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INDICE

1.
2.
3.
4.
5.

Introduccin
Generalidades de los Lpidos: Clasificacin
cidos grasos
Triglicridos
Metabolismo de lpidos
5.1. Sntesis de los cidos grasos
5.2. Formacin de triacilglicridos
5.3. Oxidacin de los cidos grasos
6. Colesterol
7. Lipoprotenas
7.1. Quilomicrones
7.2. VLDL
7.3. LDL
7.4. HDL
8. Determinacin del Perfil Lipdico
8.1. Condiciones preanalticas
8.2. Determinacin de Triglicridos
8.3. Determinacin de Colesterol Total
8.4. Determinacin de Colesterol HDL(directo)
8.5. Determinacin de Colesterol HDL (Reactivo precipitante)
8.6. Determinacin de Colesterol LDL (directo)
8.7. Determinacin de LDL-colesterol de forma indirecta
8.8. Determinacin de VLDL-Co de forma indirecta
9. Calculo del ndice de Aterogenicidad de Castelli
10. Determinacin de Lpidos Totales
11. Valores referenciales del perfil Lipdico
12. Trastornos lipdicos
13. Caso clnico

PERFIL LIPIDICO
1. Introduccin
El perfil lipdico lo constituye la cuantificacin analtica de una serie de lpidos que son
transportados en la sangre por los diferentes tipos de lipoprotenas plasmticas.
La determinacin de estos parmetros es un procedimiento analtico bsico para el
diagnstico y seguimiento de enfermedades metablicas, primarias o secundarias.
Entre estos parmetros analticos que se pueden determinar estn:

Triglicridos
Colesterol total
colesterol transportado por las LDL

Perfil Lipdico- Qumica Sangunea Pgina 1

Colesterol transportado por las HDL


Colesterol transportado por las VLDL
Lpidos totales

Altos niveles de colesterol se asocian a riesgo de padecer


cardiovasculares, en especial aquel unido a las LDL (colesterol malo).

enfermedades

El colesterol de las HDL (colesterol bueno), puesto que representa aquella fraccin de
colesterol que se transporta al hgado para su metabolizacin y excrecin por va biliar, no
se asocia con riesgo de enfermedad.
2. Generalidades de los Lpidos
Los lpidos constituyen un grupo complejo y diverso de molculas que tienen en comn el
ser insolubles en agua, por lo cual necesitan de un sistema de transporte denominadas
lipoprotenas. Los lpidos ms importantes que se encuentran en el plasma tenemos:

cidos grasos libres


Fosfolpidos
Triglicridos
Colesterol

Entre las variadas funciones de los lpidos destacan las siguientes:


Funcin de reserva, son la principal reserva energtica del organismo. Un gramo
de grasa produce 9,4kcal, mientras que los glcidos y protenas producen cerca de
4,1kcal/g
Funcin estructural, forman las bicapas lipdicas de las membranas
citoplasmticas y de las membranas de los orgnulos celulares. Cumplen esta
funcin los Fosfolpidos, glucolpidos, el colesterol, etc.
Funcin biocatalizadora, cumplen esta funcin las vitaminas lipdicas, hormonas
esteroideas y las prostaglandinas.
Funcin transportadora, el transporte de lpidos desde el intestino hasta su lugar
de utilizacin o hasta el tejido adiposo, son gracias a las lipoprotenas plasmticas.

a. Clasificacin
Lpidos Simples
cidos grasos libres
Triglicridos
Colesterol
Lpidos Compuestos
Lipoprotenas
Fosfolpidos

3. cidos grasos

Perfil Lipdico- Qumica Sangunea Pgina 2

Estn presentes en el organismo en pequea proporcin, son los nicos lpidos que
circulan por el plasma sin estar unido a una lipoprotena.
Son cidos de cadenas largas, pueden ser saturados e insaturados.
Estos cidos grasos tienen como principal funcin la de servir de fuente inmediata de
energa. Para ello, los cidos grasos son degradados, en la matriz mitocondrial, para
obtener energa mediante un proceso llamado B-oxidacin. O ser transformados en
triglicridos.
Valores normales en plasma oscilan entre 10 -20mg/dl.
4. Triglicridos
Son compuestos formados por la esterificacin de la glicerina con tres cidos grasos, son
el principal tipo de grasa transportado por el organismo.
Los triglicridos presentes en el organismo, pueden tener un doble origen:

La absorcin intestinal de las grasas digeridas (origen exgeno)


La sntesis en el hgado (origen endgeno).

