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Facultad de Qumica
MANUAL DE LABORATORIO
DE
PARASITOLOGA
Autores
Dra. Eneida Camarillo Romero
Q.F.B. Guadalupe Lastenia Daz Flores
Dra. Mara del Socorro Camarillo Romero
Agosto 2016.
Universidad Autnoma del Estado de Mxico 1
Facultad de Qumica
CONTENIDO
Pgina
Presentacin 2
Objetivos Generales 3
Reglamento del Laboratorio 4
Reporte de la Prctica 5
Evaluacin del Laboratorio 5
Evaluacin del Curso 5
Prctica No. 1 Normas de seguridad e higiene (NOM-087) 6
Prctica No. 2 Micrometra 9
Practica No. 3 Muestras y exmenes tiles para la bsqueda de parsitos intestinales 16
Prctica No. 4 Protozoarios 19
Prctica No. 5 Flagelados intestinales y del aparato genitourinario 22
Prctica No. 6 Trypanosoma 24
Prctica No. 7 Leishmania 28
Prctica No. 8 Plasmodium 30
Prctica No. 9 Toxoplasma 34
Prctica No. 10 Nematodos I (Ascaris, Enterobius, Trichuris) 37
Prctica No. 11 Nemtodos II (Strongyloides, Uncinarias) 41
Prctica No. 12 Cstodos (Taenia, Hymenolepis) 45
Prctica No. 13 Tremtodos (Fasciola, Paragonimus) 48
Prctica No. 14 Parsitos emergentes 51
Bibliografa 54
Relacin Teora - Laboratorio 55
PRESENTACIN
El parasitismo se refiere a cualquier relacin recproca en el cual una especie depende de otra, esta
asociacin puede ser momentnea o permanentemente; generalmente se aplica a un organismo ms
dbil que obtiene de otro alimento y abrigo, y aprovecha todos los posibles beneficios de la asociacin. La
especie portadora, llamada husped, puede no sufrir efectos dainos, o verse afectada por varios
trastornos funcionales y orgnicos.
Las manifestaciones clnicas de enfermedades parasitarias son tan generales que en la mayora de los
casos no basta el diagnstico basado sobre la sintomatologa. El diagnstico de certeza y la instauracin
de un buen tratamiento exigen se identifique el parsito en el laboratorio.
En el presente manual se han considerado las principales parasitosis que pueden presentarse en nuestro
pas. Adems, est integrado de tal manera que la informacin pueda servir como una herramienta dentro
del mbito clnico profesional.
OBJETIVOS GENERALES
El alumno conocer la normatividad de seguridad e higiene que rigen las buenas prcticas dentro del
laboratorio de parasitologa, misma que deber adoptar como propias para su formacin acadmica.
El alumno identificar el tipo de muestra necesaria para el examen parasitolgico, as como las
condiciones mediante las cuales debern obtenerse.
El alumno obtendr el conocimiento de los exmenes empleados para el diagnstico parasitolgico dentro
del laboratorio clnico.
Describir las caractersticas diferenciales de los agentes etiolgicos de las enfermedades parasitarias,
para efectuar el diagnstico clnico y de laboratorio correctos.
Explicar los mecanismos de transmisin en las parasitosis humanas, describiendo el ciclo biolgico,
diagnstico, tratamiento y medidas preventivas especficas para cada manifestacin.
1. Todos debern presentarse en el laboratorio con bata blanca limpia, equipo de seguridad personal y
con el material necesario para la prctica.
2. Queda prohibido dentro del laboratorio fumar, comer, beber, pipetear con la boca y en general llevarse
cualquier objeto a la boca.
3. El laboratorio, material y equipo proporcionado deber quedar limpio al final de la prctica.
4. El material biolgico (materia fecal) utilizado durante la prctica deber inactivarse con cal (1:10 p/p),
dejndolo actuar por 30 minutos, para su eliminacin al sanitario.
5. El material de vidrio contaminado con productos biolgico-infecciosos utilizado durante la prctica
deber inactivarse con cloro al 10%, dejndolo actuar por 30 minutos, para su lavado.
6. Los guantes y cubrebocas usados en la prctica, deber ser sanitizado con cloro, antes de su
disposicin final.
7. Todo material punzocortante (lancetas, agujas) ser depositado en los recipientes destinados para
ello.
8. Cada laboratorio cuenta con una bitcora de generacin y eliminacin de residuos biolgico
infecciosos, misma que deber ser llenada al finalizar la prctica.
