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AUTORES
Mara Teresa Griselda Fuentes Lara
Esperanza Jimnez Castaeda
Juana Rosado Prez
Estela Valencia Platas
COLABORADORES
Adrin Flores Barrera
Guadalupe Nlida Ortega Soto
Javier de Jess Pin Ortega
Karina de los Santos Mendoza
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A Manera de Prlogo
2
Generalmente esta parte la escribe una persona reconocida en el mbito a tratar en
el texto, pero a menudo a los lectores, y sobre todo a los estudiantes, esta persona nos
parece completamente lejana o ajena a nosotros y sus palabras no llegan a tener gran
influencia. Es por esto que decidimos aclarar que tambin somos o fuimos estudiantes de la
UNAM, tus compaeros de la FES Zaragoza, que cursamos la materia justo como ests a
punto de hacerlo t.
Uno de los objetivos primordiales de este manual es que realices toda esa bsqueda
de informacin antes de la actividad en el laboratorio para que no trabajes a ciegas, por lo
cual se proponen una serie de cuestionarios que junto con la introduccin te guiarn en la
informacin bsica que debes conocer del tema.
Sabemos que la carrera es pesada pero, aunque no lo creas, la humanidad depende de ti as que
no te rindas.
TUS COMPAEROS
3
Introduccin
LOS AUTORES
FES Zaragoza, UNAM
Mxico 2012
4
Prctica No. 1
Los analgsicos no esteroideos comprenden una amplia lista de sustancias. Estos son
los calmantes adecuados para el botiqun por su utilidad en diversos tipos de dolor y la
seguridad con que pueden ser usados a las dosis recomendadas. El prototipo de stos es la
aspirina, este grupo tambin recibe el nombre de Analgsicos Antiinflamatorios No Esteroideos
(AINES).
La mayora de los AINES, son frmacos que tienen otras propiedades como
antiinflamatorios y/o antipirticos (reducen la fiebre).
Los analgsicos Opioides incluyen los derivados de los alcaloides, ya sean naturales o
sintticos. El prototipo de estos es la Morfina, obtenida a partir de la amapola, tambin se
encuentra la Metadona, Meperidina y Propoxifeno (analgsico dbil).
6
Definicin del Dolor
Para poder entender cmo es que actan estos frmacos, es necesario tener una idea
de lo significa el Dolor, aunque es muy difcil hacerlo, pues es subjetivo.
La definicin ms comnmente aceptada del dolor es la proporcionada por la
Asociacin Internacional para el Estudio del Dolor (Internacional Association for the Study of
Pain, IASP):
"El dolor es una experiencia sensorial y emocional no placentera relacionada con dao
potencial o real del tejido, o descripta en trminos de tal dao. El dolor siempre es subjetivo".
"El dolor es lo que el paciente dice que es. Es lo que el paciente describe y no lo que los
dems piensan que debe ser. Por lo que el dolor es una respuesta del organismo ante el dao,
leve o severo y se convierte as en un signo de alerta.
Objetivo
MATERIAL BIOLGICO
MATERIAL Y EQUIPO
REACTIVOS
Analgsico (Tramadol)
Solucin salina
Metodologa
El mtodo que se utilizar, se basa en producir dolor experimentalmente en los animales de
laboratorio, y medir el tiempo en que tarda en aparecer una conducta o sntoma indicativo del
dolor. Este procedimiento se lleva a cabo en ausencia y en presencia del analgsico.
Los mecanismos para producir dolor son fsicos (se aplica una pinza sobre la cola del animal,
se coloca al animal sobre una placa caliente o bien se sumerge la cola en agua a 50 C), y
qumicos (se inyecta un agente qumico al animal).
Procedimiento 1
1. Colocar la pinza de mosco (o caimn) a 1 cm de la base de la cola del ratn.
2. La respuesta positiva al dolor se caracteriza por vocalizacin y/o movimientos para alcanzar
o morder la pinza, en un lapso de 10 segundos. En caso contrario, deseche al anormal y
tome otro.
3. Enseguida pese y numere a cada ratn.
4. Administre a cada ratn por I.P. la dosis del frmaco (asignada aleatoriamente) de acuerdo
a la siguiente tabla:
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5. Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.
