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Determinacin de la resistividad hosmotica de los eritrocitos

1. Liquido sanguneo
La sangre se encuentra en el interior de los vasos sanguneos y del corazn, y circula por todo el
organismo impulsada por las contracciones del corazn y por los movimientos corporales. Es
considerada por numerosos autores como un tipo especializado de tejido conectivo compuesto
de clulas, fragmentos celulares y una matriz extracelular lquida denominada plasma
sanguneo.1Normalmente la sangre oxigenada presenta un color rojo claro, mientras la cargada
con anhdrido carbnico es rojo bord2.
Conocer una de los principales lquidos del cuerpo humano es complejo, pero por ahora
entenderemos la importancia que juega los eritrocitos en la sangre a nuestro servicio, la sangre
est formada por plasma que es la parte liquida y constituye ms de la mitad del volumen de toda
la sangre con elementos formes y la parte celular, que constituye algo menos de la mitad 2.
El plasma sanguneo es la parte lquida que queda despus de sedimentar los elementos formes
de la sangre no coagulada; contiene en solucin una gran cantidad de protenas cuya
concentracin oscila entre 5 y 8 g/dl, segn la edad del individuo. Hay diferentes tipos de
protenas en el plasma, cada una de ellas tiene una funcin especfica, pero todas comparten
una serie de funciones generales3:
a) Mantenimiento de la presin onctica de la sangre.
b) Transporte de macromolculas biolgicas
c) Contribucin al equilibrio electroltico
d) Tomar parte en el sistema de taponamiento de la sangre con 15 mmol/l de protones
e) Intervenir en el recambio de protenas tisulares 3.
Tipos de clulas sanguneas
Las clulas son de dos tipos principales: La masa principal del componente celular hemtico est
formada por los glbulos rojos denominados eritrocitos (hematies) y leucocitos (glbulos
blancos). 4
Los eritrocitos no tienen ncleo, cuando entran en el torrente sanguneo. Esta forma especial de
los glbulos rojos es la ms favorable para su funcin principal, es decir, para el transporte de
gases y de proporcionar a la sangre su color rojo. Hay entre cuatro y medio y cinco millones de
critrocitos por milmetro cbico de sangre5. El pigmento rojizo de la sangre se llama hemoglobina
y se puede unir muy fcilmente al oxgeno y, casi con la misma facilidad, puede ceder los
oxgenos. Es mediante este mtodo como se transporta el oxgeno por el cuerpo, tomndolo del
aire de los pulmones para liberarlo en los tejidos all donde sea necesario. 4
Vida de los eritrocitos
Los eritrocitos viven slo de tres a cuatro meses en el torrente sanguneo antes de ser
destruidos. Se producen principalmente, en la mdula sea roja, que contiene tejidos
critropoytico. En el adulto, la mdula sea roja se encuentra confinada en los huesos planos (p.
ej. la pelvis y la escapula) y en los extremos de los huesos largos. En la infancia, la mayora de
los huesos contienen mdula sea roja, pero su cantidad va disminuyendo en la edad adulta. 5

