Practica n 1: mtodos fsicos qumicos de anlisis en

bioqumica. Electrometra
OBJETIVOS:
Determinar el ph de una sustancia
Saber que significa ser acido y bsico(alcalino)
DATOS DEL pH metro

pHmetro de laboratorio.

El pH-metro es un sensor utilizado en el mtodo electroqumico

para medir el pH de una disolucin.
La determinacin de pH consiste en medir el potencial que se desarrolla a travs de una
fina membrana de vidrio que separa dossoluciones con diferente concentracin
de protones. En consecuencia se conoce muy bien la sensibilidad y la selectividad de las
membranas de vidrio delante el pH.
Una celda para la medida de pH consiste en un par de electrodos, uno de calomel
(mercurio, cloruro de mercurio) y otro de vidrio, sumergidos en la disolucin de la que
queremos medir el pH.
La varita de soporte del electrodo es de vidrio comn y no es conductor, mientras que el
bulbo sensible, que es el extremo sensible del electrodo, est formado por un vidrio
polarizable (vidrio sensible de pH).
Se llena el bulbo con la solucin de cido clorhdrico 0.1M saturado con cloruro de plata.
El voltaje en el interior del bulbo es constante, porque se mantiene su pH constante (pH 7)
de manera que la diferencia de potencial solo depende del pH del medio externo.
El alambre que se sumerge al interior (normalmente Ag/AgCl) permite conducir este
potencial hasta un amplificador.
ndice
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1 Mantenimiento

2 Calibrado

3 Precauciones

4 Errores que afectan a las mediciones de pH con electrodo de vidrio

5 Acondicionamiento de la seal

Mantenimiento[editar]
El electrodo de vidrio es relativamente inmune a las interferencias del color, turbidez,
material coloidal, cloro libre, oxidante y reductor.
La medida se afecta cuando la superficie de la membrana de vidrio est sucia con grasa o
material orgnico insoluble en agua, que le impide hacer contacto con la muestra, por lo
tanto, se recomienda la limpieza escrupulosa de los electrodos.
Los electrodos tienen que ser enjuagados con agua destilada entre muestras. No se tienen
que secar con un trapo, porque se podran cargar electrostticamente. Luego se deben
colocar suavemente sobre un papel, sin pelusa, para quitar el exceso de agua.

Calibrado[editar]
Como los electrodos de vidrio de pH mesuran la concentracin de H+ relativa a sus
referencias, tienen que ser calibrados peridicamente para asegurar la precisin. Por eso
se utilizan buffers de calibraje (disoluciones reguladoras de pH conocido). que sirve para
leer sustancias

Precauciones[editar]

El electrodo debe mantenerse hmedo siempre para evitar daos al mismo.

Se recomienda que se guarde en una solucin de 4M KCl; o en un buffer de

solucin de pH 4 o 7.

No se debe guardar el electrodo en agua destilada, porque eso causara que

los iones resbalaran por el bulbo de vidrio y el electrodo se volvera intil; se calibra
mediante soluciones estandarizadas.

Errores que afectan a las mediciones de pH con

electrodo de vidrio[editar]

Error Alcalino: Los electrodos de vidrio ordinarios se vuelven sensibles a los

materiales alcalinos con valor de pH mayores a 9.

Error cido: El electrodo de vidrio tpico exhibe un error, de signo opuesto al error
alcalino, en soluciones de pH menor de aproximadamente 0,5. Como consecuencia,
las lecturas del pH tienden a ser demasiado elevadas en esta regin. La magnitud del
error depende de una variedad de factores y generalmente no es muy reproducible.
Las causas del error cido no se comprenden bien.

Deshidratacin: Resultados falsos.

Temperatura: La medicin de pH varia con la temperatura, esta variacin puede

compensarse

El pH-metro (Figura de la derecha) realiza la medida del pH por unmtodo

potenciomtrico. Este mtodo se basa en el hecho de que entre dos
disoluciones con distinta [H+] se establece una diferencia de potencial. Esta
diferencia de potencial determina que cuando las dos disoluciones se ponen en
contacto se produzca un flujo de H+, o en otras palabras, una corriente
elctrica. En la prctica, la medida del pH es relativa, ya que no se
determina directamente la concentracin de H +, sino que se compara el pH
de una muestra con el de una disolucin patrn de pH conocido.
Para ello se utiliza un electrodo de pH (ver tabla inferior). Cuando el
electrodo entra en contacto con la disolucin se establece un potencial a travs
de la membrana de vidrio que recubre el electrodo. Este potencial vara segn
el pH. Para determinar el valor del pH se necesita un electrodo de referencia,
cuyo potencial no vara. El electrodo de referencia puede ser externo o puede
estar integrado en el electrodo de pH (ver tabla inferior).
Electrodo de pH