9. Los microscopios sern revisados antes de ser usados, cualquier anomala detectada (falta de
limpieza, falla ptica, falla elctrica, etc.) ser comunicada inmediatamente al tcnico(a) laboratorista
y al profesor para su ulterior reporte.
10. Al final de la prctica debern desinfectar perfectamente las mesas de trabajo con benzal.
11. Lavarse las manos con agua y jabn despus de la prctica.
12. Todos debern guardar el orden y compostura que merece el laboratorio.
REPORTE DE LA PRCTICA
El reporte deber realizarse dentro del manual anexando las hojas necesarias al final de cada prctica, las
cuales contendrn:
Actividad de sntesis.
Esquemas de la prctica (observaciones de los parsitos).
Discusin de resultados.
Referencias bibliogrficas.
Manual: 10%
Se calificar el desarrollo de la prctica y el manual.
Teora 80%
Laboratorio 20%
PRCTICA No. 1
"Normas de seguridad e higiene"
OBJETIVO
El alumno conocer las normas de higiene y seguridad indispensables dentro del laboratorio clnico
(NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002), para aplicarlas durante el desarrollo del curso.
Duracin: 2 Hrs.
INTRODUCCIN
El manejo de los residuos peligrosos biolgico-infecciosos en los establecimientos que prestan atencin
mdica constituyen un gran problema a nivel nacional, por lo que es necesario el establecimiento de
requisitos para su control.
MATERIAL
MTODO
Despus de la exposicin, se har una dinmica en la que participarn todos los equipos.
El equipo responsable entregar material para que sea clasificado (tiempo 15 min).
Cada equipo explicar el por qu de su clasificacin y se discutir ante grupo.
ACTIVIDAD DE SNTESIS
Cmo se clasificaron los residuos biolgico-infecciosos y cmo tienen que ser eliminarlos?
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
PRCTICA No. 2
"Micrometra"
OBJETIVO
El alumno aprender a determinar coeficientes micromtricos y la calibracin del microscopio, para medir
los parsitos vistos durante el curso.
Duracin: 2 Hrs.
INTRODUCCIN
El micrmetro ocular es un disco de vidrio de 2 cm de dimetro, en el cual puede verse grabada una
escala de 5 mm, dividida en 50 partes y generalmente numerada de 10 en 10. Este disco se coloca sobre
el diafragma de cualquier ocular, transformndose as en un ocular micromtrico, cada divisin de sta
escala mide 10 micras. El ocular micromtrico de fbrica es esencialmente lo mismo, pero su lente ocular
va montado sobre un tubo corto que puede acortarse o alargarse a voluntad por desplazamiento en el
tubo externo, permitiendo as enfocar con precisin la escala micromtrica intercalada en l.
El micrmetro objetivo es un portaobjetos en cuyo centro se halla grabada una escala de 1 o 2 mm,
dividida en 100 o 200 partes; cada divisin mide, por lo tanto 10 micras.
MATERIAL
Microscopio
Micrmetro ocular
Micrmetro objetivo
Copia en acetato de la hoja correspondiente al micrmetro ocular (Anexo 1).
MTODO
Coloque el micrmetro objetivo sobre la platina del microscopio casi como si fuera una preparacin
cualquiera.
Sustituya el ocular normal por el micrmetro ocular, o bien intercalndolo sobre el diafragma (colocando la
escala grabada del micrmetro ocular hacia abajo).
Corregir el enfoque de ambas escalas, procurando, a la vez, colocarlas paralelas y muy prximas entre s,
o superpuestas.
Hacer coincidir exactamente las lneas del cero, la del micrmetro ocular con la del micrmetro objetivo.
Seleccionar un segundo punto, lo ms alejado posible del primero, donde coincidan exactamente otro par
de lneas.
A partir de las lneas superpuestas o coincidentes, se cuentan las divisiones de la escala del ocular y las
del objetivo que midan entre ellas.
Repita el procedimiento una segunda y una tercera vez, seleccionando en cada ocasin un punto ms
cercano al cero.
ACTIVIDAD DE SNTESIS
40X
100X
40X
100X
Mide los siguientes parsitos a 10X, 40X y 100X, y compralos con los valores tericos.
