Immuno-analyse & Biologie spcialise 19 (2004) 1322

www.elsevier.com/locate/immbio

Revue gnrale analyse prospective

Biologie molculaire des cancers

Molecular biology and cancer
I. Biche a,b
a
Laboratoire de gntique molculaire, UPRES EA 3618, facult des sciences pharmaceutiques et biologiques, universit Ren-Descartes, Paris-V,
4, avenue de lObservatoire, 75006 Paris, France
b
Laboratoire doncogntique, Inserm E0017, centre Ren-Huguenin, 35, rue Dailly, 92211 Saint-Cloud, France
Reu le 15 septembre 2003 ; accept le 25 novembre 2003

Rsum

Les vnements gntiques qui participent la formation des tumeurs sont en cours de description. Les premires anomalies dcrites
permettent dentrevoir quels gnes participent au processus tumoral. Les mcanismes mis en cause peuvent comporter lactivation de
proto-oncognes et linactivation de gnes suppresseurs. De nombreuses altrations gntiques sont ncessaires pour quun tissu normal
devienne tumoral. La grande majorit de ces altrations sont somatiques. Seule une tape est germinale, et exclusivement dans les tumeurs
hrditaires (~10 % des cancers). Lidentification des gnes altrs dans les tumeurs permet de progresser dans la comprhension des
mcanismes molculaires de la carcinogense et dutiliser ces marqueurs gntiques en cancrologie clinique.
2003 Elsevier SAS. Tous droits rservs.

Abstract

Genetic events involved in tumor formation are being described. Abnormalities known lead to the genes which participate to tumorigenesis.
Involved mechanisms are oncogene activation and tumor suppressor gene inactivation. Multiple genetic alterations are necessary for a normal
tissue to become malignant. Most of these genetic alterations are somatic. Only one step is inherited and in familial cancer only (~10% of
cancers). Identification of altered genes in tumors lets progress in the understanding of the molecular mechanisms of the carcinogenesis and
uses these genetic markers in clinical oncology.
2003 Elsevier SAS. Tous droits rservs.

Mots cls : Cancers sporadiques et hrditaires ; Proto-oncognes ; Gnes suppresseurs de cancer ; Applications cliniques

Keywords: Sporadic and familial cancers; Proto-oncogenes; Tumor suppressor genes; Clinical applications

1. Introduction localisation de la tumeur. Les malades ne dcdent pas du fait

Le cancer est la deuxime cause de dcs derrire les
maladies cardiovasculaires dans le monde dvelopp et la
troisime cause aprs les maladies infectieuses et parasitaires
et les maladies cardiovasculaires dans le monde en dvelop-
pement. Lvolution de la mortalit est variable selon la
Adresse e-mail : i.bieche@stcloud-huguenin.org (I. Biche).
2003 Elsevier SAS. Tous droits rservs.
doi:10.1016/j.immbio.2003.11.002
de leur tumeur primitive, mais plutt de lenvahissement
mtastatique ultrieur.
Il existe une grande htrognit des cancers au niveau
clinique, histologique, biologique et gntique. Ces varia-
tions importantes sont dues une tiologie complexe de ces
cancers faisant intervenir des facteurs exognes (niveau so-
cioconomique, alimentation, expositions aux radiations io-
nisantes...) ou endognes (dsquilibres hormonaux, antc-
dents familiaux de cancer...). Lagrgation familiale de
cancer reprsente le facteur de risque prdominant.
14 I. Biche / Immuno-analyse & Biologie spcialise 19 (2004) 1322
Fig. 1. Altrations gntiques dans les cancers.
Les techniques de biologie molculaire ont permis ces
dernires annes de prciser les concepts servant de base la
recherche en cancrologie : linitiation et la progression
dune tumeur sont lies laccumulation graduelle daltra-
tions gntiques responsables de lactivation anormale don-
cognes ou de linactivation de gnes suppresseurs de tu-
meurs.
la diffrence des cancers sporadiques o les altrations
gntiques sont toutes acquises au cours de la vie de lindi-
vidu, dans les cancers hrditaires, lune de ces altrations
est constitutionnelle, affectant alors la totalit des cellules de
lorganisme, y compris la ligne germinale. Cette altration
transmissible prdispose au dveloppement dune tumeur en
rduisant la priode ncessaire aux cellules pour acqurir le
nombre critique de mutations (Fig. 1). Dune manire gn-
rale, on considre que ces mutations rsultent de lexposition
aux agents mutagnes qui peuvent tre prsents dans notre
environnement de faon naturelle (soleil, alimentation...) ou
artificielle (tabac, expositions professionnelles...).
Lanalyse de lADN germinal des patientes atteintes de
formes familiales de cancer a permis didentifier des gnes
majeurs de susceptibilit. Cette information est aujourdhui
utile pour identifier les individus risque dans les familles
prsentant une mutation de lun de ces gnes.
En outre, la mise en vidence des altrations gntiques
somatiques dans les tumeurs est une tape essentielle vers la
comprhension des mcanismes molculaires de loncoge-
nse. Ces altrations sont galement potentiellement utilisa-
bles comme marqueurs en cancrologie clinique. En effet,
certaines de ces altrations pourraient tre utiles aux valua-
tions diagnostiques et pronostiques, lapprciation de la
rponse au traitement et seraient susceptibles douvrir la voie
vers de nouvelles approches thrapeutiques.
2. Altrations gntiques constitutionnelles
et prdisposition gntique au cancer
On distingue des prdispositions gntiques la fois ma-
jeures et mineures aux cancers. lheure actuelle, les possi-
bilits de prdiction du risque de cancer concernent exclusi-
vement les prdispositions gntiques majeures.
2.1. Prdispositions gntiques majeures aux cancers
On estime quenviron 10 % des cancers se dveloppent
dans un contexte de prdisposition gntique majeure. Ce-
pendant, la proportion des cancers hrditaires varie dun
type de cancer lautre : de trs faible pour le cancer du
poumon, du foie ou du col de lutrus jusqu 40 % pour le
rtinoblastome (Fig. 2).
Une mutation dun gne majeur de prdisposition au can-
cer chez un patient augmente considrablement son risque de
dvelopper une tumeur. Ce risque nest cependant pas de
100 % (pntrance forte mais incomplte). Par exemple,
environ 20 % des femmes porteuses de mutations du gne
BRCA1 nauront jamais de cancer du sein.
Les formes familiales de cancers se caractrisent par :
une incidence anormalement leve de cancers de mme
type au sein dune famille. Cela est particulirement net
si le type de cancer est rare dans la population gnrale ;
lexistence plus frquente de tumeurs multifocales, de
tumeurs bilatrales, de tumeurs primitives multiples ;
une atypie du point de vue de : lge dapparition des
tumeurs (plus prcoces), du sexe (cancer du sein chez
lhomme), du site (tissu inhabituel) ;
une transmission de la prdisposition sur le mode le plus
souvent autosomique dominant et plus rarement sur le
mode rcessive.
 I. Biche / Immuno-analyse & Biologie spcialise 19 (2004) 1322 15

