I.

INTRODUCCIN

Desde el conocimiento de las distintas formas de la luz, la

ciencia ha mejorado para la obtencin de informacin de distintas
maneras como los rayos x para la medicina, los rayos visibles para
la ciencia pero en nuestro caso usaremos los rayos infrarrojos que
se encuentran ubicados en el espectrofotmetro; podemos usar
varios y diversos tipos de mtodos para la obtencin de nuestros
resultados que el espectrofotmetro nos pueda brindar los
resultados que seran tiles para el presente informe por lo cual se
usara el mtodo de OLSEN que a travs de los rayos infrarrojos nos
puede decir la cantidad de elementos que presenta la muestra en
comparacin con la

muestra en blanco que se usa para la

comparacin con otras muestras que estamos analizando de

comparacin de masa

en nuestro caso el fosforo y mediante

frmulas matemticas obtendremos varias respuestas que nos sern

tiles para para la obtencin de nuestros resultados y la elaboracin
del presente informe.

I.1.

OBJETIVO:
El presente documento tiene el objetivo de dar a conocer el
procedimiento analtico para la determinacin de Fsforo por la
tcnica de espectrometra visible.

II.
II.1.

REVISIN DE LITERATURA

EL FSFORO
El fsforo (P) es uno de los 17 nutrientes esenciales
para el crecimiento de las plantas. Sus funciones no pueden
ser ejecutadas por ningn otro nutriente y se requiere un
adecuado suplemento de P para que la planta crezca y se
reproduzca en forma ptima. El P se clasifica como un nutriente
primario, razn por la cual es comnmente deficiente en la
produccin agrcola y los cultivos lo requieren en cantidades
relativamente grandes. La concentracin total de P en los
cultivos vara de 0.1 a 0.5 %. (GONZALES, et al 1960)

II.1.1.

Las reacciones del fsforo en el suelo

El fsforo se encuentra en los suelos tanto en
forma orgnica como inorgnica y su solubilidad en el
suelo es baja. Existe un equilibrio entre el fsforo en la
fase slida del suelo y el fsforo en la solucin del suelo.
Las plantas pueden adsorber solamente el
fsforo disuelto en la solucin del suelo, y puesto que la
mayor parte del fsforo en el suelo existe en compuestos
qumicos estables, slo una pequea cantidad de fsforo
est disponible para la planta en cualquier momento dado.
Al absorber el fsforo de la solucin del suelo por
las races, parte del fsforo adsorbido a la fase slida del

suelo es liberado a la solucin del suelo, para mantener

un equilibrio qumico. (GONZALES, et al 1960)
Los tipos de compuestos de fsforo que existen
en el suelo son principalmente determinados por el pH del
suelo y por el tipo y la cantidad de los minerales en el
suelo. Por lo general, los compuestos minerales que
forma el fsforo son compuestos de aluminio, hierro,
manganeso y calcio. En suelos cidos el fsforo tiende a
reaccionar con aluminio, hierro y manganeso, mientras
que en suelos alcalinos, la fijacin dominante es con el
calcio. El rango de pH ptimo para la disponibilidad
mxima del fsforo es de 6.0-7.0. En muchos suelos la
descomposicin de la materia orgnica y los residuos de
cultivos contribuyen al fsforo disponible.

FIGURA N1 Transformacin del fsforo en el suelo

II.1.2.

La absorcin de fsforo por las plantas

Las plantas absorben el fsforo de la solucin

del suelo como el ion ortofosfato: HPO4-2 o H2PO4-. La
forma en que el fosforo es absorbido es afectado por el
pH. En un pH ms alto predomina la forma H2PO4-.
La movilidad del fsforo en el suelo es muy
limitada y por lo tanto, las races pueden absorber el
fsforo solamente de su entorno inmediato. Desde que la
cantidad del fsforo en la solucin del suelo es baja, la
mayor parte de la absorcin del fsforo es activa, contra
del

gradiente

de

la

concentracin

(es

decir,

la

concentracin del fsforo es mayor en las races que en la

solucin del suelo).
La absorcin activa es un proceso que
consume energa, as que las condiciones que inhiben la
actividad de las races, tales como las bajas temperaturas,
el exceso de agua, etc., inhiben la absorcin del fsforo.
(GONZALES, et al 1960)
II.1.3. La deficiencia de fsforo
Los sntomas de la deficiencia del fsforo
incluyen retrasos en el crecimiento de la planta, coloracin
prpura oscura de las hojas ms viejas, retraso en el
crecimiento de las races y el florecimiento. En la mayora

