ECOLE NATIONALE VETERINAIRE DE LYON

Anne 2009 - Thse n

TRANSFUSION SANGUINE CHEZ LE CHIEN ET LE CHAT:

BONNES PRATIQUES ACTUALISEES DAPRES LES
RECOMMANDATIONS DE LAVHTM
(ASSOCIATION OF VETERINARY HEMATOLOGY AND
TRANSFUSION MEDICINE)

THESE

Prsente lUNIVERSITE CLAUDE-BERNARD - LYON I

(Mdecine - Pharmacie)
et soutenue publiquement le 18 dcembre 2009
pour obtenir le grade de Docteur Vtrinaire

par

CHAPUIS Delphine
Ne le 03 juillet 1984
Lyon 3e (69)

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2
3
4
 REMERCIEMENTS

A Monsieur le Professeur Dominique CHASSARD de la Facult de Mdecine de Lyon,

Qui nous a fait lhonneur daccepter la prsidence du jury de cette thse
Hommages respectueux

A Monsieur le Professeur Luc CHABANNE de lEcole Nationale Vtrinaire de Lyon,

Qui nous a confi le sujet de cette thse et nous a soutenu dans son laboration
Sincres remerciements

A Madame le Professeur Jeanne-Marie BONNET-GARIN de lEcole Nationale

Vtrinaire de Lyon,
Qui nous a fait le plaisir daccepter de participer au jury de cette thse
Hommages respectueux

5
 A Madame le Docteur Isabelle GOY-THOLLOT responsable du SIAMU de lENVL,
Qui a eu la gentillesse de nous accueillir au SIAMU pour la ralisation des photos
Hommages respectueux

A Monsieur Xavier HENRY, technicien au SIAMU de lENVL,

Qui nous a consacr du temps pour rpondre nos questions et nous faire participer aux collectes de sang
Et qui simplique normment dans le programme de don du sang.
Sincres remerciements

A Monsieur Renaud DOVIS du service informatique de lENVL,

Qui nous a apport une aide prcieuse pour collecter les mails ayant servi de base ce travail
Sincres remerciements

A lassociation AVHTM (Association of Veterinary Hematology and Transfusion Medicine),

Sincres remerciements

A tous les propritaires danimaux et leurs animaux donneurs,

Qui nous ont autoriss utiliser les photos prises pendant les collectes de sang

6
 A mes parents,
Qui mont toujours soutenu dans la vie comme dans mes tudes
Y compris dans les moments de stress o je ne suis pas forcment agrables vivre
V ous mavez toujours encourag, paul et je vous en suis infiniment reconnaissante

A mon fianc Nicolas,

Ces quatre annes distance nont pas t faciles pour toi, pour nous.
Tu mas toujours soutenu dans mes priodes de doute, tu illumines ma vie
Jespre quon pourra vite commencer notre vie deux et enfin raliser nos nombreux projets

A mon frre Nicolas,

Je te souhaite le meilleur pour ta vie professionnelle et personnelle

A mes grands-parents,
Qui mont transmis leur amour des animaux
Je ne vous oublie pas

A mon groupe de clinique : Brnice, Sylvain, Marie, Anne-Sophie, Yold-Lin,

Avec qui jai partag de nombreux fous rires en clinique comme en soire
Souhaitons quils y en aient encore beaucoup dautres : on reste en contact !

A Sophie, Pierre, Axel, Coralie, Vronika

A mes autres amis de lcole et dailleurs

A lassociation Handichiens et ses ducateurs dvous

Qui font preuve dune immense gnrosit envers les handicaps, les familles daccueil et les chiens
Merci pour tout ce que vous mavez appris

A Calypso, Tino, Jack, Bahia, Pnlope, Lasco

Tous mes animaux qui mont donn la passion de ce mtier

7
8
 SOMMAIRE

TABLE DES FIGURES ........................................................................................................................................ 12

TABLE DES TABLEAUX ..................................................................................................................................... 13
INTRODUCTION / OBJECTIFS .......................................................................................................................... 15
I. COLLECTE ET GESTION DES DONNEURS ................................................................................................. 17
A. RECRUTEMENT DES DONNEURS ....................................................................................................................... 17
B. CARACTERISTIQUES ET CONDITIONS REQUISES POUR LES DONNEURS ....................................................................... 18
1) Critres dinclusion ............................................................................................................................. 18
2) Critres dexclusion ............................................................................................................................ 19
3) Examen pr-transfusion ..................................................................................................................... 19
C. EQUIPEMENT ET PERSONNEL REQUIS POUR LA COLLECTE ...................................................................................... 32
D. SYSTEME DE COLLECTE .................................................................................................................................. 32
1) Bouteilles en verre .............................................................................................................................. 32
2) Systme de collecte ferm.................................................................................................................. 33
3) Systme de collecte ouvert ................................................................................................................. 33
4) Seringues ............................................................................................................................................ 34
5) En pratique ......................................................................................................................................... 34
E. REALISATION DE LA COLLECTE ......................................................................................................................... 34
1) Examen du donneur avant collecte .................................................................................................... 34
2) Contention.......................................................................................................................................... 35
3) Prparation du site de collecte ........................................................................................................... 36
4) Collecte sensus stricto ........................................................................................................................ 37
5) Fermeture du systme de collecte...................................................................................................... 39
F. SUPPLEMENTATION DES DONNEURS................................................................................................................. 40
G. EFFETS SECONDAIRES DE LA COLLECTE SUR LES DONNEURS ................................................................................... 40
II. TRAITEMENT ET CONSERVATION DU PRELEVEMENT SANGUIN ............................................................. 43
A. LES DIFFERENTS PRODUITS SANGUINS ............................................................................................................... 43
1) Le sang frais total ............................................................................................................................... 43
2) Le sang total conserv........................................................................................................................ 43
3) Le concentr globulaire ...................................................................................................................... 43
4) Le plasma frais et le plasma frais congel ......................................................................................... 44
5) Le plasma congel .............................................................................................................................. 44
6) Le plasma riche en plaquettes............................................................................................................ 44
7) Le concentr plaquettaire .................................................................................................................. 44
8) Le cryoprcipit .................................................................................................................................. 45
9) Le cryopoor ou plasma cryo-surnageant ............................................................................................ 46
B. ELABORATION DES PRODUITS SANGUINS ........................................................................................................... 46
1) Matriel .............................................................................................................................................. 46
2) Prparation du plasma et du concentr globulaire ............................................................................ 47
3) Prparation du plasma riche en plaquettes ....................................................................................... 51
4) Prparation du concentr plaquettaire .............................................................................................. 51
5) Prparation du cryoprcipit.............................................................................................................. 51
6) Irradiation des produits sanguins ....................................................................................................... 51
C. CONSERVATION DU SANG TOTAL ET DES DERIVES SANGUINS .................................................................................. 52
1) Matriel ncessaire au stockage des produits sanguins .................................................................... 52
2) Anticoagulants-conservateurs ........................................................................................................... 52
3) Solutions additives ............................................................................................................................. 54
4) Critres pour dterminer la viabilit des produits stocks ................................................................. 54
5) Recommandations spcifiques pour chaque produit sanguin............................................................ 58
6) Gestion des stocks de produits sanguins ............................................................................................ 62

9
III. UTILISATION DES PRODUITS SANGUINS ET REACTIONS TRANSFUSIONNELLES ...................................... 63
A. CONTROLES AVANT TRANSFUSION ................................................................................................................... 63
1) Recueil de lanamnse du receveur .................................................................................................... 63
2) Groupage du donneur et du receveur ................................................................................................ 63
3) Cross-match ....................................................................................................................................... 65
B. CRITERES DE DECISION DUNE TRANSFUSION SANGUINE ....................................................................................... 68
C. PREVALENCE DES DIFFERENTS MOTIFS DE TRANSFUSION ....................................................................................... 69
D. INDICATIONS DES PRODUITS SANGUINS ............................................................................................................. 71
1) Indications pour la transfusion des produits contenant des globules rouges .................................... 71
2) Indications pour la transfusion de plasma ......................................................................................... 73
3) Indications pour la transfusion du cryoprcipit ................................................................................ 76
4) Indications pour la transfusion du cryopoor ...................................................................................... 76
5) Indications pour la transfusion de plaquettes .................................................................................... 76
E. CONTRE-INDICATIONS ................................................................................................................................... 77
1) Contre-indications relatives ............................................................................................................... 77
2) Les cytopnies dorigine auto-immune .............................................................................................. 77
F. ALTERNATIVES A LA TRANSFUSION ................................................................................................................... 78
1) La transfusion autologue ................................................................................................................... 78
2) Le solut de transport doxygne contenant de lhmoglobine bovine purifie ................................ 78
G. ADMINISTRATION DE LA TRANSFUSION ET SUIVI CLINIQUE PER- ET POST-TRANSFUSIONNEL .......................................... 79
1) Posologie des produits sanguins ........................................................................................................ 79
2) Prparation des produits sanguins avant administration .................................................................. 80
3) Administration du produit sanguin .................................................................................................... 81
4) Monitorage du receveur..................................................................................................................... 83
5) Evaluation de lefficacit de la transfusion ........................................................................................ 83
H. LES REACTIONS TRANSFUSIONNELLES ............................................................................................................... 84
1) Dfinition Signes dappels ............................................................................................................... 84
2) Ractions mdiation immune immdiates et retardes ................................................................. 85
3) Ractions non immunologiques immdiates et retardes ................................................................. 91
I. CONDUITE A TENIR EN CAS DE REACTION TRANSFUSIONNELLE ................................................................................ 93
1) Hmolyse intra-vasculaire .................................................................................................................. 93
2) Raction fbrile non hmolytique ...................................................................................................... 93
3) Raction dhypersensibilit de type I .................................................................................................. 93
4) dme aigu du poumon (OAP).......................................................................................................... 93
5) Hypocalcmie ..................................................................................................................................... 93
6) Choc septique ..................................................................................................................................... 93
J. PREVENTION DES REACTIONS TRANSFUSIONNELLES ............................................................................................. 95
1) Contrle des poches ........................................................................................................................... 95
2) La rduction leucocytaire (ou leucorduction) ................................................................................... 95
IV. CONTROLE QUALITE .............................................................................................................................. 97
A. INTERET DES BONNES PRATIQUES .................................................................................................................... 97
B. TRAABILITE ............................................................................................................................................... 97
C. APPORT DE LINFORMATIQUE ......................................................................................................................... 98
D. SECURITE TRANSFUSIONNELLE ET HEMOVIGILANCE.............................................................................................. 98
E. CRITERES DE QUALITE ................................................................................................................................... 99
1) Critres de slection des donneurs ..................................................................................................... 99
2) Critres de qualit de la collecte de sang ........................................................................................... 99
3) Contrle bactriologique du produit sanguin .................................................................................... 99
F. CONTROLES-QUALITE A CHAQUE ETAPE DE LA TRANSFUSION ............................................................................... 100
1) Pendant la phase de collecte............................................................................................................ 100
2) Pendant la phase de conservation ................................................................................................... 100
3) Pendant la phase dadministration du produit sanguin ................................................................... 101
G. ACCREDITATION DES STRUCTURES VETERINAIRES .............................................................................................. 101

10
ANNEXE : LES GROUPES SANGUINS .............................................................................................................. 102
1) Chez le chien..................................................................................................................................... 102
2) Chez le chat ...................................................................................................................................... 105
CONCLUSION ................................................................................................................................................ 109
BIBLIOGRAPHIE ............................................................................................................................................ 111

11
 TABLE DES FIGURES

Figure 1 : Exemple de questionnaire pour les propritaires de donneurs de sang ................................................ 20

Figure 2 : Prvalence de la babsiose en France entre 2003 et 2004.................................................................... 23
Figure 3 : Prvalence de la leishmaniose en France en 2004 ................................................................................ 24
Figure 4 : Systme de collecte ouvert .................................................................................................................... 33
Figure 5 : Systme de collecte ferm ..................................................................................................................... 33
Figure 6 : Asepsie du site de collecte ..................................................................................................................... 37
Figure 7 : Compression de la veine jugulaire ......................................................................................................... 37
Figure 8 : Clamp plac sur la tubulure ................................................................................................................... 37
Figure 9 : Ponction de la veine jugulaire ............................................................................................................... 38
Figure 10 : Arrive du sang dans la tubulure......................................................................................................... 38
Figure 11 : Remplissage du systme de collecte par aspiration ............................................................................ 38
Figure 12 : Remplissage par gravit ...................................................................................................................... 38
Figure 13 : Homognisation manuelle ................................................................................................................ 39
Figure 14 : Mlangeur ........................................................................................................................................... 39
Figure 15 : Clampage de la poche de collecte ....................................................................................................... 39
Figure 16 : Stripper ................................................................................................................................................ 39
Figure 17 : Cascade de lhmostase secondaire et tests dexploration de la coagulation .................................... 45
Figure 18 : Les diffrents produits sanguins .......................................................................................................... 46
Figure 19 : Centrifugeuse sur pied utilise au SIAMU ........................................................................................... 47
Figure 20 : Disposition des poches dans les pots de la centrifugeuse ................................................................... 48
Figure 21 : Equilibrage des pots dans la centrifugeuse ......................................................................................... 48
Figure 22 : Poche de sang aprs centrifugation .................................................................................................... 49
Figure 23 : Extraction du plasma........................................................................................................................... 49
Figure 24 : Passage du plasma dans la poche satellite ......................................................................................... 49
Figure 25 : Clampage de la tubulure ..................................................................................................................... 49
Figure 26 : Vidange de la tubulure ........................................................................................................................ 49
Figure 27 : Fermeture de la poche......................................................................................................................... 49
Figure 28 : Clippeur ............................................................................................................................................... 50
Figure 29 : Rsultat de la sparation du sang total en plasma et culot globulaire ............................................... 50
Figure 30 : Identification des poches ..................................................................................................................... 50
Figure 31 : Modifications biochimiques et hmatologiques des hmaties au cours de leur stockage dans une
solution additive dAdsol ..................................................................................................................................... 54
Figure 32 : Analyse par cytomtrie de flux de la biotynilation des hmaties canines ........................................... 55
Figure 33 : Incubation du sang avec les anticorps monoclonaux .......................................................................... 64
Figure 34 : Lecture de la carte de groupage.......................................................................................................... 64
Figure 35 : Ralisation du crossmatch majeur et du crossmatch mineur.............................................................. 67
Figure 36 : Prvalence des diffrents motifs de transfusion chez le chien ............................................................ 70
Figure 37 : Prvalence des diffrents motifs de transfusion chez le chat .............................................................. 70
Figure 38 : Prvalence des diffrents motifs de transfusion plasmatiques chez le chien lHpital Universitaire
Vtrinaire de Pennsylvanie entre octobre et dcembre 1999 ............................................................................. 70
Figure 39 : Transfuseur avec un filtre .................................................................................................................... 82
Figure 40 : Administration du produit sanguin chez un chat ................................................................................ 82
Figure 41 : Robinet 3 voies .................................................................................................................................... 82
Figure 42 : Administration du sang total via un pousse-seringue ......................................................................... 82
Figure 43 : Modle de fiche de suivi de la transfusion .......................................................................................... 84
Figure 44 : Schma de la raction dhmolyse et dhmagglutination lors de ractions transfusionnelles .......... 86
Figure 45 : Suivi de la pression artrielle, de la pression veineuse centrale, de lECG drivation II, de la respiration
au cours dune transfusion incompatible chez un chat du groupe A recevant du sang du groupe B .................... 88
Figure 46 et Figure 47 : Courbes de survie des globules rouges lors de transfusions incompatibles .................... 88
Figure 48 : Astuce pour contrler le respect de la chane du froid ...................................................................... 101
Figure 49 : Schma dune agglutination entre deux globules rouges (GR) lis par des immunoglobulines ........ 104
Figure 50 : Schma de la composition chimique des antignes rythrocytaires flins ........................................ 106

12
 TABLE DES TABLEAUX

Tableau 1 : Avantages et inconvnients des diffrentes mthodes d'approvisionnement en donneur ............... 17

Tableau 2 : Avantages et inconvnients des principales techniques de dpistage des maladies ......................... 21
Tableau 3 : Recommandations pour le dpistage des maladies infectieuses chez les donneurs de sang canins en
bonne sant........................................................................................................................................................... 28
Tableau 4 : Recommandations pour le dpistage des maladies infectieuses chez les donneurs de sang flins en
bonne sant........................................................................................................................................................... 31
Tableau 5 : Avantages et inconvnients des diffrents protocoles anesthsiques................................................ 36
Tableau 6 : Dure de conservation du sang et proportion d'anticoagulant ajouter en fonction de
l'anticoagulant ...................................................................................................................................................... 53
Tableau 7 : Dose thrapeutique des diffrents facteurs de coagulation............................................................... 57
Tableau 8 : Conditions et dure de stockage et prparation l'utilisation des diffrents produits sanguins ....... 62
Tableau 9 : Elments mlanger pour la ralisation des crossmatch et des auto-contrles ............................... 66
Tableau 10 : Caractristiques des diffrentes ractions transfusionnelles et leur traitement .............................. 94
Tableau 11 : Tableau de correspondance entre le phnotype et les diffrents gnotypes possibles .................. 102
Tableau 12 : Prvalence des groupes sanguins dans l'espce canine aux Etats-Unis et en France..................... 103
Tableau 13 : Raction transfusionnelle et signes cliniques associs en fonction du groupe sanguin ................. 104
Tableau 14 : Frquence des groupes A et B chez les chats de race aux Etats Unis ............................................ 107
Tableau 15 : Correspondance entre les diffrents phnotypes, gnotypes et types d'anticorps produits .......... 107

13
14
 INTRODUCTION / OBJECTIFS

Mme si lanimal fut la naissance de la transfusion et des expriences de transfusion chez lanimal
rapidement effectues et relates ds le 17me sicle, la transfusion ne sest effectivement dveloppe
en mdecine vtrinaire qu partir des annes 1960. Les difficults lies sa ralisation, labsence de
structure garantissant lapprovisionnement en produits sanguins, son cot sont en effet autant de
facteurs limitant lutilisation de cette thrapeutique, alors que ses indications sont similaires celles
rencontres chez lhomme. En consquence, les connaissances dans ce domaine sont plus ou moins
labores ou directement adaptes des connaissances acquises en mdecine humaine.

Cre en 1999, lAVHTM (Association of Veterinary Hematology and Transfusion Medicine) se

consacre lavance des progrs scientifiques et la formation en hmatologie et la mdecine
transfusionnelle chez lanimal. Elle a pour but de promouvoir et daider au dveloppement de la
transfusion sanguine en mdecine vtrinaire (chez lanimal de compagnie principalement). Elle
regroupe des universitaires, principalement nord-amricains, et des membres des principales banques
de sang pour lanimal qui existent dans le monde. Un de ses premiers objectifs fut de contribuer
llaboration de recommandations pratiques cliniques pour la collecte de sang et la transfusion
sanguine chez le chien et le chat.

Les objectifs des recommandations pratiques cliniques sont damliorer la qualit des pratiques
professionnelles, daider tablir des rfrentiels daudit clinique et de produire des outils de
rgulation. Ce projet ambitieux initi par lAVHTM na pas encore abouti, mais un certain nombre de
contributions ont circul via la liste des adresses courriel des adhrents de lassociation et ont
donn lieu de nombreuses discussions entre membres. Notre travail a consist rpertorier ses
diffrents changes et proposer, au vu des remarques mises par les membres de lAVHTM, une
actualisation des recommandations pratiques cliniques appliquer en mdecine transfusionnelle
vtrinaire.

15
16
I. Collecte et gestion des donneurs

A. Recrutement des donneurs

Il existe plusieurs mthodes pour sapprovisionner en sang en vue dune transfusion. Certaines
cliniques vtrinaires ont recours des animaux levs et entretenus au sein de la structure dans le but
dtre donneurs de sang rguliers. Aux Etats Unis, les cliniques rachtent parfois des lvriers de
courses pour en faire des donneurs. Cependant cette pratique constitue une pratique discutable sur le
plan thique et lgislatif. (France. Ministre des affaires trangres, 2001) Dautres font appel aux
animaux du personnel ou des clients. Depuis peu, des banques de sang prives et des programmes de
don du sang ont vu le jour, en particulier aux Etats-Unis. Les clients volontaires se voient offrir des
vaccinations gratuites, des tests gratuits pour le dpistage de la dirofilariose ou de la leucose fline ou
encore un avoir pour leurs frais vtrinaires venir. Au Canada, les animaux abandonns aux SPA
subissent avant leur euthanasie une exsanguination. (Cotter S., 1991 ; Bcheler J., Cotter S.M., 1993 ;
Giger U., 1997 ; Belin P.H., 1999 ; Carr I.M., 2001)

Tableau 1 : Avantages et inconvnients des diffrentes mthodes d'approvisionnement en donneur

(Daprs Cotter S., 1991 ; Bcheler J., Cotter S.M., 1993 ; Giger U., 1997 ; Carr I.M., 2001 ; Lanevschi A.,
Wardrop K.J., 2001)

Mthode
Avantages Inconvnients
dapprovisionnement
- Cot important pour
- Disponibilit immdiate en cas lentretien quotidien et les
durgence examens pr-transfusion
Donneur appartenant la
- Statut sanitaire connu - Problme thique : dons
clinique
- Animaux coopratifs car frquents
habitus aux collectes - Les dons ne doivent pas reposer
sur un seul animal
- Statut sanitaire et anamnse
Donneurs issus de
- Cot rduit inconnus
refuges
- Problme thique
- Cot rduit
- Peu pratique en cas
- Tous les groupes de sang
Programme de don du durgence : chronophage
disponibles
sang volontaire - Temps ncessaire la gestion
- Bonne organisation des
(animaux du personnel de la liste des donneurs,
collectes programmes
ou des clients) la ralisation des rcoltes,
lavance
la gestion des stocks
- Dons plus espacs dans le temps
- Tous les groupes de sang
- Cot
disponibles
- Dlai pour
Banque de sang prive - Pas dexposition aux maladies
lapprovisionnement
- Dpistage des maladies
en cas durgence
transmissibles

Pour attirer de nouveaux donneurs, il convient de sensibiliser les propritaires limportance du don
du sang en faisant le parallle avec les campagnes de collecte de sang en mdecine humaine. Pour

17
cela, on peut utiliser des affiches dans la salle dattente ou des prospectus remettre aux clients lors de
leur premire visite ou lors des consultations vaccinales ou leur envoyer par courrier ou par mail. On
veillera utiliser un vocabulaire simple et abordable pour les propritaires danimaux de compagnie.
Ces documents doivent expliquer de manire concise et claire les conditions requises pour participer
au programme de don du sang, le droulement du prlvement sanguin et le devenir du sang collect.
Pour obtenir des renseignements complmentaires, les clients devront sadresser lassistante ou au
vtrinaire soccupant plus particulirement du programme. Par exemple, on expliquera la ncessit de
la tonte pour assurer les conditions dasepsie indispensables au prlvement de sang, limportance de
sdater les chats pour diminuer le stress et viter quils ressentent la ponction veineuse.

Le don du sang doit tre valoris autant que possible comme un acte gnreux afin de mettre en valeur
limportance de ce geste qui sauve la vie dautres animaux et faire natre une certaine fiert chez le
propritaire du donneur. On peut argumenter que leur animal pourrait un jour avoir besoin dune
transfusion et quune banque de sang entretenue par leur vtrinaire traitant leur viterait dtre
envoys dans une structure loigne de chez eux pour que leur animal soit transfus. Il faut insister sur
le fait que la dmarche est sur la base du volontariat et quils ne sont engags en rien dans la dure.

Pour fidliser le client, on lui remettra une rcompense pour son animal (sac de nourriture, jouet)
aprs chaque don et on sefforcera de faire du don du sang une exprience positive grce un accueil
chaleureux et personnalis, des locaux agrables, un temps dattente rduit au minimum. (S.
Daigneault, 2007 ; Feldman B.F, Kristensen A.T., 1995 ; Bcheler J., Cotter S.M., 1993)

A lheure actuelle, il nexiste pas de banque de sang prive en France. Un programme de dons du sang
est organis lEcole Vtrinaire de Lyon et dAlfort. Le recrutement des donneurs lENVL se fait
par le biais dannonces sur le panneau daffichage de la clinique carnivore ou par e-mail auprs des
tudiants, enseignants et membres du personnel de lcole. En change de leur motivation, les
propritaires de chiens ou chats donneurs sont rcompenss par un sac de croquettes offert par un
sponsor et le groupage sanguin de leur animal est la charge du SIAMU. Les donneurs peuvent tre
appels pour faire des dons rguliers afin dentretenir la banque de sang mais galement face un
animal ncessitant une transfusion durgence. Il peut galement arriver que le propritaire du receveur
vienne avec un donneur par exemple lorsquil sagit dun chat et que le propritaire possde un chat
ascendant ou descendant du patient.

B. Caractristiques et conditions requises pour les donneurs

1) Critres dinclusion

Les donneurs doivent tre en bonne sant, gs entre 1 et 8 ans, jour de leurs vaccinations (pour les
chiens, avec les valences Carr, Hpatite de Rubarth, Parvovirose, Leptospirose et Rage ; pour les
chats, avec les valences Typhus, Coryza, Rage, voire Leucose de manire facultative), jour de leur
vermifugation et traits trs rgulirement contre les parasites externes qui peuvent tre vecteurs de

18
maladies infectieuses. On privilgiera les chats vivant lintrieur ntant pas en contact avec des
chats ayant accs lextrieur afin de limiter le risque de maladie infectieuse fline.

Les chiens donneurs doivent peser au moins 25 kg afin de remplir une poche de 450 mL sachant quon
peut prlever jusqu 22 mL de sang par kilogramme de poids vif tous les 3 4 mois. Les chats
doivent dans lidal peser au moins 5 kg. On pourra leur prlever 10 12 mL de sang total par
kilogramme de poids vif toutes les 6 semaines. (Reine N.J., 2004 ; Griot-Wenk M.E., Giger U.,1995 ;
Schneider A., 1995 ; Bcheler J., Cotter S.M., 1993).

Lhmatocrite des chiens donneurs doit tre suprieur 40%, celui des chats doit tre suprieur 35%.
(Thbault A., 2005) Les chiens de race Greyhound sont particulirement apprcis comme donneurs
de sang car leur hmatocrite atteint naturellement 60%. Leur VGMH, CCMH, TCMH sont galement
plus levs que dans les autres races (Bartola A., 2005 ; Sullivan P.S. et al., 1994)

Pour faciliter la collecte de sang, on prfrera des animaux coopratifs. Les chats sont le plus souvent
tranquilliss. Les animaux avec un long cou, ayant des veines jugulaires facilement accessibles et
palpables seront dautant plus faciles prlever. (Lanevschi A., Wardrop K.J., 2001 ; Felman B.F,
Sink C.A., 2003)

2) Critres dexclusion

Les animaux ayant t transfuss ou les chiennes ayant t ou tant gestantes ne peuvent tre donneurs
car ils sont susceptibles davoir t exposs des groupes sanguins diffrents des leurs et par
consquent davoir fabriqu des anticorps contre ces groupes sanguins. Les femelles doivent donc tre
strilises et nullipares de prfrence. (Felman B.F, Sink C.A., 2003 ; Schneider A., 1995)
Lutilisation danimaux splnectomiss est contre-indique car ils sont plus sensibles certains agents
pathognes. (Giger U., 1997)
Si lanimal a une anomalie de la coagulation notamment un dficit en facteur de von Willebrand, il
sera exclu. Lanimal ne doit pas avoir de traitement en cours.

3) Examen pr-transfusion

a) Recueil des commmoratifs et de lanamnse

Avant chaque don, les commmoratifs et lanamnse de lanimal doivent tre relevs avec prcision,
en particulier les ventuels voyages de lanimal en zone dendmie de maladies infectieuses
transmissibles par transfusion et les ventuelles situations constituant des facteurs dexposition une
infection (accs lextrieur pour les chats, contact avec un autre individu infect). Cela conduira
largir le spectre des agents infectieux rechercher ou rpter les tests. Il convient de demander au
propritaire si son animal a t malade dans les 48 heures prcdant le don du sang. (Wardrop K.J. et
al., 2005)

19
 QUESTIONNAIRE POUR LES DONNEURS DE SANG

Nom et prnom du propritaire :

Adresse : .
Numro(s) de tlphone : ...

Nom de lanimal : .
Race : .....
Age : .
Sexe : mle femelle
Poids : ............
Strilis(e) : oui non
Si non, votre animal a-t-il dj eu une porte ? .

Milieu de vie : intrieur extrieur mixte

Congnres : oui non Accs lextrieur : oui non
Traitement anti-puces anti-tiques : oui non
Si oui, quelle frquence et avec quel produit ?
............................................................................................................
Vermifugation ? oui non
Si oui, quelle frquence et avec quel produit ?
............................................................................................................
Vaccination ? oui non
Si oui, avec quels les vaccins ?...........................................................
Date du dernier rappel?.......................................................................
Votre animal vous accompagne-t-il en voyage ? oui non
Si oui, dans quelle(s) rgion(s) ?..........................................................

Antcdents mdicaux/chirurgicaux de votre animal :

..
Antcdents de ses congnres : .
Votre animal a-t-il dj t transfus ? oui non
A-t-il t malade au cours des dernires 48 heures ? (fivre, fatigue,
vomissements, diarrhe) oui non
A-t-il un traitement en cours ? oui non
Si oui, lequel ? .

Figure 1 : Exemple de questionnaire pour les propritaires de donneurs de sang

b) Examens clinique et biologique

Avant dinclure un animal dans le pool de donneurs, il convient de pratiquer un examen clinique
complet pour reprer des signes dinfections et autres maladies intercurrentes (fivre, anmie,
gonflement articulaire) (Reine N.J., 2004) On ralise galement des examens biologiques rpter au
moins une fois par an une fois lanimal inscrit sur la liste des donneurs : minima un hmogramme,
un frottis sanguin et une biochimie, associs dans le meilleur des cas une analyse durine, une
coproscopie et parfois mme une mesure de la concentration plasmatique du facteur von Willebrand.
Concernant ce dernier, le seuil en dessous duquel on carte les donneurs est variable selon les
praticiens : 25 70%. [Dodds J., 2005c ; Mackin A., 2005 ; Wardrop J., 2005 ; Crawford C., 2005b]

20
Il est important de mesurer lhmatocrite avant chaque don afin de sassurer que le donneur ne souffre
pas dune anmie conscutive aux collectes de sang et que les produits sanguins renferment bien la
quantit voulue dhmaties. On vrifiera galement chaque rcolte que le donneur nest pas porteur
de puces ou de tiques et si tel est le cas, lanimal devra tre temporairement exclu car le risque quil
soit porteur dune maladie infectieuse vectorielle est augment. (Wardrop K.J. et al., 2005 ; Howard A.
et al., 1992 ; Schneider A., 1995)

c) Dpistage des agents infectieux

Il est galement important de vrifier que les candidats au don ne sont pas porteurs dagents infectieux
quils pourraient transmettre au receveur. Pour des raisons videntes de cot, on se devra de choisir les
agents infectieux les plus pertinents et la ou les techniques de dpistage les plus efficaces.

