BENEMRITA UNIVERSIDAD

AUTNOMA DE PUEBLA
Facultad de Ciencias Qumicas
Licenciatura en Qumico Farmacobilogo
Departamento de Microbiologa

PRCTICA No. 1
Observacin de grupos microbianos.

Equipo no. 1
De la Fuente Dieguez Adriana Abril
Lara Rosales Erika Carolina

M.S.P Mara de la Cruz Meneses Snchez

INTRODUCCION
La palabra microscopio deriva de las races griegas Micro pequeo y Skopein
observar. Desde tiempos muy remotos, en la ciudad de Minie ya usaban un cristal de
roca que agrandaba los objetos para mirarlos. Posteriormente se combinaron una lente
detrs de otra que aumenta mas la imagen.
Se dice que el iniciador del microscopio compuesto fue el Holands Antoni Van
Leewenhoek (1632-1723) ya que en base al tallado de ellos pudo observar como se
ampliaban imgenes de pequeos organismos y aprovechando la aptitud que tenia
para el dibujo presento estructuras y formas de las que se observaban.
Con esto demostr que haba un mundo hasta entonces desconocido as comprob que
las que no se reproducan por generacin espontanea, si no por el deposito de
huevecillos, en un lugar determinado.
En base a dichos trabajos la Real Sociedad Cientfica de Inglaterra se interesa por sus
observaciones e inician un estudio mas activo en la elaboracin y perfeccionamiento
del microscopio, por lo tanto este instrumento ha permitido observar objetos no
perceptibles a simple vista y ello se consigue mediante un sistema ptico compuesto
por lentes de cristal que al ser atravesadas por la imagen del objeto se amplifican.

Simple

Lupa, Lupa con diseccin

Tipos de Microscopios
campo oscuro,

Electrnico, fontico,

Compuesto

Fluorescencia

Partes de un microscopio

Revolver
Tornillo micromtrico
Mecanica

Tornillo Macromtrico
Platina
Soporte o Pie

, Contraste de Fases.

Brazo

Fuentes de luz
Luminosa

Natural o espejo, artificial o foco

Diafragma
Condensador

Microscopio Simple.
Consta de una sola lente convergente, conocida como lupa, su capacidad
amplificadora es muy reducida.
Microscopio Compuesto.
Supera extraordinariamente al anterior ya que consta bsicamente de dos
sistemas de lentes una de ellas amplifica la imagen del objeto observado, que
es capturado y nuevamente amplificado por el segundo sistema,
consiguindose con esto, un mayor poder de resolucin.
Microscopio de contraste de Fases.
Es utilizado para el estudio de elementos transparentes no coloreados, y lo mas
importante es que permite el estudio y la observacin de organismos vivos. Este
tipo de microscopio al varias los contrastes de la imagen logra que se utilicen
las diferencias de absorcin de marcha de los rayos luminosos del sistema
ptico.
Microscopio de Campo Oscuro
Es til para la observacin de organismos refrigerantes podemos lograrlo
fcilmente cerrando completamente el diagrama en un microscopio ptico. Es
til para la observacin de treponema pallidum, es muestra fresca ya que
pueden observarse perfectamente los contornos del organismo.
Microscopio Electrnico.
Su funcionamientos es muy parecido con el microscopio ptico y bsicamente
es que las diferencias son que la fuente de luz en este caso es una haz de
electrones que sale de un ctodo a diferencia del ptico, en un lugar de lentes,
utilizaremos imgenes para desviar el haz de electrones y lo que se quiere tener
es una imagen amplificada.

OBJETIVO.

Realizar una tincin simple de bacterias procedentes de distintas muestras

naturales.
Realizar dos tipos de fijaciones bacterianas y saber en qu casos se recomienda
una u otra.
Practicar con el microscopio al mximo aumento y con el correcto empleo del
aceite de inmersin.

