extracelular
(NICOLAFSEN & HVIDT, 1994). O uso de crioprotetores com alta permeabilidade
para as clulas resulta em boa sobrevivncia celular.

3.3 Crioprotetores no-penetrantes

Os agentes crioprotetores no penetrantes so substncias qumicas ou
frmacos cujo mecanismo de ao baseia-se na proteo dos espermatozides
contra os efeitos osmticos durante o processo de congelao, promovendo um
meio hipertnico que induz a sada de gua das clulas levando desidratao, ou
seja, agem no meio extracelular, reduzindo a possibilidade da formao de cristais
de gelo intracelular. Estes so representados pelos acares, lipoprotenas da gema
do ovo e protenas do leite (AMANN & PICKETT, 1987).
O crioprotetor utilizado neste protocolo foi base de gema de ovo. A
gema de ovo protege o espermatozide dos efeitos do rpido resfriamento ou

52

choque frio (PHILLIPS e LARDY, 1940). A partir desta descoberta, a gema de ovo foi
amplamente utilizada na conservao dos espermatozides de mamferos.
O mecanismo de ao da gema de ovo ainda no bem compreendido,
mas acredita-se que ela atua na superfcie da membrana plasmtica, sem alterar
sua composio (WATSON, 1990).
As lipoprotenas presentes na gema de ovo so tampo osmtico e sua
presena permite suportar qualquer meio hiper ou hiposmtico (JONES & MARTIN,
1973).
Entretanto, nos ltimos anos, aumentou-se o argumento contra a
presena de gema de ovo na composio desses meios, em funo do risco de
contaminao por bactrias ou micoplasma (BOUSSEAU et al., 1998).
Existem substncias da gema de ovo que inibem a respirao dos
espermatozides, reduzindo a motilidade (PACE & GRAHAM ,1974). De acordo com
MOUSSA et al. (2002), a lipoprotena de baixa densidade (LDL) tem sido
previamente isolada e identificada como a frao crioprotetora do ovo, conclui-se,
assim, que a LDL pode ser uma tima alternativa para composio de meios
quimicamente definidos.

4 Avaliao do Smen Congelado

Aps o congelamento do smen, duas palhetas de cada partida do touro,
selecionadas

aleatoriamente,

foram

descongeladas

para

avaliao

das

caractersticas fsica do produto. O descongelamento se d com a imerso da

palheta em gua a uma temperatura de 35 a 37 C, durante 30 segundos,
examinando, em seguida, se o smen atende aos padres mnimos descritos pelo
CBRA (1998).
No caso do no atendimento dos padres do CBRA, toda a partida do
smen congelado era descartada. Porm, das doses produzidas e deixadas na
fazenda para o uso, ainda eram retiradas duas palhetas, que serviam para o

53

veterinrio realizar o teste de TRR (Teste de termo-resistncia rpido). No entanto,

este procedimento no foi acompanhado.
O TRR consiste na sujeio da amostra ao banho-maria a 46 C por 30
minutos. Logo aps, procede-se a avaliao da porcentagem de espermatozides
dotados de motilidade progressiva (CBRA, 1998).
O TRR foi proposto em 1967, por DIMITROPOULOS, para avaliao da
fertilidade potencial de partidas de smen congelado de bovino, sendo,
posteriormente, adaptado para as demais espcies. O smen bovino de boa
qualidade apresenta pelo menos 30% de motilidade espermtica progressiva
retilnea e escore 3 (escala de 1 a 5) de vigor espermtico depois do congelamento.
(CBRA 1998).

54

Captulo III
_________________________________________________________

Consideraes Finais

55

1 Consideraes Finais
A produtividade na explorao do rebanho de corte dependente da
eficincia reprodutiva do rebanho, sendo a fertilidade do touro uma das
caractersticas mais importantes na variao desta eficincia.
O potencial reprodutivo do touro influenciado por vrios fatores como
idade, puberdade, qualidade do smen, permetro escrotal, libido, por condio fsica
adequada que permita pr em prtica os processos que culminam com a monta e
condies ambientais.
Sabendo-se que certas caractersticas de fertilidade possuem baixa
herdabilidade e que em condies precrias de alimentao as diferenas genticas
entre os animais no so expressivas, indiscutvel que a eficincia reprodutiva tem
que ser priorizada por razes econmicas e pela necessidade de obter uma
populao suficientemente grande para a implantao de um programa de
melhoramento.
Alm disso, a seleo de touros de alto valor reprodutivo torna possvel a
obteno de melhores produtos e de custos mais baixos, em funo do maior
nmero de vacas por touro. Portanto, o smen de qualidade significa o rpido
retorno do capital investido na criao de um reprodutor.
Embora o permetro escrotal seja boa indicao da qualidade do smen,
esta medida por si s no suficiente para garantir resultado positivo de fertilidade
nos touros. A alternativa para testar a fertilidade do touro a avaliao conjunta das
caractersticas

do

smen,

das medies

complementares e

das

atitudes

comportamentais.
Diante deste contexto, deve-se notar ainda que a possibilidade de
conservar os gametas masculinos de touros selecionados para utiliz-los de forma
mais racional, permite o melhoramento animal e a produo de produtos de
qualidade com menor custo sejam alcanados. Portanto, mesmo que os resultados
com a tecnologia de congelamento do smen bovino sejam considerados
satisfatrios, deve-se tentar alcanar melhores ndices na qualidade de doses de

