Revista ALEIQ

Revista de la Asociación Latinoamericana de Estudiantes

de Ingeniería Química y Ramas Afines

Volumen 1, Número 1

2010
 IDENTIFICACIÓN Y AISLAMIENTO DE METABOLITOS SECUNDARIOS DE LA ESPECIE
PARTHENIUM HYSTEROPHORUS

Nathalie Pineda Sotomayor, PhD. Omar Malagón Avilés, Dr. Mariano Martínez Vázquez, Ing. Juan Carlos
Romero Benavides.

Instituto de Química Aplicada, Planta de Productos Naturales, Área de Bioprospección de Fármacos; Universidad
Técnica Particular de Loja, San Cayetano Loja-Ecuador.

Resumen: A partir de los conocimientos ancestrales puestos en práctica en la medicina

natural, se estudió la especie Parthenium hysterophorus con la finalidad de aislar sus
metabolitos secundarios. En distintas comunidades se pone en práctica el uso de la especie
para tratar fiebres, granos, y úlceras, además de su ya comprobada actividad antiinflamatoria
y su uso en el tratamiento de neuralgias,
Se recolecto la especie en Catamayo, población a 33 Km al noroccidente de la ciudad de
Loja (679134E, 9561827N, 1250m) , se seco y posteriormente se realizaron extractos con
solventes de polaridad ascendente (Hexano, Acetato de Etilo, y Metanol), de flores, parte
aérea y raíces y otro con una mezcla CH2CL2/MeOH, de partes aéreas. De estos extractos se
evaluó su actividad citotóxica a 5 líneas celulares de cáncer humano, de los extractos más
activos se realizo cromatografía en columna abierta. De la fracción # 16 (Hex/AceOEt 9:1)
del extracto hexánico de flores, se logró aislar un triterpeno con propiedades citotóxicas
importantes, siendo selectivo para las líneas celulares MCF-7 (cáncer de mamá) y K562
(Leucemia).

Palabras Claves: Parthenium hysterophorus, citotoxicidad, triterpeno.

1. INTRODUCCIÓN Aproximadamente la mitad de las especies presentes

La medicina tradicional, basada en el uso de especies
con propiedades medicinales ha sido usada desde
hace muchos años alrededor del mundo [1-5-9-10].
Este sistema medicinal ha jugado un rol muy
importante en el cuidado de la salud, como también
en el tratamiento de enfermedades. La OMS
(Organización Mundial de la Salud) estima que
aproximadamente el 80% de la población mundial
emplea esta medina para tratar sus afecciones
primarias (hasta el año 2006) [2-8]. Actualmente se
intenta aislar nuevos productos naturales a partir de
especies reportadas como medicinales, con el
objetivo primordial de desarrollar nuevos
medicamentos para tratar enfermedades. Estas nuevas
investigaciones no son más que la evolución de las
prácticas de nuestra cultura ancestral. Los productos
naturales tendrían una mejor utilidad si se logra aislar
nuevos metabolitos que influyan directamente en los
tratamientos de enfermedades como cáncer, además
que son importantes para elucidar complejos
mecanismos celulares, incluyendo las señales y el
ciclo celular [9-10].
en la naturaleza (125.000), pueden vivir en los
bosques tropicales, por lo que los mismos son la
reserva potencial para desarrollar nuevos
medicamentos [3]. Aproximadamente el 53% de los
fármacos evaluados en estudios químicos en la
actualidad corresponden a metabolitos secundarios, y
sus derivados o compuestos obtenidos a partir de una
farmacóforo de un producto natural. [4] La parte sur
del Ecuador está considerada como uno de los 10 hot-
spots de diversidad biológica a nivel global, y de gran
valor ancestral debido a la presencia de dos grupos
étnicos: los Saraguro y los Shuar. [5] La especie
Parthenium Hysterophorus crece en zonas cálidas y
fue escogida para nuestra investigación porque es
usada en América del Sur contra el tratamiento de la
fiebre, baños contra granos e incluso contra las
ulceras tuberculosas (tópicamente) [6].
Algunas SLs han demostrado que ejecutan una
capacidad anti cancerígena por inhibición de los
efectos inflamatorios, prevención de la metástasis e
inducción de apoptosis. Hoy en día, los usos
farmacéuticos de las SLs son: anti-microbiano, anti-
viral, anti- inflamatorio, y anti- tumoral. Las lactonas
sesquiterpénicas interfieren en procesos biológicos
claves como las señales celulares, la proliferación de
las célulass, muerte celullar/apoptosis y la respiraciónn
mitocondriial. [10].
RECOLECCIÓN E 
S
SECADO
2. MÉ
ÉTODOS IDENTIFICACIIÓN

