PRCTICAS No.

1 y 2
Asignatura: Anlisis Instrumental
Profesor: Georgina Pina Luis
Ttulo: Construccin de la curva de calibracin del sistema Fe2+-1,10fenantrolina

determinacin

del

lmite

de

deteccin

del

mtodo.

Determinacin de la concentracin de Fe en vino blanco.

Objetivos:
Realizar la curva de calibracin del sistema Fe-fenantrolina y determinar el lmite de
deteccin del mtodo.
Realizar la determinacin de Fe en muestras de vino blanco
Fundamento
La espectrofotometra se refiere al uso de la luz para medir las concentraciones de
sustancias qumicas; cuando una molcula absorbe un fotn pasa de un estado
basal o fundamental, a un estado excitado (la energa de la molcula se
incrementa), as, la intensidad de los fotones que pasan a travs de una muestra
que contiene el analito, se atena debido a la absorcin. La medida de esta
atenuacin, que recibe el nombre de absorbancia, es la que sirve de seal.
La absorbancia se expresa de acuerdo a la ley de Lambert-Beer como:
A= bc
donde:
A= absorbancia
= absortividad molar
c= concentracin en moles/L
De manera que la dependencia de la absorbancia con la concentracin da lugar a
una lnea recta.
El hierro (II) forma un complejo de color rojo con 1,10-fenantrolina segn la
reaccin:
10

Para asegurar que todo el hierro presente en la muestra se encuentra en forma de

Fe2+ se aade, antes de la formacin del complejo, un agente reductor como el
clorhidrato de hidroxilamina, el cual reduce el Fe3+ a Fe2+ segn la reaccin:
4Fe 3+ + 2NH2OH

4Fe 2+ + N2O + 4H+ + H2O

La formacin del complejo de hierro (II) con fenantrolina se da en un intervalo de pH

comprendido entre 2 y 9 y aunque este es suficientemente amplio para asegurar la
formacin cuantitativa del complejo, se adiciona al medio acetato sdico que
neutraliza el cido formado durante la reduccin del hierro (III) y ajusta el pH a un
valor al que se puede efectuar la formacin del complejo.
Este mtodo puede aplicarse en la determinacin de Fe en vinos blancos o poco
coloreados y permite determinar el contenido total de hierro (Fe 2+ + Fe3+) en el vino.
Disoluciones necesarias
-

Disolucin patrn de hierro (II)

Preparar una disolucin de hierro de 200 ppm pesando la cantidad apropiada

de sulfato ferroso amnico hexahidratado, llevarlo a un matraz aforado de 100 mL.

Transferir cuantitativamente la muestra pesada a un matraz aforado de 100 mL y
aadir suficiente agua para disolver la sal. Aadir 1 ml de H2SO4 concentrado,
enrasar con agua desionizada y homogeneizar. Guardar la disolucin resultante en
una botella de polietileno preparada para tal fin.

Disolucin de 1,10-Fenantrolina (0.1%)

Disolver 100 mg de monohidrato de 1,10-fenantrolina en 100 ml de agua

desionizada.
-

Disolucin de clorhidrato de hidroxilamina al 10%

Disolver 10 g de clorohidrato de hidroxilamina en 100 ml de agua desionizada.

- Disolucin 0.1M de acetato sdico
Disolver 0.820 g de acetato de sodio en 100 ml de agua desionizada.
Material e instrumentacin necesarios
- Matraces aforados de 10 mL
- Pipetas volumtricas
- Espectrofotmetro
Procedimiento Operatorio
A. Obtencin de la curva de calibrado
Construir una curva de calibracin, adicionando en matraces de 10 ml, los
volmenes apropiados de la disolucin patrn de sulfato ferroso amnico
hexahidratado, para obtener una curva de calibracin entre 0-5 ppm de hierro, 1 mL de
clorhidrato de hidroxilamina, 3 ml de acetato sdico, 2 mL de 1,10-fenantrolina y
enrasar

con

agua

destilada.

Esperar

10

minutos,

obtener

los

espectros

correspondientes y corroborar la longitud de onda de mxima absorcin. Medir la

absorbancia de cada patrn a la longitud de onda apropiada.
B. Determinacin del lmite de deteccin del mtodo
Realizar 10 mediciones de la absorbancia del blanco y determinar la desviacin
standard (DS) de estas mediciones. Determinar el lmite de deteccin.
Lmite de deteccin del mtodo= 3 DSb/pendiente curva calibracin
C. Preparacin de la muestra a analizar

Para el anlisis de la muestra, pipetear 1 ml de vino a un matraz aforado de 10 ml y

aadir las mismas cantidades de los reactivos anteriormente citados. Esperar al
menos 10 minutos para que se desarrolle el color completamente y por ltimo, medir
la absorbancia en el espectrofotmetro a una longitud de onda de onda de 510 nm.
Realizar este procedimiento por tres veces y reportar la concentracin de hierro en
vino.

Resultados
1. Obtencin de la Recta de calibrado
Matraz n

g/mL de Fe(II)

mL de Fe(II)

A (510 nm)

1.

0.05

0.187

2.

0.1

0.401

.0.15

..613

0.2

.813

0.25

.995

2. Lmite de Deteccin
Valor Promedio 10 Desviacin Standard
del Blanco
Lecturas Blanco

Pendiente
Curva Calibracin

-0.00014

0.2019

0.000489898

Lmite
de
Deteccin
0.007279

3. Medida de la Muestra

Rplicas
1
2
4

A (510 nm)
0.102
0.094
0.097
0.103

Reporte:
a) Ttulo y objetivos de la prctica
b) Breve introduccin
c) Resultados y discusin
d) Conclusiones
e) Investigar sobre la presencia de hierro en el vino blanco