UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA

MOLINA
FACULTAD DE PESQUERA
DEPARTAMENTO DE ACUICULTURA E INDUSTRIAS
PESQUERAS

CURSO:

Microbiologa Pesquera.

DOCENTE:

Ing. Nancy Martnez Ordinola.

LABORATORIO:

LMIPE

NOMBRES:

Jafet Eliud Soria Paima

FECHA REALIZADA:

16/08/2016

FECHA DE ENTREGA:

25/08/2016

2016 II

I.

INTRODUCCIN

En cualquier laboratorio, para realizar experimentos y ensayos, se necesita disponer de

los tiles apropiados, en forma, dimensiones y en material de que se confeccionan. En un
laboratorio se utilizan implementos hechos de diversas sustancias, siendo los ms
comunes los de vidrio y los de porcelana. La microbiologa es una ciencia experimental es
a travs del trabajo de laboratorio a donde se aprende este proceso. El trabajo
experimental ayuda a asociar lo aprendido en la teora con la prctica, lo cual a la vez
permite desarrollar habilidades y destrezas. (Osorio, 2009)
Los equipos y materiales que se usan en el laboratorio, son elementos que contribuyen a
la realizacin de experimentos e investigaciones. Para trabajar adecuadamente dentro del
laboratorio es necesario conocer los nombres de los diferentes utensilios y sus
respectivas funciones. Los elementos de uso comn en un laboratorio de qumica se
clasifican segn el material del que estn constituidos. As se tiene de: metal, vidrio,
plstico, porcelana, madera y otros. (Osorio, 2009)
Como futuro ingeniero pesquero, est prctica de laboratorio consolida los conocimientos
que se viene adquiriendo desde los primeros aos de la carrera. Si bien es cierto, no se
obtiene un ttulo de microbilogos, conocer de manera adecuada los conceptos que
involucran a esta ciencia es importantes. En este caso, el reconocimiento de los
materiales e instrumentos presentes en el laboratorio de microbiologa, constituyen parte
bsica de las herramientas e informacin que debe manejar un ingeniero.
II.

III.

OBJETIVO
Reconocer los
microbiologa.

principales

materiales

instrumentos

de

laboratorio

de

REVISION BILIOGRFICA

En primer lugar, se debe conocer que un laboratorio de microbiologa consta de tres

zonas:
Zona de acondicionamiento del personal, es donde el personal debe procurar
entrar al laboratorio sin ningn contamnate por lo que se recomienda lavarse las
manos, usar garro, mascarilla y tomar otras medidas para evitar contaminacin.
Zona de anlisis, esta zona debe ser casi estril ya que es donde se manipularan
cultivos cepas de microorganismos los cuales no deben de ser contaminados con
otros microorganismos externos.

Zona sucia, es donde se limpia y prepara los materiales que se usarn en el

laboratorio.

En segundo lugar, para la identificacin y el adecuado manejo del material de laboratorio

es un primer paso para el conocimiento del mismo. Los materiales ms utilizados para la
fabricacin de los utensilios de un laboratorio son el vidrio, el plstico, la cermica y el
metal. Sus caractersticas se detallan en la Tabla 1.1.
TABLA 1.1 DESCRIPCION DE LO MATERIALES DE LABORATORIO
MATERIALES
VIDRIO
PLASTICO
PORCELANA
METAL

CARACTERISTICAS
Inerte y resistente a la temperatura.
Econmico y desechable.
Resistente a muy elevadas temperaturas
y ataques qumicos.
Material de soporte.

MATERIAL DE VIDRIO
El material fabricado de vidrio es el mas importante y el mas utilizado en los laboratorios .
Se debe a varias razones:
Es inerte : no interfiere ni reacciona con la mayoria de los compuestos quimicos
Es transparente: podemos ver que esta pasando dentro del recipiente
Es manejable
Es moldeable: se pueden reparar o disear nuevas piezas con el material roto
Existen varios tipos de vidrio qe varian en su composicion o en los porcentajes de la
misma.Lo ideal es el cuarzo (oxido de silicio) , pero lamentablemente es muy caro y solo
se utiliza para ensayos especificos , como los espectrofotometricos.

