Prctica N 9

Efecto de la temperatura sobre el crecimiento microbiano

La temperatura es el factor ambiental que ejerce una variada influencia sobre los
seres vivos, puesto que tiene un efecto conservador, promotor y destruidor del
crecimiento. El lmite de temperatura en la cual un microorganismo puede crecer y
multiplicarse es la temperatura mnima y mxima de crecimiento, la cual junto a la
temperatura optima, representa las temperaturas cardinales que ayudan a la
identificacin y taxonoma. El crecimiento microbiano se ve afectado de manera
importante por la temperatura, por lo que se han formado tres grupos, de acuerdo a
la temperatura ptima en la que se desarrollan:
1. Psicrfilos. Crecen en rangos de temperaturas que van de -5 C hasta 30C
2. Mesfilos. Crecen en rangos de temperatura que van desde 10C hasta 45C
3. Termfilos. Crecen a un rango de temperatura de 25C a 80C

Objetivo:
Determinar el efecto de diferentes temperaturas de incubacin sobre el
crecimiento de un microorganismo.

Materiales:

Tubos de ensayo con caldo nutritivo estril.

Incubadoras a 37 C, 55 C.
Refrigerador a 8 C.
Cepas:
1. Escherichia coli.
2. Staphylococcus aureus.
3. Bacillus sp.
4. Enterobacter sp.
5. Sarcina.

Mtodologa:
1.
2.
3.
4.

Coloque en una gradilla una serie de 3 tubos con caldo nutritivo estril.
Marque cada tubo con las siguientes temperaturas 8C, 37C y 55C
Inocule cada tubo con la cepa a estudiar.
Inocule los tubos a las temperaturas correspondientes durante 24 horas.

5. Observe el resultado comparando el crecimiento de cada capa a las

temperaturas estudiadas.
6. Registre sus resultados (Tabla 1)

Tabla 1

Cepa

Temperatura
8C

37C

55C

Preguntas a investigar:
1. Mencione 5 microorganismos (gnero y especie) perteneciente a cada uno de
los grupos anteriores.
2. Cul es la importancia industrial del uso de altas temperaturas para el
control de los microorganismos?
3. Cul es el mecanismo mediante el cual las altas temperaturas inhiben el
crecimiento microbiano?

Prctica N 9.1

Influencia del pH sobre el crecimiento microbiano

El crecimiento microbiano est fuertemente afectado por el pH del medio, pero hay
amplias diferencias en los requerimientos de pH de las distintas especies. Cada
especie puede crecer solo dentro de ciertos lmites de pH y el crecimiento ms
abundante ocurre en un valor que llamamos ptimo. De acuerdo con el pH ptimo
de crecimiento los microorganismos pueden clasificarse en:
a. Acidfilos. Crecen en un rango de pH desde 1,0 a 5,0
b. Neutrfilos. Crecen en un rango de pH desde 5,5 a 8,5
c. Alcalfilos o Basfilos. Crecen en un rango de pH desde 9,0 a 10,0

Objetivo:
Observar el efecto que ejerce el pH del medio de cultivo sobre el crecimiento
microbiano.

Material:
Tubos de ensayo con caldo nutritivo con el pH ajustado a 5, 7 y 9.
Cepas:
1. Escherichia coli
2. Bacillus sp.
3. Enterobacter sp.
4. Staphylococcus aureus.

Metodologa:
1. Coloque una gradilla una serie de 3 tubos con caldo nutritivo a diferentes
valores de pH.
2. Rotule los tubos con el nombre de la cepa que va a estudiar.
3. Inocule cada tubo con una asada del cultivo correspondiente.
4. Incube a 37C durante 24 horas.
5. Observe el resultado comparando el crecimiento en cada serie de tubos.
6. Registre sus resultados. (Tabla 1)

Tabla 1

Cepa

pH
7

Preguntas a investigar:
1. Mencione cinco microorganismos acidfilos, cinco neutrfilos y cinco
alcalfilos.
2. Cul es la importancia industrial del uso del pH para el control de los
microorganismos?
3. Cul es el mecanismo mediante el pH inhibe el crecimiento microbiano?

