Manual de Inmunologia

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MANUAL DE INMUNOLOGA
LABORATORIO VENECIA
MANUAL
DE
INMUNOLOGA
ELABOR:
REVISO:
AUTORIZO:
P.Q.F.B GABRIELA S.
AGUIRRE ORTIZ
Q.F.B MA..GUADALUPE
PALOMARES CUEVAS.
LIC. CYNTHiA
ROGEL RODRIGUEZ
INDICE
Pg.
Pablo Sidar No. 617. Col. Universidad C.P 50130.Toluca ,Mxico. Tel (01722)
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INTRODUCCIN.
OBJETIVO.
RESPONSABILIDADES..
PROCEDIMIENTOS.
BIBLIOGRAFIA..
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INTRODUCCIN
El sistema inmune est formado por rganos, tejidos, clulas y molculas que
funcionan en forma equilibrada para mantener la vida y salud de los seres
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humanos. El funcionamiento anormal de alguno de los componentes de este

sistema produce enfermedad. En algunas enfermedades ciertos elementos del
sistema inmune son los responsables de la produccin del dao. La produccin de
anticuerpos a las diferentes enfermedades permiten detectarlas y diagnosticar
eficazmente a un paciente.
OBJETIVO
Proporcionar los conocimientos tericos y prcticos al personal de Laboratorio
Venecia para el manejo de muestras con fines de anlisis inmunologicos para ser
empleados como elementos diagnsticos en las patologas de pacientes con
estados de salud deficiente.
RESPONSABILIDADES
Es responsabilidad del personal que labora en laboratorio Venecia, efectuar los

procedimientos del presente manual para garantizar
un resultado confiable al
analizar muestras del rea de Inmunologa.
DETERMINACIN CUALITATIVA DE ANTI-ESTREPTOLISINA O (ASO)

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I.
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PRINCIPIO DEL METODO

El ASO-Ltex es una tcnica de aglutinacin en porta para la deteccin cualitativa
y semicuantitativa de anti-estreptolisina O (ASO) en suero humano. Las partculas
de ltex recubiertas con estreptolisina O (SLO) son aglutinadas por anticuerpos
ASO presentes en la muestra del paciente.
SIGNIFICADO CLINICO
La estreptolisina O es un exoenzima inmunognico txico producido por
estreptococos -hemolticos de los grupos A, C y G. La cuantificacin de los
anticuerpos ASO se utiliza para el diagnstico y tratamiento de enfermedades
como las fiebres reumticas, glomerulonefritis aguda, y otras infecciones
estreptoccicas. Las fiebres reumticas es una enfermedad inflamatoria que
afecta al tejido conectivo de diversas zonas del cuerpo humano (piel, corazn,
articulaciones, etc...) y la glomerulonefritis aguda es una inflamacin del rin que
afecta principalmente a los glomrulos renales .
REACTIVOS
Suspensin de partculas de ltex
Ltex
cubiertas con SLO, pH,
8,2. Azida sdica 0,95 g/L.
Suero
humano,
con
una
Control + concentracin de ASO > 200 UI/mL.
Tapn rojo Azida sdica 0,95 g/L.
Control Suero animal. Azida sdica 0,95 g/L.
Tapn azul
PRECAUCIONES
Todos los componentes de origen humano han resultado ser negativos para el
antgeno HBs, HCV y para el anti-HIV (1/2). Sin embargo, deben tratarse con
precaucin como potencialmente infecciosos.
CALIBRACIN
La sensibilidad del reactivo de ltex est estandarizada frente el Patrn
Internacional de ASO de OMS.
MATERIAL :
Placas de latex
Pipetas
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Reactivo para ASO

Agitador mecnico rotatorio de velocidad regulable a 80-100 r.p.m.
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MUESTRAS
Suero fresco. Estable 7 das a 2-8C o 3 meses a -20C.
Las muestras con restos de fibrina deben ser centrifugadas antes de usar. No
utilizar muestras altamente hemolizadas o lipmicas.
PROCEDIMIENTO
Mtodo cualitativo
1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La
sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas.
2. Depositar 50 L de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los
controles Positivo y Negativo, sobre crculos distintos de un porta.
3. Homogeneizar suavemente el reactivo de ASO- ltex antes de usar. Depositar
una gota (50 l) junto a cada una de las gotas anteriores.
4. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la
superficie interior del crculo. Emplear palillos distintos para cada muestra.
Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80 100 r.p.m. y agitar durante 2
minutos. El exceso de tiempo puede originar la aparicin de falsos positivos
MTODO SEMICUANTITATIVO
1.
2.
Realizar diluciones dobles de la muestra en solucin salina 9 g/L.