MATERIAL DE PLSTICO

Es muy facil introducir contaminantes en una muestra duranete su manipulacion. El

plastico presenta una ventaja frente al vidrio, porque alser mas barato , se puede fabriar
comoo material desechable, evitando muchas contaminaciones.
Independientemente de que el material este fabricado en vidrio o plastico, esto se dividen
en materiales volumetricos y no volumetricos.

INSTRUMENTOS VOLUMTRICOS
BURETA: tubo alargado graduado con una llave al final , que permite abrir o cerrar
el flujo del liquido.descargan con extatituc vlumenes conocidos principalmente en
titulaciones.
PROBETA : es u tubo cilindrico graduado con base para poder apoyarlo. Con ella
podemos medir volumenes y, posteriormente , verterlos gracias a su termicacion
en forma de pico . no se mexzclan volumenes dentro de una probeta.

FIG 1 . PROBETA Y BURETA

PIPETAS: estan disedas para trasvasar vlumenes conociso de un recipiente a
otro. Los dos tipos de pipeta que se utilzan con mayos frecuenciaa son la pipeta
de Mhor o graduada y la volumetrica. En la primera se puden medir distinttos
volumenes de liquido , ya que lleva una escala graduada.

FIG 2. PIPETAS

INSTRUMENTOS NO VOLUMTRICOS
Se fabrican en vidrio por ser un material ideal debido a su transparencia, durabilidd y
ressitentencia.Los instrumentos en los que se combinana las sustancias se fabrican con
vidrio optico , vidrio de jena oo vidrio duro, con una composicion muy resistente a
reactivos quimicos y a cambios bruscos de temperatura .vasos precipitados(beackers),
erkenmeyers , balones de fonfo plano y de fondo redondo, embudos , tubos de ensayo ,
condensadores frascs con tapon esmerilado y vidrios de reloj , entre otros. (Osorio, 2009)

FIG 3. MATERIALES DE VIDRIO

MATERIAL DE PORCELANA
Esta preparado para calentar las sustancias a elevadas temperaturas . se trata de un
material poroso.ejemplo: embudo buschner y crisoles.

FIG 4. EMBUDO DE BUSCHNER

FIG 5. CRISOLES

MATERIAL METLICO
Se utilizan para soportar el montaje con el cual se realizara un experimento para evitar
contacto directo con la sustancia y tambin por su resistencia al calor ejemplos de este
tipo de instrumentos son el soporte universal, el aro metlico, la nuez, el tringulo de
porcelana, la malla de asbesto, la gradilla, la esptula, las pinzas (para bureta, para crisol
o para tubo de ensayo), los escobillones y el mechero, entre otros. (Osorio, 2009)
Los metales ms utilizados para dichas aleaciones son: hierro, cobre, nquel, platino, plata
y plomo.
MECHERO: es un instrumento de laboratorio de gran utilidad, diseado con el propsito
de obtener una llama que proporcione mximo calor y no produzca depsitos de holln al
calentar objetos.

FIG 6. ALGUNOS MATERIALES DE METAL

APARATOS
CENTRIFUGAS: como su propio nombre indica, utilizan la fuerza centrfuga para
funcionar. Esto requiere que estn bien ancladas y en una superficie lisa y equilibrada.
Los posibles riesgos y la forma de prevenirlos.

AUTOCLAVE O ESTUFA DE ESTERILIZACIN: Es necesario una autoclave para

esterilizar material contaminado y otro para el material limpio. El material de vidrio limpio
puede ser esterilizado por calor hmedo o seco si lo resiste. La estufa de esterilizacin,
graduada a baja temperatura, puede ser utilizada tambin para secar el material limpio
auto clavado.
En cambio el material contaminado es sometido a calor hmedo porque tiene mayor
penetracin en el material orgnico y esteriliza ms rpidamente a grmenes. Tambin se
utiliza para esterilizar soluciones. La temperatura de esterilizacin en una estufa con calor
seco es de 170 C.
HOMOGENEIZADOR O LICUADORA
Se utiliza para homogeneizar los materiales utilizados para preparar medios de cultivo.
Esta operacin permite hacerlo rpida y eficientemente. Puede utilizarse una licuadora de
uso domstico.
BALANZA
La balanza es uno de los aparatos ms utilizados en el laboratorio. Su propsito es
determinar la masa de una sustancia o pesar cierta cantidad de la misma.