CONCLUSIONES.
La observacin de microorganimos con microscopa ptica, en un laboratorio de
Microbiologa, puede realizarse por diferentes procedimientos como son la observacin
directa de microorganismos in vivo o el tratamiento con colorantes mediante tincin
positiva y negativa, procesos dirigidos a incrementar el contraste y por consiguiente a
optimizar el resultado
Familiarizarnos con las diferentes tcnicas que nos permiten la observacin de grupos
microbianos fue uno de los objetivos ms importantes en esta prctica, ya que, en las
siguientes prcticas nos facilitara el trabajo.
CUESTIONARIO.
1.- Qu tipos de microscopio existen, en que se fundamenta cada uno de ellos y cul
es su utilidad?
Microscopio Compuesto: Es el microscopio ms comn. Se utiliza para aumentar las
imgenes de objetos que no son visibles a simple vista. Su mtodo de iluminacin es
luz visible y por lo tanto el aumento es limitado; adems que tambin se usa para ver
objetos transparentes o cortados en lminas muy finas que la luz puede pasar a travs
de ellos

Microscopio estereoscpico: Hace posible la visin tridimensional de los objetos, y

para lograrlo utiliza dos oculares (los que estn cerca del ojo) y dos objetivos (los que
se encuentran cerca de la muestra). Se utiliza para objetos relativamente grandes, por
lo que requiere pequeos aumentos, generalmente de 4X y 40X a 60X. Es muy til en
botnica, mineraloga, medicina, investigacin y en aplicaciones en donde se requiera
modificar el objeto observado, como por ejemplo disecciones.
Como ya mencionamos, para poder ver la imagen de forma tridimensional es necesario
observar con los dos ojos pero con ngulos ligeramente distintos; por lo que es muy
importante que este microscopio no se confunda con un microscopio compuesto
binocular, en cuyo caso tiene dos oculares para hacer ms cmoda la observacin.

Microscopio de campo oscuro: En este microscopio los rayos de luz no penetran

directamente en el objeto, si no que se ilumina de forma oblicua, de esta forma el
objeto iluminado dispersa la luz y se hace visible contra el fondo oscuro. Se utiliza para
analizar elementos biolgicos transparentes y sin pigmentar, imposibles de ver con luz
natural. Para lograr esto, el equipo cuenta con un condensador que ilumina el objeto
con una luz intensa pero de forma indirecta.

Microscopio de fluorescencia: La fluorescencia es la propiedad que tienen algunas

sustancias de emitir luz propia cuando inciden sobre ellas radiaciones energticas, es
decir que el objeto es iluminado con rayos de una determinada longitud de onda, las
molculas la absorben y remiten luz con una longitud de onda mayor; para una
correcta observacin es necesario colocar filtros apropiados debajo del condensador y
encima de los objetivos.

Su fuente de iluminacin es una lmpara de mercurio o halgeno que emite la mayor

cantidad de luz UV en el lmite del espectro visible, sus objetivos son generalmente de
cuarzo y los filtros retienen la radiacin ultra violeta peligrosa para el ojo

Ya que las molculas con la propiedad de fluorescencia son escasas, este microscopio
se utiliza tambin para revelar fluorescencia agregada como en la deteccin de
antgenos o anticuerpos, o cuando se inyectan molculas fluorescentes en clulas para
utilizarlas como marcadores.

Microscopio de contraste de fases: Este microscopio permite observar clulas sin

colorear, por lo que es muy til para clulas vivas, ya que como bien sabemos el
fijarlas y teirlas implica la muerte de la misma, lo que adems puede daar o cambiar
la estructura.
Su fundamento se basa en el retraso que se produce en las ondas de luz al atravesar
objetos de distintos ndices de refraccin, aprovechando y amplificando dichos retrasos

2.- En qu objetivo se usa el aceite de inmersin y cul es su funcin?

