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RESUMEN Y PUNTUALIZACIONES DE LA PRIMERA

INSTANCIA PRESENCIAL DEL TALLER


EXPERIMENTAL

DEFINICIN DE TRMINOS

Excitabilidad: Un estmulo adecuado determina una respuesta activa propagada, es


decir, un potencial de accin. Es activo debido a que produce un cambio en la
conductancia. Es una respuesta propagada debido a que puede ser registrado
distalmente. Este ltimo concepto, pone de manifiesto tambin, la conductividad, puesto
que el registro se encuentra a distancia del sitio de estimulacin.

Modelo In Vitro: Son estudios que se realizan sobre componentes de un organismo:


clulas tejidos u rganos, aislados de su entorno biolgico habitual. Este tipo de estudio
permite controlar y modificar las variables ambientales, tales como: temperatura,
composicin hidroelectroltica del medio, pH, etc., capaces de afectar la estructura y
funciones de tales componentes.
Se ha seleccionado el nervio citico de batracio debido a:
1- Sus propiedades bioelctricas no difieren cualitativamente de los nervios
procedentes de otras especies.
2- Presenta adecuada longitud, es de fcil extraccin, es resistente y mantiene sus
propiedades durante varias horas.
3- En nuestro medio resulta de fcil adquisicin.
4- Dado que los batracios no conservan una temperatura constante, si no que se
adaptan a la temperatura del medio, al extraer el nervio del organismo es posible
estudiarlo a temperatura ambiente.

Registro Bitpico: La seal va a afectar a los dos electrodos de registro, ambos son
activos y esa seal que es negativa en un registro extracelular, provocar
desplazamientos del rayo de osciloscopio en ambas direcciones. La distancia que separa
los electrodos de registro influye en la amplitud y en la direccin del potencial de
accin.
Cabe destacar, que resulta de importancia capital conocer si, tanto la estimulacin como
el registro fueron intracelulares o extracelulares. En el presente experimento, ambos
fueron extracelulares, tanto la estimulacin como el registro.
Cabe destacar adems, que el registro es diferencial, es decir, que mide la diferencia de
voltaje, no conoceremos el voltaje detrs de cada electrodo, si no, la diferencia entre
ambos.

Latencia: Es el tiempo que transcurre entre el inicio de un estmulo y el comienzo de


una respuesta.

Amplitud: La amplitud de un movimiento oscilatorio, ondulatorio o seal


electromagntica es una medida de la variacin mxima del desplazamiento u otra
magnitud fsica que vara peridica o cuasi peridicamente en el tiempo. Es la distancia
entre el punto ms alejado de una onda y el punto de equilibrio o medio.

Onda sinusoide: 1- Amplitud. 2- Amplitud de pico a pico. 3- Media. 4- Periodo.


(ESTA GRFICA NO VA, LA PUSE YO PARA EJEMPLIFICAR AMPLITUD)

RESUMEN PARTE 1

Cuando se liga completamente el nervio citico en su extremo proximal, el


fenmeno observado consiste en la generacin de movimientos de flexin en la
extremidad posterior ipsilateral (del mismo lado) del animal. Este comportamiento
motor se inicia inmediatamente efectuada la ligadura, no extendindose su duracin ms
all de unos instantes luego de la maniobra.

El mecanismo que explica esta relacin causal se basa en que:


1- El nervio constituye una estructura excitable.
2- Frente a la estimulacin mecnica representada por la ligadura, se desarrolla una
respuesta activa, de naturaleza bioelctrica, capaz de propagarse desde el sitio de
la ligadura hacia el extremo distal del nervio.
3- Este fenmeno bioelctrico debe ser capaz de desencadenar en el efector
(representado por los msculos de la extremidad posterior) una respuesta
mecnica.

Hiptesis: El nervio citico constituye una estructura excitable, por lo que la aplicacin
del estmulo adecuado de esta estructura, desencadenar en ella una respuesta activa
propagada.

Objetivos:
1- Obtener evidencias electrofisiolgicas que sustenten el carcter excitable del nervio
citico.
2- Caracterizar la respuesta bioelctrica generada por esta estructura nerviosa.