FIGURA 7: BALANZA GRANATARIA (a) y BALANZA ELECTRONICAS O DIGITALES

(b).

IV.

MATERIALES Y METODOS

FIG.8. JARRA ANAERBICA

FIG.9. BALANZA DIGITAL

Recipientes
que
se
usan
para conseguir una atmsfera libre
de oxgeno para el cultivo de
microorganismos anaerobios.

Se utilizan para pesar

diferentes insumos que
utilizan.

los
se

FIG.10: AGUJAS KOLLE O ASAS DE

SIEMBRA

FIG.11: GABINETE MICROBIOLGICO O

CMARA DE FLUJO LAMINAR

Se utilizan para sembrar. Pueden ser

metlicas o de plstico, curvas o
rectas. Usualmente es un alambre de
nicrom.

Cmara donde los contaminantes son

expulsados por accin del aire circundante.
Cuenta con una lmpara ultravioleta para
evitar menor riesgo de contaminacin
(elimina microorganismos).

FIG.13. MECHERO BUNSEN O

FISHER

FIG.12: MICROSCOPIO
Instrumento que nos permite
aumentar el tamao de los
microorganismos
hacindolos
ms perceptibles.

Utilizado como fuente de calor,

como medio de esterilizacin del
ambiente de trabajo (en un radio
de 30 cm) para un anlisis
microbiolgico.

Fig.7.
Horno
de
esterilizacin
Esteriliza material de vidrio
los cuales se colocan en
estuches especiales a una
temperatura de 121C por
alrededor de 2horas.

FIG.14
HORNO
ESTERILIZACIN.

DE

Es semejante al autoclave pero

esteriliza materiales de vidrio. E
coloca en estuches a 180C por
dos horas

FIG.15.
CONTADOR
COLONIAS

DE

Es un aparato que mediante la

iluminacin de la placa y una
lupa, nos permite observar con
mayor nitidez las colonias y por
tanto facilita su recuento.

FIG.16. CENTRIFUGA

FIG.17. BAO MARA

Aparato que sirve para separar

slidos de lquidos.

Recipiente con agua que nos

permite mantener la temperatura
del agua constante. Utilizado
para la preparacin de medios y
cultivo de microorganismos.

FIG.18. PLACA PETRI

Recipiente de vidrio que se
emplea como medio de cultivo
para
el
crecimiento
de
microorganismos

FIG.19. REFRIGERADORA
Se utilizan para conservar tanto
materiales (medios de cultivo,
reactivos)
como
microorganismos.
Generalmente estn a una
temperatura fija de 4C.

FIG.20. AUTO CLAVE

Se utilizan para esterilizar a
travs del calor hmedo medios
de cultivos. Existen a diferentes
temperaturas.

FIG.21.
ESTUFA
DE
INCUBACIN
FIG.22. ABRIDOR DE LATAS
Nos
permite
obtener
til en el anlisis
de control de
temperaturascalidad
ptimas
para el ya que no
de enlatados
crecimiento de
microorganismos
nos permite abrir el doble sello
(temperaturadeuniforme
la lata y en
as todas
poder ver que tan
artes).
bien se encuentra.

FIG.23.
VASO
DE
PRECIPITADO,
PROBETA,
MATRAZ Y ESPTULA.
Materiales que nos ayudan a la
manipulacin
de
diferentes
insumos o reactivos

FIG.24.PIPETAS
ESTERILIZADAS Y BOMBILLA
DE SUCCIN.
Utilizadas para la medicin de
reactivos los cuales necesitan
ser extrados en cantidades
exactas.