de las plantas estos sntomas aparecen cuando la

concentracin del fsforo en las hojas es inferior al 0,2%.
II.1.4. El exceso de fsforo
El exceso de fsforo interviene, en su mayor
parte, con la absorcin de otros elementos, tales como el
hierro, el manganeso y el zinc. La fertilizacin excesiva
con fsforo es comn y muchos agricultores aplican
innecesariamente altas cantidades de fertilizantes de
fsforo, especialmente cuando se utilizan fertilizantes
compuestos de NPK o cuando se acidifica el agua de
riego con cido fosfrico.
II.2.

El anlisis de fsforo en el suelo

El nivel del fsforo en los anlisis de
suelos, da una medida de la capacidad del suelo para
suministrar fsforo a la solucin del suelo. El anlisis del suelo
no indica la cantidad total del fsforo en el suelo, porque la
cantidad de fsforo disponible es mucho menor que la cantidad
total. Asimismo, el nivel del fsforo en los anlisis de suelos
tampoco no es el nivel del fsforo en la solucin del suelo,
porque la concentracin de fsforo en la solucin del suelo es
generalmente muy baja y no representa apropiadamente la
cantidad de fsforo que las plantas potencialmente pueden

absorber durante la temporada de crecimiento. El nivel de

fsforo en los anlisis de suelos es, en realidad, un ndice que
ayuda a predecir los requerimientos de los fertilizantes
fosfatados de los cultivos. Las recomendaciones para la
aplicacin de fertilizantes se determinan sobre la base de
ensayos de campo en muchos suelos y cultivos. (OLSEN, et al
1954)

CUADRO N1 Interpretacin del anlisis del suelo

Es muy importante tomar el muestreo de suelo
correctamente para alcanzar los resultados que realmente
representan el nivel del fsforo disponible en el suelo. Por
ejemplo:
La profundidad de la muestra del suelo - dado que el fsforo
no es mvil

en el suelo, las muestras que se toman de la

capa superior del suelo, por lo general, indican una mayor

cantidad de fsforo que las muestras que se toman desde el
subsuelo.

 Los mtodos de aplicacin de los fertilizantes fosfatados- la

mayor parte del fsforo aplicado a los suelos se queda dentro
de 1 o 2 pulgadas desde el punto de la aplicacin. Por lo
tanto, la ubicacin exacta de donde se toman las muestras del
suelo puede afectar el resultado considerablemente.
II.3.

Mtodo de olsen modificado

El mtodo de Olsen con bicarbonato de sodio fue
desarrollado por Sterling R. Olsen y sus colaboradores en 1954
para predecir la respuesta del cultivo a la adicin de
fertilizantes de P en suelos calcreos. Se utiliza como mtodo
predilecto en suelos calcreos, particularmente aquellos con
menos ms del 2% de carbonato de calcio, pero se ha
demostrado en algunas investigaciones ser razonablemente
eficaz para suelos cidos.
El mtodo se basa en el uso de una solucin de
NaHCO3 0.5 M

solucin de

3+
Al

para

disminuir

las

concentraciones

2+

Ca soluble por precipitacin como

CaCO3

de

3+
Fe por la formacin de Al y oxi-hidrxidos de Fe

con lo que aumenta la solubilidad del P las cargas superficiales

negativas mayores y/o la disminucin del nmero de sitios de

absorcin en las superficies de Fe y Al de xido en los niveles
altos de pH tambin mejoran la desorcin de P disponible en la
solucin. (OLSEN, et al 1954.
Para Olsen un valor de 10 mg/kg se considera generalmente
ptimo para el crecimiento vegetal.

III.
III.1.

MATERIALES Y MTODOS

MATERIALES
III.1.1. INSTRUMENTOS
Balanza tcnica (0.01g).
Espectrmetro UV-Visible capaz de leer a 670nm y con ancho

de banda de 1nm y celda de muestra de 1 cm.

