Control de la Calidad para un Laboratorio de Microbiologa

Introduccin
Un laboratorio de Microbiologa debe poner en prctica una serie de acciones que le permitan
asegurar una adecuada prctica en el aislamiento, identificacin y caracterizacin de agentes
etiolgicos y su correspondiente prueba de susceptibilidad como una gua de la terapia. Esto
significa que deben ser controlados una serie de factores y eventos, tales como el monitoreo
de medios de cultivo, reactivos, instrumentos, procedimientos y que se debe poner especial
nfasis en la capacitacin permanente del personal.
Varios conceptos son convenientes de discutir y el primero de ellos es el control de calidad.
En este caso, son las tcnicas operativas, que facilitan la realizacin de un monitoreo diario de
los procedimientos practicados en el laboratorio, lo que permite detectar errores en la
ejecucin de una tcnica e identificar problemas que se presenten con los reactivos de uso
diario o espordico. Actualmente el control de calidad forma parte de un programa referente a
esta temtica. La calidad incluye calidad total, mejoramiento de la calidad y aseguramiento de
la misma.
Elementos mnimos del Programa de Control de Calidad en Microbiologa
El control de calidad en un laboratorio microbiolgico, debe evaluar y documentar el
desempeo de todos los aspectos de sus procedimientos. Esto incluye la calidad de la muestra,
la eficiencia de los reactivos, los medios de cultivo, el funcionamiento de los diversos
instrumentos o equipos y la verificacin o validacin de los resultados obtenidos.
Control de calidad de las muestras clnicas:
Uno de los aspectos ms importantes en un laboratorio de microbiologa es la apropiada
seleccin, recoleccin y transporte de las muestras clnicas. Por lo que todo el personal
relacionado con estas responsabilidades, debe comprender lo determinante que es el
mantenimiento de la calidad de la muestra, en la evaluacin e informe de un espcimen
clnico. Es responsabilidad del laboratorio proveer sta informacin en forma clara y que sea
fcilmente incorporada en la metodologa de trabajo de todas las salas de atencin y
hospitalizacin, la cual debe estar siempre accesible al personal de enfermera y medicina y
que debe funcionar como una referencia.
A pesar de que algunos tipos de muestras requieren metodologa de recoleccin y transporte
muy especiales, se pueden enumerar algunos aspectos generales que deben tenerse en cuenta
al recolectar las muestras clnicas:

La muestra debe ser representativa del proceso infeccioso.