Según el procedimiento
p descrito por A.
A Gurib-Fakim m
[3] se iniciio con la recolección e identiificación de laa
especie, see llevo a una cámara
c de secaado la muestra,
con el proopósito de eliiminar humeddad que puedaa
interferir en
e el proceso de d degradaciónn natural con ell
aire o microorganismos. Una vez que el material haa CLASIFIC
CACIÓN PARTES 
TRITURARACIIÓN
DE LLA ESPECIE
sido secadoo y posee un pesop constante,, se separo lass
flores, la parte
p aérea y laas raíces. Se triituro la especiee
y se llevoo a maceración n con disolveentes en ordenn
creciente de
d polaridad (Hex,( AceOEt y MeOH). Y
por otro laado se realizo un extracto dee partes aéreass
en CH2Cl22/MEOH (1:1)). Una vez quee el proceso dee
extracción concluyo, los extraactos fueronn M
MACERACIÓN 
concentraddos en un rota-evaporado
r or a presión, •H
Hexano
CONC
CENTRACIÓN 
reducida y almacenados en temperaturras inferiores a •A
AceOEt
•M
MeOH
EXTTRACTOS
20 °C, parra impedir la degradación
d del extracto. See
•C
CH2CL2/MeOH (1:1)
realizo pruuebas de actividad citotóxica a cada uno dee
los extracttos en las líneas celulares: PC-3(Próstata)
P ,
U251(SNC C), K562(Leeucemia), HCT-15(Colon),
MCF-7(maama), SKUL-1(pulmón); a los extractoss
más activoos se realizo cromatografíaa en columnaa
abierta, utiilizando gel dee sílica, en relaación 10:1 a laa
cantidad dee extracto, usaando disolventees de polaridadd
CROMATOGRAFFÍA EN  EVALUACCIÓN ACTIVIDAD 
ascendentee, recolectando o fracciones de d 150 ml, laa COLUMNA
A CITTOTÓXICA
identificación de los MS S presentes enn cada fracciónn
se realizo mediante cro omatografía dee capa fina enn
fase directaa, usando sulfaato cérico comoo revelador. Laa
purificacióón y cristalizaación de los compuestos
c see
hizo mediaante el método o de par de disoolventes. De laa
fracción # 16 (Hex/A AceOEt) 9:1 se s obtuvo unn
compuestoo que se caracterizo por métodoss CARACTER
RIZACIÓN
espectroscóópicos mediiante una reacción dee AISLAMIENTTO  • Métodos Espectrocópicos y 
reacción dee acetilación.
acetilaciónn. Se evaluó laa actividad citootóxica de estee COMPUESTO OS
derivado ene las mismass líneas celulaares de cáncerr
humano.

EVALUACCIÓN ACTIVIDAD 
CITTOTÓXICA

Fig. 1. Procedimieento generall de

aislamiento y evvaluación citottóxica.
 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
En la Tabla 1 se muestra los rendimientos de los
extractos obtenidos de las diferentes partes de
Parthenium hysterophorus usados para el presente
estudio.
Del extracto hexánico de flores, en la fracción #16
(Hex/AceOEt 9:1) se aislaron 24 mg de un
compuesto de p.f. 71 ° C . Se evaluó su actividad
citotóxica en las mismas líneas celulares (Tabla 3). El
mismo que es activo solo para las líneas K562
(Leucemia) y MCF-7 (mama).