III.1.2. MATERIALES
Agitador de suelos de 33 muestras.
Rack de polietileno de 11 muestras.
Macro pipeta hasta 5ml de capacidad.
Dispensador capas de dispensar hasta 25ml.
Tubos de ensayo.
Papel filtro Whatman.
III.1.3. REACTIVOS
Bicarbonato de sodio 0.5 M pH 8.5.
Tartrato de antimonio y potasio (KSbOC4H4O6. 1/2H2O).
Carbn activo (lavado).
cido sulfrico.
cido ascrbico.
Hidrxido de sodio (NaOH)
Molibdato de amonio (NH4) 6Mo7O24.
Agua destilada.
III.2. MTODOS
III.2.1. TOMA DE MUESTRA
Realizamos una calicata de 1x1m y con una profundidad de

20cm.
Tomamos 2 muestras (una muestra del Hz. O y otra del Hz. A).

Moler las muestras (con un molino que funciona a base

tambor) hasta dejarla muy fina.

Pesamos 2g muestras de cada muestra en la balanza analtica

y los colocamos cada uno en vasos de plstico.

III.2.2. PREPARACIN DE SOLUCIONES
Agregamos 1g de carbn activo (lavado) con el cucharon en

cada una de las muestras.

Luego 20ml de bicarbonato de sodio 0.5 M pH 8.5 y agitamos

vigorosamente durante 20 min con el agitador.

Filtramos cada muestra con el papel filtro Whatman, con la

finalidad de obtener la esencia cada muestra.

PREPARACIN DE LA SOLUCION PATRON
En las 3 fiolas de 50ml agregamos la solucin patrn fsforos
a 50 ppm (en la primera fiola 1ml, en la segunda 2ml y en el

tercer 3 ml) y la completamos con agua destilada.

Preparamos el reductor al agregar 0.1g de cido ascrbico en

10ml de Molibdato de amonio ((NH4) 6Mo7O24 4H2O).

Agregamos 3ml de la solucin preparada (de 0, 1, 2, 3 ppm de
los embaces de plstico) a los dos tubos de ensayo y 10ml del

reductor.
III.2.3. PREPARACIN DEL EXTRACTO DE LECTURA
En los tubos de ensayo aadir 3ml de las muestras filtradas

(cada muestra en un tubo de ensayo).

As mismo agregamos 10ml de la solucin de molibdato de

amonio y 3ml de la solucin reductora.

Dejar reposar por 15min.

III.2.4. OBTENCIN DE DATOS

Secar los tubos de ensayo (con las muestras) y colocarlos en

el espectrofotmetro a 660nm.
Y finalmente anotar los datos necesarios.

FIGURA N2 Analizando las muestras del hz 0 y hzA en el

espectrofotmetro

IV.

RESULTADOS

Para la determinacin del fosforo:

Lectura de patrones:
0 ppm: 0
1 ppm: 0.101
2 ppm: 0.159
3 ppm: 0.204
Lecturas de la muestra:
Muestra del Hz O: 0.291
Muestra del Hz A: 0.027

Realizaremos nuestra curva patrn:

Decimos que

C1V 1=C 2V 2

C1 =

1 ppm3 ml
=0.23 ppm
13 ml

C2 =

2 ppm3 ml
=0.46 ppm
13 ml

C3 =

2 ppm3 ml
=0.69 ppm
13 ml

PATRON Absorbancia Concentracin

ES
X
Y
1
0
0
2
0.101
0.23
3
0.159
0.46
4
0.204
0.69

0.464
1.38

XY

X^2

0
0.02323
0.07314
0.14076
0.23713

0
0.010201
0.025281
0.041616
0.077098

Cuadro n 2. Datos obtenidos de la absorbancia y la concentracin

Entonces decimos que:

Y =a+bx

b=

n xy x y
n x 2 ( x )

b=

( 40.23713 )( 0.4641.38 )
=3.31056
( 40.077098 )( 0.464 )2

b=3.31056

a=

a=

y b x
n
1.38(3.310560.464)
=0.039025
4

a=0.039025

Aborbancia y concentracin

f(x) = 3.31x - 0.04

R = 0.96

Relacin entre
aborbancia y
concentracin
Linear (Relacin entre
aborbancia y
concentracin)

GRFICO N1. RELACIN DE ABSORBANCIA Y LA CONCENTRACIN

Reemplazando la lectura de la muestra en la ecuacin:

Para el

HZ O

y=a+bx
y=3.31056 ( 0.291 )0.039025

y=0.92435 mg

Entonces decimos:
yVolumen total del tubo
103 gr
3
10 ml
Volumenextractante
peso de la muestra
P ppm=
alicuota
mg13 ml
3
10 gr
3
10 ml
20 ml
2 gr
P ppm =0.92435
3 ml

P ppm =40.052

HZ A

Para el

y=3.31056 ( 0.027 )0.039025

y=0.05036

Entonces decimos:
mg13 ml
103 gr
3
10 ml
20 ml
2 gr
P ppm =0.05036
3 ml
P ppm =2.1821

V.