Electrodo de referencia y medida del

pH

La diferencia de potencial (E) es proporcional a [H +], y viene definida por

la ecuacin de Nernst:
E medido = E referencia + (2,3 RT/NF) pH

donde E medido es el potencial (en voltios) detectado a travs de la membrana de

vidrio, E referencia es el potencial del electrodo de referencia, y (2,3 RT/NF) es
el factor de Nernst, que depende de la constante de los gases (R), la
constante de Faraday (F), la carga del in (N), que para el pH vale 1, y la
temperatura en grados Kelvin (T). El comportamiento del electrodo
depende de la temperatura. Por eso es importante que a la hora de calibrar el
pH-metro siempre esperemos a que las disoluciones patrn sacadas de la
nevera se pongan a
temperatura
ambiente (Figura de la
derecha).
Como a 25C el factor de
Nernst vale aproximadamente
0,06 y el potencial de
referencia se considera igual a
cero, la ecuacin de Nernst
queda reducida a:
E medido = -0,06 pH
Este mtodo ofrece numerosas ventajas respecto al mtodo colorimtrico:
es ms preciso, ya que permite apreciar diferencias de 0,005 unidades
de pH mientras que el mtodo colorimtrico slo aprecia diferencias de
0,1 unidades de pH
no se ve afectado por la coloracin que pueda presentar la muestra,
como ocurre con el mtodo colorimtrico

Los electrodos de pH

La medicin del pH es la conversin de la concentracin de iones hidronio en una tensin elctrica. A

finales del siglo XIX se realizaron experimentos utilizando placas de platino pulido y puentes de electrolito
(soluciones salinas) para poder realizarlo.
Como el electrolito se consume y los valores medidos se deben referir a una referencia para obtener valores
estables, se ha introducido el sistema de dos electrodos para esta finalidad.
En el electrodo de medicin se genera un potencial que es proporcional a la concentracin de iones de
hidrgeno (pH). El electrodo de referencia proporciona la referencia de potencial del sistema. El pH se traduce
en una diferencia de potencial o tensin elctrica entre el electrodo de medicin y el electrodo de
referencia que puede ser interpretada por circuitos electrnicos para poder mostrar su valor. En el mbito del
progreso tcnico, se ha ideado mejorar el complicado manejo de los dos sensores (uso de laboratorio) mediante
la integracin de ambos canales de medicin en un electrodo individual, el llamado electrodo combinado.
Actualmente, se utilizan casi exclusivamente electrodos combinados de pH.

Electrodo de medicin:
El electrodo de vidrio posee las mejores caractersticas tcnicas de medicin posibles de todos los sensores que
existen.
Adems de su manejo sencillo, tambin ofrece la mayor precisin posible. Se puede aplicar universalmente y
es muy resistente a las influencias de la solucin tales como color, viscosidad y composicin qumica.
La pieza central de este electrodo de medicin es una membrana de vidrio muy delgada (membrana de pH)
fabricada con un vidrio selectivo del pH especial. Este vidrio tiene la capacidad de reaccionar con la
humedad o el agua de forma que se crea una finsima capa invisible que contiene agua sobre la superficie.
Este gel o capa se utiliza como barrera selectiva que, prcticamente, solo intercambia losiones H+ con la
solucin a medir. El intercambio de otros iones se bloquea.

CALIBRACION DEL PH-METRO

CALIBRACION DE PH-METRO

Calibrar un pH-metro permite asegurar la fiabilidad de este instrumento. El pH-metro (o medidor de Ph) es un
dispositivo electrnico que se compone de un electrodo de referencia, un electrodo de repuesta al pH y un
instrumento de medida de potencial. Cuando el dispositivo est sumergido en una sustancia acuosa, se genera
una corriente elctrica. Esta corriente elctrica depende de la concentracin de iones presentes en una solucin.
Comparando la diferencia de potencial entre el material de referencia y el electrodo bajo calibracin, podemos
medir el pH de la solucin. As, el pH metro permite medir, controlar y regular el valor de pH.

El valor del pH (potencial hidrogeno) est relacionada con la concentracin en iones hidronio [H3O+] presentes
en una disolucin. Segn la concentracin en iones de la solucin, podemos saber si la solucin es cida o
base.

MEDICION DE PH DE ALGUNAS SUSTANCIAS :

H2o: porque esta agua es ligeramente clorada y mantiene particulas de cloro. yo digo que es
porque se junta con el metal de las tuberas y eso.

