Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

GCCAFD

Lucas Gonzlez. 2014/15

Mecanismos de transporte y permeabilidad celular

ada clula de tu organismo est rodeada por una membrana plasmtica que la separa del lquido intersticial.
La funcin principal de la membrana plasmtica es
permitir el intercambio selectivo de molculas entre la clula
y el lquido intersticial, de modo que la clula pueda tomar
las sustancias que necesita mientras que elimina las que no
necesita. Entre estas sustancias se incluyen gases, tales como
oxgeno y dixido de carbono, iones y molculas ms
grandes tales como glucosa, aminocidos, cidos grasos y
vitaminas.
Las molculas se mueven a travs de la membrana plasmtica pasiva o activamente. En el transporte activo, las molculas se mueven a travs de la membrana plasmtica consumiendo energa celular (ATP). En el transporte pasivo, las
molculas pasan a travs de la membrana plasmtica sin gasto
de energa. Los ejemplos del transporte pasivo son la difusin
simple, la smosis y la difusin facilitada. La difusin simple
es el movimiento espontneo de molculas a travs de la
bicapa lipdica de una membrana biolgica desde un rea con
una concentracin ms alta hasta otra con una concentracin
ms baja. La smosis es la difusin de agua a travs de una
membrana semipermeable. La difusin facilitada es el movimiento de molculas a travs de una membrana selectivamente permeable con la ayuda de protenas especializadas de
transporte incrustadas dentro de la membrana.
En este ejercicio, simularemos cada uno de estos mecanismos de transporte celular. Comenzaremos examinando la
difusin simple.

Difusin simple
Todas las molculas, sean de slidos, lquidos o gases, estn
en continuo movimiento o vibracin. Si hay un aumento en la
temperatura, las molculas se movern ms rpidamente. Las
molculas que se mueven chocan entre s, cambiando su direccin. As, el movimiento de molculas se dice que es al
azar. Si uno vertiera una gota de colorante lquido alimenticio
en un recipiente grande de agua, las molculas del colorante
se moveran aleatoriamente hasta que su concentracin fuera
igual en todo el recipiente. Las molculas alcanzaran el
equilibrio a travs del proceso de difusin. Definimos la difusin como el movimiento de molculas de un lugar a otro
como resultado de su movimiento trmico al azar. La difusin simple es la difusin a travs de la bicapa lipdica de una
membrana biolgica.
La velocidad a la cual una molcula se mueve a travs de
una membrana depende en parte de la masa, o peso molecular,
de la molcula. Cuanto ms grande es la masa, ms lenta-

Objetivos
1. Entender la funcin de permeabilidad selectiva de
la membrana plasmtica.
2. Poder describir los diversos mecanismos por los
cuales las molculas pueden cruzar pasivamente
la membrana plasmtica.
3. Poder describir los diversos mecanismos por los
cuales las molculas son transportadas activa
mente a travs de la membrana plasmtica.
4. Entender las diferencias entre los mecanismos de
transporte de la membrana con y sin gasto de
energa metablica.
5. Definir transporte pasivo, transporte activo, di
fusin simple, difusin facilitada, smosis,
bomba de solutos, hipotnico, isotnico e hipertnico.

mente difundir la molcula. Normalmente, la velocidad a la

que una sustancia difunde a travs de la membrana puede ser
determinada midiendo la velocidad a la cual su concentracin
en un lado de la membrana se acerca a la concentracin de la
sustancia en el otro lado de la membrana. La magnitud del
movimiento neto a travs de la membrana, o flujo (F), es proporcional a la diferencia de concentracin entre los dos lados
de la membrana (C0 - Ci), a su rea superficial (A) y a su
constante de permeabilidad (kp):
F = kpA(C0 Ci)
Las sustancias no polares difundirn con bastante rapidez a travs de una membrana. La razn es que estas sustancias se disolvern en las regiones no polares de la membrana
regiones que estn ocupadas por cadenas de cidos grasos
de fosfolpidos de membrana. Los gases, tales como el oxgeno y el dixido de carbono, los esteroides y los cidos grasos son las principales molculas no polares que difundirn
rpidamente a travs de una membrana.
Por el contrario, las sustancias polares tienen una solubilidad
mucho ms baja en los fosfolpidos de membrana. Ciertos
compuestos intermediarios del metabolismo, generalmente,
no son capaces de atravesar la membrana, ya que a menudo
estn ionizados y contienen grupos tales como fosfato. As,
una vez producidos en la clula no pueden abandonarla incluso
si sus concentraciones son ms altas dentro que fuera de ella.
De esto podemos concluir que la porcin de la bicapa lipdica
de la membrana plasmtica es la responsable de su selectividad
en cuanto al paso de sustancias a travs de s.

Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

Lucas Gonzlez. 2014/15

Los iones, tales como Na+ y Cl-, tienden a difundir con

bastante rapidez a travs de una membrana. Esto sugiere la
implicacin de un componente proteico de la membrana y, de
hecho, las protenas forman los canales que permiten que estos
iones pasen de un lado de la membrana al otro. Recuerda que
los canales son selectivos. Los que permiten pasar al sodio
generalmente no permitirn el paso a otros iones, tales como el
calcio.
La difusin conducir a un estado en el cual la concentracin de los solutos que difunden es constante en el espacio y
el tiempo. La difusin a travs de una membrana tiende a un
equilibrio donde hay concentraciones iguales de soluto en
ambos lados de la membrana. La velocidad de difusin es
proporcional al rea de la membrana y a la diferencia en la
concentracin del soluto a ambos lados de la misma. La primera ley de Fick de la difusin indica
J = -DA AC/AX
donde
J = velocidad neta de difusin (g o moles/unidad de
tiempo)
D = coeficiente de difusin para el soluto que difunde
A = rea de la membrana

GCCAFD

Ac = diferencia de concentracin a travs de la membrana

Ax = grosor de la membrana

A c t i v i d a d I:

Simulando la difusin simple

Sigue las instrucciones de la seccin Primeros pasos al comienzo de este manual para iniciar PhysioEx 6.0. Del men
principal selecciona el primer ejercicio: Mecanismos de
Transporte y Permeabilidad Celular (Cell Transpon Mechanisms and Permeability). Vers la pantalla de inicio de la
actividad de Difusin Simple (Simple Diffusiori), mostrada
en la Figura 1.1.
En esta actividad simularemos el proceso de la difusin a
travs de la membrana plasmtica. Observa los dos recipientes
de cristal en la parte superior de la pantalla. Llenars cada recipiente con lquido. Imagina que el recipiente de la derecha
representa el interior de una clula, mientras que el de la izquierda representa el fluido extracelular (intersticial). Entre los
dos recipientes hay un contenedor de membranas en el cual
colocars una de las cuatro membranas de dilisis que se

Figura 1.1 Pantalla de inicio del experimento de Difusin simple.

Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

Lucas Gonzlez. 2014/15

encuentran en la parte derecha de la pantalla. Cada una de ellas

tiene un MWCO diferente que significa lmite de peso molecular. Las molculas con un peso molecular inferior a este
valor pueden atravesar la membrana, mientras que las molculas con un peso molecular superior no pueden. Para mover una
membrana al contenedor, pulsa sobre ella, arrstrala al contenedor de membranas y suelta el botn del ratn la membrana se colocar en su lugar entre los dos recipientes.
Debajo de cada uno de los recipientes hay un dosificador
de soluciones. Puedes seleccionar cuntos milimoles (mM)
de los diferentes solutos (Na+/ Cl-, urea, albmina o glucosa)
deseas dosificar en cada recipiente pulsando los botones (+)
o () debajo del nombre de cada soluto. Tambin puedes dosificar agua desionizada en cualquier recipiente pulsando el
botn Agua Desionizada (Deionized Water) debajo del recipiente que desees llenar. Pulsando los botones de Dosificar
(Dispense) debajo de cada recipiente se llenarn los recipientes con lquido. Pulsando los botones Limpiar (Flush) debajo de cada recipiente stos se vaciarn.
En la parte inferior de la pantalla hay un mdulo de registro de datos. Despus de cada experimento debes guardar
tus datos pulsando el botn Guardar Datos (Record Data).
Si deseas borrar los datos de cualquier experimento, simplemente resalta la lnea de datos que deseas suprimir y pulsa
Borrar Experimento (Delete Run). Tambin puedes imprimir
tus datos pulsando Herramientas (Tools) (en la parte superior
de la pantalla) y despus seleccionando Imprimir Datos
(Print Data).
1. Con el ratn pulsa sobre la membrana de dilisis con el
MWCO de 20 y arrstrala al contenedor de membranas.
2. Ajusta la concentracin de Na+/ Cl- del recipiente de la
izquierda a 9 mM pulsando el botn (+). Pulsa entonces el
botn de Dosificar (Dispense) debajo del recipiente de la izquierda para que se llene.
3. Pulsa el botn Agua Desionizada (Deionized Water) de
bajo del recipiente de la derecha y pulsa Dosificar (Dispense)
debajo del mismo recipiente para que se llene.
4. Fija el Temporizador (Timer) a 60 minutos pulsando el
botn ( + ) junto al indicador de tiempo (que estar comprimido en 60 segundos.)
5. Pulsa el botn Iniciar (Start) para comenzar el experimento. Observa que el contenedor de membranas desciende
al interior del equipo. Observa tambin que el botn Iniciar
(Start) cambia ahora a un botn de Pausa (Pause), que puedes pulsar para interrumpir el experimento.
6. Cuando el indicador de Tiempo Transcurrido (Elapsed
Time) llega a 60, fjate en las lecturas de concentracin de
cada uno de los recipientes en los indicadores situados junto
a cada uno de ellos.
7. Una vez que el indicador de Tiempo Transcurrido (Elapsed Time) ha llegado a 60, vers aparecer una caja de dilogo
indicando si se ha alcanzado o no el equilibrio.
8. Pulsa Guardar Datos (Record Data) para guardar los
datos de este experiemento.
9. Pulsa los botones Limpiar (Flush) de ambos lados, izquierdo y derecho, para vaciar los recipientes.
10. Devuelve la membrana de dilisis a su lugar inicial pulsando sobre ella y arrastrndola al contenedor de membranas.

