Tampn qumico

Para otros usos de este trmino, vase Tampn.

Un tampn, buffer, solucin amortiguadora o solucin reguladora es la mezcla en concentraciones
relativamente elevadas de uncido dbil y su base conjugada, es decir, sales hidrolticamente activas.
Tienen la propiedad de mantener estable el pH de unadisolucin frente a la adicin de cantidades
relativamente pequeas de cidos o bases fuertes. Este hecho es de vital importancia, ya que
meramente con un leve cambio en la concentracin de hidrogeniones en la clula se puede producir un
paro en la actividad de las enzimas.
Se puede entender esta propiedad como consecuencia del efecto ion comn y las diferentes constantes
de acidez o basicidad: una pequea cantidad de cido o base desplaza levemente el equilibrio cidobase dbil, lo cual tiene una consecuencia menor sobre el pH. 1
Cada sistema buffer tiene su propio rango efectivo de pH, el cual depender de la constante de
equilibrio del cido o base empleado. Son importantes en el laboratorio y en la industria, y tambin en la
qumica de la vida. Tampones tpicos son el par amonaco-catin amonio, cido actico-anin acetato,
anin carbonato-anin bicarbonato, cido ctrico-anin citrato o alguno de los pares en la disociacin
del cido fosfrico.
ndice
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1 Mecanismo de actuacin de las soluciones tampn

2 Clculo del pH de disoluciones tampn

3 Sistemas tampn fisiolgicos

3.1 Niveles de pH en el cuerpo humano

3.2 Sistemas tampn en el organismo

3.2.1 Tampn bicarbonato

3.2.2 Tampn fosfato

3.2.3 Tampn hemoglobina

3.2.4 Aminocidos y protenas

4 Aplicaciones industriales de las soluciones tampn

5 Experiencias con soluciones tampn

6 Referencias

7 Enlaces externos

Mecanismo de actuacin de las soluciones tampn[editar editar

cdigo]
Para poder entender con claridad el mecanismo que utiliza el organismo para evitar cambios
significativos de pH, pondremos un ejemplo de actuacin del tampn de ms importancia en el
organismo, el equilibrio de cido carbnico (H2CO3) y bicarbonato (HCO3-), presente en el lquido
intracelular y en la sangre. Como producto del metabolismo se produce CO 2 que al reaccionar con las
molculas de agua produce cido carbnico, un compuesto inestable que se disocia parcialmente y
pasa a ser bicarbonato segn el siguiente equilibrio:
CO2 + H2O

H2CO3

HCO3- + H+

Entonces, el bicarbonato resultante se combina con los cationes libres presentes en la clula, como
el sodio, formando asbicarbonato sdico (NaHCO3), que actuar como tampn cido. Supongamos
que entra en la clula un cido fuerte, por ejemplo, cido clorhdrico (HCl):
HCl + NaHCO3 NaCl + CO2 + H2O
Como se puede ver en la anterior reaccin el efecto cido clorhdrico queda neutralizado por
el bicarbonato de sodio y resultan como productos sustancias que no provocan cambios en el
pH celular y lo mantienen en su valor normal, que es 7,4.

Clculo del pH de disoluciones tampn[editar editar cdigo]

Frecuentemente se utiliza la ecuacin de Henderson-Hasselbalch para el clculo del pH en
soluciones reguladoras. Sin embargo, debe aclararse que esta ecuacin no es aplicable en
todos los casos, ya que para su deduccin se realiza una serie de suposiciones. Esta ecuacin
suele proporcionar resultados incorrectos cuando las concentraciones del cido y su base
conjugada (o de la base y su cido conjugado) son bajas. Para el clculo del pH, se debe saber
el pKa del cido y la relacin entre la concentracin de sal y cido, como se observa a
continuacin

Recordemos que pKa de un cido dbil se obtiene a partir de su constante de acidez (Ka) y
es especfico para cada cido. Supongamos que disponemos de una determinada
cantidad de un cido dbil, por ejemplo, cido lctico de concentracin 10 mM. Sabemos,
que la concentracin de su sal conjugada, el lactato, es de 2 mM y que el pKa cido
del cido lctico s 3,86. Por tanto, podemos calcular el pH del cido lctico en una
solucin acuosa sin ningn tipo de sistema tamponador con la ecuacin de HendersonHasselbalch:
CH3-CHOH-COOH

