Manual de Lab Clinico2016-1

Universidad Autnoma de Baja California.
ECISALUD
LABORATORIO CLINICO INTEGRAL
MANUAL DE LABORATORIO
CICLO 2016-1
Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

ECISALUD
PROLOGO
El laboratorio clnico es un ambiente dinmico que esta continuamente cambiando
para satisfacer las necesidades de salud pblica. El presente manual ser recurso
informativo en la formacin de los alumnos de la carrera de medicina. El propsito
de la informacin contenida en este manual es que tiene un enfoque actual de los
procesos habituales de laboratorio como la tendencia tecnolgica de la
automatizacin, lo que permite enfrentar el reto de manejar pruebas sensibles,
especficas y efectivas en el monitoreo de la salud y la enfermedad, as como
auxiliar en el establecimiento del diagnostico clnico. Adems, de que conocer los
perfiles de laboratorio que se solicitan comnmente en las diferentes reas de la
clnica a fin de obtener resultados a tiempo y el costo-beneficio que representa.
Es recomendable la introduccin de la terminologa actual, completar la
informacin acerca de los organismos y guas de regulacin de las buenas
prcticas de laboratorio.

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INTRODUCION
El laboratorio clnico es un campo multidisciplinario cuya finalidad es la aplicacin
de la Ciencia Qumica para contribuir a la resolucin de problemas de salud.
La funcin del LabCI es realizar anlisis, tanto cualitativos como cuantitativos, en
fluidos corporales como sangre, orina, lquido seminal, lquido cefalorraqudeo, etc.
Para que los resultados de dichos anlisis sean tiles a los mdicos en el
diagnstico, tratamiento y seguimiento de una enfermedad, stos debern
realizarse bajo un estricto control de calidad logrando niveles ptimos de precisin
y exactitud, caractersticas deseables en cualquier resultado de diagnstico.

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OBJETIVOS DEL CURSO

1.Que el alumno sea capaz de comprender el anlisis de productos biolgicos
incluyendo una adecuada manipulacin de los especmenes, desde la toma y/o
recepcin de muestras hasta la entrega de resultados.
2. Que el alumno adquiera una formacin y preparacin en Bioqumica que le permita
afrontar los retos que encontrar en su vida profesional, ante el creciente nmero de
tcnicas que continuamente se estn desarrollando para la deteccin y cuantificacin
de metabolitos de inters en la medicina moderna.
3. Que el alumno adquiera los elementos formativos que le permitan desarrollar una
actitud y pensamientos crticos y analticos. Este proceso de enseanza incluye:
planeacin, seleccin, elaboracin y ejecucin analtica, evaluacin y resolucin de
problemas con la metodologa empleada, aplicacin e interpretacin de programas de
control de calidad, interpretacin de grficas y correlacin de los datos obtenidos con
las alteraciones que se presentan en el organismo en los diferentes cuadros
patolgicos.
Este manual fue elaborado con base en la Norma Oficial Mexicana NOM -007-
SSA3-2011 para la organizacin y funcionamiento de los laboratorios clnicos,
misma que pretende lograr que los laboratorios clnicos establezcan programas de
aseguramiento de la calidad de sus servicios. As como por la norma de
Vancouver para la estructuracin de citas y referencias bibliogrficas.
El curso de la asignatura prctica de LABORATORIO CLINICO INTEGRAL hace
nfasis en el control de calidad. Las prcticas estn diseadas con el propsito
que los alumnos dispongan de un conjunto de habilidades que les permitan la
aplicacin flexible del conocimiento adquirido de las tcnicas que se aplican en
laboratorio y tener en cuenta los tiempos de ejecucin de las mismas.

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PRACTICA #1 CONTROL DE CALIDAD Y PROCEDIMIENTOS

NORMALIZADOS DE OPERACIN EN LABORATORIO CLNICO.
INTRODUCCION
Los anlisis clnicos son una parte esencial para el diagnstico, tratamiento,
prevencin e investigacin de las enfermedades, son clave para el manejo clnico
y epidemiolgico de la salud de la poblacin. El laboratorio debe estar preparado
para enfrentar su responsabilidad, asumiendo el desafo tcnico y tico que
significa entregar resultados confiables, reproducibles y oportunos para la toma de
decisiones en salud.
El gran beneficiado con los programas de control de calidad es la poblacin del
pas, que recibir una mejor atencin en salud, con diagnsticos ms precisos que
llevaran a tratamientos adecuados, disminucin de das de hospitalizacin, menor
tiempo de incapacidad familiar o laboral, disminuyendo aun el riesgo de
enfermedad por el aporte epidemiolgico que representa el anlisis de buenos
datos de laboratorio. As tambin se beneficia el propio laboratorio y su personal,
al mejorar su imagen de eficiencia dentro del esfuerzo en salud y en su
satisfaccin por el trabajo desarrollado bajo su responsabilidad.
Los laboratorios clnicos deben de mantener programas de trabajo que incluyan

actividades de normalizacin, evaluacin de calidad, supervisin, capacitacin y
asesora. Para poder controlar todo el proceso del anlisis clnico es
imprescindible que el laboratorio de anlisis clnicos est dotado, aplique y
mantenga un sistema de calidad1. Calidad de forma sencilla se refiere a la mejor
utilizacin posible de los medios disponibles en beneficio del paciente.
Los Laboratorios clnicos implementan conceptos y procesos que aseguren la
seguridad y Calidad de todas las prestaciones. Es as como surge la necesidad de
normar cada uno de los procesos involucrados en la realizacin de los exmenes
solicitados por los Facultativos Mdicos.
Fase pre analtica: Contempla el proceso desde que se solicita el examen hasta
que es procesado en el Laboratorio.
Fase analtica: Corresponde al proceso de realizacin del examen, esto involucra
directamente la tcnica empleada para realizar un examen.
Fase Post analtica: Corresponde al proceso que comprende desde que se
obtiene el resultado de una medicin hasta que se informa.
Para el Laboratorio Clnico es importante dar las directrices en cada una de estas
etapas, para as garantizar la calidad de los exmenes realizados.

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OBJETIVO
Establecer requisitos para la Normalizacin del Procedimiento para la
determinacin de todos los estudios clnicos que se realizan en el laboratorio,
comenzando desde la fase preanaltica, analtica y postanaltica. As como
conocer las principales normas que rigen el laboratorio clnico.
El propsito principal es, brindar a nuestros pacientes resultados con Calidad y
Garanta, siendo estos los ms confiables y exactos posibles.
MATERIALES Y METODO
Normas:
La Norma Oficial Mexicana NOM-007-SSA3-2011, Para la organizacin y
funcionamiento de los laboratorios clnicos.
Esta norma tiene por objeto establecer las especificaciones que se deben
satisfacer para la organizacin y funcionamiento de los laboratorios clnicos.
Y adems es de observancia obligatoria para los laboratorios clnicos, as como
para los profesionales y tcnicos del rea de la salud de los sectores pblico,
social y privado que intervengan en la organizacin y funcionamiento de dichos
establecimientos.
El control de calidad es un proceso y tcnicas diseadas para detectar, reducir y
corregir deficiencia en los exmenes de laboratorio clnico. Para alcanzar la
calidad en el laboratorio clnico requiere de varias herramientas como: Un manual
de calidad y procedimientos. Un programa de mantenimiento y calibracin de
equipos. Capacitacin del personal e Implementacin de controles de calidad.
Existen 3 fases del control de calidad, la primera es la fase pre-analtica, la
segunda es la fase analtica y posteriormente se pasa a la fase post-analtica.
El control de calidad es un sistema diseado para incrementar la probabilidad de
que cada resultado reportado por el laboratorio es vlido y pueda ser utilizado por
el mdico para hacer un diagnstico o para tomar una decisin en su terapia.
NORMA Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Proteccin ambiental -
Salud ambiental - Residuos peligrosos biolgico-infecciosos - Clasificacin y
especificaciones de manejo. Establece los requisitos para la separacin,
envasado, almacenamiento, recoleccin, transporte, tratamiento y disposicin final
de los residuos peligrosos biolgico-infecciosos que se generan en
establecimientos que presten servicios de atencin mdica.
Etandares:
ISO 9001
Es la base del sistema de gestin de la calidad, es una norma internacional y se
centra en todos los elementos de administracin de calidad con los que una
empresa debe contar para tener un sistema efectivo que le permita administrar y
mejorar la calidad de sus productos o servicios.

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ISO 15189
Establece los requisitos generales que un laboratorio tiene que cumplir para que
se reconozca su competencia para realizar ensayos y / o calibraciones, incluyendo
el muestreo. Se divide en dos partes: la parte de gestin corresponde a los
requisitos para la certificacin del sistema de calidad mientras que la parte tcnica
describe los requisitos para el personal, instalaciones, equipos, procedimientos,
garanta de calidad e informes. Es en esta ltima parte donde ms se diferencia de
la Norma en la que se basa, la Norma ISO 9001 .
ISO 17025
Contiene los requisitos que tienen que cumplir los laboratorios de ensayo y de
calibracin se desean demostrar que:
Poseen un sistema de gestin
Son tcnicamente competentes
Son capaces de generar resultados tcnicamente vlidos.
CONTROL DE CALIDAD
Para poder cumplir con el control de calidad se empieza desde la fase pre-
analtica en la cual debemos de cuidar aspectos como solicitud del anlisis,
preparacin del paciente, recoleccin de la muestra y el transporte de la muestra.
La identificacin completa del paciente debe incluir:

Nombre completo.
Sexo.
Datos para localizacin (nombre, o nmero de cama).
Direccin.
Nmero de identificacin que proporcione una forma nica de identificacin.
La etiqueta debe incluir:

La identificacin del paciente con su nombre o clave de identificacin.
Hora de la toma de muestra.
Caracterstica observable y tipo de muestra
Criterios de aceptacin o rechazo de muestras, para eso debemos tener mucho en cuenta lo
siguiente:
Identificarla correctamente.
El volumen sea el adecuado.
El No asignado por el laboratorio corresponda igualmente a las dems muestras.
El recipiente de recoleccin es el correcto.
Muestras con hemlisis y coaguladas cuando son recolectadas con
anticoagulantes.
Presencia de interferencias como frmacos.

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En la fase analtica aqu se debe de cuidar el proceso tcnico para la

determinacin de las magnitudes biolgicas.
Aqu es donde se aplica el control interno de calidad donde se evala la calidad
del resultado dado por los aparatos del laboratorio clnico, donde se compara con
un control normal y otro anormal.
Consiste cuando la muestra est preparada para su proceso, hay que

tener en cuenta los siguientes factores:
Reactivos.
Material de vidrio.
Equipo.
Soluciones de control.
Mtodos de confiabilidad y aplicabilidad.
Para poder obtener resultados ptimos se utilizan controles que son especmenes
utilizados para determinar la validez de la calibracin, es decir, la linealidad y
estabilidad de un ensayo cuantitativo o de una determinacin cuantitativa a lo
largo del tiempo. Hay controles positivos y negativos.
Control positivo: Control que contiene el analito en una concentracin superior a

un lmite especificado.
Control negativo: Control que contiene el analito en una concentracin inferior a un

lmite especificado. Normalmente se utiliza como control negativo un espcimen
sin droga (muestra en blanco).
En la fase post-analtica aqu se validan los resultados y se entregan los
resultados.
Para poder lograr este objetivo debe de haber un control interno de calidad, que es
un proceso estadstico usado para monitorear y evaluar el proceso analtico que
produce resultados de pacientes. Cuando se realiza un anlisis de laboratorio, el
producto es un resultado; este resultado puede ser cuantitativo y/o cualitativo.

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BIBLIOGRAFIA
Grupo ACMS. Demuestre la fiabilidad de su laboratorio. Disponible en:
http://www.iso15189.es/informacion-iso-15189-grupo-acms.html. Consultado el:
Citado 1/11/13.
Jos Ignacio Campillo Garca. Diario oficial de la federacin. Disponible en:

http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/166ssa17.html. Consultado el:
01/11/13.
Diario Oficial de la Federacin. SEGOB. NOM-007-SSA3-2011. 27 de marzo de

2012. Link:http://dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=5240925&fecha=27/03/2012
Athenea, Diccionario de Trminos en control de calidad para el laboratorio clnico,

Disponible en: http://intranet.atheneasoluciones.com:8000/News/20/diccionario-de-
trminos-en-control-de-calidad-para.aspx Consultado el: 11 de octubre de 2010
Scrib. Fases del control de calidad en el laboratorio clnico. QFB. Williams

Snchez. Disponible en: http://es.scribd.com/doc/8551049/Fases-Del-Control-de-
Calidad-en-El-Laboraotrio-Clinico. Consultado el: 11 de octubre de 2013.
RIO-RAD Laboratories. Clinical Diagnosis Group. Sistemas de control de calidad

bsico e intermedio para el laboratorio clnico. W. Gregory Cooper, CLS, MHA.
Disponble en: http://www.qcnet.com/Portals/60/PDFs/BasicQCBklt_Sp_May11.pdf
Consultado el: 11 de octubre de 2013.
UNODC. Naciones Unidas. Glosario de trminos sobre garanta de calidad y

buenas prcticas de laboratorio. New York 2012. Disponible en:
http://www.unodc.org/documents/scientific/Glossary_ST_NAR_26_S.pdf.
Consultado el: 01/11/13.
Sistemas de Control de Calidad Bsico e Intermedio para el Laboratorio Clnico.

Disponible en:http://www.qcnet.com/Portals/60/PDFs/BasicQCBklt_Sp_May11.pdf.
Consultado el: 26 de noviembre del 2013.

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ACTIVIDAD INTEGRADORA
-Reportar en su bitcora la practica correspondiente
-De acuerdo a la informacin proporcionada por su profesor y lo investigado diga

de manera sintetizada de que trata cada una de las NOM y estndares
establecidos para laboratorio clnico.
-Defina sensibilidad.
-Defina especificidad.
-Defina linealidad.
-Defina reproductibilidad.
-Defina control de calidad.
-Defina que es un estndar en laboratorio clnico.
Respaldar con bibliografa

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PACTICA #2 TOMA Y MANEJO DE MUESTRA DE SANGRE Y LQUIDOS

CORPORALES.
INTRODUCCIN
El objetivo del laboratorio clnico es la obtencin de informacin sobre el estado de
salud de una persona. Esta informacin puede utilizarse para establecer un
diagnstico, evaluar una evolucin y/o pronstico de una enfermedad, valorar la
efectividad de un tratamiento, realizar un cribado en una poblacin, etc. Para ello,
a partir de muestras biolgicas, se realizan pruebas en las que se miden una serie
de magnitudes de diferente ndole: bioqumicas, hematolgicas, inmunolgicas,
microbiolgicas, parasitolgicas, toxicolgicas, etc.
Para que el resultado final de una prueba de laboratorio sea correcto, no basta con
que la determinacin analtica se realice a la perfeccin, de acuerdo a
procedimientos validados adecuadamente y bajo la supervisin de profesionales
experimentados. La calidad de la prueba depende del cumplimiento en cadena de
una buena prctica que comienza desde el momento mismo de la formulacin de
la peticin y la preparacin del paciente para la extraccin u obtencin de la
muestra y termina cuando el resultado llega a manos del profesional que solicit la
prueba.
As pues, una prueba analtica no es un mero "anlisis de sangre", sino un
proceso complejo en el que participan diferentes profesionales: los que rellenan el
formulario de peticin, los que preparan al paciente, obtienen la muestra, la
transportan hasta el laboratorio, la reciben, la procesan, validan los resultados y
hacen que estos lleguen a su destinatario en tiempo y forma. Todos estos
profesionales, los que participan en la fase preanaltica, analtica y postanaltica
son corresponsables del proceso y del resultado.
De ah la importancia de disponer de un manual de extraccin, toma y transporte
de muestras biolgicas en el laboratorio clnico. Con este manual se pretende de
manera concisa y clara ayudar a todos los profesionales que participan en la fase
preanaltica de la prueba del laboratorio.
FLUIDOS CORPORALES:
Se entiende por fluido corporal, a todas las secreciones o lquidos biolgicos,
fisiolgicos o patolgicos, que se producen en el organismo: sangre, orina,
deposiciones, lagrimas, saliva, semen, secreciones bronquiales, secreciones de
heridas, secreciones pticas, nasales, farinosas, secreciones vaginales,
secreciones uretrales, LCR, lquido pleural, lquido asctico, lquido articular, lquido
amnitico, entre otras.
FLUIDOS CORPORALES DE ALTO RIESGO:

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Se aplican siempre a la sangre y a todos los fluidos que contengan sangre visible.
Se incluyen, adems, semen, secreciones vaginales, leche materna y aquellos
lquidos provenientes de cavidades normalmente estriles como: lquido
cefalorraqudeo, lquido sinovial, lquido peritoneal, lquido pericrdico y lquido
amnitico. Se consideran de alto riesgo, por constituir fuente de Infeccin de virus
de hepatitis B, VIH y otros agentes que se transmiten por la va parenteral.
FLUIDOS CORPORALES DE BAJO RIESGO:

Se aplican a las deposiciones, secreciones nasales, expectoracin, transpiracin,
lgrimas, orina o vmitos, a excepcin de aquellos que tengan sangre visible. Se
debe considerar que estos fluidos, aunque no constituyen fuente de infeccin de
virus de hepatitis B, VIH y otros agentes que se transmiten por la va parenteral, s
tienen el riesgo de transmitir infecciones bacterianas al entrar en contacto con piel
y mucosas del operador.
PRECAUCIONES UNIVERSALES CON SANGRE Y FLUIDOS CORPORALES:

Son el conjunto de procedimientos destinados a minimizar el riesgo de adquirir
enfermedades, por el personal de la salud, al exponerse a productos biolgicos
potencialmente contaminados, en la prctica clnica. Debido a que todos los
pacientes pueden ser potenciales portadores de patologas que se transmiten por
la va parenteral, sin tener un diagnstico objetivable, LAS PRECAUCIONES
UNIVERSALES deben aplicarse en la prctica de la atencin de cualquier
paciente en todo momento y en cualquier mbito de la atencin de salud, siendo
esto lo que les confiere el carcter de Universales, estas precauciones hoy son
homologables a PRECAUCION ESTANDAR que incluyen adems las
precauciones a considerar con las diferentes secreciones.
PRECAUCIONES
GUANTES:
Deben usarse en todo procedimiento en que exista riesgo de estar expuesto a
fluido corporal de alto riesgo u otras secreciones.
Deben usarse cuando el personal tiene lesiones en las manos, transformndose
en una puerta de entrada de microorganismos.
Deben cambiarse entre cada paciente y deben ser colocados con lavado de
manos previo.
Para realizar cualquier puncin arterial y/o venosa debe usarse guantes, debido a
que reduce el riesgo de contaminacin de la piel de las manos con sangre y
disminuye el inculo al producirse un accidente por cortopunzante contaminado
con fluido de alto riesgo.

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MASCARILLAS, ANTEOJOS PROTECTORES se deben usar en los

procedimientos en que con frecuencia se producen aerosoles o salpicaduras de
sangre u otro fluido corporal de alto riesgo.
PECHERAS IMPERMEABLES su uso est indicado en los procedimientos en que

con frecuencia se producen derrames o salpicaduras de sangre u otro fluido
corporal de alto riesgo.
SI DURANTE EL PROCESO DE ATENCION DE CUALQUIER PACIENTE, LA PIEL O LAS MANOS DEL

PERSONAL ENTRA EN CONTACTO CON SANGRE U OTRO FLUIDO CORPORAL, ESTAS DEBERAN
LAVARSE DE INMEDIATO CON ABUNDANTE AGUA Y JABON ANTISEPTICO.
TRANSPORTE DE MUESTRAS:
El personal del equipo de salud que transporte muestras biolgicas SIEMPRE
DEBE USAR GUANTES.
El llenado de los frascos debe ser realizado con precaucin para evitar el derrame
por sus costados.
Los frascos debern ser transportados en cajas de seguridad tapadas, en posicin
vertical y el personal que las transporta debe manipularlas con guantes.
Los gases arteriales deben ser tapados con tapn rojo combi u otro tapn de
goma sin aguja.
MANEJO DE DERRAMES:
Debe limpiar la superficie con detergente y luego aplicar Cloro 0,5%.
Todos los procedimientos de limpieza debern ser realizados con guantes.
EL CUMPLIMIENTO DE LA NORMATIVA ES UN DEBER DE RESPONSABILIDAD CON NOSOTROS.

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NORMAS DE MANIPULACION Y TRANSPORTE DE MUESTRAS
1.SANGRE:
Esta muestra es la ms frecuente y la que constituye mayor riesgo.
Los frascos de sangre, para Hemograma, pruebas Bioqumicas, Inmunolgicas y
otras deben venir correctamente tapados con su tapn de goma, y dispuestas en
gradilla, de modo de mantenerse vertical. No deben envolverse los frascos con las
solicitudes de exmenes, stas deben venir en forma separada.
Toda muestra de sangre debe manipularse con guantes y transportarse en
contenedores con tapa, especialmente diseados y destinados slo para ese
propsito. Jams debe transportarse una muestra dentro de un bolsillo o en la
mano.
En caso de derrame de una muestra deben tomarse las siguientes medidas:

Avisar inmediatamente a la enfermera del servicio correspondiente y al
laboratorio.
Limpiar el derrame con material absorbente y eliminar, luego desinfectar con cloro
0,5% (usar guantes).
Laboratorio Central no aceptar solicitudes de exmenes que estn manchadas
con fluidos biolgicos.
2.- ORINA:
Las muestras de orina para urocultivo deben venir en frasco con tapa rosca. No es
necesario que el frasco venga lleno de orina, suficiente hasta sus partes.
En caso de derrame, limpiar con elemento absorbente y desinfectar con cloro al
0,5 %
3.- DEPOSICIONES:
Coproparasitolgicos, Coprocultivos, Coproparacitoscopicos y Benedict, deben
venir en recipiente correspondiente, correctamente tapados y sin derrames en su
exterior.
En caso de derrame o accidente, se procede igual que en puntos anteriores.
4.- OTROS FLUIDOS BIOLGICOS:

Deben manipularse y transportarse correctamente tapados y sellados con papel
engomado, sin derrames en su exterior.
En caso de derrame se procede igual que Orina y Deposiciones.
Para manipular sangre u otro fluido biolgico de cualquier paciente debe usarse
guantes de procedimientos.

