Bioanlisis de bajo costo en plataformas hbridas y microfludicas

Maowei Dou 1, Sharma Timilsina Sanjay, Merwan Benhabib, Feng Xu, y XiuJun Li

1 Departamento de Qumica, 5 Ingeniera Biomdica, 6 Centro de Investigacin

Biomdica Fronteriza, Universidad de Texas en El Paso, 500 West University Ave, El
Paso, Texas, 79968, EE.UU.
2 OndaVia San Francisco, California, 94102, EE.UU.,
3 El MOE Key Laboratorio de Ingeniera de Informacin Biomdica, Escuela de
Ciencias de la Vida y Tecnologa, 4 Bioinspired Ingeniera y Biomecnica del Centro,
Xi'an Jiaotong Universidad, Xi'an 710049, P.R. China
Autor correspondiente:
Dr. XiuJun (James) Li, xli4@utep.edu; Telfono: +1 (915) -747-8967; Fax: +1 (915) 747-5748.

Resumen: Los ensayos de bajo costo tienen amplias aplicaciones que van desde el
diagnstico de salud humana y la inspeccin de inocuidad de los alimentos hasta el
anlisis ambiental. Por lo tanto, los ensayos a bajo costo son especialmente atractivos
para las zonas rurales y los pases en desarrollo, donde los recursos financieros son
limitados. Recientemente, los dispositivos microfludicos basados en papel han surgido
como una plataforma de bajo costo que acelera grandemente el anlisis del punto de
atencin (POC) en entornos de bajos recursos. Este artculo revisa los avances recientes
del bioanlisis de bajo costo en plataformas microfludicas basadas en papel, incluyendo
plataformas de microfluidos hbridos de papel y papel. En este artculo de revisin,
primero se resumieron las tcnicas de fabricacin de plataformas de microfluidos
completamente papel, seguido de sus aplicaciones en el diagnstico de salud humana y
anlisis de seguridad alimentaria. Luego destacaron las plataformas de microfluidos
hbridos de papel y sus aplicaciones, porque las plataformas hbridas podan aprovechar
los beneficios de los mltiples sustratos de dispositivos. Finalmente, discutimos las
actuales limitaciones y tendencias de perspectiva de las plataformas microfludicas
basadas en papel para ensayos de bajo costo.
Palabras clave: Bioensayos de bajo costo, plataforma de microfluidos hbridos de
papel microfludica en laboratorio, diagnstico de enfermedades, anlisis de inocuidad
de los alimentos

Contenido

1. Introduccin
2. Plataformas Microfludicas Totalmente Papeleras
2.1.1 Tcnicas de Fabricacin de Plataformas Microfludicas de Papel
2.1.1.1

Bloqueo fsico de poros en papel

2.1.1.2

Deposicin fsica de reactivos en la superficie del papel

2.1.1.3

Modificacin Qumica

2.1.1.4

Otras Tcnicas

2.1.2 Aplicaciones de las plataformas microfludicas de papel

2.1.2.1

Diagnstico de la salud humana 2.2.1a Anlisis de protenas 2.2.1b

Anlisis de cidos nucleicos 2.2.1c Anlisis celular

2.1.2.2

Anlisis de inocuidad de los alimentos

3. Plataformas Microfludicas Hbridas de Papel

4. Conclusiones y Perspectivas Reconocimiento
1. Referencias

1. Introduccin

El micro-fluido laboratorio sobre chip (LOC), un dispositivo miniaturizado producido

principalmente por la tcnica de la microfabricacin, se ha desarrollado rpidamente en
las ltimas dcadas [1], desde su llegada en los aos noventa. Los dispositivos
microfludicos han sido ampliamente utilizados en diversas aplicaciones, especialmente
en bio-aplicaciones, gracias a sus ventajas significativas (por ejemplo, anlisis rpido,
bajo consumo de reactivos y alta eficiencia de separacin de electroforesis capilar)
asociadas con su inherente miniaturizacin, integracin, portabilidad y automatizacin. 10]. Se han desarrollado varios instrumentos modernos (por ejemplo, la reaccin en
cadena de la polimerasa en tiempo real, o qPCR [11, 12])

Para ensayos biolgicos y monitoreo ambiental. Sin embargo, muchos de estos

instrumentos son caros y voluminosos, lo que limita su uso en entornos de escasos
recursos. Dispositivos miniaturizados con alta portabilidad tienen un gran potencial para

el punto de atencin (POC) aplicaciones ms all de los ajustes de laboratorio, como el

diagnstico de enfermedades [13 - 16], la inspeccin de la inocuidad de los alimentos
[17, 18], y el anlisis ambiental [19 - 21]. Se han utilizado diversos materiales como el
silicio [22], el vidrio [23-28], el polmero (por ejemplo, polidimetilsiloxano (PDMS),
poli (metacrilato de metilo) (PMMA) [29-31] y el papel [32-36] para la microfludica
Fabricacin de la plataforma. Sin embargo, las diferentes propiedades de estos
materiales dieron lugar a enfoques de fabricacin y aplicaciones diferentes de sus
dispositivos correspondientes. Por ejemplo, debido al alto costo de los materiales, a la
falta de prototipos rpidos, a los requisitos estrictos en las instalaciones de salas blancas,
a la baja biocompatibilidad ya la dificultad de deteccin ptica, las plataformas
microfludicas basadas en silicio no son adecuadas para aplicaciones POC en entornos
de bajos recursos.

El papel es una red de fibra de celulosa barata y abundante con microestructuras

tridimensionales (3D) y una propiedad de relacin superficie-volumen alta. El papel de
celulosa biodegradable puede transportar fluidos a travs del efecto capilar sin
necesidad de bombas neumticas externas o de energa elctrica, haciendo del papel un
sustrato ideal para una solucin de prueba desechable sin necesidad de equipo. El papel
se ha utilizado para la qumica analtica y clnica desde principios del siglo XX [1]. el
De bajo costo y fciles de usar, para probar el pH, el embarazo y la diabetes.
Comercialmente disponible por dcadas. Dado que el grupo Whitesides introdujo
dispositivos microfludicos integrados en papel [37] para ofrecer plataformas LOC de
bajo costo y fciles de usar, el papel se ha convertido en uno de los sustratos ms
frecuentes para los bioensayos de bajo costo [34, 35, 38, 39 ], Tales como tiras
inmunocromatogrficas (ICS) para los ensayos cuantitativos o semicuantitativos [40].

Diferentes materiales tienen sus propias ventajas y limitaciones. A pesar de sus

importantes ventajas, el papel tambin tiene sus propias limitaciones. Por ejemplo, por
lo general, el papel no es transparente, aunque hay esfuerzos para desarrollar el papel
pticamente transparente [41, 42]. Los sustratos de papel carecen del alto rendimiento
en el control de flujo demostrado por sustratos polimricos. Por lo tanto, hbrido de
papel plataformas microfludicas se han desarrollado que puede sacar beneficios de
mltiples sustratos dispositivo [14, 15]. Estas plataformas hbridas incluyen sistemas
hbridos de papel / PDMS [14, 15, 36],

Papel / hilo de algodn sistemas hbridos [43, 44] y otros [45].

Este documento de revisin se centra principalmente en los avances recientes en el

bioanlisis de bajo costo utilizando plataformas microfludicas basadas en papel, ms
especficamente plataformas de microfluidos hbridos de papel y papel, especialmente
en entornos de escasos recursos. Primero se resumirn las tcnicas de fabricacin y las
aplicaciones de plataformas microfludicas totalmente basadas en papel, con nfasis en
aplicaciones en el diagnstico de la salud humana (a travs de protenas, cidos
nucleicos y anlisis celular) y anlisis de seguridad alimentaria. A continuacin,
destacaremos las plataformas de microfluidos hbridos de papel para varios bioensayos
de bajo costo. Finalmente, analizaremos las limitaciones actuales y las tendencias
prospectivas de las plataformas microfludicas basadas en papel.

2. Plataformas Microfludicas Totalmente Papeleras

2.1 Tcnicas de Fabricacin de Plataformas Microfludicas de Papel

Diferentes tipos de papel son adecuados como materiales de construccin para

plataformas microfludicas de papel, p. Papel de celulosa, papel / membrana de
nitrocelulosa. La seleccin del tipo apropiado se basa en las tecnologas de fabricacin y
el campo de sus aplicaciones. El papel de celulosa es ampliamente utilizado por la
mayora de los investigadores debido a su asequibilidad, propiedades hidrfilas
naturales y rpida penetracin de lquidos. Papel de filtro Whatman es el ms popular
entre los diversos tipos de papel de celulosa [20, 46-48], con porosidad bien
categorizada, caudal y retencin de partculas. Por ejemplo, como filtro de calidad
estndar, el filtro Whatman N 1 (tamao de poro 11 m) permite el flujo del medio y la
retencin de partculas, que es ampliamente adoptado ya que es compatible con muchas
tcnicas de modelado [20, 46, 47, 49- 55]. El papel de filtro Whatman N 4 tiene un
tamao de poro ms grande (20-25 m), lo cual es ideal para la tcnica de fabricacin
de la impresin de grabado que requiere un disolvente para hinchar las fibras de
celulosa y restringir el tamao de los poros. Debido a la alta porosidad del papel, los
electrodos se pueden imprimir manualmente sobre papel para la deteccin
electroqumica [19, 56]. El papel de celulosa qumicamente modificado mezclado con
una carga inorgnica (por ejemplo, polister) est disponible comercialmente como

sustrato de intercambio inico. Es no degradable y presenta una superficie ms lisa, que

es adecuado para la modificacin qumica de la superficie [19, 57]. La membrana
hidrofbica de nitrocelulosa es otro tipo importante de sustrato de papel. Con una
superficie lisa y un tamao de poro uniforme (0,45 m), permite un flujo de lquido ms
reproducible y estable. Este tipo de papel tiene un alto grado de propiedad de unin no
especfica hacia biomolculas, lo que lo hace adecuado para la inmovilizacin de ADN
[58], protenas [47, 50, 59-62] y las clulas [63].

Las plataformas microfludicas basadas en papel se basan en la accin capilar para hacer
circular los fluidos. Cuando se modelan con microestructuras, el papel se convierte en
una plataforma en la que la preparacin de la muestra, la purificacin y mltiples
biorreacciones pueden ocurrir simultneamente sin contaminacin cruzada.
Existen tres principios principales de modelado de microestructuras en plataformas
microfludicas de papel: bloqueo fsico de poros en papel, deposicin fsica de reactivos
sobre la superficie de la fibra y modificacin qumica de la superficie del papel. La
fotolitografa [64] y el trazado [65] son las principales tcnicas de bloqueo fsico de los
poros en papel, en el que el papel se trata con productos qumicos de fotorresistencia
(por ejemplo, SU-8) y PDMS para definir patrones. Las tcnicas de deposicin fsica de
reactivos sobre las superficies de las fibras incluyen grabado con chorro de tinta [66],
impresin de cera [62, 67], pantalla
Impresin [68], y flexografa de impresin [69], entre otros. El tratamiento con plasma
[70] y la impresin por chorro de tinta [48] son las principales tcnicas para la
modificacin qumica de la superficie del papel. En las siguientes secciones nos
centramos principalmente en la fotolitografa y la impresin de cera.