El objetivo x100, se denomina objetivo de inmersin, porque para proveer imgenes
ntidas, la lente debe estar inmersa en un lquido (aceite de cedro o similar), con un
ndice de refraccin igual al vidrio, lo que permite evitar la dispersin de los rayos
luminosos. Siempre que utilicemos el objetivo x100 debemos colocar una gota de
aceite de inmersin sobre la preparacin a observar.
3.- Cul es la diferencia entre una preparacin en fresco y una preparacin fija?
La forma ms simple de preparar un espcimen para su examen microscpico es hacer
una preparacin en fresco(40x). Existen dos tcnicas, una preparacin en fresco
simple ("entre porta y cubre") consiste en colocar una gota de lquido con los
microorganismos sobre un portaobjetos y a continuacin cubrirla con un cubreobjetos.
Una preparacin en gota pendiente se realiza colocando una gota del material en un
cubreobjetos y cubrindolo con un portaobjetos (invertido) con una excavacin central
(portaobjetos excavado). Hay que sellar la preparacin con vaselina alrededor de la
excavacin. La ventaja de esta ltima tcnica, es que la preparacin no se seca y
puede ser observada durante un tiempo ms largo.
Las preparaciones en fresco se utilizan para observar microorganismos vivos. Por
ejemplo, para la bsqueda de Trichomonas vaginalis en secreciones vaginales. Este
protozoo de gran movilidad causa inflamacin de la vagina y la uretra. Si en la
preparacin se observan clulas en forma de huso que se mueven mediante

contracciones o sacudidas cruzando el campo, probablemente se tratar de T.

vaginalis, pudindose efectuar el diagnstico.
Sin embargo, el inconveniente de la observacin en fresco es que no permite aumentar
el contraste de la preparacin. Por tanto, su uso, con un microscopio ptico de campo
claro, est bastante limitado. Normalmente, para observar microorganismos vivos se
utiliza alguno de los otros microscopios pticos que hemos mencionado anteriormente.
Preparacin fija: para no observar la movilidad de un microorganismo es preciso que
est fijo. Para lograrlo se agrega formol, dejar reposar la preparacin despus se lava y
se le agrega un colorante y se vuelve a lavar y por ultimo se observa en el microscopio.
4.- Qu fin tiene la fijacin de muestras al realizar un frotis bacteriano?
La fijacin de una extensin bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y
adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfologa y bacteriana y las posibles
agrupaciones de clulas que pudiera haber.
5.- Investiga las diferentes morfologas que presentan las clulas bacterianas y sus
agrupaciones.
MORFOLOGA
Las bacterias reciben diferentes nombres segn su forma: Cocos: bacterias en
forma esfrica Bacilos: bacterias en forma de bastn; Espirilos y espiroquetas:
bacterias en forma de espiral. Vibriones: bacterias en forma de coma.
Las agrupaciones bacterianas aparecen cuando las clulas se mantienen juntas
despus de la divisin celular. Son caractersticas de diferentes microorganismos. A
partir de los cocos: Diplococos, Estreptococos (un plano de divisin), Ttradas, Sarcinas
y Estafilococos (dos o ms planos). Diplococos: dos clulas Estreptococos:
cadenetas de varias clulas Ttradas: dos planos perpendiculares Sarcinas: tres
planos ortogonales (paquetes cbicos) Estafilococos: muchos planos aleatorios A
partir de bacilos aparecen: Diplobacilos Estreptobacilos Otras agrupaciones son:
En Empalizada, en V o L, letras chinas o rosetas

BIBLIOGRAFA.

http://www.uamenlinea.uam.mx/materiales/licenciatura/diversos/AQUIAHUATL_R
AMOS_MARIA_DE_LOS_ANGELES_Manual_de_practicas_de.pdf
http://www.unavarra.es/genmic/salint/microbiologia.pdf
Bonifaz A., Micologa Mdica Bsica, 3a edicin, Mxico, D.F., McGraw-Hill
Interamericana,
2010.
Prescott L.M., Harley J.P. and Klein G.A., Microbiologa, 3a edicin, Madrid,
Mxico,
Mc
GrawHill-Interamericana, 2009.