1.

INVESTIGAR QU ES LO QUE CAPTA LA HUMEDAD DEL AMBIENTE PARA

TRANSFORMARLA EN AGUA
A medida que pasan los aos, el problema del agua potable se agudiza. Las fuentes
de agua potable no son infinitas, y el crecimiento de la poblacin mundial incrementa
la demanda de este lquido indispensable. La turbina WMS1000 de EoleWater es
capaz de recolectar el agua que se encuentra en el aire gracias a un
condensador de humedad que equivale a un intercambiador de calor de un
metro de ancho por cinco kilmetros de largo. Es capaz de funcionar durante
aos, produciendo 1000 litros de agua potable al da, sin peligro de agotar la fuente
ni contaminar el ambiente.
La idea de recolectar el agua que contiene el aire no es nueva. Todos sabemos
que en la atmsfera se encuentra un porcentaje variable de agua en suspensin.
Un joven francs, llamado Marc Parent, se encontraba trabajando en la isla caribea
de San Bartolom en 1997, y desarrollo un sistema capaz de obtener agua potable
a partir de la humedad que condensaba el aparato de aire acondicionado de su
vivienda. Ese fue el primer paso en el desarrollo de un sistema que hoy da se
encuentra protegido por una patente y que ha dado lugar a una prspera empresa
llamada Eole Water. Uno de sus ltimos inventos es una turbina elica,
la WMS1000, que transforma la humedad del aire en agua potable a un ritmo de
unos 1000 litros por da. Al ser impulsada por el viento no requiere de energa extra
para funcionar ni contamina el ambiente. La turbina extrae el agua, la filtra y luego
la remineraliza. La empresa, que tiene su sede en la pequea localidad francesa de
Sainte Tulle tiene planes de construir modelos capaces de producir entre 5 y 10 mil
litros de agua potable diarios.
Una solucin para los lugares en los que no hay agua potable

Segn informa la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) en el informe GLASS

2014, existen 748 millones de personas que no tienen acceso a agua potable de
forma sostenida, y 1.800 millones de personas consumen agua contaminada.
Facilitando el acceso a agua potable se reducira la mortalidad infantil, adems de
poder combatir enfermedades y reducir costes en sanidad. Por eso, Fresh
Water puede ser una solucin a este problema.

2. CMO SE HACE LA DETERMINACIN DE COLIFORMES TOTALES Y

FECALES?
La determinacin de microorganismos coliformes totales por el mtodo del Nmero
ms Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo microbiano de
fermentar la lactosa con produccin de cido y gas al incubarlos a 35C 1C
durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales biliares. Esta
determinacin consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase confirmativa. En la
fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de sodio el
cual permite la recuperacin de los microorganismos daados que se encuentren
presentes en la muestra y que sean capaces de utilizar a la lactosa como fuente de
carbono. Durante la fase confirmativa se emplea como medio de cultivo caldo
lactosado bilis verde brillante el cual es selectivo y solo permite el desarrollo de
aquellos microorganismos capaces de tolerar tanto las sales biliares como el verde
brillante. La determinacin del nmero ms probable de microorganismos coliformes
fecales se realiza a partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva y se
fundamenta en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y producir
gas cuando son incubados a una temperatura de 44.5 0.1C por un periodo de 24
a 48 h. Finalmente, la bsqueda de Escherichia coli se realiza a partir de los tubos
positivos de caldo EC, los cuales se siembran por agotamiento en medios selectivos
y diferenciales (Agar Mac Conkey, Agar eosina azul de metileno) y posteriormente
realizando las pruebas bioqumicas bsicas (IMViC) a las colonias tpicas.
MEDIOS DE CULTIVO Y DILUYENTES
1. Para anlisis de agua
Para la preparacin del medio de cultivo utilizado en la prueba presuntiva de
muestras de agua o hielo, consultar el cuadro 1.
5 10 tubos de 22 x 175 mm con 10.0 mL de caldo lauril sulfato de sodio o
caldo lactosado concentracin doble o triple con campana de Durhama .
5 10 tubos de 16 x 150 mm con 10.0 mL de caldo bilis verde brillante con
campana de Durhamb .
5 10 tubos de 16 x 150 mm con 10.0 mL de caldo EC y campana de Durham
o caldo EC MUG con campana de Durham b .
2 cajas Petri con agar para mtodos estndar d
2 cajas Petri con agar Eosina azul de metileno c
6 tubos de 13 x 100 con 3.0 mL c/u de caldo RM-VPe
3 tubos de 13 x 100 con 3.0 mL c/u de caldo triptona o agar SIM (opcional)e
3 tubos de 13 x 100 con 3.5 mL c/u de caldo citrato de Koser o citrato de
Simmons (opcional)e
SOLUCIONES, REACTIVOS E INDICADORES
Frascos gotero con reactivo de Ehrlich o Kovace
Frascos gotero con indicador rojo de metiloe
Frascos gotero con reactivo alfa naftol VP1e
Frascos gotero con solucin de hidrxido de potasio al 40 % VP2e
COLORANTES PARA TINCIN DE GRAMd
MATERIAL Y EQUIPO
Mechero, a,b,c,d,e .
Pro pipeta .
Gradilla a,b,c,e .
Lmpara de luz ultravioleta de longitud amplia 4 watts. (366 nm)c
Lentes de seguridad
Pipetas de 10.0 mL estriles con tapn de algodn.
Pipetas de 1.0 mL estriles con tapn de algodn.
Pipetas Pasteur estriles a, b, c, d
Asa bacteriolgica b,c,d,e
Portaobjetos
Microscopio ptico
Termmetro calibrado
 Bao de agua a 44.5 0,1C.b
Incubadora a 35 2,0Ca .
Horno para esterilizar material de vidrio a 160-180Ca
Autoclave NOTAS a Material necesario al inicio de la prctica. b Material
necesario a las 48 h. de iniciada la prctica. c Material necesario a las 96 h. de
iniciada la prctica. d Material necesario a las 120 h. de iniciada la prctica. e
Material necesario a las 144 h. de iniciada la prctica.