CH3-CHOH-COO- + H+

pH = 3,86 + log (2 mM/ 10mM) = 3,86 - 0,7 = 3,16

Por tanto, el pH de una solucin acuosa de cido lctico de concentracin 10
mM, sin la intervencin de ningn tampn es 3,16. Es decir que si esto se
produjese en el lquido intracelular y no existieran las soluciones amortiguadoras
su pH estndar de 7,4 bajara bruscamente hasta 3,16. Sin embargo, esto no
ocurre en nuestro organismo gracias a los tampones qumicos.
Si reflexionamos sobre la ecuacin de Henderson-Hasselbalch se deduce que el
pH del sistema amortiguador depende de la proporcin relativa entre sal y cido,
y no de sus concentraciones absolutas. Es decir que si vamos aadiendo agua al
sistema variarn las concentraciones absolutas de cada sustancia, pero no su
cociente de concentraciones. No obstante, si la dilucin es muy grande, el
equilibrio del cido y su sal conjugada se desplaza hacia los productos y, por
tanto, aumenta la sal y disminuye el cido, entonces el cociente sal/cido
aumenta muy significativamente.
Supongamos ahora que aadimos una solucin amortiguadora de bicarbonato de
potasio (KHCO3) y una cantidad grande de agua a la anterior solucin de cido
lctico anterior de 10 mM, suficiente para que se rompa el equilibrio de
concentraciones del cido y su sal conjugada. En consecuencia, la concentracin
de cido lctico disminuye a 0,1 mM y la concentracin de lactato de potasio
aumenta a 200 mM. Calculemos el pH de la nueva solucin:
CH3-CHOH-COOH + KHCO3 CH3-CHOH-COOK + CO2 + H2O
pH = 3,86 + log (200 mM/ 0,1 mM) = 3,86 + 3,3 = 7,16
Es decir que partiendo de una solucin de cido lctico inicial de
concentracin 10 mM y pH 3,16 cido - sta ha acabado
transformndose en una solucin de cido lctico de concentracin 0,1
mM y pH 7,16 neutro - gracias a la intervencin de un tampn qumico,

en este caso, el bicarbonato de potasio. As es como el organismo

consigue mantener su pH alrededor de 7,4, a pesar de que entren
sustancias cidas o bsicas en el cuerpo.

Sistemas tampn fisiolgicos[editar editar cdigo]

Niveles de pH en el cuerpo humano[editar editar
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Muchas biomolculas no actan a un determinado valor de pH y solo
toleran fluctuaciones mnimas en el pH. Dado el bajo grado de ionizacin
del agua (H2O), cuando aadimos en sta una pequea cantidad de
cido o de base, el pH vara en mucha cantidad, llegando a niveles de
pH en los cuales las biomolculas no podran cumplir sus funciones. Por
esta razn los lquidos fisiolgicos contienen tampones que, a diferencia
del agua, mantienen el pH constante. Los tampones mantienen la
cantidad de cidos y de bases en equilibrio en un determinado pH en el
cual la actividad biolgica de las protenas, hormonas, enzimas, bombas
de iones... sea ptima. En humanos, los valores compatibles con el
mantenimiento de funciones vitales son de pH entre 6,8 y 7,8; siendo el
intervalo de 7,35 a 7,45 el de normalidad. En concreto, podemos decir
que cada lquido fisiolgico tiene un nivel caracterstico normal de pH: Sangre arterial: pH= 7,4 - Sangre venosa: pH= 7,35 - Lquido intersticial:
pH= 7,35 - Lquido intracelular: pH= 6 - 7,4 - Orina: pH= 4,5 - 8 - HCl
gstrico: pH= 0,8
Los tampones son los primeros responsables de mantener estos niveles
de pH constantes aunque en el organismo se produzcan altas
cantidades de cidos debido al metabolismo. As, los tampones son el
primer nivel de defensa contra los cambios de pH. Tambin contribuyen
al equilibrio la regulacin respiratoria (segunda lnea de defensa) y la
regulacin renal (tercera lnea de defensa). Cuando hay alteraciones
debidas a enfermedades de los riones, pulmones o por diabetes
mellitus, el pH se ve alterado y se padece acidosis (pH<7,37) o alcalosis
(pH>7,43). Las causas principales de acidosis son: insuficiencia renal,
acidosis tubulorrenal, cetoacidosis diabtica, acidosis lctica, sustncias
txicas (etilenglicol, salicilato (en sobredosis), metanol, paraldehido,
acetazolamida o cloruro de amonio. Las causas principales de alcalosis

son: uso de diurticos (tiacidas, furosemida, cido etacrnico), prdida

de cido causada por vmitos o aspiracin del contenido del estmago,
glndulas suprarrenales hiperactivas (sndrome de Cushing o
utilitazacin de corticosteroides). Estas alteraciones pueden rendir su
efecto en la primera, la segunda o la tercera lnea de defensa;
impidiendo as el funcionamiento de todos los mecanismos complexos
que mantienen los niveles de pH a niveles adecuados.