DISCUSIN

Segn (MCKEAN, S. 1993) el mtodo Olsen usa una solucin de bicarbonato de

sodio a un pH de 8.5. El resultado para la determinacin del fsforo depender si
el suelo es alcalino o cido, en el alcalino el calcio precipita como CaCO, esto
facilita la extraccin de los fosfatos de calcio ms solubles mientras que en los
suelos cidos los iones de bicarbonato reemplazan a los fosfatos de aluminio y
hierro.

Segn (MOLINA, J. 2012) el suelo brinda soporte mecnico a las plantas y

tambin representa la fuente principal de los nutrientes, estos nutrientes puedes
estar en forma inica o formando complejos y pueden ser macronutrientes o
micronutrientes dependiendo de la cantidad que es absorbida. El fsforo es uno

de los elementos ms importantes para las plantas y por lo general se encuentra

en el suelo en menores proporciones en forma asimilable.

Segn (GARBOZO, J. 2015) afirma que la movilidad del fsforo en el suelo es

limitada y, por lo tanto, las races pueden absorber el fsforo solamente de su
entorno inmediato. Las condiciones que inhiben la actividad de las races, tales
como las bajas temperaturas, el exceso de agua, etc., inhiben la absorcin del
fsforo. Esta deficiencia de fsforo presenta como sntomas retrasos en el
crecimiento de la planta, coloracin prpura oscura de las hojas ms viejas,
retraso en el crecimiento de las races y el florecimiento. Por el contrario, tambin
es comn que muchos agricultores aplican innecesariamente altas cantidades de
fertilizantes de fsforo resultando dainos para las plantas.

VI.

CONCLUSIN

Aprendimos los pasos que se requieren para la determinacin

cuantitativa del fsforo de los dos primeros horizontes del suelo del
BRUNAS mediante el mtodo de Olsen Modificado

VII.
-

REVISIN BIBLIOGRFICA

GONZALES, R.; RODRIGUEZ, A. y MARIO, M. 1960. Resultados

preliminares sobre correlacin de anlisis de fsforo del suelo, con los
rendimientos. Maracay, centro de investigaciones agropecuarias. Seccin de
suelos. Pag. 15-35.

GARBOZO ZAENS, J.2015. Determinacin de fsforo. Disponible en:

file:///F:/%A0/$analisis%20instrumental/Determinaci%F3n%20de%20f
%F3sforo.html

MCKEAN, S. 1993. Manual de anlisis de suelos y tejido vegetal:

Determinacin de fsforo en suelo por el mtodo Olsen, pp. 41.

MOLINA CEBALLOS, J.2012. Mtodos de laboratorio para la extraccin de

fsforo disponible en el suelo. Disponible en: file:///F:/%A0/$analisis
%20instrumental/M%E9todos%20de%20laboratorio%20para%20la

%20extracci%F3n%20de%20f%F3sforo%20disponible%20en%20el
%20suelo%20-%20Monografias.com.html

OLSEN, R.; COLE, C.; WATANABE, F. y DEAN, L. 1954. Estimacin de fsforo

disponible en suelos por extraccin con bicarbonato de sodio. U.S.O.A. Pag.
10-26.

VIII. ANEXOS

FIGURA N1 Agregamos carbn lavado a nuestra muestra de suelo recin molido

FIGURA N2 Agregamos una solucin que est a 1, 2,3 ppm a la fiola o matraz

FIGURA N3 Pesamos la tierra previamente molida hasta tener 2g

FIGURA N4 Ponemos nuestras muestras en el espectrofotmetro con una

muestra en blanco

FIGURA N5 Agregamos molibdato de amonio a la fiola para hacer nuestro

muestreo y de esta manera notar la presencia de carbonatos