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OBJETIVO
Conocer el manejo adecuado en la obtencin, llenado, manejo y transporte de
muestras biolgicas en laboratorio clnico.
MATERIAL Y MTODO
Toma de muestra sangunea
1.-Puncin venosa: Son obtenidas por puncin directa del rea antecubital.
Material:
Tubo dependiendo el tipo de muestra que se recoger
Torniquete
Aguja
Jeringa
Torunda con alcohol
Guantes
Mtodo:
Previo lavado de manos y utilizacin de guantes.
Seleccionar la vena y aplicar el torniquete a 4cm por encima del sitio de puncin.
Limpiar la piel con torniquete impregnado de alcohol, sobre el sitio donde se
realizar la puncin, en una sola direccin, preferencialmente hacia distal.
Tener lista la jeringa con la aguja para puncionar la vena, colocando bisel hacia
arriba y colocando el embolo en 45 dejando que la presin extraiga la sangre.
Soltar el torniquete.
Retirar la jeringa, colocando una torunda con alcohol en el sitio de la puncin.
Retirar aguja de la jeringa y depositar la sangre en el tubo especificado.
Desechar en su sitio especfico cada uno de los materiales utilizados.
Puncin arterial:
Los sitios ms comunes de puncin arterial son las arterias femoral, braquial o
radial.
En recin nacidos o en lactantes pueden utilizarse otros lugares, como la arteria
umbilical a las arterias del cuero cabelludo.
2.-La puncin arterial es necesaria fundamentalmente para la realizacin de

gasometras.
Material:
Jeringa especfica para obtencin de gases arteriales con aguja
Heparina
Torunda con alcohol
Guantes

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Mtodo:
Seleccionar la arteria
Impregnar la jeringa con heparina
Inmovilizar el miembro donde se realizar la puncin con la mueca en
hiperextensin.
Limpiar el rea con torunda impregnada de alcohol.
Palpar la arteria, percibir el pulso y la direccin que lleva la arteria.
Insertar la aguja en un ngulo de 90
Aspirar suavemente y obtener 2ml de sangre.
Retirar la aguja.
Hacer presin no menos de 5 minutos para impedir sangrado.
Enviar jeringa al laboratorio bien tapada.
Desechar material utilizado que se haya contaminado
3.- Puncin capilar: Sistema de coleccin de mayor uso en nios menores de un

ao y, en algunas ocasiones en adultos, como en realizacin de glucometra.
Material:
Tubo capilar
Lanceta
Guantes
Torunda con alcohol
Mtodo:
Seleccionar el sitio de puncin.
Limpiar el rea con la torunda con alcohol.
Puncionar el sitio con la lanceta, aplicando presin moderada para obtener la
muestra.
Usar el tubo capilar para recolectar muestra.
Limpiar el rea y hacer presin.
Desechar lanceta y material utilizado que se haya contaminado.
4.- Puncin de taln:

Realizada cotidianamente en recin nacidos. La extraccin se hace normalmente
en zonas laterales del taln (superficie plantar lateral o medial).
Material:
Lanceta
Torunda con alcohol
Guantes
Gasas
Papel filtro

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Mtodo:
Limpiar el rea con una torunda impregnada de alcohol.
Secar con una gasa estril.
Hacer una puncin en el taln con la lanceta, se limpia la primera gota de sangre
con una gasa estril.
Se toma la gota grande de sangre sobre el papel filtro para que se llene el circulo.
Llenar los crculos restantes de la misma manera, con gotas suaves sucesivas.
Secar la sangre y limpiar.
Desechar lanceta y material utilizado que se haya contaminado.
Toma de muestra fluidos corporales

Los fluidos corporales que se envan ms comnmente al laboratorio son: liquido
pleural, liquido sinovial, lquido amnitico, lquido cefalorraqudeo, orina.
Muestra de orina (General de orina): La muestra ideal es la primera miccin de la

maana, ya que es la ms concentrada. En casos de urgencia se recoge la
primera que realice el paciente. Se considera adecuado de 5-10mL de volumen de
orina. Se debe indicar al paciente que permanezca en ayuno completo, por lo
menos 6- 8 horas previas a la toma de la muestra.
ADULTOS:
Material:
Guantes (en caso necesario)
Toalla de papel
Frasco limpio con boca ancha rotulado
Mtodo:
Lavado de manos con agua y jabn.
Hombres: retraer completamente el prepucio, mantenindolo retrado hasta que se
haya recogido la muestra, lavar el meato urinario con agua y jabon, enjuagar y
secar. Mujeres: lavar el vestbulo vaginal y la entrada de la uretra con agua y
jabn, enjuagar y secar; deben separarse los labios y sujetar el frasco sin que ste
tome contacto con la vulva, la pierna o la ropa.
Se desecha el primer chorro y se empieza a recolectar la orina en el recipiente en
el chorro medio.
Recolectar 10mL de orina.
NIOS:
Material:
Agua y jabn
Bolsa de plstico o colector
Mtodo:
Lavado de los genitales y rea perineal con agua y jabn.

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Colocar la bolsa de plstico o el colector.
Vigilar la bolsa cada 30 minutos, y tan pronto como el nio haya orinado, se
retirar y enviar al laboratorio.
Muestra de orina de 24 horas: Se utiliza para la determinacin de algunas

magnitudes bioqumicas cuyo clculo depende de la cantidad exacta de orina
emitida en ese perodo de tiempo. Utilizada para la realizacin de pruebas
cuantitativas diversas, tales como: determinacin de cantidad de protenas,
glucosa, niveles hormonales, electrlitos, nitrgeno.
Material:
Contenedor de 2.000mL de boca ancha
Guantes
Mtodo:
Vaciar completamente la vejiga a una hora determinada, despus esta se
desecha.
Despus de desechar la orina, se recolecta en un recipiente limpio toda la que se
presente durante las 24 horas siguientes.
Mantener la orina a 4C, o dejarla en un lugar fresco.
Despus de 24 horas, se lleva la muestra al laboratorio.
Urocultivo: La toma de muestra de orina para cultivo y antibiograma es similar a

la descrita para examen de orina completa, la diferencia es que el frasco para la
recoleccin debe ser siempre estril.
Material:
Frasco estril rotulado
Guantes estriles
Gasas de algodn
Mtodo:
Lavado de manos.
Colocarse guantes.
Dejar caer la orina en el frasco estril.
Lquido cefalorraqudeo:
Generalmente la obtencin se tiene por medio de puncin lumbar, a travs de
catter de ventriculostoma intraoperatoriamente o a travs de cmara de vlvula
de derivacin ventrculo peritoneal.

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Material:
Equipo de puncin lumbar desechable.
Equipo de preparacin de piel.
Tubos estriles secos con tapa de rosca o tapn de caucho.
Apsito para cubrir el sitio de puncin.
Mtodo:
Preparacin de la piel.
Obtener 1-2ml de muestra en 3 tubos estriles secos, para estudio citolgico,
citoqumico y microbilogico.
En caso necesario de requerir PCR para enterovirus, herpes simple o tuberculosis,
se recolecta en un tubo adicional de 1ml y se conserva a la menor temperatura.
Enviar al laboratorio en hielo seco.
Jugo gstrico:
Material:
Jeringa de 10 cc.
Guantes no estriles.
Recipiente de boca ancha estril de tapa de rosca con fosfato trisdico al 10% con
capacidad para 50ml.
Sonda nasogstrica.
Agua destilada.
Mtodo:
Colocar sonda nasogstrica al paciente una noche antes.
Al da siguiente por la maana y con el paciente en reposo, aspirar de 5-10 cc de
contenido gstrico con una jeringa estril.
Depositar la muestra en un recipiente estril con fosfato trisdico al 10%
Instilar de 25 a 50 cc de agua destilada y aspirar 20 cc de contenido gstrico.
Agregar al recipiente estril con la muestra inicial y tapar hermticamente.
Protegerse de la luz y enviarlo a laboratorio.
Lquido pleural, pericrdico, sinovial, peritoneal, amnitico:

Material:
Equipo de preparacin de piel y anestesia local.
Jeringa y aguja estril.
Tubo estril seco para cultivos.
Tubo estril con citrato de sodio para ADA.
Tubo estril con anticoagulante para citoqumico y pruebas especiales.
Frascos estriles para citologa y cultivo.
Frasco de hemocultivo.
Frasco de hemocultivo para hongos.
Mtodo:

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Preparacin de la piel con tcnica asptica.

Puncionar con jeringa y aguja estril, y recoger mnimo 50 ml de lquido repartido
en los tubos necesarios.
Recoleccin en frasco aparte para citologa, bloque celular.
Recolectar en frasco con anticoagulante para citoqumico.
Recolectar en frasco con citrato de sodio para ADA, si se considera necesario.
Recolectar en frasco estril con 25 ml para cultivo de bacterias, hongos.
Si se requiere cultivo para anaerobios se recolectar en la jeringa manteniendo las
condiciones ideales para el crecimiento de estos grmenes, evitando la exposicin
de la muestra al medio ambiente.
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de practica correspondiente de acuerdo a rubrica
proporcionada por el profesor.
BIBLIOGRAFA
Rivera Sandra. Captulo V: Toma de muestras de laboratorio. Clnica Fundacin
Valle de Lili (sitio de internet). Guas para el manejo de urgencias. Disponible en:
http://www.aibarra.org/Apuntes/criticos/Guias/Enfermeria/Toma_de_muestras_de_l
llaborator.pdf. Acceso el 21 de noviembre del 2013.
Moreno S., Zambrano H. Manual para la toma de muestras para anlisis

microbiolgico. Secretaria Distrital de Salud de Bogot, D. C. (publicacin
peridica) 2008 mayo (citada 2013 noviembre). Se consigue en:
URL:http://www.saludcapital.gov.co/sitios/VigilanciaSaludPublica/Todo
%20IIH/Manual%20Toma%20Muestras.pdf
Landman Cecilia. Manual de tcnicas de toma de muestra para exmenes de

laboratorio. Universidad de Valparaso (sitio de internet). Manual de exmenes de
laboratorio. Disponible en:
http://prontus.uv.cl/pubacademica/pubprofesores/l/publandmancecilia/site/artic/200
70119/asocfile/manual_exs.pdf. Acceso el 22 de noviembre del 2013.
Aznar Javier. Manual de obtencin y manejo de muestras para el laboratorio

clnico. Plan de laboratorios clnicos y bancos biolgicos (sitio de internet). Servido
Andaluz de Salud, Consejera de salud. Disponible en:
http://www.enferaclinic.org/pdf/MANUALOBTENCIONYMANEJOMUESTRAS.pdf

ECISALUD
PRACTICA #3 COMPONENTES SANGUINEOS Y BIOMETRIA HEMATICA

COMPLETA.
INTRODUCCIN
La biometra hemtica (o hemograma) es
uno de los estudios de laboratorio ms
utilizados actualmente como auxiliar al
diagnostico. De la biometra hemtica se
obtienen algunos datos de los tres
elementos formes de la sangre:
eritrocitos, leucocitos y plaquetas. La
biometra hemtica es sin lugar a dudas
el primer paso para el diagnstico. Es un
estudio de laboratorio que mide las
cantidades y caractersticas de los tres
tipos de cuerpos que normalmente se
encuentran en la sangre, que en orden
decreciente de tamao son:
1. Leucocitos (glbulos blancos, serie blanca, frmula blanca).
2. Eritrocitos (glbulos rojos, serie roja, frmula roja).
3. Plaquetas (trombocitos).
Los valores normales de los elementos formes de la sangre pueden tener cambios
fisiolgicos debidos a la edad, al sexo y a la ubicacin geogrfica.
Eritrocitos
Los datos que habitualmente se reportan en una biometra hemtica sobre los
eritrocitos se pueden dividir en:
ndices eritrocitarios primarios:
Cuenta de eritrocitos.
Hematocrito.
Hemoglobina.
ndices eritrocitarios secundarios:
Volumen celular (globular) medio.
Concentracin media de hemoglobina globular (corpuscular).
Hemoglobina globular (corpuscular) media.
Amplitud de la distribucin eritrocitaria.
Desviacin estndar de la distribucin de concentracin globular de hemoglobina.
Reticulocitos
Eritrocitos anormales (alarmas morfolgicas, cambios individuales).
Cuenta de leucocitos.
Conteo plaquetario.

ECISALUD
Reticulocitos: Son eritrocitos jvenes o inmaduros. Se llaman as porque an

contienen retculo endoplsmico. Luego de ser liberados de la mdula sea,
tardan un da en madurar. Sus valores traducen la actividad de reposicin de la
mdula sea. Se expresan en valor relativo o porcentual (nmero de reticulocitos
porcada 1,000 eritrocitos) cuando se efecta un recuento manual; o en valor
absoluto (nmero de reticulocitos por mm de sangre) cuando se utiliza algn
mtodo automtico.
Eritrocitos anormales: La forma normal del eritrocito se puede alterar por

diversos estados patolgicos. Hay dos tipos de aberraciones morfolgicas:
Poiquilocitosis: variacin en la forma del eritrocito.
Anisocitosis: variacin en el tamao del eritrocito.
Recuento de leucocitos: Constituye una

gua muy til sobre la gravedad de la
enfermedad. En distintos procedimientos,
se observa patrones especficos de las
respuestas leucocitarias. La concentracin
de leucocitos es el nmero de ellos que se
encuentra en un litro de sangre. La sangre
se deposita en un lquido para diluir
leucocitos que: destruye los eritrocitos y
deja intacto a los glbulos blancos.
Se revisa:
Frtis sanguneo: La extensin se prepara repartiendo uniformemente una gota

pequea desangre sobre un portaobjetos de manera que solo se deposite una
capa de clulas. Despus de teirlas, las extensiones se sangre se utilizan para.
Determinar las fracciones de nmero de los tipos de leucocitos. Para detectar
glbulos rojos anormales. Identificar ciertos parsitos.
Segn los leucocitos que salgan alterados podramos distinguir diferentes
patologas que se podran asociar.
Basfilos: Alergias
Neutrfilos y bandas: Bacterias y Hongos.
Monocitos: Anemia, Leucemia, talasemia.
Linfocitos: Virus
Eosinfilos: Parsitos

ECISALUD
Parmetros Valores Normales en Unidades

Adulto
Leucocitos 4.50-11.00 103/ul
Neutrfilos% 40-85 %
Linfocitos% 18-45 %
Monocitos% 3-10 %
Eosinfilos% 1-4 %
Basfilos% 0.3-4 %
Neutrfilos 1.80-7.70 103/ul
Linfocitos 1.00/4.80 103/Ul
Monocitos 0.80 103/ul
Eosinfilos 0.02-0.45 103/ Ul
Basfilos 0.002-0.10 10 3/ Ul
Eritrocitos H: 4.50- 6.30 10 6 / Ul
M: 4.20-4.40
Hemoglobina H:14-18 g/dl
M: 12-16
Hematocrito H: 42-52 %
M: 37-47
VCM 83-100 Fl
HCM 28-32 Pg
CHCM 32-34.50 g/dl
Plaquetas 150000-450000 X 103
Tabla 1.Valores Normales (UNAM, Facultad de medicina, departamento de Biologa Celular y Tisular, 2011-2012).
Tinciones (Wright y Giemsa)

Una tincin de Romanowsky consiste en azul de metileno (colorante bsico) y sus
productos de oxidacin, as como eosina (colorante cido). La accin combinada
de estos colorantes produce el efecto de Romanowsky y da una coloracin
purprica a los ncleos de los leucocitos y a los grnulos neutrfilos y de color
rosado a los eritrocitos.
OBJETIVO
1.El alumno conocer el funcionamiento de un laboratorio de hematologa, as
como las medidas de precaucin para su proteccin personal en cuanto al manejo
de las muestras de sangre, al ser considerarlas potencialmente infecto-
contagiosas.
2. El alumno conocer y aprender a manejar el material y equipo ms comn que
se utiliza en la realizacin de la biometra hemtica.
3. El alumno aprender a analizar y correlacionar el resultado de la biometra
hemtica con las manifestaciones clnicas que presente el paciente.
4. El alumno conocer las alteraciones morfolgicas ms frecuentes que se
presentan en las anemias.

ECISALUD
MATERIALES Y MTODO
Torundas alcoholadas
Sistema cerrado (Vacutainer)
Jeringas
Agujas
Tubo tapn lila con EDTA
Mtodo
Las determinaciones de la Biometra Hemtica, de preferencia se realizan con
sangre venosa, ya que la extraccin es ms fcil, se obtiene una cantidad
adecuada como para repetir cuantas veces sea necesario, la manipulacin y el
pipeteo es mucho ms fcil, sin embargo tambin se puede utilizar sangre capilar
o arterial.
La metodologa utilizada generalmente es por medio de sistema automatizado o
semiautomatizado de acuerdo a lo sealado por el profesor.
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente de acuerdo a rbrica
BIBLIOGRAFA
Flora MariaGarciaGonzalez.( Et al); Utilidad de la biometra hemtica en la prctica
clnica.Eritrocito; RevSanidMilitMex 2011; 65(6) Nov.-Dic: 294-300 citado: 27/11/13
Disponible :http://www.medigraphic.com/pdfs/sanmil/sm-2011/sm116f.pdf
M. C..Silvia Garca Gonzlez, M. C..Miguel ngel Villegas Gonzlez; Manual de

practicas de anlisis clnicos/hematologa I; Benemerita Universidad Autonoma de
Puebla Licenciatura: Qumico Farmacobiologo; Marzo 2006; citado: 27/11/13
Disponible: http://www.facultadcienciasquimicas.buap.mx
http://es.scribd.com/doc/16056439/BIOMETRIA-HEMATICA, Scribd, jun-03-2009.

Citado: 27/11/13
Grupo CTO, Manual CTO de medicina y ciruga, Hematologia. 8va edicin,2010-

98 pag.
ANEXOS
Estudio de caso: anemia.
Estudio de caso: Leucemias
Estudio de caso: Infeccione
PRACTICA # 4 QUIMICAS SANGUINEAS

ECISALUD
INTRODUCCIN
La qumica sangunea Bioqumica sangunea (QS/BS) es el examen bsico para
evaluar la funcin metablica renal, cardiaca, heptica y pancretica; por medio de
la medicin y reporte de aquellos componentes qumicos disueltos en sangre.
Parmetros bioqumicos
PARAMETROS BIOQUIMICOS VALORES DE REFERENCIA
(pueden variar segn el laboratorio)
Hombre Mujeres Nios
Glucosa 70-105 mg/dl 70-105 mg/dl 40-100 mg/dl
Ac. rico 4-8.5 mg/dl 2.5-7.5 mg/ dl 2.5-5 mg/dl
Urea 7-20 mg/dl 7-20 mg/dl 5-18 mg/dl
Creatinina 0.7-1.3 mg/dl 0.5-1.2 mg/dl 0.2-1 mg/dl
Bilirrubina Directa (BD) 0.1-0.3 mg/100ml
Bilirrubina total (BT) 0.3-1.0 mg/100 ml
Fosfatasa alcalina 30-120 U/L
Gamma GlutamilTranspeptidasa (GGT) 8-38 U/L 5-27 U/L -
Transaminasa glutmico oxalacetica 5-32 mU/ ml
(GOT/AST)
Transaminasa glutmico pirvica (GPT/ALT) 7-33 mU/ml
Colesterol 100-200 mg/100ml
HDL >45 mg/100ml >55 mg/100ml -
LDL 60-180 mg/100ml
Protenas totales 6.4-8.3 gr/dl
Albumina 3.5-5 gr/dl
Calcio 8.5-10.5 mg/100ml
Potasio 3.5-5 mmol/L
Sodio 135-145 mEq/L
Fosforo 2.9- 5.0 mg/ 100ml
Segn los componentes qumicos a analizar se dividen en lo siguiente:

QS3 Glucosa + Urea + Creatinina + Nitrgeno Ureico (BUN)
QS5 Glucosa + Urea + Creatinina + Nitrgeno Ureico (BUN) + Colesterol +
Triglicridos (TG)
QS6 Glucosa + Urea + Creatinina + Nitrgeno Ureico (BUN) + Colesterol +
Triglicridos (TG) + Ac. rico.
Adems de estos existen diversos parmetros 12, 15, 24, 27 (SMAC) sin embargo
las anteriormente mencionadas son las de gabinete, que van desde el estudio
bsico al estudio completo: cabe resaltar que aumentando el estudio de
componentes qumicos se prolongara el tiempo de espera para el resultado.
OBJETIVO

ECISALUD
Determinar valores srico de componentes qumicos sanguneos y relacionar al

diagnostico de posibles complicaciones hepticas, cardiacas, renales,
pancreticas o bien trastornos electrolticos.
MATERIALES Y MTODO
Muestra analizar: Suero.
Tubo vacutainer rojo o amarillo con gel separador.
Jeringa o punzocat
Torniquete
Torundas
Guantes
Recipiente rojo para RPBI
Centrifuga
Equipo espectrofotomtrico.
Se le pedir al paciente que acuda en ayunas en promedio de por lo menos 8 hrs

y no ms de 10 hrs.
Personal encargado deber colocarse los guantes y ubicar el sitio de puncin, de

preferencia en venas situadas en la flexura del codo.
Colocar el torniquete
Limpiar la zona con la torunda de adentro hacia afuera siguiendo la circunferencia
de un circulo imaginario o bien con giros de adentro hacia afuera.
Acceder a va venosa
Una vez que est en vena, sin retirar la jeringa o punzocat, se procede a soltar el
torniquete.
Realizar aspiracin
Extraer la jeringa o punzocat, y ejercer ligera presin en el rea con un algodn/
torunda, pidindole al paciente que lo mantenga con el brazo en flexin.
Vaciar la sangr en el tubo rojo c/ gel separador y mandarlo a laboratorio.
Depositar todo objeto punzocortante (aguja) en recipiente rojo de plstico para
RPBI.
Centrifugar a 3200 rpm por 15 minutos.
Montar la muestra en equipo espectrofotomtrico.
Analizar tiempos de ejecucin y resultados del analito.
ACTIVIDAD

ECISALUD

ANEXOS
Estudio de caso: diabetes
Estudio de caso: dislipidemias
Estudio de caso: hipertensin.
BIBLIOGRAFA
Laboratoriosvaldes.com [internet]. Coahuila: laboratoriosvaldes; 2013 [citado 20 de
noviembre de 2013]. Disponible en:
http://laboratoriosvaldes.com/servicios/analisis-clinicos/quimica-sanguinea.html
unan.edu [internet]. Managua: UNAN-Managua;2013 [citado 20 de noviembre de

2013]. Disponible en: http://www.unan.edu.ni/medicina/labmicro/index.php?
option=com_content&view=article&id=8&Itemid=10
consultorioencasa.blogspot [internet]. Consultorio en casa; 2013 [citado en 20 de

noviembre 2013]. Disponible en:
http://consultorioencasa.blogspot.mx/2012/04/interpretacion-de-la-quimica-
sanguinea.html
tuotromedico.com [internet]. Tuotromedico; 2013 [actualizado noviembre 2013;

citado 20 de noviembre de 2013]. Disponible en:
http://www.tuotromedico.com/temas/analisis_bioquimico.htm
seen.es [internet]. Espaa: seen; 2011 [citado 20 de noviembre de 2013].