Causas de muerte de los eritrocitos


Las causas del envejecimiento de los eritrocitos son el descenso de la actividad enzimtica y del
metabolismo celular, as como la prdida de diversas funciones y de la flexibilidad de la
membrana celular. En el sistema retculo endotelial, los glbulos viejos entran en estrecho
contacto con clulas reticulares fagocitarias activas, as como con macrfagos y son fagocitados
o bien in toto, o bien tras su fragmentacin.5
Los eritrocitos, anucleados, tienen un metabolismo especializado que se aparta del usual en las
clulas que poseen ncleo. En tanto que las fases previas eritrocitarias, poseedoras de ncleo,
y los reticulocitos disponen todava de enzimas para el metabolismo oxidativo y para la sntesis
de protenas, en los glbulos maduros lo que se produce es una degradacin glucoltica de la
glucosa5.
Los glbulos rojos lisados (rotos) son retirados de la circulacin y destruidos por los macrfagos
fijos del bazo e hgado, y los desechos producidos son reciclados de la siguiente manera:
1. Los macrfagos del bazo, hgado y mdula sea roja fagocitan glbulos rojos lisados y
desgastados.
2. Las porciones de globina y del hierro de separan.
3. La globina se degrada a aminocidos, los cuales pueden ser reutilizados para sintetizar otras
protenas.
4. El hierro se elimina de la porcin hemo de la forma Fe3+, la cual se asocia con la protenas
plasmtica transferrina, un transportador intravascular de Fe3+.
5. En las fibras musculares, clulas hepticas y macrfagos del bazo e hgado, el Fe3+ se libera
de la transferrina y se asocia con una protena de depsito de hierro llamada ferritina.
6. Por la liberacin desde algn sitio de depsito, o la absorcin desde el tracto gastrointestinal,
el Fe vuelve a combinar con la transferrina.
7. El complejo Fe3+-transferrina es entonces transportado hacia la mdula sea roja, donde las
clulas precursoras de los glbulos rojos lo captan por endocitocits mediada por receptores para
su uso en la sntesis de hemoglobina. El hierro es necesario para la porcin hemo de la molcula
de hemoglobina, y los aminocidos son necesarios para la porcin globnica. La vitamina B12
tambin es necesaria para la sntesis de hemoglobina.
8. La eritropoyesis en la mdula sea roja induce la produccin de glbulos rojos, los cuales
entran a la circulacin.
9. Cuando el hierro es eliminado del hemo, la porcin no frrica del hemo se convierte en
biliverdina, un pigmento verdoso, y despus en bilirrubina, un pigmento amarillo-anaranjado.
10. La bilirrubina entra a la sangre y es transportada hacia el hgado.
La glucolisis, inclusive del ciclo pentosa fosfato, es la nica fuente de energa de los eritrocitos.
Los eritrocitos poseen, como peculiaridad, una va lateral para la glucolisis, el llamado ciclo 2,3
difosfoglicerato, a travs del cual cursa la parte principal de la degradacin de la glucosa. El
agente reductor NADH2 y el NADPH2, que se producen en la glucolisis o en el ciclo pentosa

fosfato, protegen a los grupos SH(sensibles a la oxidacin) de los enzimas, de la hemoglobina


y de la membrana de los eritrocitos5.
Tipos de clulas nucleadas en la sangre
Los leucocitos se diferencias de los eritrocitos por tener ncleo, poseer mayor tamao y ser
menos numerosos. Funciones importantes: Defensa y proteccin del organismo. La disminucin
del nmero de estas clulas en la sangre (leucopenia), se hace presente principalmente en
enfermedades vricas como la peste porcina. Los leucocitos son ricos en enzimas, por lo cual
pueden destruir tejidos6.
Neutrfilos: granulocitos, Polimorfos nucleares Son las clulas ms abundantes. En condiciones
normales, existen en un porcentaje del 55% al 60% del total de leucocitos; es decir, que hay de
3000 a 6000 neutrfilos por mililitro de sangre. Los neutrfilos miden aproximadamente de 1 2 a 1
5 micrmetros de dimetro. Los neutrfilos son los leucocitos que primero llegan a los lugares
donde existe invasin bacteriana, emiten pseudpodos y fagocitan a la bacteria para destruirla
mediante las sustancias que contienen en su interior los grnulos especficos e inespecficos 7.
Eosinfilos: Existen en una proporcin del 1 % al 3-4% del nmero total de glbulos blancos.
Miden aproximadamente entre 1 0 a 1 2 micrmetros de dimetro. Sus ncleos son bilobulados,
dos lbulos unidos por un pequeo puente de cromatina. Se encargan de limpiar las clulas de
bacterias y neutrfilos muertos y se cree que combaten los efectos de la histamina y otros
mediadores de la inflamacin. Son abundantes en la secrecin nasal y en el esputo de personas
que sufren de asma producida por reacciones alrgicas y disminuyen cuando en la sangre, se
elevan las concentraciones de corticoesteroides 7.
Basfilos Son los leucocitos menos numerosos; constituyen el 0. 5% al 1 % del total de glbulos
blancos. Miden de 1 0 a 1 2 micrmetros de dimetro. El ncleo de los basfilos tambin es
lobulado, puede ser trilobulado o tener la forma de una S. La funcin de los basfilos es
coincidente con 10 las funciones de los mastocitos o clulas cebadas, esta similitud an no est
lo suficientemente aclarada. Las funciones de los basfilos son semejantes a las funciones de las
clulas cebadas o mastocitos. Ambas clulas derivan de un tronco comn localizado en la
mdula sea7.
Linfocitos Son clulas pequeas, miden aproximadamente de 7 a 9 micrmetros de dimetro.
Constituyen del 20 % al 30 % del total de los glbulos blancos. Poseen un ncleo voluminoso
esfrico que ocupa casi todo el citoplasma y, este se sita alrededor del ncleo en forma de
anillo. Las funciones de los basfilos son semejantes a las funciones de las clulas cebadas o
mastocitos. Ambas clulas derivan de un tronco comn localizado en la mdula sea 7.
Monocitos Son los leucocitos ms grandes de la sangre: pueden medir de 1 5 a 22 micrmetros
de dimetro. Existen en un porcentaje del 2% al 8%. El ncleo es voluminoso, de forma
arrionada y con ciertas escotaduras Cuando abandonan la circulacin sangunea, se
transforman en los macrfagos, clulas que ejercen su accin en el tejido intersticial 7.
Plaquetas No se consideran clulas estrictamente hablando, pues son el producto del
fraccionamiento de los megacariocitos, clulas que se desarrollan en la mdula sea, junto con
los eritrocitos y leucocitos Las plaquetas son pequeas porciones del citoplasma de los
megacariocitos que se fragmentan al atravesar los capilares sanguneos de la mdula
hematopoytica. Las plaquetas desempean un papel bsico en la coagulacin sangunea 7.