Proceder para cada dilucin, como en la prueba cualitativa.
LECTURA E INTERPRETACIN
Examinar macroscpicamente la
inmediatamente despus de retirar
aglutinacin indica una concentracin
mtodo semicuantitativo, se define
resultado positivo.
presencia o ausencia de aglutinacin

el porta del agitador. La presencia de
de ASO igual o superior a 200 UI/mL. En el
el ttulo como la dilucin mayor que da
CALCULOS
La concentracin aproximada de ASO en la muestra del paciente se obtiene
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aplicando la siguiente frmula:
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200 x Ttulo de ASO = UI/mL
CONTROL DE CALIDAD
Utilizar el control positivo y negativo para controlar la funcionalidad del reactivo de
ltex, as como modelo de comparacin para la interpretacin de los resultados.
VALORES DE REFERENCIA
Hasta 200 UI/mL (adultos) y 100 UI/mL (nios < 5 aos)
INTERFERENCIAS
Bilirrubina (20 mg/dL), hemoglobina (10 g/L), lpidos (10 g/L) y factores
reumatoides (300 UI/mL) no interfieren.
LIMITACIONES DEL METODO
-
La artritis reumatoide, escarlatina, amigdalitis, infecciones estreptoccicas

diversas y algunos portadores sanos pueden dar resultados falsamente positivos.
Infecciones recientes y nios con edades comprendidas entre 6 meses y 2 aos,
pueden dar lugar a resultados falsamente negativos.
Una determinacin aislada no da informacin suficiente acerca del estado actual
de la enfermedad. En casos dudosos y con el propsito de seguir la enfermedad,
se recomienda repetir la prueba a intervalos quincenales durante 4 o 6 semanas.
El diagnstico clnico no debe realizarse nicamente con los resultados de un
nico ensayo, sino que debe considerarse al mismo tiempo los datos clnicos del
paciente
DETERMINACIN CUALITATIVA DE PROTENA C-REACTIVA (PCR)

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La PCR-Ltex es una tcnica de aglutinacin en porta para la deteccin
cualitativa y semicuantitativa de PCR en suero humano. Las partculas de ltex
recubiertas con anticuerpos anti-PCR humana son aglutinadas por molculas de
PCR presentes en la muestra del paciente.
SIGNIFICADO CLINICO
La Protena C-reactiva es una protena de fase aguda, presente en el suero de
pacientes sanos, la cual puede incrementarse significativamente en la mayora de
procesos infecciosos bacterianos y virales, tejidos daados, inflamacin y
neoplasias malignas. El incremento de concentracin de esta protena se produce
despus de unas horas de desarrollarse la inflamacin pudiendo alcanzar niveles
de 300 mg/L en 12-24 horas.
REACTIVOS
Ltex
Control +
Tapn rojo
Control -