Fig. 2. Proportion de cancers hrditaires.

On distingue diffrents groupes de prdispositions gn- jeurs de prdisposition au cancer du sein ont t caractriss,
tiques : BRCA1 et BRCA2 (respectivement en 1994 et 1995) qui
les syndromes hrditaires clairement identifis gnti- prdisposent environ 80 % des cancers du sein hrditaires
quement : ces syndromes sont rares. Le cancer est soit (Fig. 3). De plus, plusieurs autres gnes impliqus dans des
llment primordial (rtinoblastome), soit une compli- affections hrditaires rares pourraient expliquer certains cas
cation de la maladie hrditaire (neurofibromatose de de cancer du sein hrditaire, cest le cas des gnes TP53
Recklinghausen) ; responsable du syndrome de Li-Fraumeni (agrgation de
les formes familiales de cancers : il sagit le plus cancers du sein, de sarcomes, dhmopathies malignes, de
souvent dagrgation de cancers frquents dans la popu- tumeurs crbrales et de corticosurrnalomes) et du gne
lation gnrale. Les atteintes peuvent tre limites un PTEN responsable de la maladie de Cowden ou syndrome
seul site anatomique (cancers du sein ou du clon) ou des hamartomes multiples. Enfin, il existe des arguments
associant des localisations extrmement varies (syn- forts pour suggrer lexistence dun troisime gne majeur de
drome de Li-et-Fraumeni). prdisposition au cancer du sein familial (BRCA3 ?).
Cest partir de telles familles que des tudes de localisa- Ces nouvelles connaissances ont favoris le dveloppe-
tions gntiques ont permis didentifier les principaux gnes ment de consultation doncogntique et de laboratoire capa-
majeurs de prdisposition aux cancers (Tableau 1). bles de raliser des tests de prdisposition au cancer. Les
Il existe une htrognit gntique pour certains de ces formes familiales de cancers du sein et de lovaire sont, avec
cancer hrditaires, cest--dire que des gnes diffrents sont celles de cancers du clon, les formes hrditaires de cancer
associs au mme phnotype. Par exemple, deux gnes ma- les plus frquemment rencontres dans les consultations
Tableau 1
Principales prdispositions monogniques majeures au dveloppement de tumeurs transmission dominante
Prdisposition Frquence Sites tumoraux Gnes Protines
Cancer du sein 1/500 Sein, ovaire BRCA1, BRCA2 Rparation ADN
HNPCC 1/500 Clon endomtre... MSH2, MLH1... Rparation ADN
Neurofibromatose de type I 1/3500 Systme nerveux NF1 Inhibiteur des Ras
Polypose adnomateuse 1/10 000 Clon APC Contrle de la b-catnine
Mlanome 1/10 000 Peau P16, CDK4 a Rgulation cycle cellulaire
Syndrome de Li-Fraumeni 1/30 000 Sites multiples P53 Facteur de transcription
Rtinoblastome 1/40 000 Rtine, os RB1 Facteur de transcription
Noplasies endocrines multiples 1/40 000 Thyrode, surrnales RET a Rcepteur activit tyrosine kinase
de type 2, MEN2
a
Les gnes RET et CDK4 sont des oncognes, les autres gnes sont tous des gnes suppresseurs
16 I. Biche / Immuno-analyse & Biologie spcialise 19 (2004) 1322
Fig. 3. Htrognit gntique.
doncogntique. Des analyses gntiques peuvent tre pro-
poses pour ces gnes de prdisposition au cours de ces
consultations, dans le but dimpliquer lun des gnes dans la
famille et didentifier la mutation en cause.
Lorsque la recherche de mutations est la premire analyse
effectue dans une famille (on parle de recherche de cas
index ), les tests sont le plus souvent lourds et difficiles de
ralisation. Si on prend pour exemple le gne BRCA1
(Fig. 4) :
il existe une grande diversit et une grande dispersion
des mutations au niveau de ce gne ;
on observe dans prs de 10 % des familles lies
BRCA1, des rarrangements de grandes tailles (dl-
tions ou duplication dun ou plusieurs exons) non dtec-
tables par les techniques molculaires classiquement
utilises pour dtecter les mutations ponctuelles ;
il nexiste pas de test fonctionnel qui permettrait de dire
si certaines mutations du gne BRCA1, principalement
les mutations faux sens (environ 30 % de lensemble des
mutations observes), ont un caractre dltre.
En consquence, les tests molculaires actuellement utili-
ss ne sont pas totalement fiables. Nanmoins, lorsquune
mutation a t identifie pour un cas index , la recherche
Fig. 4. Spectre des mutations BRCA1.
chez les autres membres de la famille ( cas apparents )
devient alors trs simple puisquil sagit de rechercher la
mutation connue.
La recherche de mutations des gnes de prdisposition en
France entre dans le champ de la loi de biothique et du
dcret du 23 juin 2000 relatif aux conditions de prescription
et de ralisation des examens des caractristiques gntiques
dune personne des fins mdicales. Seuls les laboratoires
autoriss et les praticiens agrs, conformment aux articles
R. 145-15-6 et R. 145-15-11 du code de la sant publique,
peuvent effectuer ces analyses.
Une socit amricaine (Myriad Genetics) dtient aux
tats-Unis et en Europe plusieurs brevets relatifs des m-
thodes de diagnostic de prdisposition pour les gnes
BRCA1, BRCA2, APC, MLH1, MSH2 et P16/CDKN2A.
Forte de ses brevets, cette socit amricaine pourrait terme
exercer ses droits de deux faons ; revendiquer le monopole
de la recherche de mutations dans son propre laboratoire ou
tablir des conventions avec des laboratoires situs dans
dautres pays, le montant des droits pouvant alors tre trs
lev. Il existe ainsi des risques dingalit daccs aux tests
gntiques et des risques de ralentissement de la recherche
mdicale en raison dune situation de monopole.
La ralisation de ces tests prsente un grand intrt de
sant publique, car des mesures thrapeutiques et prophylac-
tiques peuvent tre proposes aux personnes porteuses de ces
mutations dans le but dviter la survenue dun cancer ou de
le dtecter prcocement un stade plus curable.
2.2. Prdispositions gntiques mineures au cancer
Les prdispositions gntiques mineures au cancer
font intervenir des gnes de faible pntrance avec labsence
dagrgation familiale vidente. Il existe une composante
hrditaire non perceptible par la gnalogie qui interagit
 I. Biche / Immuno-analyse & Biologie spcialise 19 (2004) 1322 17

Fig. 5. Dtoxification des xnobiotiques.

Des tudes sur les polymorphismes des gnes codant les enzymes mentionnes suggrent que ces enzymes interviendraient dans la susceptibilit individuelle
dvelopper des tumeurs.

