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Les procds downstream

en biotechnologies :
stratgies, volutions et innovations

Violaine Aths
vathes@grignon.inra.fr
UMR Gnie et Microbiologie des Procds alimentaires
INRA / AgroParisTech, Grignon

La place des oprations de sparation dans


les Biotechnologies

Procds
downstream

Regroupent les oprations


de sparation des
constituants des milieux,
dextraction des
biomolcules, de leur
purification et de leur
stabilisation

Contexte du
systme de
transformation
des agroressources

Agro-Ressources, Agro-rsidus

Prtraitements : mcaniques, chimiques,


enzymatiques, microbiologiques

Sparation
Co-produits

Sparation : 40 70%
de linvestissement
et des cots de
fonctionnement dans
les bioindustries*

Fermentation / Bioconversion

Sparation- purification
Co-produits

*Ramaswamy et al., 2013


Humphrey et Keller, 2001

Transformation (chimie / Biocatalyse) et


cration dune valeur dusage

R
E
T
R
O
I
N
G
E
N
I
E
R
I
E

L'obtention de molcules biosources

Catalyse
chimique ou
enzymatique

Molcule
biosource

Sucres
Fermentation

Ce quon pense obtenir par cette voie

L'obtention de molcules biosources

Catalyse
chimique ou
enzymatique

Sucres

- Molcule dintrt
- Substrats/nutriments
- Coproduits
- Biomasse
- Protines
- Sels

Fermentation

Ce quon obtient en ralit

L'obtention de molcules biosources

Catalyse
chimique ou
enzymatique

Molcule
biosource
Procds
downstream

Sucres
Fermentation

Purification

Les challenges de la purification

- Substrats/nutriments
- Coproduits
- Biomasse
- Protines
- Sels

L'obtention de molcules biosources

Catalyse
chimique ou
enzymatique

Molcule
biosource
Procds
downstream

Sucres
Fermentation

Purification

Les challenges de la purification

EFFICACE
ECONOMIQUE
FIABLE
FLEXIBLE / EVOLUTIVE
ECO-CONCUE

Industries alimentaires

Energie et environnement

Produits ferments
Texturants et paississants
Composs darmes
Enzymes
Conservateurs (acidifiants)
Exhausteurs de got
Ferments

Traitement des eaux uses


Traitement des dchets
Biormdiation
Fermentation mthanique
Biocarburants

Biotechnologies industrielles
Industrie chimique
Acides organiques
thanol et (bio)solvants
(Bio)lubrifiants et
tensio-actifs
Enzymes
Polymres microbiens
Synthons

Sant
Antibiotiques
Vitamines
Acides amins
Vaccins
Hormones
Protines recombinantes

Agriculture
Bioinsecticides
Biopesticides
Ensilage

Industries alimentaires
Produits ferments
Texturants et paississants
Composs darmes
Enzymes
Conservateurs (acidifiants)
Exhausteurs de got
Ferments

Diversit des
molcules
fonctionnelles

Energie et environnement
Traitement des eaux uses
Traitement des dchets
Biormdiation
Fermentation mthanique
Biocarburants

Biotechnologies industrielles
Industrie chimique
Acides organiques
thanol et (bio)solvants
(Bio)lubrifiants et
tensio-actifs
Enzymes
Polymres microbiens
Synthons

Sant
Antibiotiques
Vitamines
Acides amins
Vaccins
Hormones
Protines recombinantes

Agriculture
Bioinsecticides
Biopesticides
Ensilage

Diversit des
molcules
fonctionnelles
Choix du procd de sparation

Connaissance des
proprits physicochimiques de la molcule
dintrt, dans son
environnement
(taille, hydrophobicit, charge,
solubilit, volatilit, etc)

Qualit attendue
de la biomolcule
(puret, activit,
stabilit,)

Contraintes
conomiques et
environnementales
(cots, impacts
environnementaux)

Compromis / procd optimal

btention de molcules partir dun procd


otechnologique

Downstream processing

II

Elimination des
insolubles

Sparation
primaire des
produits

Concentration et
Purification

Destruction des
cellules

Recyclage des
cellules

I
Bioracteur

III

Centrifugation
Filtration
Dcantation
Microfiltration

II
Extraction par solvant
Prcipitation
Adsorption
Distillation
Membrane

III
Distillation
Chromatographie :
- affinit
- change dions
- exclusion
Electrodialyse

