Materiales

Reactivos

Reactivo de color. Disolver con calentamiento 40 g de cloruro mercrico en 850

mL de agua, enfriar y agregar 120 mL de HCl y 40 g de nitrato frrico. Llevar a un
volumen de 1 L con agua.

Solucion stock de salicilato. Disolver 580 mg de salicilato de sodio en suficiente

agua para obtener una solucin de 250 mL. Agregar una cuantas gotas de
cloroformo como preservativo. Mantener en refrigeracin.

Solucion estndar de salicilatos. Agregar 20 mL de la solucin stock de salicilato y

llevar a 100 mL con agua. Agregar una cuantas gotas de cloroformo como
preservativo. Mantener en refrigeracin.

Metodologa

Figura X. Diagrama de flujo general

Protocolo de
Estudio de
Adquisicion de Control de validacion del Metodo Analisis de
biodisponibilid
recursos calidad metodo analitico resultados
ad
analitico

Tabletas AAS NOM-177- Diseo

SSA1-1998 cruzado o
500 mg latino 2x2

Adquisicin de recursos

Control de calidad

Protocolo de validacin del mtodo analtico

Selectividad
Se debe demostrar la no interferencia de compuestos endgenos de la matriz
biolgica, mediante la evaluacin individual de al menos 6 unidades de sta.
Analizar la matriz biolgica normal, la lipmica y la hemolizada. Considerar
posibles interferencias de frmacos de uso comn, metabolitos, anticoagulantes u
otras sustancias que puedan estar presentes en la matriz biolgicamediante la
evaluacin individual de al menos 6 unidades de sta.

Curva de calibrcion.
Se deben caracterizar por lo menos seis concentraciones distintas del analto en la
matriz biolgica sin incluir las muestras blanco, evaluando un mnimo de 3 curvas
de calibracin

Repetibilidad
Analizar en un mismo da al menos por quintuplicado las siguientes muestras
control LIC, MCB, MCM, MCA y MCD. Calcular la concentracin obtenida para
cada nivel interpolando su respuesta analtica en la curva de calibracin.

Reproducibilidad
Analizar al menos por quintuplicado en tres corridas analticas diferentes y en al
menos 2 das, las muestras control LIC, MCB, MCM y MCA. Para cada MC
calcular la concentracin recuperada interpolando la respuesta analtica en la
curva de calibracin. La adicin de otro analista o el uso de otro equipo, debe
cumplir con los criterios de reproducibilidad.

Exactitud
De los datos de repetibilidad y reproducibilidad calcular la desviacin de la
concentracin obtenida respecto al valor nominal.

Estabilidad
Determinar las condiciones de temperatura y tiempo entre otros, en las que el
frmaco permanezca estable en la matriz biolgica, durante su manejo, toma de
muestra, almacenamiento y procesamiento analtico, evaluando por triplicado la
respuesta del analto a las concentraciones de las MCB y MCA, las cuales son
analizadas inmediatamente despus de su preparacin y despus de ser
sometidas a las condiciones del ensayo evaluadas.
2

Mtodo analtico

Preparar las soluciones patrn del frmaco en la matriz biolgica, de manera que
el porcentaje del disolvente utilizado no debe ser mayor al 5% del volumen final
preparado.
2

Curva estndar
Preparar alcuotas de 1 mL de la solucin de salicilato de sodio que contengan el
equivalente de 0.1, 0.2, 0.3 y 0.4 mg de acido saliclico con 5 mL del reactivo de
color.
1
Diluir la orina con agua hasta obtener una concentracin entre 10 y 40 mg de
cido saliclico por 100 mL. Colocar 1 mL del fluido en un tubo y agregar 5 mL del
reactivo de color, agitar durante la adicin. Ajustar hasta 0 de absorbancia un
espectrofotmetro a 540 m con un blanco preparado al mezclar 1 mL de agua
con 5 mL del reactivo de color. Leer la muestra analtica bajo las mismas
condiciones. El compuesto purpura obtenido es estable durante 60 minutos.

1
Estudio de biodisponibilidad

Referencias

1. Trinder P. Rapid Determination of Salicylate in Biological Fluids. Royal

Infarmary. 1953; 57: 301-303
2. NOM-177-SSA1-2013