56

smen produzidas, garantindo, assim, melhores resultados dos que os j

alcanados.
Na atualidade, o processamento do smen parece estar mais relacionado
expanso da inseminao artificial, porm os produtores e as associaes de
raas devem estar atentos, exigindo alternativas eficientes para predizer, com
segurana, a fertilidade do smen congelado. Pois levado em conta somente o
mrito gentico do material a ser multiplicado, mas o fato que s se tem uma
relao de benefcio/custo favorvel ao produtor quando, alm do potencial gentico
do animal doador, a qualidade do smen congelado tambm bem explorada.
Tambm preciso reconhecer que o Brasil possui uma grande
biodiversidade gentica bovina no reconhecida espalhada por propriedades que
no tm acesso a nenhuma das tecnologias disponveis no mercado. Sabendo que
um dos desafios futuros que ser enfrentado produo de alimento em quantidade
e qualidade para satisfazer a sociedade crescente, torna-se interessante, por meio
de pesquisas, reconhecer e formar um banco de smen dos animais superiores em
produtividade. Assim, de responsabilidade de todos os pesquisadores da rea se
preocupar e criar solues para melhor enfrentar os problemas futuros.
O curso de Medicina Veterinria bastante amplo, dividindo-se em vrias
reas que nem sempre se interligam. Na rea de reproduo animal, poucas
tcnicas realizadas no campo so ensinadas dentro de sala, exigindo um
aprimoramento do profissional que a escolher para trabalhar.
Durante a realizao do estgio curricular, tive oportunidade de conhecer
e lidar com vrios produtores e profissionais desta rea e, assim, acompanhar as
dificuldades enfrentadas por ambos os lados e ver que estas s podem ser
transpostas quando se tornam aliados.
Cabe ao mdico veterinrio orientar, aplicando os ensinamentos
cientficos adquiridos, buscando a satisfao do produtor rural em melhor
rentabilidade, porm de forma tica e com respeito aos animais.
A realizao do estgio curricular supervisionado mostrou-me o quanto
necessrio aos alunos que esto se formando e escolheram o campo se dedicarem

57

com grande empenho na sua atuao profissional, pois preciso mostrar aos
produtores rurais que venham a precisar dos seus servios, no s a capacidade de
trabalho, mas tambm a auto-confiana.
Ficou claro que j no existe mais preconceito para com tcnicos do sexo
feminino no campo a partir do momento que se realiza um trabalho eficiente, com
qualidade, funcional e que muitas vezes este prefervel por ser dotado de melhor
relao humana e mais cuidados.

58

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64

65

ANEXOS

66

ANEXO 1
Planilha de coleta de smen a campo

Planilha de Coleta de Smen

Partida: _____/___

Data: ___/___/___

Tcnico: __________

Touro:

Mtodo:

Doses:

Coleta: hs

Volume:

Motilidade/Vigor (cong.):

Motilidade: %

Vigor (0-5):

TRR (5 hs):

Concentrao:

DM:

Diluio inicial:

dm:

Diluio final:

Total de defeitos:

Horas:_____:_____

Doses envasadas:

Observaes:
Fonte: Empresa Gentec, no municpio de Cuiab - MT 2007.

67

ANEXO 2
Frmula diluidor Tris-Gema-glicerol

Diluidor TRIS-GEMA-GLICEROL
Tris

2,42 g

cido Ctrico

1,36 g

Frutose

1,0 g

Gema de Ovo

20 mL

Glicerol

7 mL

Penicilina G potssica

0,028 g

gua destilada

100 mL

68

INSTRUO NORMATIVA N 53 27/09/06

69

MINISTRIO DA AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO.

SECRETARIA DE DEFESA AGROCPECURIA.
INSTRUO NORMATIVA SDA N 53, DE 27 DE SETEMBRO DE 2006.