Stratgies d'amlioration et innovation dans les


procds de sparation
Rduction des impacts
environnementaux

Amlioration des
performances

Consommations
nergtiques
Consommations en eau
Limitation rejets
Alternatives / solvants

Approche intgre multichelle dans la conception


des procds
Intensification des procds
Rcupration de molcules
in-situ (ISPR)

Intgration de nouvelles technologies


Vision de l'usine du futur utilisant
les technologies d'intensification des
procds ( droite),
comparer avec une usine actuelle (
gauche) : une conomie de 30 % en
matires premires, nergies et cots
opratoires. Courtesy of DSM.
Charpentier (2011)

Stratgies d'amlioration et innovation dans les


procds de sparation
Rduction des impacts
environnementaux

Amlioration des
performances

Consommations
nergtiques
Consommations en eau
Limitation rejets
Alternatives / solvants

Approche intgre multichelle dans la conception des


procds
Intensification des procds

Rcupration de
molcules in-situ
(ISPR)

Intgration de nouvelles technologies

Exemple de la pervaporation
couple la production de
butanol par fermentation

Exemple de la production de butanol : schma dun


procd classique de purification

Fermentation A-B-E (ActoneButanol-Ethanol; souvent en


proportions 3:6:1)
Inhibition (C. acetobutylicum)
partir de 20 g/L dABE
Van der Merwe et al. / Fuel, 105 (2013)

Intrt nergtique de lextraction in situ par


pervaporation en comparaison avec la distillation
Usage butanol
carburation :
D.En = 35 MJ/kg

Obtention de
ButOH 99,9% m/m

Concentration en
butanol en
fermentation

1- Energie ncessaire pour rcuprer


le butanol selon un processus de
distillations / dcantation
Leland M.V. in Biofuels, Bioproducts & Biorefining (2008)

Intrt nergtique de lextraction in situ par


pervaporation en comparaison avec la distillation

Concentration en
butanol en
fermentation

2- Energie estime pour rcuprer le butanol par pervaporation


avec diffrents types de membranes ( : facteurs de sparation
(slectivit membranaire) de 30 120)
Leland M.V. in Biofuels, Bioproducts & Biorefining (2008)

Csolvants permat (g/L)

Csolvants fermenteur (g/L)

Extraction in situ du butanol par pervaporation

fermenteur

permat

Couplage dune fermentation ABE avec de la pervaporation pour la rcupration de butanol


(Van Hecke et al, 2012)
Fermentation continue (long terme) possible grce au couplage avec la pervaporation
Permat concentr en butanol (60 g/L)

Stratgies d'amlioration et innovation dans les


procds de sparation
Rduction des impacts
environnementaux

Amlioration des
performances

Consommations
nergtiques
Consommations en eau
Limitation rejets
Alternatives / solvants

Approche intgre multichelle dans la conception des


procds

Intensification des
procds
Rcupration de molcules
in-situ (ISPR)

Intgration de nouvelles technologies

Volatilit
biomolcule

Procds mergents ou en volution dans la rcupration


de biomolcules

Distillation

Niveaux levs de maturits


technologique et
dutilisation*
Pervaporation

Distillation membranaire
Entranement lair

Extraction par
fluide compress

Extraction par solvant


Electrodialyse

Entranement lair
par membrane
Extraction liquide-liquide
membrane

Chromatographie
Procds *optimum technologique : procd parfaitement connu. Pas damlioration possible Procds
traditionnels *optimum dutilisation : domaine dutilisation le plus vaste possible
mergents

Exemple dune colonne dextraction liquide/liquide

Volatilit
biomolcule

Procds mergents ou en volution dans la rcupration


de biomolcules

Distillation

Pervaporation
Distillation membranaire

Entranement lair

Extraction par
fluide compress

Extraction par solvant


Electrodialyse

Entranement lair
par membrane
Extraction liquide-liquide
membrane

Chromatographie Contacteurs membranaires


Procds
traditionnels

Procds
mergents

Contacteur membranaire
Membrane poreuse permettant la stabilisation dune interface entre deux
phases (aqueuse, gazeuse, organique)
Interface immobilise
Phase 1
Phase 2

Membrane poreuse
Pas de mlange
entre phases

Choix largi des fluides


possibles mettre en
contact

Surface dchange
matrise et connue
Modularit

Contacteurs
membranaires
Compacit

DIMENSIONNEMENT
AIS

Contacteurs membranaires CrossFlow module


fibres creuses
Phase dentranement
Phase dentranement +
Composs darmes

(air, solvant organique, eau)


