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FLOROGLUCINA

Phloroglucinol is a trinitrobenzene derivative with antispasmodic properties that is used


primarily as a laboratory reagent.
Substances used for the detection, identification, analysis, etc. of chemical, biological, or
pathologic processes or conditions. Indicators are substances that change in physical
appearance, e.g., color, at or approaching the endpoint of a chemical titration, e.g., on the
passage between acidity and alkalinity. Reagents are substances used for the detection or
determination of another substance by chemical or microscopical means, especially analysis.
Types of reagents are precipitants, solvents, oxidizers, reducers, fluxes, and colorimetric
reagents. (From Grant and Hackh's Chemical Dictionary, 5th ed, p301, p499)

Use in tests[edit]
Phloroglucinol is a reagent of the Tollens test for pentoses. This test relies on reaction of
the furfural with phloroglucinol to produce a colored compound with high molar absorptivity.[18]
A solution of hydrochloric acid and phloroglucinol is also used for the detection
of lignin (Wiesner test). A brilliant red color develops, owing to the presence
of coniferaldehydegroups in the lignin.[19] A similar test can be performed with tolonium chloride.
It is also part of Gunzburg reagent, an alcoholic solution of phloroglucinol and vanillin, for the
qualitative detection of free hydrochloric acid in gastric juice.

Para la identificacin de lignina, se mont el corte de hiedra previamente incubado en


floroglucinol/HCl , con esta tincin es posible visualizar las estructuras lignificadas, dando as
una coloracin roja-rosa en las membranas lignificadas. Un color rojo brillante desarrolla,
debido a la presencia de grupos coniferaldehido en la lignina La lignina, junto con la celulosa
forma parte de la pared secundaria, determina que haya menos agua y menos capacidad de
hidratacin, al impregnar los poros sus molculas.se forma por la polimerizacin de tres

alcoholes (p-cumaril, coniferil y sinapil) que difieren en el grado de metoxilacion en la


posiciones C3 y C5 en sus anillos aromaticosluego de que estos alcocholes se incorporan en
el polmero de lignina reciben ciertos nombres; p-hidroxifenil (H), guayacil (G) y siringil (S). La
estructura polimrica de la lignina se entrelaza con las microfibrillas de celulosa, y tambin se
une a las hemicelulosas y pectinas mediante enlaces ster. El resultado es una red hidrofbica
que rodea los dems componentes de la pared a la que confiere mayor resistencia y rigidez.

Los mtodos ms sencillos para visualizar la lignina y otros compuestos aromticos emplean
radiacin ultravioleta (UV). La excitacin de las molculas de base de compuestos aromticos
por la luz UV es una tcnica antigua, pero sigue siendo uno de los mtodos ms rpidos para
la visualizacin de la lignina. Sin embargo, la visualizacin UV en realidad no es ideal para la
deteccin de la lignina, porque la luz UV excitar otros compuestos aromticos. La lignina se
compone principalmente de tres componentes bsicos, los monolignoles (alcoholes
hidroxicinamil: alcohol coniferil, alcohol sinaplico y alcohol p-cumaril) 1-3. Mancha Phloroglucinol
puede proporcionar pistas sobre la magnitud de cinnamaldehydes presentes en el xilema,
fibras y tejidos traqueales 4. Floroglucinol es un buen indicador de cinnamaldehydes generales
y puede diferenciar entre cinnamaldehydes y otros compuestos aromticos. Los monmeros
de alcohol sinaplico se pueden detectary diferenciados por el uso de Maule mancha. Azul de
toluidina O es un colorante policromtico y por lo tanto tiene la capacidad de manchar
diferentes elementos de la pared celular en diferentes colores
toluidina O es detectar pectina y

5,6

5,6.

El principal uso de azul de

lignina. La ventaja de la utilizacin de azul de toluidina O es

que muchos elementos de la pared celular pueden ser visualizados en un solo paso. Tanto
calcoflor blanco y rojo congo son fciles de trabajar con y se pueden utilizar para visualizar
celulosa. Calcofluor manchas blancas de celulosa, callosa, y otros -glucanos, no sustituidos o
sustituidos dbilmente 6-9, mientras que el congo manchas rojas directamente a -glucanos (1
4) y, en particular y celulosa 10,11. El objetivo de este estudio es proporcionar pautas sencillas
para el uso de las tcnicas de tincin antes mencionados para obtener imgenes de alta
calidad a partir de A. thaliana tallos.

