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DOENA DAS ORQUDEAS - PARTE II

VRUS
Roland Brooks Cooke
INTRODUO
Alm das doenas fngicas e bacterianas, vista num captulo anterior, as orqudeas, a exemplo
de outras espcies vegetais e animais, so tambm atacadas por vrus, minsculos seres
(alguns nanmetros) que invadem as clulas, danificando seus processos metablicos e de
multiplicao, o que acaba por causar a morte das mesmas. Os vrus vivem exclusivamente s
custas dos processos metablicos ou celulares de outros organismos, no sendo ativos fora da
clula (embora possam permanecer por longo tempo, inativos, porm infecciosos, em detritos
vegetais ou mesmo na gua).
Embora seus efeitos muitas vezes paream menos graves, primeira vista, em comparao
com o estrago causado por fungos como o Pythium e bactrias como o Pseudomonas, certo
que as viroses so as doenas mais graves das orqudeas, por sua facilidade de disseminao,
perdas de valor e impossibilidade de tratamento. Assim, a nica forma de controle, nos dias
atuais, a erradicao das plantas atacadas, somado a outras medidas de preveno de
contgio. Podemos afirmar, que aps o grau de contaminao visvel atingir 20 ou 30% das
plantas de determinada coleo, o melhor descartar e eliminar a coleo toda, pois as
chances so de que a maioria das plantas tambm est contaminada, embora ainda sem
sintomas.
TIPOS MAIS IMPORTANTES DE VRUS DE ORQUDEAS
At o presente, foram diagnosticados cerca de 40 tipos de vrus que infectam as orqudeas.
Destes, apenas alguns poucos produzem efeitos prejudiciais, em nvel comercial, s plantas.
Por "nvel comercial", entende-se efeitos que possam prejudicar a apresentao das flores, e o
vigor da planta. Dessa forma, muitos vrus, embora tenham sintomas claramente visveis, no
so considerados de importncia comercial, por no prejudicarem as floraes nem a
produtividade (o vrus da "pipoca" nas folhas, comum em Laelia purpurata, se enquadra nesse
caso).
Dos vrus de importncia comercial, existentes no Brasil, dois se destacam:
CyMV - Cymbidium Mosaic Virus
Muito embora seus efeitos sejam, a princpio, pouco aparentes, o CyMV o vrus mais
perigoso para a coleo. Explica-se: como apresenta sintomas menos "graves" do que o
ORSV, muitas vezes as plantas so dadas como saudveis, o que propicia a extenso da
contaminao por toda a coleo. Quando se percebe, a coleo toda j est perdida. Por esse
mesmo motivo, o vrus mais comum nas colees. Ataca inmeros gneros,
desde Cymbidium, at Cattleya e Phalaenopsis.
Os efeitos deste vrus nas folhas so dificilmente detectveis, mas, seguindo o princpio geral
(vide abaixo), ocorrem leves riscos clorticos nas nervuras. De modo geral, no atrapalha o
crescimento da planta, nem sua capacidade de florao.
Nas flores, no h sintomas, de incio. Entretanto, passados alguns dias (entre 7 e 15,
dependendo da espcie), surgem riscos ao longo das nervuras dos segmentos florais, fruto da
destruio do floema floral. Nas flores albas e amarelas, estes riscos so necrticos (marrons).
Nas lilases e vermelhas, so riscos esbranquiados. Muitas vezes, o dono da planta despreza

estes sintomas, considerando que a flor est simplesmente "passada". Entretanto, os sintomas
so claramente distintos da senescncia natural ou mesmo a causada por gases de etileno,
que se caracterizam pela perda de substncia dos segmentos, e amarelecimento da ovrio
(pednculo).
O CyMV pode infectar uma planta, sem afetar sua produtividade ou vigor, por muitos anos.
ORSV - Odontoglossum Ringspot Virus (syn. TMV-O)
Identificado primeiramente em Odontoglossum grande, causando leses circulares nas folhas,
da o nome. Este vrus, embora altamente destrutivo, tem seu controle facilitado pelos seus
sintomas, bastante caractersticos e facilmente visveis. Nas folhas, so manchas irregulares de
colorido vermelho a roxo (cuidado para no confundir com escurecimento arroxeado causado
por luminosidade alta, ou pintas roxas em plantas semi-albas e algumas lilases e amarelas).