Disponible en: http://www.seen.es/docs/apartados/303/Casos%20clinicos
%20diabetes.pdf
PRACTICA # 5 PERFIL HEPTICO

ECISALUD
INTRODUCCIN
El perfil heptico (PH) consiste en el anlisis de sangre con el fin de medir ciertos
componentes como enzimas, protenas y bilirrubina y as poder determinar si
existe alguna alteracin funcional a nivel del hgado.
Recordemos que el hgado desempea importantes funciones como la de
eliminacin de medicamentos, drogas u otras sustancias qumicas, adems de
que interviene en la descomposicin y almacenamiento de ciertas sustancias
como carbohidratos, lpidos y vitaminas.
Parmetros bioqumicos:
PARMETROS BIOQUIMICOS VALORES DE
REFERENCIA
(pueden variar segn el
laboratorio)
Transaminasa glutmico pirvica 7-33 mU/ml Determinar dao heptico
(GPT/ALT) Responsable del metabolismo de la alanina, cuya mayor
concentracin de la enzima se ubica en el hgado. Puede
referir: cirrosis, hepatitis, hemocromatosis hereditaria, uso de
frmacos hepatotoxicos, etc
Transaminasa glutmico 5-32 mU/ ml No es especifico de enfermedad heptica, pero sirve como
oxalacetica (GOT/AST) marcador de control junto a GPT, bilirrubina. Puede referir:
hepatitis alcohlica, hepatitis, cncer heptico, necrosis
heptica, pancreatitis aguda, etc
Gamma GlutamilTranspeptidasa 8-38 U/L en varones y 5- Puede elevarse en casos de cirrosis o litiasis biliar
(GGT) 27 U/L en mujeres
LDH 100-220 UI/L LDH: Marcador de destruccin celular sensible pero poco
especifico. Especficamente LDH-5 ya que procede
directamente de hgado y piel3.
Fosfatasa alcalina 30-120 U/L Concentraciones elevadas en hgado, vas biliares y huesos. En
relacin a hgado puede referir: enfermedad heptica
alcohlica.
Bilirrubinas totales 0.3-1.0 mg/100 ml A nivel del hgado a bilirrubina es conjugada por ac.
BI 0.2-0.9 mg/dl Glucoronico originando bilirrubina directa.
BD
0.1-0.4 mg/dl
Protenas totales 6.4-8.3 gr/dl
albumina gr/dl Es producida casi exclusivamente por el hgado. [Disminucin]
cirrosis heptica, sndrome nefrtico, malabsorcin, etc
OBJETIVO
Realizar pruebas de funcionamiento heptico en suero y relacionar los resultados
con el diagnostico.
MATERIALES Y MTODO
MUESTRA REQUERIDA: de 5 a 10 mL de sangre venosa sin anticoagulante.
Materiales:
- Jeringa estril para extraer 5-10 mL con aguja 21 X 1 o sistema de extraccin
al vaco.
- Torundas de algodn.
- Alcohol etlico (70%).

ECISALUD
- Marcador de vidrio.
- Torniquete.
- Tubos sin anticoagulante 13x100mm y tapn de hule o tubos del sistema de
extraccin al vaco.
- Gradilla para tubos.
- Guantes descartables.
Mtodo:
- Lavar y secar las manos y colocarse los guantes.
- Identificar el tubo de acuerdo a la solicitud.
- Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.
- Sentar cmodamente al paciente para la extraccin tomando en cuenta que el
rea de sangra debe contar con suficiente iluminacin.
- Seleccionar la vena apropiada para la puncin.
- Realizar asepsia con torunda de algodn humedecida con alcohol etlico al 70%
de adentro hacia fuera.
- Colocar el torniquete firmemente alrededor del brazo, y pedir al paciente que
abra y cierre la mano varias veces para favorecer la dilatacin de las venas.
- Proceder a puncionar la vena seleccionada.
- Colocar la aguja con el bisel hacia arriba sobre la vena a puncionar.
- Introducir la aguja en el centro de la vena y penetrar a lo largo de la vena de 1 a
1.5 cm.
- Tirar hacia atrs el mbolo de la jeringa muy lentamente para que penetre la
sangre en la jeringa hasta llenar con la cantidad de sangre necesaria. Si utiliza
sistema de sangrado al vaco introducir el tubo en el dispositivo (holder) de
manera que al ejercer presin se atraviese el extremo inferior de la aguja, para
que la sangre fluya hacia el tubo por efecto del vaco.
- Retirar torniquete tirando del extremo doblado y colocar una torunda de algodn
sobre la piel donde se encuentra oculta la punta de la aguja.
- Extraer la aguja con un movimiento rpido por debajo de la pieza de algodn,
pedir al paciente que presione firmemente la torunda durante 3 minutos con el
brazo extendido.
- Separar la aguja de la jeringa o del holder cuidadosamente, llenar los tubos

deslizando la sangre por las paredes del mismo.
- Esperar que la muestra se coagule a temperatura ambiente.
- Centrifugar la muestra a 3200 rpm por 15 minutos.
- Separar el suero del paquete globular.
- Analizar la muestra en equipo espectrofotomtrico.
- Discutir resultados y relacionarlos con el diagnostico clnico.

ECISALUD
FUENTES DE ERROR:
- Prolongada aplicacin del torniquete.
- Extraccin violenta de la sangre, que puede provocar hemlisis.
- Empleo de tubos mal lavados.
- Depositar la sangre en el tubo en forma violenta.
- Dejar los tubos con muestras destapados.
- Que el paciente no cumpla con las indicaciones de acuerdo al anlisis qumico a
realizar.
- Separacin inadecuada del cogulo antes de centrifugar (no poner en bao de
Mara).
- Centrifugacin inadecuada de la muestra.
ACTIVIDAD
ANEXOS
Estudio de caso: ictericia
Estudio de caso: hepatitis
Estudio de caso: cirrosis
BIBLIOGRAFA
valoresnormales.com [internet]. Valores normales; 2011 [actualizado 2013; citado

en 20 noviembre 2013]. Disponible en:
http://www.sanitas.es/sanitas/seguros/es/particulares/biblioteca-de-
salud/ginecologia/controles-analiticas/sin012109wr.html
drugs.com [internet]. Drugs.com;2013 [citado 20 de noviembre 2013]. Disponible

en: http://www.valoresnormales.com.ar/perfil-hepatico-hepatograma-
higado#proteinas_totales
adolfoneda.com [internet]. Adolfoneda; 2009 [actualizado 29 de noviembre 2009:

citado 20 noviembre 2013]. Disponible en: http://adolfoneda.com/lactato-
deshidrogenasa-ldh/
PRCTICA # 6 PERFIL RENAL Y URIANALISIS

ECISALUD
INTRODUCCIN
CIDO RICO
Mtodo enzimtico colorimtrico
El cido rico en los mamferos es el metabolito final del catabolismo de las bases
pricas y su elevacin est asociada a la gota, es decir, los reumatismos
hiperuricmicos. En los pacientes con tal disfuncin, aparecen cristales de cido
rico en las articulaciones y en los tendones, lo que origina las manifestaciones
reumticas caractersticas.
Niveles altos de cido rico estn tambin asociados a patologa renal por
retencin de productos nitrogenados, asocindose en estos casos a valores
tambin altos de urea y de creatinina.
OBJETIVO
Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de cido rico en
una muestra biolgica.
Establecer los valores de referencia de cido rico y comparar con el valor de
nuestra muestra problema a analizar.
Definir cuales son las principales patologas que se presentan si tenemos valores
altos o bajos de cido rico en una muestra biolgica.
Fundamento del mtodo

El cido rico es oxidado por la uricasa a alantona y perxido de hidrgeno que
en presencia de POD y 4-AF y DCPS forma un compuesto rosceo.
MATERIALES Y MTODO

ECISALUD
Muestra:
Suero, plasma u orina.
Orina: Diluir la orina al 1:10 con agua destilada, mezclar y seguir la tcnica.
Multiplicar el resultado por 10.
Material
1Micropipeta de 1 mL
1Micropipeta de 50 L.
1Piseta con agua desionizada o destilada
2Celdas de plstico de 3 ml
4 Tubos de vidrio de 13X100
Puntas para micropipeta.
Gradilla.
Equipo
Fotmetro con filtro de lectura de: 520 nm.
Centrfuga
Standard: Sol. c. rico 6.0 mg/dL (opcional de acuerdo al fabricante).
Procedimiento y tcnica: (opcional de acuerdo al fabricante).
Lmite de Seguridad Biolgica:

Suero o plasma
Mujeres Hombres
mg/dL 2.5 - 6.0 3.4 -7.0
Orina de 24 horas
mg/dL 250 - 750
mmol/L 14,872 - 44,616
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia,

considerando edad, sexo, estado nutricional y dems factores.
CONSIDERACIONES IMPORTANTES:
-Si la muestra de orina es turbia, calentarla a 60C para disolver el cido rico.
-El cido rico en suero es estable de 3 a 5 das en T de 2-8C.
-Los anticoagulantes como la heparina, EDTA, oxalato o fluoruro no afectan los
resultados de la prueba.
-Se sugiere procesar junto con las muestras algn suero control valorado con
niveles normal y anormal que le permitir tener un control de la exactitud y
precisin de los resultados.

ECISALUD
-La hemlisis (hasta 100mg/dL de hemoglobina) y la bilirrubina hasta

20mg/dL, no interfieren en los resultados.
-El estndar es muy vido a contaminarse, cuidar mucho su manipulacin, ya que
los agentes reductores tienden a disminuir la respuesta del color, mientras que los
oxidantes generan aparicin de color, aumentando las lecturas de los blancos.
-Los detergentes son inhibidores enzimticos, asegrese de que el material de
vidrio este perfectamente lavado y enjuagado con agua desionizada.
CONTROL DE CALIDAD
SPINTROL. Normal y Patolgico. Sueros control valorados.
CREATININA
Mtodo colorimtrico-cintico
La creatinina es un producto final del metabolismo muscular. Se origina a partir de

la creatina por prdida de una molcula de agua. A su vez, la creatina se produce
por hidrlisis del fosfato de creatina, por accin de la creatin-fosfo-kinasa (CPK),
apareciendo como metabolitos de dicha reaccin el fosfato energtico y la
creatina. El radical fosfato puede aportar energa directamente por dicha reaccin
o a travs de su acoplamiento a una molcula de ADP para formar ATP y posterior
hidrlisis por accin de ATPasa.
La eliminacin de creatinina en el cuerpo humano tiene lugar casi exclusivamente
a travs de la filtracin glomerular, siendo un importante ndice del funcionalismo
renal. A diferencia de la urea, la eliminacin de creatinina por la orina no viene
afectada por la diuresis, al mismo tiempo que para una misma persona es muy
constante su eliminacin diaria con casi independencia de la dieta alimenticia,
siendo la masa muscular el factor condicionante ms directo de su excrecin total
por da. En resumen, podemos decir que la eliminacin de creatinina en un
intervalo de 24 horas es un valor constante, dependiente principalmente de la
masa muscular del individuo, y que por otro lado el clculo del aclaramiento de la
creatinina ser un parmetro directo del funcionalismo renal.
OBJETIVO
Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de creatinina en
una muestra biolgica.
Establecer los valores de referencia de la creatinina y comparar con el valor de
altos o bajos de creatinina en una muestra biolgica.

ECISALUD
Fundamento del mtodo.

La reaccin qumica aplicable para fotometra es la descrita por Jaffe, basada en
el color anaranjado que se produce al reaccionar la creatinina con el picrato
alcalino. Hay varias substancias en el suero y orina que actan como cromgenos
inespecficos, lo que es un problema principalmente para el clculo del
aclaramiento. Por este motivo tiene una gran importancia la adecuacin de todas
las variables de la reaccin, muy especialmente el pH, con el fin de obtener la
mxima sensibilidad para la creatinina y la mnima interferencia de cromgenos.
Adaptando la reaccin a una medida cintica, se logra una gran especificidad
debido a que la creatinina reacciona con el picrato alcalino con ms rapidez que
los cromgenos (metilguanidina, picramato,), por lo que las medidas del
incremento de color en un breve perodo de tiempo inicial de la reaccin valorarn
principalmente creatinina, con poca influencia de los cromgenos inespecficos,
por esto es recomendable, de ser posible, la determinacin cintica.
MATERIALES Y MTODO
Muestra
Suero o plasma heparinizado.
La creatinina en suero y plasma tiene una estabilidad de al menos de 24 horas a
2-8C.
Orina.
Diluir previamente a con agua destilada, multiplicar el resultado por la dilucin.
Reactivos (opcional de acuerdo al fabricante)
Material necesario
1 Micropipeta de 1 mL
1 Micropipeta de 200 L.
1 Piseta con agua desionizada o destilada
2 Celdas de plstico de 3 ml
Puntas para micropipeta
Gradilla.
Equipo
Fotmetro termostable a 37C con filtro de 490-510 nm.
Centrfuga
PROCEDIMIENTO
De acuerdo al inserto

ECISALUD
Clculos
Valor de referencia Mujeres 70 130 mL/min Hombres 70 140 mL/min
Linealidad
Hasta valores de 15 mg/dL (1326 mol/L)
Para valores superiores se deber diluir a 1:2 con sol. salina, multiplicando el
resultado por 2.
Lmite de Seguridad Biolgica

Suero. 0.7 - 1.4 mg/dL (61.8 - 132.6 mol/L)
Orina. 15 a 25 mg/Kg/24 h
NOTA: En orina debe multiplicar los valores de referencia por los Kg que pesa el
paciente.
DEPURACIN
Hombres: 97 - 137 mL/min
Mujeres: 88 - 128 mL/min
OBSERVACIONES
La hemlisis interfiere en el test.
No utilizar sueros lipmicos.
CONTROL DE CALIDAD
SPINTROL. Normal y patolgico.
UREA
MTODO CINTICO "UREASA-GLDH"

ECISALUD
Urea y amonaco
La concentracin sangunea de amoniaco es superior en los infantes que, en los

adultos, debido a que el desarrollo de la circulacin heptica se termina despus
del nacimiento. La hiperamonemia es una entidad que se presenta con frecuencia
debido a defectos congnitos en el ciclo de la urea. El error innato del
metabolismo ms comn es la deficiencia en ornitina transcarbamilasa. La
hiperalimentacin es una causa mucho ms frecuente de hiperamonemia en
infantes. Con frecuencia, se diagnostica el sndrome de Reye por un amoniaco
sanguneo elevado en ausencia de otra causa demostrable.
Los pacientes adultos muestran elevadas concentraciones de amonaco
sanguneo en las etapas terminales de: la cirrosis heptica, la falla heptica y la
necrosis del hgado aguda y subaguda. Se presagia el comienzo de la
encefalopata heptica por una elevacin en el amonaco sanguneo. Se ha
demostrado que la medicin en lquido cefalorraqudeo (LCR) de la glutamina,
correlaciona bien con el desarrollo de la encefalopata heptica. Tambin se puede
utilizar la medicin de la glutamina en el LCR, para diferenciar la encefalopata
heptica de la sptica. Sin embargo, no es comn la medicin de la glutamina en
el LCR. La excrecin de amonaco urinario se eleva con la acidosis y se disminuye
en la alcalosis, puesto que la formacin de sales de amonio es un mecanismo
importante para excretar el exceso de iones hidrgeno. Daos en los tbulos
renales distales, tal como ocurre en la falla renal, la glomerulonefritis, el
hipercorticoidismo y la enfermedad de Addison, conllevan a una excrecin de
amonaco disminuida sin presentar cambios en los niveles sanguneos de
amonaco.
Puesto que la urea se sintetiza en el hgado, en la enfermedad heptica sin dao
en la funcin renal, se presenta nitrgeno ureico srico bajo, aunque la relacin
urea a creatinina se puede conservar normal. La elevacin en el nitrgeno ureico
srico no implica necesariamente dao renal, puesto que la deshidratacin puede
llevar a concentraciones de nitrgeno ureico tan altas como 600 mg/L. En los
infantes que reciben una frmula alta en protenas pueden tener niveles de
nitrgeno ureico de 250 a 300 mg/L. Naturalmente, enfermedades como la
glomerulonefritis aguda, la nefritis crnica, el rin poliqustico y la necrosis renal
elevan el nitrgeno ureico.
OBJETIVO
Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de urea en una
muestra biolgica. Establecer los valores de referencia de la urea y comparar con
el valor de nuestra muestra problema a analizar. Definir cuales son las principales
patologas que se presentan si tenemos valores altos o bajos de urea en una
muestra biolgica.
Fundamento del mtodo.

ECISALUD
La ureasa cataliza la hidrlisis de la urea dando amonio y CO2. El amonio formado

se valora mediante una reaccin enzimtica (GLDH), pasando NADH a NAD + .
La disminucin de la absorbancia frente al tiempo es proporcional a la
concentracin de urea.
MATERIALES Y MTODO
Muestra
Suero o plasma heparinizado.
Reactivos
Proporcionados por el fabricante.
Material necesario
1 Micropipeta de 1 mL
1 Micropipeta de 200 L.
1 Piseta con agua desionizada o destilada
2 Celdas de plstico de 3 ml
Puntas para micropipeta.
Gradilla.
EQUIPO
Fotmetro termostable a 37C con filtro de 340 nm.
Centrfuga
Estndar Sol. Urea 50 mg/dl.
Linealidad
El mtodo es lineal hasta valores de 500 mg/dL (83.25 mmol/L)
Para concentraciones superiores se deber diluir la muestra a 1:2 con solucin
salina, multiplicando el resultado por 2.

Suero: de 15 a 45 mg/dL
Orina: de 20 a 35 g/24 horas

ECISALUD
NOTAS:
Muestra: Suero, plasma o orina..
La orina diluirla a 1:50 con agua destilada.
No emplear suero o plasmas turbios o hemolizados.
CONTROL DE CALIDAD
SPINTROL. Normal y patolgico
EXAMEN GENERAL DE ORINA (EGO)
Los anlisis de orina realizados en el laboratorio clnico, puede proporcionar una

informacin amplia, variada y til del rin de un individuo y de las enfermedades
sistmicas que pueden afectar este rgano excretor. Por medio de este anlisis,
es posible elucidar tanto desrdenes estructurales (anatmicos) como desrdenes
funcionales (fisiolgicos) del rin y del tracto urinario inferior, sus causas, y su
pronstico. La realizacin cuidadosa del examen de orina, por parte del
laboratorio, ayuda al diagnstico diferencial de numerosas enfermedades del
sistema urinario. Usualmente, los datos de laboratorio obtenidos por medio de este
anlisis, se logran sin dolor, dao o tensin para el paciente. Esta es la razn por
la cual, la realizacin e interpretacin correcta del anlisis de orina, por parte del
laboratorio permanecer siempre como una herramienta esencial de la prctica
clnica.
En la actualidad, se practican tres tipos de exmenes de orina: anlisis de orina

por tira hmeda, empleado generalmente por los mdicos en sus consultorios y
por los pacientes en sus casas; tamizaje de anlisis hmedo de la orina,
comnmente llamado anlisis bsico o rutinario de orina; y citodiagnstico de la
orina, que es una evaluacin citolgica especializada del sedimento urinario que
correlaciona con los anlisis realizados por medio de la tira reactiva. El anlisis de
orina realizado con la tira hmeda es un ensayo de primera etapa para la
deteccin y monitoreo de pacientes con anormalidades qumicas. Los pacientes
diabticos a menudo monitorean permanentemente su propia enfermedad,
buscando signos de glucosuria, proteinuria, e infecciones del tracto urinario,
mediante pruebas realizadas en casa.
El anlisis de orina hmedo o rutinario, proporciona, a costos razonables, un

tamizaje adecuado para la deteccin de anormalidades qumicas y morfolgicas
presentes en la orina. Este procedimiento se compone de dos partes: 1) un

anlisis macroscpico, en el cual se determinan las caractersticas fisicoqumicas
(apariencia, gravedad especfica y la medicin de los constituyentes qumicos por
medio de la tira), y 2) un examen microscpico del sedimento, en campo claro o
contraste de fases, para verificar hematuria, piuria, cilindruria, cristaluria, y otros
signos. Por medio de este simple examen de orina, un uromicroscopista

ECISALUD
experimentado puede detectar y monitorear muchas entidades que afectan al

rin y al tracto urinario inferior.
Recientemente, el citodiagnstico de la orina ha ganado aceptacin mdica como
un anlisis nuevo, ms sensible en el diagnstico de ciertas patologas renales y
del tracto urinario inferior. Como este anlisis requiere mayor inversin de tiempo
debido a la preparacin de coloraciones, debe reservarse para pacientes
sintomticos con enfermedades renales, del tracto urinario inferior, o neoplasias.
OBJETIVO
Establecer el mtodo adecuado de recoleccin de especimenes de orina para un
anlisis especfico.
Discutir las propiedades fsicas ms importantes de la orina y sus relaciones con la
enfermedad.
Identificar los constituyentes qumicos ms importantes de la orina, como
cuantificarlos y como confirmar su presencia.
Describir mtodos adecuados para estandarizacin de los especimenes de orina y
de los hallazgos microscpicos ms comunes.
Fundamento
El anlisis de orina rutinario, se basa en un procedimiento que se compone de dos
partes: 1) un anlisis macroscpico, en el cual se determinan las caractersticas
fisicoqumicas (apariencia, gravedad especfica y la medicin de los constituyentes
qumicos por medio de la tira como protenas, glucosa, cetonas, pH), y 2) un
examen microscpico del sedimento, en campo claro o contraste de fases, para
verificar hematuria, piuria, cilindruria, cristaluria, y otros signos.
MATERIALES Y MTODO
Muestra
El cuidado en la recoleccin de la orina y su entrega rpida en el laboratorio, son
cruciales para obtener una informacin ptima. La orina debe ser colectada en un
recipiente limpio, estril, que tenga un cierre seguro para prevenir posibles
derramamientos, evaporacin o contaminacin.
Estos recipientes deben rotularse con el nombre del paciente, fecha y hora de
recoleccin.
Para que los datos del uroanlisis sean precisos, es esencial que la orina sea
examinada dentro de las dos horas siguientes a su recoleccin o preservada de
alguna manera, usualmente por refrigeracin (2 a 8 C). Se pueden usar
fijadores o preservativos adecuados, siempre y cuando se entiendan claramente

sus efectos sobre la orina y sobre los ensayos en ella realizados. Si la orina es
recolectada sin preservativos y permanece a temperatura ambiente se empezar a
descomponer. Los preservativos actan impidiendo los cambios qumicos
asociados a la descomposicin y previniendo el crecimiento y metabolismo de los
microorganismos. El tolueno, fenol, timol y preservativos cidos son usados

ECISALUD
frecuentemente para los anlisis qumicos de la orina. Otras formas de

preservacin incluyen el ajuste del pH y la proteccin de la luz. Para preservar las
estructuras celulares puede emplearse etanol (95%), hay tambin disponibles
fijadores comerciales como Mucolex. Los laboratorios son responsables de la
seleccin adecuada del tipo y cantidades de preservativo de la de orina necesarios
para preservar las estructuras celulares.
Para cuantificar diversos aspectos de la funcin renal, frecuentemente se emplean
anlisis de orina recolectada durante un determinado perodo de tiempo.
La orina debe reflejar la excrecin en un intervalo de tiempo medido con precisin.
Estos especmenes no deben incluir la orina que se encuentra en la vejiga antes
de la iniciacin de la recoleccin. En la toma de muestras de orina de 24 horas, se
debe desechar la orina de la primera miccin de la maana del da en el cual se
inicia la recoleccin y recolectar toda la orina producida durante 24 horas,
incluyendo la primera orina de la maana del segundo da.
La primera orina de la maana es usualmente la mejor para el anlisis porque es
la orina ms concentrada.
Las muestras deben estar libres de secreciones vaginales u otra clase de
partculas extraas.
Este procedimiento puede modificarse si no es necesario el examen bacteriolgico
de la muestra. La recoleccin del chorro medio sin el lavado previo y sin usar un
envase estril, proporciona una muestra satisfactoria para el examen de rutina.
Reactivos
Reactivo (Tincin de Sternheimer-Malbin) comercial
Para sedimento urinario. Facilita la identificacin de las clulas.
Mtodo
Se vuelve a suspender el sedimento en el tubo de centrifuga y se aade una gota
del colorante; se espera tres minutos. Luego se pone una gota sobre un
portaobjetos, se cubre y se examina al microscopio.
Resultados
Hemates: Color rosado
Leucocitos: Prpura oscuro con ncleo rojo oscuro.
Granulaciones: Citoplasmticas violetas.
Clulas brillantes: Son leucocitos neutrfilos incoloros o de color azul claro.
Son caractersticos de polinefritis.
Clulas renales: Ncleo prpura oscuro, con un estrecho citoplasma de color

prpura-anaranjado.
Clulas vesicales: Ncleo azul oscuro y citoplasma azul claro.
Clulas epiteliales de descamacin: Ncleo prpura, citoplasma rosado o violeta.
Cilindros hialinos: Rosado o prpura claro.