Tableau 2 : Avantages et inconvnients des principales techniques de dpistage des maladies

(Daprs Wardrop K.J. et al., 2005)

Techniques de
Avantages Inconvnients
dpistage
Oprateur-dpendant, chronophage, faible
Microscopie optique Bonne spcificit
sensibilit

Haute Valeur Prdictive Positive Non disponible pour certains agents

Mise en culture (VPP), pathognes, faible sensibilit, onreux ou
1 rsultat + infection chronophage

Disponible pour dpister

Dtection dantigne Non disponible pour certains agents
Dirofilaria immitis et le FeLV.
(sro-immunologie) pathognes
Peu derreurs dinterprtation

Manque de standardisation entre les

laboratoires (spcificit et sensibilit
VPP=100%
PCR variables). Non disponibles pour certains
1 rsultat + infection
agents pathognes. Onreux. Faux ngatifs
possibles si ADN en trs faible quantit

1 rsultat + exposition
Srologie (recherche
lagent pathogne infection Pas de standardisation entre les laboratoires
danticorps)
Bonnes spcificit et VPP concernant lantigne, les ractifs, le
IFI, ELISA, WB, IDG,
ELISA : rapide, bon march, peu protocole
HA
derreur de manipulation

Remarque : PCR=Polymerase Chain Reaction

IFI = ImmunoFluorescence Indirecte
ELISA = EnzymeLinked ImmunoSorbent Antibody
WB=Western Blot
IDG=ImmunoDiffusion sur Glose
HA=Hmagglutination

21
Les agents infectieux qui doivent systmatiquement tre recherchs sont :
- ceux qui sont transmissibles par transfusion ou qui peuvent tre mis en culture partir du sang dun
animal infect ;
- ceux qui auront des consquences nfastes sur le receveur en cas dinfection (maladie svre ou
difficile soigner) ;
- ceux qui peuvent entraner une infection subclinique telle que des porteurs asymptomatiques
pourraient tre inclus dans la liste des donneurs ;
- ceux dont la prvalence est leve dans les rgions o le donneur a sjourn ou dans la race du
donneur. (Reine N.J., 2004 ; Wardrop K.J et al., 2005).

Les maladies quon recommande de dpister selon le contexte sont :

- celles dont la transmission a t dmontre exprimentalement mais pour lesquelles aucune
transmission par transfusion nest rapporte ;
- les maladies qui ne reprsentent pas une relle menace ou que lon peut facilement traiter. (Wardrop
K.J. et al., 2005).

Chez le chien

o Maladies dont le dpistage est recommand :

*La Babsiose : il sagit dune infection par un protozooaire inoculable par une tique. En France
mtropolitaine, une seule espce est retrouve : Babesia canis. Il sagit dune grande babsie. Elle est
transmise par deux espces de tiques diffrentes : Rhipicephalus sanguineus et Dermacentor
reticulatus. Cependant dautres espces circulent dans les pays voisins comme B. (c.) vogeli dcrites
en Espagne et la Runion ou B. gibsoni, une microbabsie dcrite en Espagne. (Bourdoiseau G.,
2006 ; Criado-Fornelio A. et al., 2009)
La babsiose se manifeste par un syndrome fbrile associ un syndrome hmolytique qui est parfois
lorigine dune insuffisance rnale svre et mme dun tat de choc fatal. En France, la prvalence
de la babsiose est leve. La distribution de cette maladie est trs htrogne, en mosaque car le
vecteur est trs dpendant des conditions de tempratures et dhumidit. Ces zones tiques sont
variables au cours du temps. Deux zones sont plus particulirement touches : une zone sud-
ouest/ouest qui stend du Languedoc la Sologne et une zone centre sur Lyon stendant jusquen
Bourgogne et au centre de la France.
Les chiens les plus touchs sont les animaux vivant dehors, la campagne et ceux qui ont moins de 3
ans ; une immunit se met en place progressivement. Cette maladie se rencontre surtout au printemps
et lautomne, saisons propices lactivit de la tique vectrice. (Bourdoiseau G., 2006). Aux Etats-
Unis, la sroprvalence de B. canis serait trs leve chez le Greyhound : 46,1%. Hors cette race est
souvent utilise dans les banques de sang aux Etats-Unis en raison de leur hmatocrite lev. (Taboada
J. et al., 1992). La transmission des babsies par transfusion est avre chez les chiens. (Freeman M.J.
et al., 1994 ; Stegeman JR. et al., 2003)

22
 Figure 2 : Prvalence de la babsiose en France entre 2003 et 2004
(Daprs Bourdoiseau G., Renard N., 2005)

Dpartements avec plus de 50 cas de babsiose par cabinet/clinique et par an

Dpartements avec entre 20 et 50 cas de babsiose par cabinet/clinique et par an
Zone de faible endmie

Le dpistage de la babsiose est rendu difficile par le fait que linfection peut voluer de manire
asymptomatique ou chronique, pas seulement aigu.
De plus, il savre que les rsultats aux diffrents tests (examen direct au microscope, srologie et
PCR) peuvent tre contradictoires pour un mme animal (Birkenheuer AJ et al., 2003)
Il est recommand de raliser des srologies contre B. canis et dexclure les chiens sropositifs de la
liste des donneurs. Les chiens srongatifs peuvent ventuellement tre tests pour Babesia spp. par
PCR. (Wardrop K.J. et al., 2005)

*La leishmaniose : cette maladie est due un protozoaire, Leishmania infantum en France (Institut de
Veille Sanitaire, 2001-2003) transmise par la piqre de la femelle du phlbotome, prsente dans le
bassin mditerranen, notamment le Sud de la France.
Le chien sert de rservoir au parasite. Davoust B. estime la sroprvalence en France 9% en 1993
dans le Sud de la France. La leishmanie se multiplie dans le systme rticulo-endothlial, plus
prcisment dans les macrophages.

23
 Figure 3 : Prvalence de la leishmaniose en France en 2004
(Intervet Schering-Plough Animal Health, 2009)

Zone de forte endmie (50 cas et plus/cabinet/an)

Zone dendmie moyenne (entre 21 et 50 cas /an)
Zone dendmie mergeante ( entre 11 et 20 cas/an)
Zone de faible endmie ( entre 6 et 10 cas/an)
Zone de trs faible endmie ( moins de 5 cas/an)

Lexpression clinique est trs protiforme : alopcie, parakratose, squamosis, onychogryphose,

ulcres, abattement, amaigrissement, adnomgalie, splnomgalie, anmie, uvite, glomrulo-
nphrite, boiterie (Davoust B., 1994 ; De Freitas E et al., 2006) La svrit de la maladie dpend de
ltat immunologique du chien : du portage asymptomatique un syndrome clinique extrmement
grave. (De Freitas E et al., 2006)
Il semblerait que la race Foxhound soit particulirement sensible linfection par la leishmaniose :
29% des Foxhound Amricains dun chenil New York taient sropositifs pour L. infantum et 78%
dentre eux taient effectivement infects daprs la PCR. Toutefois, aucune tude na dmontr ce
jour la sensibilit raciale des Foxhounds pour L. infantum. (Gaskin AA et al., 2002) Une tude sur la
leishmaniose viscrale a montr que 30% des Foxhound anglais tests taient sropositifs pour
Leishmania infantum, certains dentres eux taient donneurs de sang. Sur 7 chiens ayant reu du sang
venant dun donneur sropositif, 3 sont devenus sropositifs. Les chiens ayant reu du plasma frais
congel de donneurs infects sont rests srongatifs ce qui semble montrer que le plasma frais
congel contamin ne peut tre la source dune transmission de la leishmaniose. (Owens S et al.,
2001).

24
Une autre tude au Brsil a mis en vidence la transmissibilit de Leishmania infantum par
transfusion. (De Freitas E et al., 2006)

Compte tenu de la svrit de cette maladie, de lexistence de porteurs asymptomatiques, de la dure

dincubation variable, de sa transmission avre par la transfusion, il convient de vrifier le statut vis
vis de Leishmania spp. de tous les chiens de race Foxhound et des chiens ayant voyag dans les zones
dendmie. Pour cela, on peut raliser une IFA puis exclure les chiens sropositifs. Les chiens
srongatifs pourront tre re-tests par PCR. (Wardrop K.J. et al., 2005 ; De Freitas E et al., 2006) Il
est recommand de traiter les chiens donneurs contre les ectoparasites pour rduire le risque
dexposition au vecteur. (Reine N.J., 2004)

Deux vaccins existent ce jour contre la leishmaniose : un vaccin base dantignes excrts ou
scrts par des promastigotes de L. infantum (vaccin LiESAp-MDP) et un vaccin FML-saponin
(Leishmune). (Palatnik-de-Sousa C.B, 2008 ; Bourdoiseau G., 2008) Un vaccin devrait
prochainement tre mis sur le march en France.

*Les Rickettsioses : ehrlichiose et anaplasmose

- Ehrlichia canis
Ehrlichia canis est une rickettsie intra-monocytaire transmise par Rhipicephalus sanguineus, tique
prsente dans le Sud-Est de la France o 16,3% des tiques sont porteuses dEhrlichia canis (Sailhac-
Clment M-L., 2003). La prvalence de linfection par E. canis dans le sud de la France mesure par
PCR est de 15%. (Kenny M.J. et al., 2004) Dans le Sud de la France, la sroprvalence sur des chiens
militaires tait value 9%. (Davoust B., 1994) Cest la rickettsie la plus frquente. Son expression
clinique est variable : on peut rencontrer la forme aigu, subclinique et chronique. (Wardrop K.J. et al.,
2005). Lvolution dpendra de la qualit des dfenses immunitaires, de la race : par exemple les
Bergers allemands montrent une sensibilit accrue lehrlichiose. (Neer T.M. et al., 2002) Les
principaux signes cliniques sont de lhyperthermie, de lanorexie, de lasthnie, un amaigrissement,
des muqueuses ples, une adnomgalie, une splnomgalie, des signes oculaires (uvite, hyphma),
plus rarement du jetage, des ptchies ou du purpura. Les analyses hmatologiques rvlent de
manire quasi-systmatique une thrombopnie frquemment associe une anmie argnrative
mdiation immune. A lexamen biochimique, on observe souvent une lvation transitoire des
paramtres hpatiques (PAL et Alat), une hypoalbuminmie et une augmentation progressive des
gammaglobulines. (Davoust B., 1994 ; Beugnet F., 2002). Le dpistage dE. canis pourra se faire par
immunofluorescence indirecte (il faut des titres suprieurs 1 : 80). Pour les chiens avec des titres bas,
on recommande de rpter les srologies, de faire une PCR ou un Western Blott. Il existe aussi un test
rapide ELISA de dpistage des anticorps dirigs contre E.canis. Des rsultats positifs sont obtenus
pour des titres en anticorps suprieurs 1 : 100.
Compte tenu de la frquence et de la gravit de cette maladie, il est vivement recommand de tester les
donneurs potentiels pour cette maladie par IFI ou par ELISA. (Wardrop K.J. et al., 2005 ; Reine N.J.,
2004 ; Neer T.M. et al., 2002)

25
- Anaplasma platys
Il sagit dun parasite des plaquettes sanguines sous la forme dune morula. Cet agent infectieux est
prsent au Sud des Etats Unis et dans le Sud de lEurope, y compris en France. (Neer T.M., 2002) Il y
aurait frquemment co-infection avec E. canis. Linoculation exprimentale par voie intra-veineuse est
possible. (Carmichael L.E., Greene C.E.,1998) Aux Etats-Unis et en Asie, linfection A. platys est
asymptomatique. En France, les signes cliniques rencontrs sont un syndrome fbrile, une anorexie et
des douleurs violentes. Les manifestations hmatologiques sont une thrombocytopnie et une
mononuclose. Le dpistage, rarement mis en uvre ce jour, est effectu par PCR. (Beugnet F.,
2002)

- Anaplasma phagocytophilum
Cette bactrie intra-cellulaire est situe dans les granulocytes et les macrophages. Elle est transmise
par Ixodes ricinus et les rongeurs et ruminants constituent son rservoir. Elle provoque un tableau
clinique trs protiforme : syndrome fbrile, anorexie, boiteries, diarrhes, dficits proprioceptifs La
transmission dA. phagocytophilum par transfusion est avre en mdecine humaine. (McQuiston J.H.
et al., 2003) Le diagnostic se fait par frottis, srologie ou PCR. (Beugnet F., 2002)

*La brucellose :
Cette maladie due Brucella canis affecte lappareil reproducteur des mles comme des femelles. Elle
est habituellement transmise par voie vnrienne ou par voie oro-nasale. La transmission par
transfusion sanguine est dcrite chez les humains mais pas chez les chiens ce jour. (Wardrop K.J. et
al., 2005) Cependant, une bactrimie est possible et persistante jusqu 2 ans en labsence de
traitement. Aprs infection exprimentale, une tude a montr que les hmocultures restent positives
pour la bactrie pendant plus de 5 ans. (Carmichael L.E., Greene C.E., 1998)
Pour le dpistage, on peut utiliser une sro-agglutination sur lame ou EAT (Epreuve lAntigne
Tamponn), une hmoculture, une IDG ou un test ELISA raliser sur les donneurs entiers. (Wardrop
K.J. et al., 2005)

o Maladies vectorielles dont le dpistage est recommand dans un contexte dexposition

*La bartonellose :
Bartonella vinsonii susp. berkhoffi est une bactrie intra-rythrocytaire. La sroprvalence de B.
vinsonii serait de 14% chez des chiens dans le Sud de la France, lAfrique, la Guyane franaise et la
Martinique. Elle peut rester subclinique ou provoquer une endocardite, une myocardite, une maladie
granulomateuse, une lymphadnite. (Beugnet F., 2002 ; Breitschwerdt E.B. et al., 2004) La
transmission par transfusion nest pas dcrite ce jour. Cependant, linoculation exprimentale de
cette bactrie par voie intra-veineuse entrane une infection chronique qui se traduit par une
immunodficience due des altrations morphologiques et fonctionnelles au niveau des lymphocytes,
des cellules prsentatrices des antignes et des macrophages. (Pappalardo B.L. et al., 2001) Le
dpistage peut se faire par IFI avec un titre suprieur 1 : 64. (Breitschwerdt E.B. et al., 2004)

26
*Lhmoplasmose :
Mycoplasma haemocanis et Candidatus Mycoplasma haemoparvum sont des parasites rythrocytaires
transmis par une tique. Dans le Sud de la France, la prvalence des chiens porteurs de Mycoplasma
dtect par PCR a t estime 15,3% dont 9,6% par C. Mycoplasma haemoparvum, 3.3% par M.
haemocanis et 2,6% par les deux. (Kenny et al., 2004) La majorit des chiens infects sont
asymptomatiques ; chez les chiens immunodprims ou splnectomiss, linfection provoque une
anmie. (Reine N.J., 2004 ; Wardrop K.J. et al., 2005) Un cas de transmission par transfusion de M.
haemocanis a t dcrit sur un chien ayant subi simultanment une splnectomie et une transfusion
sanguine : de ce fait, il est difficile de dterminer laquelle des deux interventions est lorigine de
linfection. (Lester S., Hume J., 1995) Le diagnostic est ralis grce un frottis sur sang priphrique
ou par PCR. (Reine N.J., 2004 ; Wardrop K.J. et al., 2005) Certains praticiens ncartent pas
dfinitivement les chiens positifs la PCR ; ils les traitent pendant deux trois semaines avec de la
doxycycline puis recontrlent leur statut vis vis de M. haemocanis par PCR. [Hale A.S., 2007a ;
Abrams-Ogg A.C.G., 2007]

*La dirofilariose ne peut tre transmise par la transfusion de sang issu dun donneur porteur de
microfilaires. Il faut que la microfilaire soit ingre par le moustique et rinjecte un chien ou un
chat pour achever sa maturation et causer une dirofilariose. Toutefois, pour la sant du donneur, il est
prfrable de tester les donneurs en zone dendmie et de les placer sous traitement prventif contre la
dirofilariose. (Howard A. et al., 1992 ; Wardrop K.J. et al., 2005)

o Autres maladies pour lesquelles le dpistage nest pas ncessaire :

*La maladie de Lyme : chez un chien en bonne sant, le risque de transmission de Borrelia
burgdorferi par transfusion est ngligeable. (Wardrop K.J. et al., 2005)

*La trypanosomose : compte tenu de lpidmiologie de T. cruzi, le dpistage de ce parasite nest pas
ncessaire, moins que le donneur potentiel nait voyag en zone dendmie (Amrique du Sud,
Amrique centrale, quelques cas au Sud-Ouest des Etats-Unis). (Reine N. J., 2004)

*Neorickettsia risticii est prsente uniquement en Amrique du Nord (Neer TM et al., 2002)

27
 Tableau 3 : Recommandations pour le dpistage des maladies infectieuses chez les donneurs de sang
canins en bonne sant
(Daprs Wardrop K.J. et al., 2005)

Maladie Agent pathogne Dpistage Tests

Babsiose Babesia canis Recommand IFI, PCR
Leishmaniose Leishmania infantum Recommand IFI, PCR
Ehrlichiose Ehrlichia canis Recommand IFI, ELISA, PCR
Brucellose Brucella canis Recommand EAT, PCR
Hmoplasmose Mycoplasma haemocanis Conditionnel Frottis, PCR
Ehrlichiose Ehrlichia canis like Conditionnel PCR
Anaplasmose Anaplasma phagocytophilum Conditionnel Frottis, IFI, PCR
Bartonellose Bartonella vinsonii Conditionnel IFI

Chez le chat

o Maladies dont le dpistage est recommand :

*Lhmoplasmose
Cette maladie peut tre due Mycoplasma haemofelis ou Candidatus M. haemominutum
(anciennement Hemobartonella felis), bactrie la surface des hmaties. Dans le Sud de la France,
prs de 24% des chats sont infects par lune de ces deux espces de mycoplasmes. (Sailhac-Clment
M-L., 2003) Une tude ralise aux Etats-Unis sur des chats donneurs de sang a montr que 21,3%
dentre eux (ces chats taient exposs aux puces) taient infects par M. haemofelis ou Candidatus M.
haemominutum. (Hackett T.B., 2006) Ctenocephalides felis est un vecteur potentiel. (Woods J.E. et al.,
2005) La transmission par injection de trs faibles quantits de sang dun porteur chronique est
dmontre exprimentalement et elle peut induire des signes cliniques chez un chat adulte. (Reine
N.J., 2004) De plus, les mycoplasmes survivent dans du sang stock 4C pendant 1 jour 1 semaine
bien que leur virulence diminue au cours du stockage. (Gary A.T. et al., 2006) Avec M. haemofelis,
les symptmes relevs sont labattement, lanorexie, la dshydratation parfois un amaigrissement, une
pleur des muqueuses ; du point de vue hmatologie, on observe une anmie le plus souvent
rgnrative. Linfection par M. haemominutum est gnralement moins svre que celle par M.
haemofelis. (Westfall D.S. et al., 2001) : on note une fivre transitoire ou une hypothermie et parfois
un amaigrissement. Le portage asymptomatique et le portage chronique sont possibles. Dans le Sud de
la France, entre 50 et 60% des chats infects ne prsentent pas de symptmes. La svrit de
linfection semblerait tre corrle avec un tat dimmunodficience : des maladies intercurrentes
comme le FeLV ou le FIV, des abcs, un stress, une gestation, un processus tumoral. (Sykes J.E.,
2003 ; Sailhac-Clment M-L., 2003 ; Bauer N. et al., 2008)
Le dpistage peut se faire par visualisation sur le frottis de lagent pathogne la surface des hmaties
(cependant cette technique est peu sensible surtout pour les porteurs chroniques et les porteurs sains)
ou par PCR. Il est recommand dexclure les chats positifs de la liste des donneurs car le traitement ne
permet pas dliminer la bactrimie. (Wardrop K.J. et al., 2005 ; Reine N. J., 2004)

28
*La bartonellose
Cette affection est provoque par Bartonella henselae, Bartonella clarridgeiae et Bartonella koehlerae
(cette dernire na t isole que chez deux chats aux Etats-Unis). Il sagit dune zoonose qui provoque
chez lhomme la maladie des griffes du chat . (Beugnet F., 2002) Habituellement, linfection
provoque une bactrimie durable et asymptomatique. Certains chats infects exprimentalement ont
prsent de la fivre, des lymphadnopathies, des uvites et des endocardites. (Wardrop K.J. et al.,
2005 ; Reine N. J., 2004)
Il semblerait que Ctenocephalides felis joue le rle de vecteur. En France, 3,5% des puces sont
porteuses de Bartonella et 5,4% des chats sont infests par des puces porteuses de Bartonella (Just
F.T. et al., 2008). La prvalence de la bartonellose tait estime 16,5% Paris en 1996. (Gurfield
A.N. et al., 2001)
La transmission naturelle de B.henselae par transfusion sanguine est suspecte en raison de sa
localisation intra-rythrocytaire. On peut obtenir exprimentalement une bactrimie chez un chat en
injectant du sang infect par Bartonella sp. (Lappin M.R., 1999 ; Guptill L., 2003)
Pour le dpistage de la bartonellose, on peut avoir recours la srologie (IFI) ou la PCR. Le
dpistage systmatique de la bartonellose en vue dun don du sang est controvers. On pourrait
rechercher Bartonella sp. uniquement chez les chats ayant des antcdents de bartonellose ou ayant t
infests par des puces. Le traitement ne permettant pas llimination de la bactrie, on recommande
donc dcarter les chats positifs. (Wardrop K.J. et al., 2005 ; Reine N. J., 2004)

*La leucose fline

Elle est due un oncornavirus, le FeLV (ou Feline leukemia virus) transmis principalement par la
salive mais le virus pouvant tre prsent dans le sang, la transmission par transfusion sanguine est
possible quand le donneur est virmique. La prvalence du FeLV aux Etats-Unis est infrieure 2%
chez les chats sains et comprise entre 6 et 33% chez les chats trs exposs. (Levy J. et al., 2008) Aprs
exposition au FeLV, il y a 4 issues possibles en fonction de lefficacit des dfenses immunitaires :
soit linfection se propage dans les tissus lymphodes puis la moelle osseuse puis les muqueuses et les
pithlia glandulaires et muqueux et le chat mourra de la leucose en quelques annes ; soit linfection
rgresse avant davoir atteint la moelle osseuse, dans ce cas, le chat ne dveloppera pas la maladie ;
soit le chat nest pas infect aprs inoculation du FeLV ; soit linfection reste focale. La leucose fline
peut se manifester par un lymphome, une leucmie, une mylosuppression ( lorigine dune anmie,
dune thrombopnie, dune leucopnie, dune immunosuppression), des troubles de la reproduction,
une adnomgalie. Le meilleur test est le test ELISA pour lantigne p27. (Cotter S., 1998 ; Levy J. et
al., 2008) Il est conseill de tester tous les donneurs potentiels pour le FeLV et dexclure tous les chats
sropositifs. Si le rsultat est ngatif mais quon ne peut exclure une exposition rcente au FeLV, il
faut rpter le test 30 jours aprs lexposition suppose. De plus, les chats ayant accs lextrieur
sont plus exposs au risque dinfection par le FeLV, on prfrera donc les chats vivant exclusivement
lintrieur. (Wardrop K.J. et al., 2005)

*Linfection due au FIV (Feline Immunodeficiency Virus)

Le FIV est un Lentivirus transmis par la salive ou le sang lors des morsures ou des combats entre
chats. Il est lorigine dune lymphadnopathie gnralise associe une neutropnie, une

29
lymphopnie, un syndrome fbrile et de lanorexie, plus rarement, un lymphome malin ou encore une
cholangite. (Callanan J., 1992) La prvalence du FIV aux Etats-Unis est infrieure 2% chez les chats
sains et comprise entre 6 et 33% chez les chats trs exposs. (Levy J. et al., 2008) Le test de dpistage
le plus utilis permet de rechercher les anticorps anti-gp40. Il convient de raliser pour tous les futurs
donneurs un test ELISA de dpistage des anticorps spcifiques du FIV et dexclure les chats
sropositifs. Si le rsultat est ngatif mais quon ne peut exclure une exposition rcente au FIV, il faut
rpter le test 60 jours aprs lexposition suppose (dlai de sroconversion). Il est impossible de
diffrencier les chats vaccins des chats infects avec les kits de dpistage ELISA utiliss en routine :
en effet, les rsultats sont faussement positifs pendant au moins 1 an. (Levy J. et al., 2004) Cest
pourquoi il est conseill dexclure tous les chats sropositifs, y compris les chats vaccins ainsi que les
chats ayant accs lextrieur de la liste des donneurs. (Wardrop K.J. et al., 2005)

o Maladies vectorielles dont le dpistage est recommand en fonction du contexte :

*La cytauxzoonose
Cytauxzoon felis appartient la famille des Theileriids et est rencontr principalement au Sud-Est des
Etats-Unis. Toutefois, une tude ralise en France en 2006-2007 a identifi par PCR un chat infect
par Cytauxzoon sp. sur les 116 tudis, soit une prvalence de 0,8% (Criado-Fornelio A. et al., 2009)
Linfection naturelle et linfection induite exprimentalement par inoculation intra-veineuse sont
presque toujours mortelles. Aucun test srologique ou recherche PCR nest disponible. Le diagnostic
est ralis par recherche du piroplasme sur le frottis sanguin avec du sang priphrique. Compte tenu
de la rpartition trs localise du parasite, le dpistage nest pas prioritaire en routine. (Reine N.J.,
2004 ; Wardrop K.J. et al., 2005)

*Lehrlichiose, lanaplasmose, la norickettsiose

Linfection naturelle des chats par des Ehrlichiae est dmontre. (Breitschwert E.B., 2002 ;
Bjoersdorff A., 1999) On a identifi trois agents pathognes identiques ou proches de E. canis, N.
risticii et A. phagocytophila. Cependant, les cas dehrlichiose fline restent marginaux lheure
actuelle. Une tude PCR a montr une prvalence de 1% pour Ehrlichia / Anaplasma sp. Barcelone.
(Tabar M-D. et al., 2008) Le mode de transmission est probablement vectoriel avec des tiques. La
transmission de lehrlichiose par inoculation intra-vasculaire suggre quune transmission par
transfusion sanguine est possible. Cependant, aucun cas de ce type nest rapport ce jour.
Lobservation au microscope dune morula sur frottis sanguin est un moyen de dpistage accessible
mais peu sensible. A ce jour, il nexiste pas de test srologique standard pour le dpistage des
ehrlichioses chez le chat. Cest pourquoi on recherchera E. canis, A. phagocytophila et N. risticii par
PCR uniquement chez les chats ayant des antcdents de signes cliniques tels quune hyperthermie
dorigine inconnue, de labattement, des douleurs, une lymphadnopathie, une anorexie, un
amaigrissement, de la diarrhe et danomalies biologiques telles que des inclusions dans les PNN ou
des lymphocytes, une thrombopnie, une leucocytose, une hyperprotinmie avec hyperglobulinmie.
(Beaufils J-P., 1999 ; Reine N.J., 2004)

30
*La dirofilariose :
La conduite tenir est la mme que dans lespce canine. Le dpistage et la prophylaxie contre la
dirofilariose sont entrepris uniquement en zone dendmie.

o Maladies pour lesquelles le dpistage nest pas ncessaire :

*La PIF : Pritonite Infectieuse Fline

Les tests notre disposition (srologie ou RT-PCR) ne permettent pas de diffrencier le coronavirus
responsable de la gastro-entrite du coronavirus mut responsable de la PIF. La sroprvalence des
coronaviroses et la prvalence des chats virmiques pour le coronavirus sont trs leves et non
corrles au dveloppement de la PIF. De plus aucun cas de transmission de la PIF par perfusion nest
rapport. Par consquent, il nest pas pertinent de dpister cette maladie dans le cadre dun don du
sang. (Wardrop K.J. et al., 2005, Reine N.J., 2004)

*La toxoplasmose :
Les chats sont lhte dfinitif de Toxoplasma gondii. La transmission se fait par ingestion de tissus
infects ou daliment ou deau contamins par des oocystes. Aucun cas de transmission par transfusion
nest rapport. Il ny a pas lieu de rechercher ce parasite chez un chat donneur en bonne sant.
(Wardrop K.J. et al., 2005)

Tableau 4 : Recommandations pour le dpistage des maladies infectieuses chez les donneurs de sang flins
en bonne sant
(Daprs Wardrop K.J. et al., 2005)

Maladie Agent pathogne Dpistage Tests

Infection par le FeLV FeLV Recommand ELISA

Infection par le FIV FIV Recommand ELISA
Mycoplasma haemofelis, M. Microscope,
Hmoplasmose Recommand
haemominutum PCR
Bartonella henselae, B. Recommand IFI, PCR,
Bartonellose
Clarridgeae, B. kholerae conditionnel culture
En zone dendmie et
Cytauxzoonose Cytauxzoon felis Microscope
dans certaines races
Ehrlichiose Ehrlichia canis like Conditionnel PCR

Anaplasmose Anaplasma phagocytophilum Conditionnel IFI, PCR

Neorickettsiose Neorickettsia risticii Conditionnel

En conclusion, il est compliqu en France de se montrer aussi slectif vue la difficult trouver des
donneurs. De plus, le dpistage des maladies prsentes ci-dessus reprsente un cot important si lon
veut se montrer exhaustif : une srologie cote entre 20 et 25, une PCR environ 45. Les animaux

31
inclus sur la liste de donneurs du SIAMU appartiennent des tudiants ou au personnel de lEcole
Vtrinaire. Ces personnes sont particulirement sensibilises aux mesures de prophylaxie comme la
vaccination, la vermifugation et les traitements contre les parasites externes (trs important pour
limiter la transmission vectorielle dagents infectieux). On se contente donc dun dpistage FeLV/ FIV
pour les chats et dune numration formule sanguine et dun frottis sanguin avant le premier don.

C. Equipement et personnel requis pour la collecte

Une collecte ncessite au minimum de 3 personnes : une qui ralise la contention, une qui comprime la
veine et une qui effectue le prlvement. Si la structure ne dispose pas dun mlangeur, il faudra une
quatrime personne pour homogniser le sang avec lanticoagulant dans la poche de prlvement.

