Introduccin

Los lpidos son biomolculas orgnicas insolubles en el agua, que pueden extraerse
de las clulas y de los tejidos mediante disolventes no polares, por ejemplo, el
cloroformo, el ter o el benceno.

Los lpidos desempean diversas funciones biolgicas importantes, actuando como

componentes estructurales de las membranas, como formas de transporte y
almacenamiento de combustible catablico, como cubierta protectora sobre la
superficie de muchos organismos y como componentes de la superficie celular
relacionadas con el reconocimiento de las clulas, la especificidad de especie y la
inmunidad de los tejidos. La forma en que los lpidos son acumulados por un ser
vivo varan, por ejemplo, en los mamferos se acumulan como grasas, en los peces
como ceras; en las plantas se almacenan en forma de aceites protectores con
aromas y sabores caractersticos.Algunas sustancia clasificadas entre los lpidos
poseen una intensa actividad biolgica, se encuentran entre ellas algunas vitaminas
y hormonas.

Los lpidos constituyen molculas hbridas como los glucolpidos, que contienen
lpidos y glcidos, y las lipoprotenas, que contienen lpidos y protenas. En estas
biomolculas las propiedades qumicas y fsicas caractersticas de sus componente
estn fusionadas para cumplir funciones biolgicas especializadas.
Los lpidos, pueden separarse fcilmente de otras biomolculas por extraccin con
solventes orgnicos no polares como ya se mencion anteriormente, tomando en
cuenta sus caractersticas de solubilidad y observando el tipo de lpido que desea
extraerse. As mismo pueden ser separados por tcnicas experimentales como la
cromatografa de adsorcin, cromatografa de fase reversa y cromatografa de capa
fina bidimensional, siendo esta ltima la tcnica trabajada en la experimentacin
explicada en el presente reporte.

Objetivos
Comprobar la solubilidad de algunos lpidos puros y de muestras
comerciales con distintos solventes, para comprender la influencia de la
estructura qumica con su solubilidad.
Emplear tcnicas de extraccin, separacin e identificacin de lpidos
mediante el anlisis de la yema de huevo utilizando una cromatografa
bidimensional con diversos reveladores, para identificar los lpidos presentes
en la yema.
Llevar a cabo la separacin de estos lpidos mediante cromatografa
bidimensional para identificar a cada lpido utilizando diferentes reveladores
Identificar con diferentes reveladores, corrimiento cromatogrfico y
extraccin de los ldos mediante disolventes orgnicos
Metodologa
La indicada en el manual de Bioqumica Estructural, correspondiente a la prctica
No.6 Extraccin, separacin y caracterizacin de lpidos, pginas 62-64.

Observaciones y resultados
Para el estudio de las propiedades de solubilidad se analizaron nueve muestras.
Cada una fue depositada en cantidades pequeas en 5 tubos de ensaye, aadiendo
a cada tubo diferentes solventes no polares y se evalu la solubilidad que present
el lpido en cada uno de los disolventes, de acuerdo con el criterio siguiente:

+++ muy soluble + poco soluble

++ soluble -- insoluble

Segn esto, los resultados obtenidos fueron los siguientes:

Muestra Agua Etanol Acetona Benceno Cloroformo

Glicerina ++ ++ + ++ +++

Ac.Oleico -- + + + +

Ac.Palmtic -- -- + -- ++
o

Aceite de -- + -- +++ +++

olivo

Aceite -- -- -- + +
comestible

Mantequilla -- -- -- + ++

Cera -- -- -- + +

Colesterol + -- ++ ++ +
Tabla No. 1. Propiedades de solubilidad de los lpidos.

Para la parte de cromatografa

4 imgenes de las cromatografas reveladas

Imagen 1. Cromatografa revelada con Ninhidrina

Presenta manchas de color color morado

Imagen 2. Cromatografa revelada con Molibdato

La revelacin muestra manchas de color violeta
Imagen 3. Cromatografa revelada con Bismuto
La revelacin muestra pequeas manchas de color anaranjado intenso

Imagen 4. Cromatografa revelada con luz UV

La revelacin muestra manchas grandes color blanco

Discusin de resultados
Es importante tener presente que lo semejante disuelve a lo semejante, esto es,
las sustancias que son semejantes desde el punto de vista qumico son solubles
unas en otras, mientras que las que son diferentes resultan insolubles, as podemos
decir que las sustancias polares se disuelven en disolventes polares, mientras que
las sustancias no polares en disolventes no polares.
Sabiendo lo anterior, ahora se analizarn las muestras.