Parsito 10X 40X 100X Real
1 Ascaris lumbricoides
2 Trichuris trichiura
3 Hymenolepis diminuta
4 Taenia sp
5 Faciolopsis buski
6 Paragonimus mexicanus
1 2 3 4 5 6
1 2 3
4 5 6
6
5
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Micrmetro Ocular
50
40
30
20
10
Micrmetro Objetivo
PRCTICA No. 3
"Muestras y exmenes tiles para la bsqueda de parsitos intestinales"
OBJETIVOS
Explicar los procedimientos de obtencin y manejo de material fecal, para realizar estudios microscpicos.
Analizar y describir los procedimientos frecuentemente usados, en el diagnstico de parasitosis
intestinales.
Realizar el examen coproparasitoscpico directo en fresco y por concentracin.
Duracin: 2 Hrs.
INTRODUCCIN
El diagnstico de las parasitosis intestinales depende del hallazgo de huevos, larvas o adultos de
helmintos y quistes o trofozotos de protozoos en heces, por tanto la recoleccin y el manejo adecuado de
las muestras fecales, son indispensables para la identificacin correcta de los parsitos, en el laboratorio.
Son factores que interfieren con el examen de las heces, la ingestin de medicamentos previa a su
recoleccin y las muestras viejas o conservadas de manera inadecuada. La cantidad de materia fecal
suficiente para un examen rutinario, es una muestra del tamao de la nuez o de dos o tres cucharadas
soperas. La materia fecal se deposita en un recipiente de boca ancha, con tapa hermtica y limpia; no
debe contaminarse con agua, orina o cualquier otro material extrao, no debe obtenerse de la taza del
bao, ni del suelo.
Otras muestra tiles en la bsqueda de parsitos intestinales son el contenido duodenal, raspado
perianal, aspirado rectal o material obtenido por rectosigmoidoscopia.
Existe una diversidad de exmenes tiles en el diagnstico de parasitosis intestinales, la seleccin del
examen adecuado, depender de la consistencia de la materia fecal o de los sntomas del paciente. Los
exmenes frecuentemente utilizados son el directo en fresco y lo de concentracin, que se basan en los
principios fsicos de flotacin o sedimentacin. El examen en fresco es el ms sencillo y se recomienda
para la bsqueda de trofozotos de protozoos, en muestras pastosas, diarreicas o lquidas. Los exmenes
de concentracin se recomiendan para la demostracin de quistes, ooquistes, huevos o larvas.
MATERIAL
MTODO
Examen en fresco.
Colocar una gota de solucin NaCl al 0.85%, en un portaobjetos.
Con un aplicador, obtener aproximadamente 2 mg de la materia fecal y mezclarla en la gota de
solucin salina.
Hacer una suspensin uniforme y retirar los detritos macroscpicos.
Colocar un cubreobjeto y hacer la observacin microscpica inmediatamente, con los objetivos 10X y
40X.
En otro portaobjeto, colocar una gota de lugol y continuar como con la gota de solucin salina.
Coproparasitoscpico por concentracin: Tcnica de la CLSI (Clinical and Laboratory Standards
Institute).
Colocar en un frasco aproximadamente un gramo de materia fecal de cada recipiente de las
muestras del mismo paciente.
Adicionar aproximadamente 50 ml de solucin salina fisiolgica.
Dejar reposar 30 minutos, con el fin de permitir que las muestras compactas se reblandezcan.
Mezclar bien la muestra.
Tamizar empleando un copropac (en su defecto una coladera y un recipiente de vidrio).
Vertir a los tubos de ensaye 6 ml de la muestra tamizada.
Centrifugar 10 minutos a 500g.
Desechar el sobrenadante.
Agregar 2 ml de sulfato de zinc y resuspender el sedimento del fondo del tubo.
Agregar 5 ml de sulfato de zinc y centrifugar durante 1 minuto a 500g.
Colocar una pipeta pasteur una gota de la pelcula superficial en un portaobjetos, decantar el
sobrenadante y con la misma pipeta colocar una gota del sedimento en el mismo lugar, adicionar una
gota de lugol, mezclar y tapar con un cubreobjetos.
Observar al microscopio con objetivo seco dbil (10X).
Revisar la laminilla comenzando en la esquina superior izquierda en forma de zigzag de izquierda a
derecha.
Posteriormente, observar al microscopio con objetivo seco fuerte (40X).
Revisar la laminilla comenzando en la esquina superior izquierda en forma de zigzag de izquierda a
derecha, y de abajo hacia arriba.
