PRACTICA N 4

1. Cul es la finalidad de agregar antibiticos a los

medios de cultivo?

El uso de antibiticos como la penicilina G 100 U/ml,

estreptomicinas 100 g/ml, permiten inhibir la contaminacin
bacteriana y contra los mohos se utiliza la fungizona
(anfotericina B) a 2.5 a 5.0g/ml o el micostatin de 20 a 25
g/ml.

2. Para qu se realiza la prueba de tioglicolato y

tripticaseina soya?

Tioglicolato: es un excelente medio para la detetcciom de

contaminacin bacteriana, provee ambiente de aerobiosis y
anaerobiosis. Las ustancias reductoras, tioglicolato y casena
proporcionan una anaerobiosis suficiente, incluso para
anaerobios exigentes.

tripticaseina soya: altamente nutritivo para el crecimiento

de hongos y levaduras, es un medio de cultivo universal, esta
excento de sustancias inhibidoras y de indicadores. til para
pruebas de esterilidad, para recuperacin de mohos y
levaduras contaminantes.

3. De qu manera se lleva a cabo la esterilizacin de

los medios y por qu?

La filtracin es un mtodo de esterilizacin por reducir la

carga bacteriana y se utiliza para esterilizar medios de cultivo
que contienen protena o suero, productos farmacuticos,
antibiticos, aceites y otras sustancias. Todos los medios de cultivo han
de estar perfectamente estriles para evitar la aparicin de formas de vida que puedan
alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los
especimenes inoculados en dichos medios. El sistema clsico para esterilizar los medios
de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a presin como agente
esterilizante)
 PRACTICA N 5

1. Cul es la importancia de saber preparar las

diluciones?
la funcin de la dilucin en serie es una tecnica que te permite disminuir lo ms posible el numero
de bacterias de una muestra para que asi sea cuantificable el numero de colonias que crecen en
los medios de cultivos, o para q m entiendas, se usa para q sea posible y mucho mas facil contar el
numero de colonias de bacterias que se desarrollan en una cajita de petri con el cultivo de
bacterias de esa dilucion

2. Qu efectos tendra una dilucin mal realizada en la

obtencin de los resultados?

3. Cmo se interpreta o demuestra que el virus en sta

prctica se ha diluido?

PRACTICA N 6

Preguntas para discusin

1. Cules son los aspectos a considerar para obtener

ptimos resultados en el aislamiento y la propagacin
del virus en el embrin de pollo?

Para obtener ptimos resultados en el aislamiento y

propagacin de los virus, se deben considerar los siguientes
aspectos: Va de inoculacin, edad del embrin la cual
depende del virus que se va a inocular, temperatura de
incubacin, tiempo de incubacin, volumen y dilucin del
inoculo, ya que al ser mayor el volumen a inocular podr
causar mayor mortalidad.

2. Cules son las vas de inoculacin ms utilizadas y

por qu?
 Cavidad alantoidea: Es una ruta ms importante y
frecuentemente usada debido a su simplicidad en la
inoculacin del virus. Se emplean embriones de 9-11 das
de edad y normalmente se inocula 0.1 ml de suspensin
viral.,
Membrana corioalantoidea: Es una va apropiada para el
aislamiento de virus de la viruela, virus de la
Laringotraqueitis aviar, virus de la enfermedad de
Aujezsky, entre otros que producen pstulas visibles.
Saco vitelino.

3. Menciona algunas de las lesiones que pueden

estar presentes en el embrin, como resultado de
la replicacin viral?

La inoculacin de un virus en huevo embrionado puede

presentarse la muerte embrionaria, por lo que se debe
ovoscopiar a las 24 horas posterior a la inoculacin, La muerte
ocurrida dentro de las primeras horas, estas se considerarn
por traumatismo y las muertes ocurridas posterior a este
periodo, sern atribuidas al virus y se colocarn a 4 C para su
posterior estudio del lquido, observacin del embrin y sus
estructuras.

PRACTICA N 8

1. Cules son las caractersticas ms importantes de

las cepas de la Enfermedad de Newcastle, y porqu
han recibido esa denominacin?