RESUMEN PARTE 2

Amplificador: Realiza de modo analgico el clculo de la diferencia de los valores de


potencial elctrico medidos por G1 y G2.
Mide la diferencia de voltaje entre G1 y G2. Solo se observar algo cuando estn
ocurriendo diferentes eventos en cada electrodo, puesto que mide la diferencia. Si el
valor de esa diferencia de potencial fuera 0 significa que estara ocurriendo lo mismo en
ambos electrodos.
El amplificador tambin puede amplificar la intensidad de la seal para poder registrar,
visualizar y cuantificar. Puede entonces, multiplicar esa diferencia por un valor entero,
ya sea 10, 100, 1000, etc., definida por el experimentador, que es cunto lo va a
amplificar y es lo que se denomina ganancia.

V (t) = (Ganancia) x (G1 G2)

Filtros: Se utilizan para eliminar determinadas frecuencias, tales como ruidos que
podran distorsionar la seal que interesa registrar. En el presente experimento los filtros
no fueron modificados o no lo describieron los experimentadores.

Conversor: A los efectos de poder almacenar y exhibir la seal en una computadora, se


debe realizar la digitalizacin de la seal. La misma consiste en convertir la seal en
ceros y unos para poder transferirlo a la computadora. Si no fuera efectuado este
paso, no podra observarse nada en la misma.
La seal digital de salida de este dispositivo es ingresada a la computadora, donde
puede ser almacenada, grabada y simultneamente exhibida en la pantalla.

Ctodo Y nodo: Es el electrodo negativo, donde los iones (tomos cargados


elctricamente) que se dirigen del nodo (electrodo positivo) al ctodo, reciben el
nombre de cationes, y los iones que se dirigen del ctodo al nodo tienen el nombre de
aniones.

Estimulacin: La eleccin de la electricidad como energa de estimulacin es debida a


los siguientes motivos:
1- Es perfectamente cuantificable en amplitud (Voltios o mejor, de ser posible,
Amperios) y en su duracin.
2- A nivel axonal es semejante a la excitacin fisiolgica, la cual se efecta por
medio de flujos locales de corriente elctrica.

3- Dentro de ciertos lmites (20 30 V como mximo) no produce lesin alguna en


la fibra.
RESUMEN PARTE 4

Calibracin: Antes de comenzar los experimentos, se debe realizar la calibracin del


sistema de registro. El propsito es establecer una relacin precisa entre la magnitud y
el signo de la seal observada, y el valor real de la seal, es decir, la diferencia de
voltaje entre G1 y G2 que verdaderamente existe.
Para ello se aplica un pulso de voltaje directamente del amplificador, de magnitud
conocida, por ejemplo, 1mV. Cabe destacar que al realizar esto, se establece una
diferencia de potencial entre G1 y G2, tal que, G1 sea negativa con respecto a G2.
Cuando existe una diferencia de potencial entre G1 y G2 tal que, el valor del potencial
debajo de G1 es menor que G2, la deflexin de la seal ser hacia valores negativos.
El objetivo es generar un pulso conocido. Adems, el amplificador est seteado para que
G1 sea negativo con respecto a G2 (G1 < G2).

En la grfica perteneciente al ejercicio 4, se observa el resultado de la calibracin del


sistema de registro.
La flecha indica el momento en que fue aplicado el pulso de calibracin. Es posible
afirmar que el mismo se produjo en ese instante, puesto que es el momento en que se
produce la deflexin hacia abajo.
La duracin del pulso de calibracin fue de 0,2 segundos, puesto que en el momento en
que la deflexin asciende alcanzando el eje, finaliz el pulso de calibracin.

Es posible deducir que la ganancia ha sido establecida en 1000, puesto que en la letra
indican que se calibr a 1mV, pero en la grfica la escala se encuentra en Volt, de
manera que se debi multiplicar por 1000.
RESUMEN PARTE 5

En la grfica perteneciente al ejercicio 5 es posible observar dos canales.


El canal 1 (parte superior) corresponde a la seal de diferencia de voltaje entre G1 y G2
en funcin de tiempo procedente del amplificador y digitalizada por el conversor
analgico digital.
El canal 2 (parte inferior) corresponde al curso temporal del estmulo. Puede obtenerse
de su lectura la amplitud y duracin de este pulso. Consiste en la corriente que fue
inyectada, debido a esto, se presenta en mA y no se observa un pulso rectangular de
corriente.