Estas manchas ou pintas geralmente possuem regies necrosadas (mortas). Os brotos podem
ficar aleijados (tortos, fortemente pigmentados, e sem vigor). Nas flores, surgem manchas
descoloradas, com aspecto de "aquarela desbotada". No confundir com falhas de colorido de
origem gentica (variegata). Ocasionalmente, grandes variaes de temperatura podem
provocar sintomas de "color-break" idnticos aos provocados por vrus. Caso tenha ocorrido
esse fator climtico, aguardar mais um ano, para verificar se o sintoma se repete, para ento
ter certeza do diagnstico.
Ao contrrio do CyMV, o ORSV vai degradando o vigor da planta, terminando por mat-la ao
cabo de alguns anos (por inviabilidade de brotao).
DIAGNSTICO
Para facilitar o diagnstico visual, talvez ajude se mencionarmos que a atuao dos vrus, de
modo geral, nas plantas, se d por morte de clulas com carga viral elevada. Dessa forma, as
estruturas que entram em contato mais prolongado com o vrus so as primeiras a serem
lesionadas. Os vasos que conduzem a seiva, no conseguem mais faz-lo adequadamente, e
morrem. Nas plantas, esses efeitos se mostram como riscos necrticos (mortos) e clorticos
(amarelados) nas nervuras, falhas de pigmentao nas flores (por "desnutrio" dos tecidos
florais durante a formao da flor), e aleijamento de brotos (por interrupo da circulao de
nutrientes).
importante ressaltar que a sintomatologia descrita acima no definitiva. H plantas que
apresentam um ou outro dos sintomas, sem estar necessariamente contaminada por vrus.
Ocasionalmente, problemas genticos induzem a planta a produzir folhas e/ou flores com
defeitos, tanto de forma como de colorido. Intoxicao por gases poluentes (nas reas urbanas)
e fitotoxidade de defensivos aplicados de forma inadequada tambm provocam sintomas nas
plantas, que no so semelhantes aos de pragas e doenas conhecidas, e que, portanto so
muitas vezes atribudas, erroneamente, a vrus. Por outro lado, h plantas contaminadas que,
por alguma razo, no apresentam qualquer sintoma (o que no quer dizer que no possam
infectar outras plantas, que iro demonstrar sintomas). Apenas o diagnstico em laboratrio
pode dar a certeza da infeco ou no de uma planta. Entretanto, cada sintoma que a planta
apresentar um aviso de que pode estar infectada. A cada sintoma adicional apresentado,
maior a desconfiana. Assim, preventivamente, o melhor tratar toda planta que apresente
algum dos sintomas descritos acima como suspeita, isolando-a das demais. Se for uma planta
valiosa, ou matriz para clonagem ou hibridao, pode valer a pena mandar testar em
laboratrio especializado (embora o custo seja elevado).
No cabe no escopo deste trabalho descrever em profundidade os mtodos de laboratrio,
para diagnstico de virose, mas segue um pequeno resumo:
Bio-ensaio

Nesse teste, a seiva oriunda da planta suspeita inoculada nas folhas de determinadas
espcies de plantas (principalmente Cassia occidentalis, Datura sp, Chenopodium sp.
e Tetragona expansa, para CyMV, e Gomphrena globosa, para ORSV). Estas plantas no so
infectadas sistemicamente (na planta toda) quando contaminadas com ORSV e/ou CyMV, mas
apresentam leses locais facilmente identificveis. Alguns dias aps a inoculao, as folhas
apresentam numerosos pontos necrticos, com caractersticas especficas para cada tipo de
vrus. Existem kits de teste venda, nos E.U.A.
ELISA
um ensaio imunolgico (ELISA = Enzyme-linked immunosorbent assay). Nesse teste, h uma
reao serolgica (de soro sanguneo animal) presena de vrus especficos. O diagnstico
dado pela mudana de cor da soluo contendo o soro. Este ensaio bastante preciso e
rpido, podendo ser aplicado em muitas amostras ao mesmo tempo. H tambm kits venda,
no exterior.
Microscopia Eletrnica
o mtodo mais direto de diagnstico, onde a seiva suspeita tratada com corante especial, e
visualizada num microscpio eletrnico (+ de 50.000 x). As partculas de vrus so facilmente
identificveis, de acordo com uma tabela descritiva. Este mtodo o mais preciso, detectando
vrus em concentraes to baixas a ponto de no serem detectadas por Bio-ensaio ou ELISA.
Entretanto, muito caro, pela complexidade do equipamento.
FORMAS DE TRANSMISSO
Por definio, o veculo de disseminao de vrus nas orqudeas a seiva. Ou seja, qualquer
ao que ponha em contato a seiva de uma planta contaminada com a de uma planta
saudvel, uma forma de transmisso de vrus. Por esse raciocnio, chega-se ao principal
vetor de disseminao: ferramentas de corte. Facas. tesouras, unhas, estacas, enfim, qualquer
objeto que possa provocar uma ferida na planta, so disseminadores de virose por excelncia.