La sntesis endgena de estos ltimos, a su vez puede llegarse a cabo mediante dos
mecanismos fundamentales:

Directamente, a partir de los cidos grasos disponibles.


A partir del Glicerol 3P (que puede provenir de la gluclisis) y acetil-CoA.

La mayor parte de los lpidos que se ingieren en la alimentacin son triglicridos, en la luz
intestinal se hidroliza por la accin de la enzima lipasa y se absorben en la mucosa
intestinal, son reformados en triglicridos y son incorporados en las lipoprotenas, son
transportados al torrente circulatorio para su distribucin a la mayora de los tejidos donde
se utilizan como energa o se almacenan en el tejido adiposo.

Los triglicridos endgenos procedentes del hgado son la fuente principal de triglicridos
plasmticos o tambin se sintetizan a partir de los cidos grasos liberados por el hgado o
por el Acetil-CoA derivado del metabolismo de los glcidos.
5. Metabolismo de lpidos
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La mayor parte de los lpidos que se ingieren en la alimentacin son triglicridos. En el


tubo digestivo, los enlaces tipo ster de los cidos grasos de los triglicridos, se rompen
por accin de las lipasas, especialmente la lipasa pancretica, dando origen a cidos
grasos y glicerol, pasan a sangre y pueden ser utilizados como fuente de energa o ser
almacenados en forma de triglicridos.

a. Sntesis de los cidos grasos:


La Lipognesis es la reaccin bioqumica por la cual son sintetizados los cidos grasos y
unidos al glicerol forman triglicridos o grasas de reserva.
El hgado, el tejido adiposo y la glndula mamaria son los tres sitios principales donde se
lleva a cabo la biosntesis de los cidos grasos y los triglicridos.
La sntesis de cidos grasos se lleva a cabo en el citosol de las clulas y el producto
activo para la sntesis es el acetil CoA proveniente de la gluclisis.
Dado que la acetil-CoA se genera en la matriz mitocondrial, debe de transportarse hasta
el citosol para su uso en la sntesis de cidos grasos.
La acetil-CoA no puede atravesar la membrana mitocondrial interna, por lo que la acetilCoA por lo que se condensa con el oxalacetato para formar citrato y difunde hacia el
citosol.
La acetil-CoA sufre una carboxilacin irreversible catalizada por la acetilCoA carboxilasa,
para formar malonil-CoA. La reaccin de carboxilacin del acetil CoA a malonil CoA, es lo
que regula la velocidad de la sntesis de los cidos grasos.
La unin de un malonil-CoA (3C) a un acetil-CoA (2C) origina una molcula de cuatro
carbonos, y sale una de CO2. Despus se producen dos hidrogenaciones mediantes
gasto de NADPH.
Se obtienen as un acido graso activado, acilo-CoA de cuatro carbonos. Todo este proceso
est catalizado por un conjunto de enzimas, denominadas complejo cido graso sintetasa
(SAG).

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b. Formacin de triacilglicridos
La sntesis de estas molculas lipdicas requiere las formas activadas de sus
componentes:

Glicerol-3-fosfato (se obtiene a partir de la dihidroxiacetona-3-fosfato que


se forma durante la gluclisis).
Acil-CoA (obtenido a partir del acido graso sintetizado)

Las molculas de acido graso van unindose mediante enlace tipo ster formando
primero un monoacilglicrido, luego un diacilglicrido y finalmente triacilglicridos. Esto
tiene lugar en las clulas hepticas y del tejido adiposo.

