EJERCICIO EXPERIMENTAL No.

8 Citometra de flujo
Equipo: H Integrantes: Chvez Prez Karen Nagibe; Lagar Quinto Frida &
Rosales Rodrguez Luis Alfredo
Laboratorio de inmunologa general Grupo: 5

PREGUNTA DE INVESTIGACIN
Cul es el porcentaje de linfocitos T totales en sangre perifrica? Cul es el porcentaje de
linfocitos T CD 4+ y CD8+ en sangre perifrica?
HIPTESIS
Los porcentajes de linfocitos T y linfocitos T CD 4 + y CD8+ obtenidos sern similares a los
reportados en la bibliografa para un sujeto normal.
RESULTADOS
A continuacin, se muestran los resultados obtenidos tras realizar la citometra de flujo,

Fig. 1. Evaluacin de la proporcin de linfocitos T en sangre perifrica. a) Dot Plot que muestra la proporcin
de linfocitos en una muestra de sangre perifrica. b) Histograma que muestra la poblacin de linfocitos CD3+
(LcT). B) Dot Plot que muestra los linfocitos T CD4+ y CD8+ cuantificados por citometra de flujo.

utilizando como fluorocromos y para marcar las clulas CD 4+ y CD 8+

En la siguiente tabla se muestran los porcentajes correspondientes a cada tipo celular
identificado y cuantificado a travs de la citometra de flujo tanto en la muestra, como en la
sangre total perifrica.
Clulas

Porcentaje en la muestra

Linfocitos CD3+ (LcT)

Linfocitos CD 3+ CD 4+
Linfocitos CD 3+ CD 8+
Linfocitos CD 3+ CD4+ CD8+

71.1%
65.9%
0.96%
28.5%

Porcentaje en sangre perifrica

total
19.0%
12.5%
0.18%
5.40%

ANLISIS DE RESULTADOS
Los datos obtenidos tras efectuar la citometra de flujo para clulas marcadas con
fluorocromos, indicaron que la sangre del sujeto analizado posee en la muestra un 71.1% de
linfocitos con el cluster de diferenciacin CD3+, es decir, linfocitos T. De estos, el 65.9% son
linfocitos con CD4+, o linfocitos T cooperadores, y el 28.5% son linfocitos CD 8+, o linfocitos T
citotxicos. Tan slo el 0.96% resultaron tener ambas molculas, tanto CD4+, como CD8+.
De acuerdo con lo reportado por la Universidad de Arkansas de ciencias Mdicas 1, los valores
normales para linfocitos CD3+ son de 64-82% (1171-2005/l), para linfocitos T
CD4+ de entre 39-57% (720-1348/l) y para linfocitos CD8+ son de entre 17-31% (318710/l). Con este marco de referencia, podemos afirmar que los valores obtenidos en la
muestra de sangre perifrica caen dentro de los rangos normales para un individuo comn, e
incluso presenta un porcentaje mayor a los niveles normales de linfocitos T CD4+. Sin
embargo, es importante remarcar que los porcentajes antes referidos son slo de la muestra
analizada ya que en dicho artculo no se especifica que los porcentajes correspondan a la
cantidad de linfocitos T CD3+, TCD4+ y TCD8+ en sangre perifrica total, solo se hace
mencin que estos valores corresponden a un individuo sano, sin embargo si los resultados
obtenidos se extrapolan a sangre perifrica total, los linfocitos TCD3+ representan tan solo el
19.0%, de los cuales el 12.5% son linfocitos TCD4+ y el 5.40% son linfocitos TCD8+. Donde
se puede sealar que el porcentaje de TCD3+ obtenido para sangre perifrica total es cercano
al porcentaje reportado en la literatura el cual oscila alrededor del 23%. An cuando no se
encontr el porcentaje especifico de linfocitos TCD4+ y TCD8+ para sangre perifrica total, se
encontr la proporcin establecida para estos obteniendo una proporcin de 2.3 mediante la
siguiente frmula:
=

4 +
12.5%
=
= 2.3
8 + = 5.4%

la cual es superior a la establecida para un sujeto sano, reportada e un rango de 1.1-2.0, sin
embargo, es crucial sealar que esta situacin podra deberse a que el sujeto de estudio se
encontraba enfermo en el momento.
CONCLUSIN
Mediante citometra de flujo fue posible determinar los porcentajes de linfocitos TCD3+,
TCD4+ y TCD8+ para una muestra de sangre. Se lograron conocer los porcentajes de clulas
TCD4+ y TCD8, encontrndose que la relacin se encuentra fuera del intervalo normal de
clulas
BIBLIOGRAFA
1. Insuasti-Beltran, G. et al. (2013) Clinical Flow Cytometric Analysis. University of Arkansas for Medical
Sciences. Recuperado de: http://www.uams.edu/clinlab/flow.htm el 13/11/2016.