avec lenvironnement dans la gense du cancer. Ces facteurs
mineurs de prdisposition pourraient moduler leffet de len-
vironnement sur notre organisme, et donc moduler, de faon
trs fine, le risque de dvelopper un cancer. Cest la notion de
terrain ou de susceptibilit individuelle .
Parmi les mcanismes impliqus, on peut citer : les syst-
mes mtaboliques de dtoxification des carcinognes (exem-
ple du benzopyrne contenu dans la fume de cigarette) qui
feront que pour une exposition donne, deux individus subi-
ront des consquences nfastes trs diverses.
Les systmes de dtoxification agissent en gnral en
deux tapes (Fig. 5). Une premire raction enzymatique
engendre des mtabolismes intermdiaires possdant un
groupement ractif destin, au cours dune deuxime tape,
permettre une conjugaison du glutathion ou un groupe-
ment actyl pour conduire une meilleure solubilit et une
excrtion efficace. Cependant les mtabolites intermdiaires
prsentent linconvnient dtre fortement ractifs vis--vis
de lADN. Les gnes codant ces enzymes prsentent de
frquents et nombreux polymorphismes dans la population
humaine. Il est attendu que cette variabilit gntique soit
associe des diffrences de susceptibilit au cancer.
Un polymorphisme particulier dun gne mineur de pr-
disposition aux cancers pourrait augmenter trs modrment
le risque de dvelopper une tumeur (risque cumul < 5 %)
(Fig. 6). Cependant, comme les polymorphismes observs
pour ces gnes sont frquents dans la population gnrale,
ces gnes pourraient tre impliqus dans 100 % des cancers.
Du fait que ces gnes naugmentent que de faon trs
modre le risque de dvelopper un cancer, lanalyse multi-
paramtrique de lensemble de ces gnes, par exemple par
des approches de recherche de SNP (single nucleotide poly-
morphism) sur puces ADN (cDNA microarray) devrait tre

