Pgina 1 de 6 - FACULTAD DE EDUCACIN - LICENCIATURA EN BIOLOGIA CON

ENFASIS EN EDUCACION AMBIENTAL GUA DE LABORATORIO HERENCIA Y EVOLUCIN.

CAMPO: ESPECFICO - NIVEL II - II 2014.

UNIVERSIDAD SANTO TOMS

VICERRECTORA DE UNIVERSIDAD ABIERTA Y A DISTANCIA
FACULTAD DE EDUCACIN
LICENCIATURA EN BIOLOGA CON NFASIS EN EDUCACIN AMBIENTAL
GUA DE LABORATORIO PLAN RENOVADO
HERENCIA Y EVOLUCIN
CDIGO 17571
II - 2014

CRUCES MONOHBRIDOS

INTRODUCCIN

Gregorio Mendel, dise una forma de trabajo que consisti en la cruza de variedades puras
que diferan en una o varias caractersticas contrastantes bien definidas, al realizar sus
experimentos con guisantes. Analiz la descendencia de varias generaciones y elabor un
modelo para explicar sus resultados. Sus trabajos fueron redescubiertos en 1900 y, al realizar
cruzas experimentales con diversos organismos, se reconoci que los principios planteados por
l, para explicar la herencia en el guisante, eran extensivos a los dems organismos. Estos
principios los conocemos ahora como Leyes de Mendel.

La mosca de la fruta Drosophila melanogaster ha sido ampliamente usada en las cruzas

experimentales por las caractersticas de su ciclo de vida, fcil manejo y por que presenta
caracteres hereditarios contrastantes bien definido y fciles de seguir de generacin en
generacin.

OBJETIVO

Demostrar las Leyes de Mendel mediante cruzas con Drosophila melanogaster para
comprobar la segregacin y distribucin independiente.

MATERIALES

8 frascos de vidrio transparente con medio de cultivo (ver anexo 1) asegurados

con tapones de gasa
1 frasco vacio con tapn de gasa
1 caja de Petri
1 Pincel delgado de pelo suave
1 frasco gotero con cloroformo
Etiquetas adhesivas y lpiz
Estereoscopio o lupa
 Pgina 2 de 6 - FACULTAD DE EDUCACIN - LICENCIATURA EN BIOLOGIA CON
ENFASIS EN EDUCACION AMBIENTAL GUA DE LABORATORIO HERENCIA Y EVOLUCIN.
CAMPO: ESPECFICO - NIVEL II - II 2014.

MTODOS

MANEJO DE Drosophila melanogaster

Para el inicio de toda cruza experimental, con Drosophila melanogaster es
conveniente tener conocimientos de ciertas actividades que son de uso rutinario en el
laboratorio. A continuacin se explican, haciendo nfasis en el objetivo que se
persigue con cada una de ellas, as como la forma de llevarse a cabo. Es necesario
llevar una bitcora en la cual se deben registrar todas las actividades que se realicen
as como la fecha en que se hicieron.

1. Se har entrega por cada estudiante de dos cepas diferentes de Drosophila

(para ello deben traer 2 frascos limpios con medio), donde se hara entrega por
separado de cada una de las cepas las cuales debern mantenerse en una
nevera de icopor con un pequeo bombillo cerca o de ser posible en su interior
que eleve un poco la temperatura. Debern realizar los cruces de acuerdo con
la indicacin del maestro.

Nota importante: Es requisito indispensable que al iniciar toda cruza, la

hembra que fungir como progenitor sea virgen. Estas se seleccionan pocas
horas despus de emergidas debido a que no copulan sino hasta despus de 8
a 12 h. Al copular se almacenan una gran cantidad de espermatozoides que
fecundan a los vulos antes de la ovoposicin. Estas hembras pueden
colectarse antes de que emerjan de la pupa o en las primeras horas del da. No
es necesario que los machos sean vrgenes.