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La tincin histoqumica de<em> arabidopsis=""


thaliana<="" em>="" celda="" secundaria=""
elements="" pared<="" h1="">
Prajakta Pradhan Mitra1,2, Dominique Loqu1,2
Feedstocks Division, Joint Bioenergy Institute, 2Physical Biosciences Division, Lawrence Berkeley
National Laboratory
1

</em>>
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0:05

Title

1:04

Stem Embedding

2:52

Stem Sectioning

4:21

Staining Techniques

7:31

Results: Observation of Cell Wall Differences in Plant Stems Using Cell Wall
Specific Stains

10:1
0

Conclusion

Summary
Date Published: 5/13/2014, Issue 87; doi: 10.3791/51381

Keywords: Cellular Biology, Issue 87, Xylem, Fibers, Lignin, polysaccharides, Plant cell wall, Mule
staining,Phloroglucinol, Congo red, Toluidine blue O, Calcofluor white, Cell wall staining methods

Cite this Article


Pradhan Mitra, P., Loqu, D. Histochemical Staining of Arabidopsis thaliana Secondary Cell Wall
Elements. J. Vis. Exp. (87), e51381, doi:10.3791/51381 (2014).

Introduction
La pared celular vegetal tiene una gran cantidad de informacin dentro de sus diversos componentes:
lignina, celulosa, hemicelulosa (xilano, glucuronoxilano, xiloglucano, arabinoxilano, vinculacin mixta
de glucano, o glucomanano), y pectina. Tcnicas histolgicas proporcionan importantes pistas visuales
en el estudio de las diferencias dentro de las paredes celulares secundarias en los niveles de organizacin
y celulares. Diversas tcnicas histolgicas fueron desarrollados y se pueden encontrar en la literatura,
pero estas tcnicas puede ser difcil y requiere mucho tiempo para los principiantes debido a protocolos
muy detalladas con instrucciones visuales simples son rara vez disponible. El objetivo de este estudio es
proporcionar pautas sencillas para las tcnicas de tincin histolgica para obtener imgenes de alta
calidad.
Seccionar el tejido del tallo es el primer paso en la visualizacin de las paredes celulares y formas
celulares. Aunque las secciones cortadas a mano son baratos y requieren menos tiempo para prepararse,
el uso de unvibratome ofrece consistencia yproduce imgenes de alta calidad. El uso de un vibratomo
permite producir mejor calidad de los datos mediante la generacin de incluso secciones con el mismo
espesor, lo que ayuda a producir imgenes ntidas y reduce significativamente el riesgo de producir
diferencias inexactas entre las muestras que se causada simplemente por una mala preparacin de la
muestra. El uso de resinas para fijar especmenes frescos puede ser un desafo para los principiantes y
todava puede llevar mucho tiempo, incluso para los expertos en el anlisis que debe hacerse
rpidamente. Adems, se hace imposible para medir cualquier actividad biolgica con la muestra cuando
se ha incorporado en una resina. Una tcnica simple que emplea agarosa y un molde casero es til para la
incrustacin de tejidos del tallo, y tambin se puede utilizar en otras aplicaciones que requieren la
diseccin de los tejidos blandos. En comparacin con la incrustacin de especmenes en la resina, este
mtodo tiene la ventaja de mantener los tejidos vivos y la reduccin de la manipulacin de la muestra.