GCCAFD

11. Ahora, repite los pasos 1-10 con cada una de las restantes
membranas de dilisis. Asegrate de guardar los datos de
cada uno de los experimentos. Despus de cada experimento,
limpia cada uno de los recipientes y devuelve la membrana de
dilisis a su lugar.
Aydate de la Tabla Peridica de elementos de la pg. 4 de
este libro.
Cul es el peso molecular del Na+? ________
Cul es el peso molecular del Cl-? ________
Qu lmite (MWCO) de membrana de dilisis permiti el
paso de ambos iones? _______
12. Repite este experimento usando cada uno de los solutos
restantes (urea, albmina y glucosa) en el recipiente de la izquierda y agua desionizada en el recipiente de la derecha.
Asegrate de pulsar Guardar Datos (Record Data), limpiar
ambos recipientes y sustituir la membrana de dilisis despus
de cada experimento. Pulsa Herramientas (Tools) > Imprimir Datos (Print Data) para imprimir tus datos.
13. Completa la siguiente tabla con tus resultados.

Tabla 1 Se produjo difusin?

Membrana (MWCO)
Soluto

20

50

100

200

NaCI
Urea
Albmina
Glucosa
Qu materiales difundieron del recipiente de la izquierda al
recipiente de la derecha?

Cules no difundieron?

Por qu?

Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

Lucas Gonzlez. 2014/15

GCCAFD

Tabla Peridica de elementos

Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

Lucas Gonzlez. 2014/15

A c t i v i d a d 2:

Simulando la dilisis
Ahora, vamos simular un experimento en la mquina de dilisis. Estas mquinas se utilizan en los pacientes que han perdido la funcin renal. La urea, un producto de degradacin de
los aminocidos, debe eliminarse de la sangre del paciente o
llegar a ser txica para el organismo causando su muerte.
Las mquinas de dilisis toman la sangre del paciente y la pasan a travs de una membrana selectivamente permeable para
eliminar la urea de la sangre. En un lado de la membrana est
la sangre del paciente; en el otro estn las soluciones seleccionados cuidadosamente para mimetizar las concentraciones
de sustancias tales como Na+, K+, Ca++ y HCO3- que se
encuentran en el organismo. Para simular este proceso:
1. Coloca la membrana de dilisis de 200 MWCO en el
contenedor de membranas.
2. Ajusta el recipiente de la izquierda a 10 mM para cada
uno de los cuatro solutos y dosifica. Este recipiente representar la sangre del paciente sometido a dilisis.
3. Ajusta el recipiente de la derecha de la misma manera,
con excepcin de la urea que se ajusta a 0 mM es decir, el
recipiente de la derecha no contendr urea.
4. Ajusta el Temporizador (Timer) a 60 minutos, despus
pulsa Iniciar (Start) y espera a que se complete el experimento.
Qu sucede con la concentracin de urea en el recipiente de
la izquierda (el paciente)?