Sistemas tampn en el organismo[editar editar

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Existen tampones de gran importancia en el organismo:
Inorgnicos:
Tampn bicarbonato:
CO2 + H2O

H2CO3

HCO3 - + H+

Tampn fosfatico:
H2PO4-

HPO42- + H+

Orgnicos:
Tampn hemoglobina:
HHbO2

HbO2- / HbH

Hb- + H+

Aminocidos y protenas

Tampn bicarbonato[editar editar

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Tal y como se ha comentado anteriormente,
el tampn bicarbonato est compuesto por
cido carbnico (H2CO3) y bicarbonato
(HCO3-) y el valor de su pKa es de 6,1. Es el
tampn ms importante de la sangre
(pH=7,4), representa el 75% de la capacidad
buffer total de la sangre. Tambin est
presente en el lquido intersticial. Es un
tampn muy eficaz porque la relacin
HCO3-/ H2CO3 es muy alta, lo que supone
una alta capacidad para amortiguar los

cidos. Supone una ventaja el hecho que se

trata de un sistema abierto ya que el
CO2 puede ser eliminado en la respiracin
muy rpidamente, los H+ se pueden eliminar
por va renal y el HCO3- puede reemplazarse
en la orina. En realidad, este tampn est
compuesto por dos equilibrios, pues el cido
carbnico forma CO2, generando una
molcula de H2O.

Bicarbonat

Cuando el pH disminuye, el bicarbonato toma

los protones libres. As, el equilibrio se
desplaza hacia el H2CO3, que a su vez,
mediante la reaccin catalizada por la
anhidrasa carbnica (glbulos rojos), cede
una molcula de H2O y se convierte en CO2,
el cual se elimina a travs de los pulmones.
Por el contrario, si el pH de la sangre
aumenta, se forma HCO3- a partir de
H2CO3, lo que conduce a mayor captacin
de CO2. Las concentraciones de HCO3- y de
H+ tambin se pueden controlar por

mecanismos fisiolgicos a nivel renal. El

rin puede eliminar protones unindolos a
amonacos o fosfatos y mantiene la
concentracin de bicarbonato mediante
reabsorcin o regeneracin del mismo. La
suma de las formas sal y cido se llama
reserva alcalina. En condiciones normales,
esta suma tiene el valor 25,2 mEq de
CO2 por litro. Como a pH sanguneo
(pH=7,4), la proporcin entre la forma sal y
cido es de 20, resulta que [HCO3-] es 24
mEq/L y [CO2] es 1,2 mEq/L. As, es
importante tener en cuenta que el cuerpo
necesita ms bicarbonato que no cido
carbnico porque el metabolismo produce
ms cidos que bases.

Tampn fosfato[editar editar

cdigo]
El tampn fosfato est compuesto por el
hidrgeno fosfato (NaHPO4-2) y el
dihidrgeno fosfato (NaH2PO4-). Acta en el
plasma y el lquido intersticial. Este tampn
tiene un pKa de 6,8, el cual est mucho ms
cerca del pH plasmtico. Esto significara que
este tampn tendra que ser ms til que el
anterior, pero no es as ya que se encuentra
en concentraciones menores en sangre y la
eliminacin del fosfato es mucho ms lenta,
por va renal.

Fosfat

A pH fisiolgico de 7,4, la relacin HPO4-2/

H2PO4- es igual a 4. As, se trata de un
sistema eficaz para amortiguar cidos. Como
hemos dicho, a nivel sanguneo, el tampn
bicarbonato resulta ms til que el tampn
fosfato ya que este ltimo se encuentra en
concentraciones bajas. Ahora bien, a nivel
intracelular, el tampn fosfato tiene
concentraciones elevadas y es ms eficiente.