En ce qui concerne le matriel, il faut :

- des produits anesthsiques pour la tranquillisation et une crme anesthsique locale (Emla ou
Tronothane)
- le matriel ncessaire lasepsie (une tondeuse, des compresses, un antiseptique (chlorhexidine ou
polyvidone iode) sous formes savon et solution)
- des gants striles pour loprateur qui ponctionne
- un champ strile transparent
- un systme de collecte strile (poches de 500 mL contenant un anticoagulant et un conservateur pour
les chiens ; seringue strile, robinet trois voies, tubulure strile et poches de 150mL pour les chats)
- un clamp
- des clips en aluminium pour sceller les poches, une pince sceller, un stripper.
- une balance
- une bande compressive type Vetrap 4*4

La collecte doit se drouler dans un lieu appropri : une pice calme avec un sol non glissant
comportant une table dexamen de grande taille et solide et pouvant tre ferme cl afin dviter
dtre interrompu pendant la collecte. (Lucas R.L. et al., 2004)

D. Systme de collecte

1) Bouteilles en verre

Des bouteilles en verre taient autrefois utilises pour recueillir le sang. Il sagit dun systme
ouvert qui expose donc un risque de contamination de la poche. Cette pratique est proscrire car
le verre a la proprit dactiver les plaquettes et certains facteurs de coagulation (le facteur VIII et
XIII) que lon souhaite prserver. De plus, le stockage des poches prend beaucoup moins de place que
les bouteilles. (Smith CA., 1991 ; Feldman B.F, Kristensen A.T., 1995; Corlouer J-P., 2001)

32
 2) Systme de collecte ferm

Le systme ferm est constitu dune poche primaire contenant un anticoagulant et un conservateur
pour les globules rouges avec une tubulure se terminant par une aiguille. Lorsque le sang est destin
tre spar en plasma et concentr globulaire par exemple, le systme comporte 2 poches satellites
relies la poche primaire par des tubulures comportant des coupe-circuits. Le systme ferm permet
de prlever strilement le sang et de le conserver labri de lair et des contaminations. Cest le
systme le plus sr pour la collecte de sang. (Schneider A., 1995)

Les poches sont fabriques en plastique PVC contenant du DEHP (2-ethylhexylphtalate) qui migre de
la couche interne de la poche vers le sang stock et a un effet stabilisateur sur la membrane du globule
rouge. (Wardrop K.J., 1995)

3) Systme de collecte ouvert

Un systme ouvert est un systme pour lequel il faut connecter ensemble une poche ou une seringue,
une tubulure, un robinet trois voies, une aiguille et injecter un anticoagulant et un conservateur dans
la poche. Toutes ces oprations doivent tre ralises le plus strilement possible. Quoiquil en soit, ce
systme expose invitablement un risque de contamination bactrienne au cours de ces
manipulations. Cest pourquoi il convient dutiliser les produits sanguins dans les 24 heures sils sont
stocks entre 1 et 6 C, dans les 4 heures sils sont stocks temprature ambiante (22-25C). A ce
jour, aucun systme strictement clos contenant un anticoagulant et un conservateur nest disponible
pour les chats. Pour les chiens, on prfrera toujours un systme ferm. (Schneider A., 1995 ; Feldman
B.F, Sink C.A., 2003) [Davidow B., 2005a]

Figure 4 : Systme de collecte ouvert Figure 5 : Systme de collecte ferm

33
 4) Seringues

La dernire solution consiste prlever le sang total directement dans des seringues condition que le
sang soit transfus immdiatement. Il sagit dun systme ouvert. Le sang ne doit en aucun cas tre
stock cause du risque de contamination et de la dure de vie rduite des hmaties et des plaquettes.
[Davidow B., 2005a]

5) En pratique

Pour les chiens, on utilise classiquement une unit de 450 mL qui contient 63mL de solution
anticoagulante et conservatrice. Si le volume de sang prlever est infrieur 405 mL, il faudra retirer
une partie de lanticoagulant de la poche primaire. Pour que le systme reste ferm, il faudra faire
passer la quantit voulue danticoagulant dans une des poches satellites en pressant la poche primaire,
tout en pesant la poche primaire pour contrler la quantit danticoagulant retire. En effet, le citrate
est un chlateur du calcium, le plasma hyper-citrat risque donc de provoquer une hypocalcmie
chez le receveur. Si lon ne retire pas lexcs de citrate, le surplus sera transfr dans la poche
contenant le plasma. (Schneider A., 1995 ; Lucas R.L. et al., 2004) De plus, un excs danticoagulant
peut diminuer la dure de vie des hmaties ou encore modifier le pH de la solution ce qui a des
consquences sur la viabilit des plaquettes. (Thbault A., 2005) [Davidow B., 2005a]

Pour les chats, on peut se servir dune poche de 150mL pour enfants, de la mme manire que pour les
chiens. Il sagit alors dun systme ferm. En raison du bas dbit dans lespce fline et de la grosseur
de laiguille reli aux poches standard (16G), certains prfrent avoir recours un cathter de diamtre
19/21 ou une aiguille de diamtre 20 relis un robinet trois voies lui-mme reli une seringue
strile de 60mL contenant la quantit voulue danticoagulant, savoir 7 mL danticoagulant pour
53mL de sang. Parfois, le contenu de la seringue est transfr dans une poche via le robinet trois voies.
Au pralable, on aura inject strilement lanticoagulant (ACD ou CPDA-1) dans la poche avec un
ratio de 1mL dACD pour 6 9 mL de sang total. Il sagit alors dun systme ouvert. Il faut se
rappeler que le sang collect ne pourra en aucun cas tre stock tel quel dans une seringue ou dans de
lhparine, seulement dans une poche contenant un anticoagulant type CPDA-1. (Griot-Wenk M.E.,
Giger U., 1995 ; Feldman B.F, Kristensen A.T., 1995 ; Lucas R.L. et al., 2004)

E. Ralisation de la collecte

La collecte dure entre 20 et 30 minutes. ( Bcheler J., Cotter S.M., 1993)

1) Examen du donneur avant collecte

Avant toute collecte, on vrifie lanamnse du donneur (date du dernier don, pathologie
intercurrente) puis on ralise un examen clinique (temprature rectale, frquence cardiaque,
frquence respiratoire), on pse lanimal et on mesure lhmatocrite et/ou la concentration plasmatique
en hmoglobine et la concentration en protines totales. Lhmatocrite doit tre suprieur ou gal
34
35% pour les chats, 40% pour les chiens, la concentration en hmoglobine doit tre suprieure
11g/dL pour les chats, 13g/dL pour les chiens. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Lucas R.L. et al.,
2004)

2) Contention

Pour les chiens

Dans la majorit des cas, une contention physique suffit. Si le chien est agit, on peut ventuellement
le prmdiquer avec de lacpromazine 0,05 mg/kg en IM ou IV ou avec de la morphine ou du
butorphanol 0,1mg/kg en IV lente ou SC 10 15 minutes avant la collecte. (Bartolo A., 2005)
Attention toutefois lacpromazine qui inhibe lagrgation plaquettaire sans que cela ait de
rpercussion clinique sur lhmostase chez un animal avec des capacits de coagulation normales.
Cette inhibition de lagrgation est peut-tre contrebalance par lhypotension induite conjointement
par lacpromazine. (Barr S.C. et al., 1992 ; Corlouer J-P., 2001)

Pour les chats

Si le chat est suffisamment coopratif, la contention dans une serviette suffira limmobiliser.
La plupart du temps, on utilisera une tranquillisation voire une sdation. Pour les chats plus rebelles,
on peut utiliser un sac chat pour linduction. De nombreux protocoles anesthsiques existent : un
mlange de ktamine (1-2mg/kg), de diazpam (0,1mg/kg) et datropine (0,01mg/kg) par voie intra-
veineuse ou encore les associations ktamine-midazolam, ktamine-diazpam ou tiltamine-
zolazpam. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Schneider A., 1995 ; Lanevschi A., Wardrop K.J.,
2001 ; Lucas R.L. et al., 2004)

Certains praticiens prfrent ne pas utiliser la ktamine en raison du risque anesthsique encouru par
les chats souffrant dune cardiomgalie hypertrophique (CMH) encore non diagnostique. De plus, les
chats mettent du temps rcuprer aprs une anesthsie la ktamine, ce qui peut tre mal compris
par les propritaires des donneurs. Enfin, lutilisation rpte de la ktamine pourrait augmenter le
risque long terme de dvelopper une insuffisance rnale, peut-tre cause des hypotensions induites.
[Hale A.S., 2007c] Cest pourquoi ils utilisent plutt un mlange de 0,05-0,1 mg doxymorphine et de
0,2 0,5 mg/kg dacpromazine. On peut rverser les effets de la morphine avec la naloxone. Dautres
utilisent lassociation butorphanol (0,4mg/kg) acpromazine. (Feldman B.F, Kristensen A.T., 1995)
[Kaufman P., 2004 ; Rudloff E., 2004]

On vitera autant que possible lacpromazine chez les chats car cette molcule provoque une
hypotension et interfre avec le fonctionnement plaquettaire. La mdtomidine tant hypotensive et
bradycardisante est galement contre-indique. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Schneider A.,
1995 ; Lucas R.L. et al., 2004) [Lee J.A., 2007] Le propofol est proscrire chez le chat lorsquon
lutilise de manire rpte car il peut induire la formation de corps de Heinz. (Andress J.L. et al.,
2008)

35
Dautres prfrent la voie injectable une anesthsie gazeuse (isoflurane ou svoflurane) dans une
bote ou avec un masque relis un systme non rinspirant. [Kaufman P., 2004 ; Couto G., 2007 ;
Dalrymple L., 2007 ; Hale A.S., 2007c]

Tableau 5 : Avantages et inconvnients des diffrents protocoles anesthsiques

Protocoles Avantages Inconvnients

- ktamine (1-3mg/kg)-
diazpam (0,1-0,3mg/kg)-
latropine (0,01mg/kg)
- ktamine (1-2mg/kg)-
midazolam (0,1mg/kg)-
atropine (0,05 mg/kg)
- tiltamine-zolazpam
- oxymorphine (0,05-0,1 mg) et
acpromazine (0,2 0,5 mg/kg)
isoflurane/svoflurane
- Effet inotrope + de la ktamine
- Bonne tolrance
Risque pour les chats souffrant de
respiratoire
CMH non diagnostique
- Effet hypotenseur de lacpromazine
chez le chat
- Inhibition de lagrgation
- Rversibilit avec la
plaquettaire due lacpromazine
naloxone
- Dpression respiratoire, bradycardie
vagale et vomissements avec la
morphine (Thompson PI et al., 1995)
- Idal pour les chats
difficiles : induction
dans une bote
- Dlai daction trs court
pour le svoflurane
- Rveil rapide

Certains mettent en place une fluidothrapie par voie intra-veineuse ou sous-cutane pendant et aprs
la collecte pour pallier dventuelles hypotensions. [Mackin A., 2004 ; Dalrymple L., 2007 ;
Rozanski E.A., 2007]

La meilleure conduite tenir est de slectionner un protocole anesthsique sr pour le donneur et que
lon a lhabitude dutiliser. Les chats qui ncessitent un protocole anesthsique particulier en raison de
leur problme de sant ne doivent pas tre inclus dans un programme de don du sang. (Schneider A.,
1995 ; Lucas R.L. et al., 2004)

3) Prparation du site de collecte

Classiquement, on utilise les veines jugulaires comme site de prlvement. Lanimal est plac en
dcubitus latral. On peut surlever la tte du donneur sur un petit oreiller pour faire saillir la veine
jugulaire. Certains chiens tolrent mal le dcubitus latral ; dans ce cas l, on peut essayer de placer le
donneur en dcubitus sternal ou assis. La rgion jugulaire doit tre tondue soigneusement. Une crme
anesthsique locale type Emla ou Tronothane est applique au niveau de la zone 20 minutes avant
le prlvement. Le site de collecte est prpar chirurgicalement avec un savon puis une solution base
de polyvidone iode ou de la chlorhexidine pour viter la contamination du sang et prvenir le risque
de phlbite pour le donneur. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Feldman B.F., Kristensen A.T.,

36
1995 ; Schneider A., 1995 ; Lucas R.L. et al., 2004 ; Thbault A., 2005) Un ou plusieurs aides
maintiennent le donneur en dcubitus latral, un aide est assign la compression de la jugulaire le
plus loin possible de la zone de ponction afin de ne pas gner loprateur qui prlve ou loprateur
ralise lui-mme la compression. Un champ strile transparent est pos sur lanimal par loprateur qui
sest pralablement prpar strilement et porte des gants striles. Il est transperc par loprateur au
moment de la ponction. On place un clamp entour dune compresse sur la tubulure reliant laiguille
la poche de collecte pour ne pas labmer. (Lucas R.L. et al., 2004 ; Bartolo A., 2005)

Figure 6 : Asepsie du site de collecte Figure 7 : Compression de la veine jugulaire

Figure 8 : Clamp plac sur la tubulure

4) Collecte sensus stricto

Loprateur ponctionne la veine jugulaire en direction caudo-crniale et la cathtrise en rentrant

laiguille jusqu la garde. Le clamp plac pralablement sur la tubulure ct de laiguille est retir.
Le sang doit arriver dans la tubulure. La poche de collecte doit tre place le plus prs possible du sol
car elle se remplit par gravit et grce la pression artrielle. Lorsquon utilise un systme ouvert
(dans lespce fline), cest le vide dans la seringue qui permet laspiration du sang. Le sang doit tre

37
homognis avec lanticoagulant dans la poche, soit par un oprateur qui remue doucement la poche
de collecte, soit par un mlangeur afin dviter la formation de caillots.
Une banque de sang amricaine The Animal Blood Bank (Dixon, CA) a mis au point un dispositif
pour faciliter et acclrer lafflux de sang vers la poche. La poche de collecte est suspendue dans une
chambre vide : il sagit dun cylindre en plastique reli par une tubulure une pompe vide exerant
une pression de 120 180 mm Hg. La chambre vide est pose sur une balance puis tare et permet
ainsi dvaluer le volume de sang collect.

La poche peut contenir 450 mL de sang total mais on accepte une tolrance de 10% soit un volume
compris entre 405 et 495 mL. La densit du sang total est 1,053 donc lunit doit peser entre 426 et
521g. Il faut un flux constant pour prvenir lactivation des plaquettes et des facteurs de coagulation.
Quand le volume requis de sang est collect, on replace le clamp sur la tubulure prs de laiguille de
manire viter lentre dair dans la poche de collecte. Ds que laiguille est retire de la veine, une
compresse est pose sur le site de prlvement et une compression est ralise sur le site de ponction.
(Schneider A., 1995) On place une bande Vetrap pendant 30 minutes autour du cou de lanimal pour
viter la formation dun hmatome. (Feldman B.F, Sink C.A., 2003 ; Lucas R.L. et al., 2004)

Figure 9 : Ponction de la veine jugulaire Figure 10 : Arrive du sang dans la tubulure

Figure 11 : Remplissage du systme de collecte par Figure 12 : Remplissage par gravit

aspiration

38
 Figure 13 : Homognisation manuelle Figure 14 : Mlangeur

Figure 15 : Clampage de la poche de collecte

5) Fermeture du systme de collecte

On presse la tubulure avec un stripper , cest--dire une pince qui crase la tubulure pour en chasser
le contenu. On homognise le sang provenant de la tubulure avec le sang de la poche.

Figure 16 : Stripper

39
On scelle lunit de sang laide dun clip sceller en aluminium mis en place sur la tubulure le plus
prs possible de la poche laide dune pince sceller. Il faut garder une portion de tubulure remplie
de sang afin de raliser le crossmatch sur cet chantillon. On peut diviser cette portion en plusieurs
segments en plaant plusieurs clips intervalles rguliers. On peut aussi choisir de laisser la tubulure
pleine de sang, de sceller la poche le plus prs possible de la poche puis de couper la tubulure ct
du clip et de rcuprer le sang de la tubulure dans un tube sec et un tube EDTA pour effectuer les tests.
Il existe aussi un procd thermique pour sceller les poches. Par contre, le fait de nouer la tubulure sur
elle-mme ne constitue pas un systme de fermeture suffisant pour viter les fuites ou la
contamination de produits destins tre stocks.
Enfin, on identifie la poche avec la date de la collecte, le nom du donneur, le groupe du donneur, la
quantit de sang contenue dans la poche et le type danticoagulant utilis. (Chabanne L. et al., 1994 ;
Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Schneider A., 1995) [Davidow B., 2005a]

F. Supplmentation des donneurs

Les chats qui donnent leur sang trs rgulirement, toutes les 3 semaines par exemple, doivent avoir
une alimentation quilibre et riche en protines et tre supplments en fer avec une prparation par
voie orale base de sulfate ferreux deux fois par semaine (Tardyferon, 10mg/kg) ou avec un
complment minralo-vitaminique contenant du fer (Vi-Sorbin 3-5mL/j pour un chien, 1mL par
semaine pour un chat) car le fer est un facteur limitant pour la production des globules rouges. (Griot-
Wenk M.E., Giger U., 1995) [Abrams-Ogg A.C.G., 2004 ; Dodds J., 2005b] Le sang contient 0,5mg
de fer par mL : il convient donc de supplmenter par voie orale au moins la quantit quivalente au
don du sang. (Schneider A., 1995) Toutefois, il nexiste aucune tude ce jour dmontrant que des
collectes de sang rptes peuvent induire une carence en fer chez les donneurs comme cest le cas
dans lespce humaine.

G. Effets secondaires de la collecte sur les donneurs

Les effets secondaires la collecte sont trs rares aussi bien chez les chats que chez les chiens
donneurs. Une tude mene sur des chiens de course Greyhound la retraite avait pour objet de
comparer la pression artrielle systolique mesure par Doppler avant et aprs collecte dune unit de
sang (450mL). Aucun signe dhypotension (abattement, faiblesse, collapsus, pleur des muqueuses)
na t signal dans les deux heures suivant la collecte. Une diminution de la pression artrielle
systolique est note court terme immdiatement aprs la collecte mais un retour au niveau de base est
observ 1 heure 1 heure et demie aprs le don. (Couto C.G., Iazbik M.C., 2005) Une autre tude
mene sur 26 chats donneurs a montr que la collecte dune unit de sang de 50mL na pas de
rpercussions cliniques nfastes (signes cliniques dhypotension) sur un donneur de plus de 5 kg bien
quinduisant une diminution significative de la pression artrielle, de la frquence cardiaque et de
lhmatocrite des chats donneurs. (Iazbik M.C. et al., 2007)

40
On peut ventuellement observer chez le chat des effets secondaires la sdation ncessaire pendant la
collecte de sang tels quune lipidose hpatique, une insuffisance hpatique, un choc hypovolmique ou
une hypotension.
Cest pourquoi il est important de bien surveiller les donneurs dans les quatre heures suivant le don et
de rechercher les signes dhypovolmie comme la tachycardie, les extrmits froides, la faiblesse,
labattement, un collapsus. Certains praticiens prfrent perfuser prventivement les chats donneurs
avec des soluts cristallodes raison de 2 3 fois le volume de sang prlev. (Bcheler J., Cotter
S.M., 1993 ; Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995)

En conclusion, le sang collect peut soit tre transfus immdiatement, soit tre stock au rfrigrateur
pendant 3 semaines, soit tre centrifug pour sparer les globules rouges du plasma immdiatement
aprs le prlvement. (Smith CA., 1991)

41
42
II. Traitement et conservation du prlvement sanguin

Autrefois, en mdecine vtrinaire on utilisait principalement le sang total pour les transfusions ; les
progrs en mdecine vtrinaire ont conduit une dmocratisation des produits sanguins drivs.
La sparation des diffrents produits sanguins est difficile dans lespce fline en raison du volume
rduit rcolt et du fait que la plupart des poches de sang pdiatriques utilises pour la collecte ne sont
pas prvues pour rsister la centrifugation. (Smith CA., 1991 ; Schneider A., 1995)

Lutilisation de composs sanguins la place de sang total permet dallonger la dure de conservation.
Ils prsentent aussi lavantage de fournir au receveur un produit la fois sr et adapt en fonction de
lindication de la transfusion. (Smith CA., 1991) Dune part, les produits sanguins permettent un
usage conomique du sang total du donneur. (Lucas R.L. et al., 2004) Dautre part, ils permettent de
limiter lexposition des lments sanguins non ncessaires et donc de rduire le risque de raction
transfusionnelle. (Chiaramonte D., 2004)

A. Les diffrents produits sanguins

1) Le sang frais total

Le sang frais total contient les globules rouges, les leucocytes, les plaquettes, les facteurs de
coagulations et les protines plasmatiques, y compris lalbumine et lantithrombine III (ATIII). Les
hmaties apportent loxygne aux tissus alors que le plasma est le support de lexpansion volumique
via la pression oncotique et contient les facteurs de coagulation.
Le sang frais total doit de prfrence tre transfus dans les 4 6 heures qui suivent la collecte car les
plaquettes et certains facteurs de coagulation (I, V, VIII, X, XI) sont rapidement inactivs pendant le
stockage. (Corlouer J-P., 2001 ; Chiaramonte D., 2004 ; Pouderoux L., 2007)

2) Le sang total conserv

Le sang total stock apporte des hmaties et des protines plasmatiques savoir les facteurs de
coagulation stables II, VII, IX et X, le fibrinogne, lalbumine et lATIII. Au cours du stockage, la
concentration en facteurs V et VIII diminue et les plaquettes sont dtruites par la rfrigration
(Feldman B.F, Sink C.A., 2003 ; Chiaramonte D., 2004)

3) Le concentr globulaire

Le concentr globulaire est une suspension dhmaties obtenue par centrifugation du sang frais total.
Le fait de sparer le concentr globulaire du plasma provoque une diminution de la pression oncotique
collodale et le retrait des facteurs de coagulations. Lhmatocrite du concentr globulaire est autour de
80%. Le concentr globulaire permet daugmenter la capacit de transport en oxygne en augmentant
le nombre dhmaties circulantes. (Chiaramonte D., 2004 ; Pouderoux L., 2007)

43
 4) Le plasma frais et le plasma frais congel

Le plasma frais doit tre spar dans les 6 heures suivant la collecte puis transfus ou immdiatement
congel. Le plasma frais congel contient la plupart des facteurs de coagulation (les facteurs I
(fibrinogne), II, V, VII, VIII, IX, X et le facteur von Willebrand), lanti-thrombine III, la protine C-
ractive et la fibronectine (une glycoprotine qui facilite ladhsion cellulaire). (Haldane S. et al.,
2004)
Le plasma ayant t spar plus de 6 heures aprs la collecte ou le plasma congel depuis plus dun an
nest plus considr comme frais. La premption du plasma frais congel survient 1 an aprs la
collecte. (Smith CA., 1991 ; Feldman B.F, Sink C.A., 2003 ; Chiaramonte D., 2004)

5) Le plasma congel

Le plasma congel est utilisable pendant 5 ans. Une unit de plasma frais dcongele puis recongele
devient du plasma congel. Le plasma contient encore de bonnes concentrations en facteurs de
coagulation stables, savoir les facteurs vitamine K-dpendant (II, VII, IX et X) mais pas les facteurs
V, VIII ni le facteur von Willebrand et le fibrinogne. Il contient aussi lalbumine et les
immunoglobulines (Smith CA., 1991 ; Feldman B.F, Kristensen A.T., 1995 ; Schneider A., 1995)

Remarque : la place des diffrents facteurs de coagulation dans la cascade dactivation est rappele
dans la figure 17.

6) Le plasma riche en plaquettes

Il est issu de la centrifugation du sang total faible vitesse de telle sorte que les plaquettes restent dans
le plasma. Il peut tre spar en concentr plaquettaire et plasma pauvre en plaquettes condition que
cela soit ralis rapidement (dans les 6 heures suivant la collecte) car le plasma riche en plaquettes est
conserv temprature ambiante alors que le plasma pauvre en plaquettes doit tre rfrigr pour
viter la dtrioration de ses constituants. (Schneider A., 1995)

7) Le concentr plaquettaire

Le concentr plaquettaire est issu de la centrifugation du plasma riche en plaquettes et de llimination

du surnageant qui constitue le plasma pauvre en plaquettes. (Schneider A., 1995 ; Metcalfe P et al.,
1997) Pour tre efficace, 1 unit de concentr plaquettaire doit contenir au moins 71010 plaquettes.
(Abrams-Ogg ACG et al., 1993)

44
Voie endogne Voie exogne

Facteur XII Facteur XIIa Facteur III tissulaire

Facteur VII* Facteur VIIa*

Facteur XI Facteur XIa
Ca2+
Facteur IX Facteur IXa

Temps de Temps de
Cphaline Active Quick
(TCA) (TQ)
Ca2+
Facteur VIIIa

Facteur X* Facteur Xa*

Facteur V Ca2+
Facteur III plaquettaire
Facteur II*Facteur IIa*
(prothrombine) (thrombine)

Ca2+ Temps de
Fibrinogne Fibrine soluble Thrombine
* Facteurs Facteur IIa* (TT)
vitamine K1-dpendant
Facteur XIII Facteur XIIIa Ca 2+

Fibrine insoluble
Plasmine

PDF Plasminogne PDF

Voie commune

Figure 17 : Cascade de lhmostase secondaire et tests dexploration de la coagulation

(Daprs Hugnet C., 2005)

8) Le cryoprcipit

Le cryoprcipit est une source concentre en facteur VIII, XI, XII, facteur von Willebrand (vWF),
fibrinogne et fibronectine. (Chiaramonte D., 2004) Selon une tude mene par Ching Y.N.L.H. et al.
en 1994, la concentration en vWF est 20 fois suprieure dans le cryoprcipit que dans le plasma frais
congel. Le cryoprcipit contient environ 50% du facteur VIII et du vWF de la poche de plasma.
(Schneider A., 1995) [Dodds J., 2005d]

Le cryoprcipit peut tre fabriqu partir du plasma frais congel jusqu 1 an aprs la collecte.
Certains praticiens produisent le cryoprcipit uniquement partir du plasma de donneur ayant des

45
titres levs en vWF (activit du vWF suprieure 100% par exemple). [Crawford C., 2005c ; Mackin
A., 2005]

Une pr-mdication du donneur avec de la desmopressine, une vasopressine de synthse, permettrait

daugmenter la concentration plasmatique en vWF du donneur de plus de 30U/dL en stimulant la
libration du vWF stock dans plaquettes et les cellules endothliales. (Ching Y.N.L.H. et al., 1994 ;
Barr F. et al., 2000 ; Chiaramonte D., 2004) [Davidow B., 2005a]

9) Le cryopoor ou plasma cryo-surnageant

Il sagit du plasma rsiduel aprs la fabrication du cryoprcipit. Il contient les facteurs de coagulation
dpendant de la vitamine K, lalbumine, les immunoglobulines et lantithrombine III ainsi que de trs
faibles quantits de fibrinogne, de fibrinonectine, de facteurs XI, XIII, VIII et vWF. (Feldman B.F.,
Sink C.A., 2003) [Davidow B., 2005a]

Sang frais total

Concentr globulaire Plasma

Plasma frais congel Plasma congel Plasma riche en

plaquettes

Cryoprcipit Concentr
plaquettaire

Plasma Plasma pauvre en

cryopoor plaquettes

Figure 18 : Les diffrents produits sanguins

(Daprs Schneider A., 1995)

B. Elaboration des produits sanguins

1) Matriel

Pour fabriquer des produits sanguins, il faut une centrifugeuse rfrigre car une centrifugeuse
normale cre un chauffement tel quil endommage les hmaties. Il existe deux modles : les
centrifugeuses sur pied et les centrifugeuses de paillasse. Les centrifugeuses de paillasse sont moins
chres et transportables mais aussi plus difficiles quilibrer et posent souvent plus de problmes. Les

46
centrifugeuses sur pied ont une plus grande capacit et permettent de prparer plus de poches la fois.
Ces appareils sont trs coteux. Il y a parfois possibilit de rcuprer des centrifugeuses doccasion
auprs des hpitaux humains. Si la structure est trop petite pour soffrir sa propre centrifugeuse, elle
peut aussi se regrouper avec dautres cliniques pour mettre en place une banque de sang et partager les
cots de fonctionnement. (Smith CA., 1991 ; Feldman B.F, Kristensen A.T., 1995) [Kaufman P.,
2006a ; Kaufman P., 2006b]

Figure 19 : Centrifugeuse sur pied utilise au SIAMU

pour la sparation du plasma et du concentr globulaire

2) Prparation du plasma et du concentr globulaire

On distingue deux tapes : la centrifugation puis la sparation du plasma et du concentr globulaire

Centrifugation

Avant de lancer la centrifugation, il faut laisser le temps la centrifugeuse de se refroidir 10C. Il

faut retirer les pots de la centrifugeuse et y placer dlicatement les poches de collecte avec leurs
poches satellites en sassurant quelles soient dans le bon sens (la tubulure darrive du sang lors de la
collecte doit tre place vers le haut) et quil ny ait pas de nud ou de pli au niveau de la tubulure. Il
faut ensuite peser chaque pot et faire en sorte que chacun deux pse le mme poids deux deux pour
quilibrer la centrifugeuse. Pour ajuster le poids des pots on peut se servir dlastiques, du papier bulle
ou de tubes par exemple. Puis, on place les pots quilibrs lun en face de lautre dans la centrifugeuse.
Il faut rgler la vitesse 4000 tours par minute et la dure 15 minutes ou 5000 tours/min pendant
5 min et vrifier que la temprature est de 10C. Quand la centrifugeuse est compltement arrte, on
peut louvrir et retirer les poches des pots en veillant toujours garder la poche de collecte vers le
haut. (Feldman B.F, Sink C.A., 2003 ; Lucas R.L. et al., 2004)

47
 Figure 20 : Disposition des poches Figure 21 : Equilibrage des pots
dans les pots de la centrifugeuse dans la centrifugeuse

Sparation

A la sortie de la centrifugeuse, on visualise aisment la sparation entre le plasma et la couche

rythrocytaire situe au-dessous du plasma. Si ce nest pas le cas, il faut relancer la centrifugeuse. La
poche de collecte est place dans un appareil appel extracteur de plasma. Il faut ensuite casser le
coupe-circuit pour permettre au plasma de passer dans la tubulure reliant la poche principale la
1re poche satellite. Il faut relcher doucement le manche du sparateur qui presse la poche de manire
chasser le plasma dans la poche satellite. Quand la ligne suprieure de la couche rythrocytaire est
0,5 cm de lorifice de sortie de la poche, on clampe la tubulure 15 cm de la poche de collecte. On
vide la tubulure entre la poche principale et la poche satellite laide dun stripper (pince qui crase la
tubulure afin de la vider de son contenu), ce qui permet de sassurer que le sang de la tubulure na pas
coagul. On place une agrafe sur lextrmit de la tubulure replie en deux pour sceller la poche
laide dune pince sceller. On peut ensuite couper la tubulure pour isoler la poche plasmatique.
Ensuite, on casse le coupe-circuit la base de la 2e poche satellite contenant ladditif. On suspend la
poche de collecte un crochet afin que les globules rouges tombent par gravit dans la deuxime
poche satellite. On procde de la mme manire pour la deuxime tubulure : on vide la tubulure avec
le stripper puis on la scelle laide de la pince sceller et enfin on coupe la tubulure pour isoler la
poche du concentr globulaire.
On pse ensuite la poche plasmatique et la poche du concentr globulaire. La densit du plasma est
1,023. Donc 1 g de plasma quivaut environ 1 mL de plasma. On inscrit le volume de plasma sur
ltiquette de la poche ainsi que le type de produit, le groupe du donneur, son nom, la date de
fabrication et la date dexpiration du produit. (Schneider A., 1995 ; Feldman B.F, Sink C.A., 2003 ;
Lucas R.L. et al., 2004)

