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Tema 17 Mutacin (KlugT15..-PierceT.

17)

Mark Canlas

La capacidad de las molculas de dna de almacenar, replicar, transmitir y descodificar informacin es la


base de la funcin gentica. Pero igualmente importante es la capacidad del dna de cometer errores. Sin la
variacin que surge de los cambios en las secuencias de dna, no habra variabilidad fenotpica, ni
adaptacin a los cambios ambientales, ni evolucin. Las mutaciones gnicas son el origen de la aparicion
de alelos nuevos, son el origen de la variacin gentica entre poblaciones y tienen caracter preadaptativo,
es decir, que las mutaciones no ocurren por la necesidad de una adaptacin si no que son espontneas y la
adaptacin viene despus. En el polo opuesto tambin son el origen de cambios genticos que conducen a
la muerte celular, a enfermedades genticas y al cncer.
Se puede definir mutacin, como una alteracin de la secuencia de dna. Cualquier cambio de pares de
bases en cualquier molcula de dna puede considerarse mutacin. Una mutacin puede comprender la
sustitucin de un solo par de bases, la deleccin o la insercin (indel) de uno o de mas pares de bases,
o puede constituir una alteracin importante de la estructura de un cromosoma.
Las mutaciones pueden producirse dentro de las regiones de un gen que codifican la protena, en regiones
externas a los genes que afectan a su expresin o en otros sitios del dna. Por eso las mutaciones pueden
acarrear un cambio fenotpico que sea detectable o que no lo sea. El grado en que una mutacin cambia las
caractersticas de un organismo depende del sitio donde se haya producido y del alcance de la alteracin
del gen.
Las mutaciones se pueden producir en las clulas somticas o en las clulas germinales. Las que se
producen en las clulas germinales son hereditarias y son la base de la diversidad gentica y de la
evolucin, as como tambin de las enfermedades genticas. Las que producen las clulas somticas
pueden producir muerte celular localizada, una funcin celular alterada o tumores.
Las mutaciones pueden ser espontneas o inducidas aunque estas dos categoras tienen un cierto
solapamiento. Las mutaciones espontneas son las que se producen de manera natural. No hay agente
especifico asociado a ellas y se supone que son debidas a cambios aleatorios de la secuencia de
nucleotidos de los genes. La mayora de los cambios de estas mutaciones estn relacionadas a procesos
qumicos o biolgicos normales del organismo que alteran la estructura de las bases nitrogenadas. A
menudo las mutaciones se producen durante el proceso enzimtico de replicacin del dna.
En contraste con las mutaciones espontneas, las mutaciones que se producen por la influencia de
cualquier factor externo se consideran mutaciones inducidas. Las mutaciones inducidas pueden ser el
resultado de agentes naturales o artificiales. La primera demostracin de induccin artificial de
mutaciones se produjo en 1927 cuando Muller publico que los rayos X provocaban mutaciones en
Drosophila. Ademas de los distintos tipos de radiacin, se conoce un amplio espectro de agentes qumicos
tanto naturales como producidos por el ser humano que tambin son mutagnicos.

Clasificacin basada en la localizacin de la mutacin


Las mutaciones pueden clasificarse segn el tipo celular o la localizacin cromosmica en que se producen.
Las mutaciones somticas se pueden producir en cualquier celular del cuerpo excepto las germinales. Las
mutaciones germinales se producen en los gametos y las mutaciones autosmicas se producen en genes
localizados de los autosomas, mientras que las mutaciones ligadas a X se producen en genes localizados
en el cromosoma X. Cuando se produce una mutacin autosmica recesiva es probable que no tenga
ningn resultado fenotpico destacable. Es probable que la expresin de la mayora de mutaciones quede
enmascarada por el aleo dominante.