Por qu ocurre esto?

GCCAFD

las y el movimiento sin difusin de iones a travs de una

membrana est mediado por protenas integrales conocidas
como transportadores. Los transportadores estn incrustados dentro de la membrana plasmtica y experimentan un
cambio conformacional que permite que se produzca el transporte. Primero, se une una molcula al sitio receptor de un
transportador. Cuando est unida, el transportador cambia de
conformacin de modo que el sitio de unin se mueve de un
lado de la membrana al otro. Entonces, la molcula se disocia
del transportador y se libera en el otro lado de la membrana.
Este tipo de transporte se denomina difusin facilitada. Se
considera una forma de transporte pasivo porque no se consume energa celular en el proceso.
El trmino difusin facilitada es un poco engaoso
puesto que el proceso realmente no implica difusin (que,
como recordars, es el movimiento de molculas de un lugar a
otro siguiendo un gradiente de concentracin, como resultado
del movimiento trmico al azar). En la difusin facilitada las
molculas tambin se mueven de un lugar a otro siguiendo un
gradiente de concentracin, pero son las protenas
transportadoras las que dan lugar a este movimiento no el
movimiento trmico al azar. Los resultados finales de la difusin y de la difusin facilitada son los mismos. El flujo neto
se produce de un rea de alta concentracin a otra de baja
concentracin hasta que estas se igualan a ambos lados de la
membrana.
Entre los sistemas de difusin facilitada ms importantes
del organismo estn los que mueven la glucosa a travs de la
membrana. Sin los transportadores, esta molcula polar relativamente grande nunca podra pasar a la clula. Sin embargo, el nmero de protenas de transporte en una membrana
celular dada es finito, de forma que solo cierta cantidad de
glucosa puede transportarse por unidad de tiempo. El transporte de glucosa dentro de la clula es especialmente interesante, ya que es convertida a glucosa-6-fosfato tan pronto
como se incorpora a la clula, de modo que siempre hay una
baja concentracin de glucosa en su interior, lo que favorece
el transporte hacia el interior celular.

Actividad

3:

Difusin facilitada
Normalmente, las mquinas de dilisis se ajustan de forma que
la sangre se somete dos veces a difusin y la urea se reduce un
75% en vez del 50%. Adems se extrae el exceso de agua del
paciente, que no tiene ninguna otra manera de eliminar el exceso de lquido. Los pacientes sometidos a dilisis necesitan
hacerse pruebas analticas para asegurarse de que las concentraciones de iones se mantienen en los niveles normales.

Difusin facilitada
La difusin simple solo considera para el transporte a travs
de la membrana algunos iones, pero no todos. Algunas molculas, que son demasiado polares para difundir, pueden
conseguir atravesar la bicapa lipdica de la membrana plasmtica. Igualmente, algunas molculas que son demasiado
grandes para pasar a travs de los canales proteicos consiguen cruzar la membrana. Cmo? El paso de tales molcu-

Usando el ratn, pulsa Experimento (Experiment) en la parte

superior de la pantalla. Aparecer un men desplegable. Selecciona Difusin Facilitada (Facilited Diffusion). Aparecer una nueva pantalla (Figura 1.2). Notars dos cambios
fundamentales respecto a la primera pantalla. Primero, en lugar de las membranas de dilisis a la derecha de la pantalla,
ahora hay un Constructor de Membranas (Membrane Builder). Ser utilizado para fabricar membranas que transportarn las molculas de un recipiente a otro. El segundo cambio es que, en este experimento, trabajaremos solamente con
glucosa, Na+ y Cl-.
1. Observa que el indicador de Transportadores de Glu
cosa (Glucose Carriers) en este momento est fijado a 500.
Pulsa Construir Membrana (Build Membrane) para crear
una membrana con 500 transportadores.
2. Pulsa y arrastra esta membrana al contenedor de membranas situado entre los dos recipientes.

Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

Lucas Gonzlez. 2014/15

Figura 1.2

GCCAFD

Pantalla de inicio del experimento de Difusin facilitada.

3. En el recipiente de la izquierda fija el Na+/ Cl- a 9 mM y

la glucosa a 9 mM pulsando los botones ( + ) correspondientes. Entonces pulsa Dosificar (Dispense) para llenar el recipiente de la izquierda.
4. En el recipiente de la derecha pulsa el botn Agua Desionizada (Deionized Water) debajo del mismo y despus
Dosificar (Dispense).