U251 PC-3 K562 HCT15 MCF7 SKLU1

PH3 SA 1.46 81.36 16.56 93.32 17.8
Hexano Acetato de Metanol Tabla 3. Evaluación de la actividad citotóxica del
Etilo compuesto aislado (triterpeno)
Parte 1.32% 3.76% 2.79%
aérea Debido a la baja solubilidad de este compuesto se
Raíces 0.83% 0.29% 3.97% realizo una reacción de acetilación, para mejorar la
Flores 2.2% 4.86% 9.4% misma y facilitar la caracterización química por
Tabla 1. Rendimientos de los extractos obtenidos. métodos espectroscópicos como infrarrojo (IR),
espectroscopia de masas (MS), y resonancia
Como se puede ver en la Tabla 2, todos los extractos magnética nuclear (NMR, 1H, 13C), resultando ser un
evaluados presentan una inhibición del crecimiento compuesto de naturaleza triterpénica, de peso
celular interesante, siendo el extracto de flores en molecular de 480 gr/mol, al momento estamos
AceOEt el más activo, y el menos activo el extracto determinando su estructura química. En la tabla 4 se
metanólico de raíces, el extracto de las partes aéreas muestra la inhibición del crecimiento celular en las
en AceOEt prácticamente no presentan inhibición a la líneas de cáncer humano de este derivado, actividad
línea celular de leucemia. En general los extractos que prácticamente fue nula en todas las líneas.
metanólicos presentan menor inhibición al
crecimiento celular de las líneas de cáncer evaluadas,
Muestra Código U251 PC3 K562 HCT15 MCF7
mientras que los extractos de acetato son los más MVM31 sa sa sa 1.39 3.05
Acet.
activos. Sin embargo el extracto hexánico de flores
Tabla 2. Citotoxicidad del triterpeno aislado.
presento inhibición mayor al 80 % en todas las líneas
excepto en la leucémica, por lo que decidimos
realizar una cromatografía en columna abierta a este
4. CONCLUSIÓN
extracto.

Muestra U251 PC-3 K562 HCT15 MCF-7 SKLU-1

El triterpeno aislado a partir del extracto hexánico de
las flores de la especie Parthenium hysterophorus
PHFHex 89.42 77.17 49.9 95.14 87.1 95.9 presenta citotoxicidad específica para las líneas K562
y MCF-7. La inhibición del crecimiento celular en la
PHFAc 100 100 79.23 100 100 100 línea K562 es del 82% y para la línea MCF-7 del
PHFMeOH 28.78 39.73 63.63 54.16 42.23 46.23
93%, esta actividad hace suponer que su carácter
selectivo se deba a condiciones específicas en su
PHRHex 64.29 80.09 21.63 62.29 64.92 70,71 estructura química.

PHRAc 86.49 75.55 57.12 89.71 78.02 86.78

PHRMeOH sa 13.94 50.92 29.33 25.52 37.19

PHAeAc 95.13 100 2.95 100 100 100

PHAeMeOH 16.3 42.0 87.17 38.57 45.05 51.29

PHTMeCH2Cl2 100 74.19 91.36 93.45 78.37 100

Tabla 2. Inhibición de los extractos al crecimiento

celular.
 REFERENCIAS

[1] Lic. Bárbara Águila Gil, Lic. Rosa Meneses

Castillo, Dra. Leticia González Mata, Téc. Elsida
Madrigal Lesxay y Téc. David Fernández
Fernández; Extracto acuso de escoba amarga.
Estudio preliminar de sus propiedades.
[2] Ameenah Gurib-Fakim; Medicinal plants:
Traditions of yesterday and drugs of tomorrow
[3] Arvigo, R.; Balick, M. Rainforest Remedies,
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2006.
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1999,107,783.
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Soejarto, D.D.; Guo, Z. Bull. WHO, 1985, 63,
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