Resistencia osmtica
La resistividad osmtica es la susceptibilidad de los eritrocitos a la hemlisis cuando se exponen
crecientemente a una solucin salina hipotnica. El agua penetra en el interior del eritrocito que
se hincha, hasta que la capacidad de la membrana celular se sobrepasa y estalla. Esta prueba se
utiliza en el diagnstico de anemia hemoltica 9.
Deformaciones osmticas en los eritrocitos
Para el correcto mantenimiento de la forma globular normal se requiere una pequea
sobrepresin osmtica (turgencia en el interior de los eritrocitos. Por este motivo, la
concentracin osmtica de las partculas disueltas, es decir, de las protenas y de las
substancias de bajo peso molecular, debe ser en los eritrocitos algo ms elevada que en el
plasma circundante. El control de esta circunstancia se lleva a cabo mediante las bombas
inicas activas para Na y K en la membrana eritrocitaria. La inhibicin del transporte activo de
iones da lugar a un equilibrio de concentracin de los iones pequeos y, debido a la elevada
concentracin proteica en el interior celular, a una fuerte sobrepresin osmtica. El agua
penetra en los glbulos y stos se hinchan hasta que estalla su membrana. Esta forma de
destruccin globular, en la que la hemoglobina queda libre en el plasma, se denomina
hemolisis8.
Soluciones para medir resistividad en eritrocitos
Al introducir los eritrocitos en una solucin hipotnica se produce, asimismo, una penetracin
de agua en los glbulos. En este caso, si la cada osmtica no es muy grande, el incremento de
volumen da lugar nicamente a una deformacin debida al consiguiente hinchamiento. Si el
descenso osmtico es ms intenso, se produce hemolisis. La llamada resistencia osmtica de los
eritrocitos es una medida de la presin osmtica a la que se presenta hemolisis 8.
Bajo determinadas circunstancias, ciertas soluciones isotnicas pueden tambin provocar
hemolisis osmtica cuando las substancias disueltas son capaces de atravesar fcilmente la
membrana de los eritrocitos. Por ejemplo, si se suspenden eritrocitos en una solucin isotnica
de urea, las molculas de urea difunden al interior de los eritrocitos. Se suma as su presin
osmtica a la ya existente en los eritrocitos, lo que provoca por ltimo la penetracin osmtica de
agua8.
En solucin hipertnica, sale agua del interior de los glbulos al exterior, producindose un
arrugamiento de los glbulos que ocasiona en ellos un aspecto tpico que recuerda por su forma
la de los frutos de estramonio8.
Adems de la hemolisis osmtica, otros mecanismos tambin pueden dar lugar a la destruccin
de la membrana celular y, por tanto, a la hemolisis. Puede provocarse hemolisis mediante
disolventes orgnicos ejemplo, cloroformo o ter) o mediante jabones como detergentes
sintticos capaces de disolver los componentes lipdicos de la membrana, toxinas animales o
bacterianas de serpientes o toxinas de ejemplo estreptococos. Las alteraciones serolgicas (por
hemolticos) producen hemolisis txicas 9.
Los eritrocitos humanos son ideales para el estudio de la estructura de las membranas
La estructura de la membrana plasmtica del eritrocito humano ha sido muy investigada, debido
a la facilidad con que puede purificarse del resto de los componentes celulares 9.
Los lpidos se distribuyen membranas.