2.1.1 Bloqueo fsico de poros en papel

La tcnica de fotolitografa para modelar un dispositivo microfludico en papel requiere
una mquina copiadora o una impresora de chorro de tinta, luz UV y una placa caliente.
Los procedimientos de fabricacin que llevan menos de 30 min se describen en la
Figura 1 [64]. En primer lugar, se prepara una pelcula transparente, sobre la cual se
imprime el patrn microfludico. A continuacin, se impregna una hoja de papel con un
material fotorresistente (por ejemplo, SU-8) y posteriormente se incuba. Despus de la
incubacin, el lado frontal del papel tratado se cubre con una pelcula transparente (es
decir, una fotomscara) del ltimo paso, y el lado posterior se cubre con una hoja de

papel de respaldo negro para evitar la reflexin de la luz. Despus de la exposicin a la

luz UV, se cuece la hoja de papel y se elimina la fotoresistencia excesiva con una
mezcla de acetona y alcohol isoproplico. La fotolitografa es capaz de crear
caractersticas de hasta 100 m de tamao y barreras hidrofbicas de hasta 200 m de
ancho. El coste de material principal en la tcnica de patrones de fotolitografa es el
fotorresistente. Por ejemplo, SU-8 y PMMA cuestan $ 1/g y $ 0.15/g respectivamente
[65]. Esta tcnica requiere disolventes orgnicos, que pueden daar la flexibilidad del
papel, haciendo que los dispositivos de papel fabricados sean susceptibles de plegarse y
doblarse [54, 68, 71].

Comparado con el proceso fotolitogrfico multietapa, el trazado es una forma ms

directa de definir patrones hidrfobos en papel imprimiendo el polmero hidrofbico.
Como polmero barato, no txico y fcilmente disponible, PDMS se usa comnmente
en la tcnica de fabricacin de trazado. Bruzewicz et al. [65] primero investig esta
tcnica al modificar un trazador para imprimir una solucin de hexano de PDMS sobre
un papel de filtro como barreras hidrfobas. Este mtodo no
No daar la flexibilidad del papel, pero tiene otras limitaciones. Por ejemplo, puesto que
el papel es un sustrato poroso no uniforme, no permite una penetracin controlable de
PDMS [72]. En este caso, aunque la caracterstica ms pequea y la barrera se inform
que era de 1 mm, en la prctica, se necesitan canales de 2 a 4 mm de ancho, ya que las
lneas modeladas son casi rectas. Adems, consume mucho tiempo, lo que lleva 1 h a 70
C para que el PDMS cure [65].

2.1.2 Deposicin fsica de reactivos en la superficie del papel

En comparacin con la fotolitografa multietapa, la impresin de cera es ms

sencilla, menos costosa, ms flexible para cambios en el diseo del dispositivo y
adaptada a la fabricacin en masa. La cera es otro material plstico hidrofbico que
fue propuesto por el grupo de Whitesides y el grupo de Lin para las barreras
fludicas en el papel [62, 67]. La cera es barata, fcil de obtener, no txica,
biodegradable, insoluble en agua y maleable a temperatura ambiente. Esta tcnica
es rpida (~ 5 min) y no requiere ningn disolvente, dependiendo slo de dos
equipos: una impresora de tinta slida disponible comercialmente y una placa o
horno caliente. En la impresin de cera, primero se deposita un patrn de cera sobre

una hoja de papel usando una impresora de tinta slida. A continuacin, se calienta
el papel para fundir la cera y difundirla a lo largo de todo el grosor del papel. La
cera tiene la ventaja de evitar el uso de disolventes orgnicos. La desventaja de este
mtodo es que la cera fundida en papel se extiende en todas las direcciones por
capilaridad, lo que hace que los patrones estn mal definidos y carezcan de alta
resolucin. Sin embargo, para un tiempo de calentamiento dado a una cierta
temperatura, la distancia de dispersin es constante. Por ejemplo, se midi una
distancia de propagacin de 300 m cuando se calent a 150 C durante 120 s,
dando lugar a barreras y anchos de canal de 850 m y 560 m, respectivamente
[67]. Se han presentado varias soluciones para mejorar la resolucin. Por ejemplo,
mediante el uso de papel de nitrocelulosa que tiene poros ms uniformes y ms
pequeos, se informaron patrones de cera ms controlados y precisos con canales
tan finos como 300 m y barreras de 60 m [61].
En el vaco puede ser aplicado para minimizar la extensin lateral. La cera es
insoluble en agua, pero soluble en solventes orgnicos no polar, lo que puede hacer
con cera dispositivos impresos erosionar en disolventes orgnicos. Adems, los
colorantes en la cera capas pueden ser lixiviados por disolventes altamente
corrosivos, como los alcoholes, acetona y cloroformo.
En comparacin con la impresin de cera, la serigrafa es ms sencilla y
adecuada para los pases en desarrollo donde las impresoras de cera son costosas y no
son fcilmente disponibles [68]. La impresin requiere una pantalla de malla. Cera
slida pueden ser transferidos a travs de la malla cuando se presiona. Controlado por
el tamao de la malla, la cera est cargado y bloquea completamente las reas de
revestimiento sobre una hoja de papel. Entonces, al igual que la impresin de cera, la
cera en el papel se calienta para fundir para formar una barrera hidrofbica en todo el
grosor del papel. La penetracin de la cera puede ser controlada ajustando la
temperatura y el tiempo de calentamiento. Ha sido una relacin lineal encontrada
entre la anchura de la barrera hidrofbica depositado y el ancho del diseo en la

mscara. El mnimo de canal y anchos de barrera que puede lograrse mediante

serigrafa fueron de 0,65 mm y
1,3 mm respectivamente [68], mientras que el mnimo tamao de la funcin de
impresin de cera es de 300 m, indicando una mayor resolucin de impresin de
cera de serigrafa.
Grabado de inyeccin de tinta es tambin un mtodo simple para barreras
hidrofbico patrn utilizando una impresora. Se compone de dos pasos: papel de filtro
es primero empapado en una solucin de 1,0% en peso de poliestireno en tolueno
durante 2 horas para ser completamente hidrfobos modificados; a continuacin, el
papel se seca a temperatura ambiente durante 15 min, y estampada por inyeccin de
tinta de impresin de tolueno, que es para disolver el polmero y precisamente volver
a exponer las zonas hidroflicas para rutas de fluidos [66]. Por ejemplo, un flujo de
550 m de ancho canal fue impreso en el papel de filtro con inyeccin de tinta
aguafuerte con un rea de deteccin de 1,5 mm
Tiempo (~2 horas) con varias tiradas. Adems, se requiere una impresora de
inyeccin de tinta potencialmente costosas personalizada [68].
La impresin flexo grfica es una tcnica que los patrones de poliestireno en lmites
de papel cromatogrfico [69]. El poliestireno es uno de los ms populares de agentes
utilizados en esta tcnica, ya que es biocompatible y no requiere tratamiento trmico.
Patrones de poliestireno son formadas en el anverso de una hoja de papel con un 5%
de poliestireno parcialmente la tinta, que penetra en el grosor del papel. Una capa de
poliestireno uniforme est impreso en la parte posterior para impermeabilizar todo el
grosor del papel. Esta tcnica de impresin flexogrfica es compatible con rodillos a
la produccin en masa utilizando las herramientas disponibles en las imprentas.
Canales de 500 m de anchura con lmites de rugosidad se inform de 30 m, con
una mnima difusin de tinta lateral [69].
2.1.3 Modificacin qumica

La modificacin qumica de la superficie del papel es un enfoque ms sencillo y

asequible de poro o el depsito de llenado. Alquil ceteno dimero (AKD) y cido
succnico anhidro (ASA) son dibujos de bajo costo de los reactivos que se utilizan
comnmente para cambiar las propiedades humectantes de la pasta de celulosa y de
impartir la hidrofobicidad de esterificacin del grupo hidroxi de la celulosa [71]. Una
importante ventaja de este enfoque, el papel tratado pueda conservar su flexibilidad y
original, haciendo ms fcil su manipulacin y envasado. Adems, no hay marcas
visibles o cambios de color en las reas del papel hidrofbico, dispositivos, lo cual es
crtico para bioensayos basados colorimtrico.
Impresin de inyeccin de tinta que utiliza una impresora de inyeccin de tinta digital
con precisin puede depositar un AKD-heptan solucin para crear barreras
hidrofbico sobre papel [48]. Primero acalorados son dispositivos de papel despus
de la impresin para el curado. Entonces, bioindicadores en las zonas de deteccin
estn depositados utilizando la misma impresora. Como Una de bajo costo, fcil y
rpido proceso de fabricacin, la impresin de inyeccin de tinta puede ser adaptado a
la produccin en masa. Este proceso proporciona dispositivos de papel con finos
canales fluidos junto con plegado y conserva la capacidad de flexin [73]. Adems, al
ser una deposicin lquida sin contacto, se minimiza la contaminacin de la muestra
transversal y disminuye el riesgo de dao de sustrato, lo cual es muy conveniente para
la impresin de biomolculas [71, 74, 75].
2.1.4 Otras tcnicas

Impresin lser es un mtodo de estampacin de un paso que utiliza un lser de

CO 2 patrn zonas hidroflicas sobre un sustrato de papel hidrofbico, como
pergamino, cera o paleta papel [76]. Se forman grupos hidrfilos oxidado en el
tratamiento de la superficie del sustrato, el cual puede atrapar qumicos, pero no
permiten la difusin lateral de lquido. Alta velocidad y alta resolucin (62 m) puede
lograrse mediante esta tcnica.
Corte de Papel es el mtodo ms simple para fabricar dispositivos basados en
papel. El corte es rpido y slo requiere un par de tijeras, o equipos de corte
controlado por ordenador como una impresora lser cortador para patrones ms
complejos [14, 15, 56]. La cinta es necesaria para apoyar cualquier forma de libres
estructuras permanentes. Utilizando una cuchilla controlada por ordenador en un

plotter XY, Fenton et al., fabricado a base de nitrocelulosa en forma de dispositivos

de flujo lateral en dos dimensiones [47]. Despus, el dispositivo de corte de papel se
encuentra entre un vinilo y una pelcula de polister, minimizando la deshidratacin,
la evaporacin y evitar contaminaciones externas. El corte es adecuado para la
fabricacin en masa y compatible con cualquier tipo de sustratos celulsicos. El ms
pequeo posible las dimensiones de un brazo y un orificio de 1 mm y 0,7 mm de
dimetro, respectivamente. Sin embargo, la herramienta de corte es caro (~$5.000).
Adems, la fabricacin de 3D dispositivos basados en papel ha sido demostrada
mediante un adhesivo de doble cara [77].