6. Aplique nuevamente la pinza arterial de la manera antes descrita, a los 50, 60, 70y 90y
evale la respuesta de cada ratn.
7. Si muerde la pinza (positivo al dolor) no existe analgesia.
8. Si no muerde la pinza (negativo al dolor) existe analgesia.
9. Anote sus resultados en la siguiente tabla:
DOSIS %
(mg/Kg) LOG Dosis Animales (sin dolor) RESPUESTA
Animales Probados
120
90
50
30
11. Con los resultados obtenidos construya una curva de tiempo vs efecto para cada dosis.
12. Si los resultados lo permiten, calcule la dosis efectiva media (DE50) con el tiempo de efecto
mximo.
Procedimiento 2
Existe una variante del mtodo 1, que consiste en lo siguiente:
1. Calentar aproximadamente 100 m de agua a 50 C.
2. Colocar un ratn dentro de un cono (o algo parecido), de tal manera que la cola salga
del mismo.
3. Introducir la mitad de la cola por 10 segundos en el agua.
4. La respuesta positiva al dolor se caracteriza por vocalizacin y/o movimientos bruscos
para extraer la cola
9
del agua o salir del cono. En caso contrario,
deseche al animal y tome otro.
5. Enseguida pese y numere a cada ratn.
6. Administre a cada ratn por va I.P. la dosis
del frmaco (asignada aleatoriamente) de
acuerdo a la tabla 1.2.
7. Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.
8. Repita los pasos del 1 al 3 a los 15', 30', 60', y 90'.
Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.
9. Evale la respuesta de cada ratn.
10. Si su actitud no es agresiva, es decir, si no le afecta
el agua caliente, existe analgesia.
11. Anote sus resultados en la tabla 1.3.
12. Los resultados de todos los equipos
se anotarn en al tabla 1.4
13. Con los resultados obtenidos construya una curva
de tiempo vs efecto para cada dosis.
14. Si los resultados lo permiten, calcule la dosis
efectiva media (DE50) con el tiempo de efecto mximo.
Cuestionario
Referencias
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Prctica No. 2
Prctica No. 2
Bloqueadores de la Placa
Neuromuscular
Introduccin
Durante el siglo XVI los exploradores europeos encontraron que los nativos de la
cuenca del Amazonas usaban un veneno en la punta de sus flechas que produca la
muerte.
Despus de muchas investigaciones se encontr que el curare es el extracto crudo
activo de varias especies de plantas cuyo principio activo es la D-tubocurarina.
El msculo esqueltico voluntario est inervado por neuronas motoras cuyos
axones son capaces de conducir potenciales de accin a altas velocidades. Al rea del
msculo que yace junto a la terminacin axnica se le conoce como placa motora y a la
sinapsis qumica que existe entre ambas como unin neuromuscular.
PRESTNPTICOS:
Frmacos que inhiben la sntesis de acetilcolina por ejemplo hemicolinio.
Frmacos que inhiben et almacenamiento de la acetilcolina en las vesculas por
ejemplo el AH5183.
Frmacos que inhiben la liberacin de acetilcolina por ejemplo la estreptomicina.
POSTSINPTICOS
Frmacos no despolarizantes. Antagonistas competitivos de los
receptoresnicotnicos de la acetilcolina. Ejemplo la D-tubocurarina'
Frmacos despolarizantes. Activan los receptores nicotnicos produciendo
unadespolarizacin inicial, pero bloquean la accin subsecuente de los receptores.
Ejemplo la succinilcolina.
Estructura de la Succinilcolina
Objetivo
Demostrar experimentalmente el efecto de la succinilcolina en la unin neuromuscular
de ratones balb/c.
MATERIAL BIOLGICO
4 ratones balb/c.
MATERIAL Y EQUIPO
2 cajas para ratones.
1 rejilla para caja de ratones
4 jeringas de 1mL
Vaso de precipitados de 1L
Mechero Bunsen con manguera
Tripi
Toalla o trapo absorbente
Balanza granataria con canastilla para pesar animales
Cronometro
12
REACTIVOS
Solucin de succinilcolina
Solucin salina
Metodologa
Prueba de escalada
1. Por equipo tomar 4 ratones balb/c en una caja
con tapa (reja)
2. Pesar cada uno de los ratones en una balanza
con canastilla y registrar los valores marcando
la cola de cada ratn para su posterior
identificacin (del 1 al 4)
3. Inclinar la tapa de la caja de los ratones para
que forme un ngulo de 80 con respecto a la
mesa y poner a escalar cada uno de los ratones.