Fig. 6. Relation entre risque de cancer, classe de gnes impliqus et frquence de mutations/polymorphismes.
Le haut risque de cancer du sein observ dans les familles ayant une mutation germinale dun gne majeur de prdisposition tel que BRCA1 est compens par
la raret des mutations. En revanche, la frquence importante des polymorphismes des gnes mineurs de prdisposition est compense par le faible risque
associ ces allles.
18 I. Biche / Immuno-analyse & Biologie spcialise 19 (2004) 1322
plus informative sur la prdisposition individuelle dvelop-
per un cancer.
3. Altrations gntiques somatiques dans les cancers
Les cancers se dveloppent par tapes successives rsul-
tant de la croissance excessive de clones cellulaires dans
certains tissus. Des gnes responsables de modifications
conduisant lapparition de ces clones et leur prolifration
anarchique ont t identifis. Le gnome des cellules euca-
ryotes renferme en effet deux familles de gnes, les proto-
oncognes et les gnes suppresseurs de tumeurs, capables de
provoquer ou dacclrer le processus cancreux lorsque leur
structure ou la rgulation de leur expression est altre. Ces
gnes se distinguent par leur mcanisme daction.
Le mode daction des proto-oncognes est considr
comme dominant. Il suffit quun seul exemplaire soit activ
pour quil y ait un effet positif sur la prolifration cellulaire
(gain de fonction). On connat plusieurs centaines doncog-
nes et la liste ne cesse daugmenter. lheure actuelle, le
terme oncogne devient imprcis et de nombreux gnes
codant pour des protines intervenant dans le mtabolisme
normal de la cellule peuvent y tre ajouts (facteurs de
croissance et leurs rcepteurs, cytokines...).
Les gnes suppresseurs de cancer qui sont constitus par
un plus petit nombre dexemples ont t dcouverts plus
rcemment. Le concept de gne suppresseur de cancer avait
t suggr ds les annes 1970, par des expriences de
gntique somatique in vitro, montrant que le phnotype
normal est dominant sur le phnotype transform dans
des hybrides somatiques forms partir de cellules normales
et de cellules cancreuses. Ces gnes paraissent agir de faon
rcessive, leur inactivation ncessitant laltration des deux
allles (perte de fonction).
Par lintermdiaire de leurs produits, oncognes et gnes
suppresseurs contrlent respectivement, de manire positive
et ngative, des ractions mtaboliques impliques dans la
progression coordonne du cycle cellulaire. De lintensit
relative de ces deux circuits opposs dpend la dcision pour
la cellule de rester dans un tat quiescent, de sengager dans
le cycle cellulaire, de se diffrencier ou enfin de mourir.
3.1. Identification des altrations somatiques
Les anomalies gntiques somatiques dans les tumeurs
ont principalement t apprhendes selon trois approches.
3.1.1. Analyse cytogntique
Au premier regard, lobservation dun caryotype de tu-
meur, en particulier dune tumeur solide, ne montre quun
ensemble complexe danomalies chromosomiques que lon
aurait tendance prendre pour le reflet de perturbations non
spcifiques. Pourtant, certaines de ces anomalies semblent
rcurrentes, apportant ainsi de prcieux renseignements sur
la localisation de gnes potentiellement impliqus dans ce
cancer (http://cgap.nci.nih.gov/Chromosomes/Mitelman).
3.1.2. Hybridation in situ
Le foss qui existe entre le pouvoir de rsolution de
lanalyse cytogntique et molculaire sest considrable-
ment rduit ces dernires annes grce au dveloppement de
nouvelles techniques dhybridation in situ : hybridation g-
nomique comparative (CGH pour Comparative Genomic
Hybridation) et hybridation in situ fluorescente (technique
FISH). Ces techniques permettent, de plus, dviter la culture
cellulaire pralable, source dun biais slectif de cellules
tumorales haut index mitotique.
La CGH permet de mettre en vidence les rgions ampli-
fies ou perdues du gnome. Par exemple, cette technique a
permis de caractriser une vingtaine de rgions chromosomi-
ques amplifies et dltes dans les tumeurs du sein [1].
Certaines de ces rgions, prcdemment dtectes par les
techniques cytogntiques et molculaires, semblent asso-
cies des oncognes [11q13 (CCND1), 17q12 (ERBB2)...]
ou des gnes suppresseurs connus [13q14 (RB1), 17p13
(TP53)]. De nouvelles altrations ont pu tre identifies,
suggrant de nouveaux gnes possiblement impliqus dans la