10. Construye una membrana con 900 transportadores de

glucosa y repite este experimento.
11. Para comparar, disminuye la concentracin de glucosa
a 3 mM y repite los pasos 1-10 del experimento. Guarda tus
resultados despus de cada experimento pulsando Guardar
Datos (Record Data) y completa la Tabla 2.

5. Fija el Temporizador (Timer) a 60 minutos y pulsa Iniciar (Start).

6. Deja que termine experimento. Cuando el indicador de
Tiempo Transcurrido (Elapsed Time) llega a 60, pulsa Guardar Datos (Record Data) para guardar tus datos. Anota tam
bin tus datos en la Tabla 2.
1. Pulsa el botn Limpiar (Flush) debajo de cada recipiente para vaciarlos y devuelve la membrana al constructor
de membranas.
8. Construye una nueva membrana con 300 transportadores
de glucosa y repite este experimento. Asegrate de guardar
tus resultados, limpiar los recipientes y reemplazar la membrana despus de cada experimento.

Tabla 2 Resultados de Difusin facilitada

Concentracin N. de protenas
transportadas de
de glucosa
glucosa
(mM)
300
500
700
3
9

9. Construye una membrana con 700 transportadores de

glucosa y repite este experimento.

Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

Lucas Gonzlez. 2014/15

A una concentracin dada de glucosa, cmo vara el tiempo

necesario para alcanzar el equilibrio en funcin del nmero
de transportadores empleados para construir la membrana?

Vara la velocidad de difusin del Na+/ Cl- con el nmero de

receptores?

Cul es el mecanismo de transporte del Na+/Cl-?

Si pones la misma cantidad de glucosa en el recipiente de la

derecha y en el de la izquierda, se observara difusin?

El hecho de no observar difusin, significa necesariamente

que no est ocurriendo la difusin?

GCCAFD

compartimento a otro aumentar la cantidad de agua en el segundo. Si los lmites del recipiente no pueden ampliarse, la
presin dentro del segundo recipiente aumentar, impidiendo
la entrada adicional de agua. La presin que necesita ser aplicada al segundo recipiente para impedir la entrada adicional
de agua desde el primero se denomina presin osmtica. La
presin osmtica es otra caracterstica que depende de la concentracin de agua de la solucin.
Si las soluciones en los recipientes tienen la misma concentracin de solutos que no atraviesan de un lado a otro de la
membrana, las dos soluciones se dice que son isotnicas (iso
= iguales). Los solutos que atraviesan la membrana no contribuyen a la tonicidad de una solucin ya que pasan de un lado
a otro de la membrana sin problemas. Cuando se comparan dos
soluciones y una tiene una concentracin ms baja de solutos,
esa solucin se dice que es hipotnica (hipo = menos). La otra
solucin, la que tiene la concentracin ms alta, se dice que es
hipertnica (hiper = ms). Esto es importante al hablar de clulas. Si una clula es hipertnica con respecto a su medio circundante, el agua fluir a su interior para diluir la solucin hipertnica. A menudo entra tanta agua que la clula estalla.

A c t i v i d a d 4:

smosis

smosis
Una membrana semipermeable es una membrana que es permeable al agua pero no a los solutos. La smosis se define
como el flujo de agua a travs de una membrana semipermeable desde un rea con una mayor concentracin de agua (una
concentracin ms baja de solutos) hasta otra con una menor
concentracin de agua (una concentracin ms alta de solutos). Cuanto mayor es la concentracin de solutos, menor es
la concentracin de agua. La smosis se define tambin como
una propiedad coligativa porque depende de la concentracin del soluto ms que de sus propiedades qumicas. El agua
es una pequea molcula polar que difunde muy rpidamente a
travs de las membranas celulares. Debido a su naturaleza
polar, es de esperar que el agua no penetre en las regiones lipdicas no polares de la membrana celular. Protenas de
membrana, denominadas acuaporinas, forman canales a travs de los cuales puede difundir el agua. La concentracin de
estas acuaporinas vara con el tipo de tejido.
Es esencial entender que el grado hasta el cual disminuye
la concentracin de agua por la adicin de solutos depende del
nmero de las partculas de soluto agregadas. Por ejemplo, 1
mol de glucosa disminuye la concentracin de agua aproximadamente lo mismo que una solucin de 1 mol de aminocido o
1 mol de urea. Una molcula que se ioniza disminuye la concentracin de agua en proporcin al nmero de iones que se
forman. Por lo tanto, una solucin de 1 mol de Na+/Cl- produce una solucin de Na+ de 1 mol ms una solucin de Cl- de
1 mol. Por tanto, bsicamente es una solucin de 2 moles.
Dos recipientes separados por una membrana de dilisis
(tales como con los que hemos estado trabajando) no son infinitamente distensibles. La transferencia de agua desde un