Glicerina
Se sabe que la glicerina es un lquido viscoso incoloro, inodoro, higroscpico y
dulce, es un lpido simple que est formado por una molcula de propanotriol en la
que los grupos hidroxilo (OH-) le dan caractersticas polares, por lo tanto al tener
cierta polaridad y una longitud pequea en su cadena con tan slo tres carbonos, es
soluble en aquellos solventes polares, eso explica que fuera muy soluble en agua y
soluble en etanol pues fue capaz de formar puentes de hidrgeno con sus
molculas, por su parte en acetona fue poco soluble porque a pesar que se puede
dar la formacin de puentes de hidrgeno entre el oxgeno con carga parcial
negativa y los hidrgenos parcialmente positivos del la molcula de glicerina, stos
no son tan numerosos como los que se dan con agua o etanol; con cloroformo de
igual manera fue poco soluble, mientras que en benceno (no polar) fue insoluble, lo
que provoc la separacin de fases.

Imagen . Estructura de la glicerina (polar)

Ac. Oleico
El cido oleico es un lquido oleoso e incoloro, su frmula qumica es C18H34O2. Es
un cido graso monoinsaturado, es decir, que tiene slo un doble enlace en su
estructura qumica, la molcula de cido oleico consiste en una larga cadena
hidrocarbonada que tiene en un extremo un grupo carboxilo hidrofbico (polar),
mientras el resto de la cadena de hidrocarbono es hidrofbica (no polar). De este
modo, en contacto con agua, los extremos hidroflicos de las molculas del grupo
carboxilo se asociaron con el entorno acuoso y los extremos hidrofbicos se
alejaron lo ms posible del agua, por lo tanto sobre la superficie del agua las
molculas de cido oleico se orientaron formando una pelcula que consiste en una
capa de molculas, tambin llamada monocapa, por lo tanto fue insoluble en agua
notndose la separacin de fases. Lo anterior explica entonces que sea soluble en
solventes orgnicos como es el caso del etanol, cloroformo, acetona y sobre todo en
aquellos solventes orgnicos no polares como el benceno.
Imagen . Estructura del cido oleico (anfiptica)

Ac. palmtico
El acido palmtico es un cido graso saturado de cadena larga de color blanco, cuya
frmula es CH3(CH2)14COOH, al igual que el cido oleico posee una cadena
hidrocarbonada hidrofbica no polar y un grupo cido polar, por lo tanto tambin se
llev a cabo la formacin de una monocapa al ponerlo en contacto con el agua
siendo de esta manera insoluble en medio acuoso, pero en diferentes grados
soluble en solventes orgnicos como etanol, acetona benceno y cloroformo

Imagen . Estructura del cido palmtico (anfiptica)

Aceite olivo.

El aceite de oliva es una grasa vegetal. El 99% de su composicin corresponde a

diferentes cidos grasos:

cido oleico entre 63 y cido Palmitoleico 0.3 a

83% 3%

cido Palmitito 7 a 17% cido linoleico 3 a 14%

cido esterico entre 1.5 y cido linolnico menos de

5% 1.5%

El 1% restante est formado por la Vitamina E y antioxidantes naturales, entre los

cuales podemos citar a los polifenoles, pigmentos, aromas, etc.
Dado que en mayor proporcin tiene al cido oleico, es de esperarse que tuviera un
comportamiento similar que el cido oleico puro, por lo tanto result insoluble en
agua, y soluble en ciertos grados en los solventes orgnicos cloroformo, benceno,
etanol y acetona, por las mismas razones que se explicaron con anterioridad.
Imagen 8. estructura aceite de olivo
Mantequilla

Es la emulsin formada por agua (1-16%) y grasa (81-85%), sustancia seca magra
(0.5-2%) y vitaminas liposolubles. La fase continua est formada por la fraccin
lquida de grasa de leche donde estn los grnulos de grasa, gotas de agua y aire.
Para elaborarla se siguen los siguientes pasos, que incluyen el tratamiento de la
crema.
La mantequilla contiene un 50% de cidos grasos saturados, tiene propiedades no
polares por lo que su solubilidad es nula en agua, etanol y acetona y solubles en
benceno y cloroformo provoca interacciones entre las cadenas hidrofbicas por
tanto es soluble por su similar polaridad.
IMAGEN 9. ESTRUCTURA ACIDO BUTIRICO PRESENTE EN MAYOR
PROPORCION EN LA MANTEQUILLA
Cera
Qumicamente hablando, las ceras son los steres de cidos grasos saturados e
insaturados de cadena larga (de 14 a 36 C) con alcoholes grasos, que son alcoholes
alifticos monohidroxlicos de elevada masa molecular (de 12 a 40 C) a veces,
tambin con esteroles o hidroxicarotenoides.que forman materiales con altos
puntos de fusin (de 40 a 90C) por lo que no son nada solubles en agua, etanol y
acetona.
IMAGEN 10. ESTRCUTURA GENERAL DE UNA CERA
Colesterol
La molcula de colesterol est compuesta por tomos de carbono, hidrgeno y
oxgeno dispuestos en cuatro anillos unidos entre s y con una cadena lateral.
La molcula de colesterol se puede distinguir una cabeza polar constituida por el
grupo hidroxilo y una cola o porcin apolar formada por el carbociclo de ncleos
condensados y los sustituyentes alifticos. EL colesterol es poco soluble, la parte
soluble es su cabeza polar con respecto al agua, en acetona, cloroformo y benceno
es soluble gracias a sus cadenas carbonadas polares.
Imagen . Estructura del colesterol