ECISALUD
Cilindros finamente granulosos: Cilindros rosados, con granulaciones de color

prpura.
Cilindros grasos: Color rosado, gotas de grasa incoloras.
Cilindros hemticos: Cilindro rosado, hemates incoloros o lila claro.
Cilindros creos: Prpura claro u oscuro.
EQUIPO
Microscopio ptico.
Centrfuga clnica.
Equipo de urianalisis
Nota:
El alumno debe consultar el manual del microscopio ptico y centrifuga para saber
cuales son las instrucciones de operacin, datos y caractersticas de
funcionamiento de los instrumentos.
MATERIAL
Envases desechables para orina.
1 probeta graduada de 50 ml.
4 tubos para centrifuga de 13 x 100mm.
2 tubos de ensayo de 13 x 100mm.
4 portaobjetos.
4 cubreobjetos.
2 pipetas serolgicas graduadas de 10 ml.
2 pipetas Pasteur.
2 bulbos de goma.
Tiras reactivas comerciales.
Colorante de Sternheimer-Malbin.
PROCEDIMIENTO
EXAMEN FSICO DE LA ORINA

Volumen (opcional)
El volumen urinario est influenciado por la ingesta de lquidos; por los solutos
excretados, principalmente, sodio y urea; por la prdida de fluidos en la
transpiracin y la respiracin; y por el estado de los sistemas cardiovascular y
renal. Normalmente un adulto excreta de 750 a 2000 mL en 24 horas. Aunque el
volumen de orina de un espcimen recolectado al azar no tiene importancia
clnica, el volumen del espcimen recibido debe ser anotado para efectos de
documentacin y estandarizacin.
Olor.

ECISALUD
Una orina normal fresca no tiene mal olor. Un olor desagradable, puede indicar
que el espcimen es demasiado viejo para obtener un anlisis preciso. Un olor
ftido en un espcimen recolectado desde hace ms de dos horas (y no
preservado o refrigerado) indica que el espcimen es inadecuado. El olor puede
tambin dar seales de ciertas anormalidades de la orina. Un olor parecido al
amoniaco, es sugestivo de presencia de bacterias degradadoras de la urea, un
olor a frutas indica la presencia de acetona (cetonas), un olor dulce es sugestivo
de la presencia de glucosa u otros azcares, un olor ftido es sugestivo de pus o
inflamacin. El olor es importante en la deteccin clnica de la enfermedad llamada
orina de miel de maple (un defecto metablico congnito).
Apariencia (color y turbidez).

El color de la orina esta determinado, en gran medida, por su grado de
concentracin. Las orinas normales varan ampliamente de colores, desde
incoloras hasta amarillo oscuro. La interpretacin del color es subjetiva y vara
segn el laboratorio que la examine. Para que el analista describa adecuadamente
el color de la orina, puede emplear como puntos de referencia una escala
estandarizada de colores, evitando el uso de trminos ambiguos como pajizo o
sangriento.
La orina roja es, tal vez, la coloracin de mayor importancia clnica. Este color
puede ser producido por hemoglobina urinaria o mioglobina, eritrocitos intactos,
eritrocitos hemolizados, o hemoglobina libre (hemlisis). En la glomerulonefritis
aguda el color caracterstico de la orina es pardo rojizo. Normalmente una orina
fresca es clara. Cuando la orina se deja reposar, se precipitan cristales amorfos,
generalmente uratos, produciendo turbidez. La turbidez de la orina debe ser
registrada y explicada mediante la evaluacin microscpica.
Gravedad especfica.
La gravedad especfica de la orina es una medida parcial de la capacidad del rin
para concentrar orina. Su rango normal es de 1.003 a 1.035 g/mL. Los valores
iguales o superiores a 1.020 indican una buena funcin renal y la excrecin de una
cantidad aumentada de solutos disueltos excretados por los riones. Valores de
densidad especfica iguales o superiores a 1.035 indican la presencia de solutos
extraos, lo cual debe ser investigado. Una disminucin de la gravedad especfica
se observa en pacientes quienes usan diurticos.
Las sustancias de alto peso molecular afectan la gravedad especfica en un grado
mayor que la producida por simples cristaloides. Esto es importante cuando la
orina contiene molculas grandes como glucosa, protenas o medios de contraste
radiogrficos. Cuando se presentan niveles elevados de glucosuria o proteinuria,
es necesario aplicar factores de correccin para ajustar la gravedad especfica a
un valor ms representativo; se debe restar 0.004 por cada 10 g/l de glucosa y
0.003 por cada 10 g/l de protena. Valores de 1.040 o superiores estn asociados
con la presencia de medios de contraste radiogrficos o preservativos.
La gravedad especfica se puede medir empleando un hidrmetro y un recipiente
apropiado. El uso de los hidrmetros tiene varias limitaciones: 1) requieren un

ECISALUD
volumen grande de orina (10 a 15 mL); 2) estn calibrados para ser usados a 20
C, si la orina no est a esta temperatura de referencia se deben aplicar factores
de correccin; 3) los hidrmetros no pueden ser recalibrados. Por estas razones,
los laboratorios ya no emplean estos elementos.
La mayora de los laboratorios poseen refractmetros que relacionan la densidad
de una solucin con la gravedad especfica. El uso de estos refractmetros tiene
algunas ventajas: 1) requieren solo una o dos gotas de orina; 2) tienen la
temperatura compensada; 3) las lecturas estn menos afectadas por la densidad
que las de los urinmetros; y 4) poseen un tornillo para calibrar a cero.
Mtodo de la tira reactiva.

Las tiras reactivas disponen de un mtodo colorimtrico indirecto para medir la
gravedad especfica. Este mtodo usa una tira que contiene un electrolito
pretratado que muestra un cambio de pH de acuerdo a la concentracin inica de
la orina. Este ensayo es rpido, sencillo y no requiere equipos adicionales.
Osmolalidad.
El rin normal es capaz de producir orina con un rango de 50 a 1200 mOs/Kg.
Los rangos de la osmolalidad en orina oscilan desde 1/6 a cuatro veces la
osmolalidad del suero normal (280-290 mOs/Kg). La osmolalidad es medida por
un osmmetro.
La osmolaridad est determinada por el nmero de partculas por unidad de masa,
mientras la gravedad especfica es un reflejo de la densidad (tamao o peso) de
las partculas en suspensin.
Generalmente la gravedad especfica y la osmolaridad son directamente
proporcionales de un modo lineal, aunque hay excepciones importantes. Por
ejemplo, si a un paciente se le administran medios de contraste yodados por
pielografa intravenosa, la gravedad especfica puede elevarse hasta 1.070 o
1.080, mientras que la osmolalidad permanecer dentro de los lmites normales.
Las partculas de contraste tienen una masa lo suficientemente grande para elevar
la gravedad especfica, pero hay muy pocas molculas presentes que puedan
producir un notable incremento en la osmolalidad.
EXAMEN QUMICO DE LA ORINA
Anlisis por tira reactiva.

Los anlisis por tira reactiva han permitido a los laboratorios de uroanlisis
producir resultados qumicos semicuantitativos de una manera rpida, exacta y
eficiente. En general, los anlisis de orina adecuadamente realizados por medio
de tiras reactivas, son sensibles, especficos y econmicos.
Los anlisis realizados por medio de tiras reactivas deben efectuarse en orinas
bien mezcladas y equilibradas a la temperatura ambiente. Cada parmetro
qumico debe ser evaluado en un intervalo de tiempo especfico, de acuerdo a lo
indicado en las instrucciones del fabricante. Deben tomarse del envase, solamente

ECISALUD
el nmero de tiras requerido para los anlisis inmediatos y el envase debe taparse
nuevamente asegurando que la tapa quede bien ajustada. Las tiras reactivas
deben ser almacenadas en un lugar fresco (no refrigeradas). El medio ambiente
debe estar libre de humedad. Nunca se deben usar tiras para orina caducadas o
expuestas al aire.
Despus de sumergir la tira reactiva en la orina, se debe remover el exceso de
orina golpeando la tira suavemente en el borde del recipiente que contiene el
espcimen. Se debe comparar individualmente la reaccin de cada zona reactiva
con su correspondiente en la carta de colores, bajo una iluminacin adecuada. Los
resultados positivos de las tiras reactivas pueden requerir confirmaciones por
mtodos qumicos y microscpicos. La informacin proporcionada por los
fabricantes debe ser revisada para identificar fuentes de inhibidores y resultados
falsos positivos y negativos.
pH Urinario.
Aunque el mtodo estndar para la medicin del pH emplea electrodos de vidrio,
el pH urinario, usualmente, es medido con indicador de papel, debido al hecho de
que pequeos cambios en el pH son de poca importancia clnica. La mayora de
los laboratorios de uroanlisis emplean tiras reactivas multitest con dos
indicadores, rojo de metilo y azul de bromotimol. Estos indicadores proporcionan
un rango de pH de 5.0 a 9.0, el cual se manifiesta por un cambio de color de
naranja (cido) a verde y azul (alcalino). El rango de pH urinario es 4.7 a 7.8. Las
muestras de orina extremadamente cidas o alcalinas, usualmente indican
especmenes mal recolectados. El pH es importante para el manejo clnico de las
piedras o cristales.
Protenas (opcional)
Las personas sanas pueden tener una excrecin diaria de protenas de 100
mg/da, una fraccin muy pequea del contenido de protenas plasmticas. La
mayora de la protena en la orina es albmina que pasa la membrana glomerular,
pero tambin pueden estar presentes protenas de peso molecular pequeo como
las globulinas. Una vez filtradas las protenas son casi completamente
reabsorbidas en el tbulo proximal. La proteinuria, por lo tanto, puede ser el
resultado tanto de un incremento en la filtracin como de una disminucin en la
reabsorcin (funcin tubular). Las tiras reactivas son un procedimiento de tamizaje
para la proteinuria. Como la especificidad de las tiras reactivas est limitada a la
deteccin de albmina, es altamente recomendable que el laboratorio procese
simultneamente una prueba por tira reactiva y una prueba de precipitacin por
cido para la deteccin de todos los tipos de protenas. Las tiras reactivas son
sensibles al pH y dependen de la presencia de protenas para la generacin de
color. La presencia de la protena en la tira cambia el pH del medio de contraste
impregnado en la zona reactiva, producindose el cambio de color pH 3.

ECISALUD
Un resultado positivo o dbilmente positivo debe ser confirmado por otros mtodos
ms especficos como el cido tricloroactico o el cido sulfosaliclico.
Un resultado dbilmente positivo y uno fuertemente positivo puede indicar la
presencia de frmacos o protenas de Bence Jones.
Azcares.
1.Ensayos enzimticos.
El ensayo de la tira reactiva es un excelente anlisis especfico para glucosa.
Detecta la oxidacin de la glucosa a cido glucnico:
La tableta Clinitest (Ames Divisin) brinda la posibilidad de detectar otros

azcares. Este es un ensayo basado en la reduccin del cobre que mide el total
de sustancias reductoras presentes en la orina. Adems de glucosa, el Clinitest
puede detectar azcares como galactosa, lactosa y pentosa.
Cetonas.
El trmino cuerpos cetnicos incluye tres componentes qumicos diferentes pero
muy relacionados: cido acetoactico, cido beta hidroxibutrico y acetona.
Los ensayos realizados por medio de tiras reactivas emplean la reaccin de
nitroprusiato de sodio que detecta acetona y cido acetoactico pero no beta
hidroxibutrico, el cuerpo cetnico primario. Es importante saber que el reactivo de
nitroprusiato de sodio reacciona principalmente con el cido acetoactico; la
acetona tiene solo un 20% de reactividad comparada con el cido acetoactico:

ECISALUD
La determinacin de cetonas es importante en el monitoreo de la diabetes y de la

cetoacidosis y debe realizarse siempre que se determinen azcares.
Sangre y mioglobina.
Una orina roja indica usualmente la presencia de eritrocitos, hemoglobina o
mioglobina. La hematuria, a menudo, representa una combinacin de eritrocitos
intactos (ms de 5 por campo de alto poder), eritrocitos fragmentados y
hemoglobina libre. La hematuria gruesa o macroscpica implica hemorragia o
sangrado fresco, lo que, en un medio de orina cida, da como resultado una
apariencia de roja a parda, turbia, o ahumada.
El mtodo empleado por la tira reactiva para determinar hemoglobina o mioglobina
se fundamenta en una actividad semejante a la de las peroxidasas:
Un ensayo positivo indica la presencia de hematuria, hemoglobinuria o

mioglobinuria, siendo necesario un anlisis microscpico para confirmar la
presencia de eritrocitos. La presencia en la orina de agentes oxidantes como los
yoduros y bromuros, puede causar resultados falsos positivos; grandes cantidades
de cido ascrbico (usado en algunos antibiticos) pueden producir resultados
falsos positivos en algunas tiras reactivas.
La mioglobina es una porfirina ferrosa similar a la hemoglobina; se encuentra,

comnmente, en la orina en pacientes con traumas severos que involucran
destruccin muscular. Cuando la mioglobina es liberada a la circulacin, es
rpidamente excretada por el rin. Al igual que la hemoglobina, su presencia
producir orinas de apariencia rosada a roja.
Bilirrubina.
Orinas espumosas, de color amarillo a pardo, u oscuras son sugestivas de la
presencia de bilirrubina conjugada. La orina normal no contiene bilirrubina. Los
pacientes ictricos con enfermedad hepatocelular como hepatitis o enfermedad
obstructiva como cirrosis biliar pueden tener bilirrubina conjugada en la orina.
El mtodo empleado por las tiras reactivas para determinar bilirrubina se basa en
la reaccin de diazoacin.

ECISALUD
Los resultados negativos de orinas sospechosas y los resultados positivos

cuestionables provenientes de orinas coloreadas, deben ser confirmados
empleando tabletas de Ictotest (Ames Division, Miles Laboratories). El Ictotest
emplea la misma reaccin de diazoacin que las tiras reactivas. Se pueden
encontrar resultados falsos negativos, en orinas no frescas porque la bilirrubina
urinaria puede hidrolizarse u oxidarse por accin de la luz.
Urobilingeno.
El urobilingeno es un compuesto coloreado, resultado de la reduccin de la
bilirrubina por accin de las bacterias en el intestino. Las orinas normales
contienen pequeas cantidades de urobilingeno. El urobilingeno se encuentra
disminuido en nios deficientes en bacterias intestinales; en pacientes despus de
la administracin de antibiticos que reducen la flora intestinal, y en pacientes con
enfermedades obstructivas hepticas. Se encuentra un aumento del urobilingeno
en pacientes con anemias hemolticas (aumento de formacin de bilirrubina) y
disfuncin heptica. El mtodo empleado por las tiras reactivas para la
determinacin del urobilingeno vara segn el fabricante. Algunos emplean la
reaccin de Erlich, usando p dimetilaminobenzaldehdo en una reaccin simple de
color con el profobilingeno. Esta reaccin no es especfica para urobilingeno,
pudindose encontrar resultados falsos positivos con otros compuestos que
tambin reaccionan con el reactivo de Ehrlich. Otros emplean una reaccin
especfica para el urobilingeno: el urobilingeno reacciona con un compuesto de
diazonio producindose un color rojo. Para la determinacin del urobilingeno es
necesario un espcimen fresco porque el compuesto es sensible a la luz. El
espcimen preferido par la determinacin cuantitativa del urobilingeno urinario es
una orina recolectada durante las dos primeras horas de la tarde. Este tiempo de
recoleccin se debe a los patrones de excrecin diurna del urobilingeno.
Nitritos.
El ensayo de nitritos es empleado en los laboratorios de uroanlisis para detectar
bacteriuria. El mtodo empleado en las tiras reactivas para determinar nitritos se
basa en la reduccin de nitratos a nitritos por la accin enzimtica de ciertas
bacterias presentes en la orina. En un pH cido los nitritos reaccionan con el cido
p-arsanlico formando un compuesto de diazonio, el cual a su vez reacciona con
N-(1- naftil) etilndiamina produciendo un color rojo. El ensayo de nitritos debe ser
realizado en especmenes recolectados en la primera orina de la maana o en una
muestra de orina que haya sido recolectada despus de 4 horas o ms, a partir de
la ltima evacuacin de la vejiga, con el fin de permitir que durante este tiempo los
microorganismos metabolicen el nitrato dentro de la vejiga. En orinas pasadas o
viejas, el ensayo de nitritos puede ser positivo como resultado de la contaminacin
con bacterias despus de la miccin. La prueba de nitritos es especfica para
organismos gram negativos, sin embargo, se pueden obtener resultados falsos
negativos si estn presentes microorganismos como enterococos, estreptococos o
estafilococos.

ECISALUD
Esterasa leucocitaria.
La presencia de leucocitos (piuria) es un indicador de inflamacin clnicamente
importante. El mtodo empleado para la determinacin de leucocitos intactos y
lisados en las tiras de orina est basado en la presencia de esterasas
intracelulares. Estas enzimas catalizan la hidrlisis de los steres, liberando
componentes que son luego empleados en una reaccin de color. La intensidad de
la reaccin de color es directamente proporcional a la cantidad de leucocitos
presentes en el espcimen. La presencia de tricomonas y agentes oxidantes
pueden producir falsos positivos.
Melanina (opcional)
Las orinas normales no contienen melanina. La melanina se encuentra en orinas
de pacientes con melanoma maligno. Los pacientes con esta neoplasia maligna
excretan precursores incoloros de melanina (melangenos), los cuales al ser
expuestos al aire se polimerizan formando un pigmento oscuro de melanina. Los
anlisis para tamizaje emplean cloruro frrico que oxida los melangenos a
melanina, la cual vuelve la orina a un color pardo oscuro.
EXAMEN MICROSCPICO DE ORINA

Una identificacin microscpica precisa del sedimento urinario es importante para
el reconocimiento temprano de infecciones, procesos inflamatorios, y neoplasias
que pueden afectar el tracto urinario. Est en debate s todos los especmenes de
orina se deben someterse rutinariamente al anlisis microscpico, el cual exige
mayor inversin de tiempo. En su lugar, la mayora de los trabajadores del
laboratorio, estn de acuerdo en que el examen microscpico de orina solo debe
practicarse a pacientes sintomticos, cuando el mdico lo requiera
especficamente y cuando se encuentre un anlisis macroscpico anormal, es
decir, cuando se encuentre hematuria, proteinuria o piuria (resultado de nitratos o
esterasa positivos).
Microscopa de campo claro de una orina no teida.

La microscopa de campo claro no coloreada emplea luz reducida para delinear
los elementos ms translcidos de la orina, como, cilindros hialinos, cristales y
filamentos de moco. La identificacin precisa de leucocitos, macrfagos, clulas
del epitelio tubular renal, y clulas que contienen inclusiones virales puede ser
muy difcil en preparaciones no coloreadas. Para confirmar los resultados deben
emplearse tcnicas citolgicas y preparaciones teidas.
Procedimiento
La orina debe examinarse mientras est fresca, algunas clulas y cilindros pueden
desintegrarse en un lapso de una a tres horas. La refrigeracin de 2 a 8 C por 48
horas, usualmente previene la desintegracin de las clulas y entidades
patolgicas. Con propsitos de estandarizacin, cada espcimen de orina debe
concentrarse de diez a veinte veces. El examen se realiza de la siguiente manera:

ECISALUD
1. Mezcle bien el espcimen.

2. Ponga un volumen fijo (10, 12, 15 mL) de orina en un tubo de centrfuga
graduado.
3. Centrifugue a 1500 rpm o aproximadamente 80 G por 5 minutos.
4. Extraiga el sobrenadante por decantacin cuidadosa o aspiracin hasta un
volumen fijo: 1ml y 0.4 mL, son los ms comunes. Resuspenda el sedimento
golpeando suavemente en el fondo del tubo.
5. Ponga una gota el sedimento resuspendido en un rea de una lmina
estandarizada.
6. Examine con bajo poder (100x) y luz atenuada. Ajuste el enfoque fino
permanentemente mientras se explora al azar el rea cubierta. Durante la revisin
evale el espcimen en busca de clulas epiteliales transicionales y escamosas,
cristales, moco, bacterias, levaduras y artefactos. Elabore el reporte de acuerdo a
los protocolos del laboratorio. La identificacin posterior de cilindros, clulas
epiteliales renales, eritrocitos y leucocitos debe ser refinada empleando el objetivo
de alto poder.
7. Examine, al menos, diez campos empleando luz tenue. Asegrese de examinar
los bordes porque a menudo los cilindros se encuentran a lo largo de los bordes
del cubre objeto. Los cristales anormales, cuando estn presentes, deben
contarse con el objetivo de bajo poder. Una bacteriuria visible en bajo poder debe
ser reportada, por lo menos, con 2+.
8. Examine, al menos, diez campos con alto poder (440x) y reporte con valores
numricos eritrocitos, leucocitos, y clulas del epitelio tubular renal.
9. Reporte todos los conteos (promedio de 10 campos) y evale cualitativamente
de acuerdo a la terminologa estandarizada.
Microscopa de campo claro con tinciones supravitales.