As prprias folhas, ao bater umas nas outras, principalmente durante o transporte das plantas,
podem espalhar a doena.
Os insetos, mesmo os sugadores como pulges e cochonilhas, embora suguem seiva, indo de
uma planta para outra, no so considerados vetores especficos para CyMV e ORSV. No
entanto, transmitem alguns outros tipos de vrus, tambm danosos.
Outras formas importantes de contgio so a mistura de razes entre plantas doentes e
saudveis (quando as plantas esto muito prximas), e resduos. O vrus, embora inativo fora
da clula viva (como na gua e em resduos), mantm seu poder de infeco caso entre em
contato com tecido vivo. Em resumo, vasos, cacos e substrato contaminados, so fontes de
contgio, se forem usados em outras plantas. Da mesma forma, a gua pode carregar
partculas de vrus de uma planta para outra.
O ORSV, embora uma variante do vrus do mosaico do fumo, espcie distinta. Por sua vez, o
TMV (Mosaico do fumo) no infecta orqudeas. Apesar de no haver contaminao de
orqudeas com ORSV atravs de contato manual de resduos de fumo (cigarros), h risco de
surgimento de novos tipos de vrus comuns s duas plantas. O vrus TMV est presente em
alta porcentagem do fumo produzido, e, por conseqncia, nos cigarros.
preciso ter em mente sempre como se faz o contgio, ao se recomendar medidas
preventivas da disseminao de vrus.
TRATAMENTO

As perguntas que surgem com maior freqncia no meio orquidfilo, com relao a vrus, so:
"O que devo fazer para curar minha planta? Se no houver cura, o que fao com ela?" As
respostas, infelizmente, no so agradveis. No h tratamento conhecido para eliminar a
infeco por vrus de uma orqudea. H trabalhos em andamento neste sentido, principalmente
nos E.U.A., utilizando produtos como Interferon, ainda sem resultados concretos e
economicamente viveis. H muitas pessoas que afirmam que conseguiram "limpar" uma
planta, seja com produtos qumicos, seja expondo a sol pleno e outras teorias mais ou menos
fundamentadas em pesquisa cientfica. No h nenhuma "teoria" provada. Dessa forma,
plantas com vrus devem ser descartadas - se possvel incineradas. Substrato, cacos de
drenagem e vaso destas plantas no devem ser reaproveitados. Plantas contaminadas no
devem ser doados (a no ser para pesquisa), vendidos ou passados para outras pessoas de
forma alguma.
Podem-se amarrar estas plantas nas rvores do quintal? possvel, embora pouco
recomendvel. Embora no haja disseminao dos vrus acima por picadas de insetos, o risco
de ter plantas doentes nas proximidades da coleo podendo ser manuseados, cortados com
as mesmas ferramentas etc, grande. sempre melhor, porm mais doloroso, eliminar plantas
doentes.
Eliminao de Vrus por semeadura
J foi exaustivamente comprovado que as viroses mais destrutivas nas orqudeas, no so
transmitidas pelas sementes (provavelmente devido ausncia de estruturas de reserva na
semente). Portanto, pode-se utilizar uma planta doente como matriz, no intuito de obter-se
descendncia sadia. Este recurso freqente entre colecionadores e profissionais que utilizam
plantas como matrizes para melhoramento e hibridao, mantendo (em isolamento)
determinadas plantas, mesmo sabidamente contaminadas. Essas plantas so usadas como
matrizes femininas (portadoras da cpsula de sementes). Grifamos a palavra femininas, pois
no se deve utilizar plen de plantas contaminadas, que pode transmitir a doena para as
saudveis. As cpsulas devem ser colhidas maduras (j fendidas), e as sementes retiradas
sem utilizar objetos pontiagudos (apenas abrir a cpsula e dar algumas leves pancadas, para
que as sementes caiam numa folha de papel). Nunca utilizar o sistema de semeio de sementes
verdes, oriundos de plantas infectadas, pois a ao da ferramenta, ao raspar as sementes para
colocao no meio de cultura, ir ferir o tecido interno da cpsula, contaminando as sementes.