Al tomar una muestra clnica, es importante evitar la contaminacin con
microorganismos de la flora normal del rea afectada.
Debe seleccionarse el lugar anatmico correcto de donde se obtendr la muestra,
utilizar la tcnica apropiada y los instrumentos o elementos adecuados para su
obtencin.
Se debe recolectar un volumen apropiado de muestra para evitar los resultados falsos
negativos.
 Se debe identificar cada muestra con el nombre del paciente y su nmero de
identificacin.
Se debe colocar la muestra en un recipiente adecuado para su transporte, con el fin de
asegurar la sobrevivencia del posible agente infeccioso.
Por ltimo, se debe evitar derramar la muestra y mantener en todo momento las
medidas de bioseguridad apropiadas.
Control de calidad de los medios de cultivo:
Se debe mantener un registro de cada frasco de medio de cultivo, con el nombre del producto,
nombre de la casa proveedora, fecha de recibo, fecha de expiracin, nmero de lote y fecha en
que se abri el frasco.
Cada lote preparado de medio de cultivo se debe probar antes de su uso rutinario, mediante la
inoculacin de microorganismos cuyo comportamiento se conoce, tanto para reacciones
positivas, como negativas. Para esto pueden utilizarse cepas bacterianas control de la ATCC
(American Type Culture Collection). Se debe guardar un registro de los resultados obtenidos.
Para el agar Mueller-Hinton, empleado como medio de soporte para realizar la prueba de
susceptibilidad por el mtodo de difusin en agar (Mtodo de Bauer and Kirby), el control de
calidad debe extenderse hacia la determinacin de las concentraciones de timina/timidina, la
concentracin de cationes, as como en medir la profundidad del agar y que sta sea igual en
todo el plato de agar.
La concentracin adecuada de timina/timidina se monitoriza utilizando la cepa de
Enterococcus faecalis ATCC 29212 y el disco de trimetoprin sulfa.
La concentracin adecuada de cationes se monitoriza utilizando la cepa de Pseudomonas
aeruginosa ATCC 27853 y el disco de gentamicina.
Las pruebas bsicas de control de calidad de los medios preparados deben incluir: medicin
del pH, pruebas de esterilidad, capacidad de crecimiento y reaccin, aspecto, dureza y
profundidad del agar.
Control de Calidad de reactivos:
Un elemento fundamental en el trabajo diario del laboratorio de microbiologa lo constituyen
los reactivos, tanto comerciales como de preparacin domstica, que son utilizados en la
caracterizacin de microorganismos. Por ello, deben efectuarse controles diarios con las
bacterias tipo y seguir estrictamente las indicaciones en cuanto a almacenamiento de los
reactivos, metodologa de la prueba y tiempo de lectura. Es recomendable que los reactivos
comerciales sean examinados inmediatamente cuando se abre un nuevo lote o vial y llevar un
registro de su funcionamiento.
El registro de funcionamiento debe efectuarse en forma diaria o al menos cada vez que se
efecta la prueba.
Control de calidad de las tinciones:
La concentracin de las soluciones de tincin, por efecto de la evaporacin de los solventes o
las variaciones introducidas en los mtodos recomendados, pueden afectar los resultados de
las tinciones para diferenciar microorganismos por su reaccin a la tincin de Gram y la
morfologa, tintes para cpsulas, esporas, etc.
El control de calidad de stos tintes debe realizarse primero con cada nuevo lote, luego basta
con un control semanal para mantener un grado de seguridad apropiado en su uso. Para
facilitar el control de los tintes, se recomienda preparar placas con microorganismos aislados
en el trabajo rutinario o cepas de la ATCC frescas, tomado en cuenta aquellos que pudieran ser
ms tiles segn la tincin a evaluar.
Para el control diario de la tincin de Gram, se recomienda el uso de una cepa ATCC de
Staphylococcus aureus y de Escherichia coli.
Es necesario llevar un registro de estos controles.
Supervisin del personal:
El personal es el factor ms importante en la calidad del trabajo en el laboratorio de
microbiologa. Este personal debe tener una dedicacin y actitud positiva hacia el trabajo,
capacidad acadmica, actualizacin constante y contar con los elementos indispensables para
su labor.
Debe existir una ficha tcnica de cada trabajador donde se registren los posibles accidentes
sufridos, as como las infecciones suscitadas al manipular secreciones u organismos
infecciosos. Adems, se recomienda realizar estudios radiolgicos y colocacin de PPD, en
aquel personal ligado al trabajo con Mycobacterium tuberculosis.
Control de calidad de equipos:
Todos los instrumentos utilizados en el laboratorio deben estar respaldados por un programa
de control de calidad y de mantenimiento preventivo y correctivo, basados en las
instrucciones del fabricante y los procedimientos establecidos. Debe mantenerse un registro
de todo lo realizado al respecto, con el nombre del instrumento, fecha, resultado y
comentarios.
Debe redactarse un manual de procedimientos operacionales que incluya:
Listado de los equipos con nombre, marca, modelo, nmero de serie, fecha de recibo y
nmero de inventario de la institucin.
Registro del mantenimiento preventivo y correctivo, periodicidad de la inspeccin y fallas del
instrumento.
Debe incluirse un apartado de correccin de fallas y acciones correctivas efectuadas.
Instrucciones de uso del instrumento, redactadas en forma clara y en el idioma de los usuarios.
Incluir precauciones de seguridad, procedimientos de limpieza, cuidado del instrumento y
acciones correctivas.