El detalle celular se realiza en sedimentos teidos. Es frecuente el uso de un
colorante de cristal violeta-safranina O para la evaluacin rpida de ciertos
elementos celulares.
Procedimiento
1. Aadir una o dos gotas de colorante violeta-safranina O a, aproximadamente, 1
mL de sedimento de orina precentrifugado y concentrado a ese volumen.
2. Mezclar con una pipeta y poner una gota de esta suspensin en una laminilla.
Muchos laboratorios de uroanlisis recomiendan el uso de la microscopa de
contraste de fases para una mejor deteccin de los elementos formados ms
translcidos del sedimento urinario. Los cilindros hialinos, moco, y bacterias
pueden escapar a la deteccin empleando la microscopa convencional, no teida,
bajo campo claro. La microscopa de contraste de fases tiene la ventaja de
endurecer los contornos inclusive de los elementos ms efmeros, haciendo ms
sencilla su deteccin. Siempre se logra un detalle morfolgico mejor de los
elementos formados (notablemente en cilindros y clulas) con el uso de un
microscopio de contraste de interferencias.

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Cristales.
Los cristales urinarios son vistos comnmente. Usualmente los cristales no estn
presentes en orinas frescas recin obtenidas y en general, la formacin de los
cristales es considerada como un artefacto del sistema de recoleccin. Los
cristales se forman cuando varios constituyentes qumicos llegan a saturarse o
sufren un cambio en su solubilidad, cuando la orina es almacenada a
temperaturas ms bajas. Ciertas sustancias qumicas, como la albmina,
previenen la cristalizacin. Cuando la orina se calienta a 37 C, la mayora de los
cristales desaparecen. Aquellos cristales que todava permanecen, tienen
importancia diagnstica, cuando se correlacionan con sntomas clnicos.
Los tipos de cristales urinarios dependen del pH de la orina fresca. La cistina,
cido rico, leucina, y tirosina son los cristales de mayor importancia diagnstica y
por tanto deben ser identificados. Debido a la limitada relevancia clnica de los
cristales, algunos laboratoristas estn de acuerdo en que no debe desperdiciarse
tiempo en su identificacin especfica. La formacin de muchos cristales est
inducida por varios medicamentos y su importancia clnica no es clara an.
Organismos.
En un espcimen de orina bien recolectado y procesado, la presencia de
organismos es importante desde el punto de vista clnico. Se reportan,
frecuentemente, bacterias, hongos, parsitos, y clulas infectadas con virus. Los
organismos vistos en un espcimen de orina son microscpicamente reconocibles
como estructuras intra o extracelulares. Con la microscopa de campo claro se
detectan fcilmente bacterias, hongos y parsitos.
La deteccin de bacterias intracelulares fagocitadas y hongos, organismos de
Toxoplasma, y cuerpos de inclusin viral, usualmente requieren procedimientos
citolgicos. La identificacin exacta de los organismos ayuda en el diagnstico
clnico diferencial de infecciones del sistema urinario. Las preparaciones
coloreadas son importantes en la evaluacin de organismos, identificacin de
clulas inflamatorias asociadas, en la valoracin de la exfoliacin epitelial, y en la
formacin de cilindros renales con el fin de identificar su localizacin. Se deben
emplear tcnicas microbiolgicas para confirmar y clasificar completamente
algunos organismos urinarios.
Bacterias.
La orina de individuos normales es estril y no contiene bacterias. Algunas
bacterias pueden estar presentes por contaminacin durante la recoleccin o por
almacenamiento prolongado. Se puede determinar una concentracin de menos
de 103 bacterias/mL, cuando se han visto bacterias en un espcimen de orina
centrifugado, pero no en el espcimen sin centrifugar. La presencia de bacterias
en un espcimen sin centrifugar indica que hay una concentracin mayor de 103
bacterias/mL. La presencia de 105 bacterias/ml o ms sugiere una infeccin de
tracto urinario. Este nmero corresponde a 10 o ms bacterias por campo de alto
poder. La identificacin de bacterias, cocos o bacilos puede hacerse por

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microscopa de campo claro o por contraste de fases. Ocasionalmente hay

dificultad en diferenciar bacterias de cristales amorfos.
Hongos.
Las infecciones del tracto urinario (ITU) producidas por hongos son comunes en
pacientes diabticos, en aquellos que toman medicamentos desde el nacimiento, o
en aquellos que han recibido terapia intensiva con antibiticos o terapia
inmunosupresora. En la mayora de las ITUs de pacientes no
inmunocomprometidos, se ha observado un patrn inflamatorio asociado. Candida
albicans es el hongo ms comn, identificndose como levadura o micelio. En
general, la apariencia de gemacin de levadura indica que el hongo ha coexistido
con el husped, mientras que la forma micelar aparece durante la invasin al
tejido. Las levaduras de Candida albicans son altamente retractiles y miden de 3 a
5 m. Suelen ser confundidas con eritrocitos. A diferencia de los eritrocitos, las
levaduras no son lisadas por cidos.
Parsitos.
La presencia de parsitos en la orina indica contaminacin fecal o vaginal. La
Trichomona vaginalis, un flagelado, es el parsito que ms comnmente se
observa en la orina. La incidencia de este tipo de parsito en mujeres es muy alta
pudiendo producir vaginitis severa. En el hombre, el parsito causa una uretritis
asintomtica. Debido a la motilidad de este organismo oval, la microscopa de
campo claro es empleada como la forma ms sencilla y rpida de identificacin.
Los tricomnidos inmviles pueden ser confundidos con leucocitos o clulas
epiteliales. Se han encontrado huevos de helmintos (Enterovius vermicularis) en la
orina de nios por contaminacin fecal. Morfolgicamente un huevo de helminto
est rodeado por una cpsula con dos capas, transparente y delgada, pudindose
ver, enrollado dentro de ella, un embrin. En la orina, tambin pueden encontrarse
huevos de trematodos.
Clulas infectadas de virus.

Con una frecuencia cada vez mayor, se encuentran cambios celulares inducidos
por virus en el sedimento de orina de pacientes inmunocomprometidos. Se deben
emplear tcnicas citolgicas para asegurar la identificacin de citomegalovirus,
herpes simplex y Polyomavirus, los cuales producen clulas con inclusiones
intranucleares diagnsticas, siendo estas las infecciones virales ms comunes del
sistema urinario. Las clulas de inclusin viral deben distinguirse de las clulas de
inclusin provenientes de fuentes no virales, como la exposicin a metales
pesados (plomo y cadmio) y de cambios celulares degenerativos no especficos.
Eritrocitos.
Una orina normal, examinada con objetivo de alto aumento, no debe contener ms
de unos cuantos eritrocitos. Estas clulas aparecen en la orina despus de
lesiones vasculares o trastornos del rin o del tracto urinario inferior. La presencia
de eritrocitos acompaada de cilindros hemticos o eritrocitos dismrficos es

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sugestiva de sangrado del parnquima renal o del glomrulo. La deteccin urinaria

de eritrocitos dismrficos, especialmente acantocitos, es un marcador morfolgico
importante de sangrado glomerular o tubular. Su cuantificacin ayuda en el
diagnstico y manejo del paciente. Cuando se examinen orinas de mujeres, es
importante evitar la contaminacin con sangre menstrual. Los eritrocitos miden,
aproximadamente, 7 m de dimetro, tienen forma de discos bicncavos los
cuales aparecen de un color amarillo plido cuando se examinan bajo microscopa
de campo claro. En ocasiones, las tiras reactivas pueden detectar hemoglobina en
ausencia de eritrocitos en el examen microscpico. Una posible explicacin de
esta discrepancia es la presencia de orinas alcalinas o hipotnicas, ambas pueden
causar lisis de los eritrocitos. En ausencia de estas condiciones, es muy sugestivo
que el pigmento que aparece en la orina (puede ser hemoglobina o mioglobina) se
origine por filtracin desde la sangre.
Leucocitos.
La velocidad de excrecin normal de eritrocitos en la orina es de 1 leucocito por
cada 3 campos con objetivo de alto aumento, 3000 clulas/mL, o ms de 200,000
clulas/hora. Un elevado nmero de leucocitos (piuria) est asociado a numerosos
procesos inflamatorios e infecciosos del tracto urinario. La mayora de los
leucocitos vistos por microscopa de campo claro son neutrfilos segmentados.
La identificacin de linfocitos, clulas plasmticas, y eosinfilos requiere de
coloraciones especiales. Se ha mostrado que una velocidad de excrecin en
exceso de 400,000 clulas/hora siempre indica una infeccin del tracto urinario.
Esta velocidad corresponde a ms de 10 neutrfilos por campo de alto poder. Los
pacientes con infecciones activas del tracto urinario superior tienen,
frecuentemente, ms de 50 neutrfilos por campo de alto poder o una velocidad
de excrecin de leucocitos que excede 2 o an 3 millones/hora.
Clulas del epitelio tubular renal.

En el nefrn estn alineados varios tipos de clulas del epitelio tubular renal y las
clulas enfermas o viejas estn constantemente siendo arrojadas a la orina.
Aunque ellas representan la exfoliacin renal real, la presencia de ms de dos
clulas del epitelio tubular renal por campo de alto aumento indican dao o lesin
activa de los tbulos renales. Hay grandes dificultades en la identificacin precisa
de las clulas de los tbulos renales, especialmente, para diferenciarlas de las
clulas mononucleares comnmente encontradas en la orina. Por microscopa de
campo claro, las clulas tubulares renales son poligonales y de tamao
ligeramente menor que los leucocitos.
Cuerpos grasos ovales.

Los cuerpos grasos ovales son clulas del epitelio tubular renal que estn llenas
de lpidos absorbidos o que han sufrido cambios degenerativos celulares. A
menudo los cuerpos grasos ovales son asociados con proteinuria y lipiduria y son
caractersticos del sndrome nefrtico y diabetes mellitus.

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Clulas epiteliales de transicin.

En la orina normal se pueden encontrar unas pocas clulas de transicin
(uroteliales). Un gran nmero de clulas transicionales puede indicar procesos
inflamatorios de la vejiga, cateterizacin o estados patolgicos malignos.
Por microscopa de campo claro, las clulas transicionales aparecen redondas u
ovaladas, miden de 40 a 60 m, y tienen un ncleo localizado centralmente. Los
bordes citoplsmicos de esas clulas aparecen engrosados y rgidos. Cuando los
ncleos de las clulas transicionales llegan a agrandarse o a tornarse irregulares,
se recomienda emplear tcnicas citolgicas con el fin de detectar enfermedades
malignas del sistema urinario.
Clulas epiteliales escamosas.

Las clulas epiteliales escamosas se alinean en la porcin distal del tracto urinario
inferior y en el tracto genital femenino. Las clulas escamosas son las clulas ms
grandes encontradas en la orina. Tienen un citoplasma grande y plano con un
ncleo pequeo. Frecuentemente, una o ms hileras de esas clulas pueden
plegarse. La presencia de clulas escamosas en la orina usualmente indica
contaminacin (vaginal, en mujeres y uretral en hombres no circuncidados) o
metaplasia escamosa de la vejiga, y representan el tipo menos importante de
clulas epiteliales encontradas en la orina.
Fragmentos de tejidos en la orina.

En la orina, pueden observarse algunos conglomerados o fragmentos de material
de apariencia slida. Debido a su gran tamao, este material es identificado en la
inspeccin inicial de la orina. Es de color generalmente blanco o bronceado. Es
muy importante establecer la identidad de este material para un diagnstico
seguro. Esto implica transferirlo a un fijador apropiado con el fin de preservarlo
para una evaluacin citolgica o histolgica. La necrosis papilar renal o los
tumores de la vejiga son las entidades mas frecuentemente responsables de
desprender grandes fragmentos de tejido en la orina.
Espermatozoides.
Los espermatozoides pueden ser fcilmente reconocidos en la orina de un hombre
despus de la eyaculacin o en la orina de una mujer por contaminacin vaginal
despus del coito. Su identificacin es de limitada importancia clnica y la
presencia de espermatozoides, generalmente, no es reportada.
Cilindros renales.
Los cilindros renales (urinarios) son estructuras cilndricas que se organizan en el
nefrn y su importancia proviene de su localizacin. Estn formados por
uromucoide (mucoprotena de Tamm-Horsfall), que est siempre presente en la
orina, usualmente en suspensin. Este uromucoide es producido por las clulas
del epitelio tubular renal de la seccin ascendente del asa de Henle. Los cilindros
se forman como consecuencia del estancamiento de la orina y de la precipitacin
del uromucoide. El incremento en la concentracin de protenas, sales, y un pH

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urinario bajo son algunos de los factores que contribuyen a su formacin. Debido a
que la precipitacin de esta protena depende de la concentracin y composicin
de la orina, los cilindros se forman ms fcilmente en la porcin distal del nefrn y
en los ductos colectores del rin, donde la orina es ms concentrada. En
pacientes con protena de Bence Jones (mieloma mltiple), los cilindros pueden
formarse en los tbulos convolucionados proximales. Estas formaciones cilndricas
presentes en la orina reflejan las formas (largas o cortas) y dimetros (delgados y
gruesos) de los lmenes de los tbulos renales en donde se formaron. Su nmero
y propiedades cuantificables aportan valiosos indicios sobre la naturaleza de la
enfermedad del parnquima renal. Microscpicamente, los cilindros se
caracterizan por la apariencia de su matriz (hialina, granular, crea), por los
constituyentes celulares (eritrocitos, leucocitos, o clulas del epitelio tubular renal)
o por el tipo de material particulado embebido en la matriz (grnulos finos, gruesos
o fibrina). La identificacin exacta de los cilindros, especialmente de los tipos
celulares, es difcil cuando se hace en preparaciones hmedas no coloreadas
visualizadas en microscopios bajo la luz directa o campo claro. Se necesita un
microscopista hbil para evitar las interpretaciones errneas. La visualizacin de
los cilindros mejora con el empleo de microscopios con contraste de fases, de
filtros de contraste o coloraciones especiales.
Para propsitos diagnsticos de enfermedad renal, los cilindros se han clasificado
como fisiolgicos o patolgicos.
Grasas.
Las grasas se encuentran en la orina de pacientes quienes han presentado
embolismo graso despus de lesiones severas con aplastamiento seo,
degeneracin grasa del rin o sndrome nefrtico. La grasa aparecer en la
superficie de la orina recolectada en la ltima parte de la miccin. En el sedimento
urinario se pueden encontrar clulas epiteliales vacuoladas. La identificacin de
las gotas de grasa se facilita empleando coloraciones especiales para grasa como
Oil Red O o Sudn III.
ACTIVIDAD
Realizar el reporte de prctica correspondiente a cada parmetro que integra el
perfil renal y el examen general de orina de acuerdo a rbrica proporcionada por el
profesor.
ANEXOS
Estudio de caso: infeccin de vas urinarias
Estudio de caso: proteinuria
Estudio de caso: clculos
Estudio de caso: insuficiencia renal

ECISALUD
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Mxico 2003.
PRACTICA #7 PERFIL CARDIACO

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INTRODUCCIN
El metabolismo altamente anaerbico del corazn le permite usar como
combustible muchos substratos normalmente presentes en el plasma, y la
absorcin cardaca de la mayora de estos substratos es proporcional a su
concentracin arterial una vez que ciertos niveles son excedidos. En trminos
generales, el corazn usa los cidos grasos libres como su combustible
predominante. Tambin consume importantes cantidades de glucosa y lactato, as
como cantidades ms pequeas de piruvato, cuerpos cetnicos y aminocidos.
La mayor parte de la energa para la funcin cardaca se obtiene de la
descomposicin de metabolitos a travs del ciclo del cido ctrico y la fosforilacin
oxidativa. Estas vas enzimticas se encuentran principalmente en las
mitocondrias, representando aproximadamente un 35% del volumen total del
msculo cardaco.
Enzimas en las clulas miocardiacas

Varias enzimas encontradas en el tejido miocrdico son clnicamente importantes
debido a que su liberacin en el torrente sanguneo puede estar relacionada con el
dao y la muerte de las clulas miocrdicas.
Creatina cinasa
La enzima responsable de la regeneracin del ATP es la creatina cinasa.Tiene un
peso molecular de 85,000 daltones y existe en diversas formas isoenzimticas. La
creatina cinasa (CC) es un dmero, compuesto de las dos subunidades M
(msculo) y B (cerebro). Las tres isoenzimas formadas a partir de estas
subunidades se encuentran en el citosol. Estas isoenzimas se abrevian como
MM, MB, y BB. Si comparamos la actividad de la enzima en varios tejidos, el
msculo esqueltico tiene por mucho la mayor actividad, poseyendo unas 50,000
veces la concentracin de la CC srica. La isoenzima esqueltica predominante es
la isoenzima MM, con slo trazas de las isoenzimas MB y BB en la mayora de las
fibras musculares. El componente MB, sin embargo, est incrementado en ciertos
trastornos musculares, particularmente en la distrofia muscular tipo Duchenne y en
la polimiositis. La actividad de CC del msculo esqueltico medida en unidades
internacionales es aproximadamente de 2000 U/g, comparada con la actividad del
msculo cardaco de 500 U/g. En suero normal, por lo menos el 95% de la CC
presente es del tipo MM que probablemente se deba principalmente a fugas del
msculo esqueltico, particularmente durante la actividad fsica. Debido a esto, la
actividad de la CC srica en personas activas saludables muestra una distribucin
asimtrica inclinada hacia valores ms altos. Adems, los valores son ms bajos
en las mujeres que en los hombres y son ms bajos en la maana que en la
noche. Los valores tienden a ser ms bajos en pacientes hospitalizados,
posiblemente debido a que el reposo en cama reduce la cantidad de enzimas
liberadas del msculo.
Isoformas de CC

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Las isoenzimas CC-MM y CC-MB en suero pueden ser fraccionadas en subtipos o

isoformas mediante tcnicas de alta resolucin, tales como electroforesis de alto
voltaje o enfoque isoelctrico. Las isoformas de CC-MM y CC-MB se forman en la
sangre mediante la ruptura enzimtica irreversible del aminocido del COOH
terminal, un residuo de lisina, de la subunidad M o de las subunidades de las
isoenzimas del tejido. Para la CC-MM, esta ruptura involucra la remocin sucesiva
de los residuos terminales de lisina de cada subunidad M, dando lugar a tres
isoformas llamadas MM3 (forma tisular, o Mlisina Mlisina), MM2 (o MlisinaM), y
MM1 (o MM). La CC-MB, que tiene una sola subunidad M, consiste de dos
isoformas en la circulacin, la llamada MB2 (forma de tejido, o MlisinaB), y MB1 (o
MB). Es de notar que la secuencia amino terminal de la subunidad B de la CC es
similar al de la subunidad M, sin embargo, la ruptura de la lisina terminal de la
subunidad B de la CC-MB permanece controversial.
Lactato deshidrogenasa
La lactato deshidrogenasa (LDH) es una enzima tisular ubicua que cataliza la
reduccin de piruvato a lactato usando nicotinamida adenina dinucletido (NAD).
La LDH de un peso molecular de aproximadamente 140,000 daltones y es un
tetrmero compuesto de cuatro subunidades con peso molecular de 35,000
daltones cada una. Las subunidades, que son de dos tipos, H (corazn) y M
(msculo), se combinan para formar las cinco isoenzimas de LDH. La principal
isoenzima (HHHH) tiene una actividad mxima en presencia de bajas
concentraciones de piruvato, pero se inhibe por exceso de piruvato. Por contraste,
la principal isoenzima muscular (MMMM) exhibe actividad mxima en presencia de
una mayor concentracin de piruvato y se inhibe menos por exceso de piruvato.
El corazn metaboliza los cidos grasos y los carbohidratos a una velocidad
aproximadamente constante con oxidacin completa del piruvato a travs del ciclo
de Krebs del cido ctrico. Por lo tanto, el corazn tiene una baja concentracin
tisular de piruvato y lactato y rpidamente convierte el lactato del plasma en
piruvato. Por contraste, el msculo, con rpidas demandas de incrementos de
energa durante el ejercicio, tiene que contender con rpidos incrementos en
piruvato y lactato de tejido causados por el metabolismo anaerbico.
La LDH se encuentra en el citosol de todas las clulas humanas y por lo tanto
tendra poca especificidad para el diagnstico a no ser por el hecho de que las
isoenzimas estn presentes en diferentes proporciones en cada tejido. El corazn
y los eritrocitos contienen principalmente LDH1 y LDH2, mientras que el msculo
esqueltico y el hgado contienen LDH5 y en menor grado LDH4. El suero normal
contiene principalmente LDH2, con menores cantidades de LDH1 y de las otras
isoenzimas. Si las enzimas son liberadas del tejido cardaco al suero, a menudo
vemos un cambio en la proporcin de LDH1 a LDH2. La vida media de la LDH es
diferente para cada isoenzima; la isoenzima 1 (HHHH), tiene una vida media de
aproximadamente 100 horas, mientras que la isoenzima 5 (MMMM) tiene una vida
media de slo 10 horas. La importancia de esto es evidente en la discusin de la
liberacin de las enzimas durante el infarto al miocardio.

