LEUCEMIAS

Prof. Dra. Maria Regina A. Azevedo

mraao@uol.com.br
 LEUCEMIAS - HISTRICO

1845 Bennet / Virchow (sangue branco)

1877 Paul Ehrlich classificao

- LEUCEMIAS AGUDAS (blastos)

- LEUCEMIAS CRNICAS (cls.diferenciadas)
 LEUCEMIAS - HISTRICO

1976 F.A.B. Classificao morfolgica

Provas citoqumicas

1980 Diferentes mtodos diagnsticos

- estudo citogentico
- marcadores celulares (imunofenotipagem)
- microscopia eletrnica
- biologia molecular
 Etiologia - Oncogenes
v-oncogenes => transformao malgna

c-oncogenes (proto oncogenes) reguladores do ciclo cel.

- fosforilao
- sinais intracelulares via GTP
- controle da expresso genes RNA
- duplicao do DNA

Ex: c-abl (tirosina quinase) LMC; c-ras (GDP / GTP) LMA

c-myc (ligao DNA transcrio) Linfoma Burkitt
Proto-oncogenes
 LEUCEMIAS - CONCEITO

Distrbio gentico:

=> expresso anormal de proto oncogenes

proliferao de clulas malgnas
Progresso malgna
 LEUCEMIAS FATORES DE RISCO

AMBIENTAIS DO HOSPEDEIRO

Radiao Ionizante Anormalidades cromossmicas

Agentes Qumicos Hereditariedade
Retrovrus (HTLVI/II, HIV) Imunodeficincia
Disfuno crnica M.O.
 LEUCEMIAS - FISIOPATOLOGIA

Alteraes genticas adquiridas (numricas ou estruturais)

Expresso anormal dos proto oncogenes

Perda de controle do ciclo cel (proliferao lenta e indefinida)

Transformao malgna dominncia clonal

Neoplasia
HEMATOPOESE
 LEUCEMIAS - CLASSIFICAO

Leucemia Mielide Aguda LMA

Agudas

blastos
Leucemia Linfide Aguda - LLA

Leucemia Mielde Crnica - LMC

Crnicas

cls maduras
Leucemia Linfide Crnica - LLC
LEUCEMIAS AGUDAS
 Presena de BLASTOS

LMA LLA
 LEUCEMIAS AGUDAS
CLASSIFICAO F.A.B.

LEUCEMIA MIELIDE AGUDA - LMA:

(mieloblastos)

M0 mieloblastos agranulares, CF com marc. Mielides

M1 mieloblastos sem maturao (90%) > 3% MPO + Bt. Auer

M2 30 a 90% mieloblastos, monocitos < 20%, Bt. Auer

M3 predomnio promielcitos, Bt. Auer

M4 - > 30% blastos com > 20% comp. monoctico

M5 - > 80% comp. monocticos imaturos (M5a) ou #(M5b)

M6 - > 50% eritroblastos, > 3% blastos no eritrides

M7 - > 30% megacarioblastos

CLASSIFICAO OMS (2001)
LEUCEMIAS AGUDAS CLASSIFICAO F.A.B.

LEUCEMIA LINFIDE AGUDA - LLA: (linfoblastos)

L1 linfoblastos pequenos e uniformes

L2 linfoblastos grandes e pleomrficos

L3 linfoblastos com mais basofilia e vacolos (tipo Burkitt)

DIAGNSTICO LABORATORIAL L.A

Hemograma

Mielograma

Testes Complementares

- citoqumica, citogentica, imunofenotipagem, BM

 CASO CLNICO
Homem, 35 anos apresentando febre

Hemograma
GV 2.70 x 10[12]/L
Hb 9.9 g/dL
ANEMIA Ht 28.7 %
VCM 106.3 fL
HCM 36.9 pg
CHCM 34.8 g/dL

GB 9.9 x 10[9]/L
Neutrfilos 4 %
Linfcitos 16
NEUTROPENIA Moncitos 1
Eosinfilos 0
Basfilos 0
Blastos 79

PLAQUETOPENIA Plaquetas 50 x 10[9]/L

 MIELOGRAMA

> 20% de Blastos na M.O

 PROVAS CITOQUMICAS

PRINCPIO:
Demonstrao de enzimas/proteinas especficas nos
leuccitos

APLICAO:

Diferenciao de blastos
Caracterizao das LLC
Diferenciao entre infeco grave e leucemia
 PROVAS CITOQUMICAS L. AGUDAS

LMA LLA
Mieloperoxidase (gr. Azurfila) + (- M0) _
benzidina

Sudan Black + (- M0) _

PAS (glicognio) - (+ M6) +

G* => aldedo + Base Shiff

Esterase (ANAE) - (+M4/M5) _

(No especfica)

TdT
(terminal deoxinucleotidil transf.) - +
 ANLISE CITOGENTICA

- Estudo dos cromossomos na metfase atravs da

inibio do fuso mittico ( S.P. ou M.O. )

ALTERAES CROMOSSMICAS:
- Numricas ( monossomia, trissomia )
- Estruturais ( translocao, deleo, inverses )

APLICAO:
- Prognstico e resposta teraputica das L.A
- Etiologia e fisiopatologia das leucemias
- Deteco de doena residual mnima
ANLISE CITOGENTICA
 ANORMALIDADES CROMOSSMICAS