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c. Oxidacin de los cidos grasos


El principal mecanismo de obtencin de energa de los lpidos lo constituye la llamada
Beta-oxidacin de los cidos grasos, que se obtienen de los triglicridos mediante
hidrlisis catalizadas por lipasas especficas.

1. Los cidos grasos se unirn a una molcula de coenzima A (CoA) en el


citoplasma, quedando activados como acil-CoA.
2. El acil-CoA penetra en la mitocondria gracias a un transportador especial, la
carnicitina.
3. El acil-CoA sufre la primera oxidacin del carbono , formndose un acil-CoA
insaturado con doble enlace.
4. El acil-CoA se hidrata con lo que se forma un - hidroxiacil-CoA, sin doble
enlace.
5. El -hidroxiacil-CoA sufre la oxidacin del carbono , formndose un -cetoacilCoA.
6. El -cetoacil-CoA interacciona con una molcula de CoA, con lo que se rompe
en dos molculas, un acetil-CoA de dos carbonos y un acil-CoA que posee dos
carbonos menos que el que inicio el ciclo de la -oxidacin.

La acil-CoA puede iniciar otro ciclo y originar otro acil-CoA de dos carbonos menos, y as
sucesivamente hasta que se obtenga un acil-CoA de slo dos carbonos, es decir, un
acetil-CoA. Las molculas de acetil-CoA formadas en los ciclos de Beta-oxidacin pueden
seguir la ruta catablica del ciclo de Krebs y degradarse totalmente por respiracin.
6. Colesterol

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El colesterol es un esterol de 27 carbono, el cuerpo humano posee 2gramo/kg peso, esta


cantidad esta en intercambio constante con el colesterol plasmtico.
Las funciones principales del colesterol circulante son:

Componente estructural esencial de las membranas.


precursor de los cidos biliares primarios, hormonas esteroideas y precursor de
la vitamina D3 (colecalciferol) D2 (orgocalciferol).

El colesterol presente en el organismo tiene un doble origen.

Colesterol exgeno, el que procede de la alimentacin, se encuentra en su


mayor parte en forma libre.
Colesterol endgeno, aunque puede ser
sintetizado por todas las clulas, se forma
principalmente a nivel heptico e intestinal y
es eliminado por el hgado con la bilis o se
utiliza para la sntesis de cidos biliares.

La sntesis del colesterol se produce a partir de su


precursor el acetato en su forma activada (acetil-CoA),
en una va compleja con dos etapas:

Primera etapa: formacin del isopreno es la


unidad bsica del colesterol se forma el 3
hidroxi-3 metilglutaril CoA por medio de una
enzima HMGcoA reductasa formndose
mevalonato.
Segunda etapa: la condensacin progresiva
del isopreno para formar un compuesto de
30 carbonos que se cicla hasta obtener el colesterol en esta parte interviene
el sistema citocromo P450.
Muchas veces el colesterol se esterifica con un AG dando lugar a steres de
colesterol.

El colesterol se transporta en el plasma predominante como steres del colesterol


asociados a las lipoprotenas.

Las LDL transportan el 70% del colesterol.


Las HDL del 15 al 20%
El resto circula unido a las VLDL y a los Quilomicrones

El mecanismo ms importante para degradar y eliminar colesterol es la sntesis de cidos


biliares las cuales son secretadas en la bilis hacia el intestino para desecharse por heces
fecales

7. Lipoprotenas
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Son complejos macromolculas formados por, triglicridos, colesterol, Fosfolpidos,


constituyen un sistema de transporte.
Se pueden clasificar tomando en cuenta su: densidad, migracin electrofortica, contenido
de triglicridos, colesterol y flotacin.