O SECRETRIO DE DEFESA AGROPECURIA DO MINISTRIO DA AGRICULTURA,

PECURIA E ABASTECIMENTO, no uso da atribuio que lhe confere o art. 9 combinado
com o art. 42, do Anexo I, do Decreto n 5.351, de 21 de janeiro de 2005, em
cumprimento ao disposto na Lei n 6.446, de 5 de outubro de 1977, regulamentada pelo
Decreto n 187, de 9 de agosto de 1991, considerando a necessidade de atualizar as
normas estabelecidas nas Portarias nos 25 e 26, de 5 de setembro 1996, e o que consta
do Processo n 21000.010337/2006-07, resolve:
Art. 1 Aprovar o REGULAMENTO PARA REGISTRO E FISCALIZAO DE CENTRO
DE COLETA E PROCESSAMENTO DE SMEN (CCPS) BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E
OVINO, na forma dos Anexos presente Instruo Normativa.
Pargrafo nico. Centro de Coleta e Processamento de Smen (CCPS) o local em
que se renem animais para a realizao da coleta e processamento de smen.
Art. 2 Os CCPS bovino, bubalino, caprino e ovino, j registrados no Ministrio da
Agricultura, Pecuria e Abastecimento - MAPA, tero um prazo de 180 (cento e oitenta)
dias, a partir da data de publicao desta Instruo Normativa, para se adequarem s
exigncias estabelecidas no Regulamento anexo.
Art. 3. Esta Instruo Normativa entra em vigor na data de sua publicao.
Art. 4. Ficam revogadas as Portarias nos 25 e 26, de 5 de setembro de 1996.

GABRIEL ALVES MACIEL

ANEXO I - REGULAMENTO PARA REGISTRO E FISCALIZAO DE CENTRO DE COLETA E

PROCESSAMENTO DE SMEN (CCPS) BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO
ANEXO II - REQUERIMENTO PARA OBTENO DE REGISTRO DE CENTRO DE COLETA E
PROCESSAMENTO DE SMEN (CCPS) BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
ANEXO III - REQUERIMENTO PARA CANCELAMENTO DE REGISTRO DE CENTRO DE
COLETA E PROCESSAMENTO DE SMEN (CCPS) BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
ANEXO IV - COMUNICAO DE QUARENTENA DE BOVINO, BUBALINO,CAPRINO E
OVINO.
ANEXO V - CERTIFICADO ANDROLGICO PARA BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
ANEXO VI - ATESTADO SANITRIO PARA INSCRIO DE REPRODUTOR COMO DOADOR
DE SMEN BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
ANEXO VII - REQUERIMENTO PARA OBTENO DA INSCRIO DE REPRODUTOR COMO
DOADOR DE SMEN BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
ANEXO VIII - REQUERIMENTO DE BAIXA NA INSCRIO DO REPRODUTOR COMO
DOADOR DE SMEN BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.

70

ANEXO IX - INFORMAES REFERENTES COLETA E CONGELAMENTO DE SMEN

BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
ANEXO X - RELATRIO DE PRODUO E COMERCIALIZAO DE SMEN BOVINO,
BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
ANEXO XI - RELATRIO DE COMERCIALIZAO DE SMEN IMPORTADO DE BOVINO,
BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
ANEXO XII - RELATRIO DE PRODUO DE SMEN PARA TESTE DE PROGNIE.