FIG.25. TUBOS DE ENSAYO

V.

CONCLUSIN

Se emplean como recipientes de

medio de cultivos slidos y
lquidos. Son utilizados para
guardar cepas.

Se identific los diferentes instrumentos y equipos que se utilizan en el laboratorio de

microbiologa, adems, se identifica de qu estn los materiales y el funcionamiento
de los mismos.

Se identific que el principal equipo dentro de un laboratorio de microbiologa es el

autoclave y el principal instrumento es la asa de Kolle.

VI.

VII.

RECOMENDACIONES

Es importante recordar que la finalidad es determinar los microorganismos

presentes en la muestra por lo que es preciso extremar las precauciones para
evitar contaminaciones que den lugar a resultados errneos. Asegurarse que
los materiales estn bien esterilizados.

Utilizar una vestimenta adecuada, para evitar la contaminacin de la muestra

de estudio como mandil, mascarilla, guantes entre otros.

Todas las muestras deben ser manejadas con precaucin por su potencial
patogenicidad.

Nunca se puede tirar nada contaminado por el fregadero o al cubo de la basura

comn sin haber sido esterilizado previamente
CUESTIONARIO

Qu es esterilizacin?
Esterilizacin significa la eliminacin de toda forma de vida de un medio o material, lo
que se lleva a cabo generalmente por medios fsicos, por ejemplo, filtracin, o por
muerte de los organismos por calor, productos qumicos u otra va. Esta definicin
excluye por lo tanto cualquier tcnica que resulte solamente en un dao a los
microorganismos o atenuacin de la actividad de cualquier tipo (desinfeccin, Asepsia,
Pasteurizacin, etc). (Granados y Villaverde, 2003).

Describa las principales formas de esterilizacin. Materiales y equipos

Esterilizacin por agentes fsicos
1. Calor
Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la accin del calor. El
calor provoca desnaturalizacin de protenas, fusin y desorganizacin de las
membranas y/o procesos oxidativos irreversibles en los microorganismos.
La efectividad del calor como mtodo de esterilizacin depende de:

Temperatura
Tiempo de exposicin

1.1 calor hmedo

La autoclave es el aparato ms comnmente utilizado en los laboratorios para
esterilizar cultivos y soluciones que no formen emulsiones con el agua y que no se
desnaturalicen a temperaturas mayores a 100 C. Una temperatura de 121 C (una
atmsfera de sobrepresin) con un tiempo de exposicin mayor a 15 minutos sirve
para destruir organismos formadores de esporas.
1.2 Calor seco
La estufa de esterilizacin es el artefacto utilizado en los laboratorios para esterilizar
por calor seco. Se requiere mayor temperatura y tiempo de exposicin que el
autoclave. La temperatura vara entre 120 y 180C, requirindose distintos tiempos
de exposicin. A 140C se necesitan por lo menos 5 horas de exposicin, mientras
que a 160C se requieren al menos 2 horas de exposicin.
Sirve para esterilizar material de vidrio. El papel y el algodn no pueden ser
esterilizados a ms de 160C.
2. Radiaciones
Su accin depende de:

Tipo de radiacin
Tiempo de exposicin
Dosis

2.1 Ionizantes

Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los cidos nucleicos,
estructuras proteicas y lipdicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los
microorganismos.
Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolbiles
(termosensibles) como jeringas descartables, sondas, etc. Se utilizan a escala
industrial por sus costos.
No se utilizan para medios de cultivo o soluciones proteicas porque producen
alteraciones de los componentes.

