En el laboratorio de Bioquimica y Biologa molecular se estudia el efecto de las protenas

virales V, I y SH sobre diferentes genes implicados en autofagia y apoptosis en el modelo de

estudio; la levadura de fisin S. pombe, ya que se ha relacionado el efecto de estas protenas
con modificaciones en dichos procesos.
Dado que la apoptosis es un mecanismo fisiolgico de muerte celular necesario para
mantener la plasticidad del organismo y as eliminar las clulas inservibles o peligrosas, los
virus han utilizado diversos mecanismos para evadir la respuesta de la clula al identificar su
agresin. La familia Paramyxoviridae, se compone de una amplia gama de virus los cuales,
han desarrollado estrategias para evadir el estado antiviral estimulado por IFN a travs de la
expresin de protenas que antagonizan algunos componentes de esta va de sealizacin; tal
es el caso de la protena V de paramyxovirus (1). La activacin de la va de JAK-STAT por
IFN, activa simultneamente otros procesos regulados por IFN tal como la apoptosis. As el
virus de la parotiditis expresa la protena V, la cual bloquea la expresin de genes virales
activado por IFN travs de la interaccin con STAT1-STAT2, lo cual le es til para comenzar
su replicacin con el uso de la maquinaria celular sin respuesta apopttica. Un proceso similar
ocurre con la protena pequea hidrofbica (SH) de Metapneumovirus (hMPV) la cual inhibe
de manera significativa la fostorilacin y sealizacin de STAT1, sealando el papel de esta
protena en la regulacin a la baja de la sealizacin de IFN (2,3). Por otro lado, se ha
identificado a la protena SH de Paramixovirus 5 del simio (SV5), necesaria para bloquear la
sealizacin ro arriba de la activacin de las caspasas, mecanismo por el cual interfiere con
la va apopttica, ya que se ha observado que al infectar lneas celulares con un plsmido
recombinante que contiene una delecin del gen SH, las clulas exhiben un aumento de
efecto citoptico (CPE) en comparacin con clulas infectadas con el tipo salvaje,
confirmando que las clulas infectadas con el plsmido que contiene el gen deletado se
someten a un mayor grado de apoptosis que las clulas infectadas por el tipo salvaje (4,5).
Asimismo, en la protena SH del virus de parotiditis (MuV), al eliminar 156 nucletidos del
ORF del gen SH y probar su funcin en clulas infectadas con respecto al tipo salvaje, se
induce casi 4 veces una mayor tasa de apoptosis, adems del incremento de TNF- en las
clulas infectadas con el gen truncado, indicativo de que la protena SH podra bloquear la
sealizacin mediada por TNF- (6). En el laboratorio se busca insertar estas protenas en el

genoma de la levadura mediante tcnicas moleculares y determinar su efecto en

estos

procesos.
Las caspasas son protenas de una familia de cisten proteasas, las cuales son el componente
central y clave en la transduccin y ejecucin de la seal apopttica inducida por una
diversidad de estmulos, por lo cual se estudia y monitorea el proceso de apoptosis en
levadura, a travs de la metacaspasa I Pcal de S. pombe con un peso de 46,6 kDa y 425
aminocidos la cual es ortloga a las principales caspasas de la apoptosis en humanos (7,8).
Se ha visto ya que las protenas virales pueden modular la apoptosis a travs de diferentes
mecanismos. Un proceso relacionado estrechamente con la apoptosis es la autofagia;
realizado por las clulas eucariontes y que, en general, ayuda a las clulas a eliminar
protenas de vida media larga y organelos daados para asegurar la supervivencia celular. Sin
embargo, en determinadas ocasiones en las que se acumula gran cantidad de estrs
oxidativo, la maquinaria de autofagia no es capaz de hacer frente al dao ocasionado y la
clula inicia la apoptosis (9). Durante el envejecimiento, la eficiencia de la autofagia disminuye
y su regulacin se altera, siendo sta la causa de que se acumulen macromolculas y
organelos daados, que a su vez provocan la disminucin de diversas vas catablicas,
siendo esto objeto de estudio de diferentes genes implicados en autofagia. El gen Atg4 es una
proteasa de cistena con una funcin esencial en la formacin del autofagosoma. Acta junto
con Atg8 activndola proteolticamente, para la posterior conjugacin del Atg8 con
fosfatidiletanolamina unida a la membrana (PE), y esencial para la terminacin del
autofagosoma. Tambin se requiere para la desconjugacin de PE de la Gly C-terminal de
Atg8-PE. Esta actividad desconjugante de Atg4, juega un papel importante en la regulacin de
la autofagia, permitiendo el reciclado de Atg8 (10). Otro gen importante en la autofagia es el
Atg17 ya que su ausencia compromete la localizacin de otras protenas Atg del ncleo al sitio
de ensamblaje de fagforo (PAS) unindose constitutivamente a dos protenas de menor
tamao; Atg29 y Atg31 (11,12). La expresin de estas protenas vara durante el
envejecimiento celular y muy probablemente, al insertar protenas virales se comprobar el
importante papel que juegan la autofagia y la apoptosis al alterarse los mecanismos de
regulacin en el envejecimiento cronolgico de la levadura.

1.
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