PROCEDIMIENTO
1. Agua y hielo
1.1 Prueba presuntiva

Agitar la muestra y transferir volmenes de acuerdo con el cuadro 1, a cada uno

de los tubos con caldo lauril sulfato de sodio que se hayan seleccionado. Agitar los
tubos para homogeneizar la muestra.
CUADRO 1. Preparacin de inculo con caldo lauril sulfato de sodio.

Preparacin CANTIDAD VOLUMEN CALDO CONCENTRACIN

de inculo DE MEDIO DE MEDIO LAURIL
con caldo POR TUBO MAS TRIPTOSA
lauril sulfato (mL) INOCULO REQUERIDO
de sodio (mL) g/L
 1 10 o mas 11 o mas 35.6 1x
10 10 20 71.2 2x
10 20 30 53.4 1.5x
20 10 30 106.8 3x
100 50 150 106.8 3x
100 35 135 124.6 3.5x
100 20 120 124.6 4x

Incubar los tubos a 35 0,5C. Examinar los tubos a las 24 h., observar si hay
formacin de gas (desplazamiento del medio en la campana de Durham); si no se
observa produccin de gas, incubar 24 h. ms.
1.2 Prueba confirmativa de microorganismos coliformes totales
Transferir de 2 a 3 asadas de cada tubo positivo obtenido durante la prueba
presuntiva, a tubos que contiene caldo de bilis verde brillante (brila), con
campana de Durham.
Agitar suavemente los tubos para su homogeneizacin.
Incubar a 35 2C durante 24 a 48 h..
Registrar como positivos aquellos tubos en donde se observe turbidez
(crecimiento) y produccin de gas despus de un perodo de incubacin de 24
a 48 h..

Consultar la tabla 1 2 de NMP para conocer el nmero ms probable de

organismos coliformes totales/100 mL.
1.3 Prueba confirmativa de microorganismos coliformes fecales.

Transferir de 2 a 3 asadas de cada tubo positivo obtenido durante la prueba

presuntiva a tubos con caldo EC.
Agitar suavemente los tubos para su homogeneizacin.
Incubar a 44.5 0.1C en incubadora o un bao de agua con circulacin
durante 24 a 48 h.
Registrar como positivos todos los tubos en donde se observe crecimiento y
produccin de gas despus de un perodo de incubacin de 24 a 48 h.
Consultar la tabla 1 2 de NMP para conocer el nmero ms probable de
organismos coliformes fecales/ 100 mL.

Control de calidad para coliformes fecales

1. Inocular en tubos de caldo EC una cepa de E. coli como control positivo y una
de Enterobacter aerogenes como control negativo e incubar junto con las
muestras.
1.4 Prueba confirmativa para Escherichia coli

Tomar una asada de cada uno de los tubos positivos de caldo EC y sembrar por
estra cruzada en agar eosina azul de metileno para su aislamiento.
 Incubar las placas invertidas a 35C por 18-24 h.

Seleccionar dos colonias de cada placa con la siguiente morfologa colonial:

Colonias con centro negro, planas con o sin brillo metlico. Si no hay colonias con
morfologa tpica, probar una o ms colonias lo ms parecido E. coli de cada placa
y sembrarlas en agar cuenta estndar para realizar las pruebas de morfologa
microscpica y pruebas bioqumicas.

Incubar las placas a 35C por 18-24 h.