2. Para realizar los cruces, debern seleccionar los progenitores (Machos y

Hembras) segn la indicacin del cruce que se realizar y se colocan cuatro
parejas en un frasco con cultivo fresco, se realizarn 3 rplicas, es decir deben
montar 3 frascos iguales con 4 parejas del mismo cruce. Estos frascos se
etiquetan indicando el genotipo de los progenitores, el nombre del estudiante,
la fecha de siembra y el nmero del frasco (1, 2, 3).

3. Una vez se observen larvas y las primeras pupas en el medio de cultivo

(aproximadamente 5 das despus de la siembra), elimine a los progenitores
transfirindolos a la morgue (un frasco con solucin de hipoclorito al 5%) para
evitar que se crucen con la descendencia (Retrocruza). Estas larvas
corresponden a la primera generacin (F1).

4. Emergida la F1 (aproximadamente 10 das despus de eliminar los

progenitores) determine los fenotipos de cada individuo y anote las
caractersticas que presentan las poblaciones de cada uno de los frascos.
Transfiera toda la poblacin de cada frasco a otro frasco de cultivo con
alimento fresco (debe etiquetarse con el genotipo de los individuos F1xF1,
frasco del que proviene, fecha de cultivo y nombre del estudiante) y espere a
que aparezcan larvas en el alimento, stas corresponden a la segunda
generacin (F2).

5. Cuando tenga certeza de la presencia de la F2 (observe varias larvas y las

primeras pupas en el medio) es necesario eliminar a los adultos de la F1 que
les dieron origen transfirindolos a la morgue (un frasco con solucin de
hipoclorito al 5%), para evitar retrocruza.
 Pgina 3 de 6 - FACULTAD DE EDUCACIN - LICENCIATURA EN BIOLOGIA CON
ENFASIS EN EDUCACION AMBIENTAL GUA DE LABORATORIO HERENCIA Y EVOLUCIN.
CAMPO: ESPECFICO - NIVEL II - II 2014.

6. Emergida la F2 (aproximadamente 10 das despus de eliminar los

progenitores) determine los fenotipos de cada individuo y anote las
caractersticas que presentan las poblaciones de cada uno de los frascos.

Figura 1. Procedimiento para la obtencin de F1 y F2 en un cultivo de Drosophila melanogaster

OBTENCIN Y ANLISIS DE RESULTADOS

Es importante obtener los resultados a partir de toda la descendencia, por eso no deje
ningn individuo por fuera.

1. Revisar toda la informacin disponible sobre las mutaciones que le

correspondieron como: descripcin cuidadosa del fenotipo, tipo de mutacin,
patrn de herencia, letalidad, etc., y describa una breve resea de toda esta
informacin como marco terico del trabajo.
2. Con base en la informacin colectada proponga una hiptesis de lo que espera
encontrar al desarrollar la prctica, y plantee los objetivos de la investigacin.
3. Indique de manera detallada la metodologa como usted la realiz, no como se
describe en esta gua.
4. A medida que se desarrolla la prctica, deben registrar todas las observaciones
pertinentes a los ensayos durante todo el proceso, no olviden que en
investigacin TODO es importante, aunque no les parezca, cualquier
observacin que llame su atencin regstrenla que puede ser relevante como
resultado o til para el anlisis. Registren toda la informacin de los cultivos
hasta la obtencin de la F2 en la tabla 1.
 Pgina 4 de 6 - FACULTAD DE EDUCACIN - LICENCIATURA EN BIOLOGIA CON
ENFASIS EN EDUCACION AMBIENTAL GUA DE LABORATORIO HERENCIA Y EVOLUCIN.
CAMPO: ESPECFICO - NIVEL II - II 2014.

Tabla 1. Registro de las actividades realizadas para el cruzamiento.

Actividades Fecha Observaciones

Siembra (inicio del Genotipo:
cruzamiento) Fenotipo:
Eliminacin de los
progenitores
Trasvase de la F1 Genotipo:
Fenotipo:
Eliminacin de la F1
Frasco 1
Conteos de F2 Frasco 2
Frasco 3

5. Registren todos los resultados en el formato de registro de resultados (pgina

siguiente)

6. Hallar todas las proporciones fenotpicas y genotpicas obtenidas tanto en F1

como en F2, para cada uno de los frascos.