2.2 Aplicaciones de plataformas Microfludico basados en papel

2.2.1 Salud Humana Diagnostico

Las seales fisiolgicas que reflejan los cambios en el estado biolgico de una
persona insana puede evaluarse mediante pruebas de biomarcadores de enfermedad o
indicadores moleculares de normal, patognicos, tratamiento o procesos de
recuperacin. Estos biomarcadores incluyen los cidos nucleicos (DNA o RNA),
protenas, lpidos, o metabolito biomarcadores, son muy especficas y, por tanto,
puede ser utilizado para diagnosticar diversas enfermedades con precisin [78-80].
Por ejemplo, el antgeno prosttico especfico (PSA) ha sido ampliamente utilizado
para la pantalla y controlar el cncer de prstata [81]. Los mejores biomarcadores
debe ser precisa, como no-invasiva posible, y fcil de usar para la prueba. Tejido,
muestras de orina y suero han sido ampliamente utilizado como fuente de
biomarcadores. Adems, la plataforma de estos biomarcadores de diagnstico debera
ser asequible, sensible, amigable, y la masa puede fabricar para POC anlisis segn la
OMS. Plataformas microfludico basados en papel, como mencionado antes, es un
fuerte contendiente de bajo costo para este tipo de diagnstico. Los recientes avances
en bioensayos basados en papel para diagnstico de la salud humana se puede dividir
en las siguientes tres categoras: protenas, cidos nucleicos y celdas, basadas en
diferentes categoras de analitos.
2.2.1a anlisis de protenas

Las protenas son una especie de las ms utilizadas de biomarcadores para

diagnstico de la enfermedad. Anlisis de protenas que a menudo utiliza tcnicas de
inmuno ensayo incluye prueba de inmuno absorcin enzimtica (ELISA), inmuno
fluorescencia, [82] [83], [84] y [85] de inmuno difusin. Tradicionalmente, la
mayora de estos mtodos de deteccin son complicados y requieren instrumentos
costosos. Por ejemplo, ELISA es una de las tcnicas ms comnmente utilizadas. Sin
embargo, se tarda horas en completarse (o incluso por la noche) y se basa en
instrumentos costosos (por ejemplo, lectores de microplacas) [86, 87]. Por lo tanto,
existe una gran necesidad de desarrollar de bajo costo, simple y rpido POC
Enfoques de diagnstico con alta sensibilidad, especialmente en entornos con
recursos limitados. Recientemente, una serie de plataformas basadas en papel
microfludico fueron notificadas para el anlisis de los biomarcadores de protenas de
los cnceres y las enfermedades infecciosas mediante colorimetra, fluorescencia,
electroqumicos y electro quimioluminiscencia (ECL) mtodos de deteccin.
Inmuno ensayo colorimtrico, uno de los ms ampliamente utilizados, los
mtodos de deteccin se basan en el cambio de color debido a la reaccin qumica
entre las enzimas vinculadas a los analitos y los reactivos colorimtricos. Muchos
investigadores han hecho notables avances en el campo. Por ejemplo, Martnez et al.
[37] demostraron un simple dispositivo microfludico basados en papel para la
deteccin simultnea de glucosa y una protena seroalbmina bovina (BSA) en 5

de orina. El ensayo de glucosa enzimtica se basa en la oxidacin del yoduro a yodo,

resultando en un cambio de color, de claro a marrn. El ensayo de protenas se basa
en el cambio de color de azul (TBPB tetrabromophenol). Cuando fue ionizado y
enlazado a la protena, el color cambia de amarillo a azul. Muestras artificiales de
glucosa y protena en rangos clnicamente relevantes (2.5-50 mM para glucosa y
0.38-7.5

M para la albmina srica bovina) fueron medidos. (Cheng et al.) [60]

descritos ELISA colorimtrico realizado en un 96-microzone dispositivo basado en

papel (P-ELISA). Este dispositivo basado en papel- incluye una matriz (12 8 zonas
de ensayo) de la circular (el mismo diseo y dimensiones estndar de plstico como
una placa de 96 pocillos) para ejecutar mltiples P-ELISA en paralelo. ELISA se
realiz mediante la enzima fosfatasa alcalina y BCIP/NBT (5-bromo-4-chloro-3indolyl fosfato y azul de nitro tetrazolium) como sustrato. El lmite de deteccin
(LOD) de IgG de conejo con el P-ELISA fue encontrado para ser 54 fmol/zona.

Tambin demostr la deteccin de antgeno sobre VIH-1 gp41 en una muestra de

suero humano pas. El resultado positivo se distingue incluso despus de diez veces
la dilucin del suero humano. (Songjaroen et al.) [88] ha desarrollado un dispositivo
microfludico basados en papel para separar el plasma sanguneo de la sangre entera y
cuantificacin de protenas plasmticas en un solo paso, que fue significativa para los
consiguientes diagnsticos. El dispositivo constaba de membrana de separacin de
sangre combinado con estampados de papel Whatman N 1. Sin dilucin, plasma fue
efectivamente separados de una sola gota de sangre entera (15- 22

L) en una amplia

gama de hematocrito (24-55%) dentro de los 2 min. la protena plasmtica utilizando

deteccin de verde de bromo resol (BCG) ensayo colorimtrico no mostraron
diferencia significativa respecto de los mtodos convencionales (p0,05

par t-test).

La quimioluminiscencia se basa en la medicin de la luz emitida por ciertas

reacciones qumicas. Wang et al. [89] informaron de un dispositivo microfludico
basados en papel para realizar la quimioluminiscencia ELISA. En esta plataforma,
capturar los anticuerpos fueron inmovilizadas en el papel a travs de zonas
hidroflicas

glutaraldehdo

reticulado.

4-iodophenol

mejorada

del

luminol

quimioluminiscencia ensayo fue realizado en la peroxidasa de rbano (HRP)anticuerpos marcados. ELISA de quimioluminiscencia se realiz exitosamente con un
rango de deteccin lineal de 0.1-35.0 ng/mL para

- alfafetoprotena (AFP, un

biomarcador para el carcinoma hepatocelular), 0.5-80.0 U/mL de antgeno del cncer

125 (CA-125, un biomarcador para el cncer de ovario) y 0.1-70.0 ng/mL de antgeno
carcino embrionario
(CEA, un biomarcador para cncer color rectal). Adems, este laboratorio en papel
immuno device puede proporcionar resultados reproducibles en almacenamiento a
4 0C (sellados) por al menos 5 semanas.
Electro quimio luminiscencia (ECL) que combina tcnicas electroqumicas y
luminiscencia puede proporcionar una buena selectividad y sensibilidad en donde un
juego

de electrodos se usa para iniciar

y controlar

una reaccin de

quimioluminiscencia que impliquen un luminophore compuesto. Li et al. [90]

demostraron una pila genera ECL inmuno ensayo multiplexados mediante una doble
estrategia de amplificacin de la seal en un dispositivo microfludico basados en
papel. Se utiliz un xido de grafeno quitosano/nano partculas de oro (GCA)
plataforma y P-cido nano porosos funcionalizadas plata (P- cido/NPS) para la

amplificacin de la seal. Ellos demostraron que el antgeno prosttico especfico

(PSA) y El antgeno carcinoembrionario (CEA) podra ser secuencialmente
detectados en los rangos de 0.003-20 lineal ng/mL y 0.001-10 ng/mL con el LDD
hasta 1,0 y 0,8 pg/mL, respectivamente. Ge et al. [13] demostraron una cera-telas 3D
basados en papel plataforma microfludico ECL con pantalla- impreso los electrodos
para la medicin de cuatro biomarcadores tumorales en muestras de suero clnico real.
Como se muestra en la figura 2, cuatro diferentes Anticuerpos de captura para AFP,
CA-125, antgeno de Cncer 19-9 (CA19-9, biomarcador para el cncer de pncreas)
y ACE fueron inmovilizados en ocho electrodos colocados secuencialmente en el
circuito para activar la reaccin ECL. Los lmites de deteccin en una relacin sealruido de 3 resultaron ser de 0,15 ng/mL, 0,6 U/mL, 0,17 U/mL y 0.5 ng/m para AFP,
CA-125, CA19-9 y CEA, respectivamente.
Deteccin electroqumica es otra de las ms utilizadas en los mtodos de
deteccin basados en papel microfludico plataformas debido a la facilidad de la
miniaturizacin y la integracin de los electrodos en un dispositivo microfludico
Li et al. [33] describieron un ELISA electroqumica en un dispositivo microfludico
basados en papel, en el que trabajar y contador serigrafiada electrodos de grafito, tinta
y un electrodo de referencia de plata/cloruro de plata de tinta. La electroqumica de
ELISA IgG fue demostrado con LOD de 3.9 fM alcanzados. Wang et al. [91]
demostraron el inmuno ensayo electroqumico de CA-125 y CEA en 3D en un
entramado de cera plataforma microfludico basados en papel. Los anticuerpos para el
CA-125 y CEA se encontraban inmovilizados en papel con el quitosano y reticulado
con glutaraldehdo, permitiendo que ambos marcadores tumorales se detectan
simultneamente. La deteccin simultnea de dos marcadores tumorales en muestras
de suero clnico real mostr un intervalo lineal de 0.001-75.0 U/mL para CA-125 y
0.05-50.0 ng/mL para CEA. Los lmites de deteccin para CA-125 y CEA fueron 0,2
mU/mL y 0,01 ng/mL, respectivamente.
Deteccin por fluorescencia en plataformas basadas en papel microfludico ha
mostrado un buen rendimiento analtico. (Liang et al). [92] demostraron una tira de
papel para la deteccin de inmuno ensayo de fluorescencia y IgG. Poliestireno (PS)
micro bolas conjugado con primario de cabra anti-IgG se vieron inmovilizadas en
tiras de papel para la captura de IgG. De cabra anti-IgG-Cy3 fue utilizado como
anticuerpo secundario para deteccin por fluorescencia. El ldd de 20 ng/mL se

consigue mediante una matriz de fluorescencia escner. Yu et al. [93] utilizado

divinyl sulfona (DVS) la qumica para inmovilizar pequeas molculas, protenas y
ADN covalentemente al grupo hidroxilo del papel de celulosa para deteccin por
fluorescencia. Protenas, carbohidratos y protenas-glicoprotena interacciones, as
como la hibridacin de oligonucletidos indic que la membrana bioactividad era
especfica, dosis-dependientes, y estable durante un largo perodo de tiempo.
Deteccin por fluorescencia demostr que DVS-celulosa de papel modificado fue
adecuado para la conjugacin de los hidratos de carbono y en el anlisis de la
interaccin biolgica. El ldd de cido nucleico fue tan baja como 500 pM. Este tipo
de qumica DVS podra utilizarse para la conjugacin de biomolculas para
aplicaciones biomdicas de diagnsticos de la salud humana. Aunque las
sensibilidades altas podran obtenerse mediante un inmuno ensayo de fluorescencia
basado en papel, la instrumentacin externa como un escner de fluorescencia es a
menudo necesario, lo cual limita su aplicacin para bioensayos POC.
Superficie de resonancia mejorada dispersin Raman (SERR) tambin ha sido
empleada en el papel- basado inmuno ensayo. Por ejemplo, (Chen et al.) [94]
demostraron un inmuno ensayo SERR basados en papel. Usaron anticuerpos
modificados, conjugada con bolitas magnticas para capturar IgG de ratn. La
deteccin se realiz en un coloide de plata/PVP/filtro de papel SERR sustrato.
Despus de la separacin magntica, la 5-bromo-4-chloro-3-indolyl BCIP (fosfato),
una baja de SERR compuesto activo, fue agregado como sustrato para ALP a generar
un alto SERR respuesta, que podra detectar IgG de ratn desde 1-500 ng/mL con un
LOD de 0,33 ng/mL.