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Mark Canlas

La importancia de las mutaciones producidas por en los gametos es mayor, puesto que se transmiten a la
descendencia como parte de la linea germinal. stas tienen el potencial de expresarse en todas las clulas
del descendiente. Las mutaciones autosmicas dominantes se expresarn en el fenotipo de la primera
generacin. Las mutaciones recesivas ligadas al cromosoma X surgidas de gametos de una hembra
homogamtica, pueden expresarse en los descendientes machos que son hemicigotos. Debido a la
heterozigosidad, la aparicin de una mutacin autosomica recesiva en los gametos tanto de machos como
de hembras pueden pasar desapercibidas durante muchas generaciones, hasta que el alelo resultante se
haya extendido por la poblacin. Generalmente el nuevo alelo se manifestar solo cuando haya dos copias
de este en homocigosis.
Clasificacin basada en el tipo de cambio molecular.
A menudo, los genticos clasifican las mutaciones gnicas segn los cambios nucleotdicos que genera la
mutacin. El cambio de un par de bases por otro en una molcula de dna se denomina mutacin puntual o
sustitucin de bases. El cambio de un nucletido de un triplete en una porcin de un gen que codifica una
protena, puede resultar en la generacin de un nuevo triplete que codifique un aminocido diferente en el
producto proteico. Si esto ocurre se le denomina mutacin de cambio de sentido. Una segunda posibilidad
es que el triplete cambie en un codn de terminacin, lo que resulta en la terminacin de la tradicin de la
protena, lo se conoce como mutacin sin sentido. Si la mutacin puntual altera un codn pero no resulta
en un cambio aminoacdico en esa posicin de la protena puede considerarse una mutacin silenciosa.
A menudo, tambin se puede ver otros dos trminos usados para describir sustituciones de bases. Si una
pirimidina reemplaza a una pirimidina o a una purina reemplaza a otra purina, se ha producido una
transicin. Su se intercambian una purina y una pirimidina se ha producido una transversin. Otro tipos de
cambio que se puede producir es la deleccin o la insercin de uno o mas nucletidos en cualquier lugar
del gen. Estas mutaciones se denominan mutaciones de cambio de fase.
Efectos fenotpicos de las mutaciones
Las mutaciones tienen diversos efectos fenotpicos. Una mutacin que altera el fenotipo silvestre se
denomina mutacin directa, mientras que una mutacin inversa revierte un fenotipo mutante a un
fenotipo silvestre.
Los genetistas utilizan trminos especiales para describir los efectos fenotpicos de las mutaciones. Una
mutacin neutra es una mutacin de aminocido que cambia la secuencia de aminocidos de una protena
pero que no cambia su funcin. Se producen mutaciones neutrales cuando se remplaza un aminocido por
otro qumicamente similar cuando el aminocido afectado tiene poca influencia en la funcin de la protena.
La sustitucin de una base que altera un codn en el mRNA y da como resultado un aminocido diferente
en la protena, se conoce como mutacin de cambio de sentido. Una mutacin sin sentido cambia un
codn con sentido (uno que codifica un aminocido) por otro sin sentido (uno que termina la traduccin). Por
ultimo esta el cambio de pauta de lectura (ORF) que son las producidas por ndel, transposiciones, etc
Mutaciones en genes de ARNt
Una de las mutaciones en genes de ARNt es la mutacin supresora que afecta al cambio del anticodn del
ARNt de la tirosina, AUG, por AUC (STOP). En ocasiones se incluir un aminocido tirosina, donde deba
acabar la sntesis proteica.
Y la otra mutacin en genes de ARNt es la mutacin de ambigedad que es el cambio del anticodn GAU
del ARNt de la leucina por GGU, que reconoce al codn CCA de la prolina.***Buscar mas*

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Mark Canlas

Tasa de mutacin
La frecuencia con la cual un gen cambia del fenotipo silvestre a uno mutante se conoce como tasa de
mutacin y suele expresarse como el numero de mutaciones por unidad biolgica. Esto pueden ser
mutaciones por divisin celular, por gameto o por ronda de replicacin. Por ejemplo, la tasa de mutacin
para la acondroplasia, es de al rededor de cuatro mutaciones por cada 100.000 gametos expresado como
4x10-4. Por el contrario la frecuencia de mutacin se define como la incidencia de un tipo especifico de
mutacin dentro de un grupo determinado de organismos.
Las tasas de mutacin estn afectadas por tres factores. En primer lugar, dependen de la frecuencia con la
cual se producen los cambios primarios en el dna. Un segundo factor es la probabilidad de que una vez que
se produzca un cambio, este sea reparado. La mayora de las clulas posee numerosos mecanismos de
reparacin del dna alternado. Por lo tanto, la mayora de las alteraciones se corrige antes de que se
replique. Si estos sistemas de reparacin son eficaces, las tasas de mutaciones van a ser bajas; si son
defectuosos, las tasas de mutaciones sern elevadas. Un tercer factor que influye en nuestra capacidad
para calcular las tasas de mutaciones, es la probabilidad de reconocer o registrar una mutacin.
Dentro de cada clase principal de organismos, las tasas de mutaciones varan de manera considerable.
Estas diferencias pueden obedecer a distintas capacidades para reparar mutaciones, a diferentes
exposiciones de mutgenos o variaciones biolgicas en las tasas de mutaciones espontneas. Aun dentro
de una misma especie, las tasas de mutaciones espontneas varan entre los genes. El motivo para esta
variacin no esta dilucidado por completo, pero se sabe que algunas regiones del dna son mas
susceptibles a las mutaciones que otras. Pero en trminos genticos, las mutaciones que realmente tienen
valor son los que se puedan pasar a la linea germinal o aquellas que afecten a la supervivencia o viabilidad
del individuo.
Mutacin espontnea
Las mutaciones son el resultado de factores internos y externos. Las que surgen por cambios naturales
en la estructura de dna se denominan mutaciones espontneas, mientras que las provocadas por cambios
causados por sustancias qumicas ambientales o por radiacin son mutaciones inducidas.
Errores espontneos de replicacin.
La replicacin es asombrosamente exacta: se produce menos de un error en mil millones durante la sntesis
del dna. Sin embargo, de vez en cuando se producen errores espontneos. Puede haber errores en la
polimerizacin y tambin puede haber un desplazamiento en la replicacin causadas por alguna
insercin o deleccin cambiando la pauta de lectura. Se pueden producir en cualquier sitio del dna y mas
en secuencias repetidas. Antes se crea que la causa primaria de esos errores eran cambios
tautomricos, en los que cambiaban las posiciones de los protones en las bases del dna.
Las bases purinicas y pirimidinicas existen en diferentes formas qumicas denominadas tautomricas que
son formas qumicas alternativas denominadas ismeros estructurales.