Calibracin de la centrfuga: La g es el nmero de veces la gravedad y se debe determinar la velocidad de
cada centrfuga en r.p.m., para lograr 500 g debes medir la distancia del eje de la centrfuga al fondo
del tubo (cm), sin importar si es de ngulo fijo o de columpio, y consulta la siguiente tabla.
RADIO R.P.M. RADIO R.P.M.
10 2100 20 1500
11 2050 21 1450
12 2000 22 1400
13 1850 23 1400
14 1800 24 1350
15 1700 25 1300
16 1650 26 1300
17 1600 27 1250
18 1550 28 1250
19 1500 29 1200
ACTIVIDAD DE SNTESIS
Cul es el examen de laboratorio de eleccin para la bsqueda de huevos, quistes o larvas en heces?
Porqu se recomienda se estudien tres muestras seriadas de materia fecal en los exmenes
coproparasitoscpicos por concentracin?
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
PRCTICA No. 4
"Protozoarios"
OBJETIVOS
Mencionar las indicaciones de cada uno de los exmenes de laboratorio utilizados en el diagnstico de
amibiasis.
Reconocer microscpicamente de Entamoeba histolytica y otras amibas.
Analizar el tipo de muestras clnicas, en las cuales puede encontrarse Balantidium coli.
Discutir la importancia clnica de las amibas de vida libre.
Duracin: 2 Hrs.
INTRODUCCIN
El diagnstico tambin se puede realizar durante la bsqueda de antgeno en heces con la tcnica de
ELISA. Pero cuando se aloja fuera del intestino por ejemplo en hgado, pulmn u otros tejidos, no es fcil
su hallazgo por los mtodo de laboratorio rutinarios, sino que se tiene que recurrir a la biopsia o la
deteccin de anticuerpos especficos mediante tcnicas como: contrainmunoelectroforesis,
inmunodifusin, ELISA, inmunoelectroforesis, hemoglutinacin indirecta, inmunofluorescencia o fijacin
del complemento.
Las amibas de vida libre fueron consideradas hasta hace algunas dcadas como una curiosidad de
laboratorio por los protozologos. A pesar, de la baja frecuencia de la infeccin, son en la actualidad de
importancia mdica por la ubicuidad y alta virulencia de los parsitos, la ausencia de un tratamiento
efectivo y porque algunos de ellos producen enfermedades de tipo fulminantes y mortal como la
meningoencefalitis.
Las amibas de vida libre patgenas que afectan al humano son del gnero Acanthamoeba y Naegleria. La
clasificacin taxonmica previa se basaba en la morfologa, las caractersticas de locomocin y el patrn
de la divisin nuclear. Los mtodos actuales utilizan adems, tcnicas serolgicas, fisiolgicas, de
biologa molecular e isoenzimticas. Las especies patgenas de los diferentes gneros se denominan
anfizoicas por mostrar la capacidad de sobrevivir tanto en el ambiente como en el hospedero animal
despus de invadirlo.
La balantidiosis es una protozoosis cuyas manifestaciones clnicas son muy similares a las que se
presentan en la entamoebosis, shigelosis y otras, por lo que debe recurrirse a exmenes de laboratorio
especficos, para la identificacin del agente etiolgico, Balantidium coli. La balantidiosis es quiz la ms
fcil de diagnosticar mediante exmenes de laboratorio sencillos, rpidos y econmicos.
MATERIAL
MTODO
ACTIVIDAD DE SNTESIS
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
PRCTICA No. 5
"Flagelados intestinales y del aparato genitourinario"
OBJETIVOS
Enlistar los exmenes de laboratorio utilizados para el diagnstico de las giardiosis y tricomoniasis.
Mencionar los productos en que debe buscarse Giardia lamblia y Trichomonas vaginalis.
Reconocer microscpicamente Giardia lamblia y Trichomonas vaginalis.
Duracin: 2 Hrs.
INTRODUCCIN
Giardia lamblia es un enteropatgeno flagelado, que se localiza usualmente en las criptas de la mucosa
del duodeno y la porcin inicial del yeyuno. Clnicamente hay datos que permiten sospechar el diagnstico
de giardiosis, sin embargo es recomendable confirmarlos mediante exmenes de laboratorio.
MATERIAL
MTODO
ACTIVIDAD DE SNTESIS
Ante la sospecha clnica de tricomoniasis urogenital, qu examen de laboratorio solicitara y por que?
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
PRCTICA No. 6
Trypanosoma
OBJETIVOS
Duracin: 2 Hrs.
