TITULO.

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DETERMINACIN DE MERCURIO EN MUESTRA HIDROBIOLGICA

MATERIALES:
MATERIAL BIOLOGICO:
Pescado, molusco langostino y camarones.

MATERIAL DE LABORATORIO:
Matraz volumetrico de 100 ml.
Matraz de fondo plano de 250 ml.
Pipeta de 2, 5 y 10 ml.
Vaso de pp. 100 ml
Estufa de encineracin.
Gradilla
Papel milimtrico.

REACTIVOS:
Solucin de ditizona
Cloroformo
H2SO4CC.
KMNO4.
Hidroxilamina.
Amoniaco cc.
HCL 0.1 N.
Bromato de potasio al 40 %
Solucin bufer.
Diclururo de mg. q.p.
HCL 0.5 N.
Solucin estndar de agua destilada.

EQUIPOS:
Espectrofotmetro
Equipo de diseccin
PROCEDIMIENTO:
Varios mtodos analticos estn disponibles para la determinacin de
mercurio total, inorgnico y orgnico, en diferentes sustratos.
Todos representan una mejora considerable del mtodo original
colorimtrico de la ditizona. El mtodo de activacin neutrnica se considera como
el ms exacto y sensible, y usualmente es utilizado como mtodo de referencia. El
mtodo de absorcin atmica sin llama es el ms ampliamente usado en muestras
biolgicas y ambientales; aunque no es selectivo, puede determinar tanto el
mercurio total como el mercurio inorgnico y por diferencia el mercurio orgnico. El
mtodo de cromatografa de gas lquido con detector de captura electrnica se
prefiere cuando se requiere medir selectivamente el metilmercurio en tejidos de
pescado en presencia de otros compuestos de mercurio.

MTODO DE LA DITIZONA PARA LA EXTRACCIN DE MERCURIO

Se basa en la propiedad del mercurio divalente de forma con la ditizona, un
ceto complejo de color amarillo naranja, el cual se extrae con cloroformo.