tumorigense. Cest le cas de lamplicon 20q13 (ZNF217,
NCOA3/AIB1, Aurora-A) dans le cancer du sein.
3.1.3. Analyse molculaire
Les anomalies gntiques les plus frquemment obser-
ves dans les tumeurs sont des mutations ponctuelles, rar-
rangements et amplifications dADN au niveau de proto-
oncognes, de facteurs de croissance et de leurs rcepteurs,
mais aussi des mutations, des hypermthylations et des per-
tes dhtrozygotie qui inactivent des gnes suppresseurs de
cancer.
Il est noter que les altrations au niveau des gne impli-
qus dans la stabilit du gnome peut tre responsable soit
dune instabilit gntique (altration de gnes des systmes
de rparation de lADN) soit dune instabilit chromosomi-
que (altration de gnes impliqus dans les processus de
sgrgation chromosomique). Il a ainsi t montr que des
altrations au niveau des gnes du systme de rparation des
msappariements (MLH1, MSH2, PMS1, PMS2...), objecti-
ves par des altrations au niveau des microsatellites du
gnome (rptitions de mono-, di-, tri- et ttra-nuclotides),
sont responsables de mutations spcifiques sur des oncog-
nes et des gnes suppresseurs. Ces instabilits de microsatel-
lites ont t identifies dans des tumeurs de sujets atteints du
syndrome HNPCC (hereditary nonpolyposis colorectal can-
cer), mais aussi dans des cancers colorectaux sporadiques
ainsi que dans les cancers classiquement associs ce syn-
drome.
De mme, des rsultats rcents suggrent que dans les
cancers fort taux daneuplodie (cancer du sein, cancer du
clon...), puissent exister des anomalies des processus de
sgrgation chromosomique. En effet, des anomalies du
point de contrle de lintgrit du fuseau mitotique (spindle
checkpoint) qui ltat normal assure une sparation correcte
des chromosomes au cours de la mitose, ont pour cons-
quence une instabilit chromosomique avec rpartition anor-
 I. Biche / Immuno-analyse & Biologie spcialise 19 (2004) 1322
Fig. 7. Analyse lchelle gnomique
male des chromosomes (aneuplodie). Les gnes codant les
constituants du spindle checkpoint ont tout dabord t iden-
tifis chez la levure Saccharomyces cerevisiae et plus rcem-
ment chez les eucaryotes suprieurs (gnes Aurora-A,
Aurora-B, MAD1, MAD2, BUB...chez lhomme). Aurora-A,
localis en 20q13, est ainsi amplifi et surexprim dans
plusieurs cancers pithliales [2]. Nous devrions connatre
dans les toutes prochaines annes limportance du rle du
spindle checkpoint dans laneuplodie des tumeurs.
Finalement, plusieurs articles, publis ces cinq dernires
annes, suggrent limportance majeure des altrations pi-
gntiques pour inactiver des gnes suppresseurs dans les
tumeurs [3]. Ce mcanisme a t mis en vidence pour
plusieurs gnes suppresseurs, qui dans certaines tumeurs, ne
montraient aucune expression transcriptionnelle tout en tant
indemne de toute mutation. Lanalyse de la rgion 5 de ces
gnes, tout particulirement au niveau des rgions riches en
dinuclotides CpG (lots CpG) montrait des profils aberrants
de mthylation. Dans la plupart des cas, une hypermthyla-
tion de ces rgions rgulatrices est associe labsence du
produit du gne. Les premiers gnes dcrits pouvant tre
inactivs par un tel mcanisme dans les tumeurs sont les
gnes RASSF1A (3p21.3), CDH1 (16q22.1) et P16/CDKN2A
(9p21).
3.2. Perspectives concernant les altrations gntiques
dans les tumeurs
Il est important de noter que la recherche dans le domaine
des altrations gntiques dans le cancer a subi des modifi-
cations profondes dans ses stratgies mthodologiques au
cours de ces trois dernires annes (Fig. 7). Le dveloppe-
ment des technologies issues des puces ADN (cDNA mi-
croarray) a permis de changer dchelle de travail en rali-
19
sant des analyses exhaustives de lensemble des gnes de
notre gnome. Les puces ADN permettent danalyser lex-
pression gnique, non plus lchelle individuelle, mais
lchelle du gnome (transcriptome des cellules tumorales).
La puissance de cette mthodologie a permis didentifier un
nombre considrable (plusieurs milliers) de nouveaux vne-
ments molculaires associs la tumorigense [4].
Pour apprhender de faon pertinente les altrations so-
matiques dune cellule tumorale, il est galement indispen-
sable de se pencher sur lanalyse des protines quelle
contient. En effet, les protines sont les principes actifs dous
de fonction dans la machinerie cellulaire, alors que les gnes