Prueba de nado
4. En una segunda caja para ratones colocar
agua hasta la mitad.
5. Calentar agua con un mechero Bunsen en
un tripi y mezclar con el agua de la caja,
midiendo la temperatura hasta obtener un
valor entre 35C y 38C.
6. Tomar el ratn marcado con el nmero 1, que
previamente ya escal la reja, e introducirlo
con cuidado al agua para que nade 30
segundos aproximadamente.
7. Sacar de la caja y secar al ratn perfectamente
con una toalla, cuidando mantenerlo caliente
para evitar que muera de hipotermia.
13
13. Reportar los resultados en la siguiente tabla:
Control
Cuestionario
Referencias
14
Prctica No. 3
Anestsicos Locales
Introduccin.
Los anestsicos locales son frmacos que previenen o alivian el dolor al interrumpir
la conduccin nerviosa. Cuando se aplica de manera local en el tejido nervioso en
concentraciones apropiadas, actan en cualquier parte del sistema nervioso en cualquier
tipo de fibra nerviosa. Este grupo de frmacos no produce inconciencia y su sitio de accin
es la membrana celular de las clulas excitables, como la membrana nerviosa. El uso
efectivo y seguro de los anestsicos locales requiere no solo que los frmacos bloqueen la
conduccin de algunos nervios, sino tambin que esta accin sea rpida y totalmente
reversible y que no tenga efectos txico sistmicos mayores.
Mecanismo de accin: El aspecto singularmente ms importante de las acciones de
los anestsicos locales es la reduccin del aumento transitorio de la permeabilidad al sodio
asociada con la fase de ascenso es decir la despolarizacin- del potencial de accin. Esta
reduccin de la permeabilidad al sodio se debe a los efectos de los frmacos sobre los
canales de la membrana del sodio sensibles al voltaje.
Los anestsicos locales son aminas de pKa que vara entre 8 y 9. Por lo tanto puede
existir en solucin como la especie cargada (catinica) o no cargada, y el pH depender del
medio, Fig. 3.1. La lidocana (xilocana) y la procana (novocana) se consideran agentes
prototipo de los anestsicos locales. La lidocana introducida en 1948, actualmente es uno
de los anestsicos locales ms ampliamente utilizados. La estructura se muestra en la Fig.
3.1. se utiliza como anestsico local en procedimientos odontolgicos, en el tratamiento de
disritmias ventriculares (especialmente cuando estas se presentan ene le infarto de
miocardio o en ciruga cardiaca), atenuacin de la respuesta vaspresora (presin arterial
sistmica/presin intracraneana) en la intubacin y en la atenuacin de las fasciculaciones
provocadas por succinilcolina.
Figura 3.1
Objetivos
Por medio del uso de un programa de simulacin que el alumno aprenda el efecto de
los anestsicos locales al aplicar un estmulo nervioso.
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Demostrar el bloqueo del impulso nervioso por la accin de un anestsico local, al
aplicar un estmulo en una preparacin citico -gastrocnemio por medio del uso de un
programa de simulacin.
Que el alumno de manera prctica conozca el efecto de los anestsicos locales al
aplicar un estmulo nervioso (qumico, fsico o trmico).
PARTE1 (1 Sesin)
Metodologa
Mtodo 1: Uso del Simulador
PARTE2 (2 Sesin)
MATERIAL BIOLGICO
Lombrices de tierra.
MATERIAL Y EQUIPO
Termmetro
Mechero
Tripi
Vaso de precipitados de 600 ml
Aguja
REACTIVOS
Lidocana 2%
Acido clorhdrico 0.1 N
17
Mtodo 2: Uso de lombrices de tierra.
Cuestionario
18
Referencias
19
Prctica No.4
Anestsicos Generales
Introduccin
21
Etapas de la anestesia
Segn el tipo de frmaco empleado para garantizar la hipnosis, se distinguen los siguientes
tipos de anestesia:
22
Tabla 1. Contenido fsico y frmula de los agentes anestsicos
Objetivo
Demostrar la analgesia general en camarones, producida por frmacos o sustancias
con propiedades anestsicas.