48
 Plasma

Concentr
globulaire

Figure 22 : Poche de sang aprs Figure 23 : Extraction du plasma

centrifugation

Figure 25 : Clampage de la tubulure

Figure 24 : Passage du plasma dans la poche
satellite

Figure 26 : Vidange de la tubulure Figure 27 : Fermeture de la poche

l'aide du stripper laide dun clip mtallique
49
 Figure 28 : Clippeur

Culot globulaire Plasma frais

(poche satellite) (poche satellite)

Poche de collecte
(poche primaire)

Figure 29 : Rsultat de la sparation du sang total en plasma et culot globulaire

Date du prlvement
Date de premption

Groupe sanguin Volume prlev

Type de produit sanguin

Nom et coordonnes
du donneur

Figure 30 : Identification des poches

50
 3) Prparation du plasma riche en plaquettes

Lunit de sang collect doit tre manipule temprature ambiante. La centrifugation devra tre
ralise une plus faible vitesse (2000 tours/min) et moins longtemps (3 min) que pour la procdure
dcrite prcdemment. Lorsque le sang est riche en plaquettes, on distingue la couche des plaquettes
jaune clair la fin de la centrifugation. (Lucas R.L. et al., 2004 ; Hohenhaus A.E., 2003) Le plasma
riche en plaquettes est chass dans une poche satellite qui sera scelle. (Corlouer J-P., 2001 ; Haldane
S. et al., 2004 ; Slichter S.J. et al., 2005)

4) Prparation du concentr plaquettaire

Le concentr plaquettaire est fabriqu partir du plasma riche en plaquettes. Le sang total est collect
dans un systme de trois poches contenant un anticoagulant CPD-A1 puis les poches sont centrifuges
pendant 2 5 minutes 1000g temprature ambiante (20-24C) et le surnageant ou plasma riche en
plaquettes est transfr dans une des poches satellites. Pour limiter la contamination leucocytaire, il
faut arrter le transfert quand linterface plasma-cellule arrive 1 cm du haut de la poche. Le plasma
riche en plaquettes est ensuite centrifug pendant 10 minutes 2000g. Le surnageant ou plasma pauvre
en plaquettes est transfr dans la 3e poche laissant les plaquettes dans 50mL de plasma. Aprs la
sparation des poches, les plaquettes sont laisses au repos pendant 1h pour limiter lagrgation
plaquettaire puis remises en suspension doucement manuellement avant dtre places sur un agitateur
raison de 60 agitations par minute. Ce concentr plaquettaire contient alors 1 137 000
plaquettes/mm3 en moyenne. On peut esprer un rendement moyen pour la fabrication concentr
plaquettaire partir de sang total de 74%. (Abrams-Ogg A.C.G. et al., 1993 ; Metcalfe P. et al., 1997 ;
Feldman B.F, Sink C.A., 2003)

5) Prparation du cryoprcipit

Les poches de plasma frais congel sont places dans un bain-marie 4C ou dans un rfrigrateur et
on laisse dcongeler jusqu obtention dun plasma de consistance visqueuse avec quelques gros
cristaux de glace ce qui prend environ 3-4 heures. La dconglation est acclre manuellement en
cassant les cristaux de glace dans les poches. Les poches de plasma sont centrifuges 3500g 4C
pendant 10 minutes ou 5000g pendant 5 minutes. Le plasma surnageant appel cryo-
surnageant est transfr dans une poche satellite en laissant environ 50 mL de plasma dans le
cryoprcipit puis limin. Le cryoprcipit est immdiatement congel -70C. (Stokol T., Parry
B.W., 1995 ; Schneider A., 1995 ; Haldane S. et al., 2004)

6) Irradiation des produits sanguins

Des expriences en mdecine humaine ont montr que chez certains patients immunodprims, la
transfusion de cellules immunocomptentes du non soi (les lymphocytes T) pouvaient conduire une
raction de rejet vis vie de lhte (GVHD ou Graft Versus Host Disease), les lymphocytes T se
multipliant et ragissant contre les tissus du receveur. La radiosensibilit des lymphocytes T tant
accrue par rapport aux autres cellules sanguines, une irradiation aux rayons gamma des produits
sanguins semble prvenir une telle complication. Ce type de raction nest pas document en mdecine
vtrinaire lheure actuelle. (Bloodbook.com, 2009)

51
 C. Conservation du sang total et des drivs sanguins

Les moyens de conservation dpendent de la nature du driv sanguin. Ainsi, le plasma frais congel,
le plasma congel, le cryoprcipit et le plasma cryopoor sont conservs au conglateur ; le sang total
et le concentr globulaire sont conservs au rfrigrateur ; le concentr plaquettaire et le plasma riche
en plaquettes sont conservs temprature ambiante. (Schneider A., 1995)
De plus, on dispose dune grande varit de conservateurs et anticoagulants dont il faut connatre les
proprits pour choisir le plus adapt au produit sanguin que lon souhaite stocker.

1) Matriel ncessaire au stockage des produits sanguins

Les produits sanguins sont conservs dans des rfrigrateurs et des conglateurs dont la temprature
doit tre troitement contrle. Un conglateur classique peut faire laffaire pour stocker le plasma
congel 20C de mme quun rfrigrateur classique pour le sang total ou les concentrs
globulaires entre 4 et 6C condition quils ne soient pas ouverts et ferms trop souvent. Il faut donc
quils soient dvolus exclusivement au stockage de la banque de sang. Le conglateur doit tre
dgivrage manuel pour viter les gros carts de temprature dus un dgivrage automatique. (Smith
CA., 1991 ; Feldman B.F, Kristensen A.T., 1995 ; Lucas R.L. et al., 2004)

2) Anticoagulants-conservateurs

Un anticoagulant est une substance qui empche la coagulation dune unit de sang et donc la
maintient ltat liquide, transfusable.
Un conservateur maintient lintgrit du produit sanguin transfuser. (Feldman B.F, Sink C.A., 2003)

La plupart des anticoagulants et conservateurs sont destins lorigine lespce humaine. Ils peuvent
tout fait tre utiliss pour la mdecine transfusionnelle vtrinaire mais la dure de conservation des
globules rouges nest pas transposable entre espces et il faut donc des tudes dans les espces
animales vises pour pouvoir garantir une Viabilit Post-Transfusionnelle ou VPT correcte. (Wardrop
K.J., 1995)

a) Lhparine

Lhparine se combine avec lanti-thrombine III pour inactiver le facteur Xa et empche la conversion
de la prothrombine en thrombine. Comme elle na aucune proprit conservatrice, elle ne peut donc
sutiliser que pour la collecte de sang total qui va tre administr immdiatement. De plus, elle est
contre-indique si la transfusion vise traiter un trouble de la coagulation. La dose est 5-10 U/ml de
sang. (Wardrop K.J., 1995 ; Corlouer J-P., 2001 ; Feldman B.F., Sink C.A., 2003) [Davidow B.,
2005a]

b) Les solutions citrates

On peut utiliser comme anticoagulant du citrate strile (3,8%) avec ou sans conservateurs comme le
phosphate, ladnine et le dextrose pour le stockage. Le citrate est un anticoagulant se liant au calcium
qui nest alors plus disponible pour activer la cascade de la coagulation. (Wardrop K.J.,

52
 1995) [Davidow B., 2005a] Le dextrose constitue le substrat des cellules pour la glycolyse. Le
phosphate sert de tampon pour les sous-produits du mtabolisme des hmaties comme le lactate.
(Wardrop K.J., 1995 ; Lucas R.L. et al., 2004)

ACD (Acide citrate dextrose)

Cette solution contient de lacide citrique, du citrate de sodium et du dextrose. Elle nest plus
recommande pour le stockage des produits sanguins du fait de la diminution de la teneur en 2,3-DPG
(2,3-diphosphoglycrate), la concentration en 2,3-DPG tant corrle la libration de loxygne par
lhmoglobine dans lespce canine. Elle a t remplace par le CPD ou le CPDA sauf pour les
collectes de faible volume o elle est encore utilise. (Wardrop K.J., 1995) [Davidow B., 2005a]

CPD (Citrate phosphate dextrose)

Laddition du phosphate permet de maintenir de plus hautes concentrations en 2,3-DPG et un pH plus

lev. La quantit de glucose dans ce produit permet de subvenir aux besoins mtaboliques des
hmaties humaines pendant 28 jours. [Davidow B., 2005a]
Les avantages de cet anticoagulant sont aussi le maintien du potassium et de lhmoglobine
intracellulaires. (Corlouer J-P., 2001)

CDPA (Citrate phosphate dextrose adnine)

Ladnine, au dbut du stockage, permet de maintenir la formation dATP et donc daugmenter la

dure de vie des hmaties en comparaison avec le CPD sans adnine. La quantit de glucose
disponible dans ce produit est suprieure celle contenue dans la solution CPD. Cest la meilleure
solution de conservation pour les produits sanguins destins au stockage. (Wardrop K.J. et al., 1994 ;
Wardrop K.J., 1995) [Davidow B., 2005a]

La dure de conservation des poches dpend du type de conservateur utilis : les poches CPDA-1
permettent une conservation du sang pendant 5 semaines des tempratures comprises entre 1 et 6C
cest pourquoi elles sont prfres aux poches ACD. (Smith CA., 1991 ; Griot-Wenk M.E., Giger U.,
1995)

Tableau 6 : Dure de conservation du sang et proportion d'anticoagulant ajouter en fonction de l'anticoagulant

(Daprs Chabanne et al., 1994 ; Haldane S. et al., 2004 ; Thbault A., 2005)

Anticoagulant Dure de conservation du sang 4C Proportion

24h
Hparine 500UI/50mL de sang
Pas de conservation des facteurs de coagulation
15j 1mL de citrate 10%/15mL de
Citrate de sodium
Pas de conservation des facteurs de coagulation sang
ACD 21j 67,5mL/450mL de sang
CPD 28j 63mL/450mL de sang
CPDA 35j 14mL/100mL de sang

53
 3) Solutions additives

Elles contiennent du mannitol, de ladnine, du phosphate, du bicarbonate et du glucose destins

accrotre la dure de conservation des hmaties. On peut citer lAdsol, lOptisol, le Nutricel.
(Wardrop K.J. et al., 1994)
Lintrt est daugmenter la dure de stockage, damliorer le rendement en plasma par unit de sang
collect et de confrer au produit sanguin une fluidit comparable celle du sang total ce qui facilite
son administration. (Wardrop K.J., 1995)
Ladditif doit tre ajout dans les 72 heures suivant la collecte de sang. (Feldman B.F, Sink C.A.,
2003)

4) Critres pour dterminer la viabilit des produits stocks

a) Sang total et concentr globulaire

Dure de vie des hmaties transfuses

Selon les standards de la FDA (Food and Drug Administration) pour le sang total ou les concentrs
globulaires stocks en humaine, un conservateur est satisfaisant sil permet que plus de 75% des
cellules transfuses soient encore viables dans les 24 heures post-transfusion. On parle alors de
Viabilit Post-Transfusionnelle (VPT). (Schneider A., 1995) Le fonctionnement et la viabilit des
hmaties sont lis laptitude produire de lATP par glycolyse anarobie.

Moyens dvaluer la dure de vie des hmaties

Pour estimer la VPT, on peut suivre des indicateurs in vitro comme les concentrations intracellulaires
en ATP, en 2,3-DPG, le pH et le pourcentage dhmolyse. (Price G.S. et al., 1988)

Figure 31 : Modifications biochimiques et hmatologiques des hmaties au cours de leur stockage dans
une solution additive dAdsol
(Daprs Wardrop K.J. et al., 1994)
A : ATP=f(t) B : 2,3-DPG=f(t) C : pH = f(t) D : % hmolyse = f(t)

54
Toutefois, ces indicateurs in vitro ne permettent pas de prdire la VPT. Il faut pour cela faire des
mesures in vivo. (Wardrop K.J., 1995)

On peut utiliser dautre techniques plus prcises comme le radiomarquage avec du chrome 51 (51Cr) ou
du techntium 99m (99mTc) : on laisse incuber les globules rouges avec lisotope radioactif, on
transfuse le produit sanguin puis on suit lvolution de la radioactivit dans le sang. Il existe une autre
technique de marquage qui, elle, ne prsente pas de risque de radiation : la biotinylation. La biotine se
fixe aux groupes amines libres au niveau des protines de surface des cellules. On ajoute la biotine au
produit sanguin et on laisse incuber puis on transfuse le produit sanguin. On comptabilise les hmaties
marques la biotine par la cytomtrie de flux. La biotine se lie la phycorythrine qui met une
fluorescence mesure par le cytomtre de flux. (Marion R.S., Smith J.E., 1983 ; Wardrop K.J., 1995 ;
Wardrop K.J. et al., 1998)

Figure 32 : Analyse par cytomtrie de flux de la biotynilation des hmaties canines

(Daprs Marion R.S., Smith J.E., 1983)
A : Tmoin ngatif : hmaties non marques la biotine
B : Tmoin positif : hmaties marques la biotine avant la transfusion
C : Hmaties marques et non marques 15 minutes aprs la transfusion

Dure de vie des plaquettes et des leucocytes : quelques heures

Par consquent, si la transfusion de sang total vise corriger une thrombopnie, elle doit tre ralise
rapidement aprs la collecte. (Thbault A., 2005)

Modifications au cours du stockage

Le stockage provoque des altrations dites lsions de stockage sur les globules rouges. Ces
altrations peuvent tre physiques comme une dformation des cellules, la formation de vsicules dans
la membrane des globules rouges, une modification de la structure des protines membranaires.

Les modifications peuvent aussi intervenir lchelle biochimique.

La concentration en 2,3- concentration DPG dcrot au cours du stockage. Hors, le 2,3-DPG diminue
laffinit de lhmoglobine pour loxygne et facilite ainsi la libration de loxygne dans les tissus.
Par consquent, plus la concentration en 2,3-DPG est faible, moins les hmaties librent facilement
loxygne dans les tissus. Ceci nest pas valable dans lespce fline o la libration doxygne ne
dpend pas de la concentration en 2,3-DPG qui est basse de manire physiologique mais de la
concentration en chlorures. (Price G.S. et al., 1988) [Wardrop K.J., 1995 ; Cotter S., 2005]

55
La voie dEmbden-Meyerhoff ou glycolyse produit de lacide lactique qui acidifie le milieu. Cela
inhibe la glycolyse, rduit la production dATP dans les hmaties et diminue la concentration en 2,3-
DPG.
La concentration en glucose de la poche diminue car le glucose continue dtre mtabolis pendant le
stockage du produit sanguin.
Le stock dATP des rythrocytes est consomm en partie au cours de la conservation. Hors, les
globules rouges ont besoin dnergie sous forme dATP pour maintenir leur forme normale et leur
dformabilit, conserver les concentrations intracellulaires en cations et intervenir dans les
phosphorylations et autres ractions ncessaires au maintien des phospholipides de la membrane des
hmaties. La diminution de la disponibilit de lATP provoque donc une diminution de la longvit
des hmaties transfuses chez le receveur.
La plupart de ces modifications biochimiques sont rversibles aprs la transfusion. Par contre, les
altrations de la structure membranaire et de la dformabilit des hmaties sont irrversibles.
(Wardrop K.J., 1995 ; Waddell L.S. et al., 2001 ; Pouderoux L., 2007)

La concentration en ammoniac augmente au cours du stockage. Chez les chiens avec un foie sain, la
quantit dammoniac accumule en 35 jours de stockage peut tre mtabolise sans problme. Par
contre, un chien insuffisant hpatique est susceptible de mal supporter une forte concentration en
ammoniac dans le sang transfus. (Waddell L.S. et al., 2001) [Davidow B., 2005a]

Le concentr globulaire peut tre conserv pendant 20 jours dans du CPDA-1. Lorsquun conservateur
type Adsol, Nutricel, and Optisol est ajout dans la poche contenant le concentr globulaire aprs
le retrait du plasma, la dure de conservation du concentr globulaire est rallonge 35 jours avec le
Nutricel et 37 jours avec lAdsol. (Wardrop K.J. et al., 1994 ; Feldman B.F, Kristensen A.T.,
1995 ; Wardrop K.J., 1995 ; Wardrop K.J., 1997) Il faut 100mL de solution additive. Cela permet
davoir un bon dbit dadministration. Il est important de noter sur la poche quelle contient un additif
car il ne sera alors pas ncessaire de diluer le concentr globulaire avec un solut cristallode avant de
ladministrer. (Lucas R.L. et al., 2004 ; Hohenhaus A.E., 2003)

b) Plasma

Le plasma frais congel doit apporter une quantit suffisante (70%) en facteur VIII qui est le facteur le
plus labile. Selon les auteurs, il disparatrait entre 15 et 18 heures aprs la collecte. (Corlouer J-P.,
2001 ; Pouderoux L., 2007)

Au cours de la premire anne de stockage 80C, on observe une diminution significative de

lactivit des facteurs VIII, IX et X et de la concentration en vWF qui est vraissemblablement due la
dtrioration des facteurs par la conglation et la dconglation. Cette diminution est trs rduite
pendant les 3 premiers mois de stockage. Les facteurs les plus sensibles sont les facteurs VIII et IX.
Aprs un an de stockage -30C et plus de 6 mois -20C, le plasma frais congel contient des
concentrations thrapeutiques de facteur von Willebrand, facteurs II, VII, VIII, IX et X. (Wardrop
K.J., Brooks M.B., 2001 ; Chiaramonte D., 2004)

56
 Tableau 7 : Dose thrapeutique des diffrents facteurs de coagulation
Facteurs Dose thrapeutique
-5 10 U/kg pour le contrle des saignements dans le cadre de la
Facteur von Willebrand maladie de von Willebrand
-10-20 U/kg pour une hmostase efficace en per-opratoire
Facteur VIII -15 U/kg pour le contrle des saignements lors dhmophilie A
Facteur IX -10 U/kg pour le contrle des saignements lors dhmophilie B

c) Cryoprcipit

La stabilit du cryoprcipit ltat congel est dune importance capitale. Si les facteurs de
coagulation sont dgrads, consomms ou activs pendant le stockage, le cryoprcipit sera moins
efficace pour le traitement de la maladie von Willebrand ou de lhmophilie A. La dure de
conservation entre -30 et -70C est estime entre 6 mois et 1 an. (Authement et al., 1987)

Une tude sur la stabilit du facteur von Willebrand et du facteur VIII a montr que le cryoprcipit
peut tre soumis des dconglations-reconglations successives tout en maintenant une concentration
en facteur von Willebrand et une activit du facteur VIII satisfaisantes.
Ltude montre galement que si le cryoprcipit a t dcongel 4C pendant le transport, il doit
tre recongel en attendant dtre utilis puis tre dcongel rapidement et compltement avant
utilisation pour viter les phnomnes de reprcipitation qui apparaissent quand le cryoprcipit est
laiss une temprature comprise entre 1 et 6C. Les rsultats indiquent aussi que le cryoprcipit
dcongel peut tre laiss pendant 24 heures temprature ambiante sans rduction de lactivit du
facteur VIII ou de la concentration en facteur von Willebrand.
Toutefois, cette tude ne permet pas de conclure lefficacit du cryoprcipit aprs des cycles de
dconglation-reconglation, les facteurs VIII et von Willebrand ayant pu subir des modifications
structurales altrant leur fonction. En effet, lactivit du facteur VIII ne donne pas une relle indication
de la capacit de la protine raliser lhmostase. Laugmentation de lactivit du facteur VIII
pourrait tre secondaire la formation de thrombine pendant la conglation du plasma. De la mme
manire, des concentrations maintenues leves en facteur von Willebrand ne permettent pas de dire si
le cryoprcipit est toujours efficace dans le traitement ou la prvention dune hmorragie. (Stokol T.,
Parry B.W., 1995)

d) Plaquettes

Viabilit des plaquettes

Au cours du stockage, les plaquettes subissent des modifications biochimiques et structurales qui
altrent leur fonction (agrgation et adhsion plaquettaire). Ces lsions rsultent de lactivation durant
la prparation ou le stockage, de la dtrioration ou de lactivation des protases. (Metcalfe P. et al.,
1997)
Les plaquettes peuvent tre actives par des agonistes physiologiques comme lADP et la thrombine,
par les forces de frottement ou par laction de protases ou du complment. Ces stimuli induisent des
changements de conformation du complexe GPIIb-IIIa (CD41) permettant la liaison avec le

57
fibrinogne plasmatique. La stimulation avec des agonistes forts (cest--dire la thrombine) conduit
la dgranulation plaquettaire et la translocation des protines de la membrane des granules la
surface de la cellule. (Metcalfe P. et al., 1997)

La cause la plus probable de lactivation plaquettaire est leffet combin des forces de frottement et de
la libration dADP par les globules rouges et dans une moindre mesure par les plaquettes lors des
diffrentes tapes de centrifugation au cours de la prparation du concentr plaquettaire. (Metcalfe P.
et al., 1997)

Des paramtres in vitro permettent destimer la viabilit des plaquettes :

- un score morphologique aprs examen au microscope : le meilleur paramtre prdictif de la survie
post-transfusion des plaquettes stockes.
- lagrgation plaquettaire, le pH (qui doit rester infrieur 6), la ractivit des vis--vis des parois
vasculaires et la concentration en protines et marqueurs plaquettaires.
In vivo, des tudes utilisant le radiomarquage, le comptage plaquettaire, la correction du temps de
saignement ou la rduction des saignements ou du besoin de transfusion constituent des indices de la
viabilit plaquettaire [Davidow B., 2005a]
Une fois transfuses, les plaquettes survivent en moyenne entre 5 et 7 jours chez le receveur de
lespce canine. (Abrams-Ogg A.C.G., 2003)

Risque infectieux et raction transfusionnelle

On peut conserver les plaquettes entre 5 et 8 jours mais le risque infectieux est trop lev
temprature ambiante pour cette dure de stockage. En effet, les produits plaquettaires ne doivent pas
tre rfrigrs car le froid inactive les plaquettes. (Corlouer J-P., 2001) [Davidow B., 2005a]
Il y a plus de risques de raction transfusionnelle avec les plaquettes quavec les hmaties. Il
semblerait que cela soit d la production de cytokines. Ce risque serait plus rduit en utilisant un
filtre de leucorduction. Toutefois, les filtres de leucorduction nenlvent que 20 25% des
leucocytes. [Davidow B., 2005a]

5) Recommandations spcifiques pour chaque produit sanguin

a) Sang total

Il require un stockage dans un rfrigrateur entre 1 et 6C avec une bonne circulation de lair. Le
sang total peut tre conserv pendant 4 semaines. (Chiaramonte D., 2004)
Lorsque le sang total est destin un animal dans un tat critique ayant des gros besoins en oxygne, il
est prfrable de choisir une poche collecte depuis moins de 2 semaines. (Pouderoux L., 2007)

Chez le chat

On recommande comme anticoagulant le CPDA qui permet une dure de conservation de 35 jours.
(Bcheler J., Cotter S.M., 1994) Il semblerait que mme avec un systme de collecte ouvert, le risque
infectieux soit trs faible mme aprs 35 jours de stockage dans une poche. Une tude sur des chats
montre que la VPT est obtenue aprs 30 jours de stockage dans une poche ACD. [Davidow B., 2005a]

58

Chez le chien

Le CPDA est lanticoagulant de choix. La dure de stockage recommande est de 35 jours. [Davidow
B., 2005a]

b) Concentr globulaire

Il ncessite un stockage entre 1 et 6C dans un rfrigrateur avec une surveillance de la temprature et

une bonne circulation de lair. [Davidow B., 2005a] Les poches de sang doivent tre mlanges la
solution conservatrice 2 fois par semaine. (Schneider A., 1995)

Chez le chat

On recommande le CPDA associ ou non des additifs. La dure de stockage maximale est de
35 jours. [Davidow B., 2005a]

Chez le chien

Les concentrs globulaires ne peuvent tre stocks plus de 20 jours dans une poche avec du CPDA
seulement. (Price GS et al., 1988 ; Smith CA., 1991) Si on y ajoute de lAdsol ou du Nutricel, on
peut atteindre une dure de stockage recommande de 37 jours (au maximum 42 jours) selon certaines
tudes. (Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004) [Davidow B., 2005a]

Mthodes davenir : la cryoprservation et la lyophilisation du concentr globulaire

Ces dernires annes, des recherches ont t menes en mdecine humaine pour permettre une dure
de stockage des concentrs globulaires de plusieurs dcennies via la cryoprservation. Le glycrol est
le cryoprotecteur de choix lors de la conglation du concentr globulaire dans de lazote liquide -
196C. Linconvnient majeur est que le glycrol est un cryoprotecteur intracellulaire dot dun
pouvoir osmotique. Il peut donc induire une hmolyse des globules rouges une fois transfuss, il faut
donc le retirer avant la transfusion. La concentration finale en glycrol ne doit pas excder 1% ce qui
ncessite un lavage du concentr globulaire une fois dcongel avec des solutions hypertoniques ou
isotoniques, procd trs coteux et dlicat mettre en uvre. Ces manipulations peuvent provoquer
des lsions aux globules rouges suite au stress osmotique. Dans lespce humaine, les globules rouges
dglycroliss peuvent ensuite tre stocks 4C dans une solution Nutricel pendant 2 semaines ou
avec de lAdsol pendant 3 jours avec moins d1% dhmolyse. On peut contourner ce problme en
utilisant un additif cryoprotecteur extracellulaire comme lhydroxythylamidon, le dextran ou
lalbumine srique, ce qui permet dviter les tapes de lavage problmatiques. Daprs un essai
comparatif entre le glycrol 20% et lhydroxythylamidon 12,5%, le pourcentage dhmolyse lie la
dconglation reste autour de 25% avec ces deux cryoprotecteurs.

La lyophilisation des globules rouges est peut-tre un procd davenir. Elle ncessite de faibles
concentrations de sucres intracellulaires pour stabiliser les cellules pendant les oprations de
conglation et dconglation. Les globules rouges sous forme lyophilise permettraient un stockage et
un transport facilits temprature ambiante.

59
Ces mthodes ne sont pas utilises lheure actuelle mais pourraient tre une solution lavenir pour
prolonger la dure de conservation des concentrs globulaires et augmenter leur disponibilit.
(Wardrop K.J., 1995 ; Kim H. et al., 2004 ; Valeri C.R., Ragno G., 2006 ; Holovati J.L. et al., 2009)

c) Plasma frais congel

La dure de conservation recommande pour assurer une activit suffisante des facteurs de coagulation
labiles est dun an. (Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004) [Davidow B., 2005a]

Chez le chien

Lactivit des facteurs de coagulation diminue au cours du stockage. Un volume de 15-20 mL/kg de
plasma frais congel fournit 10 15U/kg de facteurs II, VIII, IX, X et de facteur von Willebrand alors
quun volume de 10 mL/kg fournit au moins 10U/kg de facteur VII. [Davidow B., 2005a]

Chez le chat

Aucune tude spcifique pour les chats nexiste concernant lactivit des facteurs de coagulation aprs
conservation du plasma. Lattitude la plus courante est dutiliser les mme dures de conservation avec
comme rserve les conditions de collecte avec un systme le plus souvent ouvert. [Davidow B.,
2005a]

d) Plasma congel

Le plasma congel depuis plus d1 an peut fournir pendant 4 ans supplmentaires des concentrations
acceptables en albumine et en facteurs II, VII, IX et X. L encore, on ne dispose pas dtude pour
lespce fline. (Chiaramonte D., 2004 ; Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004) [Davidow B.,
2005a]

e) Produits plaquettaires

Les produits plaquettaires doivent tre laisss temprature ambiante et sous agitation modre et
constante, lagitation favorisant les changes d02 et de CO2 et vitant lagrgation plaquettaire.
Le choix de la poche en particulier la matire plastique dans laquelle elle est fabrique est trs
importante pour ce type de produit qui est trs sensible la teneur en oxygne du milieu. Il faut opter
pour des poches qui sont permables loxygne afin doptimiser la dure de survie des plaquettes.
(Schneider A., 1995)
Il est recommand dutiliser lACD comme anticoagulant plutt que le CPD car le pH de lACD
amliore la viabilit de plaquettes. (Slichter S.J., Harker L.A., 1976)

Plasma riche en plaquettes

Il doit tre utilis dans les heures qui suivent la collecte. (Hohenhaus A.E., 2003)

Concentr plaquettaire

Compte tenu du risque lev de contamination infectieuse, on recommande une dure maximale de
conservation de 6 heures aprs la prparation. (Schneider A., 1995 ; Feldman B.F, Sink C.A., 2003)

60
Une tude sintressant aux concentrs plaquettaires en espce canine propose une dure de
conservation de 4 jours dans un conteneur en polyolefin (PO) permable aux gaz avec une agitation
constante.
Dans un centre durgence vtrinaire, le Dove Lewis Emergency Hospital, la mise en culture de
5 units de plaquettes J1 et J5 sest rvle ngative pour tous les chantillons.
[Davidow B., 2005a]

Concentr plaquettaire congel

Ce produit est propos par la banque de sang Midwest Blood Services pour les chiens. Il ny a aucune
publication confirmant lefficacit de ce produit ce jour. Des tudes humaines ont montr une
viabilit plaquettaire de 50% aprs conglation et stockage dans du DMSO (Dimthylsulfoxyde) 6%.
(Hohenhaus A.E., 2003) [Davidow B., 2005a] Le DMSO est le cryoprotecteur de choix pour stocker
les plaquettes sous forme congele, toutefois il ncessite aprs dconglation un lavage des plaquettes
pour retirer le DMSO avant dutiliser le concentr plaquettaire. Les plaquettes doivent ensuite tre
utilises dans les 6 heures. (Valeri C.R., Ragno G., 2006)
Une tude comparative sur dix chiens a rvl une efficacit infrieure des concentrs plaquettaires
congels par rapport des concentrs plaquettaires frais pour corriger une thrombopnie. La
cryoprservation diminue le nombre de plaquettes et leur activit fonctionnelle dagrgation. Cette
diffrence peut tre explique par les lsions plaquettaires (modifications membranaires, libration de
granules) induites par la conglation et plus particulirement lactivation plaquettaire via des seconds
messagers : on retrouve 33% de lsions de ballonisation aprs dconglation au lieu de 1% avant
conglation.
Une tude mene par lquipe de Xiao H. en 2000 a montr que la combinaison de ladrnaline au
DMSO permet doptimiser leffet cryoprotecteur du DMSO, daugmenter lagrgabilit des plaquettes
congeles qui reste toutefois infrieure celle des plaquettes conserves temprature ambiante.
Une quipe italienne a test en 2000 une nouvelle solution de conservation plaquettaire, le
ThromboSol qui contient une slection de seconds messagers (lamiloride, le nitroprusside de
sodium et ladnosine) qui inhibent lactivation plaquettaire endogne. Cette solution conservatrice
permet donc une stabilisation biochimique et une protection vis vis des lsions cryo-induites. Grce
au ThromboSol, on peut rduire 2% la concentration du DMSO, habituellement 5-6%, tout en
ayant une bonne conservation qualitative et quantitative des plaquettes et une bonne efficacit in vivo.
(Towell BL, 1986 ; Pedrazzoli P. et al., 2000)

f) Cryoprcipit

Le CPD a un meilleur rendement en cryoprcipit que lACD cest pourquoi il est prfrable de
choisir du sang prlev avec cet anticoagulant pour produire du cryoprcipit.
Le facteur von Willebrand et le facteur VIII sont stables une temprature infrieure ou gale -20C
et le cryoprcipit peut tre stock jusqu 1 an aprs la collecte quelque soit le moment o il a t
prpar partir du plasma frais congel. (Schneider A., 1995) [Davidow B., 2005a]

61
 g) Cryopoor ou plasma cryo-surnageant

Il peut tre stock pendant 5 ans partir de la date de collecte une temprature infrieure ou gale
18C. Il contiendra encore des concentrations suffisantes en facteur II, VII, IX, X, albumine et
immunoglobuline. Par contre, on ne maintiendra les faibles quantits de facteurs labiles que pendant 1
an aprs la collecte de sang. (Schneider A., 1995) [Davidow B., 2005a]

Tableau 8 : Conditions et dure de stockage et prparation l'utilisation des diffrents produits sanguins
(Daprs Schneider A., 1995 ; Lucas R.L. et al., 2004)
Produit driv
Condition de stockage Dure de conservation Prparation lutilisation
sanguin

1-6C ou temprature - Globules rouges : 21 j

Rchauffer temprature
Sang total ambiante pour avoir des - Facteurs de coagulation : 24h
ambiante
plaquettes viables - Plaquettes : 4h

Rchauffer temprature
Concentr 1-6C - 28 j ambiante
globulaire Homognisation quotidienne - 35 j si additif dans la poche Ajouter 100mL de NaCl
0,9% si pas dadditif
Rchauffer 30-37C avec
Plasma frais un bain marie
-18C - 1 an
congel Transfuser dans les 4 h
aprs dconglation
Rchauffer 30-37C avec
Plasma congel -18C - 5 ans
un bain marie
Rchauffer 30-37C avec
un bain marie
Cryoprcipit -18C - 1 an aprs la collecte
Transfuser dans les 8 h
aprs dconglation
- Facteurs labiles : 1 an aprs la
Cryoprcipit
collecte Rchauffer 30-37C avec
pauvre en -18C
- Facteurs stables, albumine, Ig : un bain marie
plasma
5 ans
Dcongeler temprature
ambiante (pas de bain
Concentr - 6 mois congel
-18C marie) avec une agitation
plaquettaire - 4 6h dcongel
douce pendant 1h avant
transfusion

Plasma riche en 20-25C

- Facteurs labiles : 4 h
plaquettes Homognisation

6) Gestion des stocks de produits sanguins

Elle est trs difficile car lutilisation des produits sanguins sinscrit souvent dans un contexte
durgence, elle est donc souvent imprvisible et variable en fonction des priodes.
Pour avoir une ide du nombre dunits ncessaires on peut faire le rapport entre les besoins en
produits sanguins pendant 6 mois sur le nombre de semaines.