71

ANEXO I
REGULAMENTO PARA REGISTRO E FISCALIZAO DE CENTRO DE COLETA E
PROCESSAMENTO DE SMEN (CCPS) BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO
CAPTULO I
DOCUMENTOS REQUERIDOS PARA OBTENO DE REGISTRO
1. Para obteno de registro de CCPS so necessrios os seguintes documentos:
1.1. cpia do contrato social da Organizao, ou da Ata de constituio da
sociedade, registrada no rgo competente, ou quando se tratar de instituio de
ensino ou pesquisa, cpia do documento que formalizou a criao do CCPS
acompanhada de declarao de funcionamento desse centro, emitida pela autoridade
maior da instituio;
1.2. cpia do Cadastro Nacional de Pessoa Jurdica - CNPJ;
1.3. cpia da Inscrio Estadual;
1.4. Anotao de Responsabilidade Tcnica emitida pelo Conselho Regional de
Medicina Veterinria;
1.5. planta-baixa com indicao de todas instalaes e dependncias do CCPS
na escala mnima de 1:100;
1.6. planta de localizao do CCPS com as coordenadas geogrficas e indicao
das estradas, rodovias, cursos dgua e reas limtrofes, em tamanho 100x60 cm e em
escala compatvel; e
1.7. memorial descritivo das instalaes, dos equipamentos e dos processos
tecnolgicos e higinico-sanitrios a serem adotados no CCPS.
CAPTULO II
EXIGNCIAS FSICAS PARA OBTENO DE REGISTRO
2. O CCPS dever possuir cerca perimetral que permita o isolamento, mnimo de 25 metros,
de criatrios vizinhos, ou barreira natural ou artificial que permita manter o isolamento desses
criatrios; estar localizado em rea no sujeita a alagamento ou qualquer outra condio
adversa que possa interferir com a sade e bem-estar dos animais ou com a qualidade do
produto; possuir entrada e sada controlada para veculos, pessoas e animais, com
equipamentos para desinfeco de veculos; e dispor, no mnimo, das seguintes instalaes:
2.1. Unidade Laboratorial constituda de:
a) Sala de Manipulao de Smen esta sala dever possuir um culo com dupla porta para
recepo do material coletado;
b) Sala de Lavagem e Esterilizao de Material com reas definidas para ambas as atividades
esta sala fica dispensada em CCPS que utiliza material esterilizado de outros laboratrios;
Obs.: As salas que compem a Unidade Laboratorial devero ser revestidas com material de
fcil higienizao e protegidas contra a entrada de insetos e outros animais.
2.2. Unidade de Coleta de Smen de fcil higienizao, com:
a) instalaes para coleta do smen com sistema de conteno que assegure o bem-estar dos
animais e a proteo dos funcionrios; e
b) rea definida para a lavagem e preparo de material utilizado na coleta do smen;
2.3. Unidade de Alojamento do Rebanho Residente com instalaes que assegurem as
condies de bem-estar dos animais;
2.4. Unidade de Quarentena com:
a) instalaes para alojamento e conteno dos animais de modo que permita a realizao de
todos os procedimentos requeridos para o perodo de quarentena;
b) cerca limtrofe com isolamento mnimo de 25 metros das demais instalaes do CCPS e de
criatrios vizinhos; e
c) entrada independente de modo que os animais que ingressem nessa unidade no transitem
pela unidade de alojamento do rebanho residente;
Obs.: A Unidade de Quarentena um local isolado no centro, onde os animais so mantidos
sob observao por um perodo especfico de tempo, sem contato direto com outros animais
ou grupos de animais, at que se conclua os exames sanitrios requeridos para ingressar no
rebanho residente e iniciar a coleta do smen destinado industrializao;
2.5. Unidade Administrativa sem comunicao direta com as demais unidades do centro;
2.6. Vestirios e Banheiros para funcionrios que trabalham no CCPS;
Obs: os vestirios e banheiros localizados na unidade laboratorial devero ser de uso
exclusivo do pessoal que trabalha nesta unidade, e dispostos de maneira tal, que separe a
unidade laboratorial das demais unidades do centro.

72

2.7. Sala ou rea de Armazenamento da Produo de Smen de modo que garanta a

qualidade e a identidade do produto, assim como eficincia no controle de estoque.
Obs.: O CCPS que mantiver espcies diferentes para a produo de smen dever ter as
Unidades de Coleta, Quarentena e Alojamento de bovinos e bubalinos separadas das Unidades
de Coleta, Quarentena e Alojamento de ovinos e caprinos por uma distncia mnima de 25m,
assim como de outras espcies que forem alojadas nesse CCPS para essa finalidade.
CAPTULO III
EXIGNCIAS OPERACIONAIS PARA OBTENO DE REGISTRO
3. O CCPS dever cumprir com as seguintes exigncias operacionais:
3.1. descrever os processos tecnolgicos e os procedimentos higinicosanitrios a serem
adotados na Sala de Manipulao de Smen, Sala de Lavagem e Esterilizao de Material,
Unidade de Coleta de Smen; Unidade de Alojamento do Rebanho Residente, Unidade de
Quarentena e na Sala/rea de Armazenamento da Produo de Smen;
3.2. estabelecer fluxo operacional entre e dentro das instalaes do CCPS de modo a
preservar as condies higinico-sanitrias do processo de produo, a qualidade e identidade
do produto, a segurana dos funcionrios e o bem-estar dos animais;
3.3. estabelecer medidas higinico-sanitrias a serem adotadas para o ingresso de visitas no
CCPS e permitir o ingresso de visitas somente aps o cumprimento dessas medidas;
3.4. estabelecer programa de controle de pragas;
3.5. dar destino adequado s guas utilizadas nos trabalhos de rotina do CCPS, assim como
aos dejetos;
3.6. realizar o controle sanitrio do rebanho residente e dos animais que ingressam no CCPS
em conformidade com o estabelecido pelo rgo competente do MAPA;
3.7. no realizar nenhum tipo de teste de diagnstico de doenas transmissveis na unidade
laboratorial, bem como nenhum tipo de teste de diagnstico de doenas transmissveis nas
dependncias do CCPS, de animais que no estejam alojados neste estabelecimento.
CAPTULO IV
PROCEDIMENTOS PARA OBTENO DE REGISTRO
4. Para obteno de registro de CCPS devero ser seguidos os seguintes procedimentos:
4.1. o representante legal do CCPS a ser registrado dever fazer requerimento dirigido
Superintendncia Federal de Agricultura - SFA, solicitando o registro do estabelecimento,
conforme modelo estabelecido no Anexo II;
4.2. o requerimento e a documentao especificada anteriormente devero ser protocolados
na SFA da Unidade Federativa, na qual se localiza o CCPS;
4.3. a SFA enviar um Fiscal Federal Agropecurio, com formao em Medicina Veterinria,
para inspecionar o CCPS;
4.4. a SFA emitir o Certificado de Registro do CCPS, em modelo padronizado para todo o
territrio nacional, mediante parecer favorvel no laudo de inspeo realizado pelo Fiscal
Federal Agropecurio.
CAPTULO V
CANCELAMENTO DE REGISTRO
5. O cancelamento de registro do CCPS poder ocorrer por solicitao do representante legal
do estabelecimento ou por deciso da autoridade competente em razo de descumprimento
da legislao.
5.1. O cancelamento de registro por solicitao do representante legal do estabelecimento
dever ser realizado por meio de requerimento dirigido SFA da Unidade Federativa que
concedeu o registro, conforme modelo estabelecido no Anexo
III.
5.2. O cancelamento do registro por deciso da autoridade competente ser formalizado em
processo administrativo na SFA da Unidade Federativa que concedeu o registro, e decidido
pelo rgo central do MAPA, conforme Decreto no 187, de 9 de agosto de 1991.
5.3. O CCPS que tiver seu registro cancelado poder solicitar novo registro nos termos da
presente Instruo Normativa.
CAPTULO VI
DOCUMENTOS REQUERIDOS PARA OBTENO DE INSCRIO DE REPRODUTOR
6. Para obteno da inscrio de reprodutores bovinos, bubalinos, caprinos e ovinos como
doadores de smen so necessrios os seguintes documentos:
6.1. comunicao de quarentena por ocasio do ingresso do reprodutor na unidade de
quarentena do CCPS, conforme modelo estabelecido no Anexo IV;