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Aspartato aminotransferasa (opcional)

La aspartato aminotransferasa (ASAT) cataliza la transferencia de un grupo amino
entre el cido asprtico y el piruvato para formar oxaloacetato (alfa cetoglutarato) y
alanina. Esta enzima ubicua es esencial en el metabolismo intermedio y permite
que los aminocidos cido asprtico y cido glutmico se degraden en el ciclo de
Krebs. La enzima existe en dos formas estructuralmente diferentes; una se
encuentra principalmente en el citoplasma y la otra en las mitocondrias. La forma
citoslica es la que se encuentra en el suero. Su vida media en el suero es
probablemente de alrededor de 20 horas. El hgado tiene la mayor actividad
enzimtica, con aproximadamente 85 U/g de tejido, mientras que el corazn posee
75 U/g y el msculo esqueltico cerca de 50 U/g.
Protenas contrctiles (opcional)

Los marcadores bioqumicos ms comnmente usados para lesin del miocardio
estn involucrados con el metabolismo de las clulas, son solubles y estn
localizados en el compartimento citoslico de las clulas. Debido a estas
propiedades, una gran proporcin de estos marcadores citoslicos son liberados
rpidamente en la circulacin despus de una lesin celular. Por contraste, la
naturaleza y funcin de las protenas estructurales determina que sean solubles;
por consiguiente, una proporcin relativamente pequea est libre en el citosol y
disponible para su rpida liberacin poco despus de una lesin celular. A esta
pequea proporcin disponible para liberacin se le denomina el reservorio
citoslico.
A pesar de la desventaja terica de su insolubilidad, se ha generado bastante
inters en las siguientes protenas estructurales: troponina I, troponina T, y las
cadenas ligeras de miosina. La base de este inters clnico surge de la
identificacin y purificacin de formas cardacas de estas protenas con alta
especificidad tisular, que se discuten adelante con mayor detalle, han permitido el
desarrollo de ensayos inmunolgicos para la determinacin de lesiones
miocrdicas.
Miosina, actina y troponina (opcional)

Las protenas miosina y actina forman la mayor parte del aparato contrctil de las
clulas musculares. Juntas constituyen el 80% de la protena de las clulas
musculares. Las protenas reguladoras troponina y tropomiosina, en asociacin
con la actina polimerizada, forma los filamentos delgados del sarcmero. La
troponina consiste de un complejo de tres subunidades: troponina C, troponina I, y
troponina T.
Troponina T (TnT) (opcional)

La protena troponina T, de 37 kilodaltones, tiene un reservorio citoslico que
constituye cerca del 6% de su concentracin intracelular total. A pesar de
encontrarse tanto en el tejido esqueltico como en el corazn, la TnT est siendo
usada exitosamente como un marcador para la enfermedad cardaca isqumica
debido a que un subtipo encontrado en el tejido miocrdico tiene una homologa

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de solamente 60% con la forma del msculo esqueltico. Se han desarrollado

anticuerpos altamente especficos que discriminan entre los subtipos de los
msculos cardacos y esquelticos.
Troponina I (TnI) (opcional)

Al igual que la TnT, la TnI es parte integrante del aparato contrctil estructural
tanto del msculo esqueltico como del miocrdico. Se cree que el reservorio
citoslico de TnI es el mismo que el de TnT, esto es, cerca del 6% de la
concentracin total de TnI de las clulas. La TnI, con un peso molecular de 21
kilodaltones, es ligeramente ms pequea que la TnT. El subtipo cardaco de la
TnI tiene varias regiones de aminocidos que difieren substancialmente de la
forma del msculo esqueltico. Estas regiones sirven como base para los
inmunoensayos cardacos especficos.
Cadenas ligeras de Miosina (CLMs) (opcional)

La miosina es una molcula de filamentos largos (540 kD) compuesta por seis
cadenas de pptidos, dos de las cuales son pesadas (230 kD) y cuatro son ligeras
(CLMs), con pesos moleculares en el rango de 26 kD. Las CLMs estn formadas
por dos componentes, la cadena ligera de miosina-1 y la cadena ligera de miosina-
2, que juntas constituyen el filamento grueso del aparato contrctil en el msculo
esqueltico y miocrdico. Las CLMs de fuentes cardacas y no cardacas pueden
ser diferenciadas usando anticuerpos especficos para CLMs cardacas. Debe
notarse que el reservorio citoslico para las CLMs es de 0.5% de la cantidad total
de clulas, y solamente cerca del 10% del reservorio citoslico para TnT o TnI.
Creatin-kinasa
Creatincinasa
Mtodo cintico UV. NAC activado
Se encuentra ms abundancia de CK en el msculo esqueltico. Las otras fuentes

en que se encuentra, por orden de mayor a menor actividad, son: cerebro, recto,
estmago, vejiga, colon, tero, prstata, intestino delgado y rin. Se detectan
cantidades despreciables en hgado, placenta y tejido tiroideo.
La CK se eleva principalmente cuando hay afecciones o enfermedades que
afectan el tejido msculo esqueltico, el miocardio o el cerebro. Se observan
notables incrementos de CK total en infarto agudo al miocardio, en afecciones del
msculo esqueltico y despus de un choque o colapso circulatorio. En general la
CK se eleva en infarto agudo al miocardio y es de gran utilidad clnica para
detectarlo. La CK total comienza a incrementarse despus de 15 horas de ocurrir
un infarto agudo al miocardio. La actividad mxima se observa a las 24 horas y
regresa a la normalidad a los 3 das. La miocarditis tambin provoca actividad
notablemente alta de CK durante la fase inflamatoria de la afeccin. La CK se
eleva adems en diversas enfermedades o lesiones del msculo esqueletico. Los
valores de creatincinasa y sus isoenzimas se utilizan en el diagnstico y

ECISALUD
tratamiento de los infartos de miocardio y de miopatas como la distrofia muscular

progresiva tipo Duchenne.
La creatincinasa (CK) es una enzima del citoplasma y la mitocondria que cataliza
tanto la formacin de ATP como la fosforilacin reversible de creatinina, con el
ATP como grupo donador de fosfato. La CK requiere activadores metlicos,
particularmente Mg , para que la enzima alcance toda su actividad cataltica.
La actividad de CK es de particular importancia en el tejido muscular, en donde

cataliza la sntesis de fosfato de creatinina, una molcula que almacena enlaces
de alta energa. Para efectuar una contraccin muscular se utiliza el grupo fosfato
para formar ATP a fin de proporcionar de inmediato energa a los msculos.
Hay diversos mtodos analticos para determinar la actividad de CK ya sea
mediante la reaccin hacia la derecha (creatinina fosfato de creatinina) o
la reaccin inversa. Estos mtodos son anlisis de punto final o cinticos, en los
que se emplean tcnicas de espectrofotometra, fluorescencia o bioluminiscencia.
El mtodo de referencia para el anlisis de CK es el de Oliver y Rosalki, un
anlisis cintico en el que se emplea la secuencia de reaccin inversa.
OBJETIVO
Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de la
Creatin cinasa
Establecer los valores de referencia de la enzima CK y comparar con el valor de
altos o bajos de CK.
Fundamento
Se mide la actividad de la creatincinasa mediante un mtodo cintico enzimtico.
En la reaccin, la creatincinasa cataliza la transferencia de un grupo fosfato del
sustrato fosfato de creatina al difosfato de adenosina (ADP). La subsiguiente
formacin de trifosfato de adenosina (ATP) se mide mediante el uso de dos
reacciones asociadas, catalizadas por la hexocinasa (HK) y la glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa (G6PDH), lo que produce dinucletido de nicotinamida adenina
reducida (NADH) a partir del dinucletido de nicotinamida adenina (NAD).

ECISALUD
El ensayo (CK) contiene el activador monotioglicerol.
MATERIALES Y METODOS
Muestra
Suero, plasma heparinizado con EDTA.
Material necesario
Pipetas de 2 mL y 200 L
Fotmetro termostable a 37C con filtro de 340 nm.
Cronmetro
Reactivos
Proporcionados por el fabricante.

25C 30C 37C
Hombres 10-80 U/L 15-130 U/L 24-195 U/L
Mujeres 10-70 U/L 15-110 U/L 24-170 U/L
NOTAS
La hemlisis interfiere en la prueba a concentraciones superiores a 200 mg/dL de
hemoglobina.
ACTIVIDAD
ANEXOS
Estudio de caso: hipertensin
Estudio de caso: infarto
BIBLIOGRAFA
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ed. Graphimedic S.A. de C.V; Mxico 2002.
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ECISALUD
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www.ilustrados.com/documentos/manualflebotomia.doc
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Salud ambiental-Residuos peligrosos biolgico-Infecciosos-Clasificacin y
especificaciones de manejo.
Internet:http://www.salud.gob.m/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html
13. WHITEHEAD T.P.; Manual, Principios de Control de Calidad (Lab/76.1);
Organizacin Mundial de la Salud; Qumica Clnica 1984.
14. Reactivos para diagnostico clnico, Bioqumica Clnica, Productos. Internet:
http://www.spinreact.com/
15. TRESELER Kathleen Morrison; Laboratorio clnico y pruebas de diagnstico;
3 ed; trad. Dr. Jorge Mrigo; ed. El manual moderno; Mxico, D.F, 1998.
16. AYRES H. Gilbert; Anlisis Qumico Cuantitativo;2 ed;ed. Harla S.A de C.V.;
Mxico 1970.
17. FLASCHKA H.A.; Qumica Analtica Cuantitativa; 9.ed; trad. Antonio Eroles
Gmez; ed. Continental S.A. de C.V; Mxico 1984.
18. GRAW Allan, Cowan Robert A; Bioqumica Clnica; 2a. ed; ed.
A.Hamabata;Mxico D.F. 2003.
19. BAYER; Manual de usuario Rapidchem 744/754.
20. GRAFF Sister Laurine; Anlisis de Orina, Atlas a color; 1 ed; trad. Pablo
Rubn Koval; ed. Mdica Panamericana S.A; Mxico 1983.
21. ALTHOF Klinder Heintz; Sedimento Urinario; 6.ed; ed. Mdica Panamericana;
Mxico 2003.

ECISALUD
PRACTICA #8 PRUEBAS INMUNOLGICAS
PRUEBA INMUNOLOGICA DE EMBARAZO

HIV / VHB / VHC / RPR / VDRL / AEL / PCR / FR
INTRODUCCIN
Las respuestas inmunitarias contra la mayora de los antigenos inducen la
produccin especfica de anticuerpos y linfocitos T efectora. Este reconocimiento
entre el antgenoanticuerpo o linfocito sienta las bases del diagnostico
inmunolgico. El estudio de las inmunoreacciones se realiza mediante el empleo
de tcnicas inmunolgicas basadas en la deteccin de y evaluacin de la
respuesta humoral (anticuerpos y complemento) o de base celular (linfocitos T y
fagocitos).
La medicin de las interacciones Antigeno- Anticuerpo con fines diagnsticos.
Se realizan en 2 vas:
Utilizacin de anticuerpos especficos para detectar el antgeno.
(diagnostico directo).
Utilizacin de antigenos especficos para detectar anticuerpos. (diagnostico
indirecto).
La reaccin entre el Ag y el Ac es de naturaleza fsica y qumica. La fuerzas que
los mantienen unidos, son de tipo no covalente, como la atraccin electrosttica,
los puentes de hidrgeno y las fuerzas de Van der Waals y la exclusin del agua.
Afinidad de un anticuerpo es la fuerza o intensidad de la unin, entre un sitio de
unin del anticuerpo y un determinante antignico. Avidez: es la fuerza con la que
el anticuerpo multivalente se une a un antgeno multivalente.
OBJETIVO
El alumno realizar algunos anlisis utilizando como herramienta la reaccin
antgeno-anticuerpo. El alumno leer ntegramente el inserto del fabricante de los
reactivos (uso, fundamentos, descripcin de los componentes, requerimientos de
muestra, almacenamiento, estabilidad, procedimiento, control de calidad,
interpretacin, etc.) Se realizarn las pruebas siguiendo estrictamente las
instrucciones del fabricante.
Fundamento
Muchas tcnicas en el laboratorio de anlisis clnicos utilizan la reaccin
antgeno-anticuerpo como herramienta para detectar y/o cuantificar constituyentes
de la sangre o de otros fluidos corporales.
En la mayora de los inmunoensayos, la muestra del paciente contiene el
antgeno (analito), y el anticuerpo se adiciona como reactivo para detectar o medir
el antgeno. Por otra parte, en los casos de enfermedad infecciosa,
determinaciones serolgicas, pruebas de alergias y pruebas para
anticuerpos autoinmunes, es la medicin del anticuerpo en la muestra del
paciente la que es clnicamente importante. En estos casos, se utiliza como
reactivo un antgeno de composicin conocida.

ECISALUD
MATERIALES Y MTODO
Muestra: Suero
Reactivos
Conjunto de reactivos para determinacin de prueba de embarazo. -Conjunto de
reactivos para practicar prueba de VIH, VHB, VHC, VDRL (o RPR), PCR, AEL, FR.
Reacciones febriles, ELISA, western blot (opcionales sugeridos por el maestro).
ACTIVIDAD
Cuestionario (entrega individual):

1. Enumere al menos 12 anlisis de laboratorio cuyo fundamento sea la reaccin
inmunolgica.
2. Qu significa ELISA?
3. Explique en que consiste la prueba de Western-blot y porqu es necesaria.
4. Definir sensibilidad y especificidad
5. Explique la ventaja de utilizar una prueba de embarazo que determine la
fraccin de la HGC sobre una que detecte la HGC ntegra.
ANEXOS
Estudio de caso: prueba inmunolgica de embarazo.
Estudio de caso: VIH, sfilis, hepatitis B.
Estudio de caso: alergia e inflamacin.
BIBLIOGRAFA
LAWRENCE KAPLAN, AMADEO PESCE y STEVEN KAZMIERCZAK: Clinical

Chemistry, Theory, Anlisis, Correlation, 4a. Edicin, EUA, Mosby, 2003.
ENGVALL, E.: Enzyme immunoassay ELISA and EMIT, Methods in Immunology,

70:419-439, EUA, 1980

ECISALUD
PRACTICA # 9 PRUEBAS MICROBIOLOGICAS Y PARASITOLOGIA (COPRO)
INTRODUCCIN
La Microbiologa mdica estudia los microorganismos que son responsables de las
principales enfermedades infecciosas de los humanos. Podemos considerar como
agentes infecciosos a los priones, virus, bacterias, hongos y parsitos. Las
enfermedades infecciosas son muy frecuentes, pueden ser graves e incluso
causar la muerte. En general son fcilmente diagnosticables y curables, algunas
son prevenibles y muchas de ellas tienen importantes consecuencias sociales y
econmicas. Los diferentes agentes infecciosos presentan factores de virulencia
que les permiten colonizar al hospedero y causar enfermedad. La mayora son
transmitidos por alimentos o agua contaminados, por fmites, por contacto directo,
por la sangre o secreciones, y algunos de ellos, necesitan de vectores para poder
infectar al humano. Las bacterias, los virus y los parsitos transportados por el
agua, provocan cerca de cuatro millones de muertes por ao en el mundo.
Quienes ms riesgo corren son los 1,100 millones de personas que carecen de
acceso a agua potable y segura y los 2,400 millones sin instalaciones de servicios
de salud adecuadas.
OBJETIVO
Realizar las determinaciones micro y bacteriolgicas de los siguientes lquidos
corporales:
Sangre para hemocultivo
Orina para urocultivo
Lquido Asctico: realizado para estudio etiolgico de sndrome asctico
Lquido Cefalorraqudeo: realizado para estudios de afecciones
meningoenceflicas (inflamaciones, infecciones, traumatismos).
Lquido pleural: estudio etiolgico de derrame pleural.
Lquido sinovial: estudio etiolgico de derrame articular.
Parasitolgico (coproparasitolgico).
Lquido cefalorraqudeo
El diagnstico y tratamiento correcto de una enfermedad del SNC puede depender
de los resultados del examen del LCR en el laboratorio; debido a esto, este lquido
tiene que extraerse y manipularse correctamente.
El LCR es normalmente estril y puede obtenerse mediante puncin lumbar o, con
menos frecuencia, por puncin cisternal, cervical o ventricular; cada uno de estos
procedimientos debe ser realizado aspticamente por un mdico con experiencia
en el mismo y alertado el paciente sobre sus indicaciones y posibles
complicaciones.
La zona de puncin es generalmente la lumbar, pero tambin habra de nombrarse
la ventricular, suboccipital o por una derivacin.

ECISALUD
Se debe marcar y desinfectar la zona de puncin. Es deseable para el paciente un

tratamiento paliativo del dolor con un anestsico local. La puncin deber ser
sagital y ligeramente inclinada hacia arriba (20).
La cantidad que se recoja depender de la situacin clnica, cuando se estn
buscando clulas tumorales, es importante obtener tanto lquido cefalorraqudeo
como se pueda (hasta 30 ml sera un volumen ptimo en adultos).
El tiempo de recoleccin de la muestra deber ser tan largo como sea posible,
usando una aguja lo ms fina posible, para evitar el dolor de cabeza siguiente a la
puncin.
Factores a tener en cuenta durante la toma de muestra: El paciente en ayunas,
debera estar sentado, o pedirle que se tumbe de lado sobre un lecho plano. La
espalda del paciente deber doblarse hacia delante y la posicin ser asegurada
por un asistente. La musculatura debera estar tan relajada como sea posible.
Debe anotarse la hora en que se toma la muestra, junto con informacin sobre
cualquier tratamiento inicial (p. ej. en la meningitis bacteriana).
Se recomienda usar una aguja atraumtica de punta de lpiz (0,7 mm el dimetro
exterior), como la diseada por Sprotte y Whitacre para evitar el sndrome post-
puncin (dolor de cabeza).
Con el fin de evitar la contaminacin de la muestra, se debe obtener y transportar
el lquido cefalorraqudeo en tubos cerrados.
El lquido cefalorraqudeo deber distribuirse, en condiciones aspticas, en varios
tubos de poliestireno transparente con tapn (estriles y sin aditivos). Para
citologa, debe evitarse el uso de aditivos tales como EDTA y fluoruro. Despus de
la obtencin de la muestra, se debe retirar la aguja y cubrir la herida
adecuadamente. Los pacientes debern guardar reposo tendidos boca abajo al
menos durante 30 minutos para evitar prdidas subsiguientes.
Es muy importante despus de tomada la muestra, enviarla al laboratorio lo antes
posible por el medio ms rpido.
Indicaciones a tener en cuenta para la recoleccin de muestras de lquido
cefalorraqudeo:
- En ocasiones es til la recoleccin de muestras en diferentes porciones
indicando la secuencia de llenado ya que facilita la determinacin del origen de los
posibles hemates.
- No es aconsejable el uso de guantes empolvados con talco cuando se est
extrayendo lquido cefalorraqudeo, ya que podra alterar el examen citolgico del
lquido cefalorraqudeo.
- El LCR debe ser centrifugado de inmediato. Si la centrifugacin se lleva a cabo
rpidamente, la sangre proveniente de una puncin traumtica no generar
xantocroma.
- La congelacin del lquido cefalorraqudeo es mejor llevarla a cabo a -70C que a
-20C ya que, por ejemplo, las bandas de protenas oligoclonales desaparecen
lentamente despus de estar almacenadas durante unos 6 meses a -20C.

ECISALUD
Lquidos serosos; lquidos pleural, pericrdico y peritoneal

Los lquidos serosos son lquidos corporales que derivan del plasma y se
encuentran en la cavidad pleural, pericrdica y peritoneal. Estas cavidades
corporales estn delimitadas por una membrana serosa parietal y una visceral,
que estn constituidas por una capa de tejido conjuntivo con numerosos capilares
y vasos linfticos, y una capa superficial de clulas mesoteliales. Los lquidos
serosos son ultrafiltrados del plasma que derivan de la abundante red capilar de la
membrana serosa. Su formacin es similar a la del lquido extravascular en
cualquier otra parte del organismo, y en ella intervienen la presin hidrosttica, la
presin coloidosmtica y la permeabilidad capilar.
El examen del lquido en el laboratorio puede suministrar con frecuencia una
informacin diagnstica de utilidad sobre las alteraciones que han motivado su
formacin y servir de gua para un tratamiento adicional.
Se denomina paracentesis la extraccin de lquido de una cavidad serosa del
organismo mediante aspiracin percutnea (introduciendo una aguja a travs de la
piel). Los trminos especficos de toracentesis o toracocentsis, pericardiocentsis
y peritoneocentsis se refieren a las cavidades pleural, pericrdica y peritoneal,
respectivamente. El lquido de la cavidad peritoneal se denomina normalmente
lquido asctico. De manera similar los trminos hemotrax, hemopericardio y
hemoperitoneo se refieren a la presencia de sangre (normalmente, como resultado
de una hemorragia visible) dentro de las respectivas cavidades corporales.
Aunque el trmino empiema se usa a menudo para indicar la existencia de pus en
la cavidad pleural (piotrax), literalmente significa "pus dentro de una cavidad
corporal".
Adems de su valor diagnstico, la paracentesis, que debe ser hecha con una
tcnica asptica por un mdico con experiencia en el procedimiento y al corriente
de sus indicaciones y complicaciones potenciales, puede contribuir a mejorar los
sntomas del derrame, facilitar una descompresin de un rgano que supona un
peligro para la vida del paciente, o permitir la instilacin de frmacos en una de las
cavidades corporales.
Debido a que la mayora de los derrames son abundantes (generalmente ms de
100 ml), es fcil obtener suficiente lquido para realizar todas las pruebas
diagnsticas de laboratorio necesarias con una sola muestra, evitando tener que
repetir el procedimiento.
A menos que se prevean pruebas bioqumicas especiales o un estudio
microbiolgico o citolgico extenso, debe bastar una muestra de 50 ml para
realizar un examen completo de laboratorio. El lquido debe transportarse
rpidamente al laboratorio (en la hora que sigue a su recogida) o, si el retraso es
inevitable, debe estar refrigerado a 4C para evitar el crecimiento bacteriano y la
alteracin de los componentes celulares, o de la composicin qumica.
Para los estudios de bioqumica el lquido debe recogerse sobre un recipiente

estril y tapn de rosca (8-10 ml), dejar que coagulen las muestras y eliminar el
cogulo o cualquier otro material en suspensin (ej. clulas) mediante
centrifugacin. Se aconseja procesar paralelamente sangre del paciente.