IINTRODUCCIN
EXAMEN DE SANGRE. Las pruebas clsicas para la deteccin de tripomastigotes, son el examen directo
y los extendidos (delgados o gruesos) teidos con Giemsa; sin embargo, es recomendable hacer tcnicas
de concentracin de sangre mediante los mtodos de Stront o Woo (hematocrito).
MATERIAL
MTODO
ACTIVIDAD DE SNTESIS
Anote el nombre y las caractersticas morfolgicas de las fases parasitarias de Trypanosoma cruzy
Amastigote Promastigote
Epimastigote Tripomastigote
Trypoanosoma cruzi
Trypanosoma gambiense
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
PRCTICA No. 7
Leishmania
OBJETIVOS
Duracin: 2 Hrs.
IINTRODUCCIN
La leishmaniosis es una histoparasitosis producida por protozoos del gnero Leishmania, de localizacin
intracelular; caracterizada por lesiones cutneas, mucocutneas o viscerales y cuyo agente causa es
transmitido por la picadura de mosquitos del gnero Lutzomyia.
En su ciclo biolgico, las especies del gnero Leishmania, presentan una fase de amastigote y otra de
promastigote, son indistinguibles de las diferentes especies de Leishmania.
Por su morfologa son idnticas, por lo que es importante su localizacin para diferenciar la especie:
Localizacin Especie
Amastigote
MATERIAL
MTODO
ACTIVIDAD DE SNTESIS
Menciona dos exmenes de laboratorio empleados para el diagnstico de la leishmaniosis cutnea y que
estructuras espera encontrar para confirmar el diagnstico?
En el caso de leishmaniosis visceral cul es el material biolgico ms adecuado para la bsqueda del
agente etiolgico?
Cul es el medio de cultivo para el aislamiento de leishmaniosis y qu fase del parsito se desarrolla en
este medio?
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
PRCTICA No. 8
Plasmodium
OBJETIVOS
Duracin: 2 Hrs.
INTRODUCCIN
Plasmodium es el agente causal de la malaria; se multiplica a travs de dos mecanismos, uno sexual que
se lleva acabo en el mosco anopheles (husped definitivo) y otro asexual que ocurre en el husped
humano (husped intermediario) en el que presenta una fase exoeritroctica y otra eritrocitica en la que es
considerado un parsito intracelular.
MATERIAL
MTODO
Tincin
Colocar sobre el frote unas gotas de metanol y dejar secar
Colocar sobre el frote seco la solucin de azul de metileno, dejar un segundo
Enjuagar con la solucin amortiguadora, hasta que los bordes de la muestra en la gota gruesa se
tornen de un color gris azulado.
Dejar escurrir el portaobjetos.
Agregar el colorante de Giemsa recin preparado (1 gota de solucin alcohlica de Giemsa en 1 ml.
de solucin amortiguadora)
Dejar que el colorante actu de 6 a 10 minutos. El tiempo puede variar de un lote a otro de
colorante.
Enjuagar con solucin amortiguadora para eliminar el exceso de colorante de Giemsa
Dejar escurrir y secar mediante calor suave y abanicado.
Examinar la laminilla con objetivo de inmersin.
ACTIVIDAD DE SNTESIS
Para llevar a cabo el diagnstico de especie de la malaria, en que momento es conveniente tomar la
muestra?
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
PRCTICA No. 9
Toxoplasma
OBJETIVOS
Mencionar los exmenes de laboratorio directos e indirectos que se usan para el diagnstico de
toxoplasmosis.
Reconocer microscpicamente trofozotos de Toxoplasma gondii.
Duracin: 2 Hrs.
INTRODUCCIN
El diagnstico clnico de esta protozoosis no es fcil debido entre otra causas a que el agente etiolgico,
Toxoplasma gondii, es el parsito ms diseminado en el mundo. Esto trae como consecuencia que la
toxoplasmosis pueda coexistir con cualquier otra enfermedad, sin una relacin causa-efecto entre esta
parasitosis y la sintomatologa del paciente.
Resulta muy difcil y con frecuencia imposible, establecer el diagnstico sin la ayuda del laboratorio y an
as en muchas ocasiones, tampoco se logra.
Los mtodos de laboratorio pueden ser directos e indirectos. Los primeros ayudan a demostrar la
presencia del parsito y los segundos a detectar anticuerpos especficos.