2.2.1b Anlisis de cidos nucleicos

El anlisis de cidos nucleicos ha sido ampliamente utilizado en muchas reas,

incluyendo el diagnstico clnico. Puede detectar los agentes etiolgicos de
enfermedades directamente a partir de muestras clnicas, lo cual es muy til en la
deteccin rpida de microorganismos unculturable o fastidioso. Adicionalmente,
permite confidencial de identificacin y caracterizacin de patgenos mediante
amplificados de DNA/RNA microbiano. Normalmente, una cantidad limitada de

ADN/ARN est disponible (por ejemplo, una nica copia de ADN de una clula
especfica), especialmente cuando se analizan muestras biolgicas humanas. Por lo
tanto, la amplificacin de la secuencia de destino es un paso clave en el anlisis de
cidos nucleicos para aumentar la sensibilidad del mtodo [95]. cido Nucleico
biomarcadores pueden ser cuantificados o cuantific durante el paso de amplificacin
(por ejemplo, por la polimerasa en tiempo real reaccin o qPCR [96]), o tras el paso
de amplificacin (por ejemplo, mediante hibridacin de ADN).
Como un bajo costo, porttiles, desechables y rpido mtodo de deteccin de cidos
nucleicos, microfludico basadas en papel de hibridacin de cidos nucleicos ha
despertado gran inters entre los investigadores. (Arajo et al.) [97] presentado un
activado basado en papel tira microfludico Cy3-etiquetados de rodamiento de un solo
filamento de ADN (sonda) para una rpida hibridacin de destino a travs de
transporte capilar. Mediante el barato y fcilmente disponible bifuncional reactivo de
vinculacin, 1,4-phenylenediisothiocyanate, un solo paso la activacin del papel de
filtro Whatman n 1 fue desarrollado, hacindolo susceptible de acoplamiento
posterior de marcados con C y 3. A causa de la intrnseca capacidad de absorcin de
la matriz de papel, lo que facilit la rpida muestra a travs de matrices de elucin de
la sonda, la hibridacin de ADN se logr en menos de 2 min. La banda microfludico
basados en papel para una rpida y diagnsticos especficos de ADN qued
ejemplificado por la discriminacin de las ampliaciones generados desde canino y
humano y mitocondrial de ADN genmico en simulacros de muestras forenses.
(Cheng et al.) [98] informaron de un Ensayo colorimtrico basado en papel para la
vigilancia del virus del dengue mediante el examen de los productos amplificados.
Los resultados indicaron que su dispositivo microfludico en papel era capaz de
detectar los productos amplificados con una concentracin de 6 x 105 unidades
formadoras de placa (pfu) / mL (300 ng / ml). Cunningham et al. [99] inform de un
barato de papel microfluidic dispositivo para la deteccin cuantitativa de cidos
nucleicos, que se bas en el principio de la meta inducida por la conformacin de
conmutacin de un aptmero vinculado a una etiqueta electroqumica. El LOD para
ADN fue de 30 nM, y se demostr una buena reproducibilidad. Ihalainen et al. [100]
desarrollaron dos diferentes arquitecturas de reconocimiento supramolecular para la
deteccin impedimtrica de hibridacin de ADN en los electrodos de oro impresos
por inyeccin de tinta en papel. La primera arquitectura comprende capas alternas de

monocapa de autoensamblaje biotinilado (SAM), estreptavidina y la sonda de ADN

biotinilada. La segunda arquitectura consiste en una sonda de ADN funcionalizada
con tiol inmovilizada (HS-DNA) y posterior relleno con SAM-11-mercapto-1undecanol (MUOH). De acuerdo con los resultados de la medicin de espectroscopia
de impedancia electroqumica (EIS), mostr que la hibridacin podra detectarse con
espectroscopia impedimtrica en el intervalo de picomol para ambos sistemas. Wang
et al. [101] inform de un papel de base photoelectrochemical (PEC) microfluidic
plataforma para la deteccin de ADN sensible, que utiliza un grafo-modificado
poroso Aupaper electrodo como el electrodo de trabajo para obtener PEC respuestas
mejoradas. El mecanismo de cuantificacin se bas en la carga de un nuevo
supercapacitor de papel (PS) construido sobre la plataforma por la fotocorriente
generada. El PS se cortocircuit automticamente despus de un perodo de tiempo
fijo para emitir una corriente instantneamente amplificada, que fue detectada
sensitivamente por un multmetro digital terminal (DMM) integrado con la
plataforma microfludica. Se demostr que esta plataforma microfludica basada en
papel podra detectar ADN a nivel femtomolar.
A pesar del buen rendimiento de la hibridacin de cido nucleico basada en papel
microfludico para la deteccin de cido nucleico, los ensayos basados en hibridacin de
ADN en dispositivos basados en papel todava se basan en un proceso de amplificacin
de cido nucleico realizado fuera de chip que a menudo requiere soporte de equipos
caros y voluminosos en laboratorio Configuracin. Todava es difcil integrar etapas de
amplificacin de ADN en un dispositivo basado en papel, debido a problemas de
evaporacin de lquidos y requisitos de elementos de calentamiento.
2.2.1c Anlisis celular
Se han desarrollado varios cito-sensores basados en deteccin quimioluminiscente,
fluorescente, electroqumica, electroquimioluminiscencia y colorimtrica para la
deteccin de clulas cancerosas y otros tipos de clulas de mamfero con alta
selectividad y sensibilidad. El desarrollo de cito-dispositivos basados en papel
microfludico de bajo costo y fciles de usar ofrece un potencial alentador para la
deteccin miniaturizada y de alto rendimiento de clulas cancerosas o bacterias, la
separacin de clulas sanguneas y el cultivo de clulas 3D.

Se han desarrollado varios cito-sensores basados en papel para la investigacin del

cncer. Wu et al. [102] desarroll un microfludico de papel electroquimioluminiscencia
origami cito-dispositivo (-PECLOC) para la captura especfica de las clulas
cancerosas, lo que indica las posibles aplicaciones de mltiples cncer temprano
diagnstico y tratamiento clnico. Se utilizaron electrodos Au / papel modificados con
aptmeros en el -PECLOC como electrodos de trabajo. Debido al reconocimiento
especfico de la manosa en la superficie celular, las nanopartculas de aleacin de Au /
Pd conjugadas con concanavalina-A se introdujeron en el -PECLOC como nanolabeles
promovidos catalticamente para la deteccin de peroxidisulfato ECL. El PECLOC
demostr un buen rendimiento analtico hacia el citoensayo de cuatro tipos de clulas
cancerosas (clulas de adenocarcinoma de mama humano (MCF-7), clulas de leucemia
promieloctica aguda humana (HL-60), clulas de leucemia mielgena crnica humana
(K562) y Clulas de leucemia linfoblstica aguda humana (CCRF-CEM)) con buena
estabilidad, reproducibilidad y precisin. La linealidad para las clulas MCF-7 estaba en
el intervalo de 450-1,0 107 clulas / ml con LOD de 250 clulas / ml. La
reproducibilidad se investig en base a la precisin inter-ensayo entre 10 -PECLOCs.
Las desviaciones estndar relativas para la deteccin paralela de 500, 104 y 107 clulas
MCF-7 / mL fueron 3,64%, 3,33% y 3,76%, respectivamente. Su et al. [103] desarroll
un cito-dispositivo electroqumico basado en papel microfludico (-PECD) para la
deteccin de clulas cancerosas y el cribado in situ de frmacos contra el cncer de una
manera multiplex basada en el cultivo de clulas 3D en el electrodo. Este -PECD
entero se fabric en una sola hoja de papel plano en lotes basados en el principio de
kirigami y origami, con electrodos de Au / papel modificados con aptamer integrados en
el chip. Este -PECD, podra responder a cuatro clulas de leucemia promieloctica
aguda humana (HL-60) en un volumen de 10 L con un amplio rango de calibracin
lineal de 5.0 102 a 7.5 107 clulas / mL. El LOD para clulas HL-60 se calcul que
era de 350 clulas / ml. Adems, el cribado de frmacos anticancergenos in situ se
implement con xito en este -PECD mediante la monitorizacin de las clulas
cancerosas apoptticas usando el mtodo de voltametra de pulso diferencial de
respuesta rpida (DPV), despus del cultivo de clulas 3D en electrodo con cultivo que
contiene frmaco anticanceroso medios de comunicacin. Su et al. [104] aplic adems
el -PECD a la evaluacin in situ de multi-glicano expresiones de clulas cancerosas
vivas. De forma similar, se emplearon electrodos de Au / papel y se intercalaron con

sondas electroqumicas de HRP-lectina para la deteccin de clulas. Se detectaron

clulas eritroleucmicas humanas (clulas K562) con un intervalo lineal de 550 a 2.0
107 clulas / ml con el LOD calculado de 400 clulas / ml. El -ELPCD se aplic
entonces con xito para determinar las expresiones de las clulas multiglycans
superficie en las clulas vivas en respuesta al tratamiento con frmacos a travs de inelectrode 3D de clulas de cultivo.
Li et al. [105] investigaron la influencia de las estructuras de papel (madera de conferas
y fibras de madera dura) en el rendimiento de los dispositivos analticos microfludicos
en papel para el transporte de glbulos rojos (hemates) para la tipificacin de la sangre.
Las estructuras de poros se caracterizaron por emplear porosimetra de mercurio. Se
demostr que las fibras de madera dura con un bajo peso base y una mayor porosidad
permitan el fcil transporte de los glbulos rojos y mostraban ensayos de alta claridad
en la tipificacin de la sangre. Por otro lado, las fibras de madera blanda con una
estructura de poros ms compleja, hacen que el transporte de hemates sea ms difcil y
la claridad baja en la tipificacin de la sangre.
El grupo de Whitesides fue pionero en una plataforma microfludica de papel de bajo
costo para el cultivo de clulas 3D para imitar las funciones a nivel de tejidos y rganos
[106, 107]. Primero modelaron las barreras hidrofbicas en capas individuales de papel
cromatogrfico mediante impresin de cera. A continuacin, varias capas de papel
impregnadas con suspensiones de clulas en el hidrogel de matriz extracelular se
apilaron para imitar la arquitectura de oxgeno 3D y gradiente de nutrientes in vivo.
Despus del cultivo en 3D, esta plataforma microfludica apilada en papel podra ser
desestabilizada, proporcionando un anlisis molecular capa por capa nico. Cultivos
celulares en el apilado, paper-supported geles proporcion una plataforma flexible para
el estudio de la respuesta gentica y las respuestas celulares a los gradientes moleculares
3D [106].
Li et al. [108] demostraron un disco de prueba de POC basado en papel para el anlisis
multiplexado de bacterias de clulas enteras. Se utilizaron nanopartculas de oro
conjugadas con anticuerpos como el agente de sealizacin para el ensayo de flujo
lateral (LFA) de antgenos de clulas enteras de Pseudomonas aeruginosa y
Staphylococcus aureus. La intensidad de color de las nanopartculas de oro acumuladas
en la regin de ensayo se convirti en una lectura de voltaje cuantitativo proporcional a

la concentracin bacteriana. El intervalo de deteccin de bacterias fue de 500-5000

unidades formadoras de colonias (ufc) / mL para cada uno de los agentes infecciosos
ensayados.