cubiertas de IgG de
cabra anti-PCR humana, pH, 8,2.
Azida sdica 0,95 g/L.
Suero
humano
con
una
Concentracin de PCR > 20
mg/L. Azida sdica 0,95 g/L.
Suero animal. Azida sdica 0,95
g/L.
Tapn azul
CALIBRACION
La sensibilidad del reactivo de ltex est estandarizada frente el Material de
Referencia CRM 470/RPPHS.
MATERIAL :
Placas de latex
Pipetas
Reactivo para PCR
MUESTRAS
Las muestras con restos de fibrina deben ser centrifugadas antes de la prueba.
No utilizar muestras altamente hemolizadas o lipmicas.
PROCEDIMIENTO
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Mtodo cualitativo
controles Positivo y Negativo, sobre crculos distintos de la placa de
latex.
3. Homogeneizar suavemente el reactivo de PCR antes de usar. Depositar
una gota (50 L) junto a cada una de las gotas anteriores.
4. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por
toda la superficie interior del crculo. Emplear palillos distintos para cada
muestra.
5. Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80 100 r.p.m. y agitar
durante 2 minutos. El exceso de tiempo puede originar la aparicin de
falsos positivos
Mtodo semicuantitativo
1 Realizar diluciones dobles de la muestra en solucin salina 9 g/L.
2 Proceder para cada dilucin, como en la prueba cualitativa.
LECTURA E INTERPRETACION
Examinar macroscpicamente la presencia o ausencia de aglutinacin
inmediatamente despus de retirar la placa del agitador. La presencia de
aglutinacin indica una concentracin de PCR igual o superior a 6 mg/L .
En el mtodo semicuantitativo, se define el ttulo como la dilucin mayor que da
resultado positivo.
CALCULOS
La concentracin aproximada de PCR en la muestra del paciente se obtiene
6 x Ttulo de PCR = mg/L
CONTROL DE CALIDAD
Utilizar el control positivo y negativo para controlar la funcionalidad del reactivo de
ltex, as como modelo de comparacin para la interpretacin de los resultados.
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Hasta 6 mg/L.
INTERFERENCIAS
Bilirrubina (20 mg/dL), hemoglobina (10 g/L) y los lpidos (10 g/L) no interfieren.
Factores reumatoides (100 UI/mL), interfieren. Otras sustancias pueden interferir.
NOTAS
Una concentracin muy elevada de PCR en la muestra del paciente puede

dar lugar a un resultado falsamente negativo debido al efecto prozona. Se
recomienda re-ensayar la muestra utilizando un volumen de 20 L.
La intensidad de la aglutinacin no es indicativa de la concentracin de
PCR en las muestras ensayadas.
El diagnstico clnico no debe realizarse nicamente con los resultados de
un nico ensayo, sino que debe considerarse al mismo tiempo los datos
clnicos del paciente.
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DETERMINACIN CUALITATIVA DE FACTOR REUMATOIDE (FR)
El FR-Ltex es una tcnica de aglutinacin en porta para la deteccin cualitativa y

semicuantitativa de factores reumatoides (FR) en suero humano. Las partculas
de ltex recubiertas con gamma-globulina humana son aglutinadas por factores
SIGNIFICADO CLINICO
El factor reumatoide son un grupo de anticuerpos dirigidos contra la fraccin Fc
de las inmunoglobulinas G. Aunque se hallan presentes en un gran nmero de
desordenes reumticos, tales como el lupus eritematoso sistmico (SLE) y el
sndrome de Sjgren, su principal inters clnico radica en el diagnstico de la
artritis reumatoide (RA).
REACTIVOS
cubiertas con gamma-globulina
humana, pH, 8,2. Azida sdica 0,95
g/L,
Control Suero humano con una concentracin
+
de FR > 30 UI/mL. Azida
Tapn
rojo
sdica 0,95 g/L.
Control
Tapn Suero animal. Azida sdica 0,95 g/L.
azul
Ltex
CALIBRACION
La sensibilidad del reactivo de ltex est estandarizada frente el Calibrador
Internacional de FR de OMS (WHO 64/1 Rheumatoid Arthritis Serum).
CONSERVACION Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit estn listo para su uso, y son estables hasta la
fecha de caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los
viales bien cerrados a 2-8C, y se evita la contaminacin durante su uso. No
congelar: la congelacin de los reactivos altera irreversiblemente la funcionalidad
de stos.
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MATERIAL :
Placas de latex
Pipetas
Reactivo para FR
MUESTRAS
No utilizar muestras hemolizadas o lipmicas.
PROCEDIMIENTO
Mtodo cualitativo
3. Homogeneizar suavemente el reactivo de FR- ltex antes de usar.
Depositar una gota (50 L) junto a cada una de las gotas anteriores.
5. Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80 100 r.p.m. y agitar durante
2 minutos. El exceso de tiempo puede originar la aparicin de falsos
positivos
Mtodo semicuantitativo
1. Realizar diluciones dobles de la muestra en solucin salina 9 g/L.
2. Proceder para cada dilucin, como en la prueba cualitativa.
inmediatamente despus de retirar la placa del agitador. La presencia de
aglutinacin indica una concentracin de FR igual o superior a 8 UI/mL (Nota 1).
resultado positivo.
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CALCULOS
La concentracin aproximada de FR en la muestra del paciente se obtiene
8 x Ttulo de FR = UI/mL
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda utilizar el control positivo y negativo para controlar la funcionalidad
del reactivo de ltex, as como modelo de comparacin para la interpretacin de
los resultados.
Hasta 8 UI/mL
INTERFERENCIAS
Bilirrubina (20 mg/dL), hemoglobina (10 g/L) y lpidos (10 g/L) no interfieren.
La incidencia de resultados falsamente positivos es del 3-5%. Individuos