Bradizotos (Giemsa)
Toxoplasma gondii
(Inmunofluorescencia indirecta)
MATERIAL
MTODO
ACTIVIDAD DE SNTESIS
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
PRCTICA No. 10
Nemtodos I
OBJETIVOS
Duracin: 2 Hrs.
INTRODUCCIN
Los agentes etiolgicos de las geohelmintosis son: Trichuris. trichiura, Ascaris lumbricoides, Strongyloides
stercolaris, Necator americanus y Ancylostoma duodenale. Todos excepto Trichuris trichiura, tienen ciclo
migratorio por hgado, corazn pulmones para finalmente establecerse en intestino delgado. Trichuris
trichiura se localiza en el ciego.
Una vez establecidos los adultos en el intestino delgado o grueso y cuando alcanzan su madurez sexual,
se eliminan las formas diagnsticas en la materia fecal; as por medio de mtodos de concentracin por
flotacin o sedimentacin se llega al diagnstico.
La enterobiosis es una parasitosis que afecta frecuentemente a grupos de personas que viven en
hacinamiento; se adquiere por la ingestin de huevos de Enterobius vermicularis, a travs de la
contaminacin de las manos al rascarse la regin perianal y posteriormente llevrselas a la boca; otro
mecanismo es por contagio por la convivencia con individuos portadores del parsito o por diseminacin
de huevos por el polvo.
Los gusanos adultos se localizan en la regin leocecal del intestino, donde permanecen adosado por
medio de sus expansiones cuticulares ceflicas (aulas). Para establecer el diagnstico de certeza, es
necesario demostrar los adultos en heces o huevos del parsito en la regin perianal del husped,
MATERIAL
Tcnica de Kato-Miura.
Papel estraza / Cajas de Petri. / Pipetas Pasteur con bulbo de caucho.
Cuadros de celofn de 22x30 mm, en solucin de verde malaquita-glicerol.
Malla de alambre de acero inoxidable de cuadros de 4 cm. por lado / Pinzas
Aplicadores de madera / Portaobjetos / Cubreobjetos / Muestra de materia fecal
Preparacin de Reactivos:
Solucin de Verde de malaquita al 3% (pesar 0.03 g de verde de malaquita y disolverlos en 1 mL de agua
destilada)
Solucin de verde de malaquita y glicerol: 100 mL de Glicerina pura adicionar 00 mL de agua destilada y 1
mL de la solucin de verde de malaquita al 3%.
Mtodo de Graham
Abatelenguas / Cinta adhesiva transparente / Portaobjetos
MTODO
MTODO DE GRAHAM.
Sobre el extremo de un abatelenguas, colocar 8 cm de cinta adhesiva transparente, con la parte
engomada hacia fuera y sostenerla contra el abatelenguas, con los dedos ndice y pulgar.
Colocar al paciente, de manera que quede expuesta la regin perianal: presionar la cinta adhesiva
contra dicha regin hacia la izquierda y la derecha, tendiendo cuidado de cubrir toda el rea entre la
mucosa y la piel.
Pegar la cinta sobre un porta objetos y rotular con los datos del paciente.
Examinar la preparacin en el microscopio, con los objetivos 10X y 40X.
ACTIVIDAD DE SNTESIS
( ) ( ) ( )
( ) ( ) ( ) ( )
( ) ( ) ( )
b) Trichuris trichiura
c) Enterobius vermicularis
b) Trichuris trichiura
c) Enterobius vermicularis
b) Trichuris trichiura
c) Enterobius vermicularis
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS:
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
PRCTICA No. 11
Nemtodos II
OBJETIVOS
INTRODUCCIN
Otros de los agentes etiolgicos de las geohelmintosis mencionados anteriormente son: Strongyloides
stercoralis, Necator americanus y Ancylostoma duodenale. Estos parsitos infectan al hombre cuando la
larva filariforme penetra la piel, migratorio por hgado, corazn pulmones para finalmente establecerse en
intestino delgado.
La trichinellosis es una helmintosis causada por Trichinella spiralis, que se caracteriza por sndrome febril,
edema parpebral, mialgias y eosinofilia. Esta parasitosis usualmente se sospecha por la sintomatologa y
con los antecedentes de haber ingerido carne de cerdo infectada mal cocida, sus derivados.