Il faudra tenir compte du nombre danimaux soigns par la clinique, de la taille de la clinique, du poids
moyen des receveurs, de lexistence dun service durgence dans la clinique qui augmente
ncessairement les besoins. (Feldman B.F, Sink C.A., 2003)

62
III. Utilisation des produits sanguins et ractions transfusionnelles

A. Contrles avant transfusion

1) Recueil de lanamnse du receveur

Il convient de demander au propritaire si son animal a dj t transfus, sil souffre dune

insuffisance cardiaque ou rnale. Si lanimal est une femelle, il faut aussi sinformer dune ventuelle
gestation car dans ce cas, il existe un risque important dune maladie hmolytique nonatale. (Sarrau
S. et al., 2002)

2) Groupage du donneur et du receveur

Le donneur et le receveur doivent imprativement tre groups avant la transfusion. (Griot-Wenk

M.E., 1995 ; Hale A.S., 1995) La pratique qui consiste administrer de petites quantits de sang pour
vrifier la compatibilit doit tre abandonne car elle peut conduire des ractions transfusionnelles
svres. (Giger U., Bcheler J., 1991 ; Chiaramonte D., 2004)
La ralisation du groupage et du cross-match est dautant plus cruciale chez le chat car il nexiste pas
de donneur universel dans cette espce. Il est donc important davoir aussi bien des chats du groupe A
que du groupe B dans le pool de donneur. Les chats du groupe AB peuvent recevoir du sang du groupe
A comme du sang du groupe B : ils sont assimils des receveurs universels . Cependant, du fait
du risque dhmolyse lev avec le sang du groupe B li aux anticorps anti-A, on leur transfusera de
prfrence du sang du groupe A. (Hohenhaus A.E, 2004)

Chez le chien

Des cartes de groupage sont disponibles en routine pour tester le groupe DEA 1.1. Elles prsentent
lavantage dtre peu coteuses, rapides (rsultats obtenus en 2 minutes) et faciles dutilisation et
ncessitent de faibles volumes de sang total (0,4 mL de sang sur EDTA). Le groupage laide des
cartes repose sur la raction dagglutination grce des anticorps monoclonaux de souris. Attention
linterprtation du test : dans certains cas, on note une faible agglutination qui semble correspondre au
groupe DEA 1.2 qui ragirait de manire faiblement positive avec les anticorps du test. Cela peut
poser problme si lon considre un receveur du groupe DEA 1.2+ comme un receveur DEA 1.1+ et
quil reoit du sang du groupe DEA 1.1+ ou si lon exclut un donneur dont le test est faiblement positif
du programme de don en le croyant DEA 1.1+.

Il existe deux autres tests ralisables en routine pour typer les chiens vis--vis du groupe DEA 1.1 : le
CHROM test et le GEL test. Le CHROM test est bas sur limmunochromatographie avec des
anticorps monoclonaux. Il donne galement de bons rsultats mme sil donne parfois des faux
ngatifs. Ces rsultats sont faciles interprter. (Seth M. et al., 2005) Le GEL test repose sur
lagglutination des globules rouges dans des micro-colonnes contenant lanticorps monoclonal DEA
1.1 dans une matrice glifie. La porosit du gel laisse passer les hmaties libres mais pas les hmaties
agglutines. Cette mthode ncessite une incubation de 5 minutes et donne un rsultat facilement
interprtable. (Giger U. et al., 2005)

63
 Tmoin positif de la migration du sang

Figure 33 : Incubation du sang avec Figure 34 : Lecture de la carte de groupage

les anticorps monoclonaux

Pour les autres groupes sanguins, il faut envoyer un chantillon de sang dans un tube EDTA pour
groupage auprs dun laboratoire habilit.
LUniversit de lEtat du Michigan a mis au point des anti-sera de rfrence contre les groupes DEA
1.1, DEA 1.2, DEA 3, DEA 4 et DEA 5 produits par allo-immunisation de srum de chien. Cette
mthode ncessite la mise en suspension et le lavage de globules rouges cest- dire plusieurs
cycles de mise en suspension dans une solution tampon phosphate salin (PBS) puis centrifugation et
limination du surnageant. Ces manipulations rallongent le temps ncessaire pour le groupage 25
minutes en moyenne. De plus, linterprtation de ce test est plus dlicate et require une certaine
exprience. Enfin, la disponibilit et la reproductibilit des anticorps polyclonaux est limite.
Le groupage des groupes autres que DEA 1.1 est recommand en cas de crossmatch positif ou si on
suspecte ou observe une raction hmolytique. (Chabanne et al., 1994 ; Hale A.S., 1995 ; Bendali-
Ahcne S. et al., 1998 ; Feldman B.F., 1999 ; Giger U. et al., 2005)

Le groupage sanguin est essentiel car il permet dutiliser bon escient les produits sanguins dun
donneur universel et de le rserver aux chiens qui relvent dune urgence mdicale (hmorragie
massive mettant en jeu le pronostic vital) et qui nont jamais t groups. Ds que cela est possible,
grouper lanimal minima pour le groupe DEA 1.1. Les produits sanguins du groupe DEA 1.1 - seront
ainsi utiliss uniquement chez les receveurs DEA 1.1-. Pour les animaux souffrant danmie
chronique par exemple, on ne peut quencourager un groupage complet. [De Luca L., 2005a]
A dfaut, on ralisera un crossmatch avec un donneur qui sera obligatoirement universel. (Hale A.S.,
1995)

Chez le chat

Comme dans lespce canine, il existe plusieurs mthodes de groupage disponibles en routine pour
tester les groupes sanguins A et B : la carte dagglutination, limmunochromatographie ou CHROM
test et le Gel test bas sur lagglutination dans des micro-colonnes contenant une matrice glifie.
(Seth M. et al., 2005)

64
Le ractif qui reconnat les chats du groupe A (et AB) est du srum de chats du groupe B qui contient
des allo-anticorps qui agglutinent fortement les hmaties du groupe A (et AB). Le ractif qui rvle le
groupe B contient non pas du srum de chats du groupe A qui contient de trop faibles titres en
anticorps et provoque une trop faible agglutination mais un germe de bl, Triticum vulgaris, une
lectine qui se lie spcifiquement lantigne B. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995)
Les chats du groupe AB sont parfois mal groups avec certains tests. Le statut FeLV positif interfre
parfois dans le groupage sanguin et donne des rsultats discordants selon la mthode utilise. (Seth M.
et al., 2005)

Quand on ne dispose pas de kit de groupage flin, on peut prdire le groupe sanguin du chat nayant
jamais t transfus en ralisant le crossmatch majeur et mineur avec le sang dun chat de groupe
connu. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995) Attention toutefois aux chats du groupe AB que le
crossmatch ne permet pas didentifier. Ils ne possdent pas dallo-anticorps : leurs globules rouges
sont porteurs des antignes A et B, cest pourquoi ils sagglutinent avec les sera anti-A et anti-B.
Lagglutination des hmaties du groupe AB avec les allo-anticorps anti-A est cependant moins
marque quavec les hmaties du groupe A. (Griot-Wenk M.E. et al, 1996) Les chats du groupe AB
sont donc de mauvais candidats au don sauf si le receveur est du groupe AB car ils possdent la fois
les antignes A et B dans des proportions variables si bien que ladministration de sang du groupe AB
un chat du groupe A sans titre significatif en anticorps induira la production danticorps anti-B et
donc potentiellement une raction transfusionnelle retarde ou une svre raction transfusionnelle
lors dune nouvelle transfusion incompatible. (Knottenbelt C.M., 2002)

Remarque : la ncessit dutiliser un plasma issu dun donneur compatible avec le receveur est
controverse. Certains pensent quil faut tre vigilent du fait quil est pratiquement impossible
denlever tous les globules rouges et fragments de globules rouges lors de la prparation des produits
sanguins. [Davidow B., 2005b ; Dodds J., 2005f] Dautres estiment que le risque de ractions
transfusionnelles est ngligeable et ne mentionnent pas le groupe du donneur sur la poche de plasma.
[Kaufman P., 2005 ; Brooks M., 2005] Selon une tude prsente lACVIM (American College of
Veterinary Internal Medicine) en 2005, les 2500 units de plasma testes contenaient moins de 0,25%
de globules rouges et moins de 2% danticorps anti-DEA. [Hale A.S., 2005]

3) Cross-match

Les units sont prpares de telle sorte que des chantillons soient conservs pour faire un crossmatch
avant chaque transfusion sil y a un intervalle suprieur 4 jours entre les transfusions. Le crossmatch
est recommand dans toutes les espces pour les animaux ayant des antcdents de transfusion ou une
gestation. Le crossmatch permet de dterminer si la transfusion du jour est compatible mais ne permet
pas de prjuger de la compatibilit future ni dviter lallo-immunisation du receveur. (Hohenhaus
A.E., 2003) En effet, le crossmatch ne permet pas de vrifier la compatibilit des leucocytes et
plaquettes qui sont la principale source de ractions transfusionnelles fbriles aigus non hmolytiques
par exemple. (Feldman B.F, Kristensen A.T., 1995)

65
Le crossmatch majeur consiste vrifier sil y a une raction dagglutination aprs mlange des
globules rouges du donneur avec les anticorps dans le srum du receveur. Cela ne remplace pas le
groupage sanguin. Cela donne une indication sur la probabilit quune raction transfusionnelle
survienne et le caractre aigu ou retard dune raction ventuelle.
Le crossmatch mineur dtecte les anticorps dans le srum du donneur dirigs contre les hmaties du
receveur. On le met en uvre avant toute transfusion en cas dantcdent de transfusion ou de
gestation. (Lucas R.L. et al., 2004) Il est surtout utile en cas de transfusion de grande quantit de
plasma. (Feldman B.F, Kristensen A.T., 1995)

Le crossmatch est ralis soit par agglutination dans des tubes soit par agglutination sur des lames, soit
par des tests sur des micro-colonnes contenant une matrice glifie portant des anticorps spcifiques
qui retient les hmaties agglutines. Il convient de raliser le cross-match diffrentes tempratures
car les ractions dagglutinations et dhmolyse peuvent dpendre de la temprature.

La ralisation du crossmatch majeur par agglutination sur tube prend environ 40 minutes. On prlve
1mL de srum du receveur potentiel partir dun tube sec. On collecte 2mL dhmaties du donneur
partir de la tubulure de la poche de collecte ou dun tube EDTA.. On centrifuge 3400 tours/min
pendant 2 minutes. On spare le plasma et les globules rouges du donneur que lon met dans deux
tubes diffrents identifis au nom du donneur. On lave les hmaties du plasma en remplissant le
tube avec une solution NaCl 0,9%, on remet les globules rouges en suspension puis on recentrifuge
3400 tours/min pendant 1 minute et enfin on retire le surnageant. La procdure de lavage est
rpte encore 2 fois. Il faut ensuite prparer une suspension de globules rouges 4% en prlevant 0,2
mL de globules rouges lavs et en ajoutant 4,8 mL dune solution NaCl 0,9%. On prpare 6 tubes
tiquets avec le nom du donneur, la temprature laquelle ils seront soumis : 37C, 4C,
temprature ambiante et sil sagit du groupe test ou du groupe contrle . On met 2 gouttes de
srum du receveur et 2 gouttes de suspension de globules rouges 4% dans chaque tube du groupe
test . On laisse incuber pendant 15 minutes la temprature approprie pour chaque tube. Les tubes
sont ensuite centrifugs pendant 1 minute. On retire les tubes de la centrifugeuse doucement puis on
recherche des signes dhmolyse au niveau du plasma. On observe lil nu puis au microscope sil y
a des signes dagglutination au niveau des globules rouges. Si tel est le cas, le crossmatch est positif.
Cela indique quil y a une grande probabilit quil y ait une raction transfusionnelle. (Feldman B.F,
Sink C.A., 2003 ; Haldane S. et al., 2004 ; Lucas R.L. et al., 2004)

Tableau 9 : Elments mlanger pour la ralisation des crossmatch et des auto-contrles

Srum / Plasma Globules Rouges

Crossmatch majeur Receveur Donneur
Crossmatch mineur Donneur Receveur
Autocontrle receveur Receveur Receveur
Autocontrle donneur Donneur Donneur

Les donneurs dont les autocontrles sont positifs devront tre exclus car ils sont susceptibles de
prsenter des auto-anticorps.

66
 DONNEUR (D) RECEVEUR (R)

Tube Tube Tube Tube

sec EDTA sec EDTA

1 Centrifugation 1 Centrifugation
2 Retrait du surnageant 2 Recueil du srum
3 Lavage des hmaties 3
4 Ralisation d1 suspension de globules
rouges (GR) 4% avec du NaCl 0,9%

GR D GR R Srum R Srum D
2 gouttes 2 gouttes
2 gouttes 2 gouttes

Crossmatch Crossmatch
majeur mineur

1 Incubation 37C et 4C pendant 15 minutes

2 Centrifugation 1 minute
3 Recherche lil nu et au microscope de signes dhmolyse ou dagglutination

Figure 35 : Ralisation du crossmatch majeur et du crossmatch mineur

(Daprs Thbault A., 2005 ; Sarrau S., 2002)

Remarque : le crossmatch nest pas ncessaire lors des transfusions plasmatiques (Hohenhaus A.E.,
2003)

67
Attention ne pas confondre les rouleaux-formations, frquentes chez les chats et les receveurs en
hypoprotinmie, avec des ractions dagglutination. Pour faire la diffrence, il faut ajouter 2 gouttes
de solution de NaCl lagglomrat de globules rouges : sil sagit de rouleaux-formations, les globules
rouges se disperseront alors que sil sagit dune vritable agglutination, elle persistera. (Feldman B.F,
Sink C.A., 2003 ; Haldane S. et al., 2004 ; Lucas R.L. et al., 2004)

B. Critres de dcision dune transfusion sanguine

- La prsence dune anmie et le degr de lanmie : si lhmatocrite est infrieur 15% chez le chien,
infrieur 12% chez le chat ( moduler lors dshydratation qui peut provoquer une hmoconcentration
ou lors de splnocontraction qui peut fausser lapprciation en augmentant la volmie jusqu 20%)

- Le caractre aigu ou chronique de lanmie : un animal avec une perte sanguine rapide (lie un
traumatisme ou une hmorragie aigu) ncessitera une transfusion pour un hmatocrite plus lev
(<20%) quun animal avec anmie chronique (une diminution progressive de lrythropose ou
anmie secondaire une maladie chronique). En effet, lors dhmorragie aigu, tous les constituants
sanguins sont perdus si bien que les signes de choc peuvent apparatre pour un hmatocrite dans les
valeurs usuelles. Puis lhmatocrite diminue dans les 72h suivant le dbut de lhmorragie cause de
la redistribution des fluides extravasculaires vers lespace intra-vasculaire.

- Le pourcentage de volume de sang perdu par rapport au volume sanguin total de lanimal malade. Si
ce volume est infrieur ou gal 20%, le traitement reposera uniquement sur une fluidothrapie avec
des cristallodes ou des collodes afin de rtablir la volmie. Si les pertes sanguines sont comprises
entre 20 et 50% du volume sanguin total, on transfusera des concentrs globulaires en plus des
cristallodes sauf en cas dhypotension, de troubles de la coagulation ou de thrombopnie associs.
Des pertes sanguines suprieures 50% du volume sanguin total ncessitent une transfusion de sang
total ou une transfusion de concentrs globulaires avec un collode (dextran 70, pentastarch,
hetastarch)

- Le caractre rgnratif ou non de lanmie : si la rticulocytose est leve, on peut diffrer la

transfusion et suivre lvolution de lanmie.

- Lexistence dune hypovolmie : la transfusion sera pratique pour un hmatocrite plus lev que
chez un animal normovolmique.

-La prsence de signes cliniques associs lanmie : abattement, tachypne, tachycardie, collapsus.

-Lexistence dune maladie intercurrente et son pronostic : le consentement clair du propritaire est
fondamental avant dentreprendre la transfusion si lanimal souffre dune affection qui lui sera fatale
trs court terme.

-Une anesthsie programme pour une chirurgie : la transfusion sera ralise avant pour rduire le
stress cardio-respiratoire ou prvenir des saignements per-opratoires en cas de coagulopathie. (Kerl

68
M.E., Hohenhaus A.E., 1993 ; Chabanne et al., 1994 ; Corlouer J-P., 2001 ; Lanevschi A., Wardrop
K.J., 2001 ; Jutkowitz L.A., 2004 ; Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004 ; Pouderoux L., 2007)

Dans le cadre dune tude rtrospective, une chelle de dcision de transfuser a t propose utilisant
des critres (comme la valeur de lhmatocrite, son volution au cours du temps, la prsence de signes
cliniques) auxquels on assigne un certain nombre de points. En additionnant les points, on obtient un
score qui est compar lchelle de dcision et on entreprend ou non la transfusion de lanimal. (Kerl
M.E., Hohenhaus A.E., 1993)

En ce qui concerne les produits plaquettaires, on dcidera de transfuser lors de saignements mettant en
jeu le pronostic vital comme cela peut tre le cas lors dhmatmse, de mlna, dhmaturie ou
dpistaxis svre (induisant une chute de lhmatocrite ou un abattement par exemple), de signes
neurologiques inexpliqus ou de signes dhmorragies rtiniennes.
La dcision de transfuser sera prise en fonction dune valeur hmatologique (pour des valeurs
infrieures 10 000 plaquettes/mm3 en labsence dautres facteurs augmentant le risque hmorragique,
pour des valeurs infrieures 20 000 plaquettes/mm3 si tel est le cas) ou de la prsence de certains
signes cliniques. Il faut garder lesprit que les capacits dhmostase seront diminues si la
thrombopnie est associe des anomalies des facteurs de coagulation. Les chats semblent plus
rsistants aux effets dltres dune thrombopnie : ils ont moins tendance saigner que les chiens
pour la mme numration plaquettaire. On leur transfuse donc des plaquettes pour des valeurs
infrieures 5000 plaquettes/mm3. Lusage prophylactique des produits plaquettaires est recommand
lorsquune chirurgie est prvue sur un animal avec une thrombopnie svre. (Sarrau S. et al., 2002 ;
Abrams-Ogg A.C.G., 2003)

C. Prvalence des diffrents motifs de transfusion

Dans lespce canine, les principaux motifs de transfusion de concentrs globulaires sont par ordre de
frquence :
- une hmorragie (environ 70% des cas) lie un traumatisme, une chirurgie, une noplasie, une
thrombopnie, un saignement gastro-intestinal, une coagulopathie, un syndrome dilatation-torsion de
lestomac, un pyomtre, une infection, une affection splnique
- une hmolyse (14% 22% des cas) secondaire une anmie hmolytique mdiation immune dans
la plupart des cas
- une dysrythropose (8 14% des cas) idiopathique, lie une insuffisance rnale chronique, une
noplasie ou encore une dyplasie mylode. (Kerl M.E., Hohenhaus A.E., 1993 ; Callan M.B. et al.,
1996)

Dans lespce fline, aux Etats-Unis, les principaux motifs de transfusion de sang total sont par ordre
de frquence :
-une hmorragie (27 52% des chats) lie la plupart du temps un polytraumatisme (32% des cas),
moins frquemment (8% des chats) une intoxication aux anticoagulants, une rupture
dhmangiosarcome ou une hmaturie lie une affection du bas appareil urinaire.

69
-une dysythropose (20% des cas) conscutive une panniculite (17,1%), une maladie inflammatoire
telle une gastro-entrite, des abcs, une endomtrite (17,1%), une insuffisance rnale (14,3%), une
aplasie slective de la ligne rythrocytaire (8,6%), une hypoplasie des lignes rythrocytaire et
mgacaryocytaire (8,6%), une leucmie (5,7%), une PIF (5,7%), un lymphome intestinal (5,7%), une
infection par le FeLV/FIV.
-une hmolyse (10 14% des chats) due une anmie hmolytique mdiation immune (46,2%),
une anmie corps de Heinz (7,7%), une hypophosphatmie (15,4%), un lymphome (7,7%) ou
dorigine indtermine (23,1%).
-un trouble de la coagulation (CIVD, intoxication aux anti-coagulants) dans 2,2% des cas
-une hypoprotinmie secondaire une parvorirose dans 2,2% des cas. (Castellanos I., 2004 ;
Weingart C., 2004 ; Klaser D.A. et al., 2005)
Hmorragie

Hmolyse
Hmorragie
Dysrythropose
Hmolyse
Dysrythropose
Trouble de la
coagulation
Hypoprotinmie

Figure 36 : Prvalence des diffrents motifs Figure 37 : Prvalence des diffrents motifs
de transfusion chez le chien
de transfusion chez le chat

En ce qui concerne la transfusion de produits plasmatiques chez les chiens, elle est ralise pour
apporter :
- dans 47% des cas, des facteurs de coagulation qui font dfaut lors dhmorragie intestinale (26%),
lors daugmentation des paramtres hpatiques (17%), de noplasie abdominale (17%),
dhmopritoine (12%), dintoxication aux anticoagulants (12%), de CIVD (9%), dhmaturie (9%),
de morsures (7%), de thrombo-embolie pulmonaire (7%), de sepsis (7%)
-dans 63% des cas, de lalbumine pour palier une hypoalbuminmie aigu dans 87% des cas associe
une hmorragie (42%), une chirurgie du tractus digestif (18%), une hpatopathie (13%), une
morsure, une pritonite infectieuse, une pneumonie bactrienne, une noplasie, une colique
nphrtique, un panchement pleural ou pricardique, une septicmie, une diarrhe ou une pleursie.
-dans 10% des cas, des -macroglobulines lors de pancratites
-dans 13% des cas, des immunoglobulines en traitement de soutien lors de parvovirose (25%) ou de
septicmie (75%) (Logan J.C. et al., 2001)

Troubles de la
coagulation
Hypoalbuminmie

Pancratite

Hypoglobulinmie

Figure 38 : Prvalence des diffrents motifs de transfusion plasmatiques chez le chien lHpital
Universitaire Vtrinaire de Pennsylvanie entre octobre et dcembre 1999
(Logan J.C., 2001)
70
Dans lespce fline, lhypoalbuminmie (9%) et linsuffisance hpatique (7%) sont les principales
indications de transfusion dans lEtat de lOhio aux Etats-Unis. (Castellanos I., 2004)

D. Indications des produits sanguins

1) Indications pour la transfusion des produits contenant des globules rouges

a) Une anmie

Lanmie est la raison la plus frquente de transfuser des produits sanguins contenant des globules
rouges chez le chat (de 75 80%) et le chien.
On peut classifier les anmies en fonction de leur tiologie, de leur modalit (aigu/chronique) ou de
leur caractre normovolmique/hypovolmique.

Etiologie des anmies

En ce qui concerne ltiologie des anmies, on distingue les anmies hmolytiques, les anmies
secondaires une hmorragie et celles qui sont dues une dysrythropose.

Chez le chien, les anmies hmolytiques sont le plus souvent auto-immunes. La transfusion ne sera
donc ralise que si lanmie met en jeu le pronostic vital.
Chez le chat par contre, lhmolyse est majoritairement due des maladies infectieuses
(hmoplasmose, FeLV), une intoxication (mthmoglobinmie, anmie corps de Heinz) ou une
maladie mtabolique comme une lipidose hpatique. (Kerl M.E., Hohenhaus A.E., 1993 ; Corlouer J-
P., 2001)

La dysrythropose est une cause danmie beaucoup plus frquente chez le chat que chez le chien,
probablement en raison de la prvalence leve de linsuffisance rnale chronique et des infections
lies des rtrovirus chez les chats. (Kerl M.E., Hohenhaus A.E., 1993) Les maladies hmolytiques
sont par contre moins rencontres chez les chats que chez les chiens receveurs de transfusion de
globules rouges. (Hohenhaus A.E, 2004)

Anmie normovolmique versus anmie hypovolmique

Il est important de distinguer ces deux types danmies car la thrapeutique ne sera pas la mme.

Lanmie normovolmique est soit argnrative soit hmolytique. Elle est, la plupart du temps,
chronique et/ou associe une augmentation relative du volume plasmatique. Elle est bien tolre
(frquences cardiaque et respiratoire normales, muqueuses roses ples, pression artrielle normale) et
ne constitue donc pas une urgence. On privilgiera dans ce cas le concentr globulaire du fait de sa
faible pression oncotique. On veillera choisir un dbit plus faible pour diminuer le risque de
surcharge volumique et diviser la poche en plusieurs portions que lon rfrigrera avant
administration.

71
Au contraire, une anmie hypovolmique rsulte dune perte de sang massive voluant en quelques
heures seulement. Lanimal est trs faible, avec un pouls rapide et filant, des muqueuses blanches. La
priorit lors dhypovolmie est de rtablir le volume circulant grce une fluidothrapie drastique
avant dentreprendre une transfusion. Ensuite, on mesure lhmatocrite et on vrifie le temps de
recoloration capillaire (TRC) et la pression artrielle. Si ces paramtres se maintiennent et que
lhmatocrite reste au-dessus de 20%, on peut sursoir la transfusion. Par contre si on note une
mauvaise perfusion priphrique et une chute de lhmatocrite au dessous de 20%, il faut entreprendre
une transfusion de sang total et parfois une chirurgie pour contrler lhmorragie. Il peut arriver que
lhmatocrite soit plus bas aprs quavant la transfusion du fait de la dilution du volume circulant par
les cristallodes ou collodes ou de lhmorragie toujours prsente mais on observe une amlioration
clinique.

b) Une hmorragie

Les principales causes dune hmorragie sont : un traumatisme, une hmorragie interne lie une
noplasie ou une lsion hpatique ou splnique, un ulcre gastro-intestinal, une intoxication aux
anticoagulants, une perte de sang lie une chirurgie. (Kerl M.E., Hohenhaus A.E., 1993 ; Rozanski
E., De Laforcade A.M., 2004)

Une hmorragie est dite massive si la perte de sang est suprieure 20% du volume sanguin sachant
que le volume sanguin dun chien est de 90 mL/kg de Poids Vif (PV), celui dun chat est de 70mL/kg
de PV.