Identificar las etapas de la anestesia general.
Identificar el tiempo en que produce su efecto el frmaco, y el tiempo de recuperacin
del camarn
MARERIAL BIOLGICO
Cuatro camarones de tamao mediano
MATERIAL Y EQUIPO
Dos peceras
Bomba para oxigenacin
Vaso de precipitados 500ml
Jeringas de 1ml
REACTIVOS
Halotano
Metodologa
1. Colocar los camarones en una pecera
con oxigenacin para observar su
comportamiento inicial, si es necesario,
inducir el movimiento con una varilla
de vidrio, picando en los costados del
camarn.
2. En otra pecera, colocar 0.25ml de halotano
en 500ml de agua.
3. Colocar uno de los camarones en la pecera
con halotano y picar de la misma forma
con la varilla de vidrio. Registrar el tiempo
de latencia.
4. Seguir registrando el tiempo de excitacin
(sobrerreaccin al estmulo), hipnosis
(movimiento pero no reaccin al estmulo)
y anestesia (se voltea completamente de
cabeza y se encorva).
5. Cambiar al camarn a la pecera con
oxigenacin y registrar el tiempo de
23
recuperacin.
6. A la pecera con halotano agregar otros 0.25 ml de este ANESTESICO y colocar al otro
camarn.
7. Realizar el mismo procedimiento que con el primer camarn.
Video: https://www.youtube.com/watch?v=o_TPX0tZ1oM&feature=youtu.be
Cuestionario
Referencias
1. Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica, 10a ed., Me. Graw
Hill, Mxico 2003
2. BertrandG. Katzung, Farmacologa Bsica y Clnica, 8a ed., Manual Moderno, Mxico
2002
3. C. Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Editorial Espax, 1976,
Barcelona, Espaa.
24
Prctica No. 5
Por lo tanto, para tratar la epilepsia se debe descartar si hay un solo tipo de crisis o si
se presentan varios tipos ya que de eso depende un buen tratamiento.
Los anticonvulsivos se clasifican en varios grupos para tratar los diferentes tipos de
crisis:
26
El mecanismo de accin de los anticonvulsivos (del tipo benzodiacepinas) es disminuir
la entrada de calcio por bloqueo de los conductos de sodio (despolarizacin) y potenciar los
efectos inhibitorios debido a la estimulacin de vas GABAergicas por aumento de descargas
de abertura de los canales de cloro.
Para la valoracin de nuevos medicamentos, se utiliza el pentilentetrazol para crear
crisis convulsivas. Esto provoca hipoxia por espasmo vascular lo que ocasiona cambios
degenerativos en la corteza cerebral debido al antagonismo fisiolgico.
Objetivos
MATERIAL BIOLGICO
Dos ratas Wistar
MATERIAL Y EQUIPO
Dos jeringas para insulina
REACTIVOS
Solucin de Pentilentetrazol de 65 mg/mL
Diazepam de 5 mg/ml
Metodologa
1. Pesar cada rata y marcarlas, una se usar para probar el efecto preventivo y en la otra
el efecto curativo del diazepam.
2. En la rata marcada como 1,administrar diazepam 2mg/kg va intraperitoneal
3. Esperar 20 minutos.
4. Aplicar una dosis de pentilentetrazol 64mg/kg va intraperitoneal.
5. Observar si se presenta algn tipo de convulsin.
6. En caso de que ocurra se anota la latencia del pentilentetrazol y tipo de convulsin.
7. Para observar el efecto curativo del diazepam, administrar a la rata marcada como 2,
una dosis de 64mg/kg de pentilentetrazol va intraperitoneal.
8. En cuanto aparezca la convulsin aplicar la dosis de diazepam 2mg/ kg va
intraperitoneal.
9. Tomar el tiempo de latencia para el inicio del efecto del diazepam.
10. Realizar el sacrificio de los animales con ayuda de cloroformo.
11. Anote sus resultados en las siguientes tablas
27
Tabla 1: Anlisis del efecto Anticovulsivo
Equipo Tipo de latencia del Diazepam No convulsion
1
Video: https://www.youtube.com/watch?v=Snf2fA_5AO8&feature=youtu.be
Cuestionario
1. Defina estado epilptico
2. Escriba la clasificacin de las crisis convulsivas
3. Escriba la clasificacin de los anticonvulsivos
4. Escriba y analice el mecanismo de accin de los anticonvulsivos
5. Cules son los efectos adversos generales de los anticonvulsivantes?
6. Cul es el mecanismo de accin que est presentando el Diazepam como
anticonvulsivante?