Tampn hemoglobina[editar editar

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La hemoglobina es una protena globular
multimrica que dispone de cuatro puntos de
unin a ligandos cuyas propiedades de unin
estn reguladas alostricamente. La funcin
principal de la hemoglobina es el transporte
de oxgeno por la sangre. Referente a su
estructura, se trata de un heterotetrmero y
consta de dos pares de cadenas
polipeptdicas diferentes. Cada una de las
cadenas lleva un hemo como grupo
prosttico, donde se unen las molculas de
O2, por lo que una hemoglobina puede unir
como mximo cuatro molculas de O2. La
captacin de O2 se ve afectada, entre otros
factores, por los H+ y el CO2. Algunos
factores favorecen el estado T, en el cual la
protena no tiene O2 unidos, y otros
favorecen el estado R, en el cual la
hemoglobina tiene unidas molculas de O2.
Este fenmeno se denomina efecto Bohr. Es
muy positivo para remarcar la diferencia
entre las distintas afinidades para el O2; la

cual es esencial para que cumpla su funcin

de transporte.
Cuando el CO2 forma cido carbnico y
protones, los protones estabilizan el estado
T, de descarga de O2. As, en los capilares
perifricos, dnde encontramos CO2, la
hemoglobina cede las molculas de O2. En
los capilares de los alvolos pulmonares se
invierte este efecto. As, cuando se unen H+
a la hemoglobina, se produce un efecto en el
equilibrio del tampn bicarbonato ya que se
induce a la formacin de bicarbonato. Es un
tampn fisiolgico muy eficiente gracias al
cambio de su pK cuando pasa de la forma
oxidada (pK=7,16) a la reducida (pK= 7,71) y
a la gran cantidad que hay en la sangre.

Aminocidos y
protenas[editar editar cdigo]
Los aminocidos tienen carcter anftero, es
decir, pueden ceder protones y tambin
captarlos. Esto es as gracias a dos de los
radicales comunes en todos los aminocidos:
el grupo NH2 y el grupo COOH. Estos
radicales, al estar en contacto con el agua,
se presentan ionizados o protonados;
actuando los dos como donantes o aceptores
de protones.

En pH cidos:
- El NH2 capta un protn: NH3+ (el pka para
este radical es 9)
En pH bsicos:

- El COOH pierde un protn: COO- (el pKa

para este radical es 2)

En el punto de pKa del grupo amino existe el

50% de radicales amino protonados (NH3+)
y el otro 50% de radicales amino
desprotonados (NH2). En este punto, la
variacin de pH, si adicionamos NaOH a la
solucin, es mnima. Por lo tanto, en este
punto la capacidad amortiguadora es
mxima.
En el punto de pKa para el grupo carboxil
existe el 50% de radicales carboxil
protonados (COOH) y el otro 50% de
radicales carboxil desprotonados (COO-). En
este nivel de pH el aminocido tambin es
buen amortiguador.
En el punto isoelctrico de los aminocidos
sin cadena radical cida o bsica se
encuentra a medio camino entre el pKa del
grupo amino y el pKa del grupo carboxil. Y
encontramos el aminocido en su forma
zwitterin, com ambos grupos funcionales
ionizados: NH3+ y COO-.
El punto isoelctrico de los aminocidos con
cadenas protonables es diferente ya que
existe un tercer pka, que corresponde al
valor de pH en el cual el protn de la cadena
lateral se disocia.
As, vemos como esta capacidad para captar
y ceder protones convierte a las protenas y
aminocidos en amortiguadores del pH,
actuando como cidos si estn protonados, o
como bases, si no lo estn.

Muchas protenas tienen grupos protonables

en la cadena radical variable, as cada
protena o aminocido tiene su punto
isoelctrico y sus pKa caractersticos para
cada grupo protonable del radical variable.
Los pKa pueden verse afectados por
radicales prximos y as, puede variar
calidad amortiguadora de los aminocidos
segn radicales de su entorno. Por ejemplo,
la histidina, prxima al grupo hemo en la
hemoglobina, tiene pK muy diferentes segn
si est unida al oxgeno o no.
Cuando los aminocidos se unen formando
pptidos mediante enlaces entre el grupo
COOH de un aminocido y el grupo NH2 de
otro, desaparecen sus propiedades
amortiguadoras. Ahora bien, siempre existen
los grupos terminales y tambin los grupos
ionizables de las cadenas laterales de los
aminocidos: cido asprtico y glutmico,
arginina, lisina, histidina, etc. As, para
determinar su capacidad amortiguadora,
solamente observaremos los pK de los
terminales y de los laterales ionizables.

Aplicaciones industriales de
las soluciones
tampn[editar editar cdigo]
Como hemos visto las soluciones tampn
son muy tiles para el mantenimiento del pH
en sistemas biolgicos, como por ejemplo el
cuerpo humano, pero sus propiedades van
mucho ms lejos y son ampliamente usadas
en las industrias actuales.