2.2 Ultravioletas
Afectan a las molculas de DNA de los microorganismos debido a que forman dmeros
de pirimidinas adyacentes que inducen errores en la duplicacin y por lo tanto la
prdida de la viabilidad de las clulas. Son escasamente penetrantes y se utilizan para
superficies.
Esterilizacin por agentes qumicos
La efectividad de estos agentes depende de las condiciones bajo las que actan.
Concentracin: vara con el tipo de agente y de microorganismo, pues una misma
concentracin del agente puede producir un efecto diferente en distintos
microorganismos.
Tiempo: los microorganismos no son susceptibles a un agente en la misma forma, por
lo que no todos los microorganismos mueren al mismo tiempo.
pH: afecta tanto a los microorganismos como a los agentes qumicos. El aumento de
pH por encima de 7 incrementa la carga negativa de los microorganismos afectando la
concentracin del agente sobre la clula. El pH determina el grado de disociacin y la
efectividad del agente qumico, pues a menor disociacin mayor permeabilidad y
mayor efectividad.
1. Al d eh dos
Son agentes alquilantes que actan sobre protenas, lo que provoca modificacin
irreversible de enzimas e inhibicin de la actividad enzimtica (Adicin nucleoflica de
grupos -NH2 y -SH). Se utilizan como desinfectantes y esterilizantes. Destruyen
esporas.
El glutaraldehdo es el nico esterilizante efectivo en fro. El formaldehdo como gas se
utiliza para descontaminar edificios, ambientes, etc. El formaldehdo gaseoso se
obtiene por calentamiento del paraformaldehdo (OH (CH2O)n-H), lo que produce las
despolimerizacin de este compuesto y la liberacin de formaldehdo.

El formaldehdo tiene la desventaja de ser muy irritante y perder actividad en

ambientes refrigerados.

2. x i d o d e E t i l e n o
Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrgenos lbiles como los
que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos, hidroxilos, etc.
Es utilizado en la esterilizacin gaseosa, generalmente en la industria farmacutica.
Sirve para esterilizar material termosensibles como el descartable y plstico, equipos
electrnicos, bombas cardiorrespiratorias, etc. Es muy peligroso por ser altamente
inflamable y explosivo, y adems cancerigeno.
Esterilizacin por filtracin
Se usan membranas filtrantes con poros de un tamao determinado. El tamao del
poro depender del uso al que se va a someter la muestra. Hay que tener en cuenta
que los filtros que se utilizan generalmente en los laboratorios no retienen virus ni
micoplasmas, estos ltimos estn en el lmite de separacin segn el dimetro de poro
que se utilice.
Existen tres tipos bsicos de filtros:
Filtros profundos o Filtros de profundidad: consisten de un material fibroso o
granular prensado, plegado, activado, o pegado dentro de los canales de flujo. En este
tipo de filtros la retencin de las partculas se produce por una combinacin de
absorcin y de retencin mecnica en la matriz.
Membranas filtrantes: tienen una estructura continua, y la retencin se debe
principalmente al tamao de la partcula. Partculas ms pequeas al tamao del poro
quedan retenidas en la matriz del filtro debido a efectos electrostticos.
Filtros de huella de nucleacin (Nucleoporo): son pelculas muy delgadas de
policarbonato que son perforadas por un tratamiento conjunto con radiacin y
sustancias qumicas. Son filtros con orificios muy regulares que atraviesan la
membrana verticalmente. Funcionan como tamices, evitando el paso de toda partcula
con un tamao mayor al del poro.
La filtracin se utiliza para emulsiones oleosas o soluciones termolbiles. Su usa para
esterilizar aceites, algunos tipos de pomadas, soluciones oftlmicas, soluciones
intravenosas, drogas diagnsticas, radiofrmacos, medios para cultivos celulares, y
soluciones de antibiticos y vitaminas.

VIII.

IX.

BIBLIOGRAFA

Osorio, R. 2009. Manual de tcnicas de laboratorio qumico. Colombia.Editorial:

Universidad de Antioquia. 110 pg.

BIBLIOGRAFA ELECTRNICA

Granados, R. y Villaverde, C. 2003. Microbiologa-Tomo I. (En lnea). Consultado el

22 de agosto. 2016. Disponible en: https://books.google.com.pe/books?
id=sUrIecdf_O8C&printsec=frontcover&dq=esterilizacion+microbiologia&hl=en&sa
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