1 En primer lugar, se prepara la muestra: Consiste en separar la parte

comestible del pescado, molusco, langostino, camarn o cualquier otro tipo
hidrobiolgico. Se lava con agua destilada tres veces, de manera consecutiva, y
luego se procede a picar la muestra de forma muy fina hasta hacer una papilla
ms o menos homognea.
De una papilla se toman 25 gramos para realizar la determinacin.
2 Digestin de la muestra: Consiste en un baln de 500 ml, se coloca la
muestra y se aade cuidadosamente 20 ml de HCl CC. Al baln se acopla un
refrigerante de reflujo, suavemente, hasta que empiece la evolucin (hervir) aade
poco a poco 3 gr. de KMnO4 hasta obtener un color ligeramente prpura, luego se
agrega 2 ml. de clorhidrato de hidroxilamina al 20%, la solucin debe quedar
incolora. En algunos casos, es necesario calentar hasta la decoloracin total de la
muestra. Luego, se procede a la carbonizacin de la muestra, en una mufla, hasta
obtener cenizas blancas, se filtra, y el residuo se lava con una pequea cantidad
de agua bidestilada; en esta condicin queda listo para la extraccin.
3 Extraccin del mercurio: Se enfra la muestra a temperatura ambiente, se
transfiere a una pera de decantacin de 250 ml. Se lleva la solucin a PH =2,
utilizando amoniaco cc., se mide el PH y luego se aade 5 ml de ditizona
extractiva, se agita por 2 minutos y se aprecia en color verde oscuro del
preparado, el proceso extrado, se repite 3 veces en la forma similar a la descrita
(fase clorofrmica). Los extractos clorofrmicos obtenidos se juntan y se agitan, se
agrega 25 ml de HCl. 0.1N a la fase acuosa, se le agrega 10 ml de cloroformo y se
agita, finalmente se rene todos los extractos cloroformos unidos.
Esta extraccin no es selectiva (puede estar siendo interferida por otros metales
que interfirieron el proceso).
4 Separacin de sustancias interferentes: Al embudo que contiene extractos
cloroformos de ditizona, se aade 25 ml de bromuro de K al 40%, se agita por 2
minutos y en estas condiciones, el mercurio pasa por la fase acuosa, formando el
complejo tetrabromuro mercurato de K, separndose as de la sustancia
interferente: cobre, bismuto, plomo, arsnico, cromo, que permanecen en la capa
clorofrmica, la misma que se descarta.
5 Formacin y medicin especto fotomtrica del complejo: La fase acuosa se
lava y se agita con algunos cloroformos Q.P., que luego se deshechan; se agrega
5 ml de buffer para ajustar el PH 6.4, as se rompe el complejo
tetrabromomercurato de K (para que quede libre el mercurio). Por ltimo, se aade
7.5 ml de ditizona estndar y se agita por 2 minutos. En estas condiciones se
forma el ditizonato de mercurio que es un complejo coloreado, posteriormente se
hace la lectura de la absorbancia 490 Nm en el espectrofotmetro y se dibuja la
cc. en la curva de calibracin que previamente se haya preparado. Esto implica
preparar una solucin patrn y una solucin estndar de Hg.
PREPARACIN DE LA SOLUCIN PATRN
Se disuelve 80.13 gr de dicloruro de Hg Q.P en HCl 0.5N, se afora a 100 ml con el
mismo cido. Esta nueva solucin equivale a 1ml de Hg por 1ml (1ml Hg/1ml), es
bastante estable.
PREPARACIN ESTNDAR I DE MERCURIO
Se prepara transfiriendo 10 ml de la solucin patrn a una fiola de 1000 ml, luego
se afora con agua destilada; esto significa que la concentracin de Hg ser 10
ugr/ml.
PREPARACIN DE LA SOLUCIN ESTNDAR II DE MERCURIO
Se transfiere 25 ml de la solucin estndar I a una fiola de 250 ml y se completa el
volumen con agua destilada, la cc. ser de Hg, de esta nueva solucin ser de 1
ug/ml. La recomendacin tanto de la solucin estndar I como de la solucin
estndar II debe ser preparada en el momento de emplearse.
CURVA DE CALIBRACIN
Se toma 2.5, 5, 7.5 y 10 ml de la solucin estndar II, que son ledos en el
espectrofotmetro y se grafica en el papel milimetrado. Luego, en esa grfica, se
incluye la lectura de la muestra problema.
TITULO.-
DETERMINACIN POR ESPECTROFOTOMETRA DE LA CONCENTRACIN
DE COBALTO Y NQUEL EN UNA MEZCLA

MATERIALES:
Espectrofotmetro Biomate 3 Thermoline
2 celdas para espectrofotmetro
2 matraces aforados 100 mL
2 matraces volumtricos de 25 mL
2 vasos de precipitados de 100 mL
2 pipetas graduadas de 5 mL
Vidrio de reloj
Balanza analtica
Esptula
Piseta con agua destilada

REACTIVOS:
Co (NO3)2* 6H2O
Ni (NO3)2* 6H2O

PROCEDIMIENTO:
1. Preparar las siguientes disoluciones:
a) 100 mL de Co (NO3)2* 6H2O 0.09 M
b) 100 mL de Ni (NO3)2* 6H2O0.09 M
2. Verificar que las longitudes de onda de mxima absorbancia no se
sobrepongan, haciendo un barrido de 10 nm desde 300 hasta 700 nm, para cada
una de las dos soluciones.
3. Medir la transmitancia en el mximo de absorcin.
4. Medir la transmitancia de una mezcla problema que proporciona el profesor,
con los mismos compuestos en los mximos obtenidos para cada solucin del
procedimiento nmero 2.
TRATAMIENTO DE DATOS EXPERIMENTALES:
A partir de los porcientos de transmitancia calcule los valores de
absorbancia para cada una de las longitudes de onda. Si se hacen varias
determinaciones tome el promedio.

Con estos datos calcule los coeficientes de extincin molar de los dos iones
a las dos diferentes longitudes de onda.

Calcule la concentracin molar de cada componente. Para obtener mejores

resultados efecte los clculos conservando tres cifras despus del punto
decimal. Reporte los resultados en molaridad y en mg de Ni por mL y mg de
Co por mL.