7. Describa la farmacocintica del Diazepam
8. Cules son los efectos adversos del Diazepam?
9. Cules son los usos clnicos del Diazepam y del Pentilentetrazol?
10. Cules son las interacciones del Diazepam?
Referencias
1. Hardman, J. Limbird L. Molinof P. Ruddon R. and Goodman A. 1996. Goodman &
Gilman. Las Bases Farmacolgicas de la Teraputica. 9 Edicin. Vol. 1. Ed. McGraw Hill
Interamericana. E.U.
2. Katzung, B. 2001. Farmacologa Bsica y Clnica. 8 Edicin. Ed. Manual Moderno,
Mxico.
3. Smith, C. Reynard A. 1993. Farmacologa. Ed. Mdica Panamericana. Argentina.
28
Prctica No. 6
Frmacos
Cardiotnicos
Introduccin
Los digitalicos son los cardiotnicos ms antiguos utilizados en el tratamiento de la
insuficiencia cardiaca congestiva (ICC). Son sustancias de origen natural, cuya fuente
importante de obtencin es la Digitalis purprea o Digitalis lanata y el prototipo es la
digoxina, medicamento compuesto por un ncleo esteroidado con un anillo lactona de cinco
miembros no saturados en posicicn 17 y una serie de azcares unidos al carbono 3 del
ncleo, cuya rekacin estructura-actividad le confiere las actividades farmacocineticas y
farmacodinmicas. Siendo el ncleo esteroide y la lactona responsables de su actividad
cardiotnica, los residuos glucosidicos influyen en la absorcin, la vida media y su
biotransformacin.
Objetivo
Se alcanzar y demostrar el efecto txico de un glucsido cardiaco (digoxina)
aplicado al corazn de la pulga de agua
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Se demostrarn los efectos inotrpicos positivos y cronotrpico negativos de la
digoxina aplicada al corazn de la pulga de agua
Se compararan los efectos producidos de la digoxina con otras substancias
cardiotnicas administradas a la pulga de agua
PARTE 1 (1 Sesin)
MATERIAL BIOLGICO
NO
MATERIAL Y EQUIPO
Computadora personal con simulador instalado
REACTIVOS
NO
PARTE 2 (2 Sesin)
MATERIAL BIOLGICO
Pulgas de agua (1 bolsa por grupo)
MATERIAL Y EQUIPO
Microscopio
Cronometro
Caja de Petri
Pipetas Pasteur
6 jeringas de 1 ml
2 Portaobjetos
REACTIVOS
Digoxina
Epinefrina
Atropina
Pilocarpina
Solucin de cloruro de sodio al 2% p/v
Solucin de cloruro de potasio al 2% p/v
Solucin de cloruro de calcio al 2% p/v
Metodologa
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1. Seleccionar el experimento de frecuencia cardiaca en la barra superior.
2. Observar la frecuencia cardiaca y guardar datos.
3. Seleccionar la solucin y aplicar sobre el corazn de la rana.
4. Dejar actuar y guardar datos hasta que el ritmo se marque como estable.
5. Enjuagar con la solucin Ringer a 23C.
6. Ensayar con otras soluciones y con el efecto de la temperatura.
Cuestionario
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5. Cul es el mecanismo de accin de los glucsidos cardioactivos y como se
manifiesta en la funcin cardiaca?
6. Cules son los efectos txicos de los glucsidos cardioactvos?
7. Cules sern los usos o indicaciones de los glucsidos cardioactivos?
8. Haga un esquema de la anatoma de la pulga de agua, localice el corazn e
indique cuntos latidos realiza por minuto
9. Qu frmacos son agonistas directos de los receptores dopaminrgicos y con
acciones estimulantes sobre receptores y adrenrgicos?
10. Frmaco que aumentan la contractilidad cardaca y producen vasodilatacin
arteriovenosa y reduccin de las resistencias vasculares perifricas?