Cromatografa bidimensional.
En esta parte se utilizarn 4 reveladores, los cuales fueron luz.ultravioleta,
ninhidrina, molibtado y bismuto.
En la prueba con bismuto de observo una coloracin entre amarilla y anaranjada,
est reportado que este revelador reacciona con la colina (fosfatidincolina) cuando
se observan un color amarillo.
Con molibdato se da una reaccin con fsforo elemental dando una coloracin azul
marino, por la presencia de los lpidos fosforilados, es este caso si se percibi una
coloracin azul, por lo que se logr identificar a los lpidos foforilados.
En el caso de la cromatografia en la que se utiliz ninhidrina como revelador , es
sabido que la nihidrina es un reactivo que identifica aminocidos por lo que en este
caso se identifico lipidos que contienen aminoacidos, ya que este rectivo actua
oxidando a estos y dando un derivado de coloracin purpura , lo cual se visualiz en
la cromatografia, por lo tanto es probable que los lipidos presentes son lipidos que
contienen aminoacidos como l a fosfatidiletanolamina y la fosfatidilserina.
Finalmente con la luz ultravioleta solo se logr observar la silueta de algunas
manchas blancas pequeas.Esto es debido a que en el espectro de radiacin d eluz
visibles, los acidos grasos que constituyen a los lpidos no absorben en esta
longitud de onda , sin embargo bajo luz ultravioleta , los acidos grasos insaturados y
ma ssi son conjugadas sus insaturaciones absorben a esta longitud, de onda, por lo
que pueden identificarse, lipidos que contienen acidos grasos con insaturaciones,
como s eoberv experimentalemnte bajo luz ultravioleta siluetas marcadas, la luz
ultravioleta se relaciona algunas veces para la oxidacin de los dobles enlaces y la
posterior yincion con reactivo de Schiff para la identificacion d elipidos insaturados.
CONCLUSIN

Se pudo llevar a cabo el anlisis de diferentes tipos de lpidos ocupando solventes

con diferente polaridad.
En base a los resultados obtenidos se pudo comprobar cmo es que los lpidos son
muy solubles o solubles en solventes orgnicos no polares como son el benceno y
el cloroformo mientras que para los solventes polares como el agua y el etanol
presentan insolubilidad o poca insolubilidad esto es debido a una propiedad
caracterstica denomina hidrofobicidad.
La baja solubilidad de los lpidos se debe a que su estructura qumica es
fundamentalmente hidrocarbonada (aliftica, alicclica o aromtica), con gran
cantidad de enlaces C-H y C-C. La naturaleza de estos enlaces es 100% covalente
y su momento dipolar es mnimo. El agua, al ser una molcula muy polar, con gran
facilidad para formar puentes de hidrgeno, no es capaz de interaccionar con estas
molculas. En presencia de molculas lipdicas, el agua adopta en torno a ellas una
estructura muy ordenada que maximiza las interacciones entre las propias
molculas de agua, forzando a la molcula hidrofbica al interior de una estructura
en forma de jaula, que tambin reduce la movilidad del lpido.
Aprovechando la solubilidad de los lpidos se logr llevar a cabo la extraccin de
fosfolpidos de la yema de huevo en una mezcla de disolventes cloroformo-metanol
logrando su separacin por cromatografa bidimensional.
Para poder llevar a cabo la identificacin de lpidos en la yema de huevo se
utilizaron reveladores como luz ultravioleta, ninhidrina, molibdato y bismuto los
cuales identifican diferentes tipos de lpidos.
La luz ultravioleta identifica lpidos insaturados observando simplemente manchas,
la ninhidrina identifica aminocidos que estn unidos a un lpido dando manchas de
color violeta, el bismuto identifica fosfolpidos que tienen colina dando manchas de
color naranjas y el molibdato identifica fosfolpidos en general dando manchas de
color azul.

Referencias.
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