ECISALUD
Para los estudios de citologa se proceder igual, pero utilizando el tubo con EDTA
(1mg/ml) como anticoagulante, no debe usarse citrato sdico u oxalato. Las
clulas se conservan relativamente bien entre 24 y 48 horas si las muestras se
mantienen refrigeradas.
Microbiologa:
Para el estudio bacteriano rutinario es suficiente de 1 a 10 ml. Cuando se requiera
la investigacin de Mycobacterium spp u hongos se enviar un volumen superior a
10 ml.
Esta es la mnima cantidad necesaria para el estudio bacteriolgico del lquido
empleado en la dilisis peritoneal.
Si es necesario evitar la coagulacin de algunos de estos lquidos se usar
heparina sin conservantes; otros anticoagulantes pueden tener accin bacteriana.
Los recipientes idneos son tubos estriles de tapn de rosca o de presin
negativa sin conservantes. Se llenarn hasta cerca del tapn, de esta forma
pueden ser tiles para el estudio de anaerobios, especialmente si la muestra es
purulenta.
Es aconsejable para este tipo de muestras inocular paralelamente, en el lugar de
la extraccin, dos frascos de hemocultivo, uno para aerobios y otro para
anaerobios.
Las muestras deben ser enviadas inmediatamente al laboratorio y hasta su
procesamiento se mantendrn a temperatura ambiente.
Cuando las muestras se destinen a la investigacin de micobacterias y hongos,
debern mantenerse en nevera.
Los hemocultivos se mantendrn entre 35C y 37C, o en su defecto a
temperatura ambiente.
Cuando se utilice una anestesia local, hay que cambiar de jeringuilla y aguja para
hacer la extraccin de la muestra, ya que los anestsicos pueden inhibir el
crecimiento bacteriano.
Lquido sinovial
Los trastornos de la membrana sinovial, la alteracin en los elementos de sostn
articular y la presencia de cuerpos extraos pueden producir la acumulacin de
grandes cantidades de lquido sinovial en las articulaciones. Su posterior anlisis
en el laboratorio puede ser decisivo para el diagnstico de la patologa
subyacente.
MATERIALES Y MTODO
Materiales: tubo estril con o sin medio de transporte.
Muestra:
Lquido asctico: 5 ml de lquido con heparina.
Lquido cefalorraqudeo: 3 muestras en tubo rojo y 1 en tubo lila de 1.5 ml de

lquido cefalorraqudeo

ECISALUD
Lquido pleural: 5 ml de lquido con heparina

Lquido sinovial; 5 ml de lquido sinovial con anticoagulante.
La obtencin del lquido debe realizarse con una jeringa sin anticoagulante. Una
vez recogida la muestra, en funcin del volumen obtenido, debe distribuirse en los
diferentes contenedores necesarios para realizar su estudio:
a - Tubo estril para examen microbiolgico.

b - Tubo sin aditivos para el estudio de cristales.
c - Tubo heparinizado o con EDTA para el recuento celular.
Para el estudio bioqumico puede utilizarse el tubo b o el tubo c. La observacin

microscpica de los cristales debe realizarse en el menor tiempo posible tras la
artrocentsis y siempre sin anticoagulante para evitar la aparicin de artefactos.
La muestra obtenida debe ser transportada al laboratorio a la mayor brevedad
posible, para evitar la degeneracin celular. Si existe demora en el transporte, es
necesario conservar la muestra a temperatura entre 2 y 8 C para reducir el
metabolismo celular, a excepcin de la muestra para cultivo que ha de
transportarse a temperatura ambiente. En este caso tambin puede utilizarse un
tubo con EDTA-fluoruro para el estudio bioqumico y recuento celular.
La muestra destinada al estudio bioqumico debe ser centrifugada de inmediato
para separarla del contenido celular.
Consideraciones
Lquidos coagulados o hemorrgicos finalizarn en exmenes difciles de
interpretar.
Procedencia: tiempos de respuesta
Hospitalizacin bsica 2 horas
Hospitalizacin crtica/pabellones/neo 1 hora
Urgencias (infantil, obsttrica y adulto) 1 hora
Pacientes ambulatorios 4 horas
Procedimiento
Determinacin de parmetros bioqumicos (cuando aplique), se utilizar la tcnica
que el profesor recomiende.
Determinacin de parmetros microscpicos (cuando aplique), se utilizar la

tcnica que el profesor recomiende.
ACTIVIDAD

ECISALUD
EXMEN COPROLGICO.
EXMEN MICROSCPICO O DESCRIPCIN FSICA DE LA MATERIA FECAL.
INTRODUCCIN.
Se entiende por coproparasitolgico (coprolgico), el estudio o anlisis de las
heces, y comprende la observacin macroscpica y el anlisis qumico,
bacteriolgico y parasitololgico de la deposicin.
En el manejo de los productos biolgicos va a radicar el xito o fracaso del
diagnstico de enfermedades parasitarias. Es necesario seguir ciertos
lineamientos preestablecidos para cada producto.
Las muestras mal colectadas, conservadas inadecuadamente o muy viejas, no
servirn para observaciones ulteriores e incluso puede conducir a resultados
errneos o falsos.
La colecta de este material biolgico se puede verificar de diferentes maneras,
pero la obtenida por expulsin natural es la indicada para realizar este tipo de
examen. Debiendo evitar que se mezcle con orina, agua o tierra.
CARACTERES MACROSCPICOS.
CONSISTENCIA. - Puede ser acuosa lquida, blanda, pastosa o semiformada,

formada y dura. Normalmente y con dieta mixta, la deposicin debe ser slida y
formada, es decir cilndrica y consistente para mantener esta forma despus de
ser excretada.
COLOR. - Normalmente y con dieta mixta, la deposicin es de color pardo o caf

marrn mas o menos oscuro en el adulto, en nios debido a la dieta Lctea es
amarillenta, con dieta carnea se hace marrn oscuro. Una alimentacin rica en
verduras, tie las heces de color verdoso, mientras que si preponderan papas o
pan las heces se aclaran a marrn amarillento.
OLOR. - El olor fecal caracterstico, se hace ftido en todos los procesos que
cursan con putrefaccin de las protenas ingeridas o endgenas, dado por
productos aromticos originados por la accin de microorganismos de
fermentacin o de putrefaccin que actan sobre carbohidratos y protenas como
el indol y el escatol.
RESTOS ALIMENTICIOS. - Se observa la capacidad digestiva del paciente.
MOCO. - Su aparicin en las deposiciones suele ser reconocible

macroscpicamente.
Si se encuentra finamente dividido y mezclado en las heces, dndole un color
brillante, entonces procede del intestino delgado a diferencia del moco en copos
visibles tiene un origen mas bajo y sobre todo el que se observa en tira tiene un
origen en el colon distal.

ECISALUD
SANGRE. - Su presencia es anormal debida a una accin traumtica por algn

agente infeccioso. Se puede encontrar fresca dndole una coloracin rojo brillante
cuando los daos son en el colon o bien encontrarse metabolizada,
proporcionndole a las heces un color rojo oscuro o negrusco cuando los daos
son a nivel de intestino delgado.
PRESENCIA DE PARSITOS MACROSCPICOS. - Algunos parsitos como

scaris lumbricoides pueden ser observados a simple vista, los oxiuros pueden
hallarse en la superficie inicial de las heces, algunos otros parsitos pueden salir
como fragmentos como las tenias y es necesario buscarlos en la totalidad de la
muestra.
AZUCARES REDUCTORES. - demuestra la presencia de carbohidratos (glucosa)

en la sangre y puede ser diagnostico de intolerancia lctica.
MATERIALES Y MTODO
Realice la toma de muestra, es importante sealar para este tipo de estudio no se

debe agregar ningn conservador a la materia fecal para realizar la recoleccin y
transporte. Realizar el examen macroscpico tomando en cuenta todas las
caractersticas mencionadas.
Forma de reportar: la presencia el ltimo parmetro se reportan como:

Positivo: Se observaron (quistes, huevecillos o larvas) de (parasito) +, ++, +++ o
++++.
Negativo: No se observaron quistes, huevecillos ni larvas
ACTIVIDAD
Cuestionario:
Qu tecnicas se utilizan para realizar la toma de muestra fecal?
Que reactivo o colorantes se pueden utilizar para el analisis de las muestras?
Diga cuales mtodos de anlisis coprolgico existen
ANEXOS
Estudio de caso: septicemias.
Estudio de caso: parasitismo

ECISALUD
BIBLIOGRAFA
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Oxford University Press. June 2002.
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Lpez-Urrutia A. La intranet como soporte del sistema de calidad del laboratorio.

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Magnitudes Biolgicas relacionadas con la Urgencia Mdica1Documento F. Fase
3. Versin 6 Preparado por: G. Padrs Soler, A. Galn Ortega, E. Guillen
Campuzano,
Sociedad Espaola de Bioqumica Clnica y Patologa Molecular. Comit

Cientfico.
Comisin Magnitudes Biolgicas relacionadas con la Urgencia Mdica. Documento

E. Fase 3. Versin 7 Preparado por: A. Noguera Bennaser, A. Galn Ortega, E.
Guillen Campuzano, M.L. Hortas Nieto, J.L. Marn Soria, G. Padrs Soler.
Recomendaciones para el estudio de lquidos biolgicos serosos en el laboratorio
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Recomendaciones para la acreditacin de laboratorios clnicos (Vol. 1)
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Viroj Wiwanitkit. Published online 2001 October 16. Types and frequency of
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2003: 41 (7): 884-7

ECISALUD
PRACTICA # 10 ESPERMATOBIOSCOPIA
Semen y Otros Fluidos Corporales

INTRODUCCION
El anlisis de lquido seminal es un anlisis de laboratorio que comprende una
evaluacin microscpica y microscpica del semen, el elemento primordial para la
fertilidad masculina. El ALS informa a cerca del rendimiento excretor de los
testculos, capta procesos inflamatorios, y oclusiones en las vas espermticas
excretoras. Valora caractersticas fisicoqumicas que dan informacin importante
sobre la contribucin secretora de las glndulas sexuales accesorias. Refleja la
funcin espermtica de los testculos, as como la presencia de otros tipos
celulares.
OBJETIVO
Efectuar una espermatobioscopa directa y conocer sus valores de referencia.
Fundamento
El examen del semen usualmente se practica como parte del protocolo del estudio
de la pareja con problemas de fertilidad. Por su relativa simplicidad, frecuente-
mente se solicita antes de someter a la mujer a estudios que son mas
complicados. Adems, el laboratorio clnico realiza estudios postvasectoma y
anlisis forenses.
MATERIALES Y MTODO
MUESTRA: Se recolecta la muestra despus de un perodo de abstinencia sexual
de 3 das, preferentemente por masturbacin.
REACTIVOS, MATERIAL Y EQUIPO:

-Recipiente para la recoleccin de la muestra -Probeta graduada de 10 ml
-Pipetas de transferencia
-Papel para determinacin de pH -Dilutor
-Cmara de Neubauer
-Portaobjetos y cubreobjetos -Colorantes para tincin
-Microscopio
Mtodo
VOLUMEN: Utilice una probeta graduada
VISCOSIDAD Y TIEMPO DE LICUEFACCION: La licuefaccin debe ser total antes

de 30 minutos. Para valorar la viscosidad, sumergir una varilla de vidrio en la

ECISALUD
muestra y medir la longitud del filamento (normal: 5-10 mm); Otro criterio es que
debe gotear libremente.
pH: Utilice un papel indicador de pH
RECUENTO: Diluya la muestra 1:20 con solucin de Macomber y Saunders (for-

mol, bicarbonato de sodio y agua destilada). Se puede utilizar sa-tisfactoriamente
agua del grifo.
Llene la cmara de Neubauer y cuente los espermatozoides que observe en cinco
de los cuadros pequeos del cuadrado central. Efecte sus clculos y reporte
espermatozoides/ml.
MOTILIDAD: Valorarla entre los 30 y 60 minutos del eyaculado.

Colocar una gota entre porta- y cubreobjetos y observar con el objetivo 40X del
microscopio.
El porcentaje de espermatozoos con movimiento progresivo hacia adelante puede
estimarse despus de observar aproximadamente 20 campos.
La motilidad se puede clasificar en la escala del 0 al 4, indicando 4 movimiento
rpido y progresivo hacia delante y 0 indicando ausencia de movimiento.
MORFOLOGIA: Teir un frotis delgado utilizando el mtodo de Giemsa, Wright o

Papanicolaou. Observar bajo aceite de inmersin al menos 200 espermatozoos y
reportar como porcentaje.
ACTIVIDAD

1. Qu instrucciones da Usted al paciente para una adecuada recoleccin de
muestra para espermatobioscopa?
2. En que consiste la prueba de Sims-Huhner?
3. Cul es el protocolo a seguir para la valoracin postvasectoma?
4. y 5.: Preguntas adicionales elaboradas cada semestre por su profesor.
ANEXOS
Estudio de caso: enfermedades de transmisin sexual (ETS).
Estudio de caso: impotencia.
BIBLIOGRAFA
-SUSAN KING y MARJORIE SCHAUB: Urinalysis and Body Fluids, 4a. Edicin,
EUA, F.A.Davis Company, 2001

ECISALUD
-WORLD HEALTH ORGANIZATION: WHO Laboratory Manual for the Examination

of Human Semen and Sperm-Cervical Interaction.1a. Edicin, Inglaterra,
Cambridge University Press, 1999.
PRACTICA # 10 PRUEBAS TOXICOLGICAS Y FARMACOS DE ABUSO
INTRODUCCIN
Las drogas de abuso son sustancias psicoactivas o psicotrpicas, capaces de

alterar el estado de conciencia, el humor, los sentimientos, la conducta, las
motivaciones y los procesos del pensamiento del individuo que las consume,
traducindose clnicamente en estimulacin o depresin del sistema nervioso
central o modificando la percepcin. El uso inapropiado de cualquiera de estos
compuestos, por lo general ocurre de manera intencional, pero en ocasiones
pudiera desarrollarse inadvertidamente por el sujeto. Casi siempre, aquellas
sustancias que afectan el comportamiento y que adems producen efectos
placenteros, tienden a consumirse en exceso. La autoadministracin de estas
drogas de abuso, en forma repetida o episdica, interfiere con la salud y el
desempeo social y laboral del individuo. La adiccin y abuso del alcohol y otros
frmacos afectan a un nmero importante de la poblacin de muchos pases
incluyendo el nuestro. El alcohol es la sustancia de abuso ms comn en la
civilizacin occidental y los patrones del comportamiento con el alcohol son
similares con otras substancias como la marihuana. Cocana,
benzodiacepinas, opiceos y otros frmacos.
Muchas empresas utilizan un anlisis para detectar el uso de stas sustancias
antes de contratar a un trabajador que pudiera poner en riesgo la seguridad de la
empresa.
OBJETIVO
El alumno conocer algunas de las metodologas para la identificacin de
xenobiticos txicos, frmacos de abuso y/o sus metabolitos.
Se efectuar un rastreo urinario para deteccin de los frmacos de abuso, as
como la determinacin de una sustancia txica en una muestra de sangre u orina.
El anlisis a practicar depender de la disponibilidad de reactivos y equipo.
Fundamento:
El laboratorio de anlisis clnicos con capacidad para la realizacin de
anlisis toxicolgicos aporta informacin prctica al mdico ocupacional sobre
los riesgos de salud, evaluacin de la exposicin y para el seguimiento del
personal en tratamiento.

ECISALUD
MATERIALES Y MTODOS
MUESTRA: Sangre total, suero u orina, segn el anlisis a practicar.
REACTIVOS, MATERIAL Y EQUIPO:

Los indicados por el fabricante del conjunto de reactivos a utilizarse. El alumno
leer ntegramente el inserto del fabricante de los reactivos (uso,
fundamentos, descripcin de los componentes, requerimientos de muestra,
almacenamiento, estabilidad, procedimiento, control de calidad, interpretacin,
etc.)
Segn la disponibilidad de reactivos y equipo, seguir fielmente el protocolo

establecido para el anlisis a realizar.
ACTIVIDAD
ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA: Visitar un laboratorio que realice

exmenes toxicolgicos y conocer su aplicacin a la clnica medica.

1. Enumere al menos 10 txicos industriales o de exposicin profesional, que el
laboratorio clnico cuantifique.
2. Cules son los lmites mximos permisibles de nivel de plomo en sangre en
trabajadores expuestos?
3. 4. y 5. Preguntas adicionales elaboradas cada semestre por su profesor.
ANEXOS
Estudio de caso: intoxicacin por drogas de abuso.
Estudio de caso: intoxicacin por herbicidas y plaguicidas (organoclorados,
organofosforados, carbamatos, etc)
Estudio de caso: intoxicacin por plomo
Estudio de caso: intoxicacin por arsnico.
BIBLIOGRAFA
-EDWARD R. ASHWOOD y CARL A. BURTIS: Tietz Fundamentals of Clinical

Chemistry, 5a. Edicin, EUA, W.B. Saunders Company. 2000.
-www.osha.gov
-www.stps.gob.mx

ECISALUD
-EDWARD R. ASHWOOD y CARL A. BURTIS: Tietz Fundamentals of Clinical

Chemistry, 5a. Edicin, EUA, W.B. Saunders Company. 2000.
-LAWRENCE KAPLAN, AMADEO PESCE y STEVEN KAZMIERCZAK: Clinical

Chemistry, Theory, Anlisis, Correlation, 4a. Edicin, EUA, Mosby, 2003.
-PRICE C. y NEWMAN D. (eds): Principles and Practices of Immunassays, 2a.

Edicin, EUA, Stockton Press, 1997.
PRACTICA # 11 PRUEBAS HORMONALES

INTRODUCCION
Perfil hormonal masculino: este perfil determina la concentracin de las hormonas
andrognicas necesarias para una adecuada salud en el hombre. Estas hormonas
influyen en el estado emocional, la funcin sexual, la fuerza y la masa muscular, la
energa, la salud cardiovascular, la integridad de los huesos, y la capacidad
cognitiva. Ayuda a conocer los niveles sericos de las hormonas para poder
implementar intervenciones que normalicen los niveles para un bienestar total.
Perfil hormonal femenino: Este perfil determina la concentracin de las hormonas

necesarias para una adecuada salud en la mujer. Ayuda a monitorear la mujer
tanto la fase hormonal reproductora como la fase menopusica. Ambos ciclos son
determinantes en el estado emocional, patrones de sueo, apetito, y conducta
sexual. Los desequilibrios crnicos de los estrgenos y progesterona estn
implicados en trastornos tales como sndrome premenstrual, infertilidad,
amenorrea, endometriosis, sndrome de ovario poliqustico, osteoporosis y cncer
de mama.
OBJETIVO
Conocer la utilidad de marcadores hormonales en el diagnstico precoz del
embarazo, en su control, en la mola hidatiforme, coriocarcinoma, carcinoma
embrionario del testculo, embarazo ectpico, control de mola y coriocarcinoma
despus del tratamiento.
MATERIALES Y METODO
Condicin paciente: no requiere ayuno.
Materiales:
1. Materiales para puncin venosa.
2. Tubo tapa amarilla, roja (sin anticoagulante); tubo verde heparina de litio (con
anticoagulante).
Procedimiento:
Muestra: Vase prctica 2 obtencin de sangre venosa

ECISALUD
Transporte:
En gradilla a temperatura ambiente. En un tiempo de traslado que no exceda la
hora luego de ser obtenida la muestra.
Consideraciones
Cantidad de sangre mnima a extraer:
2 cc: nios (tubo sin anticoagulante).
5 cc: adultos (tubo sin anticoagulante)
4 cc: tubo verde heparina de litio (con anticoagulante)
vaciado de la muestra sangunea al tubo: si no se est utilizando sistema tipo
vacutainer o venoject completo (es decir, con camisa), recordar importancia de
retirar la aguja antes de proceder a depositar la muestra en el tubo.
Sobre mantencin de tubos sin uso:
Mantener a temperatura ambiente 20-24 C
ACTIVIDAD
ANEXOS
Estudio de caso: esterilidad.
Estudio de caso: cncer.
Estudio de caso: hipertiroidismo.
BIBLIOGRAFA:
(Anexar bibliografa)

ECISALUD
PRACTICA # 12 PRUEBAS ESPECIALES
INTRODUCCION
El descubrimiento de casi la totalidad del mapa gentico humano (genoma) nos ha
dado las armas para comenzar la lucha definitiva contra las enfermedades. Con
forme la ciencia avanza las pruebas de laboratorio tambin, equipos mas
sensibles, mas especficos y sistemas automatizados mas precisos ayudan a la
determinacin de analitos en pro del diagnostico clnico y la determinacin clnica
de muchas enfermedades. Pruebas inmunomoleculares, genticas y de
investigacin son de gran ayuda en el laboratorio clnico.
OBJETIVO
Conocer y relacionar las pruebas inmunomoleculares asi como sistemas
automatizados que pueden ser de gran ayuda en el diagnostico clnico.
Materiales y mtodo
Se utilizarn medios audiovisuales y documentales en el desarrollo de esta
prctica.
Mtodo
Analizar y relacionar con el diagnostico las siguientes pruebas:
Cariotipo de bandas G (tincin de bandas G con giemsa-tripsina).
Hibridacin in situ con fluorescencia (FISH)
Hibridacin genomita comparativa (CGH)
Cariotipo espectral (sky-FISH) y multi-FISH (M-FISH)
Reaccin en cadena de la polimerasa (analisis molecular mediante PCR).
Microarreglos de ADN.
Reaccin en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR)
Reaccin en cadena de la polimerasa multiple en tiempo real (RT-PCR
multiple).
PCR multiple en tiempo real en el anlisis de mutaciones en tumores
Solidos.
ACTIVIDAD

ECISALUD

BIBLIOGRAFIA
(Anexar bibliografa analizada)
Anexos:
Estudio de caso: tumores
Estudio de: anlisis de inmunoglobulinas (Igs)
Estudio de caso: ADN (prueba de paternidad, polimorfismos, deleciones, etc).
Estudio de caso: enfermedades vs herencia y mapa gentico.

ECISALUD
GLOSARIO
Acidosis. pH del fluido corporal anormalmente bajo. Respiratoria -causada por
una PCO2 anormalmente alta; Metablica-causada por una concentracin de
bicarbonato anormalmente baja.
Acidosis lctica. Acidosis (pH sanguneo bajo) causado por exceso de cido.
Adipsia. Ausencia de sed.
Aditivo. Sustancia qumica que al aadirse a una muestra causa uno o ms
cambios en sus propiedades fsicas o qumicas.
Adsorber. Acoplamiento de una sustancia qumica a una superficie slida.
Aerosol. Una fina niebla producida por la atomizacin de un lquido.
Agua corporal total (ACT). Toda el agua contenida en el cuerpo, tanto dentro
como fuera de las clulas, incluyendo aquellas contenidas en los sistemas
gastrointestinal y genito-urinario.
Agua extracelular (AEC). Agua externa a las membranas; anatmica: toda agua
externa a las membranas celulares; fisiolgica: plasma y agua corporal en la cual
pequeos solutos pueden difundirse; excluye la porcin transcelular del agua
anatmica extracelular; incluye el plasma y el fluido intersticial.
Agua intracelular (AIC). Agua contenida en las clulas del cuerpo; agua dentro
de las membranas celulares.
Agua libre. Agua que no contiene soluto.
Agua transcelular. La porcin de agua extracelular que est rodeada por una
membrana epitelial, cuyo volumen y composicin se determinan por la actividad
celular de esa membrana.
Alcalosis. pH del fluido corporal anormalmente alto; respiratoria: causada por una
PCO2 anormalmente baja; metablica: causada por una concentracin de
bicarbonato anormalmente alta.
Albuminuria. Incremento en la concentracin de albmina en la orina.
Aldosterona. Hormona mineralocorticoide secretada por la corteza adrenal que
influye en el metabolismo del sodio y el potasio.
Alcuota. Una pequea parte de una determinada muestra, la cual tiene la misma
composicin qumica.
Aminoaciduria. Exceso de uno o ms aminocidos en la orina.
Anlisis bicromtico. Monitoreo espectrofotomtrico de una reaccin a dos
longitudes de onda. Usado para corregir el color de fondo.
Anlisis cintico. Anlisis en el cual el cambio del parmetro que se est
controlando con respecto al tiempo est relacionado con la concentracin, como el

ECISALUD
cambio de absorbancia por minuto. Las mediciones son hechas muy

tempranamente en el perodo de reaccin.
Anlisis hmedo de orina. Prueba de tamizaje de la orina que combina una
valoracin fisicoqumica y un examen del sedimento urinario en una preparacin
hmeda no coloreada.
Anlisis de orina por tira hmeda. Examen qumico de la orina empleando tiras
reactivas de prueba para la determinacin de albmina, glucosa, cetonas,
bilirrubina, hemoglobina, bacterias, leucocitos, y otros constituyentes qumicos.
Anlisis de punto final. Monitoreo de una reaccin despus de que sta se ha
completado esencialmente.
Anlisis por tira reactiva. Uso de tiras de prueba conteniendo reactivos qumicos
para determinar si hay concentraciones patolgicas de diversas sustancias en la
orina.
Anastamsis. Conexin de dos vasos sanguneos.
Angiognesis. Una complicacin de la diabetes mellitus. Proliferacin anormal de
los vasos sanguneos en un tejido tal como las lentes del ojo.
Angiopata. Una complicacin de la diabetes mellitus que se manifiesta como un
dao en las membranas basales de los vasos sanguneos.
Angiotensina. Polipptido vasopresor producido por la accin enzimtica de la
renina sobre el angiotensingeno. Una enzima convertidora del pulmn extrae dos
aminocidos C-terminales del decapptido inactivo angiotensina I para formar el
octapptido biolgicamente activo angiotensina II.
ANSI (American Nacional Standard Institute). Miembro de la organizacin
internacional para la estandarizacin.
Anticoagulante. Una sustancia que puede suprimir, retrasar o evitar la
coagulacin de la sangre impidiendo la formacin de fibrina.
Anticuerpos de las clulas de los islotes (ACI). Anticuerpos frecuentemente
encontrados en la diabetes tipo I que sugieren un origen autoinmune.
Antisptico. Una sustancia qumica la cual reduce el nmero de bacterias.
Arterial. Relacionado con o derivado de las arterias, los vasos que conducen
sangre del corazn a los tejidos del cuerpo.
Bacteriuria. Presencia de bacterias en la orina.
Bilirrubinuria. Presencia de bilirrubina en la orina.
Blanco de muestra. Muestra ms diluyente; usada para corregir la absorbancia
de la mezcla completa de reaccin para el color endgeno de la muestra.
Blanco de reactivo. La mezcla de reaccin menos la muestra: usado para restar
el color del reactivo endgeno de la absorbancia de la reaccin completa (ms la
muestra).
Clculos. Concreciones anormales, usualmente compuestos de sales, presentes
en el sistema urinario u otros tejidos; una piedra renal.