Celgard Liquicel

Alimentation
aqueuse

Retentat
aqueux

Paq > Pentranement

Grande compacit
( a >2000 m2/m3 )*

Paq

Pentranement

Membrane
poreuse
(hydrophobe)

* Colonnes dispersion : 3-30 m2/m3 - Tours garnissage : 30-300 m2/m3 - Colonnes agites : 150-450 m2/m3

Extraction continue de la -dcalactone produite par voie


microbiologique Extraction liquide-liquide membrane
P

H3C

gamma-dcalactone(mg.l-1)
160

E1
120

E2

(MM = 170 g/mol., pche)

A2

80

A1

40

hexane
racteur (7l)
Micro-organisme
Sporidiobolus
Salmonicolor
Dure dextraction
E1 (1h)
E2 (1h30)

0
0

20

40

60

80

100

temps (h)
A : Apport prcurseur (ricinolate de mthyle) 1g/l
E : Priode extraction
Rendement dextraction (%)
72
83

Quasi-totalit de la lactone produite,


extraite en 1 h, sans filtration
pralable du milieu.

Utilisation de SIR (Solvent Impregnated Resins) en


Pas de mlange
fermentation
entre phases
Compacit

Surface dchange
matrise et connue

SIR

Modularit

Critres de slection de SIRs pour lISPR :


1 biocompatibilit
2 slectivit extraction partir du milieu
3 rgeneration de la phase extractante

Exemple de lextraction ractive


de lacide lactique
Intrt / procd traditionnel qui
gnre un volume important de
dchets (gypse(CaSO4))
van den Berg et al. (2010) Techno-economic evaluation of solvent impregnated particles in a bioreactor
van den Berg et al. (2008) Extractant Selection Strategy for Solvent-Impregnated Resins in Fermentations

Les solvants alternatifs : la voie des solvants verts

Solvant eco-friendly : Solvant prsentant un bilan environnemental et sanitaire


positif (non COV, non toxique, non co-toxique) : peut tre dorigine ptrochimique
Agrosolvant : Solvant vert dont au moins une partie des matires premires est
dorigine renouvelable
- Bilan environnemental amlior (bilan carbone, biodgradabilit)
- Alternative aux ressources fossiles
Filires dobtention principales :
- Sucrochimie : drivs fermentation sucres (lactates, succinates, actates)
- Lipochimie : esters dhuiles vgtales (EMHV, EEHV)
- Autres : bois, agrumes (terpnes)
Les agrosolvants, Ple IAR De Caro P et al. (2008) Techniques de lIngnieur

Evaluation du potentiel de substitution des agrosolvants


utilisables en extraction
Paramtres de solubilit de Hansen

Approche molculaire
complmentaire dune
approche macroscopique
(proprits physico-chimiques
(densit, viscosit, volatilit)
Evaluation impacts
environnementaux des
agrosolvants
Projet ANR InBioSynSolv : Virtual laboratory
for synthons and biosolvent design based on
reverse molecular engineering
Ernenwein C., Frville V., Pezron I. Les agrosolvants en extraction. Eco-extraction du vgtal - Procds Innovants
et Solvants alternatifs, Dunod (2011)

Ncessit
dinnover

Rduire cot des tapes de purification pour tre


concurrentiel sur la production dune biomolcule
Technologies et solvants alternatifs dans le cas de
lextraction liquide / liquide (membranes, solvants)

Explorer diffrents principes de rcupration : Ecoconception / nouvelles technologies


Comment valuer impacts environnementaux des
Rduction impacts
environnementaux nouvelles technologies

Intensification
procds

ISPR (In Situ Product Recovery)


Durabilit de la production de biomolcules : vers
une approche intgre muti-chelle => ingnierie
produit / procds

Programme
Bioraffinerie
des
lignocelluloses
INRA dept
CEPIA

Centre
excellence
Biotech
Blanches
(ECP,
APT,RMS)

UMR
GMPA,
Grignon
(78)
Chaire ABI

Merci de votre
attention !

Centre
excellence
Biotech
Blanches
(ECP,
APT,RMS)

Programme
Bioraffinerie
des
lignocelluloses
INRA dept
CEPIA

UMR
GMPA,
Grignon
(78)
Chaire ABI

Violaine Aths
vathes@grignon.inra.fr
UMR Gnie et Microbiologie des Procds alimentaires
INRA / AgroParisTech, Grignon