Seccionamiento tejidos a travs de un vibratomo es altamente preciso y genera homogensecciones


unidades organizativas, que, dependiendo del objetivo del estudio, a continuacin, se pueden utilizar con
varias tcnicas de tincin diferentes.
Los mtodos ms sencillos para visualizar la lignina y otros compuestos aromticos emplean radiacin
ultravioleta (UV). La excitacin de las molculas de base de compuestos aromticos por la luz UV es
una tcnica antigua, pero sigue siendo uno de los mtodos ms rpidos para la visualizacin de la
lignina. Sin embargo, la visualizacin UV en realidad no es ideal para la deteccin de la lignina, porque
la luz UV excitar otros compuestos aromticos. La lignina se compone principalmente de tres
componentes bsicos, los monolignoles (alcoholes hidroxicinamil: alcohol coniferil, alcohol sinaplico y
alcohol p-cumaril) 1-3. Mancha Phloroglucinol puede proporcionar pistas sobre la magnitud de
cinnamaldehydes presentes en el xilema, fibras y tejidos traqueales 4. Floroglucinol es un buen indicador
de cinnamaldehydes generales y puede diferenciar entre cinnamaldehydes y otros compuestos
aromticos. Los monmeros de alcohol sinaplico se pueden detectary diferenciados por el uso de Maule
mancha. Azul de toluidina O es un colorante policromtico y por lo tanto tiene la capacidad de manchar
diferentes elementos de la pared celular en diferentes colores 5,6. El principal uso de azul de toluidina O es
detectar pectina y 5,6 lignina. La ventaja de la utilizacin de azul de toluidina O es que muchos elementos
de la pared celular pueden ser visualizados en un solo paso. Tanto calcoflor blanco y rojo congo son
fciles de trabajar con y se pueden utilizar para visualizar celulosa. Calcofluor manchas blancas de
celulosa, callosa, y otros -glucanos, no sustituidos o sustituidos dbilmente 6-9, mientras que el congo
manchas rojas directamente a -glucanos (1 4) y, en particular y celulosa 10,11. El objetivo de este
estudio es proporcionar pautas sencillas para el uso de las tcnicas de tincin antes mencionados para
obtener imgenes de alta calidad a partir de A. thaliana tallos.

Protocol
1. Stem incrustacin
1. Hacer una solucin de agarosa al 7% en agua (de 7 g de agarosa de
electroforesis-grado en 100 ml de agua destilada). Disolver la agarosa
en autoclave durante 20 min o en el microondas durante 20 min a una

intensidad ms baja (por ejemplo, intensidad de 10% de un horno de


microondas 1250 vatios).
2. Preparar un molde hecho en casa para incrustar los tallos usando viales
de plstico.
1. El uso de una hoja de afeitar, cortar la parte inferior cnica de
un tubo de microcentrfuga con tapn de rosca de 2 ml (Parte A).
Con una aguja de jeringa, perforar un agujero en la tapa del
tubo ligeramente mayor que el dimetro del vstago para ser
incrustado. A continuacin, cortar 0,5 cm de la parte inferior de
un tubo de microcentrfuga de 0,6 ml (Parte B).
2. Aadir la porcin de 0.5 cm de corte del tubo de microcentrfuga
de 0,6 ml en el tubo de microcentrfuga de 2 ml de precorte.
Selle las dos partes utilizando Parafilm (Figura 1). NOTA: La
parte inferior del tubo se corta para facilitar la eliminacin de la
muestra incrustada despus de la agarosa se ha solidificado. Tl
agujero en la tapa ser ayudar en la sujecin del vstago
estacionario cuando el vstago est incrustado en agarosa. El
molde que servir para celebrar la agarosa y sostenga el tronco
recto al incrustar. El Parafilm celebrar las dos partes, A y B,
hasta que la agarosa se establece y el tallo est incrustado.
3. Uso de una hoja de afeitar, cortar una seccin de vstago de la
zona de inters, (por ejemplo,medio de la primera entrenudo del
tallo). NOTA: Idealmente, el tallo debe cortarse justo antes de la
incorporacin de evitar la destruccin por la deshidratacin.
Alternativamente, el vstago puede ser almacenado
temporalmente en una placa que contiene un papel de filtro
humedecido con agua. Esta placa se puede colocar en hielo
hasta que est listo para ser incorporado para prevenir la

