Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
INTRODUCCIN.
Qu son los carbohidratos, Algunos ejemplos y algunos mtodos.
Mtodos
Se denominan carbohidratos a aquellos que responden a la frmula
emprica Cn(H2O)n. Entre los muchos elementos de nuestra
alimentacin los carbohidratos (conocidos tambin como hidratos de
carbono, sacridos o glcidos) son una de las sustancias principales
requeridas por nuestro organismo debido a su alto aporte energtico,
stos se encuentran en azcares, almidones y fibra. En todos los
seres vivos se encuentran presentes los carbohidratos en el material
gentico a causa de la desoxirribosa y la ribosa presentes en l.
Mtodos Qumicos
-Mtodo de cido Fenol Sulfrico: se basa en los productos de reaccin y
degradacin del cido y del azcar, en donde el azcar se torna
fundamentalmente hidroximetilfurfural (HMF) o furfural (F), leyendo una
absorbancia a 490nm generando colores amarillos y anaranjados.
-Mtodo de cido Sulfrico: sus fundamentos son los mismos del mtodo de
cido Fenol Sulfrico, se diferencia en que los colores que se observan son
azules y verdes leyendo una absorbancia de 620nm.
*Estos mtodos si bien son fciles, rpidos, no interfieren con las protenas y
los resultados son confiables y reproducibles, si los carbohidratos no
proporcionan HMF o F en la descomposicin cida, la muestra arrojar una
amplia gama de colores.
MTODOS PARA LA DETERMINACIN DE AZCARES REDUCTORES:
Mtodo Volumtrico o Propuesta de Lane-Eynon (1923)
Este mtodo se basa en la determinacin del volumen de una disolucin de la
muestra, que se requiere para reducir completamente un volumen conocido del
reactivo alcalino de cobre. El punto final se determina por el uso de un
indicador interno, azul de metileno, el cual es reducido a blanco de metileno
por un exceso de azcar reductor.
Cu(NO 3 ) 2
I2 + I
I3
S4O6
-2
+ 3I
(TRIIODURO)
Reactivo de Nelson
(NH 4)6Mo 7 O24 - Molibdato de amonio
Na 2HAsO 7H 2O Arsenato de Sodio H 2SO 4 cido Sulfrico
CuSO 45H 2O Sulfato de Cobre
Mtodo Fluorimtrico
Este mtodo es posible realizarlo cuando los compuestos de la muestra
absorben la radiacin a una longitud de onda corta y luego emiten radiacin a
una longitud de onda ms larga.
Determinacin de glucosa por medio de este mtodo:
Extraccin con iso-butil metil cetona.
Reaccin con hidracida de cido phidroxibenzoico.
Adicin de reactivo y lectura a una emisin de 470nm.
Excitacin a 454nm.
Mtodo Enzimtico
En este mtodo se requiere de un extracto neutro o cido libre de alcoholes y
metales pesados (ya que no se pueden usar sales de plomo para clarificar los
extractos).
Este mtodo se puede aplicar a una gran variedad de carbohidratos o
compuestos relacionados como monosacridos, disacridos, polisacridos,
cidos, alocholes y polioles.
Reacciones
GLUCOSA OXIDASA
H2O2 H2O + O2
O2 + CROMGENO INCOLORO, REDUCIDO CROMGENO AZL OXIDADO
DETERMINACIN ENZIMTICA DE SACAROSA/GLUCOSA
Reacciones:
HK
Mtodo Haderdorn-Hansen
Mtodo del cido 3.5 Dinitrosaliclico (DNS)
Mtodos Fsicos
Densimetra
Este mtodo proporciona una aproximacin a la cantidad de azcar presente
en soluciones de azcar relativamente pura, ya que la presencia de otros
materiales solubles afecta a la gravedad especfica de una solucin.
*Gravedad especfica: la gravedad especfica de una solucin de azcar es una
funcin de la concentracin de soluto a una temperatura definida.
Determinacin de Carbohidratos por Densimetra:
Para este proceso se utiliza un instrumento de medicin llamado Higrmetro
(tambin utilizado para la medicin de slidos solubles totales), para este
mtodo se ha diseado un higrmetro especial que lee el % de azcar
directamente a 20C.
NDICE DE REFRACCIN FUNDAMENTO
EL NDICE DE REFRACCIN DE UNA SOLUCIN DE AZCAR ES UNA MEDIDA
DE SU CONCENTRACIN.
LAS SOLUCIONES DE DIFERENTES AZCARES DE IGUAL CONCENTRACIN
TIENEN APROXIMADAMENTE EL MISMO NDICE DE REFRACCIN.
POLARIMETRA
Fundamento:
-SI SE PUEDE HACER QUE TODOS LOS RAYOS TENGAN ORIENTADOS SUS
COMPONENTES ELCTRICOS Y MAGNTICOS EN LA MISMA DIRECCIN, LA
RADIACIN SER POLARIZADA EN PLANO. ESTO SE PUEDE LOGRAR MEDIANTE
EL USO DE UN FILTRO POLARIZADOR.
CUANDO LA LUZ POLARIZADA BRILLA EN UNA MOLCULA ASIMTRICA (UN
COMPUESTO QUE NO PUEDE PRODUCIR UNA IMAGEN AL ESPEJO). LA LUZ ES
ROTADA. ESTO ES LLAMADO COMPUESTO PTICAMENTE ACTIVO (e.g.
GLUCOSA).
SI UN COMPUESTO TIENE SIMETRA LA LUZ POLARIZADA NO SER AFECTADA.
EL SEGUNDO FILTRO ES ROTADO MANUALMENTE PARA COMPAGINAR
VISUALMENTE LAS SOMBRAS DE UN COLOR. ESTO ROTA AL RAYO DE LUZ
POLARIZADA DE REGRESO A SU POSICIN ORIGINAL.
SE MIDE EL GRADO DE ROTACIN REQUERIDO.
MAGNITUD DE LA ROTACIN DEPENDIENTE DE:
LA LONGITUD DE ONDA DE LA LUZ UTILIZADA.
LONGITUD DE LA CELDA
NATURALEZA DE LA SUBSTANCIA ACTIVA Y SU CONCENTRACIN
TEMPERATURA
POLARMETROS vs SACARMETROS
POLARMETRO: USA LUZ MONOCROMTICA Y LEE EN GRADOS ANGULARES
(SE DEBE RELACIONAR CON LA CONCENTRACIN DE AZCAR).
SACARMETRO: USA LUZ BLANCA Y LEE LA CONCENTRACIN DE AZCAR
DIRECTA.