Preechakasedkit

et

al.

[109]

desarrollaron una prueba de tira

inmunocromatogrfica basada en papel con nanopartculas de oro para la rpida

deteccin de Salmonella typhi en suero humano. El inmunoensayo se realiz uniendo
antgeno y anticuerpo de Salmonella typhi sobre una membrana de nitrocelulosa. Se
encontr que el LOD era de 1,14 105 cfu / mL, que se poda detectar visualmente a
simple vista en 15 minutos.
2.2.2 Anlisis de seguridad alimentaria
Los residuos de plaguicidas y los patgenos transmitidos por los alimentos, presentes en
los alimentos o piensos, estn causando ms problemas de salud pblica en todo el
mundo y constituyen un importante problema de seguridad debido a su infectividad y
toxicidad para los seres humanos. Por lo tanto, el desarrollo de estrategias de bajo costo
para un anlisis rpido de la inocuidad de los alimentos de POC sin la necesidad de
instrumentacin sofisticada es una necesidad urgente. Los sensores basados en papel
microfludicos baratos, porttiles, desechables y fciles de usar han sido desarrollados
para anlisis porttiles de seguridad alimentaria.
La acetilcolinesterasa (AChE) que inhibe los productos qumicos, sobre todo los
pesticidas organofosforados y carbamatos al interferir o inhibir la colinesterasa, es un
residuo importante de plaguicidas, que puede ser venenoso para los seres humanos
[110]. En el cuerpo, cuando tal inhibicin excesiva conduce a bajos niveles de
colinesterasa, el sistema nervioso puede funcionar mal, y puede resultar la muerte. Por
lo tanto, muchos investigadores desarrollaron biosensores basados en papel para la
deteccin de trazas de productos qumicos que inhiben la AChE. Por ejemplo, Hossain
et al. [111] inform de un papel de base en fase slida biosensor para la deteccin de los
inhibidores de la AChE, incluyendo paraoxon y aflatoxina B1. Este biosensor de fase
slida basado en papel utiliz la impresin por inyeccin piezoelctrica de tintas
biocompatibles, dopadas con enzimas, basadas en sol-gel para crear tiras sensoriales
colorimtricas. Polivinilamina que captur agentes aninicos se imprimi primero y
luego AChE se sobreimprime intercalando la enzima entre dos capas de gel de slice
derivadas de sol biocompatible en el papel. Mediante la medicin de la actividad
residual de AChE en el papel, inhibidores de la AChE se detectaron con xito utilizando

el ensayo colorimtrico de Ellman con un buen nivel de detalle, que eran ~ 100 nM para
paraxn y ~ 30 nM para
Aflatoxina

B1,

respectivamente. Este

grupo

tambin

ha

desarrollado

un biosensor bioactivo sin reactivo en fase slida basado en papel para la deteccin de
inhibidores de la AChE, tales como pesticidas organofosforados [18]. Se logra una
buena LOD (bendiocarb ~ 1 nM; carbaril ~ 10 nM; paraxn ~ 1 nM; malatin ~ 10
nM). Este ensayo bioactivo basado en papel se aplic para estudiar los residuos de
plaguicidas recogidos de muestras de alimentos tales como leche y jugo de
manzana. Mostr efectos de matriz despreciables y un buen acuerdo con un mtodo
convencional de ensayo de espectrometra de masas, demostrando su aplicabilidad para
pruebas rpidas de los niveles de trazas de pesticidas organofosfato y carbamato en el
anlisis de muestras de alimentos. Kavruk et al. [112] desarrollaron un sensor de
inhibidor de la AChE basado en papel para la deteccin de los productos de degradacin
de los plaguicidas organofosforados. El LOD de malatin fue tan bajo como 2,5
ppm. Adems, entre la BSA, la glucosa y la trehalosa, se encontr glucosa como el
mejor estabilizante para mejorar el desarrollo del color y la vida til, especialmente para
pruebas visuales, con la estabilidad operativa confirmada mediante pruebas de 60 das
de almacenamiento a 4C. Todos estos bioensayos mencionados anteriormente
mostraron un buen LOD en 5 minutos. Adems, la deteccin se realiz a simple vista,
evitando la necesidad de instrumentacin sofisticada y costosa.
Con alta severidad, frecuencia de enfermedad y nmero desproporcionadamente alto de
muertes, Escherichia coli, Salmonella spp., Listeria monocytogenes y se clasifican en la
parte superior de la lista Patgenas de patgenos bacterianos transmitidos por los
alimentos. Jokerst et al. [113] desarrollado un dispositivo de microfluidos en papel para
el

cribado

de Escherichia

coli O157:

H7, Salmonella typhimurium, Listeria

monocytogenes y en muestras de alimentos. Se desarroll un ensayo de microspot

basado en papel usando la impresin de cera sobre papel de filtro. Diferentes enzimas
asociadas con los tres agentes patgenos reaccionaron con diferentes sustratos
cromognicos, dando lugar a diferentes cambios de color para la deteccin
multiplexada. Como

se

muestra

en

la Figura 3a, cuando

se

combina

con

procedimientos de enriquecimiento (12 h o menos), el dispositivo fue capaz de detectar

bacterias en concentraciones en listos para el inoculado

carne (RTE) tan baja como 10 ufc / cm2. Park et al. [114] desarrollaron un dispositivo
basado

en

el

papel

de Salmonella mediante

de
una

microfluidos
aplicacin de

para

la

telfono

deteccin

cuantitativa

inteligente. Ellos

primero

precargados anti submicroparticulas conjugados Salmonella Typhimurium en cada canal

de microfluidos del dispositivo de papel, despus de mojar el dispositivo de
microfluidos papel ensoluciones de Salmonella, lo que lleva a las partculas de
anticuerpo

conjugado

confinados

dentro

de

las

fibras

de

papel

para

immunoaglutinacion. Despus de eso, las imgenes digitales fueron tomadas por un

telfono inteligente programada en un ngulo y distancia optimizada, de la que la
exten t de inmunoaglutinacin se cuantific mediante la evaluacin de la dispersin de
Mie para calcular y mostrar la concentracin bacteriana. La clula de un solo nivel LOD
(de una muestra de 10 l) se logr dentro de un minuto, como se muestra en
la Figura 3b.
El monitoreo de la vida til del producto es crtico para el control de la calidad de los
alimentos y el monitoreo de la incidencia de patgenos transmitidos por los
alimentos. Nie et al. [115] desarrollaron un dispositivo microfludico electroqumico en
papel que utiliz un glucmetro comercial para medir la concentracin de etanol en los
productos alimenticios en el sitio. El grfico de calibracin para el anlisis de etanol
mostr un intervalo lineal de 0,1 a 3 mM, con LOD de 0,1 mM.
3. Papel plataformas de microfluidos Hbridos

Desde el advenimiento de lab-on-a-chip en la dcada de 1990, el silicio, vidrio de

microfluidos, diversos polmeros, y papel se han utilizado para la fabricacin del
dispositivo de microfluidos. Cada material tiene sus ventajas y limitaciones propias
tambin. Por ejemplo, la facilidad y el bajo costo de la litografa suave y las propiedades
pticas atractivas de PDMS, han hecho PDMS dispositivos de microfluidos
ampliamente utilizados en bio aplicaciones de microfluidos [30, 116]. Sin embargo, los
microdispositivos PDMS se asocian a menudo con modificaciones complicadas
adicionales de superficie qumica para la inmovilizacin de la sonda. Recientemente,
dispositivos de microfluidos en papel han proporcionado una nueva plataforma de bajo
costo para diferentes aplicaciones relacionadas con la asistencia sanitaria y el anlisis de
la seguridad alimentaria en comunidades de escasos recursos [34, 38, 117,118]. barreras
hidrfobo puede ser modelada fcilmente en capas individuales de cromatogrfico papel

para formar canales de microfluidos [35], sin los estrictos requisitos de sala limpia
instalaciones. El papel poroso es compatible con muestras biolgicas, proporcionar un
sustrato

3D

para

de

almacenamiento

de

reactivo,

la

proteccin

la

reaccin. dispositivos de microfluidos en papel, sin embargo, por lo general hacer no

ofrecer el alto nivel de rendimiento y funcionalidad que ofrece PDMS en el flujo de
lquido el control y la entrega. Por lo tanto, los investigadores introdujeron un nuevo
tipo de microfluidos hbrido de papel dispositivos que extraen beneficios de ambos
sustratos de dispositivos [14, 15, 43, 44]. Como se describi anteriormente, ya que los
dispositivos de microfluidos PDMS implicados a menudo complicado modificacin de
la superficie y los dispositivos de microfluidos en papel no proporcionan un alto
rendimiento en control y suministro de flujo, el grupo Li desarroll el primer papel /
PDMS biochip hbrido para patgeno deteccin de [14], con xido de grafeno aptmero
funcionalizado (GO) nano-biosensores integrado en el chip para, de un solo paso, la
deteccin de patgenos multiplexado simple. El papel poroso dentro de los pozos de
deteccin proporciona un sustrato

3D sencilla para

la

inmovilizacin de

nanosensores. Como se muestra en la Figura 4 , el sustrato de papel utilizado en este

biochip hbrido facilit la absorcin fsica de biosensores aptmero, sin ningn
tratamiento de la superficie o de la sonda aptmero complicado inmovilizacin.
Lactobacillus acidophilus se utiliz como un modelo de bacteria para desarrollar la
plataforma de microfluidos con la LOD de 11,0 UFC / ml. Este sistema hbrido tambin
se ha ampliado con xito a la deteccin simultnea de dos patgenos transmitidos por
los

alimentos

infecciosas

(por

ejemplo, Staphylococcus

aureus y

Salmonella

enterica ). El 'enciende' en una sola etapa de ensayo patgeno en el biochip de

microfluidos hbrido slo nos llev unos 10 minutos para completar.
Aunque el mtodo antes mencionado se puede medir directamente microorganismos sin
preparacin de la muestra complicado debido a la utilizacin de aptmeros, la
sensibilidad podra no ser tan alto como los mtodos basados en la amplificacin de
ADN. Con el fin de lograr una alta sensibilidad de deteccin, el grupo Li desarrollado
otro papel / PDMS chip de microfluidos integrados hbridos con mediada por bucle
amplificacin isotrmica (LAMP), un mtodo de amplificacin isotrmica de ADN,
para la alta sensibilidad deteccin de enfermedades infecciosas globales [15]. Como se
muestra en la Figura 5a y 5b , cromatografa discos de papel se colocaron en zonas de
LAMP, que sirve como el sustrato en 3D para cebador de ADN de pre-almacenamiento
para la reaccin LAMP posterior para mejorar la sensibilidad de deteccin. Fue