Errores en pruebas de laboratorio

Desconocimiento de las determinaciones o mtodos a utilizar: es aconsejable consultar al
laboratorio sobre los anlisis que se indicarn al paciente para saber si son los de eleccin.
Informarse sobre la forma ms adecuada para la obtencin y remisin de la muestra, tiempos
de espera, etc. Tener todos los elementos a mano antes de realizar la extraccin. Algunos
laboratorios proveen el material adecuado.
Hiperlipemia: el exceso de triglicridos en sangre enturbia el suero e interfiere en muchas
reacciones bioqumicas dando valores irreales en las mediciones. Para obtener un suero
lmpido se necesitan entre 6 y 8 horas de ayuno slido, con excepcin de las 12 hs de ayuno
previas a la medicin de colesterolemia.
Hemlisis: la ruptura de eritrocitos libera hemoglobina que tie el suero de un color rojo y
que interferir con las reacciones bioqumicas alterando los resultados finales. Por lo tanto
evitar agitar los tubos con sangre. Para homogeneizar sangre con anticoagulante slo basta
inclinar suavemente el tubo.
Muestra insuficiente: tener en cuenta la cantidad de determinaciones que se van a solicitar
para calcular la cantidad exacta de sangre en cada tubo con y sin anticoagulante. Un animal
deshidratado libera poco suero. Anlisis de orina enviar 10 cc de una muestra homogeneizada
previamente.
Coproparasitolgico: materia fecal de tres das consecutivos en un mismo frasco.
Citologa: dos o tres extendidos para distintas coloraciones.
Histopatologa: trozos de 0,5 cm x 0,5 cm x 0,5 a 1 cm en un frasco de boca ancha.
Raspajes: con vaselina entre dos portaobjetos, y pelos sueltos dentro de un tubo.
Cultivos: hisopos en tubos con medio de transporte, frascos estriles.
Mal acondicionamiento de la muestra: que podra alterar los resultados esperados.
Sangre o suero, orina y lquido de puncin: refrigerados
Coproparasitolgico: en formol al 5%.
Citologa: portaobjetos separados entre s y en una cajita.
Histopatologa: en formol al 10%.
Raspajes: sin conservantes.
Cultivos: refrigerados y con medios de transporte adecuados.
Ausencia de protocolo clnico: es indispensable el envo de un protocolo clnico o una
solicitud especificando los anlisis requeridos y los datos completos del propietario, paciente
y profesional que deriva incluyendo su nmero telefnico o mail por si es necesario pedir ms
datos. Es importante, tambin, aclarar si est recibiendo medicacin que pudiera interferir en
el procesamiento de la muestra.
Comunicacin inadecuada entre cliente/clnico y clnico/laboratorista: la ausencia de datos,
las malas interpretaciones o dar por sobreentendido preparaciones previas o mtodos de
recoleccin y de envo por parte de los clientes o los colegas, puede hacer fracasar o dificultar
el diagnstico. Muchas veces es imposible volver a tomar una muestra.
Desbalance costo/beneficio: es de utilidad hacer una buena planificacin de los mtodos
complementarios que se vayan a utilizar para ahorrar tiempo, dinero y sobretodo, maniobras
riesgosas. Detallar prioridades en caso de muestras insuficientes.
Errnea interpretacin de resultados: invalida todos los pasos anteriores y perjudica al
paciente. Solicitar, siempre, al laboratorio los valores de referencia para cada anlisis. Toda
informacin y aclaracin es til antes de hablar con el propietario.
Controles sucesivos: se sugiere derivarlos al mismo laboratorio que realiz los estudios
iniciales, pues un cambio en la metodologa puede provocar confusiones.

Bibliografa
Guerrero F., Gamboa M., Mora J. & Rodrguez E.: Bacteriologa Diagnstica: Tinciones,
Medios de Cultivos y Pruebas Diagnsticas.