73

6.2. cpia do Certificado de Registro Genealgico Definitivo - RGD ou do Certificado Especial

de Identificao e Produo - CEIP;
6.3. cpia da Certificao Zootcnica, conforme determinao do setor competente do MAPA somente para animais inscritos com a finalidade de comercializao de smen;
6.4. cpia do teste de Tipagem de DNA ou Sangunea;
6.5. cpia do Certificado Androlgico, conforme modelo estabelecido no Anexo
V; e
6.6. Atestado Sanitrio, conforme modelo estabelecido no Anexo VI.
CAPTULO VII
PROCEDIMENTOS PARA OBTENO DE INSCRIO DE REPRODUTOR
7. Para obteno de inscrio de bovinos, bubalinos, caprinos e ovinos como doadores de
smen devero ser seguidos os seguintes procedimentos:
7.1. o responsvel tcnico pelo CCPS dever fazer requerimento dirigido SFA, solicitando a
inscrio do reprodutor, conforme modelo estabelecido no Anexo VII;
7.2. o requerimento e a documentao requerida no captulo VI devero ser protocolados na
SFA da Unidade Federativa, na qual se localiza o CCPS interessado na obteno da inscrio
do reprodutor como doador de smen; e
7.3. A SFA emitir o Certificado de Inscrio do reprodutor, como doador de smen em
modelo padronizado para todo territrio nacional, aps anlise da documentao.
CAPTULO VIII
BAIXA NA INSCRIO DE REPRODUTOR
8. O afastamento do doador de smen do CCPS, por qualquer motivo, dever ser informado
SFA da Unidade Federativa que inscreveu o animal, conforme modelo estabelecido no Anexo
VIII.
8.1. A SFA dar a baixa na inscrio.
8.2. O doador de smen que sair do CCPS dever, por ocasio de seu retorno, cumprir com os
requisitos especificados no captulo VII, para obteno de nova inscrio.
CAPTULO IX
IDENTIFICAO DO SMEN
9. O smen processado de bovinos, bubalinos, caprinos e ovinos dever ser envasado em
embalagens que contenham as seguintes informaes:
9.1. nmero da partida correspondente data do congelamento e no caso de mais de um
ejaculado no mesmo dia, precedido por trao e algarismo identificando o nmero do
ejaculado;
9.2. nome ou nmero de registro do CCPS no MAPA;
9.3. nome e nmero de registro genealgico definitivo do doador;
9.4. cdigo da raa, padronizado internacionalmente por duas letras;
9.5. letra M para macho e letra F para fmea no caso de smen sexado; e
Obs.: no caso de smen coletado para teste de prognie a identificao dever ser realizada
em conformidade com o programa estabelecido para esse fim.
CAPTULO X
INFORMAES SOBRE O SMEN
10. O CCPS dever disponibilizar aos compradores as seguintes informaes sobre o smen:
10.1 volume da dose em mL;
10.2. motilidade progressiva em percentagem;
10.3. vigor em escala de 0-5;
10.4. defeitos totais em percentagem;
10.5. defeitos maiores em percentagem; e
10.6. nmero de espermatozides por dose.
CAPTULO XI
RESPONSABILIDADE TCNICA
11. Somente o profissional com formao em Medicina Veterinria poder ser responsvel
tcnico pelo CCPS bovino, bubalino, caprino e ovino.
Obs.: No caso de mudana do responsvel tcnico, o CCPS dever comunicar imediatamente
a SFA, o nome do sucessor com a Anotao de Responsabilidade Tcnica emitida pelo
Conselho Regional de Medicina Veterinria e a Solicitao de Baixa da Responsabilidade
Tcnica do anterior.
CAPTULO XII
EXIGNCIAS A SEREM CUMPRIDAS PELO RESPONSVEL TCNICO
12. O responsvel tcnico pelo CCPS dever:

74

12.1. manter no CCPS, para efeitos de fiscalizao, arquivos contendo as informaes

referentes coleta e congelamento de smen requeridas no Anexo IX;
12.2. encaminhar SFA, at o ltimo dia til do ms subseqente, relatrios de atividades
mensais, conforme modelos especificados a seguir:
a) Relatrio de Produo e Comercializao de Smen, Anexo X;
b) Relatrio de Comercializao de Smen Importado, Anexo XI;
c) Relatrio de Produo de Smen para o Teste de Prognie, Anexo XII; e
Obs.: O CCPS que atrasar ou no enviar os relatrios especificados acima ficar sujeito s
penalidades previstas na legislao.
12.3. fazer cumprir as exigncias zoossanitrias, bem como as demais exigncias requeridas
pelo MAPA, para coleta, processamento e comercializao do
smen;
12.4. manter no CCPS, para efeitos de fiscalizao, cpia dos exames sanitrios dos animais
quarentenados e residentes.
CAPTULO XIII
DISPOSIES GERAIS
13. Todo CCPS bovino, bubalino, caprino e ovino tem que estar registrado no MAPA.
14. O CCPS que comercializa smen ou qualquer outro material de multiplicao animal,
produzido em outros estabelecimentos, ter que atender legislao especfica
do MAPA para esse fim.
15. Qualquer alterao no contrato social do estabelecimento dever ser comunicada SFA,
em processo administrativo, acompanhado da cpia do novo contrato social ou da Ata de
constituio da sociedade.
16. Qualquer alterao na planta-baixa do estabelecimento registrado dever ser submetida
aprovao prvia do MAPA.
17. Somente poder ser objeto de comrcio o smen obtido em estabelecimento registrado e
de reprodutores inscritos no MAPA com a finalidade de comrcio.
18. Na nota fiscal do smen comercializado obrigatrio constar:
18.1. nome e nmero de registro no MAPA, do CCPS que produziu e comercializou o smen;
18.2. nome do doador, raa, RGD e nmero de inscrio no MAPA; e
18.3. quantidade de doses de smen.
19. A distribuio das doses de smen para as fazendas colaboradoras do teste de prognie
poder ser realizada somente aps a liberao da SFA.
20. A fiscalizao do CCPS ficar a cargo do Fiscal Federal Agropecurio com formao em
Medicina Veterinria.
21. O Fiscal Federal Agropecurio a servio do MAPA, a qualquer momento, ter livre acesso
ao CCPS, bem como aos documentos arquivados.
22. O CCPS que obtiver cancelamento de registro dever informar ao MAPA o estoque de
produo existente com identificao dos doadores.
23. Os casos omissos e as dvidas suscitadas na aplicao desta Instruo Normativa e de
Normas complementares sero dirimidas pelo Secretrio de Defesa Agropecuria do MAPA.

75

ANEXO II
REQUERIMENTO PARA OBTENO DE REGISTRO DE CENTRO DE COLETA E
PROCESSAMENTO DE SMEN (CCPS) BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
____________________, _____de ______________de ______
Senhor Chefe,
Eu, abaixo assinado, representante legal do estabelecimento
______________________________________, Inscrio Estadual N __________,
CNPJ N _____________, localizado ___________, Municpio __________________,
UF _______, CEP ___________, solicito nos termos da legislao vigente do MAPA, o
registro desse estabelecimento como CCPS:

( )Bovino ( )Bubalino ( )Caprino ( )Ovino

Anexo os seguintes documentos:
( ) cpia do contrato social da Organizao; ou da Ata de constituio da sociedade;
ou documento que formaliza a criao do CCPS na instituio;
( ) cpia do Cadastro Nacional de Pessoa Jurdica - CNPJ;
( ) cpia da Inscrio Estadual;
( ) Anotao de Responsabilidade Tcnica;
( ) planta-baixa do CCPS;
( ) planta de localizao do CCPS; e
( ) memorial descritivo.
Informo ainda, o endereo para correspondncia e meios de contato:
Localizao: ________________, Municpio: ______________________, UF: _____,
CEP: ____________, Caixa Postal: ____________, Fone: _____________________,
FAX: __________________, Endereo Eletrnico: ____________________________.
Atenciosamente,
___________________________________________________
Assinatura do Representante Legal do CCPS