interesante que observ que el sistema hbrido de papel activada resultados de la prueba
mucho ms estables durante un largo perodo de 2 meses que un sistema de
microfluidos sin papel (Figura 5c ). El uso de un ADN libre de centrfuga mtodo de
extraccin, que han demostrado alta sensibilidad de deteccin en la deteccin libre de
instrumento de los principales causantes de bacteria de la meningitis, Neisseria
meningitidis ( N. meningitidis ). Sin el uso de cualesquiera instrumentos especializados,
diagnstico clnico de N. meningitidis podra lograrse visual confirmacin de la
fluorescencia brillante con una pluma de luz UV porttil, como se muestra en la Figura
5d .AnLOD se logr tan bajo como 3 copias de ADN diana por zona LAMP, mientras
que la corriente LOD de qPCR es de 9 copias por reaccin [11]. Recientemente, una
tarjeta de microcapilar TLC equipada sistema de microfluidos integrado con la lmpara
ha informado [45], lo que para la muestra-a el cribado respuesta de polimorfismos de
nucletido nico (SNP) tipificacin del gen CYP2C19 de muestras de sangre no
tratadas. En el interior del capilar, incluyendo todos los reactivos tampn de lavado y
lmpara mezcla se precargado. Y se insert la tarjeta FTA utilizado para extraer ADN
de muestras de sangre en el microcapilar antes de las operaciones de fluidos. Sin el
requisito de avanzada instrumentos, este sistema de microfluidos pueden lograr
pretratamiento, extraccin, amplificacin in situ, y la deteccin de cidos nucleicos
dentro de 150 minutos. Al cambiar aptmeros y cebadores, estos gentica ensayos que
utilizan dispositivos de microfluidos hbridos tienen un gran potencial en la deteccin
rpida de una amplia variedad de otros patgenos infecciosos, lo cual es de gran
importancia, ya que la aparicin de enfermedades infecciosas patgenos ha generado
impacto muy significativo sobre la salud y la economa mundial.
Adems del anlisis de cidos nucleicos y de bajo costo del papel hbridos plataformas
de microfluidos para celular 3D se ha informado de la cultura. Qi et al . [119]
desarrollaron una hidroxipropil celulosa (HPC) metacrilato de material compuesto en
forma de foto-modelable y el sustrato hbrido de papel biodegradable para celular la
cultura y otras aplicaciones de bio. Este sustrato hbrido permitido la proliferacin
celular y celular las migraciones en condiciones ptimas para el cultivo de clulas a
largo plazo y andamio de tejido implantable Aplicaciones. Deiss et al . [120] inform de
un / PDMS dispositivo de microfluidos hbrido de papel para la cultura de las bacterias
y la deteccin de la resistencia a los antibiticos utilizando una versin porttil de la
Kirby- Bauer prueba de susceptibilidad a los antibiticos (AST). El dispositivo hbrido
compuesto por una membrana de PDMS y hojas de papel estampado con tinta de la

impresora hidrfobo y ensamblados con cinta de embalaje. Por la medicin de zonas de

color azul de crecimiento inhibido, la susceptibilidad a los antibiticos de varias cepas
de Escherichia coli y Salmonella typhimurium se cuantific. La flexibilidad del papel
plataforma de cultivo bacteriano de microfluidos hbrido debe ser capaz de facilitar la
integracin con otras pruebas basadas en papel, evitando la necesidad de contar con un
pre-cultivo externa de las bacterias. hilo de algodn es otra plataforma de bajo coste con
buenas propiedades

de

absorcin y flexibilidad. Sus unidimensionales

(1D)

caractersticas hacen que sea innecesario para crear nuevas barreras hidrofbicas cuando
la transferencia de lquidos, pero es difcil de llevar a cabo el anlisis cuantitativo. Por
lo tanto, el algodn 1D hilos y hojas de papel en 2D se han combinedr para formar otro
tipo de hbrido de papel plataformas de microfluidos [43, 44]. La combinacin de
materiales 1D con otros materiales 2D hace es factible fabricar dispositivos de
microfluidos en 3D. La fabricacin del papel 3D / hilo plataformas de microfluidos
requiere comnmente utilizados slo y agujas de coser o asequibles hogar mquinas de
coser. En una plataforma de microfluidos tales hbrido, un hilo acta como un conducto
de paso en 3D materiales cosidos, que pueden transportar el lquido a travs de mecha
capilar sin la necesidad de una barrera.
Este papel / hilo plataforma de micro fluidos hbrido se puede utilizar para cualitativa o
semicuantitativa anlisis. Li et al . [43] demostraron sensores de hilo / basados en papel
con la incorporada indicadores colorimtricos para la deteccin de ion nitrito (NO 2 -) Y
cido rico (AU), que son dos biomarcadores importantes de varias condiciones
mdicas humanos. Una solucin de ensayo se introduce en los hilos desde el agujero
central de la pelcula con una micropipeta; la solucin de ensayo malvado rpidamente a
lo largo las discusiones y alcanzaron discos de papel pre-tratadas con NO 2 -o los
indicadores UA, lo que lleva al color cambios para la deteccin colorimtrica. Lin et
al . [44] desarroll otro hbrido de papel / algodn dispositivo de microfluidos para el
diagnstico in vitro. El dispositivo utilizado algodn como un canal de flujo y papel de
cromatografa como zonas de reaccin para obtener informacin semi-cuantitativa. El
color intensidad era distinguible tanto por el ojo desnudo y se puede analizar an ms
por el software Image J para el anlisis semi-cuantitativo. Mediante el uso de muestras
artificiales, rangos clnicamente relevantes de aproximadamente 0,38 a 30 mM de
protena en la orina, 0,16 a 2,5 mM para el NO 2 -, 7.80-125 mm para Se analizaron
urobilingeno y 100-1600 mM para UA.

4. Conclusiones y Perspectivas
Debido a su bajo coste y facilidad de fabricacin, enorme dispositivos microfludicos
basados en papel han sido desarrollados para diversas aplicaciones en el diagnstico de
enfermedades, inspeccin de seguridad alimentaria y incluso el anlisis del medio
ambiente, especialmente para entornos de escasos recursos, como las zonas rurales y las
naciones en desarrollo, donde la gente no puede permitirse el lujo de instrumentacin
costosa. Varios bio-aplicaciones de dispositivos de microfluidos en papel han sido
demostrado a travs de inmunoensayo, cido nucleico anlisis y anlisis celular.
A pesar de las muchas ventajas del papel, el material no es "perfecto". Como se ha
mencionado en el Papel hbrido plataformas de microfluidos Seccin, cada sustrato
dispositivo tiene sus propias ventajas y limitaciones. Desde el advenimiento del
concepto de dispositivos de microfluidos hbridos de papel de la Li grupo [14, 15], se
han desarrollado muchos nuevos sistemas hbridos de papel. Los investigadores han
demostrados nuevos beneficios que antes era imposible en los sistemas no hbridos,
hbridos de papel plataformas de microfluidos. Creemos que se desarrollarn ms y ms
dispositivos hbridos de papel y que van a jugar un papel cada vez ms importante en el
futuro cercano. Sin embargo, algunos desafos tecnolgicos que tenga que ser dirigida a
crear fisuras y de alta resolucin dispositivos hbridos de dos sustratos de dispositivos
diferentes, ya que los mtodos de fabricacin actuales para dispositivos basados en
papel no ofrecen alta resolucin. Algunos mtodos de fabricacin (por ejemplo, a travs
de High temperatura) podra daar las propiedades originales de papel. dispositivos
basados en papel son baratos. Sin embargo, ciertos detectores son todava voluminoso y
costoso, lo que limita las aplicaciones de dispositivos basados en papel en entornos de
bajos recursos. deteccin mltiple estrategias se han utilizado en el anlisis de
microfluidos

base

de

papel

tal

como

colorimtrico,

fluorescencia,

quimioluminiscencia, ECL y deteccin electroqumica.

deteccin colorimtrica es altamente compatible con la naturaleza del ensayo de bajo
coste en entornos de bajos recursos, pero la sensibilidad y la cuantificacin son a
menudo comprometida. Deteccin electroqumica tambin es deseable para papelbasado dispositivos de microfluidos, pero el potenciostato voluminosos y caros es un
cuello de botella. A pesar de que Potenciostatos porttiles estn disponibles
comercialmente, el costo sigue siendo bastante alta. Quimioluminiscencia no requiere
configuracin ptica complicada; por lo tanto, tambin es un mtodo de deteccin
preferido para dispositivos basados en papel en entornos de bajos recursos. En las

ltimas dcadas, las tecnologas de telfonos inteligentes tienen desarrollado

dramticamente. Potentes chips de CPU se han utilizado en los telfonos
inteligentes. Un incremento nmero de nuevas aplicaciones y complementos activar los
telfonos inteligentes para ofrecer ms y ms Funciones para supervisar el estado de
salud personal [10]. Por lo tanto, nos imaginamos que la combinacin de las tecnologas
de telfonos inteligentes u otros dispositivos electrnicos de lectura de bajo costo (por
ejemplo, medidores de glucosa [115]) con dispositivos de microfluidos en papel podran
causar un gran impacto en el cuidado de la salud y del medio ambiente el seguimiento
en un futuro prximo.

Tabla 1 Resumen de los diagnsticos de salud en humanos basada en papel y su

microfluidos hbrido plataformas

Tabla 2 Resumen de los anlisis de la seguridad alimentaria en las plataformas basadas

en papel y su hbrido de micro fluidos

Reconocimiento
El grupo Li desea reconocer el apoyo financiero del Instituto Nacional de Alergias y
Enfermedades Infecciosas de los Institutos Nacionales de Salud (NIH) bajo el N
Premio R21AI107415, y el Instituto Nacional de Ciencias Mdicas Generales de los
NIH bajo Premio Nmero SC2GM105584. El contenido es de exclusiva responsabilidad
de los autores y no representan necesariamente la opinin oficial de los NIH. apoyos
financieros del Programa de IDR en la Universidad de Texas en El Paso (UTEP) y el
NIH RCMI subvencin piloto tambin estn agradecidos admitido. FX desea reconocer
el apoyo financiero de la clave (Key subvencin)
Proyecto del Ministerio de Educacin de China (313045) y la Internacional de Ciencia y
Tecnologa Programa de Cooperacin de China (2013DFG02930).