ne sont que des supports de linformation. Le niveau dex-
pression des ARN messagers nest pas forcment le reflet de
labondance, ni de la nature, des protines qui seront retrou-
ves dans la cellule tumorale. En effet, la traduction des ARN
messagers en protines est soumise un grande nombre de
rgulations, en particulier des modifications post-
transcriptionnelles (pissages alternatifs...) et post-
traductionnelles (glycosylation, phosphorylation, dgrada-
tion...) dont le rle est dterminant pour leur fonctionnalit
(ou bien leur pouvoir oncognique). En particulier, les pre-
mires tudes de protomique diffrentielle ont montr que
de nombreuses modifications entre tumeurs malignes et bni-
gnes sont dues des modifications post-traductionnelles non
dtectes par lanalyse des ARN messagers. La protomique
(tude du protome) doit son essor actuel en cancrologie
lmergence de technologies analytiques performantes per-
mettant danalyser des milliers de protines simultanment :
lectrophorse bidimensionnelle et surtout spectromtrie de
masse de type Maldi-Tof ou Seldi-Tof. Les premiers rsultats
concernant lanalyse du protome dans les tumeurs sont
extrmement prometteurs et lvidence, lanalyse protique
grande chelle constituera trs certainement une technolo-
20 I. Biche / Immuno-analyse & Biologie spcialise 19 (2004) 1322
Fig. 8. Marqueurs sriques et analyse protomique.
gie dcisive pour identifier des protines altres dans la
tumorigense [5].
Ces analyses de gnomique descriptive seront suivies ra-
pidement par des analyses de gnomique fonctionnelle :
localisation cellulaire et sub-cellulaire de ces oncoprotines,
caractrisation de leurs interactants molculaires, tude de
leffet de leur surexpression (ou de leur extinction) contrle
dans des modles in vivo (modles animaux) ou in vitro
(lignes cellulaires)...
3.3. Interactions entre les cellules tumorales et les cellules
du stroma
Les tumeurs sont principalement composes de cellules
cancreuses, mais elles contiennent galement dautres types
cellulaires non cancreuses comme des fibroblastes, des lym-
phocytes, des cellules endothliales... Il est important de ne
pas ngliger le rle de ces cellules non tumorales dans la
tumorigense et la dissmination mtastatique [6]. Par exem-
ple, la formation de vaisseaux sanguins partir des cellules
endothliales (langiogense) est un phnomne crucial pour
le dveloppement tumoral. De mme, les mtalloprotases,
qui interviennent dans la dgradation de la matrice extracel-
lulaire et donc dans la dissmination mtastatique, sont ex-
primes majoritairement par les fibroblastes.
4. Applications cliniques des altrations gntiques
somatiques
Laccroissement considrable de nos connaissances mol-
culaires dans la carcinogense mammaire va trs probable-
ment dans un proche avenir tre utile aux valuations dia-
gnostiques et pronostiques, lapprciation de la rponse aux
traitements et serait susceptible douvrir la voie vers de
nouvelles approches thrapeutiques.
4.1. Dpistage des cancers
La stratgie de dpistage des cancers fonde sur la recher-
che de marqueurs tumoraux dans le srum est pour une
majorit de cancers peu efficace du fait du manque de sensi-
bilit et de spcificit des marqueurs utiliss ce jour. Cepen-
dant, les marqueurs tumoraux pourraient connatre un regain
dintrt en raison du dveloppement de nouvelles approches
technologiques en particulier la spectromtrie de masse de
type Seldi-Tof qui a le potentiel didentifier des profils pro-
tiques sriques spcifiques de patientes atteintes de cancer
(Fig. 8). Les molcules identifies peuvent driver de la
tumeur et/ou de son tissu hte environnant. Les premiers
rsultats obtenus sont extrmement prometteurs et lvi-
dence la protomique pourrait devenir un outil de dpistage
performant, non invasif (1 l de sang), rapide (30 minutes
pour obtenir un profil spectral) et peu onreux [5].
4.2. Aide au diagnostic
Les cancers forment un groupe de maladies dune grande
htrognit. Lidentification de sous-groupes de tumeurs,
grce lutilisation de marqueurs molculaires, va permettre
une approche nouvelle dans le diagnostic de cancers consi-
drs cliniquement et histologiquement quivalents, mais
dont lvolution est trs variable. Les marqueurs molculai-
res seront utiles pour la dcision mdicale dans des situations
 I. Biche / Immuno-analyse & Biologie spcialise 19 (2004) 1322 21