deshidratacin del tejido y la deformacin. Almacenamiento de


la madre para perodos de ms de 30 minutos sin elevada
humedad har que el vstago se seque.
3. Derrita la agarosa en el microondas a baja intensidad. PRECAUCIN: La
botella que contena agarosa puede estar caliente. Utilice un guante para
coger la botella. Deje que los s de agarosa fundidatand a temperatura
ambiente (entre 20 C y 25 C) hasta que se enfra a aproximadamente
50 C.
4. Lentamente pipeta de 5 ml de la agarosa en el molde de plstico
preparado de antemano para llenar el vial. NOTA: Asegrese de que no
haya burbujas de aire en los moldes. Las burbujas de aire har que las
brechas en el molde de agarosa y no cubren completamente la muestra
madre, que finalmente conducir a la corte desigual de las secciones de
la muestra.
1. Deje que la agarosa se enfre durante 30 a 60 segundos para
convertirse en semislido. Pruebe con un pequeo palillo de
dientes, asegurndose de que puede penetrar y permanecer de
pie, pero no flotan, en la agarosa. NOTA: Si la madre se coloca
cuando la agarosa est todava caliente se puede daar la
muestra por encogimiento del tallo, la destruccin de la
morfologa celular.
2. Coloque el vstago en este vial de agarosa-llenado. Asegrese
de que el vstago se mantiene recta. Coloque la tapa perforada
de una manera tal que la punta del vstago se lleva a cabo por
la tapa. No gire el tapn de rosca. En algn momento ms de un
vstago (de una sola especie) puede ser embedded en un solo
vial; pero en ese caso concreto, no utilice la tapa. NOTA: Si la
tapa de rosca est activada, la madre recibir retorcido.

5. Agregar el vial a temperatura ambiente o a 4 C durante 10-30 min,


hasta que se solidifica.
6. Retire el molde suavemente deslizndolo fuera del tubo. Abra el Parafilm.
Empuje la parte inferior de la parte B del molde suavemente con el pulgar
para soltar la agarosa solidificada de la Parte A en un portaobjetos de
vidrio para microscopio.
7. Cortar el tallo incrustado de agarosa en tres trozos aproximadamente
iguales de 1,2 cm de longitud. Corte la parte del tallo que no estaba en la
agarosa y descartarlo.
1. Guarde estas piezas de agarosa con el embebido tallos en
hermtico 2 tubos de microcentrfuga ml en una caja oscura a 4
C hasta el momento de la seccin. Alternativamente,
almacenar los tubos a 4 C durante un mximo de una semana.
NOTA: El almacenamiento es posible, pero el experimentador
tiene que ser consciente de que los tallos incrustado todava
estn vivos y, dependiendo del experimento, Artefactos
potencialmente podran ser introducidos.
2. Stem Sectioning
1. PRECAUCIN: Lea el manual vibratome cuidadosamente y siga todas las
instrucciones de seguridad.
2. Asegrese de que la platina est limpia y completamente seca (libre de
cualquier slido o lquido). Limpie la platina con una hoja de afeitar para
eliminar cualquier pegamento residual de los experimentos anteriores y
lavar con agua. Luego seque con una toalla de papel. NOTA: Esto
asegurar que el adhesivo funciona bien y se une a la muestra de
agarosa. Si este paso no se hace correctamente, es posible que los