La toma de la biopsia se recomienda despus del da 25 de iniciada la infeccin, ya que antes de este
tiempo, las larvas pueden no estar enrolladas, lo que dificulta y disminuye la sensibilidad de la prueba. En
estas circunstancias es recomendable realizar digestin con jugo gstrico artificial y lectura del sedimento
al microscopio.
MATERIAL
MTODO
TCNICA DE HARADA MORI. El mtodo permite el cultivo de huevecillos para obtener el desarrollo de
larvas de helmintos, las que son ms fcilmente identificables para precisar la especie.
La muestra debe conservarse a temperatura entre 15C y 30C, desde el momento de la recoleccin
hasta su proceso. La exposicin de la muestra al sol o fro intenso, destruye la viabilidad de los
huevecillos.
Las heces formadas pueden reblandecerse con un poco de agua destilada, es recomendable utilizar
cuatro tubos por muestra.
Colocar en un tubo de ensaye 5 ml. de agua destilada
Se extiende un frote delgado (1 a 2 mm) de heces con el abatelenguas o aplicador de madera, en el
tercio medio del papel filtro de un solo lado, respetando as los extremos.
Introducir la tira de papel filtro en un tubo de ensaye, tapar el tubo dejando el tapn flojo.
El cultivo se guarda a temperatura ambiente (24C a 28C) y se deja durante 5 das.
A partir del 5 da se inicia la revisin de los tubos de la siguiente forma:
Mediante el microscopio estereoscpico, se observa la presencia de larvas en el fondo del tubo.
Calentar los tubos en bao mara a 50C por 30 minutos.
Aspirar con la pipeta Pasteur una muestra del fondo del tubo.
Colocar una gota en cada extremo del portaobjetos, agregando una gota de lugol a cada una de ellas.
Cubrir la preparacin con cubreobjetos y observar al microscopio.
Nota: al calentar los tubos a 50C se puede manipular la muestra sin correr riesgos de contaminacin
con material altamente infectante.
ACTIVIDAD DE SNTESIS
b) Trichinella spiralis
c) Necator americanus
b) Trichinellosis
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS:
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
PRCTICA No. 12
"Cstodos"
OBJETIVOS
Enlistar los exmenes de laboratorio utilizados para el diagnstico de cstodos y mencionar ventajas y
limitaciones de las tcnicas empleadas en el diagnstico inmunolgico de cisticercosis.
Reconocer mediante preparaciones fijas, Taenia solium, Taenia. Saginata y Cisticerco
Identificar microscpicamente los huevos de Taeneia sp e Hymenolepis nana
Duracin: 2 Hrs.
INTRODUCCIN
Taenia solium y Taenia saginata son los agentes etiolgicos de la taeniosis; estos cstodos tienen su
hbitat en el intestino delgado del hombre, que es su nico husped definitivo.
La expulsin espontnea de progltides en las heces orienta a la bsqueda de estos cstodos, ya que el
individuo que aloja una Taenia puede eliminar progltides junto con las heces, por lo que es de suma
importancia realizar un tamiz de la materia fecal en bsqueda de progltides, los cuales miden
aproximadamente de 10 a 20 mm de longitud por 5 a 7 mm de ancho y presentan un color blanco.
Los huevecillos de la tenia desarrollados dentro del cuerpo o ingeridos directamente de carne de res o
cerdo, se desarrollan en forma larvaria. La forma larvaria de Taenia solium es el cisticerco, que en el ser
humano y algunos animales causa cisticercosis. El cisticerco se ha encontrado alojado en diferentes
rganos y tejidos causando sintomatologa muy variada, lo que hace difcil establecer un diagnstico
temprano.
Hymenolepis nana es el cestodo ms pequeo que parasita el intestino delgado (leon) de los seres
humanos, en donde se pueden encontrar hasta miles de estos parsitos. Mide de 3 a 4 cm de longitud por
1 a 2 mm de ancho; presenta un esclex con cuatro ventosas y un rostelo retrctil armado por una corona
de ganchos; la cadena estrobilar la constituyen progltides trapezoidales.
Los huevos salen por las heces al desintegrarse los progltides grvidos que se caracterizan por tener
una corteza gruesa y transparente; y dentro se encuentra el embrin hexacanto.
MATERIAL
MTODO
ACTIVIDAD DE SNTESIS
b) Hymenolepis nana
Esquematizar:
Cuales son las principales pruebas serolgicas y de gabinete que se realizan para el diagnstico de
cisticercosis?
Realizar una historia clnica de un paciente con cisticercosis y los estudios sugeridos para establecer el
diagnstico.