Fig. 9. Signature molculaire (70 gnes) qui permet de prdire lvolution du cancer du sein
Lanalyse de lexpression de 25 000 gnes dans une srie de 78 tumeurs du sein de bon pronostic (petites tumeurs sans envahissement ganglionnaire) a permis
didentifier un groupe de 70 gnes ayant la capacit de distinguer les patientes qui ont rechut sous les cinq ans de celles qui nont pas rechut. Lintrt
pronostique de cette signature molculaire fut confirm sur une seconde srie de 17 tumeurs du sein.

o lanalyse histopathologique nest pas dcisive, principa-
lement dans les tapes prcoces de la tumorigense. terme,
ces nouveaux marqueurs biologiques permettront un dia-
gnostic prsymptomatique du cancer, et en association avec
les caractristiques anatomopathologiques reconnues, pour-
ront dboucher sur une nouvelle classification des lsions
bnignes et des formes non infiltrantes.
4.3. Pronostic de la maladie
Les facteurs pronostiques cliniques et histologiques se
rvlent insuffisants pour prvoir avec exactitude lvolution
des cancers.
Les premires altrations suggres pour avoir un intrt
pronostique utilisable en cancrologie clinique sont lampli-
fication et la surexpression des proto-oncognes (ERBB2,
Cyclines D1, hTERT...), ainsi que les altrations des gnes
suppresseurs (p53, p16/CDKN2A...). On sest acharn va-
luer certains marqueurs, comme par exemple les gnes cits
ci-dessus, alors que 1000 autres pourraient ltre tout aussi
lgitimement. De plus, un marqueur isol ne fera pas le
pronostic. Pour tre plus dterminante, la recherche des alt-
rations gntiques dintrt pronostique devra tre plus glo-
bale au niveau du gnome, en utilisant des techniques dana-
lyse molculaire grande chelle (SNPs, CGH-arrays,
cDNA microarrays, spectromtrie de masse,...). Rcemment,
des chercheurs nerlandais ont ainsi identifi, partir de
25 000 gnes et en utilisant la technologie des cDNA mi-
croarrays, une premire signature molculaire de 70 gnes
comme marqueur pronostique indpendant dans le cancer du
sein [7] (Fig. 9).
4.4. Prdiction de la rponse la chimiothrapie
adjuvante
Les marqueurs molculaires devraient prendre un essor
considrable pour prdire la rponse une chimiothrapie
adjuvante. De plus, tant donn la disponibilit croissante de
nouvelles molcules antitumorales, une caractrisation mo-
lculaire plus approfondie de la maladie est indispensable
pour en affiner les indications thrapeutiques.
Depuis 1992 plusieurs tudes ont montr des rsultats
encourageants mais encore prliminaires, concernant lasso-
ciation de certaines anomalies gntiques, analyses indivi-
duellement, avec la rponse thrapeutique. Elles concernent
par exemple la drgulation de lexpression des gnes
ERBB2, BCL2 et de TP53. Cependant, on peut penser quun
marqueur isol ne pourra jamais pleinement prdire la r-
ponse une molcule cytotoxique et que lon devra proba-
blement avoir recours un typage molculaire de la tumeur
en mesurant lexpression gnique grande chelle. cet
effet, de nombreux projets, utilisant la technologie des puces
22 I. Biche / Immuno-analyse & Biologie spcialise 19 (2004) 1322
ADN, sont actuellement en cours de ralisation pour tudier
in vitro et in vivo leffet des cytotoxiques utiliss dans les
cancers sur les programmes molculaires transcriptionnels
des cellules tumorales, dans le but didentifier de potentiels
facteurs contribuant au dveloppement de la rsistance ces
molcules. Citons pour exemple, une tude rcente o les
auteurs ont dtermin les profils dexpression de plus de
5000 gnes sur des lignes cellulaires mammaires rsistantes
ou non la doxorubicine et identifi environ 300 gnes
diffrentiellement exprims [8].
terme, lanalyse de ces profils molculaires (ou dun
panel de gnes dintrt, sous forme de signatures molculai-
res) pourrait dboucher sur des traitements individualiss
pour chaque patiente, en dterminant le type de mdicaments
utiliser mais aussi les doses administrer.
4.5. Perspectives thrapeutiques
Enfin, les progrs de la connaissance des mcanismes
molculaires des cancers dbouchent actuellement sur des
stratgies thrapeutiques nouvelles. Maintenant que lon a
dcouvert et caractris des gnes dont les produits sont
capables de drguler une cellule normale, on met au point
des mdicaments innovants ciblant spcifiquement ces gnes