Le sang frais total est indiqu uniquement en cas dhmorragie active massive lorigine dune
diminution de lhmatocrite en dessous de 15% associe une hypoprotinmie majeure avec des
protines totales infrieure 35g/L et une albumine infrieure 15 g/L. Dans les autres cas
dhmorragie, on peut aussi utiliser du sang total conserv ou un concentr globulaire, notamment
chez les animaux souffrant par exemple dune insuffisance cardiaque chez qui il faut viter tout prix
une surcharge volmique. (Feldman B.F, Sink C.A., 2003 ; Chiaramonte D., 2004 ; Mischke R., 2005)

c) Un sepsis

Le sepsis est une rponse inflammatoire systmique lie la prsence dun agent infectieux.
Le sepsis est frquemment associ des anomalies hmatologiques comme une leucopnie ou une
leucocytose, une thrombopnie, une anmie et une coagulopathie. Lorsque les animaux malades
prsentent la fois un sepsis et une anmie, la transfusion dun concentr globulaire est indique afin
de maintenir un hmatocrite satisfaisant pour la distribution de loxygne. Lhmatocrite recommand
en mdecine humaine pour assurer une oxygnation tissulaire approprie est de 21%, on ne dispose de
valeur seuil en mdecine vtrinaire. (Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004)

d) Une coagulopathie avec saignement actif

Le sang frais total est indiqu en cas de troubles de la coagulation et/ou de thrombopnie svre
lorigine de pertes sanguines qui ne rpondent pas aux autres traitement tents pour restaurer la
fonction de transport de loxygne du sang circulant. (Chiaramonte D., 2004)

72
Le sang total stock ne contenant plus ni facteurs V et VIII, ni plaquettes, on ne peut lutiliser pour
arrter un saignement d la maladie de von Willebrand, lhmophilie A ou une thrombopnie.

e) Modalits de la transfusion : la transfusion massive

Chez lhomme, une transfusion massive est dfinie comme une transfusion de sang ou de produits
sanguins de lquivalent du volume sanguin total (90mL/kg) sur 24h ou moins ou la transfusion de la
moiti du volume sanguin sur 3 heures. Les animaux soumis un tel traitement risquent de dvelopper
des troubles lectrolytiques (surtout une hypocalcmie), une thrombopnie et une coagulopathie par
dilution. Ces transfusions massives sont relativement bien tolres chez le chat et le taux de survie de
59% est similaire celui observ lors de transfusions classiques (64%). Lors dune tude rtrospective
mene sur 27 chats ayant subi des transfusions multiples ou une transfusion massive (60mL/kg en 24h
ou 30mL/kg sur 3h), un seul a manifest des signes de surcharge volumique, 4 ont dvelopp une
hypocalcmie dont 1 une hypocalcmie svre (Cai<0,70mmol/L). (Barr F. et al., 2000 ; Rozanski E.,
De Laforcade A.M., 2004 ; Weingart C. et al., 2004 ; Franoise A. et al., 2008)

2) Indications pour la transfusion de plasma

La transfusion de plasma frais congel apporte les facteurs de coagulation des concentrations
thrapeutiques tout en diminuant le risque dallo-immunisation vis--vis des hmaties ou de surcharge
volumique si du sang total avait t utilis la place. Il est aussi indiqu en cas dhypoprotinmie
svre ou encore lors dchec du transfert passif dimmunoglobulines chez les chiots ou les chatons.
(Chiaramonte D., 2004)

Les coagulopathies associes une diminution ou un dysfonctionnement des facteurs de coagulation

sont une indication de transfusion plasmatique. Elles sont mises en vidence par une prolongation des
temps de coagulation (PT = temps de prothrombine = temps de Quick (TQ), aPTT = activated partial
thromboplastin time = temps de cphaline active (TCA), ACT=activated clotting time). En raison de
la rserve en facteurs de coagulation, il faut quun pourcentage lev de facteurs de coagulation fasse
dfaut avant dinduire une prolongation des temps de coagulation.
Une prolongation significative > 25% des valeurs usuelles des TQ et TCA doit tre soigne
agressivement par un traitement de soutien de la maladie sous-jacente, par du plasma et/ou une
supplmentation en vitamine K. (Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004)

a) Troubles de la coagulation hrditaires

Les maladies responsables dun dficit congnital en facteurs de coagulation sont la maladie de von
Willebrand, lhmophilie A (carence en facteur VIII) et lhmophilie B (carence en facteur IX).
(Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004)

Maladie de von Willebrand

La maladie de von Willebrand est due une anomalie qualitative ou quantitative du facteur von
Willebrand (vWF) qui occasionne un dfaut dadhsion plaquettaire au niveau de lendothlium ls
au cours lhmostase primaire et augmente donc le risque hmorragique en cas dintervention
chirurgicale ou de traumatisme.

73
Cette maladie a une forte prvalence chez les Dobermans et les Pinschers.

Le diagnostic de cette maladie repose sur une exploration du temps de saignement buccal qui est
augment, des temps de coagulation normaux et une numration plaquettaire normale mais la
confirmation doit tre fait avec un dosage du vWF. (Ching Y.N.L.H. et al, 1994 ; Rozanski E., De
Laforcade A.M., 2004 ; Chiaramonte D., 2004)

Le choix thrapeutique est bas sur la svrit des signes cliniques (une hmorragie par exemple). Le
cryoprcipit constitue le traitement le plus efficace mais le plasma frais congel peut se rvler utile
dfaut. En effet, ladministration de cryoprcipit permet datteindre des concentrations post-
transfusionnelles en vWF significativement plus fortes quavec du plasma frais congel chez des
receveurs atteints de la maladie de von Willebrand. (Stokol T., Parry B.W., 1998)
Il est administr raison de 6 10mL/kg toutes les 8-12 heures au besoin. La concentration en vWF
doit tre contrle aprs traitement. Lautre possibilit de traitement est lactate de desmopressine,
une vasopressine synthtique qui stimule les rcepteurs la vasopressine pour le relargage des stocks
intra-cellulaires en vWF. (Stokol T., Parry B.W., 1995 ; Chiaramonte D., 2004) [Davidow B., 2005a]

Hmophilie A

Il sagit la dficience hrditaire en facteur de coagulation la plus frquente chez le chien et le chat.
Elle est plus particulirement rencontre chez les Bergers Allemands. Le facteur VIII participe
lactivation du facteur X en activant le facteur IX en prsence de calcium ionis et de phospholipides.
Un dfaut en facteur VIII provoque des hmorragies prolonges au niveau des vaisseaux sanguins
endommags suite un dfaut de formation de fibrine.
Le diagnostic est orient par lanamnse en cas dhmorragie inexplique ou suite un traumatisme
mineur et par lexploration des temps de coagulation avec un TQ normal mais un TCA augment.
(Stokol T., Parry B.W., 1998 ; Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004 ; Chiaramonte D., 2004) Le
plasma frais congel est une alternative au cryoprcipit pour le traitement de lhmophilie A : il
permet de restaurer une activit du facteur VIII suffisante pour assurer une hmostase satisfaisante.
Lefficacit du cryoprcipit est quivalente celle du plasma frais congel pour restaurer une
concentration thrapeutique en facteur VIII chez des receveurs hmophiles. (Stokol T, Parry BW,
1998) Lactivit du facteur VIII doit tre recontrle aprs transfusion par un TCA.

Hmophilie B

Lhmophilie B est due une dficience fonctionnelle ou absolue en facteur IX. Une fois activ par le
facteur XI, il se complexe avec le facteur VIII, le calcium et les phospholipides. La dficience
provoque un clou plaquettaire friable qui se dsintgre facilement. Le TCA est prolong et le TQ est
normal. Le plasma congel est le traitement de choix. (Chiaramonte D., 2004)

b) Troubles de la coagulation acquis

Les principales causes de dficience acquise en facteurs de coagulation sont linsuffisance hpatique,
lintoxication aux anti-coagulants, le sepsis avec ou sans CIVD et une intoxication lhparine. Le
plasma congel peut tout fait convenir pour traiter une intoxication aux anti-coagulants. (Corlouer J-
P., 2001 ; Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004 ; Hohenhaus A.E., 2003)

74
 c) Indications controverses

Lhypoprotinmie

Lutilisation du plasma frais congel comme source dalbumine a t abandonne en mdecine

humaine. En effet, lalbumine squilibre entre les compartiments intra-vasculaire et interstitiel de
sorte que le compartiment interstitiel contient 60% de lalbumine. Ainsi, il faudrait dnormes
volumes de plasma pour augmenter significativement lalbuminmie et corriger la pression oncotique :
il faut 700mL de plasma pour augmenter lalbuminmie de 15 25 g/L chez un chien de 20 kg.
Dautres solutions collodales beaucoup plus disponibles et plus adaptes que le plasma existent pour
restaurer la pression oncotique (par exemple lhydroxythylamidon ou Pentastarch, le dextran ou la
solution dalbumine humaine). En cas de pertes protiques lies une entropathie ou une
nphropathie, la nutrition entrale ou parentrale constitue une bonne alternative car cela favorise la
synthse hpatique dalbumine. (Corlouer J-P., 2001 ; Lanevschi A., Wardrop K.J., 2001 ; Logan J.C.
et al., 2001 ; Chiaramonte D., 2004 ; Mischke R., 2005 ; Pouderoux L., 2007 ; Mathews K.A., 2008)

La pancratite

Certains ont propos le plasma frais congel comme traitement de la pancratite aigu. Cette
proposition est base sur le fait que lors dune pancratite, les rserves en antiprotases (cest--dire
les -globulines) sont consommes pour linhibition prmature des protases pancratiques actives.
Lide est de fournir les protines manquantes et les antiprotases naturelles comme l antithrombine
III, lantichymotrypsine et les -globulines pour prvenir lapparition de CIVD. En humaine, il est
dcrit que les pancratites svres sont associes des concentrations trs basses en -globulines. Bien
que le plasma frais congel soit efficace pour la supplmentation en anti-protases pendant les
pisodes de pancratite aigu, il ny a pas de preuve statistique damlioration clinique ou de
diminution de la mortalit. (Logan J.C. et al., 2001 ; Chiaramonte D., 2004)

Sepsis

Le sepsis est une indication controverse de transfusion. En thorie, la transfusion plasmatique

permettrait de remplacer les facteurs de coagulation, lantithrombine III et lalbumine qui font dfaut
lors de sepsis. Lantithrombine III est une protine anticoagulante naturellement prsente qui est
responsable de 70 80% de lactivit anticoagulante dans le plasma. Lors de sepsis et de CIVD,
lantithrombine III est consomme massivement, ce qui prdispose le malade une thrombo-embolie.
Toutefois, une tude na pas montr daugmentation de la concentration en anti-thrombine III aprs
transfusion plasmatique. (Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004) Il ny a pas deffet bnfique de la
transfusion de plasma en plus des traitements base dhparine et de corticodes sur lactivit de
lantithrombine 48h. (Rozanski E.A. et al., 2001 ; Thompson M.F., 2004) Le plasma frais congel
contient galement de la fibronectine, une opsonine non spcifique du systme phagocyte
mononuclaire qui pourrait tre intressante en cas de sepsis et dendotoxmie. (Mischke R., 2005)

Il semblerait quil faille augmenter la posologie habituelle du plasma en cas de sepsis du fait de la
perte continue de facteurs de coagulation. Un monitorage des temps de coagulation (TQ et TCA) est
recommand. (Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004)

75

Parvovirose

Le plasma frais congel pourrait tre utilis comme source dimmunoglobulines qui font dfaut lors de
parvovirose chez de jeunes chiots par exemple. Toutefois, aucune tude na montr que le plasma
prlev chez un donneur vaccin rgulirement apportait suffisamment dimmunoglobulines pour
avoir un effet bnfique chez un receveur souffrant dune parvovirose, dun sepsis ou dune
endotoxmie. (Logan J.C. et al., 2001)

3) Indications pour la transfusion du cryoprcipit

Le cryoprcipit, source concentre de facteur VIII, facteur von Willebrand, fibrinogne et

fibronectine, est le traitement de choix de la maladie de von Willebrand, de lhmophilie A et de la
dficience en fibrinogne en cas de saignement ou en prvision dune chirurgie. (Hurst T et al., 1987 ;
Ching Y.N.L.H., 1994 ; Lanevschi A., Wardrop K.J., 2001 ; Chiaramonte D., 2004)

Il est plus efficace que le plasma frais congel pour restaurer des temps de saignements lors de la
maladie de von Willebrand et de lhmophilie A. (Ching et al., 1994 ; Stokol T., Parry B.W., 1998)
Lactivit du facteur VIII est en moyenne 1,5 fois plus importante dans le cryoprcipit que dans le
plasma frais congel. La concentration en facteur von Willebrand est en moyenne 3,5 fois plus
importante dans le cryoprcipit que dans du plasma frais congel. Lautre avantage du cryoprcipit
par rapport au plasma frais congel est de diminuer le risque de ractions transfusionnelles de type
prurit, pleur des muqueuses, abattement ou encore de surcharge volumique. (Stokol T., Parry B.W.,
1998) [De Luca L., 2005c]

Certains chiens issus de familles prdisposes fabriquent des anticorps anti-facteur VIII suite
ladministration de cryoprcipit. Lefficacit du cryoprcipit devient nulle lors dadministrations
ultrieures ce qui prsente un problme majeur pour le traitement de ces animaux. (Giles A.R. et al.,
1984)

En revanche, le cryoprcipit est environ deux fois plus coteux que le plasma frais congel en raison
de son plus faible rendement puisquil est fabriqu partir de plasma frais congel. [Dodds J., 2005d]

4) Indications pour la transfusion du cryopoor

Le cryopoor est utilis dans le traitement de la parvovirose canine et des intoxications aux
anticoagulants. (Feldman B.F, Sink C.A., 2003)

5) Indications pour la transfusion de plaquettes

La principale indication est une thrombopnie par aplasie mdullaire le plus souvent dorigine
tumorale. Lautre mcanisme dapparition dune thrombopnie est une destruction plaquettaire
secondaire une CIVD ou un processus auto-immun.

Les transfusions plaquettaires ne sont pas frquemment pratiques car chez 85% des chiens, la
thrombopnie nest pas suffisamment marque (infrieure 50 000 plaquettes/mm3) pour occasionner
une hmorragie. Parmi les chats ayant une thrombopnie infrieure 50 000 plaquettes/mm3, 34%

76
seulement souffrent dune hmorragie. Toutefois, on peut observer des saignements spontans avec
une numration plaquettaire leve en cas de dysfonctionnement plaquettaire ou thrombopathie.
De plus, la prparation de produits plaquettaires est dlicate : il est difficile dobtenir un volume
suffisant de plasma riche en plaquettes pour avoir un intrt thrapeutique sur un gros chien par
exemple. La dure de conservation de ce produit sanguin est trs courte et limite donc laccs ce
produit sanguin.
En outre, il existe un risque non ngligeable dallo-immunisation suivant la premire transfusion
plaquettaire. Cela rend inoprantes les transfusions plaquettaires suivantes et entrane parfois des
ractions transfusionnelles.
Enfin, quand la thrombopnie est dorigine auto-immune, la transfusion plaquettaire est inutile car les
plaquettes transfuses seront dtruites aussi rapidement que celles du receveur. (Abrams-Ogg A.C.G.
et al., 1993 ; Corlouer J-P., 2001 ; Lanevschi A., Wardrop K.J., 2001 ; Hohenhaus A.E., 2003)

Auparavant, on utilisait du sang total ou du plasma riche en plaquettes pour traiter les thrombopnies.
Linconvnient principal est quil faut de gros volumes de ces produits (35% du volume sanguin du
receveur) pour apporter suffisamment de plaquettes, ce qui occasionne une polycythmie, une
hyperprotinmie, une surcharge volumique ainsi que des ractions transfusionnelles. Le concentr
plaquettaire prsente lavantage dapporter de grande quantit de plaquettes sans globules rouges ni
plasma et donc de diminuer le risque deffets secondaires lis ces lments sanguins non ncessaires
au traitement des thrombopnies. Le concentr plaquettaire doit tre administr dans les 6 heures
suivant la collecte. (Abrams-Ogg A.C.G. et al., 1993)

Un nouveau produit base de plaquettes a t rcemment mis au point : il sagit du concentr

plaquettaire congel. Les plaquettes sont collectes par aphrse puis conserves dans du
dimthylsufloxyde (DMSO). Aucune publication na prouv son efficacit ce jour mais il savrerait
efficace dans le traitement des thrombopnies mdiation immune. Lutilisation de concentr
plaquettaire congel sur 6 chiens souffrant dune thrombocytopnie svre a permis daugmenter la
numration plaquettaire et/ou de rduire les saignements. Comme le produit contient du DMSO, il doit
tre administr lentement pour prvenir une bradycardie. (Hohenhaus A.E., 2003) [Davidow B.,
2005a]

E. Contre-indications
1) Contre-indications relatives
Chez les animaux insuffisants cardiaques ou rnaux, la transfusion de concentr globulaire doit tre
prfre la transfusion de sang total en raison du risque accru de surcharge volumique.
Il est dconseill dadministrer des animaux insuffisants hpatiques des produits sanguins conservs
depuis plus de 2 semaines du fait de laugmentation de lammonimie dans la poche au cours du
stockage. (Pouderoux L., 2007)

2) Les cytopnies dorigine auto-immune

-Une anmie hmolytique auto-immune ne justifiera une transfusion que si elle est trs mal tolre et
engage le pronostic vital. En effet, lanmie est due des auto-anticorps dirigs contre les globules

77
rouges mais bien souvent la spcificit large des ces anticorps conduit une incompatibilit de toute
transfusion et donc une dure de vie trs limite des hmaties transfuses et une hyperstimulation du
systme immunitaire. De plus lapport dhmaties risque dinhiber la rponse mdullaire
drythropose.
La transfusion prsente non seulement un intrt thrapeutique trs limit mais aussi un risque non
ngligeable de raction hmolytique aigu. Dans ce cadre l, lemploi de lOxyglobin, solution
base dhmoglobine bovine soluble, est tout fait pertinent. Cependant, une tude rtrospective sur la
survie de chiens souffrant danmie hmolytique auto-immune a montr quil ny a pas de diffrence
significative entre le groupe ayant reu de lOxyglobin avec un concentr globulaire et le groupe
ayant reu uniquement de lOxyglobin. (Chabanne et al., 1994 ; Corlouer J-P., 2001 ; Rentko V.T. et
al., 2002 ; Pouderoux L., 2007)

-De la mme manire, une thrombopnie dorigine auto-immune ne constitue par une bonne indication
de transfusion plaquettaire car les plaquettes transfuses seront dtruites aussi rapidement que celles
du receveur. (Abrams-Ogg A.C.G. et al., 1993 ; Abrams-Ogg A.C.G., 2003 ; Hohenhaus A.E., 2003)
Lalternative consiste alors injecter de la vincristine 0,5mg/m2 une fois par semaine pour stimuler
la ligne mgacaryocytaire. (Barr F. et al., 2000 ; Pouderoux L., 2007)

F. Alternatives la transfusion

1) La transfusion autologue
Lauto-transfusion est un procd qui consiste collecter du sang autologue aprs un pisode de
saignement, le filtrer puis le transfuser au donneur. La seule indication est un saignement actif dans
une grande cavit sans autre source possible de globules rouges. Cela est contre-indiqu si le sang est
contamin par de lurine ou de la bile, des agents infectieux ou des cellules tumorales.
La transfusion autologue peut aussi tre pratique en prvision dune chirurgie. Le sang de lanimal
malade est collect 1 4 semaines avant la chirurgie puis stock et transfus si lanimal prsente une
anmie pendant ou aprs la chirurgie.
Les avantages de cette technique sont la compatibilit antignique, labsence de risque de transmission
de maladie et le fait que le sang soit normotherme, au bon pH, conomique et immdiatement
disponible.
Les inconvnients sont un risque dhmolyse, de formation demboles, de dveloppement dune
coagulopathie ou de CIVD et de sepsis. De plus, cette procdure ncessite une sdation lors de la
collecte, augmente les cots. (Fusco J.V. et al., 2000 ; Chiaramonte D., 2004 ; Rozanski E., De
Laforcade A.M., 2004)

2) Le solut de transport doxygne contenant de lhmoglobine bovine purifie

LOxglobin est un solut de transport qui augmente la concentration plasmatique et totale en

hmoglobine. Ce produit est indiqu comme traitement de soutien des anmies secondaires une
hmorragie, une hmolyse ou une dysrythropose.

78
Il reprsente une alternative intressante aux produits sanguins lorsquon se trouve dans limpossibilit
dterminer le groupe sanguin du donneur et du receveur. Les avantages par rapport aux concentrs
globulaires sont son accessibilit (il peut tre stock pendant 3 ans temprature ambiante), labsence
de risque de transmission dagents infectieux et une affinit plus faible de lhmoglobine bovine pour
loxygne qui permet une dcharge plus complte de loxygne dans les tissus.(Gibson GR et al., 2002
; Hohenhaus A.E., 2002 ; Callan M.B., Rentko V.T., 2003) En revanche, son cot reste important : une
poche de 125 mL cote environ 400. (Pouderoux L., 2007)

G. Administration de la transfusion et suivi clinique per- et post-transfusionnel

1) Posologie des produits sanguins

Sang frais total / Sang total

Une dose de 2 mL/kg de sang frais total ou de sang total augmente lhmatocrite de 1%. (Chiaramonte
D., 2004 ; Jutkowitz L.A., 2004)

Formules pour calculer le volume V de sang transfuser avec PV = poids vif en kg, Ht = hmatocrite
en % (Chabanne et al., 1994 ; Corlouer J-P., 2001 ; Jutkowitz L.A., 2004) :
-chien : V= 90 PV receveur (Ht voulu Ht receveur) / Ht donneur
-chat : V= 66 PV receveur (Ht voulu Ht receveur) / Ht donneur

Concentr globulaire

En labsence de pertes sanguines, une dose de 1mL/kg de concentr globulaire augmentera

lhmatocrite de 1%. (Rozanski E., De Laforcade A.M., 2004)
Formule chez le chat : Volume de concentr globulaire transfuser (mL) = Ht voulu (%) PV (kg)
(Castellanos I., 2004)

Plasma frais congel

Pour les troubles de la coagulation la posologie du plasma frais congel est de 10 20 mL/kg, soit une
unit de plasma pour 10 20 kg de poids vif avec un maximum de 22 mL/kg par 24 heures si lanimal
est normovolmique.
Le dbit dadministration est 4-6 mL/min. (Hohenhaus A.E., 2003)

Cryoprcipit

La posologie est de 12 20 mL/kg toutes les 10 12 heures ou 1 unit pour 10 kg de poids vif jusqu
ce que les saignements actifs cessent. (Hurst T et al., 1987)

Plasma riche en plaquettes et concentr plaquettaire

Les posologies recommandes sont 1 unit de concentr plaquettaire pour 10 kg de poids vif et 1 unit
de plasma riche en plaquettes pour 3 kg de poids vif. On peut esprer une augmentation de la

79
numration plaquettaire de 20 000 plaquettes/mm3 1 2 heures aprs la transfusion. (Abrams-Ogg
A.C.G., 2003 ; Hohenhaus A.E., 2003 ; Haldane S. et al., 2004)

2) Prparation des produits sanguins avant administration

Rchauffement des produits sanguins stocks

Les produits sanguins congels ou rfrigrs doivent tre rchauffs temprature ambiante avant
administration.

En effet, en cas de transfusion massive de sang froid, on peut observer une acidose, une
vasoconstriction priphrique, une hypoglycmie, une hyperlactatmie, une diminution du dbit
cardiaque et des troubles du rythme. De plus, laffinit de lhmoglobine pour loxygne augmente
quand la temprature diminue donc on a une moins bonne distribution tissulaire de loxygne do une
hypoxie. (Corlouer J-P., 2001)

Attention ne pas atteindre des tempratures suprieures 37C car la chaleur excessive prcipite et
dnature le fibrinogne et les autres protines, dtruit les facteurs de coagulation et rduit la capacit
de transport en oxygne des globules rouges. Le rchauffement peut aussi favoriser la croissance
bactrienne si le produit sanguin est contamin pendant la procdure de collecte. (Chiaramonte D.,
2004)

Le plasma ne doit pas tre dilu avant administration. Les units de plasma congeles doivent tre
manipules avec prcaution car il y a un risque que la poche en plastique congele se fende. Il
semblerait que plus la poche est congele une temprature basse (-80C par exemple) plus ce risque
de rupture est lev. Le rchauffement doit tre le plus rapide possible pour viter la croissance
bactrienne.
Si le plasma doit tre prt plus rapidement, il doit tre ferm hermtiquement dans un sac en plastique
et plac dans un bain marie une temprature infrieure 37C, les ports de la poche au-dessus du
niveau de leau pour viter toute contamination de la poche. Cette mthode prend entre 25 et 35
minutes. (Hurst T. et al., 1987 ; Feldman B.F, Kristensen A.T., 1995 ; Feldman B.F, Sink C.A., 2003 ;
Chiaramonte D., 2004) [Turnage J., 2007] Le fait dutiliser de leau courante acclre la procdure et
ramne sa dure 20 minutes environ : on place lunit dans un bol sous un robinet deau courante
37C. [Turnage J., 2007 ; Wardrop K.J., 2007]

En urgence, le micro-onde raccourcit le temps de dconglation (moins de huit minutes) sans

occasionner de dtrioration des facteurs I (fibrinogne), VIII et vWF ou dallongement des temps de
coagulation TQ et TCA. Attention cependant car le micro-onde a tendance trop chauffer le plasma.
Les units de plasma sont places dans un bain-marie chaud pour rendre la poche moins fragile. Puis
elles sont emballes dans un sac en plastique supplmentaire et mises au micro-onde pendant des
squences de 10 secondes. Entre chaque squence, les units sont agites doucement et brivement.
Enfin, quand seulement quelques cristaux de glace demeurent, les poches sont retournes plusieurs
fois jusqu liminer ces particules geles. (Hurst T et al., 1987)

80

Dilution du concentr globulaire

Lhmatocrite du concentr globulaire tant de 80%, il faut le diluer avec un solut NaCl 0,9% avant
administration raison de 10mL de NaCl pour 30 40mL de concentr globulaire afin dassurer un
dbit de transfusion appropri. Si la poche de concentr globulaire contient un additif type Adsol ou
Nutricel, il nest pas ncessaire de le diluer. (Chiaramonte D., 2004 ; Hohenhaus A.E., 2003 ; Prittie
J.E., 2003)

Vrifications des poches

Avant dadministrer un produit sanguin, il convient dexaminer ltiquette colle sur la poche de sang
et de vrifier que la date dexpiration nest pas dpasse, que lespce du donneur, le produit sanguin
et le groupe sanguin sont bien ceux qui sont requis. Les produits sanguins doivent aussi tre inspects
visuellement pour rechercher des anomalies de la couleur, de la consistance ou la prsence de caillots.

On suspectera une contamination bactrienne :

- si les segments de tubulure de la poche apparaissent plus clairs que le sang dans la poche elle-mme
- si la couche des hmaties est de couleur violette et une zone dhmolyse est visible au-dessus de la
couche des hmaties
- si le plasma ou le liquide surnageant est trouble, violet, marron ou rouge.
Si une de ces anomalies est prsente, une culture doit tre ralise pour dterminer sil y a eu ou non
contamination de lunit de sang et cette poche ne doit pas tre administre avant obtention du rsultat
de la culture. (Chiaramonte D., 2004 ; Wardrop KJ. et al., 2005 ; Lucas R.L., 2004) Certaines banques
de sang prives mesurent systmatiquement sur chaque poche le pH, lhmatocrite et les solides totaux
(TS), ils font un frottis sanguin, une coloration de Gram la rechercher de bactries et si elle est
positive, une culture bactrienne. [Hale A.S., 2007b]

3) Administration du produit sanguin

On veillera retirer la nourriture quelques heures avant de commencer la transfusion pour viter les
vomissements. Il faut utiliser un kit commercial pour ladministration de sang. Il comporte un filtre de
170 m qui permet dter les caillots et dbris forms pendant le stockage. Pour les chats chez lesquels
le volume transfus est souvent faible, on peut se servir dune seringue relie un filtre de 18m.
(Hohenhaus A.E., 2003) La plupart du temps, ladministration se fait via un cathter priphrique
veineux par gravit avec un compte-gouttes mais on peut aussi utiliser une pompe perfusion ou un
pousse-seringue condition quils nendommagent pas les globules rouges (vrifier les conditions
dutilisation prconises par le fabricant). Pour un dbit de perfusion optimal, la chambre de perfusion
ne doit pas tre remplie plus qu la moiti. On choisit un cathter de gros diamtre (au moins 0,9 mm)
pour viter lhmolyse. Le cathter doit tre rserv la transfusion de produits sanguins, en aucun cas
on nutilisera la mme voie veineuse que pour la fluidothrapie avec du Ringer lactate qui contient du
calcium ou avec des soluts hypotoniques ou pour ladministration de mdicaments. Dans de rares cas,
lors dhypotension svre ou chez de trs jeunes animaux, on utilisera la voie intra-osseuse qui permet
la mise en circulation de 95% des hmaties en 5 minutes.

81
 Figure 39 : Transfuseur avec un filtre Figure 40 : Administration du produit sanguin
chez un chat

Figure 41 : Robinet 3 voies Figure 42 : Administration du sang total via un

pousse-seringue

La transfusion doit tre ralise en 4 6 heures pour viter la contamination bactrienne.

La vitesse dadministration dpendra de lindication (svrit de lanmie, trouble de lhmostase), de
la prsence dune hypovolmie et de lexistence dune insuffisance cardiaque ou rnale chez le
receveur.
Le dbit doit tre fix entre 0,25 et 1 mL/kg/h pendant les 30 premires minutes. Si aucune raction
transfusionnelle nest note, on peut augmenter le dbit.
Pour des animaux normovolmiques, le dbit est entre 5 et 10 mL/kg/h pour un chien, 10 20
mL/kg/h pour un chat. Les receveurs hypovolmiques peuvent tre transfuss plus rapidement (jusqu
22mL/kg/h chez le chien, de 22 66mL/kg/h chez le chat). Par contre, on ne dpassera pas 4mL/kg/h
chez un cardiopathe ou un insuffisant rnal. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995; Corlouer J-P., 2001 ;
Feldman B.F, Sink C.A., 2003 ; Hohenhaus A.E., 2003 ; Prittie J.E., 2003 ; Bartolo A., 2005 ;
Thbault A., 2005)

Le plasma peut tre administr entre 4 et 6 mL/kg/h. (Chiaramonte D., 2004)

82
 4) Monitorage du receveur

Pour un monitorage efficace, il faut avoir pris des valeurs de rfrence avant davoir commencer la
transfusion. On mesurera lhmatocrite, les protines totales, la frquence cardiaque, la frquence
respiratoire, la couleur des muqueuses, la temprature rectale et si possible, la couleur des urines et la
pression artrielle et la pression veineuse centrale (pour pouvoir dtecter une surcharge volumique
chez un cardiopathe). La pression artrielle systolique doit rester entre 80 et 100 mmHg pour
maintenir une perfusion rnale suffisante. La pression veineuse centrale doit rester infrieure 10 cm
deau ; sinon il y a surcharge volumique.

Pendant la premire heure, tous les quarts dheure, on mesure la frquence cardiaque, la frquence
respiratoire et la temprature rectale. Si aucun effet secondaire nest dcel, le dbit de la transfusion
est augment. Aprs la premire heure, on doit intervalle rgulier, toutes les heures par exemple,
rechercher les signes dune raction transfusionnelle savoir de la fivre, une hypotension, des
vomissements, de la diarrhe, des urines colores, des apnes ou un collapsus. Pour faciliter la
dtection de vomissements, diarrhe et hmoglobinurie, on peut disposer une alse blanche dans la
cage.

Si une raction est observe, il faut arrter immdiatement la transfusion. On met en place une
fluidothrapie avec des soluts cristallodes, on mesure la pression artrielle et on surveille les urines.
La poche de transfusion doit tre test avec une coloration de Gram et mis en culture pour liminer
une contamination bactrienne de la liste des causes de ractions transfusionnelles.