7. Con base en los resultados y en la informacin que consult sobre cada una de
las mutaciones que trabajo, realice un anlisis de los resultados, en los que
explique detalladamente si su hiptesis fue correcta o no y por qu, y cules
fueron las posibles razones para que sus resultados fueran esos.

8. Resolver el cuestionario propuesto.

9. Finalmente indique a qu conclusiones lleg despus de realizar la prctica.

FORMATO DE REGISTRO DE RESULTADOS

Estudiante:________________________________________________________
Cruce inicial (genotipo y fenotipo):______________________________________
Fecha de inicio:_____________________________________________________
Observaciones de F1 (indicar genotipos y fenotipos):_______________________
_________________________________________________________________
F2: Fecha de inicio del cruzamiento:____________________________________

Conteo de F2
Fenotipo Total
 Pgina 5 de 6 - FACULTAD DE EDUCACIN - LICENCIATURA EN BIOLOGIA CON
ENFASIS EN EDUCACION AMBIENTAL GUA DE LABORATORIO HERENCIA Y EVOLUCIN.
CAMPO: ESPECFICO - NIVEL II - II 2014.

Total

CUESTIONARIO

1. Defina los siguientes conceptos:

a) Homocigtico e) Lnea pura
b) Heterocigtico f) Dominante
c) Genotipo g) Recesivo
d) Fenotipo h) Alelo

2. Analice el desarrollo del trabajo del equipo y seale los posibles factores que
pudieron afectar los resultados. Cmo se puede mejorar estas prcticas?

3. Al comparar los valores obtenidos para cada carcter, por separado, con la
proporcin esperada para un cruzamiento monohbridos. Qu se obtuvo?

4. Defina efecto Pleiotrpico

6. Investigue lo relativo a los genes que regulan las caractersticas estudiadas

(cromosomas en que se encuentra, posicin en el mapa, que otros efectos origina en
el organismo, etc.); Considera que se manifest algn efecto pleiotrpico? Por qu?

7. Es vlido extrapolar los resultados del cruzamiento en la mosca a otros

organismos, incluso el humano? Explique por qu.

BIBLIOGRAFA

Ramos, P. 1993. Manual de Laboratorio de Gentica para Drosophila melanogaster. McGraw-

Hill. Mexico.

Klug,W. Cummings, M. 1999. Conceptos de Genetica. 5ta ed. Editorial prenticeHall. P.814.

Griffiths AJF, Miller JH, Suzuki DT, Lewontin RC, Gelbart WM. 2002. Gentica. 3a. edicin.

Strickberger MW. 1988. Gentica. Omega. Barcelona.

 Pgina 6 de 6 - FACULTAD DE EDUCACIN - LICENCIATURA EN BIOLOGIA CON
ENFASIS EN EDUCACION AMBIENTAL GUA DE LABORATORIO HERENCIA Y EVOLUCIN.
CAMPO: ESPECFICO - NIVEL II - II 2014.

ANEXO 1
Medio de cultivo para Drosophila Melanogaster

Adaptado de: "Raising Fruit Flies", Nancy Nehring

Reptiles Magazine, October 1995, pp. 26-28, 30

Ingredientes:
- 1 Taza de agua
- 1 Banano maduro
- 1 Cuchara sopera de Harina de maz
- 1 Cuchara sopera de gelatina sin sabor
- 1 Cuchara sopera de azcar
- Cuchara de postre de levadura en grnulos

Procedimiento:

1. Hacer un concentrado lquido y homogneo licuando el banano en el

agua.
2. Calentar el agua con el banano a temperatura alta hasta punto de
ebullicin, agregar el resto de ingredientes y revolver constantemente
para homogenizarlos.
3. Servir en un frasco limpio de su volumen de medio
4. Tapar rpidamente y dejar enfriar a temperatura ambiente.
5. Estos medios se pueden almacenar en el refrigerador bien tapados
hasta que se utilicen.

Nota: una vez se realicen los cruces de las Drosophilas en estos medios se
deben cubrir con tapones hechos de gasa y algodn que cubran bien la boca
de los frascos para que las moscas estn seguras y no se escapen pero
puedan respirar.