Referencias
33
Introduccin
Fisiologa De La Nefrona
Los riones controlan el volumen del fluido extracelular ajustando la excrecin de NaCI y
H20. Diariamente los riones filtran ms de 22 moles de Na+ , los cuales se reabsorben por los
tbulos renales, para mantener el equilibrio.
El cuerpo mantiene la presin sangunea a expensas del volumen del fluido extracelular.
Cuando la ingesta de NaCI es mayor que su eliminacin (p.ej. en falla congestiva cardiaca o falla
renal) se desarrolla edema.
La reabsorcin de sodio se debe primeramente a la adenosin trifosfatasa (ATPasa)
localizada en la parte lateral de la membrana de las clulas epiteliales del nefrn. La bomba de
Na+ /K+ necesita energa para intercambiar un Na+ por cada dos K + , manteniendo una baja
concentracin de Na+ y alta concentracin de K + en el interior de la clula. En el lado de la luz
tubular, existen vas pasivas para el movimiento del Na+ electroqumico del lumen a la clula.
Esas clulas son las bases fisiolgicas de la accin diurtica.
El primer acierto de los diurticos es la reduccin del edema por reduccin del volumen
del fluido extracelular, y para que esto ocurra, la secrecin de Na+ deber exceder a su ingesta.
En principio, los diurticos previenen la entrada de Na+ a las clulas tubulares. Una vez
que el diurtico entra al fluido tubular, el sitio de la nefrona donde acta determina su efecto. Es
decir, el sitio de accin determina tambin que otros electrolitos, adems del Na+, sern
afectados.
Todos los diurticos, excepto la ESPIRONOLACTONA, ejercen sus efectos en el lado
luminal de la nefrona. Por eso deben alcanzar el fluido tubular para tener efecto. Por ejemplo, el
manitol lo hace por filtracin en los glomrulos; los dems diurticos, como estn fuertemente
enlazados a las protenas, se filtran escasamente, llegando al lumen por secrecin a travs del
tbulo proximal (va secretoria de bases y cidos orgnicos).
El bajo flujo sanguneo renal o falla renal, disminuyen la eficacia de los diurticos, as
como drogas que compiten por la bomba secretoria como el PROBENECID para las drogas cidas,
o la CIMETIDINA para drogas bsicas. Diurticos Con Accin En El Tbulo Contorneado Proximal.
El tbulo proximal determina el grado de liberacin de Na+ y H20 a zonas ms lejanas de
la nefrona. Una amplia variedad de transportadores acoplan el paso del Na+ al interior de la
clula, al movimiento de aminocidos, glucosa, fosfato, y otros solutos, MANITOL: Es un diurtico
osmtico no metabolizable y es filtrado haca el espacio tubular incrementando la osmolalidad
del fluido tubular. Esto trae como consecuencia reabsorcin aumentada de fluido resultando en
excrecin aumentada de agua acompaada de un poco de Na+.
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en H20 y C02 por accin de la anhidrasa carbnica. EL C02 difunde al tbulo proximal en
donde se combina con H20 para formar H2C03, el cual a su vez forma H+ y HC03+. Este
ltimo sale del tbulo hacia la sangre, mientras H+ es secretado nuevamente a la luz
tubular, resultando en reabsorcin de HC03+. Si la actividad de la anhidrasa carbnica se
reduce, la reabsorcin de HC03+ tambin disminuye y la sale al tbulo proximal en
cantidades mucho ms grandes. Aunque el Na+ es el principal catin que acompaa la
salida del HC03+ del tbulo proximal, se reabsorbe ampliamente en el tbulo distal el
intercambiado por K+. Por lo tanto, la ACETOLAMIDA causa principalmente un incremento
de HC03+\ K+ y H20 urinario.
Diurticos De Asa
Actan principalmente bloqueando el co-transportador de Na+/K+/Cr en la
membrana apical de la rama ascendente del asa de Henle. Como en este sitio se
concentra y diluye la orina, los diurticos de asa disminuyen al mximo la concentracin
y dilucin urinaria. En esta parte ascendente del asa se reabsorbe Ca++ y Mg++, proceso
dependiente de la reabsorcin normal de Na+ y CI-. Por lo tanto los diurticos de asa
incrementan la excrecin urinaria de agua, Na+, K+, Ca++ y Mg++. EJEMPLOS:
Furosemida, bumetanida y cido etacrinico.