Leche: El pH de la leche es ligeramente cido (pH comprendido entre 6,6 y 6,8) debido a la
cantidad de cido lctico, que suele ser de 0,15-0,16% de la leche.El acido lactico es un acido
debil, un cido es toda sustancia que en solucin acuosa libera protones o iones hidrgeno+ Si
dicho cido se disocia totalmente, es un cido fuerte; por el contrario, un cido dbil se disocia
parcialmente y en un momento dado, cuando la disociacin alcanza el equilibrio, coexisten
tanto el cido dbil como las especies ionizadas

Pisco
Cocacaola: Lo que "gasifica" una bebida es la introduccin en ella de CO2 a presin, que al
estar en disolucin forma la especie H2CO3, cido carbnico, que no existe realmente, porque
o bien est como CO2 disuelto que rpidamente vuelve a irse al aire (que es lo que pasa en
cuanto abres la lata, de eso son las burbujitas), o reacciona para dar HCO3(-) y H(+), siendo
esta ltima especie la responsable de la acidez (no es H(+) realmente, sino el in hidronio,
H3O(+), que se forma con el agua).

Orina: El mdico puede ordenar este examen para verificar si hay cambios en los niveles de
acidez en el cuerpo. Se puede realizar si usted:
Est en riesgo de presentar clculos renales. Se pueden formar diferentes tipos de clculos
dependiendo de cunta acidez tenga la orina.

Saliva:
En la saliva tenemos un mecanismo buffers que intenta mantener el PH entre el 7 y
7,4 pero como hemos podido comprobar este mecanismo en determinadas
circunstancias no lo consigue, principalmente por :
Ingesta desproporcionada de alimentos bebidas con PH cido
Higiene bucal deficiente, poco control de placa bacteriana , presencia de
policaries, enf. peridontal etc
Stress, con desequilibrio del sistema nervioso que provoca disminucin del flujo
salival.

 Medicacin que disminuye el flujo salival.

Tabaco
Combinacin de las anteriore

De cao

Acido clorhdrico: El cido clorhdrico, cido muritico, espritu de sal, cido

marino, cido de sal o todava ocasionalmente llamado, cido hidroclrico (por su
extraccin a partir de sal marina en Amrica), agua fuerte o salfumn (en Espaa), es
una disolucin acuosa del gas cloruro de hidrgeno (HCl). Es muy corrosivo y cido. Se
emplea comnmente como reactivo qumico y se trata de un cido fuerte que se disocia
completamente en disolucin acuosa. Una disolucin concentrada de cido clorhdrico
tiene unpH inferior a 1; una disolucin de HCl 0,1 M da un pH de 1 (Con 40 mL es
suficiente para matar a un ser humano, en un litro de agua. Al disminuir el pH provoca la
muerte de todo el microbioma gastrointestinal, adems de la destruccin de los tejidos
gastrointestinales).
A temperatura ambiente, el cloruro de hidrgeno es un gas ligeramente amarillo,
corrosivo, no inflamable, ms pesado que el aire, de olor fuertemente irritante. Cuando se
expone al aire, el cloruro de hidrgeno forma vapores corrosivos densos de color blanco.
El cloruro de hidrgeno puede ser liberado por volcanes.
El cloruro de hidrgeno tiene numerosos usos. Se usa, por ejemplo, para limpiar, tratar y
galvanizar metales, curtir cueros, y en la refinacin y manufactura de una amplia variedad
de productos. El cloruro de hidrgeno puede formarse durante la quema de muchos
plsticos. Cuando entra en contacto con el agua, forma cido clorhdrico. Tanto el cloruro
de hidrgeno como el cido clorhdrico son corrosivos.

Vinagre: contiene una concentracin que va de 3 % al 5 % de cido actico en agua.

CUESTIONARIO:
1. Cmo se determina el ph del acido actico 0,25 M?
2. ncuentra en el vinagre, siendo el principal responsable de su sabor y olor agrios.
Su frmula es CH3-COOH (C2H4O2). De acuerdo con la IUPAC se denomina
sistemticamente cido etanoico.

3.
4.

Frmula qumica; el grupo carboxilo, que le confiere la acidez, est en azul.