Eliminao de Vrus por Clonagem
Quando o Dr. Georges Morel inventou o processo de clonagem, na dcada de 60, seu objetivo
era produzir clones de batata isentos de vrus, a partir de cultivares muito produtivos, porm
infectados. Posteriormente, em 1964, estendeu a pesquisa s orqudeas (Cymbidium), j no
intuito de produzir grandes quantidades de plantas idnticas, para o mercado de flores. A lgica
da eliminao de vrus por clonagem era simples: j que os vrus das plantas iam infectando as
clulas medida que a planta crescia, deveria haver um ponto central de crescimento, onde o
vrus ainda no houvesse chegado a infectar as clulas. Esse ponto o meristema apical, que
o ponto de crescimento da planta, onde a diviso celular ocorre com muita rapidez. Se esse
ponto pudesse ser isolado e cultivado em laboratrio, poderiam ser obtidas plantas livres do
vrus. No caso da batata, assim como em outras culturas, o processo foi bem-sucedido,
gerando lotes de plantas idnticas, e saudveis. J nas orqudeas, houve um problema. Como
as orqudeas crescem de forma muito mais lenta do que outras culturas, o tamanho do grupo
de clulas saudveis extremamente pequeno (menos de 0,5mm). Este fato torna
extremamente difcil obter protocrmios viveis, se atendido o objetivo de obter plantas
saudveis. Embora seja tecnicamente possvel (e tenha sido feito com Cymbidium),
comercialmente no vivel. O que significa que nenhum laboratrio de clonagem produz lotes

de meristemas, livres de vrus, a partir de plantas contaminadas. Em resumo, se a matriz


estiver infectada, os mericlones, de modo geral, tambm sero. Nesse ponto, preciso chamar
a ateno para os seguintes fatos: a) No Brasil, a introduo dos 2 vrus mais importantes,
ocorreu na dcada de 60; b) Essa introduo se deu, com certeza, atravs da importao de
mericlones infectados e c) a expanso destas doenas no Brasil se deu pela proliferao da
multiplicao via meristema de plantas comercialmente desejveis, sem os controles
necessrios.
PREVENO
J que no h tratamento, a nica forma de evitar a disseminao de vrus nas colees,
adotar procedimentos para 1) Identificar plantas doentes; 2) Evitar introduzir plantas doentes no
orquidrio; 3) Eliminar plantas infectadas; 4) Prevenir novas contaminaes. De forma prtica,
seguem algumas "regras bsicas":
1 - No adquirir plantas "de risco" (colees antigas, orquidrios comerciais sem normas
rgidas de controle etc)
2 - Aceitar presentes de "cortes especiais" com reservas. Manter tais plantas isoladas por 1
ano, ou at que tenha feito teste em laboratrio.
3 - Eliminar prontamente quaisquer plantas comprovadamente doentes com vrus;
4 - Isolar plantas suspeitas
5 - Desinfetar bancadas, removendo detritos (razes mortas etc), antes de renovar com plantas
novas;
6 - No reutilizar xaxim, cacos ou vasos (vasos podem ser reutilizados, se mergulhados numa
soluo de cloro a 20% por 2 horas, depois secas ao sol)
7 - Manter limpo o local de plantio, no misturando xaxim velho com novo etc;
8 - No replantar grande nmero de plantas num s dia, principalmente se forem plantas
adultas e antigas;
9 - Controlar pragas
10 - Manter distncia entre os vasos (1/2 dimetro do vaso);
11 - Embalar adequadamente plantas de exposio, para minimizar atrito e feridas;
12 - No manusear em demasia as plantas. Cuidado ao retirar partes secas ou mortas, para
no ferir as plantas;
13 - No pendurar plantas umas sobre as outras;
14 - No reutilizar gua ou soluo de fertilizante;
15 - Esterilizar ferramentas adequadamente;
16 - No fumar no orquidrio.

17 - Nunca andar pelo orquidrio, com canivete na mo, cortando flores e folhas, tirando
mudas, etc., utilizando a mesma ferramenta.
A desinfeco de ferramentas de corte o ponto mais importante da lista, pois as ferramentas
disseminam o virus com grande eficincia. H vrios mtodos para esterilizao, que podem
ser adotados de acordo com cada tipo de material da ferramenta:
1 - Fogo. Esse o mais eficiente, seguro e barato. Tanto o CyMV como o ORSV so
permanentemente destrudos por exposio a temperaturas acima de 150 C. por alguns
segundos. Para atingir essa temperatura, basta levar a lmina ao fogo, em toda sua extenso,
por cerca de 15-20 segundos. Por dar melhor cobertura, dar preferncia ao fogo de gs, como
o de fogo, fogareiro ou bico de bunsen. Esse mtodo tem o inconveniente de destruir a
tmpera da ferramenta, inutilizando-a aps certo nmero de "queimas". Assim, no
apropriado para tesouras de poda e outras ferramentas de alto custo. Sugerimos utilizar facas
pequenas, de ao inox (tipo "verdura") e cabo de madeira, que tem custo muito baixo (cerca de
R$ 1), e resistncia moderada ao fogo. Aps queimar a lmina, passar a faca em gua fria.