(ou leurs produits) dans un but de rduquer ces cellules
tumorales ou de les liminer slectivement.
Les cibles molculaires potentielles qui semblent avoir le
plus grand intrt actuellement en vue dapplications thra-
peutiques dans les cancers sont les rcepteurs de surface
activit tyrosine kinase. Citons pour exemple, lanticorps
monoclonal humanis dirig contre le domaine extracellu-
laire du rcepteur ERBB2, lHerceptin (trastuzumab), qui a
obtenu une autorisation de mise sur le march en France en
mars 2001. Ce mdicament est actuellement indiqu chez les
patientes atteintes dun cancer du sein mtastatique surexpri-
mant ERBB2 [9].
Dautres inhibiteurs des rcepteurs activit tyrosine ki-
nase sont actuellement en cours dutilisation dans les cancers
humains, cest le cas de lIressa (ZD1839), dorigine syn-
thtique et dirige contre le domaine tyrosine kinase de
ERBB1 (REGF) dans les cancers du poumon non petites
cellules, et du Glivec (STI571) inhibiteur slectif des tyro-
sine kinase ABL, BCR-ABL, KIT et PDGFR dans les leuc-
mies mylodes chroniques (LMC) et les tumeurs stromales
digestives (GIST pour Gastro-Intestinal Stromal Tumor).
Des essais, ciblant dautres molcules drgules dans les
cellules tumorales, sont galement en cours : les kinases
impliques dans la transduction des signaux (anti-GRB2,
anti-Ras-farnsyl-transfrase...), les rgulateurs du cycle cel-
lulaire (anti-mTOR) et de lapoptose, et les molcules agis-
sant positivement dans la noangiogense (anti-VEGF, anti-
FLK1, anti-COX2...). Enfin, une cible majeure actuelle de la
thrapeutique concerne les protases qui lorsquelles sont
drgules sont responsables du pouvoir mtastasant de la
tumeur [10].
Ces mdicaments innovants, ayant un mcanisme daction
original et une mise sur le march rapide (tudes de phase III
gnralement courtes), ont cependant linconvnient majeur
dtre extrmement coteux, sans commune mesure avec les
traitements de rfrence connus ce jour. Chaque mdica-
ment nouvellement mis sur le march est susceptible de faire
monter de faon importante la courbe de progression des
dpenses dans les tablissements de sant. Une augmentation
exponentielle de la mise sur le march de ces nouveaux
mdicaments est projete court terme, il sera donc primor-
dial dvaluer les conditions optimales dutilisation et les
bnfices attendus pour chacun de ces produits. Les mtho-
des molculaires de diagnostic pour cibler au mieux les
patientes susceptibles de bnficier le plus de ces diffrents
mdicaments ncessitent ainsi dtre standardises.
Finalement, il est encore trs difficile de prjuger de la
faisabilit et de lefficacit de ces nouvelles approches thra-
peutiques lchelle dun organisme entier. En effet, nous ne
connaissons pas toutes les consquences de la normalisation
de la rgulation dune altration gntique, mme prcoce,
sur un organisme drgul la fois au niveau gntique et
pigntique.
Rfrences
[1] Tirkkonen M, Tanner M, Karhu R, Kallioniemi A, Isola J, Kal-
lionier OP. Molecular cytogenetics of primary breast cancer by CGH.
Genes Chromosomes Cancer 1998;2:17784.
[2] Jaallepalli PV, Lengauer C. Chromosome segregation and cancer:
cutting through the mystery. Nat Rev Cancer 2001;1:10917.
[3] Tycko B. Epigenetic gene silencing in cancer. J Clin Invest 2000;105:
4017.
[4] Perou CM, Sorlie T, Eisen MB, Van De Rijn M, Jeffrey SS,
Rees CA, et al. Molecular portraits of human breast tumours. Nature
2000;406:74752.
[5] Petricoin EF, Ardekani AM, Hitt BA, Levine PJ, Fusaro VA, Stein-
berg SM, et al. Use of proteomic patterns in serum to identify ovarian
cancer. Lancet 2002;359:5727.
[6] Bissell MJ, Radisky D. Putting tumours in context. Nat Rev Cancer
2001;1:4654.
[7] Vant Veer LJ, Dai H, Van De Vijver MJ, He YD, Hart AA,
Mao M, et al. Gene expression profiling predicts clinical outcome of
breast cancer. Nature 2002;415:5306.
[8] Kudoh K, Ramanna M, Ravatn R, Elkahloun AG, Bittner ML, Melt-
zer PS, et al. Monitoring the expression profiles of doxorubicin-
induced and doxorubicin-resistant cancer cells by cDNA microarray.
Cancer Res 2000;60:41616.
[9] Leyland-Jones B. Trastuzumab: hopes and realities. Lancet Oncol
2002;3:13744.
[10] Overall CM, Lopez-Otin C. Strategies for MMP inhibition in cancer:
innovations for the post-trial era. Nat Rev Cancer 2002;2:65772.