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Mark Canlas

Las formas tautomricas de importancia biolgica son las formas ceto(normal)-enol(tautomero) de la


timina y guanina y las formas amino(normal)-imino(tautomero) de la citosina y de la adenina.
Debido a que estos desplazamientos cambian la estructura de enlace de la molcula, Watson y Crick
sugirieron que los cambios tautomricos pueden resultar en cambios en el emparejamiento de bases o
mutaciones. Los tautmeros transitorios menos frecuentes pueden formar puentes de hidrogeno con
bases no complementarias. El efecto que conduce a la mutacin se produce durante la replicacin del dna,
cuando un tautmero poco frecuente de la cadena molde se empareja con una base no complementaria. En
la siguiente ronda de replicacin, se separan miembros del par de bases mal emparejados y cada uno
especifica de su base complementaria normal. El resultado final es una mutacin puntual.
Despurinacin y Desaminacin
Alguna de las causas mas comunes de mutaciones espontneas son debidas a daos en las bases del dna.
La despurinacin implica la prdida de bases nitrogenadas en una molcula helicoidal de doble cadena de
dna intacta. En la mayor parte de los casos, estos sucesos implican purinas, tanto guaninas como adeninas.
Estos nucleotidos pierden su base nitrogenada al romperse el enlace glucosdico que une el 1C de la
desoxirribosa y la posicin numero 9 del anillo de la purina. Esto conduce a la generacin de un sitio
apurnico. (sitios AP) en una cadena del dna. Se ha estimado que en el dna de las clulas de mamfero en
cultivo se forman diariamente miles de estas lesiones espontneas. Si no se reparan los sitios AP, no habr
ninguna base en esa posicin que acte de molde durante la replicacin del dna. En consecuencia, en este
sitio la dna polimerasa introducir un nucletido al azar.
En el proceso de desaminacin un grupo amino
de la adenina o de la citosina se convierte en
una grupo ceto. En estos casos, la citosina se
convierte en uracilo y la adenina en hipoxantina.
El efecto mas importante de estos cambios, es la
alteracin de la especifidad de emparejamiento
de estas dos bases durante la replicacin del
dna.
La desaminacin se puede producir de manera
espontnea o como resultado de una tratamiento
con un mutgeno qumico como puede ser el
cido nitrso (HNO2).

