Sintesis de Alicina

La sntesis de alicina se realiz siguiendo el mtodo propuesto por Bocchini et al.

[10] De acuerdo con esto, se aadi lentamente una cantidad equimolar de cido
perbenzoico en 20 ml de diclorometano a una solucin de disulfuro de alilo (1,46 g
en 100 ml de diclorometano) bajo agitacin magntica rpida mientras se enfriaba
a -10C. La mezcla de reaccin se dej reposar a temperatura ambiente durante 1
h. Se elimin el exceso de cido lavando la mezcla con una solucin de
bicarbonato de sodio. La solucin de diclorometano se enjuag con agua
destilada, se sec sobre sulfato de sodio anhidro y el disolvente se elimin por
evaporacin rotativa. El producto seco se pes y se prepar la disolucin estndar
disolviendo la alicina pura en metanol. Los datos obtenidos a partir del anlisis por
HPLC-UV demostraron que la alicina representaba ms del 99% del estndar.

2.2 MTODOS DE EXTRACCIN

Los dientes de ajo fueron desligados de la cabeza de ajo, y les fue retirada la
serie de capas envolventes. Despus de esto se procedi al pesaje de 25 g, los
cuales fueron desinfectados, macerados y trasladados cuantitativamente al
proceso de extraccin. Las extracciones se realizaron bajo tres variables:
-Variedad de ajo: blanco y morado. -Tipo de solvente: etanol 75%, hexano, mezcla
hexano:etanol (1:1). Los solventes fueron elegidos con el fin de probar el nivel de
extraccin de componentes del ajo a diferentes polaridades, siendo el menos polar
el hexano, y con polaridad mayor el etanol al 75%. -Sistema de extraccin: soxhlet
y en fro con agitacin. 2.2.1 Extraccin soxhlet La muestra tratada fue envuelta en
papel filtro (110mm de dimetro de poro), y dispuesta dentro del extractor de 100
mL de capacidad. El condensador utilizado fue de tipo bulbo y el matraz de 250
mL, se utiliz una manta elctrica de calentamiento y agua corriente para el
condensador. 2.2.2 Extraccin en fro: la muestra preparada y el solvente fueron
dispuestos dentro de un erlenmeyer de 250 mL. La boca de los erlenmeyers fue
cubierta con papel aluminio y se implement agitacin magntica a temperatura
ambiente (aprox. 25 C). Se realizaron todos los procesos de extraccin por
triplicado con un tiempo de dos horas cada uno, conjugando las dos variedades de
ajo, los tres tipos de solventes y los dos montajes de extraccin, obteniendo de
esta manera 12 combinaciones posibles. Los solventes de extraccin fueron
separados de los extractos y oleorresinas por medio de rotaevaporacin. Con el
peso de la cantidad de oleorresina extrada se calcularon los porcentajes de
rendimiento promedio para cada combinacin. Se seleccion la oleorresina con

mayor porcentaje de rendimiento a la que posteriormente se le realizaron los

anlisis de caracterizacin.

Cromatografia
8.2 Preparacin de extracto acuoso de ajo (AIIium sativum) El ajo proviene del
Estado de Michoacn. 1 g de dientes de ajo se macera con 2 mi de agua destilada
en un mortero, se deja reposar durante 1 O minutos y posteriormente se filtra a
travs de papel Whattman 41 y se esteriliza a travs de un filtro Millipore de poro
0.4 ;m. Debido a que la alicina es el principal componente con actividad biolgica
en el ajo, se trata de obtener un extracto acuoso con un alto contenido de alicina.
19 8.3 Anlisis cualitativo para identificacin de alicina en el extracto acuoso de
ajo. La metodologa para la identificacin de alicina en el extracto acuoso de ajo se
realizo de acuerdo a (CAMAG, 2004) y se describe a continuacin. Fase
estacionaria Las placas de slica gel 60 F254 (Merck), 20 X 20 cm, fueron
prelavadas con metano! y secadas en una estufa a 100 C por 1 hr con el fin de
activarla, se deja enfriar en la cmara al vaci. Fase mvil La solucin tolueno:
acetato de etilo en una proporcin (10:3) fue aadida a la cmara de desarrollo de
tal manera que el volumen alcanzara una altura de 5 mm por arriba del borde
inferior. Aplicacin de la muestra 1 O tJL de cada uno de los extractos obtenidos y
1 O tJL de la solucin estndar de alicina fueron aplicados a 1 cm del extremo
inferior de la placa. Fase de desarrollo Despus de evaporado el disolvente de la
muestra, se coloc la placa en la cmara de desarrollo saturada con los vapores
de la fase mvil, los cuales desplazan la muestra hasta una longitud de 6 cm, ya
recorrida esta longitud, la placa fue retirada y secada con aire fri por 5 min. 20
Identificacin de la muestra.- UV 254 nm, esto se realiz con una lmpara de luz
ultravioleta.