La enfermedad del Newcastle velognico viscerotrpico, se

describi en 1927 y se denomin ocasionalmente como
enfermedad de Newcastle Asitica. As mismo, la enfermedad
del Newcastle velgenico neurotropico, se describi en 1942 e
inicialmente se denomin enfermedad del Newcastle
Americana, la enfermedad del Newcastle mesognica,
originalmente se describi en 1946 y algunas de estas cepas
se utilizaron como vacunas en aves. La otra forma de
enfermedad del Newcastle lentognica se describe en 1948 y
estas cepas se utilizan para la vacunacin masiva en las aves
jvenes.

2. Cmo se calcula el ttulo viral para la enfermedad

de Newcastle?

El diagnstico de laboratorio se realiza mediante el

aislamiento del virus a partir del bazo, cerebro o pulmn, por
inoculacin va cavidad alantoidea en huevo embrionado libre
de patgenos especficos (SPF) de 10 das de edad, en los
cuales se alcanza un ttulo viral elevado.

3. Con fundamento terico Qu significa

hemoaglutinacin?

Hemoaglutinacin es la propiedad que tienen ciertos virus para unir y aglutinar eritrocitos de
mamferos y aves, debido a las protenas que poseen en su capa externa Esta hemoaglutinacin
inducida por virus puede usarse para facilitar la identificacin de un virus desconocido.

4. Realiza un esquema de la prueba

5. Realiza el clculo de resultados mediante la escala de Reed

y Muench.

PRACTICA N 9

Preguntas para discusin

1. Menciona los efectos del virus sobre el embrin.

Tales efectos incluyen enanismo, adherencia de la membrana amnitica,
hemorragia y muerte de los embriones, variando las lesiones en funcin a las
muestras y el nmero de pasajes en el huevo.

2. Comentar la DIE50 obtenida del virus.

3. Realice un esquema de la prueba.

4. De acuerdo a los resultados obtenidos en la prueba

describa cuales son las posibles causas de no tener resultados
homogneos?

PRACTICA N 10

Preguntas para discusin

1. Cules son las caractersticas de la enfermedad?

2. Realiza un esquema de la prctica.

3. Cul fue el ttulo de la suspensin viral calculado por el

mtodo de Reed y Muench?

4. Interprete sus resultados obtenidos.

PRACTICA N 11

Preguntas para discusin

1. Define un cultivo celular.

Por cultivo celular se entiende el conjunto de tcnicas que

permiten el mantenimiento de clulas in vitro, manteniendo al
mximo sus propiedades fisiolgicas, bioqumicas y genticas.
Un cultivo celular supone una disgregacin celular por medios
enzimticos o mecnicos y el producto o suspensin celular,
esta se puede cultivar como monocapa adherente o en
suspensin en el medio de cultivo. Este tipo de cultivos
permite su propagacin, aumentando notablemente su masa
celular del cultivo a lo largo de las generaciones.

2. Menciona la importancia de realizar cultivos

celulares en medicina veterinaria.

3. Qu es la tripsinizacin?

La tripsina es una enzima que rompe los enlaces de las

protenas mediante hidrlisis. Es producida en el pncreas y
activada en el duodeno.

En cultivos celulares de clulas adherentes se usa para

despegar las clulas de la superficie de crecimiento (placas de
cultivo) y poder tenerlas en suspensin.

4. Mencione que es un cultivo celular primario y

cules son las ventajas que tiene?

el cultivo primario, se obtiene directamente del tejido original,

y a partirde este, aumenta el nmero de clulas obtenidas acaban
predominando uno o dos tipos celulares: los que tienen mayor tasa de
crecimiento la poblacin celular se hace uniforme y homognea sus
caractersticas se conservan durante las sucesivas generaciones y, si se
conservan en nitrgeno lquido, de forma indefinida

5. Para qu nos sirve realizar un conteo celular?

Los conteos celulares pueden ser usados principalmente en:
 1. Monitoreo de la salud de los cultivos

2. Monitoreo de los niveles de proliferacin

3. Evaluacin de la inmortalizacin para la transformacin

Es importante que los conteos celulares sean precisos, consistentes y rpidos, en particular
cuando se monitorean las respuestas celulares cuantitativas

6. Realice el ejercicio de conteo celular de acuerdo a la

tcnica descrita.