Quilomicrones
Lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL)
Lipoprotenas de baja densidad (LDL)
Lipoprotenas de alta densidad (HDL)
a. Quilomicrones

Son molculas grandes, aparecen en el plasma tras la ingestin de grasas, y son


sintetizadas en las clulas intestinales. Son rico en triglicridos, su vida media en sangre
es muy corta (menos de 30minutos) y su principal funcin es el transporte de los lpidos
exgenos, sobre todo de triglicridos.
b. VLDL
Son lipoprotenas de muy baja densidad, son sintetizadas en el hgado y tambin en el
intestino, a partir de los lpidos exgenos y endgenos.
Su funcin es la de transportar los triglicridos endgenos.
c. LDL
Las lipoprotenas de baja densidad se originan como consecuencia de la degradacin de
las VLDL en el torrente circulatorio. Su funcin esencial es la de transportar el 80% del
colesterol circulante hacia las clulas de los tejidos para su utilizacin. Este es el
colesterol que, en exceso, puede quedar adherido a las paredes de los vasos sanguneos
por lo que es recomendable mantener bajos los niveles del colesterol LDL.
d. HDL
Es la lipoprotena de alta densidad, tiene una densidad, esto se debe a su alto contenido
de protenas (52% protenas y 48% lpidos).
Lipoprotenas de alta densidad o HDL recoge el colesterol sobrante de los tejidos y lo
traslada hasta el hgado, donde ser eliminado. Por tanto, cuanto mayor sean los niveles
del colesterol HDL, mayor cantidad de colesterol ser eliminado de la sangre.

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8. Determinacin del Perfil Lipdico


La determinacin de las concentraciones de lpidos, lipoprotenas y protenas
relacionadas circulantes permite el diagnstico, el tratamiento y el seguimiento de las
diferentes dislipemias.

Triglicridos
Colesterol total
colesterol transportado por las LDL
Colesterol transportado por las HDL
Colesterol transportado por las VLDL
Lpidos totales

a. Condiciones preanalticas
Es necesario estandarizar todas las circunstancias que rodean al anlisis para evitar
todos los posibles factores que influyen en los niveles de lpidos y lipoprotenas:

No se deben realizar estudios en pacientes que estn enfermos, tienen


infecciones, embarazadas o han tenido infarto de miocardio, procesos
quirrgicos dentro de los dos meses previos al estudio.
El paciente debe mantener su dieta habitual y el peso por lo menos 2
semanas antes de la extraccin.
El paciente no debe realizar ejercicios vigorosos durante 24 hs antes de la
extraccin.
Observar estrictamente las 12 horas de ayuno.
El paciente debe permanecer sentado durante 5 min.
Preferiblemente realizar la determinacin en suero.
Colesterol total y Colesterol HDL deben analizarse lo antes posible.

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b. Determinacin de Triglicridos

Fundamento del Mtodo: Enzimtico colorimtrico


Los triglicridos son hidrolizados por las lipoproten lipasa, liberando glicerol y
cidos grasos.
El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato deshidrogenasa y ATP en presencia de
glicerol quinasa para producir glicerol-3-fosfato y ADP.
El G3P es convertido a dihidroxiacetona fosfato (DAP) y H 2O2 por la glicerolfosfato
deshidrogenasa (GOD).
Al final el H2O2 reacciona en presencia de la peroxidasa con 4-aminoantipirina y pclorofenol para dar origen a un compuesto coloreado de color cereza (Quinona)
capaz de absorber a 505nm.
La intensidad de color formado es proporcional a la concentracin de triglicridos
presente en la muestra.

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Muestra
Suero obtenido libre de
hemlisis
(para
evitar
resultados
falsamente
elevados)
Plasma
obtenido
con
EDTA o heparina.

El analito es estable durante 3


das entre 2 y 8C y 30 das a
- 10C. La sangre debe ser
cogida luego de ayunar de 12
a 14 horas.

c. Determinacin de Colesterol Total


Colesterol total es la suma de todas las fracciones (Co-HDL, Co-LDL, CoVLDL)
Fundamento del Mtodo: enzimtico colorimtrico
El colesterol presente en la muestra origina un compuesto coloreado que es capaz
de absorber a 505nm. Segn la siguiente reaccin:

La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de colesterol


presente en la muestra.
Muestra
Suero obtenido libre de hemlisis o plasma cogido con heparina. El Colesterol es
estable en el plasma o en lo suero por hasta 7 das entre 2 y 8C y hasta 5 das
entre 15 y 30C.