Objetivo
MATERIAL BIOLGIO
1 Rata Wistar de 150-200 gramos de peso, de preferencia del mismo sexo y
edad.
MATERIAL Y EQUIPO
Jaula Metablica
Probeta Graduada
Balanza Granataria
Jeringas de 1 y 5 mL
REACTIVOS
Solucin fisiolgica (NaCI 0.9 %), que se utiliza como control negativo.
Furosemida (Control positivo)
Metodologa
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CLCULOS:
1. Excrecin urinaria:
= 100
2. Accin Diurtica:
= 100
Cuestionario
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Categora Ejemplo Mecanismo de accin Sitio de accin
Diurticos de asa
Tiacidas
Inhibidores de la
anhidrasa carbnica
Diurticos osmticos
Diurticos ahorradores
de potasio
Referencias
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Prctica No.8 Determinacin Espectrofotomtrica
de sodio en la orina
Servicio social.
MECANISMO DE ACCION:
Los diurticos de asa provocan la excrecin del 20-25% del sodio (Na+)
filtrado por los riones, de ah que tambin se les conozca como diurticos de alto
techo. Actan fundamentalmente sobre la rama ascensodio (Na+) y cloruro (Cl-) desde el
tbulo dente del asa de Henlerenal hacia el tejido intersticial (reabsorcin, inhibiendo el
transporte de tubular). Esto tiene un efecto adicional, ya que al llegar ms electrlitos a la
parte distal de la nefrona, tambin se reduce la reabsorcin de agua, como consecuencia
del aumento de la presin osmtica de la orina. Los diurticos del asa inhiben el sistema
co-transporte sodio-potasio-cloruro, situado en la membrana luminal de las clulas del
asa gruesa ascendente, esencial para la reabsorcin fisiolgica de estos electrlitos. Los
diurticos del asa parecen ser responsables del desarrollo de una accin venodilatadora,
aunque se ignora si sta es de tipo directo o indirecto. Se debe a la liberacin de algn
factor renal (posiblemente, prostaglandinas). El efecto venodilatador podra contribuir
significativamente al efecto diurtico de estos frmacos.
41
El siguiente mtodo sirve para determinar sodio en orina mediante la precipitacin del
sodio del sobrenadante libre de protenas como triple sal. La disminucin resultante de
la absorbancia de la mezcla de reactivo de color -sobrenadante es proporcional al
contenido de sodio de la muestra, por lo cual al determinar el sodio excretado por una
rata a la que se le administre un diurtico de asa podremos de terminar el tiempo
mximo de la diuresis.
Objetivo:
Material
Tres pipetas de 0.5ml
Una pipeta de 5ml
Doce tubos de ensayo
Gradilla.
Material biolgico
Agua destilada.
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Una vez preparadas las dos disoluciones mezclar ambas y colocarlas a
ebullicin hasta que sea una disolucin transparente de color amarillo
homogneo.
Enfriar la mezcla y en caso de observar algn precipitado filtrar,
posteriormente la cantidad re sultante de esta medirla en una probeta y
adicionar una cantidad igual de etanol.
Nota: En caso de que das posteriores se observe un ligero precipitado filtrar o calentar
nuevamente hasta disolverlo.
Metodologa:
Enjuagar todo el material con poca agua destilada y secar perfectamente con
papel limpio.
De la orina recolectada de la prctica de diurticos tomar 0,5ml de cada
tiempo con una pipeta y colocarla en un tubo de ensayo cada una teniendo
la precaucin de etiquetar correctamente, posteriormente con otra pipeta
agregar 0,5ml del reactivo precipitante y agitar vigorosamente, despus dejar
reposar por cinco minutos a temperatura ambiente. Transcurridos los cinco
minutos centrifugar por cinco minutos ms (Para precipitar protenas).
Por otra parte etiquetar 11 tubos con las siguientes leyendas, RB, S, U15, U30, U45,
U1h, U1h15, U1h30, U2h, U2h30 y UC- (Reactivo blanco, estndar, muestra al
minuto15..muestra a agua destilada, al S 0.5ml del estndar de sodio y a todos los
U 0,5ml de la muestra las 2 horas y media y muestra control negativo
respectivamente).