Prctica N 10

Desinfectantes y antispticos
Los mtodos sanitarios tienen por finalidad disminuir el contenido de bacteriano de
los utensilios utilizados en la industria de lo alimentos. A diferencia de los que
ocurre con los agentes quimioteraputicos, los desinfectantes deben resultar
efectivos frente a una gama amplia de microorganismo, independientemente de su
estado metablico y por otra parte, no necesariamente ser inocuos para las clulas
de husped. La palabra antisepsia se refiere generalmente a la aplicacin tpica de
agentes qumicos en superficies donde se desea destru o inhibir a los
microorganismo patgenos.
Aunque

existen

sustancias

que

son

bactericidas

bacteriostticos,

los

desinfectantes efectivos deben ser necesariamente bactericidas.

Objetivo:
Estudiar la accin bactericida de distintos desinfectantes de uso comn y su
potencia por dilucin.

Materiales:
Cajas de Petri estriles con agar nutritivo.
Disco de papel de filtro.
Pinzas cromadas.
Asa y porta asa.
Incubadora a 30C
Agar nutritivo.
Cultivo de:
1. Staphylococcus aureus.
2. Escherichia coli.
3. Bacillus subtilis.

 Muestras: Cinco marcas diferentes de desinfectantes

Metodologa
Inocule toda la superficie de una placa con una asada de las bacterias
cultivadas.
Introduzca un disco de papel de filtro en cada una de las muestras de
desinfectantes que se encuentran en el laboratorio.
Deje escurrir perfectamente cada disco de papel y colquelos con la ayuda
de una pinza en la placa de Petri inoculada.
Presione el disco para evitar que se desprenda.
Incube en forma invertida a 37C, leer a las 24 hrs.
Reporte la presencia y el tamao del halo de inhibicin que se observa
alrededor de cada uno de los discos.

Prctica N 10.1

Accin letal de las radiaciones ultravioletas

Aunque ciertas longitudes de ondas de la luz visible son benficas e incluso
esenciales para algunas bacterias, la luz del sol es normalmente nociva para la
mayora de las bacterias. Este efecto se debe principalmente a los rayos de la
regin ultravioleta del espectro, en particular a la luz de longitudes de onda entre
240.300NM.
Considerando que el ADN presenta un pico de absorcin de luz en el rango
ultravioleta, especficamente 260 NM y que la radiacin de esta longitud afecta
marcadamente la tasa de mutacin, la transformacin bacteriana, etc., parece que
la radiacin UV acta sobre el material gentico. Especficamente produciendo
Dmeros de Tiamina dentro de la misma cadena de ADN o, a veces, entre
diferentes cadenas de ADN. Las bases absorben la energa de la luz y en estado
excitado se unen con las bases adyacentes, interfiriendo con la correcta replicacin
y funcin de la molcula de ADN. En consecuencia, la clula bacteriana no puede
reproducirse y muere.

Materiales:
Cultivos de Serratia marcescens y Sarcina Lutea.
6 placas de AN.
Lmpara Germicida.

Metodologa.
Rotule ocho placas, dependiendo la distancia y el tiempo de exposicin a la
luz UV.
Coloque una placa inoculada destapada debajo de la lmpara germicida.
Djela durante 30 segundos tape la placa.

 Coloque otra placa debajo de la lmpara y djela durante 1 minuto. Tape la

placa.
Coloque una placa inoculada, pero sin destapara, debajo de la lmpara y
djela durante 1 minuto. Se puede variar este ltimo paso utilizando una
placa destapada pero colocando un papel sobre una parte de la placa.
Suba la lmpara a una altura de 1 metro, repita los pasos 2 y 3 con la
lmpara a esta altura.
Inocule todas las placas a 37 C durante 24 horas.
Observe el crecimiento en cada una de las placas.
Registre sus resultados.

Preguntas a investigar:
1. Cmo se clasifican las bacterias en base a su sensibilidad a agentes
quimicos y fsicos?
2. Explique la importancia y las aplicaciones clinicas e industriales, del control
quimico de los microorganismos
3. Qu es un antibiotico? Qu es un bactericida? Qu es un agente
bacteriosttico?