En la Industria agrcola, las soluciones

tampn se usan para la fertirrigacin y la
agricultura hidropnica (cultivar plantas
usando soluciones minerales y no suelo
agrcola). Todas las plantas tienen un
intervalo de pH en que las races
absorben nutrientes de forma idnea.
Una variacin del pH puede afectar al
proceso de absorcin de las races:
disminuyendo la captacin de minerales
y aumentando la permeabilidad a
sustancias txicas como el aluminio. A
su vez, una variacin en el pH afecta la
solubilidad de la mayora de minerales.
Existe un pH idneo para cada planta
dependiendo de su fisiologa i de los
minerales que requiere, pero, como
norma general, podemos decir que
precisan un pH ligeramente cido (5.5-7)
salvo excepciones como las habas con
pH un tanto bsico (7.4-8.1)

En la Industria alimentaria tambin son

de gran importancia los parmetros del
pH ya que, por ejemplo, nos indica si la
carne es apta para el consumo humano.
Si la carne est entre 5.4 i 7.0 de pH, es
apta para el consumo, pero a lo largo del
tiempo el pH disminuye, hecho que
indica que su consumo no es pertinente.
En la industria vincola, se deben de
tener muy en cuenta las variaciones de
pH en la elaboracin del vino, este debe
oscilar entre 2.8 i 3.5, puesto que a pH
superior a 3.5 determinadas bacterias

pueden atacar el vino y producir

variaciones en el sabor.

Es sin duda alguna en la Industria

farmacutica en la que se debe tener un
control y conocimiento ms exhaustivo
del pH, por distintas razones:
1.

Primeramente, para el diseo de los

medicamentos es necesario saber
el pH de la zona del cuerpo en que
trabajar el frmaco, pues si bajo
ese pH las protenas que queremos
usar se desnaturalizan el
medicamento no tendr efecto
alguno.

2.

En el proceso de formulacin de los

frmacos se usan las propiedades
fisicoqumicas del pKa y el pH para
elegir la frmula ptima del
medicamento

3.

En los ensayos previos a la

comercializacin de los
medicamentos se requiere un
control del pH para garantizar que
los resultados obtenidos sean
reales i ciertos, pues un pH errneo
podra dar resultados falsos.

Experiencias con soluciones

tampn[editar editar cdigo]
En bioqumica, como ya hemos expuesto, es
necesario controlar el pH de los medios en
los que trabajamos, especialmente si
queremos estudiar el comportamiento de

cualquier sustancia con base proteica como,

por ejemplo, enzimas o la separacin de
biomolculas con capacidad de ionizacin.
Por eso, es necesario saber preparar un
tampn y poder predecir cual ser su
comportamiento durante la experiencia.
Las soluciones tampn como ya sabemos
son mezclas de cidos y bases dbiles y sus
propiedades dependen directamente del pKa.
El pH del punto de equilibrio (punto de
inflexin de la grfica que dibujaremos)
corresponde al pKa. Este punto es
importante porque es el punto en que la
capacidad tampn del sistema es mayor. Es
decir que dependiendo de qu nos interesa
estudiar prepararemos un determinado
tampn.
Pondremos ahora un ejemplo para poder
entender el proceso con claridad.
Supongamos que deseamos preparar un
tampn de 100mL A-/Ah de pKa 7.1 a pH 7.4
y una concentracin 0.1M:
Usamos la ecuacin de HendersonHasselblach para el cociente entre
concentracin A-/AH. (A- representa a la sal,
AH al acido)
pH = pKa+log([A-]/[AH])
7.4 = 7.1+log([A-]/[AH])
log([A-]/[AH]) = 7.4-7.1 = 0.3
[A-]/[AH] = 10^0.3=1.995.
Queremos 100mL de tampn a 0.1M:
0.1M*0.1l = 0.01

Con esta informacion, podemos plantear un

sistema de ecuaciones como el siguiente:
1)[A]/[AH] = y/x
2) x+y = 0.01 (reordenando) y = 0.01-x

[A]/[AH] = (0.01-x)/x = 1.995

x = 0.0034 moles AH
y = 0.01-x
y = 0.01-0.0034 = 0.0066 moles ADe esta forma, sabemos los moles de cido y
sal que necesitamos para preparar la
solucin tampn de 100mL a 0.1 M. A partir
de los resultados, obtendremos grficos
parecidos al de la imagen de la izquierda. Sin
embargo, en nuestro caso el punto de
equivalencia estara en un pH de 7.1.