Pulsa Experimento (Experiment) en la parte superior de la

pantalla y selecciona smosis. Aparecer una nueva pantalla
(Figura 1.3). Esta es similar a la que vimos para el experimento de Difusin Simple (Simple Diffusion). El principal
cambio es que en la parte superior de cada recipiente hay un
indicador de presin, que veremos durante el transcurso de
los experimentos.
1. Arrastra una membrana de 20 MWCO y colcala entre
los dos recipientes.
2. Fija la concentracin de Na+/ Cl- del recipiente de la izquierda a 9 mM y pulsa Dosificar (Dispense).
3. Llena el recipiente de la derecha con Agua Desionizada
(Deionized Water) y pulsa Dosificar (Dispense).
4. Fija el Temporizador (Timer) a 60 minutos.
5. Pulsa Iniciar (Start) y deja que transcurra el experi
mento. Presta atencin a los indicadores de presin (Pressure) en la parte superior de cada recipiente.
6. Una vez detenido el Tiempo Transcurrido (Elapsed
Time) pulsa Guardar Datos (Record Data). Anota tambin
los datos en la Tabla 3 de la pg. 8.
7. Pulsa Limpiar (Flush) debajo de ambos recipientes para
vaciarlos.
8. Devuelve la membrana a su lugar original.
9. Repite el experimento usando las tres membranas restan
tes. Asegrate de guardar todos tus datos y limpiar los recipientes entre cada experimento.
Observaste cambios de presin durante este experimento? Si
es as en qu recipiente(s) y con qu membranas?

Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

Lucas Gonzlez. 2014/15

GCCAFD

Figura 1.3 Pantalla de inicio del experimento de smosis.

Por qu?

Difundieron el Na+ / Cl- desde el recipiente de la izquierda

al de la derecha? Si es as, con qu membrana(s)?

10. Repite el experimento usando primero albmina 9 mM

en el recipiente de la izquierda y despus glucosa 9 mM.
Pulsa Guardar Datos (Record Data) despus de cada experimento; anota tambin tus datos en la Tabla 3.

Tabla 3 Resultados de smosis

(presin en mm Hg)
Membrana ( MWCO)

Soluto
Por qu?

20

50

100

200

Na+/CIAlbmina
Glucosa

Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

Lucas Gonzlez. 2014/15

11. Pulsa Herramientas (Tools) -Imprimir Datos (Print

Data) para imprimir tus datos.
Explica la relacin entre la concentracin de solutos y la presin osmtica.

La difusin permite que se genere presin osmtica?

Se generara presin si las concentraciones de solutos fueran

iguales a ambos lados de la membrana?

Por qu o por qu no?

Se generara presin si tuvieras glucosa 9 mM en un lado de

la membrana de 200 MWCO y NaCl 9 mM en el otro lado?
Si es as, qu solucin generara la presin?

Se generara presin si tuvieras albmina 9 mM en un lado

de la membrana de 200 MWCO y NaCl 9 mM en el otro
lado? Si es as, qu solucin generara la presin?

anteriores (Figura 1.4). Observa los dos recipientes situados

en el lado izquierdo de la pantalla, uno encima del otro. Observa tambin que el recipiente superior contiene un indicador de presin. A diferencia del experimento de smosis, en
el cual el indicador de presin meda la presin desarrollada
debido al movimiento del agua, este indicador de presin
mide la presin hidrosttica que filtrar el lquido del recipiente superior al recipiente inferior. Finalmente, observa el
mdulo de Anlisis de Residuos de Membrana (Membrana
Residue Anlisis). ste se utilizar para detectar si queda algn soluto en la membrana despus de cada experimento.
1. Pulsa y arrastra la membrana de 20 MWCO al contenedor de membranas situado entre los dos recipientes.
2. Fija el Na + /Cl - a 9 mM, la urea (Urea) y la glucosa
(Glucose) a 5 mM y el carbn vegetal en polvo (Powdered
Charcoal) a 5 mg/ml pulsando el botn (+) junto a cada soluto. Entonces pulsa Dosificar (Dispense) para verterlo en el
recipiente superior.
3. Deja la presin en 50 mm Hg y el Temporizador (Timer)
en 60 minutos, los ajustes por defecto. Pulsa Iniciar (Start).
Vers como el lquido es filtrado al recipiente inferior.
4. Mira el mdulo Unidad de Anlisis del Filtrado al lado
del recipiente inferior para cualquier actividad. Ello te indicar qu solutos estn pasando a travs de la membrana.
5. Cuando hayan pasado los 60 minutos, arrastra la membrana al mdulo de Anlisis de Residuos de Membrana
(Membrana Residue Analysis) y suelta el ratn. La membrana
se colocar en su lugar. Pulsa Iniciar Anlisis (Start Analysis). En el mdulo de datos inferior, vers qu soluto(s) fueron detectados en la membrana usada para la filtracin.
6. Guarda tus datos pulsando Guardar Datos (Record
Data).