5. Es el segundo de los cidos carboxlicos, despus del cido frmico o metanoico,

que solo tiene un carbono, y antes del cido propanoico, que ya tiene una cadena
de tres carbonos.
6. El punto de fusin es 16,6 C y el punto de ebullicin es 117,9 C.
7. En disolucin acuosa, el cido actico puede perder el protn del grupo
carboxilo para dar subase conjugada, el acetato. Su pKa es de 4,8 a 25 C, lo cual
significa, que al pH moderadamente cido de 4,8, la mitad de sus molculas se
habrn desprendido del protn. Esto hace que sea un cido dbil y que, en
concentraciones adecuadas, pueda formardisoluciones tampn con su base
conjugada. La constante de disociacin a 20 C es Ka = 1,75105.

tico. Ka(CH3COOH)=1.8x10-5

Calcule el pH de la solucin 0,1M de cido actico (Ka = 1,8x10-5)

[H+] = /1.8*10^-5 * 0.1 = 1.34*10^-3 M
Luego, el pH
pH = - log [H+] = - log 1.34*10^-3
pH = 2.87

a) A igualdad de concentracin con el actico (ambos son 0.25 M) el HCl

producir ms iones H+, pues es un cido fuerte, que en disolucin se disocia
totalmente, a diferencia del actico, que es cido debil.
b) HCl 0.25 M: HCl ---> Cl- + H+
. . . . . .Inicial: 0.25 . . .--- . . --. . . . . . .Final: --- . . . 0.25 . 0.25
[H+] = 0.25 mol/L ---> pH = - log [H+] = - log 0.25 = 0.6
Actico 0.25 M: HAc ---> Ac- + H+
. . . . . . . Inicial: 0.25 . . . --- . . --. . . . . . Final: 0.25(1-a). 0.25a 0.25a

Ka(HAc) = 1.8*10^(-5) lo que significa que, en el equilibrio de disociacin, se

cumple: [Ac-]*[H+]/[HAc] = 1.8*10^(-5)
Sustituyendo: 1.8*10^(-5) = [(0.25*a)*(0.25*a)] / [0.25*(1 - a)]
Y despreciando 'a' frente a '1', es decir, tomando 1 - a = 1:
1.8*10^(-5) = 0.25*(a^2) ---> a = raz[1.8*10^(-5) / 0.25] = 8.5*10^(-3)
Ahora: [H+] = 0.25*a = 0.25 * 8.5*10(-3) = 2.13*10(-3) ---> pH = - log [2.12*10(3)] = 2.67
Como alternativa, se puede calcular empleando el valor "pK" (pKa = -log Ka),
llegndose a la expresin terica:
pH = (1/2)*pKa - (1/2)*log c , siendo "c" la concentracin inicial del cido, en
mol/L.
En este caso, para el actico, pKa = 4.74 , c = 0.25 mol/L, con lo que
pH = (1/2) * 4.74 - (1/2)*log 0.25 = 2.37 + 0.30 = 2.67 ... obviamente, igual
resultado que antes.
c) Relacin entre pH y [H+]: pH = -log ^H+] o bien [H+] = 10^(-pH)
En este caso: [H+] = 10^(-2.67) = 2.14*10^(-3) mol/L . . . concentracin a
conseguir
Concentracin de partida: 0.25 M
Por ley de dilucin: V1 * M1 = V2 * M2
0.150 * 0.25 = V2 * 2.14*10^(-3) ---> V2 = 17.52 L
Hay que diluir los 150 mL (= 0.150 L) hasta 17.52 L. Por tanto, suponiendo
aditivos los volmenes, habr que aadir
17.52 - 0.15 = 17.37 L de agua.

8. Desarrolle la ecuacin de hederse harselbelt

ECUACIN DE HENDERSONHASSELBALCH

El pH de una mezcla amortiguadora se puede conocer mediante la ecuacin de Henderson-Hasselbalch.

En la disociacin del cido actico:

la constante de equilbrio es:

Si tomamos logaritmos:

Y cambiando de signos:

o lo que es lo mismo:

y reordenando,

que es la frmula conocida como la ecuacin de Henderson-Hasselbalch.

Teniendo en cuenta que el cido actico es muy dbil y, por tanto, el equilibrio de disociacin est casi
totalmente desplazado hacia la izquierda (desplazamiento favorecido por la presencia de cantidades notables
de acetato) podremos sustituir en la ecuacin de Henderson-Hasselbalch, sin introducir errores, la
concentracin de actico libre por la de actico total ([AcH]=[cido]).
Anlogamente, como el acetato sdico est completamente disociado podemos considerar que la
concentracin del in acetato coincide con la concentracin de sal ([Ac-]=[sal]).

9. Determine el ph de 5 muestras de leche

10. -leche en polvo (anchor) : 6.53 PH
11. Leche de cabra 6,3 a 6,8.
12. LECHE MATERNA 7
13. VACA PURA : 6, 4
14.
-leche pura : 6.53 PH
-leche pura vida: 6.24 PH
-leche Gloria: 6.13 PH
-leche cremoso Ideal : 6.14 PH
-Gaseosa fanta: 2.30 PH
-coca-cola: 1.92 PH
-energina : 3.81 PH
-guarana :2.26 PH
- KR : 2.45 PH
15.Determine el ph de 5 muestras de gaseosa