especmenes no podrn adherirse al disco y ms tarde provocarn la


muestra caigan fuera del disco durante el corte.
1. Utilice papel suave limpia para eliminar la humedad del bloque
de agarosa que contiene las muestras.
2. Coloque una pequea gota de adhesivo tisular en la platina.
Racha a cabo el adhesivo para cubrir el rea en el centro de la
placa con la punta de la botella adhesivo. Rpidamente lugarel
bloque de agarosa de manera que las muestras son o bien
perpendicular a o en paralelo con la placa para transversal o
secciones transversales longitudinales, respectivamente. Deje
que el adhesivo para fijar la muestra a la platina a temperatura
ambiente o a 4 C durante 10-30 min. NOTA: Este es un paso
sensible al tiempo.
3. Fijar la platina en su lugar en el bao tampn o valle. El bloque / s de
agarosa con las secciones deben estar en paralelo con la hoja de afeitar.
Llene la bandeja de tampn con agua destilada a temperatura ambiente
hasta que las muestras estn completamente sumergidos.
4. Cortar una hoja de afeitar en la mitad y luego recortar los extremos con
unas tijeras fuertes para que la hoja se queda completamente plano.
Coloque la mitad de la hoja de afeitar de precorte en el soporte de
cuchillo.
1. Ajuste el ngulo del soporte de cuchillo a 84 , la velocidad de
0,90 mm / seg (8 posicin en el vibratome) y la frecuencia de 50
Hz (posicin 5 en el vibratome). Cortar secciones de 100 micras
de espesor. Utilice el modo continuo. NOTE: Este espesor se
selecciona para asegurar que el tejido puede soportar los
diversos tratamientos con cido y base utilizados en algunos de

los protocolos de tincin. Establece la ventana para seccionar y


permitir 15-20 min en un modo continuo para la vibratome a la
seccin de un bloque de agarosa de aproximadamente 1,2 cm.
5. Recoge las secciones con una pipeta de plstico desechable durante el
corte en el bao tampn. Alternativamente, las secciones pueden ser
transferidos desde la bandeja de tampn en un vaso de precipitados de
vidrio y luego a una placa de Petri claro. Transferir algunas secciones de
los tubos de microcentrfuga de 2,0 ml. Nota: Las muestras se recogen de
una placa de Petri, ya que es ms fcil ver las secciones sobre un fondo
claro, y porque el bao tampn pueden ser preparadas para la siguiente
muestra.
6. Las secciones se pueden almacenar en un tubo de 50 ml o recogidos y
almacenados en 1,5 a 2 ml de tubos de microcentrfuga a 4 C durante
30 a 60 min. NOTA: El almacenamiento de las secciones por perodos ms
largos dar lugar a la mala calidad de imagen.
3. Microscopio y ajustes de la cmara para imgenes
1. Ajustar la iluminacin Koehler en el microscopio. Elija un
objetivo. Enfoque la muestra primero. Traiga la intensidad de la
luz a la mitad o menos. Cierre el diafragma de campo (FD) y la
apertura (AP) o llevarlo a la posicin ms baja posible en ese
objetivo particular.
1. Cuanto mayor es la ampliacin, ms grande es el anillo
ser. Utilice el botn de enfoque del condensador para
enfocar el iris de campo tan fuertemente como sea
posible.

2. Lentamente lleve la imagen del iris de campo


(pequeo anillo en forma de hexgono) al centro con
los mandos de centrado del condensador-(tornillos en
forma de alfiler que rodean el condensador). Aumente
poco a poco el diafragma (FD) de tal manera que el
diafragma de campo alcanza el borde. Detener el
aumento de la FD justo despus del iris de campo ha
superado el lmite.
3. Poco a poco aumentar la abertura (AP) para ajustar el
contraste. Ajuste la intensidad de la luz segn las
necesidades. NOTA: la iluminacin Koehler necesita ser
ajustado para cada Objetivo, cada da experimental.
Anote los nmeros obtenidos despus del ajuste para
el da. Estos nmeros se pueden volver a utilizar cada
vez que se cambian los objetivos de ida y vuelta para
ese da en particular.
2. Ajuste la abertura, intensidad, tiempo de exposicin, la ganancia
y filtros como se describe en la Tabla 1. Esta informacin debe
ser utilizado slo como una gua.
3. Utilice una cmara digital de alta resolucin con un chip CCD
interlineal de formato grande sin obturador mecnico para
capturar imgenes de fluorescencia; y una alta resolucin,
cmara de alta velocidad de imgenes de campo brillante.
4. Procesar las diapositivas utilizando software estndar. Cargue el
software. Haga clic en "Acquire" y "Ajuste de la cmara / tabla,"
a continuacin, seleccione la cmara que se utilizar. Haga clic
en "Aceptar". Haga clic en "Adquirir" seguido de "ficha Color."
Bajo "ficha Color," elegir "el mtodo Bayer" seguido de