Hacer un frotis y teirlo por Gram. Observar al microscopio la presencia de bacilos

cortos o cocobacilos Gram-negativos.
1.4.1 Identificacin bioqumica de Escherichia coli mediante pruebas (IMViC).

A partir de las cajas de agar cuenta estndar, seleccionar una colonia, suspenderla
en 2 ml de solucin salina isotnica para realizar las siguientes pruebas bioqumicas.
a. Produccin de indol (I)
Tomar una asada de la suspensin bacteriana e inocular un tubo con caldo
triptona, incubarlo a 35C por 24 2 h.
Finalizada la incubacin, adicionar entre 0.2 y 0.3 mL de reactivo de Kovacs o
Ehrlich.
La presencia de una coloracin roja en la superficie del tubo se considera como
prueba positiva para la presencia de indol.
b. Produccin de cidos mixtos (o prueba de rojo de metilo, RM)
Tomar una asada de la suspensin bacteriana e inocular un tubo que contenga
caldo RM-VP, incubar a 35C por 48 2 h.
Finalizada la incubacin, adicionar 5 gotas de solucin de rojo de metilo.
Se considera una prueba positiva cuando se desarrolla un color rojo. Un color
amarillo es una prueba negativa.
c. Produccin de metabolitos neutros (Voges-Proskauer VP)

Tomar una asada de la suspensin bacteriana e inocular un tubo que contenga

caldo RM-VP, incubar a 35C por 48 2 h.
Finalizada la incubacin, adicionar 0.6 mL de solucin KOH 40% (VP1), agitar
y 0.2 mL de solucin alfa- naftol (VP2 ) y agitar.
Dejar reposar el tubo destapado durante 10 minutos; se considera una prueba
positiva cuando se desarrolla un color rosa en la superficie.
d. Utilizacin del citrato (C)

Tomar una asada de la suspensin bacteriana e inocular un tubo que contenga

caldo citrato de Koser o agar citrato de Simmons (opcional) Incubar a 35C por
96 h.
El desarrollo del cultivo que se observa con la turbiedad en el caldo citrato de
Koser, se considera una prueba positiva.
3. INVESTIGAR LAS PRINCIPALES CONTAMINANTES DEL AGUA.
Fuentes de contaminacin
A. Agentes fsicos: Calor
B. Compuestos qumicos inorgnicos:
Sales: Cl-, SO4 2- , HCO, CO3 2- , S2-, Br-
cidos y bases: H2SO4 , HNO3 , HCl, NaOH, KOH
Elementos txicos:
Metales: Hg, Be, Pb, Cu, Cd, Zn, Fe, Mn, Cr
No metales: As, Sb, Se, B Elementos radioactivos
Gases: H2S, NH3 , Cl2 , CO2
Especies minerales no disueltas: Slice, Arcillas, etc.
C. Compuestos qumicos orgnicos
Carbohidratos, aminocidos, protenas
Aceites y grasas
Hidrocarburos, principalmente derivados del petrleo
Jabones y detergentes
Pesticidas
D. Bionutrientes: Compuestos nitrogenados, compuestos fosforados, producen
un fenmeno denominado eutrofizacin.
E. Microorganismos:
Bacterias
Virus
Hongos
Algas
F. Residuos slidos
4. efectos de la contaminacin del agua
El hombre, es el principal causante de la contaminacin del agua, ya que la
eliminacin de residuos lquidos, domsticos e industriales, as como
desperdicios slidos como la basura, en los ros y otros cuerpos de agua, trae
como consecuencia su inutilizacin. La misma naturaleza es fuente de
contaminacin por el arrastre del suelo y capas vegetales, debido a la
deforestacin incontrolada.

Los efectos ms comunes producidos son los siguientes:

Efectos Fsicos: como mal olor, cambio de color, enturbiamiento, fermentacin,

cambio de temperatura...
Efectos Qumicos: como la disminucin de la concentracin necesaria de
oxgeno para la vida acutica.
 Efectos Biolgicos: como la muerte de plantas y animales, as como la
produccin de enfermedades en el hombre.

Efectos de la contaminacin del agua en la salud

Amebiasis: dolores abdominales, diarreas, fiebre, escalofros, lceras.

Clera: Diarrea profunda, vmitos, dolores abdominales, deshidratacin.
Gastroenteritis: dolores abdominales, diarrea, fiebre, vmitos.
Fiebre tifoidea: fiebres constantes, vmitos, anorexia, diarrea.

http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Analisis_Agua_NMP_22309.pdf
http://www.ircwash.org/sites/default/files/245.11-91AD-9090.pdf
http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis203.pdf
 UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO
Ingeniera Qumica e Industrias Alimentarias
Alumna: Romero Chancafe Mayuri
Docente: M. Sc. Ronald Gutirrez Moreno
Lambayeque, enero del 2017