LMC t (9, 22) cr. Philadelphia (bcr/abl ) 99%

LMA t (8, 21) 15 a 20% dos casos ( M2 )

t (15, 17) 90% dos casos ( M3 )
inv (16) 15% dos casos (M4 + eosinofilia)

LLA t (4, 11) leucemia congnita/bifenotpica

t (9, 22) - adultos com LLA
t (1, 19) LLA pr B em crianas

LLC trissomia cr 12 ( linhagem B )

t (14, 19) linfcitos pequenos
 IMUNOFENOTIPAGEM (marcadores)

PRINCPIO:

Anticorpos monoclonais para deteco de Ag:

- receptores de membrana, mIg / cIg, enzimas nucleares (TdT)

APLICAO:

Diferenciao entre linfcitos B, T e subtipos

Identificao de blastos das diferentes linhagens
Prognstico e tratamento das LLA, LLC e L. bifenotpicas
Maturao celular, doena residual
 Imunofenotipagem

Leucemias Agudas

Painel Primrio

Anticorpos Linhagem
MPO/CD13/CD33 Mielide
CD79a/CD19/CD22c Linfide B
CD3c/CD7/CD2/CD5 Linfide T
MTODOS DE ESTUDO:

Suspenso de clulas viveis (Ag membrana) CF

Imunocitoqumica seces teciduais e esfregaos IF

Citmetro de fluxo
 LEUCEMIAS AGUDAS

LEUCEMIA MIELIDE AGUDA

Tipo celular predominante:

mieloblasto M0, M1, M2 (peroxidase +, CD33+)

promielcito M3 (peroxidase +)
monoblasto M4 e M5 (esterase +)
eritroblasto M6 (PAS +)
megacarioblasto M7 (CD41+)
M1
M1 PEROXIDASE +
M2
M3
M3 PEROXIDASE+
M4
M4 ESTERASE +
M5a
M5b
M6
M6 PAS+
M7
M7 GPIIbIIIa +
 LEUCEMIA LINFIDE AGUDA

Tipo celular predominante - linfoblasto

L1
L2
LLA Peroxidase -
L3
Diagnstico e conduta teraputica na L.A
LEUCEMIAS CRNICAS
 LEUCEMIAS CRNICAS

LINFIDES - LLC: (classificao imunolgica)

CLULAS B CLULAS T

LLC ( linfcitos, +comum) LGL ( linfcitos granulares)

LPL- B (prolinfcitos) LPL -T ( prolinfcitos )
Tricoleucemia (Hairy cells) ATLL HTLV (flower cells)
Linfomas no Hodgkin em fase Snd. de Szary (nc clivado)
leucmica
 LEUCEMIA LINFIDE CRNICA

HEMOGRAMA

Leucocitose com linfocitose (linfcitos maduros, atipias)

Fragilidade celular (manchas de Grumpet)
Anemia (AHAI)
Plaquetopenia

MIELOGRAMA
Infiltrao de linfcitos
LLC (manchas de Grumpet)
Leucemia Pr Linfoctica
Linfcitos Granulares
Hairy cell - Tricoleucemia
Linfcitos Clivados (Sezary)
 LEUCEMIA MIELIDE CRNICA
Distrbios mieloproliferativos

1. Leucemia Mielide Crnica (LMC)

14% das leucemias

Hiperplasia mielide, hiperleucocitose, neutrofilia,

basofilia, desvio a esquerda, esplenomegalia
Presena de cromossomo Filadelfia (bcr-abl)
Curso trifsico (fase crnica, fase acelerada e crise
blstica)
LMC : hiperleucocitose em SP - DE
LMC desvio a esquerda
MIELOGRAMA - LMC
Citogentica LMC - t(9,22)
LMC - t(9,22) bcr-abl
 Hibridizao in situ
FISH
bcr-abl
FISH - normal
TRATAMENTO INIBIDOR DA TIROSINA QUINASE
Mielofibrose
 TRATAMENTO

- Quimioterapia

- Radioterapia

- Transplante de medula ssea

1891: uso da medula como forma teraputica (uso oral);

1945: aps Hiroshima estudos intensificados;

1964: esclarecido o sistema HLA;

1972: 1 transplante de MO alognico.

 TMO

CTH: clulas-tronco do tecido hematopotico

> origina todas as clulas (gv,gb,plaquetas)
> marcador fenotpico: CD34+
> alta capacidade proliferativa

COLETADAS INFUNDIDAS RECEPTOR

(doador) (paciente)
REGIME DE CONDICIONAMENTO:

- Caracterizado por altas doses de quimioterapia

e/ou radioterapia.
- Objetivos:
> efeito imunossupressor
> efeito tumoricida
> baixa toxicidade
TIPOS DE TRANSPLANTE:

QUANTO A FONTE DAS CLULAS:

- Cordo Umbilical

- Sangue Perifrico (aferese)

-Medula ssea (puno)
 TMO: Presente e futuro

- BRASIL: 2,5 transplantes medula/milho de hab./ano.

Pases desenvolvidos: 7 a 10.
Limitaes: custo e disponibilidade de doadores
Tempo de espera: 1 ano.

- Alternativa: uso de sangue do cordo umbilical (SCUP)

menos imunoreativas: < complicaes.
Ningum to pequeno que no possa ensinar...

...Nem to grande que no possa aprender

Voltaire