que padecen otras enfermedades como mononucleosis infecciosa,
hepatitis, sfilis, y personas de edad avanzada, pueden dar lugar a
resultados positivos falsos.
Es importante para establecer un buen diagnstico de la enfermedad,

realizar tambin una prueba de Waaler Rose, junto con el examen clnico
del paciente.
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DETERMINACIN CUALITATIVA DE REAGINAS PLASMTICAS VDRL

PRINCIPIO DEL MTODO
La prueba de VDRL es una tcnica no treponmica de aglutinacin en porta para
la deteccin cualitativa y semicuantitativa de reaginas plasmticas. La suspensin
antignica, una mezcla de lpidos complejos, es aglutinada en presencia de
reaginas presentes en la muestra del paciente afectado por sfilis.
SIGNIFICADO CLNICO
Las reaginas son un grupo de anticuerpos dirigidos contra componentes del
propio organismo, en pacientes que sufren infeccin por Treponema pallidum,
agente causal de la sfilis. Este microorganismo produce lesiones en el hgado y
corazn, liberando al torrente circulatorio pequeos fragmentos de estos rganos
no reconocidos por el propio individuo. El sistema inmunolgico del paciente
reacciona dando lugar a la formacin de reaginas, - anticuerpos frente a estos
fragmentos. El ensayo es til para seguir la respuesta a la terapia antibitica.
REACTIVOS
Solucin que
cardiolipina 0,3 g/L,
Antgeno contiene
lecitina
2,1 g/L y colesterol 9 g/L, en
tampn fosfato 1,5
VDRL
estabiliza mmol/L. Conservante., pH 7,0
do
Control + Suero artificial ttulo de reaginas
con un
1/8.
Tapn rojo
Control Suero animal. Conservante.
Tapn azul
PREPARACION
RPR-carbn: Homogeneizar el reactivo con suavidad antes de su uso.
Abrir el vial de RPR-carbn y acoplar la micropipeta al vial dispensador de
plstico y aspirar por succin la cantidad de reactivo necesaria. Una vez
terminado el ensayo, devolver la cantidad sobrante a su envase original y lavar la
micropipeta y vial con agua destilada.
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MATERIAL :
Placas
Pipetas
Reactivo para VDRL
MUESTRAS
Suero fresco o plasma. Estable 8 das a 2-8C o 3 meses a -20C.
No utilizar muestras altamente hemolizadas o lipmicas.
PROCEDIMIENTO
Mtodo cualitativo
3. Homogeneizar suavemente el reactivo de RPR-carbn antes de usar.
Invertir el vial dispensador y presionar ligeramente para eliminar las
burbujas de aire.
4. Situar la micropipeta en posicin vertical y perpendicular al porta, y
dispensar una gota (20 L) de este reactivo junto a cada una de las gotas
anteriores.
6. Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80 100 r.p.m. durante 8
minutos El exceso de tiempo puede originar la aparicin de falsos
positivos.
MTODO SEMICUANTITATIVO
1. Realizar diluciones dobles de la muestra en solucin salina 9 g/L.
2. Proceder para cada dilucin, como en la prueba cualitativa.
LECTURA E INTERPRETACION
inmediatamente despus de retirar la placa del agitador. Agitarla manualmente un
par de veces antes de realizar la lectura.
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INTERPRETACIN
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Tipo de aglutinacin Lectura