Al tubo RB adicionar 0.5mL de desproteinizada que le corresponde. Ya que cada tubo
tenga lo que corresponde adicionar sin excepcin a todos los tubos 2.5mL del reactivo
de color y agitar vigorosamente para temperatura ambiente y centrifugar a alta
velocidad por 5 minutos ms.
43
Para obtener la cantidad de sodio en orina es necesario ajustar el espectrofotmetro
con:
() ()
=
() ()
Homogenizarr (ver tabla de abajo), realizado todo esto dejar reposar por 10 minutos a
agua destilada a 0 de absorbancia con una longitud de onda de 420nm. Luego leer el
contenido de los tres tubos ajustando entre lectura y lectura con agua.
44
Cuestionario:
Bibliografa:
1. A Photometric Method For The Estimation Of Sodium And Its Application To
Serum Sodium Determinatione. C. Butterworth. J. Clin. Path, (1951), 4, 99.
2. C.Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Editorial
Espax, 1976, Barcelona, Espaa.
3. http://ocw.uv.es/ciencias-de-la-salud/farmacologia-clinica-aplicada-a-la-
enfermeria/l eccion24.diureticos.pdf
45
Prctica No. 9
Efecto de los Frmacos
Hipoglucemiantes
Introduccin
47
Antiguamente se utilizaban insulinas de origen bovino y porcino que hasta ahora ya han
desaparecido del mercado. Hoy en dia todas las insulinas humanas sintetizadas por
ingeniera gentica (DNA recombinante) por lo que estn purificadas y solo contiene una
fraccin proteca de la insulina. El nico factor que las diferencia es la duracin de la
accin, razn por la cual se adquieren en preparaciones inyectables que retardan la
liberacin.
Objetivo.
Demostrar el efecto hipoglucemiante de la insulina en ratas hiperglucemicas,
determinando la conentracin de glucosa en sangre.
MATERIAL BIOLGICO
1 rata
MATERIAL Y EQUIPO.
3 Jeringas de insulina
3 jeringas de 10 mL
Reloj
Bao maria
REACTIVOS.
Tiras reactivas para la medicin de glucosa en sangre
Metodologa
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asegurar que la disminucin de glucosa en sangre del animal experimental se debe al
frmaco y no a la manipulacin.
1.- Marcar las ratas del 1 al 4. Tomar una muestra a tiempo cero antes de manipular al
animal, para obtener el valor basal de glucosa. La muestra se toma realizando una
incisin en la arteria caudal de la cola de la rata.
5.- Posterior a esta administracin tomar muestras cada 15 minutos hasta los 90
minutos o hasta alcanzar el nivel basal de glucosa.
NOTA: Conjuntar los resultados de todo el grupo parra sacar promedio y graficar
como se indica anteriormente.
Cuestionario.
1. Indica la clasificacin de la Diabetes Mellitus
2. Qu es la insulina?
3. Qu son los hipoglucemiantes orales?
4. Cules son las vas de administracin de la insulina?
5. Explique el mecanismo de accin de la insulina?
6. Por qu razn la insulina no se administra por va oral?
49
7. A qu se refiere el trmino de antagonismo fisiolgico entre la insulina y el
glucagn?
8. Qu importancia tienen los controles utilizados en la prctica?
9. Cul es el mejor hipoglucemiante que se conoce?
10. Por qu la metformina es el frmaco de primera eleccin en todos los
pacientes con diabetes Mellitus tipo 2?
Referencias.
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Anexo prctica 3: Simulador
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Anexo prctica 3: Simulador
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Anexo prctica 3: Simulador
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Anexo prctica 3: Simulador
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Anexo prctica 3: Simulador
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Anexo prctica 3: Simulador
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Anexo prctica 3: Simulador
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Anexo prctica 3: Simulador
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Anexo prctica 3: Simulador
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Anexo prctica 6: Simulador
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Anexo prctica 6: Simulador
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Anexo prctica 6: Simulador
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Anexo prctica 6: Simulador
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Anexo prctica 6: Simulador
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Anexo prctica 6: Simulador
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Anexo prctica 6: Simulador
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Anexo prctica 6: Simulador
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Anexo prctica 8
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Anexo prctica 8
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