Cuando en el ejercicio 5:
b. c. Pregunta por la amplitud as como por la duracin, debo observar entonces, la
grfica inferior (canal 2).
d. Pregunta por el valor del voltaje en los sitios indicados con la flechas, el mismo
corresponde a 0mV. Este valor, corresponde a la diferencia entre G1 y G2. El hecho de

que el voltaje sea 0 puede deberse a diversas causa. Que ambas valgan 0, por ejemplo,
o, que ambas valgan 5.

Caracterstica De La Seal Observada

Tras el pulso estimulante es posible observar dos respuestas. La primera seal


consiste en un artefacto del estmulo, en tanto que la segunda es la seal bioelctrica,
denominada potencial de accin.

La primera seal corresponde a un artefacto de estimulacin debido a que:


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No tiene latencia.
No tiene umbral.
Crece en forma lineal con la intensidad del estmulo.
Se invierte al cambiar la polaridad del estmulo.

A su vez, la segunda seal corresponde a un potencial de accin debido a que:


1- Tiene latencia y dada la magnitud de la misma solo puede ser una respuesta
biolgica, puesto que no se conoce totalmente ningn tipo de energa que se
desplace a tan baja velocidad (del orden de metros por segundo).
2- Tiene umbral, lo cual significa que se requiere una mnima cantidad de energa
para lograr activar la estructura excitable, denominado estmulo umbral.
3- Al invertir la polaridad del estmulo, la segunda seal no modifica su polaridad.

Si cambiamos la polaridad del estmulo observamos que el potencial de accin no se


modifica, puede ser sin embargo, algo ms pequeo. S se modifica la latencia,
tornndose ms corta cuando el ctodo se encuentra ms prximo a los electrodos de
registro y ms larga cunado es el nodo el que se encuentra en la proximidad de
aquellos. El aumento de la latencia observado es debido a que se incrementa el tiempo
de conduccin, que es el tiempo necesario para conducir el impulso nervioso desde su
sitio de generacin hasta el electrodo de registro ms proximal.
Esto es efectivamente lo observamos al invertir la polaridad. El ctodo queda ms lejos
de G1. La deflexin 1 se invierte, mientras que de la 2 tan solo se modifica la latencia,
(la cual disminuye), pero a grandes rasgos mantiene sus caractersticas Es la seal 1 la
que se modifica radicalmente, lo cual comprueba, que la misma proviene del
estimulador, puesto que no tiene latencia, se da en mismo instante en que se estimula y
se invierte de forma concomitante al invertir la polaridad. Por tanto, la seal 1
constituye un artefacto.
Cuando se aplica un estmulo mediante electrodos, tales como el ctodo y el nodo, el
resultado es la acumulacin de carga positiva, la cual determina la despolarizacin.
Dado que el ctodo constituye el polo negativo, es el que va a acumular debajo de s las

cargas positivas. Cuando se invierte la polaridad, estas cargas positivas quedan ms


lejos del electrodo de registro y debido a esto, se incrementa la latencia. Se acumula
tambin ms carga negativa.
Existen ciertos experimentos que se pueden realizar para obtener evidencias que
sustenten lo afirmado anteriormente. Uno, sera invertir la polaridad, como
efectivamente se hizo. Otro, sera mediante el bloqueo de los canales Na y K, puesto
que al bloquear dichos canales no deberamos registrar ninguna seal si se tratara de un
potencial de accin. Si se bloquean los canales y se registra una seal es porque la
misma no corresponde a un potencial de accin.

En el experimento, el hecho de que no se registre un potencial de accin con las


caractersticas habituales, no significa bajo ningn concepto que no se trate de un
potencial de accin. La segunda seal constituye efectivamente un potencial de accin.
La variacin en cuanto a sus caractersticas con respecto a las usualmente observadas se
produce como consecuencia de diversos factores:
1- Es un axn nico. El experimento no es realizado sobre mltiples axones como
en un nervio.
2- Es adems, un registro extracelular, no intracelular.

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