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Mark Canlas

Dao oxidativo
El dna tambin puede sufrir daos debido a los subproductos de los procesos celulares normales. Estos
subproductos incluyen diversos tipos de oxigeno reactivo(oxidantes eletroflicos) que se generan durante
la respiracin aerbica normal. Algunos de ellos se generan durante el metabolismo celular y amenazan la
integridad del dna. Los oxidantes reactivos, que tambin se generan por exposicin a radiacin de alta
energa, pueden producir mas de 100 tipos diferentes de modificaciones qumicas en el dna, incluyendo
modificaciones de bases que conducen a emparejamientos errneos durante la replicacin.
Transposones
Los elementos genticos transponibles o transposones tambin producen mutaciones espontneas en
eucariotas y en procariotas. Determinadas secuencias de ADN tienen capacidad de movilizarse en los
genomas, produciendo roturas, inserciones, duplicaciones, inversiones, etc.
Entrecruzamiento desigual o ilegtimo
Elementos repetidos inducen errores en el apareamiento de los cromosomas. El entrecruzamiento genera
deleccin en una cromtida y duplicacin en la otra.
Mutacin inducida: Agentes mutgenos
Las mutaciones inducidas se producen por daos en el dna causados por agentes qumicos y
radiaciones. Todas las clulas de la tierra estn expuestas a una enorme cantidad de agentes que tienen el
potencial de daar el dna y causar mutaciones (mutgenos). Algunos de estos agentes, como algunas
toxinas de hongos y la luz ultravioleta, son componentes naturales de nuestro ambiente. Otros, incluyendo
algunos contaminantes industriales, los rayos X usados en medicina y los productos qumicos que hay en el
humo del tabaco, pueden considerarse como no naturales o como adiciones producidas por los humanos.
Estos agentes mutgenos naturales y no naturales, y sus mecanismos de accin son los siguientes.
Agentes fsicos: Radiacin y Calor
En 1927 Hermann Muller demostr que con el uso de los rayos X podan inducirse, mutaciones en
Drosophila. Los resultados de estudios posteriores mostraron que los rayos X aumentan en gran medida las
tasas de mutaciones en todos los organismos. Por lo que se puede afirmar que la radiacin produce
mutaciones gnicas y cromosmicas, y que la
induccin de mutaciones es proporcional a la dosis
recibida de radiacin y generalmente es
acumulativa.
La energa alta de los rayos X, de los rayos
gamma y los rayos csmicos penetra los tejidos y
daa el dna. Estas formas de radiaciones,
denominadas radiaciones ionizantes, desplazan
electrones de los tomos donde se encuentran y
transforman las molculas estables en radicales
libres e iones reactivos. Luego estos alteran las
estructuras de las bases y rompen las uniones
fosfodister del dna.

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Mark Canlas

Por otro lados, las radiaciones ionizantes producen roturas de la doble cadena del dna. El intento de
reparacin de esa roturas puede inducir a mutaciones cromosmicas.
La luz UV posee menos energa que la radiacin ionizante y no expulsa electrones ni causa ionizacin, sin
embargo es altamente mutagnica. Las bases purnicas y pirimidnicas absorben con rapidez la luz UV;
como resultado se forman uniones qumicas
entre las molculas pirimidinicas adyacentes en
la misma cadena de dna y la creacin de
estructuras llamadas dmeros de pirimidina.
Los dmeros mas frecuentes de pirimidinas
estn constituidos por dos bases de timina
(llamados dmeros de timina) pero tambin
puede haber dmeros de las otras bases
pirimidinicas. Estos dmeros distorsionan la
configuracin del dna y a menudo bloquean la
replicacin y la transcripcin. Por ultimo aunque
menos potente que los anteriores, el calor
tambin es un agente mutagnico e induce
despurinizaciones.
Agentes qumicos
Son compuestos qumicos capaces de alterar las estructuras del dna de forma brusca, ya que producen
cambios en las bases nitrogenadas. Algunos de los mutgenos qumicos son el cido Nitroso, que induce
desaminacin de citosina y crea un uracilo que como consecuencia se apareara con una adenina para
producir una mutacin de transicin.
La hidroxialamina es un mutgeno modificador de bases muy especfico que agrega un grupo hidroxilo a la
citosina y la convierte en hidroxialaminacitosina. Esta conversin aumenta la frecuencia de un tautmero
extrao que se aparea con la adenina en lugar de la guanina y lleva a las transiciones.
Uno de los primeros grupos de mutagenos qumicos descubiertos fueron los gases mostaza que contienen
sulfuro. El descubrimiento se realizo durante la I Guerra Mundial, en investigaciones sobre armas qumicas.
Los gases mostaza son agentes alquilantes es decir, ceden grupos alquilo como metilos y etilos a grupos
amino o cetona de las posiciones 6 de la guanina y 4 de la timina. Como sucede con los anlogos de
bases, las afinidades de emparejamiento se alteran provocando mutaciones de transicin.
Otro tipo de agentes mutgenos son los anlogos de base. Estos mutgenos qumicos pueden sustituir a
las purinas o a las pirimidinas durante la biosntesis de los cidos nucleicos. Uno de los ejemplos es el 5-BU
5-bromouracilo un derivados del uracilo que se comporta como anlogo de la timidina y se encuentra
halogenados en la posicin 5 del anillo de pirimidina. Si la 5-BU se une qumicamente a la desoxirribosa, se
forma el nuclesido anlogo Breomodeoxiuridina (BrdU).
La presencia del atomo de bromo en lugar del grupo metilo incrementa la probabilidad de que se produzca
un cambio tautomrico. Si en el dna se incorpora 5-BU en vez de timidina y si se produce un cambio
tautomrico a la forma enol, la 5-BU se emparejara con la guanina. Despus de una ronda de replicacin se
habr producido una mutacin de transicin de A/T A G/C. Ademas la presencia de 5BU en el dna
incrementa la sensibilidad de la molcula a la luz UV que es tambin mutagnica.