Agregados grandes o
medianos
Ningn agregado o ligera
rugosidad
Resultado
R
Reactivo
N
No Reactivo

resultado positivo.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda utilizar el control positivo y negativo para controlar la
funcionalidad del reactivo de carbn, as como modelo de comparacin para la
interpretacin de los resultados.
INTERFERENCIAS
Bilirrubina (20 mg/dL), hemoglobina (10 g/L) y lpidos (10 g/L), no interfieren. Los
factores reumatoides (300 UI/mL), interfieren.
CONSIDERACIONES
Temperaturas elevadas del medio ambiente pueden provocar la
desecacin de la mezcla de reaccin sobre el porta, dando lugar a un
aspecto de aglutinacin que puede confundirse con un falso positivo. Se
recomienda realizar la prueba dentro de una cmara hmeda.
La prueba RPR-carbn no es especfica para el diagnstico de sfilis. Se

recomienda el ensayo de todas las muestras Reactivas con mtodos
treponmicos como el TPHA y FTA-Abs para la confirmacin de
resultados.
Un resultado negativo no excluye el diagnstico de la sfilis. El diagnstico
clnico no debe realizarse nicamente con los resultados de un nico
ensayo, sino que debe considerarse al mismo tiempo los datos clnicos del
paciente.
La mononucleosis infecciosa, neumona viral, toxoplasmosis, embarazo y
enfermedades autoinmunes pueden causar falsos resultados positivos.
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REACCIONES FEBRILES
Los Antgenos Bacterianos son una tcnica de aglutinacin en placa para la
deteccin y semicuantificacin de anticuerpos anti-Salmonella, Brucella y Proteus
en suero humano. Los reactivos, suspensiones bacterianas, coloreadas y
estandarizadas, aglutinan en presencia del anticuerpo homologo correspondiente
en las muestras ensayadas.
SIGNIFICADO CLINICO
El diagnstico de enfermedades febriles puede establecerse bien sea por el
aislamiento del microorganismo en sangre, orina o heces o por la demostracin
del ttulo de anticuerpos especficos, somticos (O) y flagelares (H) en el suero del
paciente. La determinacin de estos anticuerpos forma las bases para el ensayo
de Widal que establece que altos niveles de anticuerpos O y H superiores a 1/100
en suero, es indicativo de infeccin por estos microorganismos.
REACTIVOS
S. typhi O
S. typhi H
S. paratyphi BH
S. paratyphi AH
Brucella abortus
Proteus OX19
MATERIAL ADICIONAL
Agitador rotatorio de velocidad regulable a 80-100 r.p.m.
Agitador vortex.
Pipetas de 50 L.
MUESTRAS
Suero fresco. Estable 8 das a 2-8C o 3 meses a 20C.
Las muestras con restos de fibrina deben ser centrifugadas antes de la prueba. No
utilizar muestras altamente hemolizadas o lipmicas.
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PROCEDIMIENTO
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A. Mtodo de aglutinacin en PLACA (cualitativo)