Le receveur doit tre surveill toutes les 6 heures pendant les 24 heures suivant la transfusion la
recherche dune tachypne, tachycardie, de fivre, de vomissements, dhypotension,
dhmoglobinurie car certaines ractions se manifestent de manire diffre. (Prittie J.E., 2003 ;
Chiaramonte D., 2004 ; Hohenhaus A.E., 2004 ; Jutkowitz L.A., 2004 ; Bracker K.E., Drellich S.,
2005)

5) Evaluation de lefficacit de la transfusion

Si aucune raction transfusionnelle nest observe au cours de la transfusion, on mesure lhmatocrite

1 2 heures aprs la fin de la transfusion. Lobjectif est dobtenir un hmatocrite suprieur 18% sauf
en cas danmie argnrative o lon vise un hmatocrite 35%. Si le plasma frais congel est
administr pour traiter une coagulopathie, un bilan de coagulation doit tre ralis pour vrifier leffet
thrapeutique. La lactatmie est un bon indicateur de la perfusion chez les animaux non insuffisants
hpatiques : elle doit se normaliser autour de 1 2mmol/L si la transfusion a restaur une oxygnation
tissulaire correcte. (Corlouer J-P., 2001 ; Jutkowitz L.A., 2004)

83
 FICHE DE SUIVI
DE LA TRANSFUSION
Date :
Nom du donneur : Groupe sanguin :
Nom du receveur

Muqueuses
Heure T (C) FC FR PA Prurit Autre
(TRC, couleur)

Figure 43 : Modle de fiche de suivi de la transfusion

H. Les ractions transfusionnelles

1) Dfinition Signes dappels

Les ractions transfusionnelles correspondent un ensemble de modifications mtaboliques et

immunologiques lorigine deffets indsirables chez le receveur pendant ou aprs la transfusion dun
produit sanguin. (Chabanne et al., 1994 ; Chiaramonte D., 2004)
Chez un chat, 1 mL de sang incompatible suffit provoquer une raction transfusionnelle dhmolyse
aigu chez le receveur. Cela conduit la mort dans 30% des cas. (Hohenhaus A.E, 2004)

Les signes dappel dune raction transfusionnelle aigu sont de lurticaire, des tremblements, des
vomissements, une hmoglobinmie, une hmoglobinurie, une incontinence fcale et urinaire, une
fivre transitoire et de la prostration, de la dyspne, une paraparsie transitoire, des convulsions, une
CIVD et un choc.

84
Les signes dappel dune raction transfusionnelle retarde sont une diminution inattendue de
lhmatocrite aprs la transfusion, de la fivre, de lanorexie, un ictre et une bilirubinurie associs
lhmolyse.

Les signes dappel dune raction transfusionnelle lie la transfusion dun produit contenant des
plaquettes sont un angidme, un choc anaphylactique, des vomissements, un syndrome fbrile non
infectieux et un sepsis. (Abrams-Ogg ACG, 2003)

Les ractions aigus surviennent dans les minutes ou les heures qui suivent la transfusion alors que les
ractions retardes apparaissent plusieurs jours voire plusieurs semaines aprs. (Kerl M.E., Hohenhaus
A.E., 1993 ; Chiaramonte D., 2004)

Elles peuvent survenir lors de transfusion de tout produit sanguin mais sont plus frquentes avec les
produits contenant des globules rouges et le plasma quavec le cryoprcipit par exemple. (Stokol T.,
Parry B.W., 1998)

Selon des tudes rtrospectives, la prvalence des ractions transfusionnelles seraient entre 1,2 et 13%.
(Kerl M.E. et al., 1993 ; Callan M.B. et al., 1996 ; Prittie J.E., 2003 ; Castellanos I. et al., 2004 ;
Weingart C. et al., 2004 ; Klaser D.A. et al., 2005 ; Thbault A., 2005) La prvalence des ractions
transfusionnelles suite ladministration dun concentr plaquettaire est de 17%. (Abrams-Ogg ACG
et al., 1993)

2) Ractions mdiation immune immdiates et retardes

Peu de cas de ractions transfusionnelles dues aux allo-anticorps chez le chien sont rapports dans la
littrature. Cela peut sexpliquer par la raret des anticorps naturels ayant des consquences cliniques,
par le fait quun animal est rarement transfus deux fois ou encore par une sous-dclaration des cas.

a) Effets immdiats

Raction hmolytique aigu

o Mcanisme

Les ractions hmolytiques aigus sont lies des anticorps contre les anticorps rythrocytaires. Elles
sont apparentes des ractions dhypersensibilit de type II. La gravit et le dlai dapparition de ces
ractions hmolytiques dpendent de la classe dimmunoglobuline (Ig) implique (IgG, IgM), de la
temprature laquelle les anticorps se lient aux anticorps de surface des cellules et le degr de fixation
du complment.
Les anticorps IgG et IgM activent la fraction lytique C5-9 du complment en se fixant sur les
hmaties, ce qui aboutit une hmolyse intra-vasculaire dans les quelques minutes quelques heures
qui suivent la transfusion. Les IgG sont moins efficaces que les IgM pour lactivation du complment,
la lyse par le complment est incomplte et les hmaties subissent une destruction extra-vasculaire. La
phagocytose est stimule par les complexes rythrocytes-anticorps : en effet, les hmaties sur
lesquelles se sont fixs les anticorps et le complment sont reconnues par les macrophages. Le

85
complment fix sur les hmaties est dgrad en fraction C3 ce qui permet la libration dhmaties
partiellement digres dans le torrent circulatoire.

Fixation du complexe Activation de la

immun sur le rcepteur de phagocytose
Fc (fraction commune)

Lysozome

Complexe Ag-Ac
hmolysines
Phagocyte

Complment activ
par la voie classique C3b

GR b
GR
C

Libration de la fraction C3b Activation de la phagocytose

(opsonisation)

Libration des fractions C3a et C5a Libration de substances

(anaphylatoxines) vasoactives vasodilatation
Chimiotactisme

Hmolyse
Libration de la fraction lytique :
C5C9 ou CAM (=Complexe
dAttaque Membranaire)

GR
GR
GR GR

GR GR

Activation de la Hmolyse
GR GR phagocytose

GR GR

Ac hmagglutinines

Figure 44 : Schma de la raction dhmolyse et dhmagglutination lors de ractions transfusionnelles

La formation des fractions C3a et C5a stimulent la libration de mdiateurs de linflammation ainsi
que de substances vasoactives comme lhistamine, la srotonine et les prostaglandines par les
mastocytes, les leucocytes et les plaquettes. Il en rsulte une vasodilatation lorigine dune
hypotension svre, un tonus vagal augment et une bradypne.
Lhmolyse intra-vasculaire conduit la production de fibrine, la circulation de micro-thrombi et la
consommation des plaquettes, des facteurs de coagulation (via lactivation de certains facteurs par le
86
complment) et ventuellement une CIVD. (Auer L., Bell K., 1983 ; Giger U., Bcheler J.,1991 ;
Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Knottenbelt C.M., 2002 ; Chiaramonte D., 2004)

o Dans lespce canine

Dans les minutes ou les heures qui suivent la transfusion, le chien prsente de la fivre, une
hypotension, une tachycardie, une tachypne, la fivre, des vomissements, une incontinence fcale et
urinaire et des tremblements. Lhmolyse intra-vasculaire aigu provoque une hmoglobinmie et une
hmoglobinurie mme pour de faibles volumes de sang transfus. Parfois, on observe chez les
receveurs une prostration, une parsie, une dyspne ou encore des convulsions mais ces ractions
transfusionnelles conduisent rarement la mort de lanimal. Les signes cliniques disparaissent dans les
12 24 heures. (Chabanne L. et al., 1994 ; Giger U. et al., 1995 ; Chiaramonte D., 2004)

o Dans lespce fline

Lors dune transfusion incompatible de sang du groupe B un receveur du groupe A, lactivation du

complment est modre do les signes cliniques modrs (un inconfort, une tachycardie, une
tachypne, une hmoglobinmie et une hmoglobinurie) absents avec parfois seulement un retour de
lhmatocrite son taux initial quelques jours aprs la transfusion. Par contre une transfusion
incompatible peut conduire la production de titres levs en anticorps anti-B qui pourront provoquer
une raction transfusionnelle svre.

Chez les chats du groupe B recevant du sang du groupe A, lactivation du complment est intense, ce
qui dclenche des signes cliniques svres quelques secondes aprs le dbut de la transfusion mme
avec de trs petits volumes de sang (1mL). Les manifestations sont une agitation, des vocalises puis de
labattement, des apnes ou une bradypne, une bradycardie, une arythmie cardiaque avec blocs atrio-
ventriculaires par exemple, une hypotension, une incontinence fcale et urinaire, une sialorrhe, une
mydriase, des convulsions et des vomissements. On rencontre galement frquemment des signes
dhmolyse comme lhmoglobinmie et lhmoglobinurie. Les analyses hmatologiques montrent
une diminution significative de lhmatocrite, de lhmoglobinmie et de la numration rouge
rapidement suivie dune hmoconcentration secondaire une augmentation de la permabilit
capillaire ainsi quune leucopnie transitoire probablement due la diapdse leucocytaire stimule
par la formation des complexes anticorps-antigne. Lensemble de ces manifestations correspond la
phase 1 dcrite par Auer and Bell qui peut durer entre 35 secondes et 5 minutes. Certains chats
dcdent au cours de cette phase.
Puis vient la phase 2 avec des phnomnes compensatoires (hypertension, tachycardie, tachypne) qui
peut durer plusieurs heures. On observe pendant cette phase des extrasystoles. (Auer L., Bell K.,
1983 ; Giger U. et al., 1990 ; Giger U., Bcheler J., 1991 ; Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ;
Knottenbelt C.M., 2002 ; Bracker K.E., Drellich S., 2005)

87
 PA

PVC
ECG DII Phase 1

Temps
(t0)
Respiration

PA
PVC
Phase 2
ECG DII (t0+4 min)
Temps
Respiration

Figure 45 : Suivi de la pression artrielle, de la pression veineuse centrale, de lECG drivation II, de la
respiration au cours dune transfusion incompatible chez un chat du groupe A recevant du sang du groupe B
(Daprs Auer L., Bell K., 1983)

De plus, les ractions dhmolyse ont un grand impact sur la dure de survie des hmaties transfuses.
Lors de transfusion avec un cross-match ngatif, la survie des hmaties transfuses est la mme que
celle dhmaties auto-transfuses, savoir, entre 29 et 39 jours. En cas de transfusion incompatible, on
observe une rduction significative de la dure de vie des hmaties tout particulirement lors de
transfusions de sang du groupe A un receveur du groupe B. Des hmaties du groupe B transfuses
un receveur du groupe A qui na jamais t transfus ont une dure de vie de 2 jours tandis que des
hmaties du groupe A transfuses un receveur du groupe B nayant jamais t transfus survivent
seulement 1,3 heures. Dans les 24 heures, toutes les hmaties du groupe A sont dtruites. (Giger U.,
Bcheler J.,1991 ; Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Corlouer J-P., 2001)
100
% survie des GR transfuss

100
% survie des GR transfuss
50

50

0 10 20 30 40 50 60 70 (jours) 0 10 20 30 40 50 60 70 (jours)

Receveur A, Donneur A Receveur B, Donneur B

Receveur A, Donneur B Receveur B, Donneur A

Figure 46 et Figure 47 : Courbes de survie des globules rouges lors de transfusions incompatibles

88

Ractions aigus mdiation immune non hmolytiques

Les ractions fbriles non hmolytiques sont les ractions transfusionnelles les plus frquentes. Elles
surviennent dans environ 3% des transfusions de globules rouges chez les chiens daprs les
observations de J. Wardrop au centre hospitalier universitaire vtrinaire de Washington. Elles se
manifestent par un pisode dhyperthermie (augmentation de la temprature rectale dau moins 1C
dans les quatre heures suivant la transfusion).

Lhyperthermie rsulterait de lallo-immunisation cest--dire linteraction des anticorps du receveur

avec les antignes des leucocytes et plaquettes du donneur ou bien de la libration de cytokines
pyrognes (interleukine 1, 6 et 8, TNF) ou dautres mdiateurs de linflammation (histamine,
srotonine) par les leucocytes suite leur activation par le complment, la thrombine ou suite leur
dgradation pendant le stockage des produits sanguins. On observe parfois aussi des vomissements et
une tachypne.

Ce type de ractions survient en fin de transfusion dans les dernires 30 minutes et peut se poursuivre
pendant 20 heures. Elle ne met pas en jeu le pronostic vital. Cependant, attention au diagnostic
diffrentiel avec les sepsis induits par la transfusion suite la contamination bactrienne des produits
sanguins. La transfusion doit tre stoppe et ventuellement reprise un dbit plus lent. (Brownlee L.
et al., 2000 ; Chiaramonte D., 2004 ; Chaudhary R., 2006)

Ractions dhypersensibilit aigus de type I

On distingue les ractions anaphylactiques (rponse des anticorps du receveur contre les Ig A du
donneur) et les ractions allergiques (rponse des anticorps du receveur contre les IgE du donneur. Ces
ractions sont observes lors de transfusion de produits plasmatiques car ils contiennent de lalbumine,
des immunoglobulines et dautres allo-antignes. Suite la rponse des anticorps du receveur contre
ces protines plasmatiques, les mastocytes sont activs et librent des substances vasoactives comme
lhistamine, les leucotrines, les prostaglandines et les cytokines. (Prittie J.E., 2003 ; Chiaramonte D.,
2004 ; Bracker K.E., Drellich S., 2005) On peut aussi observer ce type de raction lors de transfusion
de sang issu dun donneur allergique un receveur en contact avec lallergne. (Corlouer J-P., 2001)

Les manifestations sont le dcubitus, une tachycardie, une dyspne, des extrmits froides, un
urticaire, un dme facial, du prurit et parfois une hypotension et une arythmie cardiaque. Elles
apparaissent dans les 45 premires minutes et rtrocdent spontanment.

Il peut aussi y avoir un choc anaphylactique, de pronostic rserv pendant les 24 premires heures : il
se caractrise par un abattement, de la fivre, une hypotension, une bronchoconstriction, un dme
non cardiognique, des vomissements, des tremblements, une incontinence fcale et urinaire. (Callan
M.B. et al., 1996 ; Prittie J.E., 2003 ; Bartolo A., 2005 ; Thbault A., 2005)

Les ractions allergiques conscutives la transfusion de plasma ou de produits plaquettaires sont

gnralement plus svres que celles dues la transfusion de produits sanguins contenant des
hmaties. Ceci est probablement expliqu par les plus grands volumes transfuss et par la quantit plus

89
importante de substances vasoactives lorsquil sagit de plasma. Les leucocytes contenus dans les
poches dgranulent pendant le stockage.

Une raction anaphylactode est indistinguable dune raction anaphylactique : la diffrence rside
dans le mcanisme qui ne fait pas intervenir la dgranulation des mastocytes et basophiles mais des
anaphylatoxines drives du complment (C3a, C4a, C5a). (Bracker K.E., Drellich S., 2005)

Immunodpression

Il semblerait quil y ait une corrlation entre la transfusion sanguine et lchec chirurgical sans que
lon en connaisse le mcanisme en cause. Ladministration de produit sanguin est associ un risque
significativement augment de fuite aprs anastomose intestinale (23% des animaux transfuss contre
9% des animaux non transfuss) mais il se pourrait que cela soit li au fait que seuls les malades les
plus critiques donc les plus susceptibles de prsenter des complications postopratoires ont t
transfuss. (Ralphs S.C. et al., 2003) Lincidence des complications respiratoires comme une
pneumonie par fausse dglutition ou un syndrome de dtresse respiratoire aigue est plus leve chez
les animaux transfuss. (Alwood et al., 2003)
Lallo-immunisation due aux leucocytes contenus dans les produits sanguins et les mdiateurs
contenus dans le plasma jouerait un rle dans ces phnomnes dimmunodpression. Il semblerait que
la transfusion provoque une diminution de lhmatopose, une dgradation des cellules NK, une
altration fonctionnelle des cellules phagocytaire et des cellules prsentatrices des antignes, une
diminution de lactivit des lymphocytes T helper, une augmentation de lactivit des lymphocytes T
tueurs et une diminution de la production de linterleukine 2. (Jutkowitz L.A., 2004)

b) Effets retards

Les ractions immunologiques retardes surviennent mme si le sang transfus est compatible chez
des animaux qui ont dj t sensibiliss aux anticorps rythrocytaires.

Purpura post-transfusionnel

Le purpura post transfusionnel est une complication rare qui survient le plus souvent chez les chiennes
multipares qui se caractrise par une thrombopnie svre et des ptchies, des ecchymoses dans la 1e
ou 2e semaine qui suit la transfusion de produits sanguins contenant des plaquettes entires ou
fragmentes. Ce phnomne est d des anticorps dirigs contre un antigne spcifique des plaquettes
du receveur. La raction peut persister pendant 2 mois mais se rsout spontanment. (Wardrop K.J. et
al., 1997 ; Feldman B.F, Sink C.A., 2003 ; Bracker K.E., Drellich S., 2005 ; Chiaramonte D., 2004)

Hmolyse extra-vasculaire

Elle sige dans le foie ou la rate. Elle conduit une chute de lhmatocrite 1 3 semaines aprs la
transfusion suite la production dallo-anticorps dans les 4 14 jours suivant la transfusion. Elle
conduit une inefficacit de la transfusion, un syndrome fbrile et un ictre quelques jours aprs la
transfusion. (Chabanne et al., 1994 ; Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Corlouer J-P., 2001 ; Bracker
K.E., Drellich S., 2005)

90
 3) Ractions non immunologiques immdiates et retardes

a) Effets immdiats

Hmolyse pr-transfusionnelle due des lsions rythrocytaires

Les globules rouges sont endommags suite des conditions de stockage inadquates (exposition des
tempratures extrmes, contaminations bactriennes, traumatismes physiques, dfaut dATP) ou une
administration sous pression excessive avec une fluidothrapie massive concomitante, un cathter de
diamtre trop faible ou lutilisation dune pompe perfusion. (Chabanne L. et al., 1994 ; Corlouer J-P.,
2001 ; Prittie J.E., 2003 ; Chiaramonte D., 2004) Ce type de raction nentrane pas ou peu de
symptmes mais nuit lefficacit de la transfusion. (Chabanne et al., 1994 ; Thbault A., 2005)

Surcharge volumique

Elle est secondaire une transfusion excessive et trop agressive. Lexistence dune pathologie cardio-
vasculaire ou rnale pr-existante augmente la sensibilit la surcharge volumique et donc le risque
dapparition dune dcompensation de laffection sous-jacente.
Une tachycardie, tachypne ou dyspne, de la toux prcdent souvent une insuffisance cardiaque
congestive. Elle se manifeste par une dtresse respiratoire, des muqueuses cyanoses, une turgescence
jugulaire, un jetage spumeux, des crpitants lauscultation pulmonaire. Pour ces receveurs risque, il
est conseill de garder un dbit d1mL/kg/h et de privilgier le concentr globulaire par rapport au
sang total. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Prittie J.E., 2003 ; Chiaramonte D., 2004)

Vomissements

Ils peuvent tre dus un dbit trop important (>10mL/kg/h) ou une ingestion daliment avant ou
pendant la transfusion. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Callan M.B. et al., 1996)

Hyperkalimie

Lhyperkalimie est due un dficit en ATP des rythrocytes qui conduit leur lyse et donc la
libration du potassium. Ce type de raction est rare moins dune insuffisance rnale ou dune
hyperkalimie pr-existante. (Chiaramonte D., 2004)

Hypocalcmie

Le citrate est un anticoagulant qui se lie au calcium prsent dans la poche pour viter la formation de
caillots. En cas de transfusion massive ou derreur dans la quantit danticoagulant ajoute, le citrate
peut chlater le calcium circulant et tre lorigine dune hypocalcmie avec toutes les anomalies
associes (tremblements, fasciculations voire convulsions, spasme laryng, hypotension, anomalies de
lECG). Le risque existe surtout chez les insuffisants hpatiques car le citrate est rapidement
mtabolis en bicarbonate dans le foie chez les individus normaux. (Griot-Wenk M.E., Giger U.,
1995 ; Corlouer J-P., 2001)

91

Micro-embolies pulmonaires (thrombi ou air)

Elles se manifestent par une tachypne et de la dyspne.

On retrouve des micro-thrombi quand les leucocytes, les plaquettes et la fibrine forment des micro-
agrgats dans le sang juste aprs la collecte. Ils sont normalement limins lors de ladministration
grce aux filtres intgrs dans les tubulures des kits de transfusion. Mais les micro-thrombi sont
parfois assez petits pour passer travers les filtres. Ils se logent dans les capillaires pulmonaires aprs
des transfusions massives. (Chabanne L. et al., 1994 ; Brownlee L. et al., 2000 ; Chiaramonte D.,
2004)

Choc septique / Choc endotoxinique

Cela est d une contamination bactrienne de la poche transfuse. La plupart du temps, les bactries
sont introduites au moment de la collecte du fait dune asepsie insuffisante du site de collecte ou des
mains de loprateur, du fait de lutilisation dun matriel de prlvement non strile ou encore cause
dune bactrimie chez le donneur. (Chabanne L.et al., 1994 ; Nol L., 1996) Le sang tant un
excellent milieu de culture pour les bactries, les bactries se multiplient ensuite au cours du stockage
la faveur dpisodes de rupture de la chane du froid. Les bactries les plus souvent impliques sont
des bactries Gram comme les Pseudomonas, Citrobacter, Yersinia, Serratia et certains coliformes.
Plusieurs bactries Gram sont capables dutiliser le citrate comme source de carbone pour se
multiplier et produire des endotoxines de basses tempratures (4C) et causent ainsi des chocs
septiques endotoxiniques. Mme un nombre rduit de bactries (10 50 bactries/mL de sang) peut
contaminer une unit de sang du fait de la croissance exponentielle des bactries en seulement
quelques jours. Les poches ne prennent pas toujours une coloration anormale quand elles sont
contamines. (Hohenhaus A.E. et al., 1997 ; Corlouer J-P., 2001)

Les signes cliniques sont de la fivre, une hypotension, une tachycardie, une polypne, de la diarrhe,
des vomissements, une douleur abdominale. Les analyses biologiques rvlent le plus souvent une
hypo ou une hyperglycmie, une leucocytose neutrophilique majeure et ventuellement une
hmoculture positive. La transfusion de sang contamin aboutit la mort du receveur dans 28% des
cas selon une tude sur 14 chats transfuss. Le risque de contamination des units de sang est plus
lev dans lespce fline que dans lespce canine du fait des faibles volumes collects, on utilise des
systmes de collecte ouverts. (Hohenhaus A.E. et al., 1997 ; Bartolo A., 2005)

b) Effets retards

Transmission dagents pathognes (Ehrlichia, Babesia, Leishmania, Mycoplasma, FeLV, FIV)

Les maladies transmissibles par transfusion ont t dtailles dans la partie concernant la gestion du
donneur. Il convient de raliser un dpistage systmatique de ces agents pathognes lors de la slection
des donneurs pour prvenir la transmission de maladie par transfusion.

92
 I. Conduite tenir en cas de raction transfusionnelle

Le premier geste est darrter la transfusion. On revrifie le groupage et le crossmatch. On examine la

poche la recherche de signe dhmolyse en centrifugeant du sang de la poche dans un tube
hmatocrite. (Prittie J.E., 2003)

1) Hmolyse intra-vasculaire

Le traitement consiste en une fluidothrapie, une oxygnothrapie voire des molcules vaso-actives
comme ladrnaline.
Ladministration de corticodes est controverse car ils nauront vraissemblablement pas deffets sur
les anticorps pr-existant mais ils ont leur place dans le cadre du traitement du choc. (Griot-Wenk
M.E., Giger U., 1995 ; Bartolo A., 2005 ; Pouderoux L. et al., 2007)

2) Raction fbrile non hmolytique

On peut administrer des anti-histaminiques et/ou des AINS pour rduire lhyperthermie si besoin.
(Bracker K.E., Drellich S., 2005)

3) Raction dhypersensibilit de type I

On ralisera une fluidothrapie et une oxygnothrapie selon la gravit du choc et on pourra

ventuellement administrer des anti-histaminiques (diphnhydramine 2 mg/kg), des corticodes
action rapide 2mg/kg en IV sil ny a pas damlioration voire de ladrnaline en IV de 0,02 0,2
mg/kg en cas de raction anaphylactique. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Bartolo A., 2005 ;
Bracker K.E., Drellich S., 2005; Thbault A., 2005)

4) dme aigu du poumon (OAP)

Il convient dadministrer du furosmide par voie intra-veineuse et de mettre lanimal sous oxygne
(Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Bartolo A., 2005)

5) Hypocalcmie

Le traitement consiste administrer du gluconate de calcium 10% sous surveillance ECG la

posologie de 1mL/kg IV lente sur 2 5 minutes. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Rozanski E., De
Laforcade A.M., 2004 ; Bartolo A., 2005)

6) Choc septique

Il faut retirer toutes les tubulures et cathters ayant servi ladministration du produit sanguin. Puis on
ralise des prlvements de sang et durine pour une mise en culture.
On maintient la fluidothrapie, on met en place une antibiothrapie par voie intra-veineuse et ralise
quilibrage de la glycmie. (Bartolo A., 2005 ; Pouderoux L. et al., 2007)

93
 Tableau 10 : Caractristiques des diffrentes ractions transfusionnelles et leur traitement
(Daprs Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Callan M.B. et al., 1996 ; Wardrop K.J. et al., 1997 ; Chiaramonte
D., 2004 ; Haldane S. et al., 2004 ; Bartolo A., 2005 ; Thbault A., 2005;)

Dlai Type de Mcanisme

Signes cliniques Traitement
dapparition raction dapparition

Fivre
Tachycardie / bradycardie
Arythmie cardiaque
Hypotension
Fluidothrapie
Raction Tachypne / bradypne ou apnes
Mdiation Oxygne
hmolytique Tremblements, convulsions
immune Molcules vaso-actives
intra-vasculaire Vocalises, agitation / abattement,
Corticodes
Vomissements
Incontinence fcale et urinaire
Hypersalivation
Hmoglobinurie / hmoglobinmie

Raction fbrile
Mdiation Hyperthermie
non
immune Parfois vomissements et tachypne
hmolytique
Fivre
Tachycardie,
Fluidothrapie
Raction Tachypne, dyspne
Mdiation Corticodes et/ou anti-
Immdiat dhypersensibili Extrmits froides
immune histaminiques
t de type I Urticaire, prurit, rythme
Adrnaline
dme facial
Vomissements
Tachycardie ou bradycardie
Transfusion
Tachypne ou dyspne
Surcharge excessive Furosmide
dme pulmonaire : toux, dtresse
volumique et/ou Oxygne
respiratoire, muqueuses cyanoses,
trop rapide
jetage spumeux
Hyperthermie
Tachycardie Antibiotiques par voie
Choc septique Contamination
Tachypne IV
Sepsis bactrienne
Hypotension, choc Fluidothrapie
Diarrhe, vomissements
Tremblements, fasciculations voire
Chlation du
Hypocalcmie convulsions Gluconate de calcium
calcium par le
Arythmie cardiaque 10%
citrate
Vomissements
Micro-
Micro-embolies
agrgats dans
pulmonaires
le sang stock

Purpura post- Mdiation Ptchies

Retard transfusionnel immune Thrombopnie svre

Hmolyse extra- Mdiation

Diminution de lhmatocrite
vasculaire immune

94
 J. Prvention des ractions transfusionnelles

Aucune preuve nexiste que ladministration de diphenhydramine (0,5mg/kg), un anti-H1 associ de

lactominophne ou de la dexamethasone (0,25mg/kg) avant la transfusion prviennent ou rduisent
les signes dune raction hmolytique aigue. De plus, ces molcules ne sont pas dnues de toxicit.
Cest pourquoi une prmdication avec ces molcules nest pas recommande en mdecine
transfusionnelle humaine. (Giger U., 1995 ; Geiger T.L., Howard S.C., 2007)

Les produits sanguins seront toujours prfrs au sang total afin de limiter lexposition des lments
sanguins non ncessaires au traitement et qui pourraient induire une raction transfusionnelle.
(Chiaramonte D., 2004)

1) Contrle des poches

Le contrle des poches ne permet pas toujours de dtecter une contamination des produits sanguins.
Tout dabord, les poches contamines ne prsentent pas systmatiquement une anomalie de la
coloration de la poche. Le changement de coloration provient de la dsoxygnation, de lhmolyse et
de la formation dhmoglobine qui peuvent tre secondaires la croissance bactrienne. De plus les
cultures bactriennes ncessitent plusieurs jours avant dobtenir les rsultats, elles peuvent donner des
rsultats faussement ngatifs si le nombre de bactries est faible. Un examen du frottis sanguin ne
permettra de dtecter que les contaminations massives. Toute anomalie de la poche, de la texture, etc.
doit conduire carter la poche. (Hohenhaus AE et al., 1997)

2) La rduction leucocytaire (ou leucorduction)

Principe

La rduction leucocytaire par filtration est une technique base sur la rtention des leucocytes par un
triage mcanique, ladsorption des leucocytes sur le filtre, ladhsion indirecte lie linteraction entre
les plaquettes et les leucocytes.
Les filtres sont utiliss soit avant le stockage des produits sanguins, soit au chevet de lanimal malade
aprs stockage des produits. La filtration des leucocytes est facilite aprs rfrigration du sang total
4C : elle est 2 fois plus rapide et plus efficace. Cependant, le fait que la filtration soit lente est
rechercher car cela gnre moins de force de frottement. (Brownlee L. et al., 2000)

Technique

Le filtre en polyester est intgr dans la tubulure. On suspend la poche pour permettre la tubulure de
se dployer sur toute sa longueur. On casse le coupe-circuit afin de laisser le sang scouler
travers le filtre jusqu la poche satellite. (Brownlee L. et al., 2000)

Intrts de la rduction leucocytaire :

-viter lallo-immunisation vis vis des leucocytes et des plaquettes (via le retrait des cellules
prsentatrices des antignes du donneur) qui peut tre prjudiciable lors de transfusions multiples. Le
dveloppement danticorps vis vis des plaquettes peut engendrer une destruction prcoce non

95
seulement des plaquettes transfuses mais parfois aussi celles du receveur et donc un risque de
saignement accru. (Brownlee L. et al., 2000 ; Slichter S.J. et al., 2005)
-prvenir la libration par les leucocytes des mtabolites comme les cytokines, lhistamine, la
srotonine, la protine cationique osinophilique, llastase et la phosphatase acide qui induiraient des
ractions transfusionnelles et augmentent le pourcentage dhmolyse des hmaties stocks (Nielsen HJ
et al., 1997 ; Brownlee L. et al., 2000)
-prvenir une raction anaphylactique (Wurm K. et al., 2008)
-empcher la transmission dagents pathognes parasitant les leucocytes (Prittie J.E., 2003 ; Wurm K.
et al., 2008)
-prvenir les thrombo-embolies qui surviennent frquemment chez les chiens transfuss. Une
corrlation a pu tre tablie entre des transfusions multiples et une thromboembolie chez un chien avec
une anmie hmolytique mdiation immune. Juste aprs la transfusion, les leucocytes et les
plaquettes forment dans le sang stock, des micro-agrgats assez petits pour passer au travers des
filtres des kits dadministration puis aller se loger dans les capillaires pulmonaires. (Brownlee L. et al.,
2000)

Toutefois, mme le plasma filtr comprend des rsidus cellulaires qui peuvent probablement tre
lorigine dune immunisation. La probabilit que le plasma contienne des cellules et fragments
cellulaires est de 80% pour du plasma ayant subi seulement une centrifugation ; elle est infrieure
15-20% pour du plasma centrifug puis filtr. (Wurm K. et al., 2008)

En ce qui concerne le cot, un systme de collecte permettant la rduction leucocytaire occasionne un

surcot de 50% par rapport un systme de collecte poches multiples classique. (Brownlee L. et al.,
2000)

96
IV. Contrle qualit

La scurit transfusionnelle sobtient dune part par le respect des bonnes pratiques transfusionnelles
par lensemble du personnel, dautre part, par des contrles de la qualit des produits tous les
niveaux de leur laboration : en amont de la transfusion lors de la collecte par lenregistrement des
produits et les diffrents tests biologiques sur les prlvements, au cours de la transfusion et en aval
(contrle externe des produits). (Vachey L., 1997)

A. Intrt des bonnes pratiques

Lintrt dlaborer et de respecter des bonnes pratiques est dhomogniser les mthodes de travail et
dtablir lordre dexcution des diffrentes tapes pour viter des erreurs ou des oublis. (Hergon E.,
1998)

Les bonnes pratiques mettent laccent sur 4 tapes cls :

- la slection et le prlvement des donneurs (examen clinique pr-transfusion systmatique, asepsie
lors de la collecte, tiquetage du prlvement, traabilit)
- le contrle de la qualit des prlvements sanguins
- la prparation des produits sanguins (viter les contaminations bactriennes et pratiquer une bonne
gestion des circuits).
- la distribution des produits sanguins labors. (Vachey L., 1997)

Il faut galement assurer une formation adapte au personnel (les ASV notamment) afin quil soit
mme de respecter les bonnes pratiques. Par exemple, il doit tre sensibilis limportance de la
dsinfection rigoureuse du site de ponction du donneur, du contrle des poches au cours du stockage,
de la surveillance du receveur la recherche des signes dune raction transfusionnelle

B. Traabilit

Il convient denregistrer pour chaque transfusion lunit utilise et le donneur dont elle provient ainsi
que le receveur ayant bnfici de la transfusion. Cela pourra par exemple faciliter la recherche des
diffrents receveurs si lon se rend compte que le donneur est porteur dun agent infectieux. (Wardrop
K.J.et al., 2005)

Le dossier du donneur doit contenir le nom de lanimal, son poids, son groupe sanguin, les
coordonnes du propritaire, les dates programmes des tests de dpistage des maladies et les dates de
collecte de sang avec lexamen pr-transfusion, les rsultats de la visite annuelle (examens cliniques,
NF, biochimie) les problmes ventuels survenus et le ct de la veine jugulaire utilise lors de
chaque collecte. Il est trs important denregistrer toutes les pathologies intercurrentes du donneur.
Cela permet par exemple de rechercher les receveurs ou dtruire les poches non transfuses dun
donneur ayant dvelopp une noplasie entre temps lorsquon suspecte une transmission au receveur
de cellules tumorales embolises pendant la transfusion. Cela peut aussi tre utile si lon dcouvre

97
quun donneur est porteur dun agent pathogne pour prvenir le risque de transmission de maladies
infectieuses en dtruisant les poches ou pour mettre en place prcocement le traitement chez le
receveur. (Bcheler J. et al., 1993 ; Feldman B.F, Sink C.A., 2003 ; Lucas R.L. et al., 2004)

Le dossier de transfusion doit fournir les informations telle la date de la transfusion, le type de produit
sanguin utilis, le type de poche utilis (anti-coagulant, date de premption de la poche, addition dune
solution nutritive) le groupe sanguin et le volume de sang transfus, le donneur, le receveur,
lindication de la transfusion, le rsultat du crossmatch et les ventuels problmes rencontrs
(ractions transfusionnelles).