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Mark Canlas

Por ultimo estn los agentes intercalantes como por ejemplo la proflavina, la naranja de acridina, el
bromuro de etidio y la dioxina. Estos mutgenos qumicos producen mutaciones al intercalarse entre bases
adyacentes del dna, as distorsionan la estructura tridimensional de la hlice y provocan inserciones y
deleciones de un nucletido nico durante la replicacin. Estas inserciones y deleciones producen con
frecuencia mutaciones de cambio de marco de lectura y de este modo los efectos mutagnicos de los
agentes intercalantes a menudo son graves. Como los agentes intercalantes generan tanto adiciones como
deleciones, pueden invertir los efectos de sus propias mutaciones.
Detecciones de mutaciones
Las mutaciones han sido objeto de intenso estudio entre los genetistas, porque tienen casi siempre efectos
perjudiciales. Estos estudios incluyeron el anlisis de las mutaciones inversas, las que a menudo dan una
idea acerca de como las mutaciones causan dao al dna; el desarrollo de pruebas para determinar las
propiedades mutagnicas de los compuestos qumicos e investigaciones de poblaciones humanas
trgicamente expuestas a niveles altos de radiacin.
Una forma de la deteccin de mutaciones es el uso de modelos. Se suele usar de modelos: hongos,
levaduras, plantas, animales de experimentacin, cultivos celulares, etc. Es mas eficiente en
microoganismos haploides como bacterias u hongos. A menudo la deteccin depende de un sistema de
seleccin en el que las clulas mutantes puedan aislarse fcilmente de las no mutantes. Por ejemplo los
mutantes nutricionales en modelos de bacterias u hongos pueden detectarse y aislarse por su incapacidad
de crecer en medio mnimo y por su capacidad de crecer en medio completo. Las clulas mutantes no
pueden sintetizar alguna sustancia esencial ausente en el medio mnimo pero que se encuentra en el medio
completo. Una vez detectado y aislado el mutante se puede determinar que sustancia es la que no puede
sintetizar cultivando la cepa mutante en una serie de tubos que contienen medio mnimo suplementado con
un unico compuesto.
Test de Ames
El ensayo de Ames se usa para valorar la mutagenicidad de los compuestos qumicos. Existe una gran
preocupacin sobre las posibles propiedades mutagnicas de cualquier sustancia que entra en el cuerpo
humano ya sea por la piel, por el sistema digestivo o por el aparato respiratorio. El ensayo de Ames usa
cutro cepas de bacteria Salmonella typhimurium que han sido seleccionadas por su sensibilidad y
especificidad a la mutagnesis. Las cuatro cepas son incapaces de sintetizar histidina, y por lo tanto
requieren histidina para crecer(his-). El ensayo mide la frecuencia de reversin de la mutacin que produce
bacterias silvestres.(revertientes his+). Estas cepas de Salmonella tienen mayor sensibilidad a los
mutagenos ya que contienen otras mutaciones que eliminan el sistema de reparacin por escisin y la
barrera de lipopolisacaridos que cubre y protege la superficie de la bacteria de la presencia de sustancias
externas.
Es interesante destacar que muchas sustancias que entran en el cuerpo humano son inocuas hasta que se
activan metablicamente, generalmente en el hgado, en productos qumicamente activos. As, el ensayo
Ames incluye un paso en el que el compuesto que se desea probar se incuba in vitro en presencia de un
extracto de higado de mamfero. Otra alternativa es inyectar los compuestos en ratones para que las
enzimas del higado las modifiquen y luego se recuperan para ser usados en el ensayo de ames.
Aunque una respuesta positiva en el ensayo de ames no demuestra que un compuesto sea cancergeno
el ensayo de ames es util como mecanismo preliminar de rastreo. El ensayo de ames se usa mucho en el
desarrollo industruak y farmaceutico de sustancias qumicas.