Procedimiento de Medida

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Valores referenciales
Hasta 200mg/dl

d. Determinacin de Colesterol HDL(directo)

Fundamento del Mtodo: Enzimtico Colorimtrico.

El HDL Directo permite una determinacin directa sin la necesidad de precipitacin


previa ni tratamiento de la muestra. Son utilizados reactivos que realizan la
dosificacin selectiva del colesterol conectado al HDL. Las superficies de las
lipoprotenas de baja densidad (LDL), muy baja densidad (VLDL) y de los
quilomicrones son estabilizados por la absorcin del polianin y no sufren la accin
de las enzimas modificadas presentes en el reactivo. El HDL, sin embargo, se
solubiliza por la accin de un detergente, permitiendo la accin enzimtica sobre el
colesterol conectado a l. De esta forma el colesterol-HDL presente en la muestra
origina un compuesto coloreado que es capaz de absorber a 550 nm.
La intensidad de la coloracin formada es proporcional a la concentracin de
colesterol HDL en la muestra.

Muestra

Suero obtenido libre de hemlisis, plasma cogido con heparina.


El Colesterol HDL es estable en el suero por hasta 7 das entre 2 y 8C.

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e.

Determinacin de Colesterol HDL (Reactivo precipitante)

Fundamento del Mtodo

Las lipoprotenas de alta densidad (HDL) se separan precipitando selectivamente


las lipoprotenas de baja y muy baja densidad (LDL y VLDL) presencia de
fosfotungstato y iones magnesio. Las HDL quedan en el sobrenadante separado
por centrifugacin, donde se realiza la determinacin del colesterol ligado a las
mismas, empleando el sistema enzimtico Colesterol oxidasa/Peroxidasa con
colorimetra segn Trinder (Fenol/4-AF). Cuyo colesterol se cuantifica
espectrofotomtricamente a 505nm.

Muestra: Suero o plasma

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f.

Determinacin de Colesterol LDL (directo)

Fundamento del Mtodo:

El presente mtodo es un ensayo homogneo sin precipitacin, en dos pasos. En


el primero, se agrega un tensioactivo (Reactivo 1) que solubiliza las partculas
lipoproteicas no-LDL. El colesterol liberado es consumido por el colesterol esterasa y el colesterol oxidasa en una reaccin sin desarrollo de color. Un segundo
tensioactivo (Reactivo 2) solubiliza las partculas de LDL formndose, por la
presencia de enzimas y un Reactivo cromognico, un color que es capaz de
absorber a 600nm (590-700nm).
La intensidad de la coloracin formada es proporcional a la concentracin de LDL
colesterol.

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Muestra : suero o plasma


Procedimiento de medida

g.

Determinacin de LDL-colesterol de forma indirecta

La determinacin de esta fraccin, tambin se puede calcular de forma indirecta


mediante la frmula de Friedewald, solo es aplicable si los triglicridos son
400mg/dl.

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h. Determinacin de VLDL-Co de forma indirecta


Para la determinacin de colesterol-VLDL, tambin se realiza indirectamente
mediante una frmula matemtica aplicable solo cuando la concentracin de
triglicridos sea 400mg/dl.
La primera frmula bsica para crear una
estimacin VLDL es la siguiente:

La segunda forma de calcular el nmero de VLDL es:

9. Calculo del ndice de Aterogenicidad de Castelli.


El cociente o ndice aterognico es la relacin
matemtica entre los niveles
de colesterol total en el organismo y colesterol HDL o lipoprotenas de alta densidad.
Valores normales de este ndice es menor a 4,5, mientras que a mayor ndice
aterognico mayores son las probabilidades de que se forme una placa de ateroma en
las arterias y de origen a aterosclerosis.