Filtracin
A la vez que la difusin permite que las clulas tomen oxgeno y alimentos mientras eliminan el dixido de carbono y
los desechos metablicos, tambin est ocurriendo otro proceso. Este proceso se produce principalmente en los capilares
del organismo (tales como los renales) donde la presin del
fluido sanguneo denominada presin hidrosttica fuerza
a los materiales a atravesar la pared capilar. Tanto la sangre
como el fluido intersticial contienen solutos disueltos. Generalmente, la presin osmtica del fluido intersticial no es tan
grande como la presin hidrosttica de la sangre, por lo que
hay un movimiento neto de fluidos y/o solutos hacia fuera de
los capilares un proceso denominado filtracin. Lo que se
filtra hacia fuera depende solamente del tamao molecular
del soluto y del tamao de los poros de la membrana. La
filtracin se considera un proceso pasivo, puesto que ocurre
sin gasto de energa metablica.
Actividad

GCCAFD

5:

Filtracin
Pulsa Experimento (Experiment) en la parte superior de la
pantalla y selecciona Filtracin (Filtration). Vers una pantalla de inicio bastante diferente a las de las actividades

Cules fueron los resultados del anlisis inicial de la membrana?

7. Pulsa Limpiar (Flush) y devuelve la membrana a su lu

gar original.
8. Arrastra la membrana de 50 MWCO al contenedor de
membranas situado entre los dos recipientes.
9. Mantn la presin en 50 y repite el experimento. Cuando
el Temporizador (Timer) haya alcanzado los 60 minutos, realiza un anlisis de la membrana y pulsa Guardar Datos (Re
cord Data).
10. Pulsa Limpiar (Flush) y devuelve la membrana a su
lugar.
11. Repite los pasos 8-10 con las dos membranas restantes.
Asegrate de guardar tus datos para cada experimento.
12. Aumenta la presin a 100 mm Hg y repite el experimento completo. Una vez ms, guarda todos los datos experimentales.
.

Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

Lucas Gonzlez. 2014/15

Figura 1.4

GCCAFD

Pantalla de inicio del experimento de Filtracin.

Afecta el lmite de la membrana (MWCO) a la velocidad de

filtracin (Fltration Rate)?

Afecta la presin aplicada a la velocidad de filtracin (Filtration Rate)?

Pasaron todos los solutos a travs de todas las membranas?

Si no, cul o cules no lo hicieron?

Cmo puede el organismo aumentar selectivamente la velocidad de filtracin (Filtration Rate) de un rgano o sistema dado?

Transporte Activo
El transporte activo difiere del transporte pasivo en que se
utiliza energa metablica para mover solutos a travs de la
membrana. Tambin se diferencia en que los solutos se mueven desde un rea de menor concentracin a otra de mayor
concentracin al contrario de lo que ocurre en la difusin
facilitada. Como en la difusin facilitada, se requiere la unin
de una sustancia a un transportador. Puesto que la sustancia
unida se est moviendo cuesta arriba hasta un rea de
mayor concentracin, los transportadores se denominan, a

Por qu?