Referencias
[1] XJ Li, Y. Zhou, dispositivos de microfluidos para aplicaciones biomdicas,
Woodhead Publishing, 2013.
[2] CT Culbertson, TG Mickleburgh, SA Stewart-James, KA Sellens, M. Pressnall,
Analtica Qumica, 86 (2013) 95-118.
[3] XJ Li, AV Valadez, P. Zuo, Z. Nie, Bioanlisis, 4 (2012) 1509-1525.
[4] X. Li, Li PCH, Expert Review of Clinical Pharmacology, 3 (2010) 267-280.
[5] GB-Salieb Beugelaar, G. Simone, A. Arora, A. Philippi, A. Manz, Qumica
Analtica, 82 (2010) 4848-4864.
[6] ML Kovarik, PC Gach, DM Ornoff, Y. Wang, J. Balowski, L. Farrag, NL Allbritton,
Analtica Qumica, 84 (2011) 516-540.
[7] F. Yang, X. Zuo, Z. Li, W. Deng, J. Shi, Zhang G., P. Huang, S. Song, C.
Ventilador, Advanced Materials, 26 (2014) desde 4671 hasta 4676.
[8] X. Fang, S. Wei, J. Kong, Lab on a Chip, 14 (2014) 911-915.
[9] XJ Li, Li PCH, Can. J. Pure & Appl. Sci., 8 (2014) 2663-2669.
[10] XA Xu, Altug; Wei, Huilin; Wang, Shuqi; Pingguan-Murphy, Belinda; Erlandsson,
Bjorn-Erik; Li,Xiujun; Lee, Wongu; Hu, Jie; Wang, Lin; Xu Feng, IEEE, (2014).
[11] X. Wang, MJ Theodore, R. Mair, E. Trujillo-Lpez, M. du Plessis, N. Wolter, AL
Baughman, C.Hatcher, J. Vuong, L. Lott, Journal of Clinical Microbiology, 50 (2012)
702-708.
[12] F. Perini, A. Casabianca, C. Battocchi, S. Accoroni, C. Totti, A. Penna, PLoS One,
6 (2011) e17699.
[13] L. Ge, J. Yan, X. Song, M. Yan, S. Ge, J. Yu, Biomateriales, 33 (2012) 1024-1031.
[14] P. Zuo, X. Li, DC Domnguez, B.-C. Ye, Lab Chip, 13 (2013) 3921 a 3928.
[15] M. Dou, DC Domnguez, X. Li, J. Snchez, G. Scott, qumica analtica, 86 (2014)
7.978 a 7.986.
[16] S. Wang, F. Xu, U. Demirci, los avances en biotecnologa, 28 (2010) 770-781.
[17] MEI Badawy, AF El-Aswad, Revista Internacional de Qumica Analtica, 2014
(2014) 8.
[18] SZ Hossain, RE Luckham, MJ McFadden, JD Brennan, Qumica Analtica, 81
(2009) 9055-9064.
[19] Z. Nie, CA Nijhuis, J. Gong, X. Chen, A. Kumachev, AW Martnez, M.
Narovlyansky, GMWhitesides, laboratorio en un chip, 10 (2010) 477-483.

[20] A. Apilux, W. Dungchai, W. Siangproh, N. Praphairaksit, CS Henry, O.

Chailapakul, Analtica qumica, 82 (2010) 1727-1732.
[21] AW Martnez, ST Phillips, GM Whitesides, Actas de la Academia Nacional de
Ciencias, 105 (2008) 19.606-19.611.
[22] AJ Chung, Kim D., D. Erickson, Lab on a Chip, 8 (2008) 330-338.
[23] XJ Li, YC Chen, Li PCH, Lab on a Chip, 11 (2011) 1378-1384.
[24] XJ Li, X. Xue, PCH Li, Integr. Biol., 1 (2009) 90-98.
[25] XJ Li, V. Ling, Li PCH, Anal. Chem., 80 (2008) 4.095 a 4.102.
[26] XJ Li, J. Huang, GF Tibbits, PCH Li, electroforesis, 28 (2007) 4723 a 4733.
[27] XJ Li, Li PCH, Anal. Chem., 77 (2005) 4315 a 4322.
[28] F. Shen, X. Li, Li PCH, Biomicrofluidics, 8 (2014) 014109.
[29] H. Chen, X. Li, L. Wang, Li PC, Talanta, 81 (2010) 1203-1208.
[30] Y. Xia, GM Whitesides, Annu. Rev. Mater. Sci., 1998 (1998) 153-184.
[31] X. Fang, Y. Liu, J. Kong, X. Jiang, Qumica Analtica, 82 (2010) 3002 hasta 3006.
[32] W. Liu, CL Cassano, X. Xu, ZH Ventilador, Qumica Analtica, 85 (2013) 1027010276.
[33] X. Li, Z. Nie, C. Cheng, A. Goodale, G. Whitesides, en: Proc. Micro total Anlisis
de Sistemas, 2010, pp.1487-1489.
[34] Z. Nie, CA Nijhuis, J. Gong, X. Chen, A. Kumachev, AW Martnez, M.
Narovlyansky, GM Whitesides, Lab Chip, 10 (2010) 477-483.
[35] CM Cheng, AW Martnez, J. Gong, CR Mace, ST Phillips, E. Carrilho, KA Mirica,
GM Whitesides, Angew Chem Int Ed Engl, 49 (2010) 4771-4774.
[36] Han YL, W. Wang, J. Hu, G. Huang, S. Wang, WG Lee, TJ Lu, F. Xu, Lab Chip,
13 (2013) 4745 hasta 4.749.
[37] AW Martnez, ST Phillips, MJ Butte, GM Whitesides, Angewandte Chemie
International Edition, 46 (2007) 1318-1320.
[38] XY Liu, M. Mwangi, XJ Li, M. O'Brien, GM Whitesides, Lab Chip, 11 (2011)
2189-2196.
[39] J. Hu, S. Wang, L. Wang, F. Li, B. Pingguan-Murphy, TJ Lu, F. Xu, biosensores y
bioelectrnica, 54
(2014) 585-597.
[40] K. Abe, K. Kotera, K. Suzuki, D. Citterio, Qumica analtica y bioanlisis, 398
(2010) 885-893.

[41] M. Nogi, S. Iwamoto, UN Nakagaito, H. Yano, materiales avanzados, 21 (2009)

1595-1598.
[42] H. Zhu, Z. Fang, C. Preston, Y. Li, L. Hu, Energy & Environmental Science, 7
(2014) 269-287.
[43] X. Li, J. Tian, W. Shen, ACS Applied Materials e Interfaces, 2 (2009) 1-6.
[44] S.-C. Lin, M.-Y. Hsu, C.-M. Kuan, H.-K. Wang, C.-L. Chang, F.-G. Tseng, C.M. Cheng, Informes cientficos,
4 (2014).
[45] L. Zhang, Y. Zhang, C. Wang, Q. Feng, F. Ventilador, G. Zhang, X. Kang, X. Qin,
J. Sun, Y. Li, Analtica
qumica, 86 (2014) desde 10.461 hasta 10.466.
[46] AW Martnez, ST Phillips, GM Whitesides, E. Carrilho, Qumica Analtica, 82
(2009) 3-10.
[47] EM Fenton, MR Mascareas, GP Lpez, SS Sibbett, ACS materiales e interfaces, 1
aplicadas (2008)
124-129.
[48] X. Li, J. Tian, G. Garnier, W. Shen, coloides y superficies. B, Biointerfaces, 76
(2010) 564-570.
[49] J. Yu, L. Ge, J. Huang, S. Wang, S. Ge, laboratorio en un chip, 11 (2011) 12861291.
[50] AW Martnez, ST Phillips, E. Carrilho, SW Thomas, 3, H. Sindi, GM Whitesides,
Analtica
qumica, 80 (2008) 3.699 hasta 3707.
[51] RF Carvalhal, MS Kfouri, MH Piazetta, AL Gobbi, LT Kubota, Qumica Analtica,
82 (2010)
1162-1165.
[52] AK Ellerbee, ST Phillips, CA Siegel, KA Mirica, AW Martnez, P. Striehl, N. Jain,
M. Prentiss,
GM Whitesides, Qumica Analtica, 81 (2009) 8447-8452.
[53] AW Martnez, ST Phillips, Z. Nie, CM Cheng, E. Carrilho, BJ Wiley, GM
Whitesides, en un laboratorio
chips, 10 (2010) 2499-2504.
[54] T. Songjaroen, W. Dungchai, O. Chailapakul, W. Laiwattanapaisal, Talanta, 85
(2011) 2587-2593.

[55] SMZ Hossain, RE Luckham, AM Smith, JM Lebert, LM Davies, RH Pelton, MDL

Filipe, JD
Brennan, Qumica Analtica, 81 (2009) 5474-5483.
[56] P. Wang, L. Ge, M. Yan, X. Song, S. Ge, J. Yu, biosensores y bioelectrnica, 32
(2012) 238-243.
[57] A. Arena, N. Donato, G. Saitta, A. Bonavita, G. Rizzo, G. Neri, sensores y
actuadores B: Qumica, 145
(2010) 488-494.
[58] M. Cretich, V. Sedini, F. Damin, M. Pelliccia, L. Sola, M. Chiari, bioqumica
analtica, 397 (2010)
84-88.
[59] R. Hawkes, E. Niday, J. Gordon, bioqumica analtica, 119 (1982) 142-147.
[60] CM Cheng, AW Martnez, J. Gong, CR Mace, ST Phillips, E. Carrilho, KA Mirica,
GM
Whitesides, Angewandte Chemie International Edition, 49 (2010) desde 4771 hasta
4774.
[61] Y. Lu, W. Shi, J. Qin, B. Lin, Qumica Analtica, 82 (2009) 329-335.
[62] Y. Lu, W. Shi, L. Jiang, J. Qin, B. Lin, electroforesis, 30 (2009) 1497-1500.
[63] A. Li, Y. Wang, L. Deng, X. Zhao, Q. Yan, Y. Cai, J. Lin, Y. Bai, S. Liu, Y.
Zhang, Citotecnologa, (2012)
1-11.
[64] AW Martnez, ST Phillips, E. Carrilho, SW Thomas III, H. Sindi, GM Whitesides,
Analtica
Qumica, 80 (2008) 3.699 hasta 3707.
[65] DA Bruzewicz, M. Reches, GM Whitesides, Qumica Analtica, 80 (2008) 33873392.
[66] K. Abe, K. Suzuki, D. Citterio, Qumica Analtica, 80 (2008) 6928-6934.
[67] E. Carrilho, AW Martnez, GM Whitesides, Qumica Analtica, 81 (2009) 7091
hasta 7.095.
[68] W. Dungchai, O. Chailapakul, CS Henry, The Analyst, 136 (2011) 77-82.
[69] J. Olkkonen, K. Lehtinen, T. erho, Qumica Analtica, 82 (2010) 10.246-10.250.
[70] X. Li, J. Tian, T. Nguyen, W. Shen, Qumica Analtica, 80 (2008) 9131 hasta 9134.
[71] X. Li, J. Tian, W. Shen, Celulosa, 17 (2010) 649-659.
[72] X. Li, J. Tian, T. Nguyen, W. Shen, Qumica Analtica, 80 (2008) 9131 hasta 9134.