Le dossier du receveur doit mentionner la ralisation dune transfusion chez cet animal pour que
toutes les prcautions (groupage sanguin, crossmatch) soient prises en cas de deuxime transfusion.
(Bcheler J. et al., 1993)

C. Apport de linformatique

Linformatisation peut apporter un supplment de scurit quant la traabilit.

Etant donne la dangerosit potentielle du sang et des produits sanguins, leur manipulation implique
un contrle rigoureux, une surveillance et une traabilit tous les niveaux, de la collecte la
transfusion du receveur en passant par la prparation et le stockage des produits sanguins et les tests
pr-transfusion. Parmi les erreurs conduisant un accident transfusionnel en mdecine humaine, celles
qui ont lieu au moment de ladministration des produits sanguins sont les plus frquentes, suivies des
erreurs concernant les prlvements, les tests de laboratoire y compris les crossmatch et linventaire
des stocks des produits sanguins.

Linformatisation et lutilisation dautomates permet de scuriser chacune des tapes cls en facilitant
la mise en uvre de la traabilit et de larchivage des donnes. En cas daccidents transfusionnels, on
pourra entreprendre des enqutes rtrospectives. Lutilisation dautomates pour les analyses sanguines
et de lecteurs de codes barres pour le choix de la poche transfuser permet dviter les erreurs
humaines introduites lors de la saisie manuelle des donnes par exemple. (Li B.N. et al., 2007)

D. Scurit transfusionnelle et hmovigilance

Les questions de scurit transfusionnelle se posent pour les problmes dincompatibilit

transfusionnelle, dallo-immunisation, de transmission dagents infectieux du donneur au receveur
entre autres. Cest pourquoi lacte transfusionnel doit tre pratiqu de manire raisonne et lon doit
ny recourir que dans des indications trs prcises. (Smith C.A., 1991)

Lhmovigilance consiste recueillir et analyser les donnes relatives aux effets secondaires de la
transfusion de produis sanguins chez le receveur.

Il faut enregistrer tous les accidents transfusionnels survenus, mme les plus mineurs, comme cest le
cas au CNITV (Centre National dInformation sur les Toxiques Vtrinaires) pour les intoxications et

98
effets secondaires des mdicaments. Cela permet davoir une ide plus prcise de leur prvalence, des
facteurs de risque, des tapes cls et ainsi de prvenir ces accidents en laborant ou en rvisant le
guide des bonnes pratiques de la transfusion. Ainsi, si on enregistre un accident li un mauvais
stockage, on vrifie les autres poches stocks dans le mme rfrigrateur ; si on enregistre un accident
li une transmission dun parasite ou dun germe bactrien, on vrifie les poches provenant du mme
donneur. (Rouger P., Hergon E., 1998)

E. Critres de qualit

1) Critres de slection des donneurs

Il convient de slectionner rigoureusement les donneurs, notamment vis--vis de leur statut sanitaire.

2) Critres de qualit de la collecte de sang

Le prlvement de sang doit tre ralis en 4 10 minutes selon lAssociation amricaine de banques
de sang.
La prsence de contusions/hmatomes au niveau du site de prlvement est un point important auquel
les propritaires de donneurs accordent de limportance.
Il peut tre intressant pour mieux valuer la qualit de la collecte de faire remplir aux propritaires de
donneur un questionnaire de satisfaction. (Feldman B.F, Sink C.A., 2003)

3) Contrle bactriologique du produit sanguin

Il existe diffrentes mthodes pour mettre en vidence des bactries dans les produits sanguins :
lexamen direct par coloration de Gram est une mthode simple qui permet didentifier les bactries
partir de 104 a l05 CFU/ml. La mise en culture laide dautomates a une meilleur sensibilit (102
CFU/ml) mais prsente linconvnient dtre un procd coteux et long mettre en uvre. Plusieurs
quipes ont tent de mettre au point des tests rapides ralisables au chevet de lanimal base sur une
reconnaissance par des anticorps spcifiques de certaines bactries, la dtection du dgagement du
CO2 par un indicateur color sur la poche ou encore le dosage du glucose contenu dans la poche, le
glucose tant consomm en cas de croissance bactrienne. Pour tre pertinent, lexamen
bactriologique doit tre ralis le plus prs possible de la transfusion.
Du fait de la faible frquence des accidents transfusionnels lis une contamination bactrienne des
poches (infrieure 0,1% sur des poches de concentrs plaquettaires en cours de stockage) et de la
difficult dinterprtation du rsultat lors de mise en vidence de germes de la flore cutane, ces
examens bactriologiques prsentent un intrt limit et ne sont pas ralis en routine en mdecine
humaine.

Par contre, en cas daccident transfusionnel de type hyperthermie dorigine indtermine ou choc
septique, il faut imprativement raliser un examen direct la recherche de bactrie, une hmoculture
et un ensemencement de milieux de culture aussi bien du produit sanguin transfus que du sang du
receveur. Cela permettra de mettre en place prcocement une antibiothrapie et danalyser voire retirer
99
les produits sanguins issus du mme donneur, prlevs par le mme oprateur ou collects sur le
mme lot de poche. (Nol L., 1996)

F. Contrles-qualit chaque tape de la transfusion

1) Pendant la phase de collecte.

En mdecine humaine, les centres de transfusion en Grande-Bretagne ralisent des contrles-qualit de

lantisepsie cutane par couvillonnage ou par application de glose-contact sur la zone de ponction
avant et aprs la collecte. Cela permet didentifier et corriger les gestes inadquats des oprateurs qui
contaminent le site de ponction. (Nol L., 1996)
Lautre point-cl est la vrification de la poche de collecte, notamment lintgrit de son emballage, sa
date de premption et la nature de lanti-coagulant utilis.

2) Pendant la phase de conservation

Produits contenant des globules rouges

Il faut contrler scrupuleusement la temprature des rfrigrateurs ddis au stockage et viter de les
ouvrir trop souvent. Les units de sang ne doivent en aucun cas tre retires du rfrigrateur si ce nest
en vue dtre utilises. Une unit de sang total 1C se retrouve plus de 6C en moins de 30 minutes
temprature ambiante.
Toute couleur ou texture anormales comme un surnageant gris, violet, brun ou rouge, des cellules
sanguines prises en masse, de caillots, une diffrence de couleur entre le contenu des segments de
tubulure et le contenu de la poche elle-mme ou du sang au niveau des ports de sortie de la poche doit
alerter le personnel quant la prsence dune contamination ventuelle du produit sanguin. (Schneider
A., 1995)

Produits plasmatiques congels

Les deux incidents majeurs sont la dconglation intempestive et la fuite suite la rupture des poches.

Toute dconglation dune dure inconnue est susceptible de saccompagner dune nette diminution de
la teneur en facteurs de coagulation labiles. Il existe des astuces pour se rendre compte que la poche a
subi une dconglation. Il suffit de retourner la poche une fois compltement congele : sil y a une
dconglation, les bulles dair dans la poche se dplaceront vers le haut de la poche ; la poche est plus
fine en bas de la poche. Lautre solution consiste entourer dun lastique en caoutchouc afin de crer
une chancrure. Aprs conglation, on retire llastique. Si la poche se dcongle, lchancrure se sera
estompe ou aura disparu.

100
 Persistance de lchancrure
Respect de la chane du froid

Elastique en
caoutchouc

Disparition de lchancrure
Rupture de la chane du froid

Figure 48 : Astuce pour contrler le respect de la chane du froid

Pour viter que les poches de plasma congel ne se brisent, il est recommand de les emballer dans du
papier bulle, de les stocker dans des cartons et de les manipuler prcautionneusement. En effet, le
plastique qui constitue la poche est trs fragile une fois congel. Il faut attendre que la dconglation
soit termine avant de vrifier lintgrit de la poche et de rechercher des flures ou des fuites. Les
units abmes doivent tre jetes. (Schneider A., 1995 ; Feldman B.F, Sink C.A., 2003)

3) Pendant la phase dadministration du produit sanguin

Le monitorage des receveurs doit tre fait trs scrupuleusement. Il peut tre utile de faire signer aux
propritaires des receveurs une attestation de consentement mentionnant les diffrents risques lis la
transfusion sanguine et indiquant que les vtrinaires et banques de sang ne garantissent pas labsence
dagent infectieux dans les produits sanguins. (Wardrop K.J.et al., 2005)

G. Accrditation des structures vtrinaires

Il serait bon que les cliniques pratiquant la transfusion soient agres par des associations prives ou
des institutions officielles et quelles soient inspectes rgulirement par une autorit indpendante
pour vrifier quelles appliquent bien les bonnes pratiques de la transfusion. La certification de
ltablissement pourra tre affiche dans la salle dattente par exemple lattention des clients
propritaires danimaux donneurs ou receveurs. Cela reprsente un gage de srieux et de comptence
la clientle et facilite la relation de confiance. (Hergon E., 1998)
Dans les pays anglo-saxons, les structures vtrinaires peuvent demander une accrditation de la part
dorganisations vtrinaires (tels lAmerican Animal Hospital Association ou AAHA, le Royal
College of Veterinary Surgeons ou RCVS). Ces associations imposent aux cliniques qui veulent
recevoir une accrditation un certain nombre de standards en matire dquipement et de comptences
du personnel dont quelques-uns concernent la mdecine transfusionnelle. Par exemple, les structures
vtrinaires doivent avoir accs en permanence du sang frais, du plasma congel, du cryoprcipit et
de loxyglobine de chien et de chat et utiliser ces produits bon escient. (Chamard V., 2009) [De Luca
L., 2005b]

Aux Etats-Unis, les banques de sang prives doivent obtenir une licence auprs du dpartement dEtat
de la FDA pour avoir le droit de vendre du sang [Dodds J., 2008]

101
 ANNEXE : LES GROUPES SANGUINS

1) Chez le chien

On dnombre chez le chien 8 groupes sanguins, sachant quun mme individu peut prsenter plusieurs
groupes. Dans la nomenclature actuelle, les groupes sanguins sont numrots de 1 8 et prcds des
initiales DEA comme Dog Erythrocyte Antigen. Le groupe DEA 1 prsente 3 allles : DEA 1.1, DEA
1.2 et DEA 1.3. Pour les autres groupes sanguins, les hmaties sont positives ou ngatives pour tel ou
tel groupe sanguin (DEA 4+ ou DEA 4-). (Giger U et al.,1995) On dispose de sera de groupage pour
seulement 5 groupes sanguins. (Hohenhaus A.E, 2004). Il semblerait quil existe un groupe sanguin
supplmentaire identifi en 2007 par lquipe de Marie-Claude Blais baptis Dal. Les hmaties de
certains dalmatiens seraient dpourvues de cet antigne et ces derniers seraient susceptibles dtre
exposs une raction hmolytique immdiate ou retarde en cas de transfusion incompatible.

Caractristiques gntiques

Les groupes sanguins sont transmis selon un mode autosomal dominant de manire indpendante les
uns des autres.(Hale A.S, 1995)
Lantigne DEA 1 prsente plusieurs allles tels que DEA 1.1 > DEA 1.2 > DEA 1.3 > DEA 1
ngatif. Un chien peut tre DEA 1.1 positif ou ngatif et seul un chien DEA 1.1 ngatif peut tre DEA
1.2 positif ou DEA 1.2 ngatif. (Giger U. et al., 2005) Le mode de transmission de ces allles est
autosomal rcessif (Hohenhaus A.E, 2004). Lallle DEA 1.3 est dcrit uniquement en Australie sur
des Bergers Allemands (Symons M., Bell K., 1991) Un chien ne peut prsenter quun seul des 4
phnotypes comme le montre le tableau ci-dessous. (Hale A.S, 1995)

Tableau 11 : Tableau de correspondance entre le phnotype et les diffrents gnotypes possibles

Phnotypes Gnotypes possibles

1.1 1.1/1.1, 1.1/1.2, 1.1/1.3, 1.1/-
1.2 1.2/1.2, 1.2/1.3, 1.2/-
1.3 1.3/1.3, 1.3/-
Ngatif -/-

Caractristiques biochimiques

La structure chimique des antignes spcifiques de chaque groupe sanguin na pas t identifie ce
jour mais la nature des glycolipides de surface des rythrocytes a t dtermine et pourrait tre lie
tel ou tel groupe sanguin. Il sagit de sphingoglycolipides contenant des rsidus dacide sialique. Les
chiens de race dorigine europenne ont lacide N-actylneuraminique. (Hohenhaus A.E, 2004)

102

Prvalence des groupes sanguins dans la population
Tableau 12 : Prvalence des groupes sanguins dans l'espce canine aux Etats-Unis et en France
(Daprs Hale A.S., 1995 ; Bendali-Ahcne S. et al., 1998) [Hale A.S., 2003]

Groupes sanguins
Prvalence dans la population Prvalence dans la population
(nomenclature
(Etats-Unis) (France)
actuelle)
DEA 1.1+ 42% 55% 53,1%
DEA 1.2+ 20% 3,1%
DEA 1.3+ 0,5%
DEA 3+ 3,6%
DEA 4+ 98%
DEA 5+ 23%
DEA 6+ 98-99%
DEA 7+ 45% 0%
DEA 8+ 40%

Les allo-anticorps

Les allo-anticorps sont des immunoglobulines de la classe IgG et IgM. Tous les allo-anticorps sont des
agglutinines mais les anticorps anti-DEA 1.1 sont retrouvs comme hmolysines des titres plus
levs quelles le sont comme agglutinines. (Giger U., 1995)

o Allo-anticorps naturels

Chez environ 15% de la population, on retrouve des allo-anticorps naturels contre certains antignes
de groupe sanguin (DEA 3, DEA 5 et DEA 7) des titres faibles (infrieurs 1/8). Cependant, ces
anticorps naturels nentranent pas de relles complications. En effet, ils provoquent une destruction
extra-vasculaire retarde des hmaties dans les 72 heures post-transfusion mais pas dhmolyse.
(Swisher S.N., Young L.E., 1961 ; Chabanne L. et al., 1994 ; Hale A.S., 1995 ; Belin P.H., 1999) Par
consquent, ces ractions retardes ne posent problme que si les capacits de rgnration
rythrocytaire du receveur sont dfaillantes.

Labsence danticorps naturels ayant des consquences cliniques implique dune part, quun
crossmatch entre deux chiens nayant jamais t transfuss conduit toujours un rsultat compatible,
dautre part quune premire transfusion ne peut pas tre lorigine dune raction transfusionnelle
aigu. (Giger U. et al., 1995).

103
 IgM

GR GR

IgG

Figure 49 : Schma dune agglutination entre deux globules rouges (GR) lis par des immunoglobulines
(Ig) de la classe G et M spcifiques des antignes rythrocytaires

o Allo-anticorps induits

Il faut quil y ait contact anticorps-antigne via une transfusion pour que le sujet dveloppe des allo-
anticorps contre un autre groupe sanguin que le sien.
Ces allo-anticorps apparaissent entre 4 et 14 jours aprs la transfusion du sang dun donneur positif
pour un ou plusieurs groupes sanguins un receveur ngatif. (Giger U., 1997)

Tableau 13 : Raction transfusionnelle et signes cliniques associs en fonction du groupe sanguin

(Daprs Hohenhaus A.E., 2004 ; Hale A.S., 1995)

Groupe Raction transfusionnelle provoque par les

Signes cliniques associs
sanguin anticorps induits

DEA 1.1 Hmolyse aigu svre Svres

DEA 1.2 Faible agglutination Inapparents svres

Pas dhmolyse in vitro mais raction retarde : Pas de consquence si les

rduction de la dure de survie des hmaties capacits de rgnration
DEA 3, 5 et 7
transfuses et squestration des hmaties dans la rate et des hmaties sont
le foie. correctes

DEA 4 Pas de raction Aucun

DEA 6 et 8 Inconnue Inconnus

Aucune tude nest disponible ce jour sur les chiens DEA 1.3 ngatif et les consquences dune
transfusion incompatible pour ce groupe mais daprs les constatations dAnne Hale, cet antigne
serait faiblement immunogne. [Hale A.S., 2003]

104

Donneur universel

Au sens strict, le donneur canin universel est un chien qui est ngatif pour les groupes DEA 1.1, 1.2,
DEA 3, DEA 5, DEA 7 et positif pour le groupe DEA 4. En effet, comme 98% des chiens sont positifs
pour ce groupe, il serait trop difficile de trouver des chiens ngatifs pour le groupe DEA 4 (2%
seulement). Cependant, des ractions hmolytiques svres vis vis du groupe DEA 4 ont t
rapportes dans la littrature. (Melzer K.J., 2003) Certains nexcluent pas les chiens DEA 7 + du pool
de donneurs. En pratique, on ne peut pas se permettre de se montrer aussi slectif. Cela liminerait
trop de donneurs potentiels : daprs Jean Dodds, il y aurait 1 donneur universel pour plus de 1000
donneurs potentiels et parmi ceux-ci, seulement 33 40% dentre eux seront slectionns aprs les
tests de dpistage des maladies infectieuses. [Dodds J., 2005a] Il semblerait que la prvalence des
donneurs universels soit corrle la prvalence de certaines races : on retrouverait plus de donneurs
universels parmi les Greyhounds, pitbulls et boxers. [Crawford C., 2005a] De plus, le cot dune
transfusion deviendrait prohibitif si lon devait typer le donneur vis vis de tous les antignes canins.
On utilise des chiens ngatifs pour le groupe DEA 1.1. Les donneurs positifs pour le groupe DEA 1.1
ne pourront tre utiliss que pour un donneur positif pour DEA 1.1. (Hohenhaus A.E, 2004 ; Giger,
1997) On peut aussi faire un compromis en utilisant les donneurs universels pour produire du sang
frais total et des concentrs globulaires alors que les autres donneurs serviront fabriquer du plasma.

En pratique, pour la transfusion, nous devons nous soucier des groupes sanguins les plus antigniques
savoir DEA 1.1 et DEA 1.2 qui sont responsables dune raction transfusionnelle dhmolyse aigu
en cas de transfusion incompatible.

2) Chez le chat
Le systme des groupes sanguins flins comporte trois groupes : le groupe A pour lequel les hmaties
portent lantigne A, le groupe B pour lequel les hmaties portent lantigne B et le groupe AB pour
lequel les hmaties portent les antignes A et B. Cette nomenclature a t tablie en 1962. (Eyquem et
al, 1962) A ce jour, le groupe O (des hmaties ne portant aucun des antignes A et B) nest pas dcrit.
(Knottenbelt CM et al., 1999)
Une tude rcente suggre quil existe un autre antigne rythrocytaire appel Mik. Les chats
dpourvus de cet antigne produiraient naturellement des anticorps anti-Mik qui pourraient tre
lorigine dune raction dhmolyse aigu en cas de transfusion incompatible. (Weinstein N.M. et al.,
2007)

Caractristiques gntiques

La transmission des groupes A et B se fait selon le mode autosomal par des gnes codant pour le
groupe A et B situs sur le mme locus avec A > B. (Giger U., 1991)
Il existerait un troisime allle AB tel que A > AB > B. (Griot-Wenk M.E., 1996 ; Ann E. Hohenhaus
A.E., 2004)

Caractristiques biochimiques

Les antignes sont des gangliosides composs de rsidus dacide sialique constitus pour le groupe A
de lacide N-glycolylneuraminique ainsi que de lacide N-actylneuraminique en quantit plus faible

105
et variable en fonction du statut homozygote ou htrozygote de lindividu du groupe A, pour le
groupe B de lacide N-actylneuraminique uniquement. Lacide glycolylneuraminique tant synthtis
partir de lacide N-actylneuraminique par une hydroxylase, cela suggre que les chats du groupe B
sont dpourvus cette hydroxylase. (Furukawa K. et al., 1988 ; Knottenbelt C.M., 2002 ; Hohenhaus
A.E., 2004). Les chats du groupe AB sont porteurs des deux acides neuraminiques dans des
proportions variables en fonction des individus. (Griot-Wenk M.E., Giger U., 1995 ; Knottenbelt
C.M., 2002)

NeuGc NeuGc Glu Glu C

Ga Ga Ga
Groupe A 8 2
et

NeuAc NeuGc Glu Glu C

Ga Ga Ga
8 2

Groupe B NeuAc NeuGc

Ga Ga Ga Glu Glu C
8 2

hydroxylase
NeuAc NeuGc

NeuGc : acide N-glycolylneuraminique liaison 2

NeuAc : acide N-actylneuraminique liason 1
Ga : galactose
Glu : glucose
C : cramide

Figure 50 : Schma de la composition chimique des antignes rythrocytaires flins

Prvalence des diffrents groupes sanguins

Le groupe A est le groupe le plus reprsent dans la population fline mondiale : 99% des chats
domestiques aux Etats-Unis sont du groupe A. Toutefois, on observe de grandes disparits de la
prvalence des diffrents groupes selon quil sagit de chats de race ou non.

La prvalence du groupe B est plus importante chez le British Shorthair, lAbyssin, le Persan, le
Turkish Van ou encore lAngora Turc. (Hohenhaus A.E., 2004 ; Arikan S et al, 2003) Cela aura des
consquences pratiques lorsquon a besoin dun donneur du groupe B : on le cherchera dabord parmi
les chats de race. Si lon veut un donneur du groupe A, on le cherchera en priorit chez un chat de
type europen ( poil court). Cependant aucune tude nest disponible en France sur la prvalence des
groupes sanguins en fonction des races. Il faut donc rester prudent car les pools gntiques des chats
de race peuvent diffrer selon le pays dorigine. La prvalence du groupe B varie galement en
fonction de la zone gographique : en France Paris, elle tait estime 15% alors quelle tait
value 26% en Australie (Eyquem et al, 1962), 7,9 % des chats europens en Angleterre
(Knottenbelt CM et al., 1999)

106
 Tableau 14 : Frquence des groupes A et B chez les chats de race aux Etats Unis
(Giger U et al., 1991 ; Giger U., 1997)

Frquence des chats Frquence des chats de

Chats de race
de groupe A groupe B
Siamois, Oriental Shorthair, Burmese, Tonkinois
100% 0%
et Bleu Russe
Maine Coon, Chat des forts norvgien 95% 5%
Abyssin, Himalayan, Birman, Persan, Somali et
80-95% 5% - 25%
Sphinx
Devon Rex, British Shorthair 50-75% 25% - 50%

Les allo-anticorps

Contrairement aux chiens, les chats possdent naturellement des allo-anticorps naturels. Ces anticorps
sont transmis par la mre aux chatons via le colostrum dans les 16 heures qui suivent la naissance et
tous les chatons du groupe B dveloppent des allo-anticorps lge de quelques semaines. (Griot-
Wenk M.E. et al, 1995)
Parmi les individus du groupe B, 70% possdent naturellement des anticorps anti-A des titres
susceptibles dinduire une svre hmolyse aigu et de rduire considrablement la dure de vie des
hmaties. 35% des individus du groupe A ont des anticorps anti-B mais des titres trop faibles pour
induire une raction transfusionnelle proprement parler. (Auer L., Bell K., 1981)
Les individus du groupe AB, quant eux ne possdent pas dallo-anticorps naturels. (Bcheler J.,
Giger U., 1992)
Lanticorps anti-A est une hmagglutinine et une hmolysine, il est prsent des titres levs chez les
chats du groupe B. Il sagit majoritairement dune immunoglobuline de la classe M, mais on rencontre
aussi la classe G. (Wilkerson MJ et al, 1991 ; Bcheler J., Giger U., 1993) Ces allo-anticorps peuvent
fixer et activer le complment. (Auer L, Bell K 1983) Au contraire, les anticorps anti-B des chats du
groupe A sont de faibles agglutinines de la classe IgM et de faibles hmolysines de la classe IgM et
IgG en proportions gales. (Bcheler J., Giger U., 1993)

Tableau 15 : Correspondance entre les diffrents phnotypes, gnotypes et types d'anticorps produits
(Daprs Carr I.M, 2001)

GLOBULES ROUGES ANTICORPS

Phnotype Gnotype Type Frquence Titre

A A/A ou A/B Anti-B Rare Bas
B B/B Anti-A leve Elev
AB AB/AB ou AB/B Aucun Nulle 0

Du fait, de lexistence danticorps naturels dans lespce fline, il faudra toujours grouper les chats
donneurs et receveurs avant toute transfusion afin de prvenir une raction dhmolyse aigu.

107
108
 CONCLUSION

En labsence de confrence de consensus ou de recommandations pratiques cliniques dans le cadre de

la transfusion sanguine chez le chien et le chat, ce travail se fait lcho des initiatives de lAVHTM
(Association of Veterinary Hematology and Transfusion Medicine) en ce domaine. Relays par
internet, les changes entre membres de lassociation intervenants dans le processus transfusionnel
chez lanimal ont permis une assez large concertation. Au cours de ce type de forum, les membres ont
ainsi pu partager leurs expriences et leur savoir-faire en matire de transfusion chez les animaux de
compagnie sur des thmes aussi varis que le choix des donneurs, les diffrents tests de groupage
sanguin, les protocoles anesthsiques utiliss lors de la collecte de sang, la dure de conservation des
produits sanguins... Sils nont pas abouti pour lheure la publication et la diffusion dun guide de
bonnes pratiques, ils ont permis lbauche dun certain nombre de recommandations pratiques
cliniques que nous rapportons dans ce travail.

A dfaut davoir trouv des lments suffisants dans ces changes de courriers lectroniques, les
recommandations pratiques prsentes dans ce travail sappuient galement sur une analyse critique de
la littrature rcente consacre ce sujet, en tenant compte des particularits propres lexercice
vtrinaire en France, parfois assez loignes de conditions dexercice en Amrique du Nord.

Ce travail contribue ainsi la diffusion des connaissances et leur actualisation, dans le but de
favoriser une plus large et une meilleure pratique de la transfusion sanguine chez le chien et le chat.

109
110
 BIBLIOGRAPHIE

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CHAPUIS Delphine
TRANSFUSION SANGUINE CHEZ LE CHIEN ET LE CHAT : BONNES
PRATIQUES ACTUALISEES DAPRES LES RECOMMANDATIONS DE
LAVHTM (ASSOCIATION OF VETERINARY HEMATOLOGY AND
TRANSFUSION MEDICINE)

Thse Vtrinaire : Lyon, le 18 dcembre 2009

RESUME :
Ce travail se fait lcho des initiatives de lAVHTM dans le domaine de la transfusion sanguine
chez le chien et le chat. Relays par internet, les changes entre membres de lassociation
intervenants dans le processus transfusionnel chez lanimal ont permis une assez large
concertation et lbauche dun certain nombre de recommandations pratiques cliniques. A dfaut
davoir trouv des lments suffisants dans ces changes de courriers lectroniques, les
recommandations pratiques prsentes ici sappuient galement sur une analyse critique de la
littrature rcente consacre ce sujet, en tenant compte des particularits propres lexercice
vtrinaire en France. Ce travail contribue ainsi la diffusion des connaissances et leur
actualisation, dans le but de favoriser une plus large et une meilleure pratique de la transfusion
sanguine chez le chien et le chat.

MOTS CLES :
- Transfusion
- Produit sanguin
- Chien
- Chat
- Hmatologie

JURY :
Prsident : Monsieur le Professeur Dominique CHASSARD
1er Assesseur : Monsieur le Professeur Luc CHABANNE
2me Assesseur : Madame le Professeur Jeanne-Marie BONNET-GARIN

DATE DE SOUTENANCE :
18 Dcembre 2009

ADRESSE DE LAUTEUR :
11 rue Madeleine Renaud
69740 GENAS

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