10

Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

Lucas Gonzlez. 2014/15

menudo, bombas. El movimiento neto desde una concentracin menor a otra mayor y el mantenimiento de una concentracin elevada estable en un lado de la membrana solo puede
alcanzarse mediante la aportacin continua de energa al mecanismo de transporte activo. El aporte de energa puede alterar
la afinidad del lugar de unin del transportador de modo que
haya una afinidad ms alta a un lado que al otro, o la energa
puede alterar la velocidad a la que el transportador mueve el
sitio de unin de un lado de la membrana al otro. Como en
la difusin facilitada, el nmero de las molculas
transportadoras por la clula es finito.
La energa para el transporte activo deriva del metabolismo celular. La inhibicin del ATP bloquea el mecanismo
de transporte activo. Para que los solutos se muevan desde un
rea de menor concentracin a otra de mayor concentracin,
el transporte debe estar acoplado con el flujo de energa desde
un nivel energtico mayor hasta otro menor. Si el ATP se utiliza directamente en el transporte, el mecanismo de transporte se conoce como transporte activo primario.
La energa se produce mediante la hidrlisis de ATP por un
transportador que es un ATPasa que cataliza la rotura del ATP
y su autofosforilacin. Esta fosforilacin del transportador

GCCAFD

alterar la afinidad del sitio de unin o bien la velocidad del

cambio conformacional. Se han identificado cuatro protenas
de transporte activo primario. En todas las membranas plasmticas hay una sodio-potasio ATPasa, responsable del flujo
hacia el exterior de sodio y del flujo hacia el interior de potasio. El sodio es el principal ion encontrado en el fluido extracelular, mientras que el potasio es ms abundante en el interior de las clulas. Otras protenas de transporte estn
implicadas en el transporte de calcio, transporte de hidrgeno
y en el transporte de hidrgeno-potasio.
A c t i v i d a d 6:
Transporte activo
Pulsa Experimento (Experiment) en la parte superior de la
pantalla y selecciona Transporte Activo (Active Transport).
Aparecer una nueva pantalla que se asemeja a la pantalla de
la difusin facilitada (Figura 1.5). El principal cambio es la
adicin de un dosificador de ATP encima de los recipientes.
Recuerda que, puesto que el ATP es necesario para que el sistema funcione, debe ser agregado en cada experimento.

Fgura 1.5 Pantalla de inicio del experimento de Transporte activo.

11

Prcticas de Fisiologa del Ejercicio-I

Lucas Gonzlez. 2014/15

1. Asegrate que en el Constructor de Membranas (Membrane Builder) el nmero de transportadores de glucosa est
fijado en 500 y el nmero de bombas Na+/K+ tambin est fijado en 500.
2.

Pulsa Construir Membrana (Build Membrane).

3. Arrastra la membrana construida al contenedor de

membranas situado entre los dos recipientes.

GCCAFD

Ahora que has realizado el experimento bsico, vamos a llevar a cabo dos variaciones.
12. Repite el experimento sin incrementar la cantidad de
ATP aadida al sistema.
Vara la cantidad de NaCl/KCl transportados?

4. En el recipiente de la izquierda, fija a 9 mM el

Na+/ Cl- pulsando el botn ( + ) y pulsa Dosificar (Dispense).
5. En el recipiente de la derecha, pulsa Agua Desionizada
(Deionized Water) y despus Dosificar (Dispense).

13. Repite el experimento sin cambiar el nmero de transportadores y bombas cuando construyas la membrana.

6. Fija el ATP a 1 mM y despus pulsa Dosificar ATP (Dispense ATP).

La cantidad de solutos transportada a travs de la membrana

vara con el aumento de transportadores o de bombas?

1. Asegrate de que el Temporizador (Timer) est fijado a

60 minutos y pulsa Iniciar (Start).
Al final de este experimento, se movieron el Na+/Cl- desde el
recipiente de la izquierda al recipiente de la derecha?

Por qu?

8.

Algn soluto se ve ms afectado que otro?

La membrana que has construido, permite la difusin

simple?

Pulsa Limpiar (Flush) debajo de ambos recipientes.

9. Aade 9 mM de Na+/ Cl- al recipiente de la izquierda y

9 mM de KC1 al recipiente de la derecha. Pulsa Dosificar
(Dispense).

Si colocaras NaCl 9 mM en un lado de la membrana y 15 mM

en el otro, habra movimiento del NaCl?

10. Fija el ATP a 1 mM, pulsa Dosificar ATP (Dispense

ATP) y despus Iniciar (Start).
11. Al final del experimento pulsa Guardar Datos (Record
Data).
A medida que el experimento progresa, las concentraciones
de los solutos cambiarn en las ventanas situadas al lado de
los recipientes. La velocidad disminuir notablemente, para
pararse antes de completarse el experimento. Por qu?

Por qu?

Produce alguna diferencia la cantidad de ATP agregada?

12