10. Determinacin de Lpidos Totales

Fundamento del Mtodo

Los lpidos insaturados reaccionan con el cido sulfrico en caliente con formacin
de iones carbonio. En una segunda etapa, stos, en presencia de fosfovainillina
dan una coloracin rosada. La intensidad del color formado es proporcional a la
concentracin de lpidos totales presente en la muestra.

Muestra

Suero o plasma.
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Estabilidad de la muestra: Los lpidos totales son estables 24 h a temperatura


ambiente (15-25C) o 3 das a 2-8C

Procedimiento de medida

11. Valores referenciales del perfil Lipdico


Valores referenciales
Triglicridos

hasta 150 mg/dl

Colesterol total

hasta 200mg/dl

HDL- Co

40 - 60 mg/dl

LDL- Co

hasta 130 mg/dl

VLDL-Co

2 - 30 mg/dl.

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Lpidos Totales:

450 800 mg/dl

ndice de Aterogenicidad

4,5

12. Trastornos lipdicos


Generalmente se denominan trastornos lipdicos a cualquier alteracin en los niveles
normales de los lpidos en sangre. De forma mayoritaria nos vamos a referir al
aumento de los niveles de Colesterol (Hipercolesterolemia) y de Triglicridos
(Hipertriglicidemia), aunque hay otras alteraciones a tener en cuenta como es la
disminucin del colesterol HDL. La bsqueda activa de pacientes con hiperlipemia
est justificada por su gran importancia como factor de riesgo de enfermedad
cardiovascular, ya que es, junto con la hipertensin y el tabaquismo uno de los
principales factores que predisponen a padecer una cardiopata coronaria.
La hiperlipemia es un estado bioqumico asintomtico, aunque puede haber sntomas
inespecficos como dolores abdominales, alteraciones hepticas. Si perdura en el
tiempo est asociado a la aterosclerosis y sus complicaciones.
La aterosclerosis es un trastorno comn que ocurre cuando en la capa ntima de las
arteriolas y arterias se acumulan grasa, colesterol y otras sustancias Estos depsitos
forman estructuras duras llamadas de placas de ateroma, que con el tiempo van a
producir ateroesclerosis, es decir, un estrechamiento o endurecimiento de las arterias
por depsito de colesterol en sus paredes.
Como precaucin se realiza un estudio lipdico a personas con antecedentes familiares:

Enfermedades cardiovasculares

Diabetes mellitus

Presencia de xantomas o turbidez en suero.

Los niveles plasmticos de lpidos estn alterados transitoriamente en: embarazo, ciruga,
traumatismo, infecciones, stress, adelgazamiento rpido y por consumo de frmacos.

13. Caso clnico


Paciente de 37 aos, mujer, no fuma, no es diabtica, es hipertensa conocida desde
10 aos que trata con enalapril 20 + hidroclorotiazida 12.5 1 comp/da desde hace 4
aos, sus antecedentes familiares relata que su madre muri de infarto de miocardio.
Acude a consulta y tras expresar sus quejas y molestias habituales, recoge sus
anlisis semestrales.

Examen fsico:

Perfil Lipdico- Qumica Sangunea Pgina 18

Peso=64; talla=1.53. IMC=29.73, Permetro de cintura=88 cm


Anlisis de laboratorio:
Glucemia basal: 87 mg/dl
Colesterol total: 293 mg/dl
Triglicridos: 281 mg/dl
Co-LDL: 205 mg/dl
Co-HDL: 30 mg/dl

Existe probabilidad
cardiovascular?

de

que

esta

paciente

padezca

de

enfermedad

Respuesta: 9,77% la paciente presenta un riesgo alto de padecer enfermedad


cardiovascular. Debera reforzar su dieta, recibir tratamiento farmacolgico y
control cada dos meses del perfil lipdico.

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