Escribe una historia clnica de un paciente parasitado con Hymenolepis nana, y los estudios de
laboratorio necesarios para establecer el diagnstico
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
PRCTICA No. 13
"Tremtodos"
OBJETIVOS
Duracin: 2 Hrs.
INTRODUCCIN
La fasciolosis es una zoonosis causada por el tremtodo Fasciola heptica, que tiene como huspedes
definitivos a animales herbvoros y humanos, en los que se localiza en los conductos biliares. La
sospecha clnica de fasciolosis, se establece mediante la sintomatologa del paciente y considerando los
antecedentes epidemiolgicos y hbitos de alimentacin. El diagnstico se debe confirmar mediante
mtodos directos durante la fase de estado o indirectos durante la fase migratoria o de invasin.
La paragonimosis es una zoonosis causada por el tremtodo Paragonimus sp, se adquiere por ingestin
de cangrejos, langostinos y camarones de agua dulce infectados y mal cocidos. El adulto se localiza en el
pulmn; el diagnstico se hace al identificar los huevos en esputo, lquido pleural y materia fecal.
Fasciola heptica
Paragonimus wetermani
MATERIAL
MTODO
ACTIVIDAD DE SNTESIS
A B C
D E F
Fasciola heptica.
Paragonimus sp
Fasciola heptica.
Paragonimus sp
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
PRCTICA No. 14
"Parsitos emergentes"
OBJETIVOS
Duracin: 2 Hrs.
INTRODUCCIN
La cryptosporidiosis es una entidad en la que el agente etiolgico se reconoci como patgeno para el
hombre hasta 1976, en esa poca se asoci en pacientes con sndrome de inmunodeficiencia adquirida o
inmunocompremotidos actualmente tambin en individuos inmunocompetentes.
Para reconocer los ooquistes con menos dificultad, se puede recurrir a diferentes tinciones entre otras:
Giemsa, Ziehl-neelsen modificado o Kynyoun.
Isospora belli es un coccidio intestinal cuya presencia en heces de humanos fue descrita por primera vez
en 1890 por Raillet y Lucet. La importancia de su estudio radica en que se ha reconocido como un
oportunista causante de diarrea crnica en pacientes con SIDA.
MATERIAL
MTODO
Examen en fresco:
En un portaobjetos hacer una suspensin de la muestra con solucin salina.
Adicionar una gota de lugol, mezclar y colocar un cubreobjetos, observar al microscopio.
Tincin de Kinyoun:
Preparar un extendido de heces, dejar secar al aire.
Fijar la preparacin con metanol, durante 1 min. Dejar secar al aire.
Cubrir la preparacin con carbol-fucsina y teir durante 2 min.
Enjuagar con agua de la llave.
Decolorar con cido sulfrico al 10% y lavar con agua de la llave, hasta lograr un rosa plido.
Teir con verde brillante 1% durante 30 segundos; lavar con agua de la llave y dejar secar al aire.
Examinar la preparacin en el microscopio, con los objetivos 10X, 40X y 100X, los ooquistes se tien
de color cereza.
ACTIVIDAD DE SNTESIS.
Isospora beli
Cryptosporidium parvum
Blastocystis hominis
Cyclospora cayetanensis
Isospora beli
Cryptosporidium parvum
Blastocystis hominis
Cyclospora cayetanensis
ESQUEMAS DE LA PRCTICA
DISCUSION DE RESULTADOS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
BIBLIOGRAFA
Beaver, P.C.; Cup, R.C. y Wayne, E. Parasitologa clnica de Craig Faust. RC Masson Ed. 2003.
Dvila GC,Trujillo HB. Prevalencia de parasitosis intestinal en nios de zonas urbanas del estado de
Colima, Mxico. Bol Med Hosp Infant Mex. 2001; 58:2349.
Garca TLE, Hernndez RJ, Olivares HKV, Cant LJH. Prevalencia de parasitosis intestinal en nios en
edad preescolar. Bioquimia. 2004; 29 Suppl 1: 99.
Rodrguez GLM, Hernndez JEJ, Rodrguez GR. Parasitosis intestinal en nios seleccionados en una
consulta ambulatoria de un hospital. Rev Mex Pediatr. 2000; 67: 1 1722.
Romero FDE. Actividad trptica en nios asintomticos con giardiasis. Rev Sanid Milit. 2004; 58:2003.
Unidad V. Helmintos