"Promedio de cuatro." Aadir la ganancia sugerido (rojo, verde,


azul) from Tabla 1. Seleccione la pestaa "Config salvar" y haga
clic en el directorio en el que las imgenes han de almacenarse.
Ajuste "Tiempo de exposicin" de las sugerencias en la Tabla
1. Ajuste "Agrupacin" a "1" y "hurgar en la basura en vivo" a
"1". Centrarse en la regin de inters y, a continuacin, haga
clic en "Guardar en vivo."
5. Imgenes de salida en el software de la cmara estn en el
formato "TIF". Analizar las imgenes para histoqumica de los
tipos de clulas. Utilice software estndar para usos intermedios
de presentacin y publicacin.
4. Ultravioleta y Bright-campo Imaging
6. Usar una pipeta de 1 ml con el corte de punta de la pipeta de
manera que las secciones se pueden pipetearon a cabo
fcilmente. Suavemente secciones pipeta en la punta y en un
portaobjetos de microscopio. Cubrir las secciones con un
cubreobjetos. Tenga en cuenta las secciones bajo la luz
ultravioleta o luz de campo brillante.
5. Floroglucinol-HCl (Wiesner) tincin 12
7. Disolver 0,3 g de floroglucinol en 10 ml de etanol absoluto para
preparar una solucin de floroglucinol 3%. Mezclar un volumen
de HCl concentrado (37 N) a dos volmenes de 3% floroglucinol
en etanol; esta solucin es floroglucinol-HCl (pH-HCl) o Wiesner
mancha. Nota: esta solucin es que se recin hecho en el da de
la tincin y no puede ser almacenado, ya que la solucin se
degradar con el tiempo y la tincin se convertir en ineficaz.

PRECAUCIN: HCl es altamente corrosivo, por lo que vaya con


mucho cuidado al manipular la mancha Ph-HCl.
8. Transferencia de secciones de tallo a un tubo de microcentrfuga
de 2,0 ml. Aadir 1 ml de la solucin de Ph-HCl al tubo que
contiene las secciones y la tapa de inmediato debido a que el
HCl en la mancha Ph-HCl es altamente corrosivo. Mueva
suavemente el tubo para asegurar que todas las secciones se
tien. Una alternativa a este paso es para mantener la tapa del
tubo abierto de modo que el pH de la solucin de HCl-se puede
pipete arriba y abajo, preferentemente sin molestar a la
SECciones. NOTA: Tenga cuidado de no pipetear las secciones en
la punta de la pipeta, ya que esto puede daar esas secciones.
1. Usar una pipeta de 1 ml con el corte de punta de la
pipeta de tal manera que las secciones se pueden
pipetearon a cabo fcilmente y sin daos. Pipetear
suavemente secciones en la punta y en un
portaobjetos de microscopio. Cubrir las secciones con
cubreobjetos. Tenga en cuenta las secciones bajo
iluminacin de campo brillante. NOTA: El pH de la
solucin de HCl-seca en 5-10 minutos, provocando un
deterioro de los especmenes. Por lo tanto, la imagen
tiene que ser completado dentro de ese perodo de
tiempo.
9. Observacin de la lignina en las secciones de tallo teidas con
Phloroglucinol y Maule Manchas:
El xilema compuesto por vasos y fibras y fibras interfasciculares eran
los nicos elementos de la madre que se tieron por las manchas de
lignina (floroglucinol y Maule) Usando una seccin del tallo muestra de