La distribucin de los componentes lipdicos de una membrana biolgica es asimtrica. Cada


capa de la bicapa tiene una composicin y fingolipidos individuales diferente. La esfingomielina
se encuentra predominante en la capa exterior, mientras que fosfatidiletanolamina predomina en
la capa lipdica interna. En cambio, el colesterol se distribuye por igual a ambos lados de la
membrana10.
El movimiento transversal de un lado a otro no catalizado(es decir, el movimiento flip-flop) de
glicerofosfolipidos y los esfingolipidos es lento, La asimetra de los lpidos se mantiene mediante
protenas de membrana especficas, llamadas transportadores de lpidos, que promueven el
movimiento transversal de lpidos10.
Membrana de los glbulos rojos
La membrana de glbulos rojos es una estructura de componentes mltiples que es responsable
de muchas de las funciones fisiolgicas y propiedades mecnicas de la clula. Los defectos en
cualquiera de estos componentes se pueden manifestar como trastornos clnicos con los
eritrocitos. En los ltimos aos se han producido grandes avances en el conocimiento de las
bases moleculares de estos trastornos, en el que el anlisis mutacional ha aclarado muchas
preguntas acerca de la relacin estructura-funcin de los componentes de la membrana de los
glbulos rojos10.

Padecimientos hereditarios
Los sndromes del SA son un grupo de enfermedades hereditarias que se caracterizan por la
presencia de eritrocitos de forma esfrica en el frotis de sangre perifrica. SA se encuentra en
todo el mundo. Es la anemia hereditaria ms comn en personas de ascendencia del norte de
Europa, que afecta aproximadamente a 1 de cada 1000 a 2500 individuos en funcin de los
criterios diagnsticos11.
Sedimentacin
En una muestra de sangre, hecha no coagulable, los glbulos sedimentan debido a su mayor
densidad (1,10 g/ml) frente a la del plasma(1,03 g/ml), descendiendo lentamente hasta el fondo
del recipiente. Este es el motivo de que, al cabo de un tiempo, los componentes corpusculares
se separen del plasma sanguneo. Para la determinacin de la velocidad de sedimentacin
globular(VSG, BKS BSG) segn Westergren, se recoge sangre venosa(que se hace
incoagulable mezclndola en la proporcin 4:1 con solucin al 3,8% de citrato sdico) y se
coloca en pipetas especiales, de 200 mm de longitud, dispuestas en posicin vertical, leyendo
al cabo de 1 y 2 horas la altura(en mm) de la columna de plasma libre de eritrocitos 12.
Fragilidad en eritrocitos
Existen varios mtodos para medir la presinosmtica celular; la mayor parte son fsicos. Algunos
de stos mtodos son utilizando tanto a la zanahoria como al celofn, por lo que es conveniente
comparar los anteriores modelos utilizando clulas vivas, como en este caso sern glbulos
rojos. La forma de disco bicncavo del eritrocito normal, implica un exceso de extensin
superficial con relacin a su volumen, lo que le proporciona una grancapacidad de
deformabilidad. Como la membrana eritrocitaria es semipermeable, cuando los eritrocitos son