76

ANEXO III
REQUERIMENTO PARA CANCELAMENTO DE REGISTRO DE CENTRO DE COLETA
E PROCESSAMENTO DE SMEN (CCPS) BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E
OVINO.
______________________, _____de ______________de ____.
Senhor Chefe,
Eu, abaixo assinado, representante legal do estabelecimento
_______________________, Inscrio Estadual N __________, CNPJ N
_____________, localizado ________________, Municpio _______________, UF
_______, CEP _________, solicito nos termos da legislao vigente do MAPA, o
cancelamento do registro desse estabelecimento como CCPS:

( )Bovino ( )Bubalino ( )Caprino ( )Ovino

Informo que a solicitao do cancelamento de registro pelo seguinte motivo:
__________________________________________________________________.
Informo ainda, em relatrio anexo, a relao do smen em estoque com identificao
dos doadores.
Atenciosamente,
___________________________________________________
Assinatura do Representante Legal do CCPS

77

ANEXO IV
COMUNICAO DE QUARENTENA DE BOVINO, BUBALINO,
CAPRINO E OVINO.
_____________,_____de ______________de ______
Senhor Chefe,
O CCPS _____________________________________________ registrado no
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento, sob o N
______________________, por meio de seu representante legal, comunica que na
presente data foram iniciados os trabalhos referentes quarentena do reprodutor
___________________________________________________________, espcie
______________________, raa ___________________________, RGD/CEIP N
_____________________________________________ procedente da propriedade
______________________, localizada no municpio ____________________, Estado
_________________.
Atenciosamente,
____________________________________________
Carimbo e Assinatura do Responsvel Tcnico

78

ANEXO V
CERTIFICADO ANDROLGICO PARA BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
A. IDENTIFICAO DO REPRODUTOR
Nome: Espcie: Raa:
RGD/CEIP: Nascimento:
Proprietrio:
Endereo:
B. EXAME CLNICO (Condio Geral, Sistema Genital e Comportamento Sexual)
Observaes:
C. ESPERMOGRAMA
1. COLETA DE SMEN
Mtodo: Data da Coleta:
2. CARACTERSTICAS FSICAS:
Volume do Ejaculado: __________mL
Motilidade Progressiva : _________%
Vigor (O 5): ___________
Concentrao: _________ espermatozide / mL
3. CARACTERSTICAS MORFOLGICAS
Especificar individualmente as anormalidades encontradas e suas freqncias:

Defeitos Maiores: _______%

Defeitos Menores: _______%
Espermatozides Anormais: _______%
Outros Elementos: ________
Observaes:
D. TESTES COMPLEMENTARES:

E. CONCLUSO:

___________________, ______de______________ de _______

___________________________________________
Carimbo e Assinatura do Responsvel Tcnico

79

ANEXO VI
ATESTADO SANITRIO PARA INSCRIO DE REPRODUTOR COMO DOADOR DE
SMEN BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
Atesto para os devidos fins que o animal ____________________________
_______________________________________, espcie _________________, raa
__________________________, com RGD / CEIP N____________________
encontra-se apto a fazer parte do rebanho residente do CCPS _________________
___________________________, registrado no Ministrio da Agricultura, Pecuria e
Abastecimento sob o N ______________________.
Informo a seguir o resultado e a data dos exames realizados durante o perodo
de quarentena para as seguintes doenas:
NOME DA
DOENA

1 TESTE

2 TESTE

3 TESTE

RESULTADO DATA RESULTADO DATA RESULTADO DATA RESULTADO

Preencher os dados referentes ao segundo, terceiro e quarto teste somente

para as doenas nas quais so requeridos mais de um teste na quarentena ou em caso
de atendimento a protocolos especiais de comrcio internacional.
_____________, _____de ______________de ______
_________________________________________
Carimbo e Assinatura do Responsvel Tcnico

4 TESTE
DATA

80

ANEXO VII
REQUERIMENTO PARA OBTENO DA INSCRIO DE REPRODUTOR COMO
DOADOR DE SMEN BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
_____________, _____de ______________de ______
Senhor Chefe,
Eu, abaixo assinado, responsvel tcnico pelo estabelecimento ___________
_______________________, registrado no Ministrio da Agricultura, Pecuria e
Abastecimento, sob o nmero ________________, solicito a inscrio do reprodutor
identificado a seguir, como doador de smen:
Nome

Espcie

Raa

RGD/CEIP

Anexo os documentos especificados a seguir:

( ) Cpia do RGD / CEIP;
( ) Teste de Tipagem de DNA ou sangunea;
( ) Certificao zootcnica:
( ) Certificado Androlgico; e
( ) Atestado sanitrio.
Informo, ainda, que o smen a ser coletado para a finalidade de:
( ) Comercializao;
( ) Uso em Rebanho Prprio;
( ) Comercializao e Uso em Rebanho Prprio; e
( ) Teste de prognie.
Atenciosamente,
_________________________________________________
Carimbo e Assinatura do Responsvel Tcnico

Nascimento

81

ANEXO VIII
REQUERIMENTO DE BAIXA NA INSCRIO DO REPRODUTOR COMO DOADOR
DE SMEN BOVINO, BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
____________________, ______ de ________ de ____
Senhor Chefe,
Eu, abaixo assinado, Responsvel Tcnico pelo
estabelecimento__________________________________________________,
registrado no Ministrio da Agricultura, Pecuria e do Abastecimento sob o nmero
_________________________, solicito a baixa na inscrio do reprodutor identificado
a seguir, como doador de smen.
Nome

Espcie

Raa

RGD/CEIP

Nascimento

Informo a seguir:
Causa da baixa______________________________________________________
__________________________________________________________________
Doses produzidas:____________________________________________________
Perodo de Coleta: _______________________
Atenciosamente,
________________________________________
Carimbo e Assinatura do Responsvel Tcnico

82

ANEXO IX
INFORMAES REFERENTES COLETA E CONGELAMENTO DE SMEN BOVINO,
BUBALINO, CAPRINO E OVINO.
A. IDENTIFICAO DO REPRODUTOR
Nome: RGD/CEIP:
Espcie: Raa: Nascimento:
Proprietrio:
Endereo:
B. ESPERMOGRAMA
1. COLETA DO SMEN
Mtodo: Data da Coleta:
2. CARACTERSTICAS FSICAS
Volume do Ejaculado: _________mL
Motilidade Progressiva: ________ %:
Vigor (O 5):_______________
Concentrao: _______________ Espermatozides / mL
3. PROCESSAMENTO
( ) Congelamento ( ) Resfriamento
Meio utilizado: _________________
Concentrao: _____________ Espermatozides/ Dose Volume da dose :___________mL
4. AVALIAO PS-CONGELAMENTO OU RESFRIAMENTO
Motilidade progressiva: ______%:
Vigor (0 5) : _______ Concentrao _____________ Espermatozides/ Dose
5. CARACTERSTICAS MORFOLGICAS
Especificar individualmente as anormalidades encontradas e suas freqncias:
Defeitos Maiores: ____________%
Defeitos Menores: ____________%
Espermatozides Anormais: ____________%
Outros Elementos: ___________
C. CONCLUSO
Partida: Nmero de doses:
___________________, ______de ______________ de _______
______________________________________________________
Carimbo e Assinatura do Responsvel Tcnico

83

ANEXO X
RELATRIO DE PRODUO E COMERCIALIZAO DE SMEN BOVINO, BUBALINO,
CAPRINO E OVINO
CCPS:
Registro no MAPA:
Espcie Animal:
MS / ANO:____________
INDENTIFICAO DO
REPRODUTOR
Nome Raa RGD Inscrio Saldo do Produzidas
/
no MAPA
ms
CEIP
anterior

DOSES DE SMEN
Comercializadas

No Exportadas Total
pas

______________________, _______de ____________de ______

_______________________________________________
Carimbo e Assinatura do Responsvel Tcnico

Devolvidas Utilizadas Estoque

84

ANEXO XI
RELATRIO DE COMERCIALIZAO DE SMEN IMPORTADO DE BOVINO, BUBALINO,
CAPRINO E OVINO
CCPS:
Registro no MAPA:
Espcie Animal:
MS/ANO:
IDENTIFICAO
DO
REPRODUTOR
Nome Raa RGD

ORIGEM

Estabelecimento

DOSES DE SMEN

Pas Saldo- Importadas Vendidas Devolvidas Utilizadas

ms
anterior

Nome Raa RGD Estabelecimento Pas Saldo - ms anterior Importadas Vendidas Devolvidas
Utilizadas Estoque
______________________, _______de ____________de ______
_____________________________________________
Carimbo e Assinatura do Responsvel Tcnico

Estoque

85

ANEXO XII
RELATRIO DE PRODUO DE SMEN PARA TESTE DE PROGNIE
CCPS:
Registro no MAPA:
Espcie Animal:
MS/ANO:
Reprodutor Raa RGD

Inscrio no MAPA

Partida

_________________, ______de ________de ________

_______________________________________________
Carimbo e Assinatura do Responsvel Tcnico

Data
da
Coleta

Nmero
de doses