[73] X. Li, J. Tian, W. Shen, Qumica analtica y bioanlisis, 396 (2010) 495 501.
[74] V. Gauvreau, G. Laroche, Bioconjugate Chemistry, 16 (2005) 1088-1097.
[75] RM Nagler, qumica clnica, 54 (2008) 1415-1417.
[76] G. Chitnis, Z. Ding, CL Chang, CA Savran, B. Ziaie, laboratorio en un chip, 11
(2011) 1161-1165.
[77] AW Martnez, ST Phillips, GM Whitesides, Actas de la Academia Nacional de
Ciencias de
los Estados Unidos de Amrica, 105 (2008) 19.606 a 19.611.
[78] XJ Li, Jin WR, QF Weng, Anal. Chim. Acta, 461 (2002) 123-130.
[79] WR Jin, XJ Li, Gao N., Anal. Chem., 75 (2003) 3859 a 3864.
[80] XJ Li, Jin WR, Chin. Chem. Lett., 13 (2002) 874-876.
[81] IM Thompson, DK Pauler, PJ Goodman, CM Tangen, MS Luca, HL Parnes, LM
Minasian, LG
Ford, SM Lippman, ED Crawford, New England Journal of Medicine, 350 (2004) 22392246.
[82] E. Engvall, P. Perlmann, Inmunoqumica, 8 (1971) 871-874.
[83] S. Kivity, B. Gilburd, N. Agmon-Levin, MG Carrasco, Y. Tzafrir, Y. Sofer, M.
Mandel, T. Bttner, D. Roggenbuck, M. Matucci-Cerinic, reumatologa clnica, 31
(2012) 503-509.
[84] N. Latif, CS Baker, MJ Dunn, ML Rose, P. Brady, MH Yacoub, Revista del
Colegio Americano de Cardiologa, 22 (1993) 1378-1384.
[85] J. Brouwer, Archivos Internacional de Alergia e Inmunologa, 85 (1988) 244-249.
[86] A. Singh, S. Datta, A. Sachdeva, S. Maslanka, J. Dykes, G. Skinner, D. Burr, RC
Whiting, SK Sharma, La seguridad sanitaria, (2015).
[87] J. Kai, A. Puntambekar, N. Santiago, SH Lee, DW Sehy, V. Moore, J. Han, CH
Ahn, Lab on a Chip, 12 (2012) 4.257-4.262.
[88] T. Songjaroen, W. Dungchai, O. Chailapakul, CS Henry, W. Laiwattanapaisal, Lab
on a Chip, 12 (2012) desde 3.392 hasta 3.398.
[89] S. Wang, L. Ge, X. Song, J. Yu, S. Ge, J. Huang, F. Zeng, biosensores y
bioelectrnica, 31 (2012) 212- 218.
[90] W. Li, Li M., S. Ge, M. Yan, J. Huang, J. Yu, Acta Analytica Chimica, 767 (2013)
66-74.
[91] P. Wang, L. Ge, M. Yan, X. Song, S. Ge, J. Yu, biosensores y bioelectrnica, 32
(2012) 238-243.

[92] J. Liang, Y. Wang, B. Liu, RSC Adv., 2 (2012) 3878-3884.

[93] A. Yu, J. Shang, F. Cheng, BA Paik, JM Kaplan, RB Andrade, DM Ratner,
Langmuir, 28 (2012) 11265-11273.
[94] Y. Chen, H. Cheng, K. tranva, S. Zhang, Y. Zhao, L. Han, Z. Chen, S. Huan,
Analyst, 138 (2013) 2624- 2631.
[95] P. Liu, X. Li, SA Greenspoon, JR Scherer, RA Mathies, Lab Chip, 11 (2011) 10411048.
[96] S. Poppert, A. Essig, B. Stoehr, A. Steingruber, B. Wirths, S. Juretschko, U.
Reischl, N. Wellinghausen,
Journal of Clinical Microbiology, 43 (2005) 3390 hasta 3397.
[97] AC Arajo, Y. Song, J. Lundeberg, PL Stahl, H. Brumer, Qumica Analtica, 84
(2012) 3311-3317.
[98] Lo SJ, SC Yang, DJ Yao, JH Chen, CM Cheng, Nanotecnologa Magazine, IEEE,
6 (2012) 26-30.
[99] JC Cunningham, NJ Brenes, RM Crooks, Qumica Analtica, 86 (2014) 6166-6170.
[100] P. Ihalainen, F. Pettersson, M. Pesonen, T. Viitala, A. Mttnen, R. sterbacka,
J. Peltonen,
La nanotecnologa, 25 (2014) 094009.
[101] Y. Wang, L. Ge, P. Wang, M. Yan, S. Ge, N. Li, J. Yu, J. Huang, Lab on a Chip,
13 (2013) 3.945-3955.
[102] L. Wu, C. Ma, L. Ge, Q. Kong, M. Yan, S. Ge, J. Yu, biosensores y
bioelectrnica, 63 (2015) 450-457.
[103] M. Su, L. Ge, Ge S., N. Li, J. Yu, M. Yan, J. Huang, Analytica Chimica Acta, 847
(2014) 1-9.
[104] M. Su, L. Ge, Q. Kong, X. Zheng, S. Ge, N. Li, J. Yu, M. Yan, biosensores y
bioelectrnica, 63 (2015) 232-239.
[105] L. Li, X. Huang, W. Liu, W. Shen, ACS materiales e interfaces, 6 (2014) 2162421631 aplica.
[106] R. Derda, A. Laromaine, A. Mammoto, SK Tang, T. Mammoto, DE Ingber, GM
Whitesides,Actas de la Academia Nacional de Ciencias, 106 (2009) 18457-18462.
[107] R. Derda, SK Tang, A. Laromaine, B. Mosadegh, E. Hong, M. Mwangi, A.
Mammoto, DE Ingber, GM Whitesides, PLoS ONE, 6 (2011) e18940.
[108] C.-z. Li, K. Vandenberg, S. Prabhulkar, X. Zhu, L. Schneper, K. Methee, CJ
Rosser, E. Almeide, Biosensores y bioelectrnica, 26 (2011) 4342-4348.

[109] P. Preechakasedkit, K. Pinwattana, W. Dungchai, W. Siangproh, W. Chaicumpa,

P. Tongtawe, O. Chailapakul, biosensores y bioelectrnica, 31 (2012) 562-566.
[110] G. Mercey, T. Verdelet, J. Renou, M. Kliachyna, R. Baati, F. Nachn, L. Jean, P.Y. Renard, cuentas de la investigacin qumica, 45 (2012) 756-766.
[111] SMZ Hossain, RE Luckham, MJ McFadden, JD Brennan, Anal Chem, 81 (2009)
9055 a 9064.
[112] M. Kavruk, VC zalp, HA ktem, Journal of Analytical Methods in Chemistry,
2013 (2013) 8.
[113] JC Jokerst, JA Adkins, B. Bisha, MM Mentele, LD Goodridge, CS Henry,
Qumica Analtica,
84 (2012) 2900-2907.
[114] T. San Park, W. Li, KE McCracken, J.-Y. Yoon, Lab on a Chip, 13 (2013) 4.8324.840.
[115] Z. Nie, F. Deiss, X. Liu, O. Akbulut, GM Whitesides, Lab on a Chip, 10 (2010)
3.163-3.169.
[116] SKY Tang, GM Whitesides, Optofluidics: Fundamentos, dispositivos y
aplicaciones, (2010) 7-31.
[117] XJ Li, ZH Nie, C.-M. Cheng, AB Goodale, GM Whitesides, Proc. Micro total
Anlisis de Sistemas,
14 (2010) 1487-1489.
[118] AW Martnez, ST Phillips, GM Whitesides, E. Carrilho, Qumica Analtica, 82
(2010) 3-10.
[119] A. Qi, SP Hoo, J. amigo, L. Yeo, Z. Yue, PP Chan, materiales sanitarios
avanzados, 3 (2014) 543-554.
[120] F. Deiss, ME-Funes huacca, J. Bal, KF Tjhung, R. Derda, Lab on a Chip, 14
(2014) 167-171.

Figura 1

Esquema de la tcnica de la fotolitografa para la fabricacin de microfluidos en papel

Plataformas. (A) Procedimiento para el patrn de papel con resina fotosensible
hidrfobo. (B) derivatizacin de el dispositivo para bioensayos. ( Fuente : Adaptado con
permiso de Martnez et al. , 2008. Copyright 2008 American Chemical Society. [64])

Figura 2 plataforma de microfluidos ECL en papel 3D para la medicin de

multiplexado de cuatro biomarcadores de cncer. 1) electrodo de trabajo de carbono
serigrafiado; 2) quitosano (CS) la modificacin; 3)la inmovilizacin de anticuerpos de
captura; 4) de bloqueo y de lavado; 5) la captura y de lavado; 6)incubacin con
anticuerpos de seal, el lavado y la activacin de la reaccin ECL. ( Fuente : Adaptado
con el permiso de Ge et al. , 2012. Copyright 2012 Elsevier. [13])

Figura 3 dispositivos basados en papel de microfluidos para la deteccin de patgenos

transmitidos por los alimentos. (un)
El anlisis de las muestras de carne listos para comer se trataron con 10
1, 102Y 103 ufc / cm 2 para (1) Escherichia coli O157: H7 y (2) Salmonella
typhimurium . La actividad enzimtica de las muestras se ensay despus de
enriquecimiento de 0, 4, 8, 10, y 12 h. ( Fuente : Adaptado con permiso de Jokerst et
al. , 2012.Copyright 2012 American Chemical Society. [113]) (b) Smartphone
cuantifica Salmonella de un dispositivo para microfluidos de papel a base de papel. (1)
Una fotografa del dispositivo basado en papel con un telfono inteligente lanzamiento
de la aplicacin para telfonos inteligentes. (2) la curva A de calibracin estndar de la
lectura de los tres canales separados utilizando la aplicacin para telfonos inteligentes

bajo la luz ambiente.( Fuente : Adaptado con el permiso del Parque et al. , 2013.
Derechos de Autor 2013 Real Sociedad de Qumica. [114])

Figura 4 Representacin esquemtica del papel / PDMS hbrido biochip de

microfluidos para un solo paso multiplexada la deteccin de patgenos mediante
biosensores GO aptmeros funcionalizado. (A) el diseo de biochips de microfluidos,
(B) y (c) ilustran el principio de la de un solo paso 'vuelta-en "enfoque de deteccin
basado en la interaccin entre los GO, aptmeros y patgenos. Cuando el patgeno
diana est presente, el objetivo patgeno induce la aptamer ser liberado de GO y por lo
tanto restaura la fluorescencia de el aptmero se inactiv previamente por GO. (d) la
investigacin reaccin cruzada de Staphylococcus aureus y Salmonella enterica con sus
correspondientes aptmeros y no correspondiente. ( Fuente : Adaptado con permiso de
Zuo et al. , 2013. Derechos de Autor 2013 Real Sociedad de
Qumica. [14])

Figura 5 El papel de chip de microfluidos PDMS / hbrida integrada con la lmpara de

alta sensibilidad -Instrumento libre de diagnstico de enfermedades infecciosas. (A) La
ilustracin 3D del esquema del chip diseo. Un disco de papel de cromatografa est
situado en el interior de cada zona LAMPARA LAMPARA para precargar
Cebadores (B)

Una

fotografa

del

chip

microfludico

hbrido. (C)-chip

en

funcionamiento de la lmpara
Comparacin entre el chip de micro fluidos hbrido con papel en el interior y el chip de
micro fluidos no hbrido sin papel en el interior. (D) Una imagen fluorescente tomada
por una cmara de telfono celular para el on-chip
Deteccin de lmpara de N. meningitidis usando un lpiz de luz UV porttil. (Fuente :
Adaptado con el permiso de Dou y col. , 2014 Copyright 2014 American Chemical
Society. [15])

Grficamente abstracto
Reflejos
Opinin recientes avances de bajo costo utilizando el bioanlisis de micro fluidos en
papel plataformas
Tcnicas de fabricacin de dispositivos de micro fluidos introducidas en papel
Centrado en aplicaciones en el diagnstico de enfermedades y el anlisis de la
seguridad alimentaria
Plataformas de micro fluidos papel destacado hbrido