colocados en una solucin hipotnica, el agua entra osmticamente haciendo que aumente el
volumen y adquiere la forma esfrica. Con ello, la superficie disminuye respecto a su volumen
dando a la clula cierto grado de rigidez que interfiere con el paso de la misma a travs de
pequeas aberturas,por lo que fcilmente se rompe. Otro fenmeno adicional es la salida de
hemoglobina, que es permitida por el estiramiento de la membrana eritrocitaria. En esta prctica
se harn una serie de diluciones de NaCl, de concentracin progresiva, en las que los eritrocitos
problema se sometern a diferentes concentraciones y se valorar la concentracin de NaCl que
produce la hemlisis en comparacincon una sangre normal 11.
El estudio de la fragilidad osmtica de los hemates valora la resistencia de los eritrocitos a
soluciones de presin osmtica decreciente, en condiciones constantes de pH y de temperatura.
Para ello, se enfrentan los hemates problema a soluciones tamponadas de cloruro sdico cuya
concentracin es decreciente11.
Cuando los eritrocitos estn en contacto con soluciones hipotnicas, penetra agua atravs de su
membrana y se hinchan. Al hincharse los hemates, una parte de la Hb que contienen puede salir
al exterior a travs de los poros de su membrana. Si la entrada de lquido es excesiva, los
hemates se rompen y dejan libre toda la Hb que engloban(hemlisis).
En condiciones normales, un eritrocito puede aceptar sin hemolizarse una entrada de agua que
incremente su volumen en un 70% como mximo11.
Esta prueba evala por tanto la capacidad que tienen los glbulos rojos de soportar un
incremento tenido acuoso (resistencia osmtica eritrocitaria o ROE). Dentro de una misma
sangre la ROE de los hemates varia de unos a otros 11.
La fragilidad osmtica eritrocitaria es a menudo realizada en los estudios de posibles casos de
esferocitosis hereditaria. Esta prueba no ayuda a diferenciar los esferocitos de la esferocitosis
hereditaria de la anemia hemoltica autoinmune adquirida; este test solo indica que una
proporcin de clulas rojas tiene una disminucin de la relacin de la superficie y el volumen y
son ms susceptibles a la lsis en las soluciones hipo-osmticas 12.
La prueba de fragilidad osmtica indica la resistencia de los eritrocitos a la ruptura por accin de
la presin osmtica, ejercida sobre la membrana eritrocitaria, al colocarlos en soluciones salinas
hipotnicas; es un indicador de la razn volumen/superficie celular, importante para el diagnstico
diferenciado y la evolucin de determinados tratamientos 12.
Importancia de los eritrocitos en la salud.
Cada glbulo rojo contiene en su interior una protena rica en hierro denominada hemoglobina
que se encarga de transportar el oxgeno desde los pulmones hasta los dems rganos del
cuerpo. La hemoglobina tambin transporta el gas carbnico de los rganos para que pueda ser
expulsado a travs de los pulmones13.
El color rojo de la sangre se debe a la presencia de hemoglobina. Adems, esta protena
representa el 65 % de las reservas de hierro del organismo 13.
El valor normal de hemoglobina en el hombre es de 13 g a 18 g/100 ml mientras que en la mujer
es de 11,5 g a 15 g/100 ml.

Una de las enfermedades ms comunes causada por problemas en los eritrocitos es la anemia
por deficiencia de hierro, es un tipo comn de anemia. La anemia es una enfermedad en la que la
sangre tiene menos glbulos rojos de lo normal. Los glbulos rojos transportan oxgeno y retiran
del cuerpo el dixido de carbono, que es un producto de desecho 13.
La anemia tambin se presenta cuando los glbulos rojos no contienen suficiente hemoglobina.
La hemoglobina es una protena rica en hierro que transporta el oxgeno a todas partes del
cuerpo13.
Por lo general, la anemia por deficiencia de hierro se presenta con el paso del tiempo si el cuerpo
no tiene suficiente hierro para producir glbulos rojos sanos. Sin suficiente hierro, el cuerpo
comienza a usar el hierro que ha almacenado. En poco tiempo, ese hierro almacenado se
consume13.
Cuando eso sucede, el cuerpo produce menos glbulos rojos. Adems, los glbulos rojos que se
producen contienen menos hemoglobina de lo normal 13.
La anemia por deficiencia de hierro puede causar cansancio, sensacin de falta de aliento, dolor
en el pecho y otros sntomas. Los casos graves pueden dar origen a problemas del corazn,
infecciones, problemas del crecimiento y el desarrollo en nios, y otras complicaciones 13.
Las personas que corren un mayor riesgo de sufrir anemia por deficiencia de hierro son los bebs
y nios pequeos, las mujeres y los adultos que tienen sangrado interno 13.

Referencias
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Introduccin a la Biologa Celular (pp.1-2). Madrid: Editorial Mdica Panamericana.
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"medio interno". En Tratado de Fisiologa Mdica. 11 Edicin (p.3). Madrid: Elsevier.
3 Tejon R. J (204) Bioquimica Estructural 1a Edicion (p.128). Tebar
4 Justin Howse, TCNICA DE LA DANZA Y PREVENCIN DE LESIONES. Edition illustrated (p.
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Nacional Autnoma de Mxico Sitio web:
http://histologiaunam.mx/descargas/ensenanza/portal_recursos_linea/apuntes/Tejidosanguineo.pdf
8 Campbell N. A., (2001). Biologa: conceptos y relaciones. Pearson Educacin, 2001 809 paginas
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12 Granados Ziga, Jorge, & Pazos Sanou, Liliana. (1998). Legislacin para el uso de animales de
laboratorio en Costa Rica. Medicina Legal de Costa Rica, 15(1-2), 03-05. Retrieved October 29, 2016,
13 U.S. Department of Health & Human ServicesNIH logoNational Institutes of Health. Anemia por
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