tipo salvaje. Mancha Phloroglucinol reacciona con cinnamaldehyde


finales grupos de lignina para dar un color rosa o fucsia 4(Figura
3). Como observ bajo iluminacin UV, una coloracin fucsia se
observa en las fibras del xilema y interfascicular pero est ausente en
la mdula y la corteza o epidermis (Figura 3). Stem secciones
transversales se analizaron bajo 5X, 10X, 20X, 40X y
ampliacin (Figura 3 Paneles A, B, C, y D - E,respectivamente) para
visualizar mejor la distribucin de manchas floroglucinol a travs de la
madre y se diferencian los principales tejidos; xilema y fibras
interfascicular; mdula y la corteza; y la epidermis. Por lo general, la
intensidad del color se correlaciona con el nivel de lignificacin de una
manera cualitativa - excepto cuando el mutante o transgnicos
analizados se enriquece anormalmente en unidades de aldehido
cinmico-derivados (por ejemplo mutantes CAD) <sup> 14. La
mancha del Maule es especfico en la deteccin de las unidades de
lignina siringil en el xilema y fibras interfasciculares. Coloracin rojo
indica la presencia de unidades de lignina siringil en los elementos de
la lignina (Figura 4) 18. Sin embargo, una coloracin rojo brillante se
observ en las fibras cuando se compara con los tejidos del xilema
que sugiere que las fibras contienen un nivel ms alto de S lignina
mientras que el xilema es ms enriquecido en unidades de T. Como
se observ despus de la tincin floroglucinol, una coloracin roja se
observa en las fibras del xilema y interfascicular pero est ausente en
la mdula y la corteza o epidermis (Figura 4). Tambin se
correlaciona con la distribucin de lignina observado bajo UV (Figura
2) y demuestra que las unidades siringil estn presentes en todos los
tejidos lignificados de esta muestra de tallo. Stem secciones
transversales se analizaron bajo 5X, 10X, 20X, 40X y
ampliacin (Figura 2 Paneles A, B, C, yD - E, respectivamente) para
visualizar mejor la distribucin de manchas Maule a travs de la

madre y la discriminacin de los principales tejidos: las fibras del


xilema y interfascicular, mdula y la corteza, y la epidermis. Es
importante tener en cuenta que la cantidad y distribucin de las
unidades de siringilo entre los tejidos lignificados varan con la edad
de la madre y pueden estar ausentes en un tallo joven (datos no
mostrados).

Biosystems and Pathways

Download
1 to 10 of 6,346
123...635

BioSystem ID

BioSystem Name

380

Aminobenzoate degradation

BioAssay Results
Refine/Analyze

Download
1 to 10 of 137
123...14
Activity

Activit
y

Substance
SID

BioAssay
AID

BioAssay Name

Active

68348

155

NCI Yeast Anticancer Drug Screen. Data for the rad50 strain

Active

103595115

358852

Antiproliferative activity against mouse Colon 26-L5 cells by MTT

Active

103595115

358853

Antiproliferative activity against human HT1080 cells by MTT assa

Active

103595115

395644

Inhibition of Crotalus adamanteus venom PLA2 assessed as effect o

Activit
y

Substance
SID

BioAssay
AID

BioAssay Name
hexadecanoyl-2-(1-pyrenedecanoyl)-sn-glycero-3-phosphoglycerol
at 0.15 uM

Active

103595115

395645

Inhibition of Crotalus adamanteus venom PLA2 assessed as effect o


hexadecanoyl-2-(1-pyrenedecanoyl)-sn-glycero-3-phosphoglycerol
at 0.30 uM

Active

103595115

395646

Inhibition of Crotalus adamanteus venom PLA2-induced edema in S


at 50 ug, id

Active

103595115

403716

Inhibition of sheep COX1 measured by oxygen consumption

https://en.wikipedia.org/wiki/Phloroglucinol
https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/phloroglucinol#section=BioAssayResults
cefire.edu.gva.es/pluginfile.php/429856/mod_folder/.../0/3.%20Protocolos.pdf?

Disolver 0,3 g de floroglucinol en 10 ml de etanol absoluto para


preparar una solucin de floroglucinol 3%. Mezclar un volumen
de HCl concentrado (37 N) a dos volmenes de 3% floroglucinol en
etanol; esta solucin de floroglucinol-HCl (pH-HCl)
o Wiesner mancha.
Esta solucin debe ser recin hecha el da de la tincin y no puede
ser almacenado, ya que la solucin se degradar.

2.
Transferir las secciones de tallo a un tubo
de microcentrfuga de 2,0 ml. Aadir 1 ml de la solucin de PhHCl al tubo que contiene las secciones y tapar de inmediato. Mueva
suavemente el tubo para asegurar que todas las secciones se
tian.

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