PRACTICA N 12

1. Cules son las principales lesiones encontradas en

cultivo de fibroblastos en la replicacin viral?

2. Calcula la Dosis Infectante Cultivo de Tejidos 50 mediante el

mtodo de Reed y Muench.

PRACTICA N 13

1. Menciona la importancia de realizar la congelacin

de lneas celulares.

Se recomienda conservar muestras de clulas en alcuotas

con el fin de minimizar la acumulacin de cambios genticos
en las lneas continuas, esto evitara el cambio y la
transformacin de lneas finitas y la prdida accidental de una
lnea por muerte o contaminacin.

2. Qu funcin tiene la glicerina y el DMSO en la

congelacin de clulas?

El DMSO Su accin crioprotectora se atribuye principalmente a su habilidad

de prevenir acumulacin excesiva de electrolitos y otras sustancias durante el
proceso de congelamiento, y la formacin de cristales de hielo que rompen la
estructura de la membrana,

La GLICERINA acta como agente crio conservante

3. Cul es la razn de este mtodo de reconstitucin
celular?

Es importante disponer de alcuotas congeladas de las clulas

con el fin de minimizar la acumulacin de cambios genticos
en las lneas continuas, evitar la senescencia y la
transformacin en las lneas finitas, y evitar la prdida
accidental de una lnea por muerte o contaminacin.

PRACTICA N 15

1. En que consiste la neutralizacin viral?

la neutralizacin viral consiste en el descenso del ttulo

infectante de una preparacin viral posterior a la exposicin a
anticuerpos.

2. Cuntos mtodos existen para realizar la

neutralizacin de un virus y en que consisten?

Mtodo Alfa. Se usa un virus ms suero diluido de forma

constante en un volumen igual de soluciones ante diluciones
decuples del virus. Este mtodo identifica el virus.

Mtodo Beta. Utiliza un anticuerpo ms virus diluido de forma

constante, generalmente con 100 a 200 unidades, ante un
volumen igual de diluciones dobles del anticuerpo. Este
mtodo mide el ttulo de anticuerpos

3. Cmo se interpretan los resultados obtenidos en

una prueba de suero neutralizacin?

El ttulo del suero se considera como la ms alta dilucin de

este que es capaz de neutralizar la actividad viral, que es
detectada por el efecto citoptico.
El titulo se expresa como la dilucin ms alta capaz de
neutralizar 100 a 200 DICT50/0.2 ml.

4. De acuerdo a la prctica realizada cuales fueron los

datos obtenidos y realice su interpretacin de los
mismos.

PRACTICA N 16

1. En que consiste la prueba de inmunofluorescencia?

El fundamento de la prueba es la combinacin de protenas

anticuerpos presentes en un antisuero unidos o teidos con
colorantes fluorescentes para formar conjugados
(anticuerpos fluorescentes), estos muestran e identifican el
antgeno, bien en los cultivos celulares infectados en caso de
que el virus no sea citoptico, en improntas y en cortes de
tejidos de animales infectados.

2. Por medio de esta prueba que se detecta en la

muestra teida?

3. Cul es la muestra que se debe tomar de un animal

cuando se sospecha de rabia?

Con la tcnica de inmunofluorescencia se debe usar

muestras de tejido cerebral, con otras tcnicas como las
inmunoquimicas, se pueden usar Muestras recogidas del
tejido cerebral, del tejido de la piel, de la orina o de la saliva.

4. Mediante IF, en la impronta que estructuras deben

de ser observables para considerarla positiva?

Se observa una fluorescencia brillante especfica de color

verde limn, de diferente tamao, desde una arenilla hasta el
tamao de un corpsculo de Negri.
 PRACTICA N 17

1. Menciona la diferencia que existe entre los mtodos

alfa y beta

El mtodo alfa mantiene la cantidad constante de virus que se

agrega a cada tubo o pozo, mientras el suero problema se
diluye de manera seriada. El mtodo beta consiste en agregar
una cantidad estandarizada de suero a cada tubo o pozo, en
donde se hacen diluciones seriadas de una suspensin de
virus cuya actividad hemaglutinante es conocida. Ambos
mtodos estiman los niveles de anticuerpos presentes en un
individuo.