1. Dejar atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La
2. Depositar 50 L de la muestra a ensayar y 1 gota (50 L) de cada control
en crculos separados de un porta.
3. Mezclar el reactivo vigorosamenteo con el agitador vortex antes del ensayo.
Aadir una gota (50 L) de antgeno prxima a la muestra a ensayar.
4. Mezclar con ayuda de un palillo, procurando extender la mezcla por toda la
superficie interior del crculo.
5. Situar la placa sobre un agitador rotatorio a 80-100 r.p.m., durante 1
minuto.
B. Mtodo de aglutinacin en placa (titulacin)
1. Utilizando una micropipeta, dispensar 80, 40, 20, 10 y 5 L de muestra no
diluida en crculos separados de una placa.
2. Depositar una gota (50 L) de antgeno en cada crculo prximo a la
muestra a ensayar.
3. Mezclar con ayuda de un palillo, procurando extender la mezcla por toda la
superficie interior del crculo.
4. Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80-100 r.p.m., durante 1
minuto.
Mtodo de aglutinacin en porta
inmediatamente despus de retirar la placa del agitador y comparar los
resultados con los sueros control.
Los resultados obtenidos en el mtodo de titulacin en placa, son
aproximadamente equivalentes a los que se obtendran en el mtodo de
aglutinacin en tubo con diluciones del suero de 1/20, 1/40, 1/80, 1/160 y 1/320
respectivamente.
Se considera como resultado positivo cualquier grado de aglutinacin parcial o
completa, con diversos grados de clarificacin del sobrenadante. El ttulo de la
muestra se define como la dilucin mayor que muestra resultado positivo.
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CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda utilizar el control positivo y negativo para controlar la
funcionalidad de los reactivos, as como modelo de comparacin para la
interpretacin de resultados. Todo resultado distinto al resultado que da el control
negativo, se considerar positivo.
Son indicativos de infeccin reciente:
Salmonellas:
Ttulos 1/80 (anticuerpos somticos) 1/160 (anticuerpos flagelares).
Brucellas:
Ttulos 1/80
Proteus:
Ttulos de OX19 1/80
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PRUEBA RPIDA PARA LA DETECCIN CUALITATIVA DE GONADOTROPINA

CORINICA HUMANA (HCG) EN ORINA O SUERO
La Gonadotropina Corinica humana (hCG) es una hormona glucoproteica

producida por la placenta en desarrollo poco despus de la fertilizacin. En el
embarazo humano, la hCG puede detectarse tanto en orina como en suero ya a
los 7-10 das de la concepcin. Los niveles de hCG continan aumentando muy
rpidamente, superando las 100 mUI/ml tras la primera falta y alcanzando el
mximo en torno a 100.000-200.000 mUI/ml a las 10-12 semanas de embarazo.
La aparicin de hCG en orina y suero poco despus de la concepcin y su
posterior aumento rpido durante el principio de la gestacin convierten a esta
hormona en un excelente marcador para la deteccin precoz del embarazo.
La Prueba hCG de Embarazo en Placa (Orina/Suero) es una prueba rpida que
detecta cualitativamente la presencia de hCG en una muestra de orina o suero con
una sensibilidad de 25 mUI/ml. La prueba utiliza una combinacin de anticuerpos
monoclonales y policlonales para detectar selectivamente los niveles elevados de
hCG en orina o suero. Con el nivel de sensibilidad mencionado, no muestra
interferencias cruzadas con otras hormonas glucoproteicas estructuralmente
relacionadas, FSH, LH y TSH, en niveles fisiolgicos altos.
PRINCIPIO
Las muestras positivas reaccionan con el conjugado de color del anticuerpo
especfico anti-hCG para formar una lnea de color en la regin de la lnea de la
prueba de la membrana. La ausencia de esta lnea de color sugiere un resultado
negativo. Para servir como control del procedimiento, siempre aparecer una lnea
de color en la regin de la lnea de control, si la prueba se ha realizado
correctamente.
REACTIVOS
REACTIVOS
La placa contiene partculas anti-hCG y anti-hCG que recubren la membrana.

MUESTRA
Suero u orina
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PROCEDIMIENTO
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1. Dejar estabilizar la bolsa sellada a temperatura ambiente antes de abrirla.

Extraiga la placa de la bolsa sellada y utilcela en cuanto sea posible.
2. Coloque la placa en una superficie limpia y nivelada. Mantenga el cuentagotas
en posicin vertical y deposite 3 gotas de orina o suero (aproximadamente
100 l) en el pocillo de la placa (S) y ponga en marcha el cronmetro. Evite que
queden retenidas burbujas de aire en el pocillo de la placa (S).
3. Espere hasta que aparezcan una o dos lneas coloreadas. Los resultados
debern leerse a los 3 minutos cuando se analice orina o a los 5 minutos
cuando se analice una muestra de suero. Los resultados deben
interpretarse en el momento adecuado. Es importante que el fondo est
claro antes de leer el resultado.
INTERPRETACIN DE RESULTADOS
POSITIVO: Aparecen dos lneas coloreadas distintas. Una lnea quedar en la
regin de control (C) y otra lnea quedar en la regin de la prueba (T).
*NOTA: Una concentracin de hCG de muestra por debajo del nivel de corte de
esta prueba puede dar como resultado la aparicin de una lnea poco definida en
la zona de prueba (T) despus de un perodo de tiempo prolongado. La aparicin
de una lnea en el rea de prueba (T) tras haber esperado el tiempo necesario
puede indicar un nivel bajo de hCG en la muestra. Si se observan tales resultados,
se recomienda repetir la prueba con una muestra nueva al cabo de entre 48 y 72
horas, o bien utilizar un mtodo de confirmacin alternativo.
NEGATIVO: Una lnea coloreada aparece en la regin de control (C). No
aparece ninguna lnea coloreada en la regin de la prueba (T).
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NO VLIDO: No aparece la lnea de Control. Un volumen de la muestra