Cuidado para no misturar facas "usadas" com as j esterilizadas, na banca de plantio. Uma
boa opo construir uma caixa de madeira, com dois compartimentos, para receber as facas.
No lado "limpo", pintar com tinta verde, e, do outro (facas usadas), pintar de vermelho. Assim,
vai-se passando as facas do verde para o vermelho medida que vo sendo usadas, evitando
confuso.
2 - Custicos. Outro sistema bastante eficiente, desde que aplicado corretamente. Os produtos
recomendados so as solues de cloro (que atuam por oxidao) e o fosfato trissdico (que
atua por elevao do pH). Deve-se optar por esterilizao por produto qumico, quando a
material da ferramenta no permitir o uso do fogo (por ser de plstico ou alumnio). Para utilizar
soluo de cloro, recomendamos o seguinte: diluir 300 ml de soluo concentrada de
hipoclorito de sdio (cloro lquido de piscina), em 700 ml de gua pura. Manter essa soluo
tampada sempre que no estiver sendo usada (pois o cloro evapora). Passar gua limpa na
ferramenta antes de mergulhar no cloro (para remover resduos vegetais), deixar a ferramenta
no cloro por 3-4 minutos, e passar novamente gua limpa corrente (no a mesma da etapa
anterior...) para tirar o excesso de cloro. Quando a soluo de cloro ficar muito suja, ou a cada
semana, trocar por nova. Este sistema timo para tesouras de poda de ao inox, que se
estragam rapidamente no fogo, mas que tem boa resistncia ao cloro. Para utilizar o TSP
(fosfato trissdico), fazer uma soluo saturada (isto , dissolver o sal de TSP em gua
destilada at que no consiga dissolver mais nada, restando uma camada de cristais no fundo
do vasilhame. Manter sempre saturada). O tratamento da ferramenta parecido com o utilizado
no cloro, devendo permanecer mais tempo (10-15 minutos). Ateno: ambos os produtos, alm
de serem corrosivos para as ferramentas, tambm atacam a pele. Utilizar sempre luvas de
borracha ao manusear estes produtos. H quem utilize o lcool para desinfetar ferramentas.
Para eliminar fungos e bactrias, pode ser eficaz. Para vrus, insuficiente. Flambar a
ferramenta com lcool, tambm ineficaz, pois no se atinge a temperatura necessria.
NOVOS RUMOS
H muitos trabalhos de pesquisa em andamento, visando resolver o problema das viroses em
plantas em geral, e tambm nas orqudeas. Houve algum progresso na eliminao de vrus em
meristemas, atravs do tratamento do meristema apical dissecado, com soro especfico para
CyMV e ORSV, o que pode resultar na produo de mericlones saudveis a partir de matrizes
infectadas. Mas a real soluo do problema passa pela criao de plantas imunes a vrus. Esse
processo de engenharia gentica, que tem atingido resultados surpreendentes em culturas
como alfafa e tomate, consiste na introduo, no ncleo da clula vegetal, de determinados

genomas virais no-ativos, tais como a "capa" do vrus. Na presena deste genoma, o vrus
no consegue se replicar, o que resulta na imunidade da planta hospedeira. Para se fazer o
transporte deste genoma, tem-se utilizado uma bactria causadora de galhas em plantas
(Agrobacterium tumefaciens). Usa-se a bactria para introduzir o genoma viral na forma de
plasmdeos (DNA no cromossmico), e depois se aplica bactericida para eliminar a bactria.
Infelizmente o progresso nesse campo, aplicado s orqudeas, tem sido mais lento do que o
esperado, devido ao fato da nica bactria possuidora da capacidade de transportar o genoma
de resistncia (A. tumefaciens) ser especfico de dicotiledneas, no sendo capaz de atuar nas
monocotiledneas, como as orqudeas. Atualmente estuda-se mtodos de injeo direta do
genoma viral no ncleo das clulas meristemticas. Caso haja sucesso nessa empreitada,
poderemos ter, num futuro no muito distante, clones transgnicos de orqudeas com
resistncia a virus, o que abrir uma nova etapa na histria da orquidofilia. Resta esperar e
torcer...
Compilado e editado por
Eng. Agr. Roland Brooks Cooke
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