2. Como se interpreta una reaccin de inhibicin de la

hemoaglutinacin?

La completa sedimentacin o formacin de botn de glbulos

rojos en el fondo del pozo es negativo a la hemoaglutinacin y
la observacin de la formacin de una red en el fondo del
pozo es positiva a la hemoaglutinacin.

3. Cmo se define una unidad hemoaglutinante?

unidades hemaglutinantes (UHA), que se definen como el

inverso de la ltima dilucin en que los virus fueron capaces
de aglutinar.

4. Que es la elusin de los virus?

5. Que factores pueden afectar el resultado de la

prueba dando falsos positivos?

6. Realice un esquema de la prueba e interprete los

resultados obtenidos
7. Menciona algunos de los virus que tienen la
capacidad de hemoaglutinar

Adenoviridae, Poxviridae, Parvoviridae, Flaviviridae,

Orthomyxoviridae, Paramyxoviridae, Coronaviridae,
Bunyaviridae, Rhabdoviridae, Reoviridae.

8. Qu factores influyen en la obtencin del titulo de

la hemoaglutinacin?

El ttulo hemoaglutinante se expresa como el reciproco de la

dilucin ms alta que muestra una completa actividad
hemoaglutinante.

9. Cules son los factores intervienen para que una

prueba de falsa positiva?

10. Realiza el anlisis de los resultados de la prctica

 DIARREA VIRAL BOVINA
Etiologa El virus de la diarrea viral bovina (VDVB) es un pestivirus de la
familia Flaviviridae relacionado con el virus de la peste porcina clsica y el virus de la
enfermedad de la frontera del ganado ovino. El virus presenta mltiples cepas que
se pueden clasificar en dos grandes serotipos: serotipo 1 y serotipo 2. Ambos
pueden provocar cuadros agudos de gravedad variable.

Mecanism La transmisin puede ser vertical (transplacentaria en

hembras preadas transmisin horizontal del virus DVB
o de
ocurre por contacto directo o contacto cercano indirecto con
transmisi animales infectados. El virus se propaga a travs de las
n secreciones nasales y oculares y de las heces.

Especies Bovinos Porcinos Ovinos y Caprinos Alpacas Llamas

Camlidos Bfalos de agua Rumiantes silvestres Otros
afectadas
Artiodctilos
sintomatolog sistemas inmunitario, respiratorio, reproductor y digestivo.
a lceras en la boca y el tubo digestivo, as como diarrea
hemorrgica. Puede producirse una diarrea tradicional, pero es
raro.

Disminucin del rendimiento reproductivo.

 Inmunosupresin que est al origen de las enfermedades
respiratorias e intestinales del ternero.

El VDVB tambin puede atravesar la barrera placentaria de una

vaca gestante e infectar al feto, provocando muertes embrionarias,
abortos espontneos y mortalidad perinatal. Muy importante es su
capacidad de provocar el nacimiento de animales persistentemente
infectados (PI) que a menudo pueden pasan desapercibidos y que
constituyen una gran fuente de infeccin para el rebao.

Tratamient No existe un tratamiento especfico, solo se recomienda

terapia de sostn mediante la administracin de electrolitos
o y control
parenterales y soluciones astringentes va oral.
Medidas La vacunacin se debe realizar en terneros entre 6 y 10
meses de edad y a las vacas no gestantes, ya que puede
preventiva
provocar efectos teratognicos. Los animales positivos
s deben de aislarse y se deben llevar a cabo medidas de
bioseguridad como: desinfectar corrales as como las reas
por donde transitan los animales y restringir el acceso a
personal para eliminar los vectores. Otras medidas
recomendadas son la lotificacin de animales por edades,
vacunar a las hembras en periodo abierto y a las vaquillas
primerizas. Las vacunas que existen son vivas e inactivadas,
a la fecha no se puede establecer que vacuna es la ms
recomendada, ya que depende de cada situacin.