insuficiente o una tcnica incorrecta son las razones ms frecuentes del fallo de la
lnea de control. Revise el procedimiento y repita la prueba con una nueva placa.
CONTROL DE CALIDAD
Se incluye un control interno del procedimiento en la prueba. La lnea coloreada
que aparece en la regin de control (C) acta como control interno del
procedimiento. Confirma que hay suficiente volumen de muestra y que la tcnica
empleada es la correcta. Un fondo claro es un control interno negativo del
procedimiento. Si aparece un fondo de color en la ventana de resultados que
interfiere con la posibilidad de leer los resultados de la prueba, estos pueden ser
no vlidos.
Evaluar un control positivo de hCG (que contenga 25-250 mUI/ml de hCG) y un
control negativo (con 0 mUI/ml de prueba cada vez que se reciba un nuevo
equipo).
LIMITACIONES
Es una prueba cualitativa preliminar, por lo tanto, no se puede determinar ni

el valor cuantitativo ni la tasa de incremento de hCG con este mtodo.
Las muestras muy diluidas, que vienen indicadas por una densidad
especfica baja, pueden no contener niveles representativos de hCG. Si se
sigue sospechando un embarazo, se recoger la primera orina de la
maana 48 horas despus, y se repetir la prueba.
Poco tiempo despus de la implantacin hay niveles muy bajos de hCG
(menos de 50 mUI/ml) en las muestras de orina y suero. Sin embargo,
como un nmero importante de embarazos terminan en el primer trimestre
por causas naturales, una prueba con resultado positivo dbil se confirmar
volviendo a estudiar otra muestra con la primera orina o suero de la
maana obtenida 48 horas despus.
Esta prueba detecta de forma precisa concentraciones de hasta 500.000
mIU/ml de hCG intacta. No obstante, no detecta de forma precisa los
productos de la degradacin de la hCG, entre los que se incluyen la hCG
beta libre y los fragmentos de ncleo beta. Los ensayos cuantitativos
utilizados para sealar la presencia de la hCG pueden detectar los
productos de la degradacin de la hCG, por lo que pueden proporcionar
resultados diferentes a los de esta prueba rpida.
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Esta prueba puede producir resultados falsos positivos. Hay varias

situaciones, adems del embarazo, que dan lugar a niveles altos de hCG,
como son la enfermedad trofoblstica y ciertas neoplasias no trofoblsticas,
como tumores testiculares, cncer de prstata, cncer de mama y cncer
de pulmn. Por lo tanto, la presencia de hCG en una muestra de orina o
suero no se usar para diagnosticar un embarazo a menos que se hayan
descartado estas afecciones.
Esta prueba puede producir resultados falsos negativos cuando los niveles
de hCG se encuentren por debajo del nivel de sensibilidad de la prueba. Si
se sigue sospechando un embarazo, se recoger la primera orina de la
maana o una muestra de suero 48 horas despus, y se repetir la prueba.
Pgina
22
BIBLIOGRAFIA
3. http://www.spinreact.com
4. https://microinmuno.files.wordpress.com/2012/07/manual-denmunologia.pdf
5. http://asp.salud.gob.sv/regulacion/pdf/manual/Manual_procedimientos
_lab_clinico.pdf
509-38-88 280-56-72

Manual de Inmunologia

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