ECISALUD
Capilar. Relacionado con un vaso sanguneo muy delgado en los tejidos donde los
nutrientes son depositados y los productos de desecho son removidos por la
sangre.
Catter. Un tubo de hule o plstico que conecta una cavidad del cuerpo con la
superficie del cuerpo.
Cateterizacin. Insercin de un instrumento delgado, flexible y tubular en la vejiga
o urter para obtener o sacar orina.
Clulas plidas. Neutrfilos de tincin tenue, hinchados y degenerados, que se

encuentran en la orina diluida, los cuales tienen grnulos citoplasmticos que
presentan un movimiento browniano caracterstico.
Cetoacidosis diabtica. Una complicacin de la diabetes mellitus caracterizada
por hiperglucemia, hiperosmolaridad, pH bajo, cetonuria y cetonemia, y letargo o
coma.
Cetona. Cualquier compuesto que contiene un grupo carbonilo -CO- y grupos de
hidrocarburos unidos al carbono del grupo carbonilo.
Cetonemia. Exceso en la sangre, de cetonas y de derivados de cetocidos.
Cetonuria. Exceso en la orina, de cetonas y de cetocidos derivados. Presencia
de cetonas en la orina, las cuales son un producto intermedio del metabolismo de
las grasas, como ocurre en la diabetes mellitus.
Cilindros. Estructura cilndrica formada como resultado de conglutinacin de
clulas y precipitacin de protenas en el lumen de los tbulos convolucionados
distales y ductos colectores del nefrn, los cuales son expulsados en el sedimento
urinario.
Cilindros hialinos. Cilindros transparentes formados de mucoprotena.
Cilindruria. Presencia de cilindros en la orina.
Cirrosis. Enfermedad progresiva del hgado caracterizada por el dao a las
clulas del parnquima heptico.
Citodiagnstico de orina. Anlisis especializado de orina que combina una
valoracin fisicoqumica y un examen del sedimento urinario concentrado teido
para Papanicolaou.
CLIA o CLIA88. La Reforma para el Mejoramiento de los Laboratorios Clnicos
(CLIA88 por sus siglas en ingls), reglamenta el funcionamiento de los
laboratorios clnicos en los Estados Unidos. Esta ley se interpreta mediante
regulaciones administrativas desarrolladas por organizaciones certificadoras.
Cogulo. Agregacin de clulas sanguneas unidas por fibrina, una protena
polimerizada.
Coma no cetsico heperglucmico hiperosmolar (CNHH). Una complicacin
de la diabetes mellitus caracterizada por hiperglucemia, heperosmolaridad, Ph
bajo, niveles normales de cetocidos y letargo o coma.
Control de la calidad externo. Programa en el cual una institucin externa
provee muestras desconocidas para su anlisis. (Vea: Survey o proficiency testing

ECISALUD
specimen. Encuesta o especmenes para ensayos de aptitud). Los resultados son

remitidos a los laboratorios participantes con una evaluacin de rendimiento:
aceptable o no aceptable. En el CLIA88 este proceso se conoce con el nombre
de ensayos de aptitud.
Control de calidad interno. Programa analtico que verifica la aceptabilidad y
estabilidad de los resultados del laboratorio, mediante la utilizacin de muestras
controles.
Correccin de Allen. Anlisis multicromtico de una reaccin para corregir la
absorbancia de fondo. Adems de la Amax (absorbancia mxima) del cromforo,
se monitorean dos longitudes de onda para restar la absorbancia de fondo

promedio.
Cristales amorfos. Precipitado de sales no cristalino, granular, sin importancia
patolgica.
Desviacin estndar usual (DEU). Es el promedio de los valores de las
desviaciones estndar de 3 a 6 meses, basados en datos consecutivos de control
de calidad. Es un estimado de la precisin, que un sistema analtico es capaz de
alcanzar.
Desviacin estndar (DE). Es un indicador descriptivo de la extensin de la
dispersin de una poblacin de resultados de ensayos o de un conjunto de datos.
Desviacin estndar mensual. Desviacin estndar calculada con los valores de
control de la calidad diarios durante un mes.
Diabetes inspida. Excrecin crnica de grandes cantidades de orina
hipoosmtica causada por la incapacidad de concentrar la orina debido a la
carencia de la produccin, secrecin o efecto de la hormona antidiurtica, HAD.
Diabetes gestacional. Intolerancia a la glucosa que ocurre en algunos
embarazos.
Diferencia significativa. Aquella que se demuestra estadsticamente que est
ms all del lmite de variabilidad esperado; clnicamente es una diferencia
suficientemente grande para influir en una decisin mdica; operacionalmente es
una diferencia estadsticamente significativa que el personal que realiza el ensayo
y los supervisores consideran suficientemente grande para requerir una
investigacin.
Disacrido. Dos monosacridos ligados por una unin glucosdica.
Diurtico. Un agente que promueve la produccin de orina.
EDTA. cido etilendiaminotetraactico, es un agente quelante de calcio, de uso
comn. Acta como anticoagulante y preservativo, uniendo calcio y otros cationes.
Por sus propiedades quelantes, es capaz de inactivar varias enzimas necesarias
para la formacin del cogulo y para la degradacin de protenas y lpidos en
sangre.
Eritrocituria. Presencia de eritrocitos en orina.
Eritrocituria dismrfica. Presencia de fragmentos de eritrocitos en el sedimento
de orina indicativos de hematuria renal (glomerular y tubular).

ECISALUD
Estndar primario. Substancias qumicas de la ms alta pureza conocida, que

pueden ser usadas para producir calibradores para sistemas analticos.
Estasis. Una disminucin en el flujo de sangre en una parte del cuerpo.
Evaporacin. Transformacin de agua en vapor
Extracelular. Fuera de las clulas.
Flebotoma. Puncin de una vena con una aguja con el propsito de obtener una
muestra de sangre.
Fluido intersticial (FI). Agua extravascular, extracelular.
Fuera de control. Condicin en la cual un sistema de anlisis es rechazado para
ser utilizado en la atencin de los pacientes, debido a los resultados de control de
la calidad o a otros indicadores. Esta circunstancia debe ser declarada

formalmente por el director del laboratorio o por el supervisor tcnico.
Funguria. Presencia de hongos en la orina.
Glucoltico. Relacionado con el proceso del metabolismo de la glucosa.
Gluconeognesis. Produccin de glucosa a partir de cido pirvico.
Glucosa. Un aldehdo polihidroxlico de seis carbonos; fuente principal de energa
en los organismos. Su metabolismo produce adenosn trifosfato.
Glucosilacin. Reaccin en la cual la glucosa se une covalentemente a la
protena.
Glucosuria. Cantidades excesivas de glucosa urinaria.
Gravedad especfica. El peso de una sustancia comparada con un volumen igual
de otra sustancia tomada como estndar.
Grupo semejante. Cuando se utiliza en programas de control externo, indica el
grupo de laboratorios que utilizan mtodos iguales o similares.
HDL. Lipoprotenas de alta densidad. Estos complejos lipo-proteicos se llaman
tambin alfa-lipoprotenas y son las ms densas de las lipoprotenas. Su acrnimo
ms usado es HDL por "High-Density Lipoprotein."
Hematuria. Presencia de sangre en la orina.
Hemoconcentracin. El proceso de incremento en la concentracin de las
clulas, protenas y ocasionalmente otros compuestos analizados en sangre a
travs de la prdida de agua, ya sea in vitro o in vivo.
Hemoglobinuria. Presencia de hemoglobina libre en la orina.
Hemlisis. Ruptura de glbulos rojos, liberando al suero o plasma los contenidos
en ellos.
Heparina. Un anticoagulante el cual inhibe directamente la formacin de fibrina.
Hidrmetro. Instrumento empleado en medir la gravedad especfica de un fluido.
Hiperaldosteronismo. Trastorno causado por la secrecin excesiva de
aldosterona y caracterizada por alcalosis hipopotasmica (hipocalemica), debilidad
muscular, hipertensin, poliuria, polidipsia y concentraciones normales o elevadas
de sodio plasmtico.
Hipercloremia. Concentracin anormalmente alta de cloruro plasmtico.
Hipernatremia. Concentracin anormalmente alta de sodio plasmtico.

ECISALUD
Hiperosmtica. Que denota una presin osmtica efectiva mayor que la del
plasma.
Hiperpotasemia. Concentracin anormalmente alta de potasio plasmtico.
Hipertnica. Que denota una presin osmtica terica mayor que la del plasma.
Hiponatremia. Una concentracin anormalmente baja de sodio plasmtico; por
dilucin: hiponatremia causada por un exceso de agua (con respecto al sodio) en
el compartimento extracelular.
Hipopotasemia. Concentracin anormalmente baja de cloruro plasmtico.
Hiposmtico. Que denota una presin osmtica efectiva menor que la del
plasma.
Hipotnico. Que denota una presin osmtica terica menor que la del plasma.
Hormona antidiurtica (/HAD). Hormona peptdica de la neurohipfisis que acta

en el tbulo colector del rin para permitir un incremento de la reabsorcin de
agua y por lo tanto una disminucin de la excrecin de agua libre por el rin.
Tambin se conoce como vasopresina.
Ictericia. Referente al color anaranjado impartido a la muestra debido a la
presencia de bilirrubina.
IDL. Lipoprotenas de densidad intermedia. Este complejo lipoproteico tiene una
densidad entre VLDL y LDL, es de una vida media relativamente corta y en la
sangre de una persona sana estn en muy bajas concentraciones. En personas
con disbetalipoproteinemia su concentracin en sangre es elevada. Su acrnimo
ms usado es IDL por "Intermediate-Density Lipoprotein."
Infradiano. Cambios en la concentracin de compuestos analizados que ocurren
con menos frecuencia que una vez al da.
Interferente. Cualquier fenmeno qumico o fsico que pueda interferir o detener
una reaccin o proceso.
Intraindividual. Dentro de una sola persona.
Intravenoso. Dentro de una vena; generalmente se refiere a los fluidos
intravenosos, en donde el agua contiene medicamentos, glucosa, o electrlitos
que son administrados a un paciente a travs de un catter insertado en una vena.
In Vitro. Literalmente, en vidrio; ocurre en una situacin artificial, como en un tubo
de ensaye.
In vivo. Ocurre en un organismo vivo.
LDL. Lipoprotenas de baja densidad. Este complejo lipoproteico es tambin
llamado beta-lipoprotena y es el producto final del catabolismo de la VLDL. Es el
mayor transportador del colesterol. Su acrnimo ms usado es LDL por "Low-
Density Lipoprotein."
Levadura. Microorganismo unicelular nucleado que se reproduce por gemacin.
Lmites de accin. Rangos de valores establecidos para las mezclas de control
de calidad. Si los resultados estn por fuera de estos lmites puede existir un
deterioro en la calidad de los sistemas analticos, que debe ser investigado por el
tcnico.

ECISALUD
Lmites de control. Lmites numricos, (expresados en las unidades de los

ensayos), dentro de los cuales deben hallarse los valores de una muestra de
control, para que el ensayo pueda ser considerado vlido o dentro de control.
Lipemia. Presencia de partculas de lpidos (generalmente lipoprotenas de muy
baja densidad) en la muestra, que le dan a la muestra un aspecto turbio.
Lipoprotenas. Complejo lpido (apoprotena)-protena correspondiente a unas
familias de macromolculas con conocidas propiedades fsicas qumicas y
fisiolgicas conocidas.
Materiales de referencia certificados (MRC). Un material de referencia, que
tiene uno o ms de sus valores garantizados por un procedimiento vlido. Est
acompaado o respaldado por un documento expedido por un organismo
certificador. El material tiene una alta pureza del componente especificado.
Mtodo. El principio metodolgico usado en la elaboracin de un ensayo: el

fundamento qumico o fsico del mismo.
Mtodo de referencia. Un mtodo investigado profundamente, en el cual se da
una descripcin precisa y clara de los procedimientos y condiciones necesarias
para la determinacin exacta de uno o ms valores. La exactitud y precisin
documentadas para al mtodo se corresponden con la utilizacin del mtodo para
evaluar la exactitud de otros mtodos, para medir valores de la misma propiedad,
o para asignar valores a materiales de referencia.
Mtodo definitivo. El mtodo analtico que ha sido sometido a la investigacin y
evaluacin de todas las fuentes de inexactitud incluyendo la inespecificidad.
La magnitud de la imprecisin final del mtodo y el sesgo, expresados en la
declaracin de incertidumbre, son compatibles con el propsito e implementacin
final del mismo. El valor final de un mtodo definitivo es tomado como valor
verdadero.
Mioglobinuria. Presencia de hemoglobina en la orina, esta es una protena que
se combina con el oxgeno de las clulas musculares.
Monosacrido. Un aldehdo o acetona polihidroxlico tal como la
glucosa,fructosa o manosa.
Nefritis. Inflamacin del rin.
Neuropata. Una complicacin de la diabetes mellitus atribuida al dao de los
glomrulos y capilares asociados con el glomrulo.
Oliguria. Excrecin anormalmente baja de orina, o sea, menor de 400 mL/ da en
un adulto.
Osmol. El nmero total de moles de un soluto en solucin despus de su
disociacin.
Osmolaridad. Concentracin osmtica expresada en osmoles o miliosmoles de
soluto por litro de solvente.
Osmosis. Movimiento de agua a travs de una membrana semipermeable de una
solucin con baja concentracin de partculas de soluto a una solucin con alta
concentracin de partculas de soluto.
Piuria. Cantidad anormal de leucocitos en orina.

ECISALUD
Plasma. La parte lquida de la sangre en el torrente sanguneo; es una muestra

obtenida de sangre mediante la colecta con un anticoagulante, con una
centrifugacin posterior de la muestra.
Polidipsia. Consumo excesivo de fluido secundario a una sed extrema; polidipsia
psicognica secundaria a un trastorno psiquitrico, sin una lesin orgnica
demostrable.Un sntoma de la diabetes mellitus.
Polifagia. Hambre constante. Un sntoma de la diabetes mellitus.
Polisacrido. Un carbohidrato compuesto de ms de dos monosacridos unidos
por puentes glucosdicos.
Poliuria. Prdida urinaria excesiva. Un sntoma de la diabetes mellitus.
Porfirinas. Un grupo de derivados del pirrol libres de hierro o magnesio que se
encuentran universalmente en todas las clulas. Estos compuestos constituyen la
base de los pigmentos respiratorios en animales y plantas.
Postprandial. Despus de comer.

Presin osmtica coloidal. La presin osmtica efectiva del plasma y el fluido
intersticial a travs del endotelio capilar, mayormente resultante de la presencia de
protena.
Procedimiento. Grupo de instrucciones para utilizar un mtodo, que genera un
resultado analtico.
Proteinuria. Incremento en la concentracin de protena en la orina.
Protelisis. El proceso de degradacin de las protenas, el cual puede ocurrir por
reacciones qumicas o procesos enzimticos.
Pseudohiperpotasemia. Concentracin plasmtica de potasio anormalmente alta
en una muestra obtenida de un paciente, en ausencia de una verdadera elevacin
de la concentracin plasmtica de potasio en ese paciente.
Quelacin. El proceso de unin de una molcula orgnica (quelante) con
mltiples iones metlicos.
Quilomicrones. Grandes complejos lipoproteicos formados en el intestino y que
tienen una importante funcin en el transporte de grasas (mayormente triglicridos
dietarios).
Rechazo falso. Rechazo de una serie porque los resultados de control de la
calidad indican un problema analtico que no est realmente presente.
Rechazo verdadero. Rechazo de una corrida analtica porque los especimenes
de control indican que existe un problema real.
Recuento de Addis. Anlisis cuantitativo del sedimento urinario, en el cual se
cuantifica el nmero de eritrocitos, leucocitos y cilindros en un espcimen de orina
recolectado en un determinado tiempo.
Revisin delta. Comparacin de la concentracin de un compuesto analizado en
la muestra de un individuo, con la misma concentracin existente en la muestra
anterior, de la misma persona.
Semipermeable. Permeable a ciertas molculas pero no a otras; generalmente
permeable al agua.

ECISALUD
Separador de suero. Un componente mecnico que separa fsicamente el suero

y las clulas (los separadores de plasma separan plasma de las clulas),
previniendo los cambios en la concentracin de los compuestos analizados sricos
debido al metabolismo celular.
Sndrome de secrecin inapropiada de la hormona antidiurtica. Conjunto de
hallazgos, incluyendo la hipotonicidad del plasma, hiponatremia e hipertonicidad
de la orina con excrecin continuada de sodio, el cual es producido por una
excesiva secrecin de HAD y que mejora con la restriccin de agua.
Suero. La parte lquida de la sangre que queda despus de que se ha formado un
cogulo.
Tendencia. Cambio gradual en los resultados de las muestras de control de la
calidad, que sugiere un problema con el sistema analtico o con el material de
control.
Torniquete. Un dispositivo mecnico (como una banda ancha de hule) usada en

la superficie de una extremidad la cual comprime las venas, hacindolas aparecer
ms grandes mediante la prevencin del retorno de sangre al corazn y pulmones.
Turbidez. Dispersin de luz en un lquido que contiene partculas suspendidas.
Ultradiano. Cambios en la concentracin de los compuestos analizados los cuales
ocurren en un perodo de tiempo mucho menor que un da.
Urobilingeno. Grupo de compuestos incoloros formados por la reduccin de la
bilirrubina conjugada por la accin de bacterias intestinales. Cerca del 1% del total
del urobilingeno producido pasa a la orina.
Valor asignado. Es el valor medio, establecido para un compuesto analizado en
una mezcla de control de calidad.
Variabilidad inherente. Los valores de las mediciones repetidas de un mismo
material varan alrededor de una media. La desviacin estndar mide la magnitud
de esta variabilidad.
Variacin cclica. Cambios en concentracin de compuestos analizados los
cuales ocurren repetitivamente, en una forma predecible, durante un perodo dado
de tiempo.
Variacin circadiana. Cambios en la concentracin de compuestos analizados la
cual ocurre durante el transcurso de un da.
Variacin preanaltica. Factores que alteran los resultados de una prueba de
laboratorio y que ocurren antes de realizar la prueba.
Virus. Agente que se autorreplica, consta de una estructura fundamental de
cidos nucleicos encapsulados por una cubierta de protenas. Este
microorganismo puede multiplicarse solamente dentro de las clulas de su
hospedero.
VLDL. Lipoprotenas de muy baja densidad tambin llamadas pre-beta
Lipoprotena.

Manual de Lab Clinico2016-1

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Universidad Autnoma de Baja California.

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

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OBJETIVOS DEL CURSO

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

PRACTICA #1 CONTROL DE CALIDAD Y PROCEDIMIENTOS

Los laboratorios clnicos deben de mantener programas de trabajo que incluyan

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

La identificacin completa del paciente debe incluir:

La etiqueta debe incluir:

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

En la fase analtica aqu se debe de cuidar el proceso tcnico para la

Consiste cuando la muestra est preparada para su proceso, hay que

Control positivo: Control que contiene el analito en una concentracin superior a

Control negativo: Control que contiene el analito en una concentracin inferior a un

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

Jos Ignacio Campillo Garca. Diario oficial de la federacin. Disponible en:

Diario Oficial de la Federacin. SEGOB. NOM-007-SSA3-2011. 27 de marzo de

Athenea, Diccionario de Trminos en control de calidad para el laboratorio clnico,

Scrib. Fases del control de calidad en el laboratorio clnico. QFB. Williams

RIO-RAD Laboratories. Clinical Diagnosis Group. Sistemas de control de calidad

UNODC. Naciones Unidas. Glosario de trminos sobre garanta de calidad y

Sistemas de Control de Calidad Bsico e Intermedio para el Laboratorio Clnico.

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

-De acuerdo a la informacin proporcionada por su profesor y lo investigado diga

Respaldar con bibliografa

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

PACTICA #2 TOMA Y MANEJO DE MUESTRA DE SANGRE Y LQUIDOS

FLUIDOS CORPORALES DE ALTO RIESGO:

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

FLUIDOS CORPORALES DE BAJO RIESGO:

PRECAUCIONES UNIVERSALES CON SANGRE Y FLUIDOS CORPORALES:

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

MASCARILLAS, ANTEOJOS PROTECTORES se deben usar en los

PECHERAS IMPERMEABLES su uso est indicado en los procedimientos en que

SI DURANTE EL PROCESO DE ATENCION DE CUALQUIER PACIENTE, LA PIEL O LAS MANOS DEL

EL CUMPLIMIENTO DE LA NORMATIVA ES UN DEBER DE RESPONSABILIDAD CON NOSOTROS.

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

NORMAS DE MANIPULACION Y TRANSPORTE DE MUESTRAS

En caso de derrame de una muestra deben tomarse las siguientes medidas:

4.- OTROS FLUIDOS BIOLGICOS:

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

2.-La puncin arterial es necesaria fundamentalmente para la realizacin de

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

3.- Puncin capilar: Sistema de coleccin de mayor uso en nios menores de un

4.- Puncin de taln:

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

Toma de muestra fluidos corporales

Muestra de orina (General de orina): La muestra ideal es la primera miccin de la

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

Colocar la bolsa de plstico o el colector.

Muestra de orina de 24 horas: Se utiliza para la determinacin de algunas

Urocultivo: La toma de muestra de orina para cultivo y antibiograma es similar a

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

Lquido pleural, pericrdico, sinovial, peritoneal, amnitico:

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

Preparacin de la piel con tcnica asptica.

Moreno S., Zambrano H. Manual para la toma de muestras para anlisis

Landman Cecilia. Manual de tcnicas de toma de muestra para exmenes de

Aznar Javier. Manual de obtencin y manejo de muestras para el laboratorio

Elaboro: QFB Daniel Mora Bueno

PRACTICA #3 COMPONENTES SANGUINEOS Y BIOMETRIA HEMATICA