CETOSIS BOVINA
Etiologa todas las teoras sobre las causas de la cetosis se centran en los
factores que pueden provocar hipoglucemia, ya sea por un aporte de
energa insuficiente, por un exceso de gasto, o por una incapacidad
del organismo para proporcionar glucosa utilizable. En cualquiera de
estos casos, el organismo utiliza la grasa para proporcionarse la
energa necesaria y, al quemarla en exceso, se producen gran
cantidad de cuerpos cetnicos que se acumulan en la sangre
(cetonemia).
Mecanism
o de
transmisi
n
Especies Al ganado bovino lechero
afectadas

Inapetencia.

Estreimiento.

Heces cubiertas de mucosidades.

Depresin.

Mirada fija perdida.

sintomatolog
a
Disminucin en la produccin de leche.

Frenesi y agresin.

Masticacin.

Marcha compulsiva.

Aliento con olor actona.

Tratamient
o y control

Medidas Condiciones propicias durante la lactancia y el periodo seco

- Alimento concentrado en cantidades pequeas durante dos semanas antes del
preventiva parto
- Se debera evitar la sobrealimentacin
s - Mxima ingesta de materia seca
- La paja debera ser substituida por altas raciones de ensilado
- Despus del parto la materia seca debera tener 16-18% de protena cruda y 19-
21% de fibra.
DISTOMATOSIS HEPTICA
Etiologa Taxonmicamente se clasifica al agente causal de la
Distomatosis de la siguiente manera:
Phylum: Platyhelminthes
Clase: Trematoda
Orden: Digenea
Familia: Fasciolidae
Gnero: Fasciola
Especie: Fasciola hepatica y Fasciola gigantica

(Siendo la segunda ms grande y de reas tropicales,

mientras que la F.hepatica es ms chica y de reas con
condiciones climticas templadas. En Amrica la nica que
existe de estas dos especies es F. hepatica). El gnero
Fasciola es de distribucin mundial.

Vulgarmente se denomina a la F. hepatica con los siguientes

nombres: Duela, Zaguaip, Distoma el hgado, Alicuy, Jallo
Jallo, Callutaca.
Mecanism Consumo de aguas contaminadas
o de
transmisi
n
Especies principalmente a bovinos, ovinos y caprinos, pero tambin
puede afectar a otros mamferos herbvoros y omnvoros,
afectadas
entre los que se encuentran los equinos, los lagomorfos, los
roedores y el hombre,
sintomatolog
a En la forma aguda, los animales mueren debido a una
infestacin masiva. La diarrea es el nico sntoma.
Forma subaguda:
Un o dos meses despus de la infectacin, los animales
comienzan a estar abatidos, con las mucosas plidas. En la
regin de la garganta suele aparecer un edema. Cada de la
lana, disminucin del rendimiento, adelgazamiento y anemia
acentuada. Muerte a los 15-20 das.
En la forma crnica los sntomas son los de una hepatopata:
Apetito variable, descenso del rendimiento, ictericia
 manifiesta, o latente (bilirrubinemia)..
Tratamient Administrar a todos los animales el rebao distomicidas a base de
hexaclorofeno, o meniclofolano, oxiclozamida, tetraclorometano,
o y control
hexacloroetano, o paraxilol. Estos distomicidas tienen el
inconveniente de que no slo son activos contra los distomas adultos.
El tratamiento causal debe ir acompaado de una teraputica
sintomtica y una alimentacin adecuada.
Medidas Todos los factores que inciden en el ciclo de vida del
preventiva parsito y en su transmisin deben de ser estudiados
en cada caso para poder establecer medidas racionales
s
de prevencin y control de la enfermedad.

La clave es proteger al mximo a los animales jvenes,

que son lo ms susceptibles, a travs de tcnicas de
manejo (que no pastoreen campos cercanos a cuerpos
de agua), desparacitaciones estratgicas y control de la
poblacin de caracoles a travs del uso de qumicos.
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