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Universidad Autnoma del Estado de Mxico

Facultad de Qumica

Programa Educativo Qumico Farmacutico Bilogo

MANUAL DE LABORATORIO
DE
PARASITOLOGA

Nombre del alumno(a) ___________________________________

Autores
Dra. Eneida Camarillo Romero
Q.F.B. Guadalupe Lastenia Daz Flores
Dra. Mara del Socorro Camarillo Romero

Agosto 2016.
Universidad Autnoma del Estado de Mxico 1
Facultad de Qumica

CONTENIDO

Pgina
Presentacin 2
Objetivos Generales 3
Reglamento del Laboratorio 4
Reporte de la Prctica 5
Evaluacin del Laboratorio 5
Evaluacin del Curso 5
Prctica No. 1 Normas de seguridad e higiene (NOM-087) 6
Prctica No. 2 Micrometra 9
Practica No. 3 Muestras y exmenes tiles para la bsqueda de parsitos intestinales 16
Prctica No. 4 Protozoarios 19
Prctica No. 5 Flagelados intestinales y del aparato genitourinario 22
Prctica No. 6 Trypanosoma 24
Prctica No. 7 Leishmania 28
Prctica No. 8 Plasmodium 30
Prctica No. 9 Toxoplasma 34
Prctica No. 10 Nematodos I (Ascaris, Enterobius, Trichuris) 37
Prctica No. 11 Nemtodos II (Strongyloides, Uncinarias) 41
Prctica No. 12 Cstodos (Taenia, Hymenolepis) 45
Prctica No. 13 Tremtodos (Fasciola, Paragonimus) 48
Prctica No. 14 Parsitos emergentes 51
Bibliografa 54
Relacin Teora - Laboratorio 55

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PRESENTACIN

El parasitismo se refiere a cualquier relacin recproca en el cual una especie depende de otra, esta
asociacin puede ser momentnea o permanentemente; generalmente se aplica a un organismo ms
dbil que obtiene de otro alimento y abrigo, y aprovecha todos los posibles beneficios de la asociacin. La
especie portadora, llamada husped, puede no sufrir efectos dainos, o verse afectada por varios
trastornos funcionales y orgnicos.

La transmisin de enfermedades parasitarias depende de tres factores: 1) fuente de infeccin, 2) modo de


transmisin, y 3) presencia de husped susceptible. El efecto combinado de estos factores establece la
existencia de un parsito en un momento y en un lugar determinados, y su tendencia a la diseminacin.

Las manifestaciones clnicas de enfermedades parasitarias son tan generales que en la mayora de los
casos no basta el diagnstico basado sobre la sintomatologa. El diagnstico de certeza y la instauracin
de un buen tratamiento exigen se identifique el parsito en el laboratorio.

En el presente manual se han considerado las principales parasitosis que pueden presentarse en nuestro
pas. Adems, est integrado de tal manera que la informacin pueda servir como una herramienta dentro
del mbito clnico profesional.

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OBJETIVOS GENERALES

El alumno conocer la normatividad de seguridad e higiene que rigen las buenas prcticas dentro del
laboratorio de parasitologa, misma que deber adoptar como propias para su formacin acadmica.

El alumno identificar el tipo de muestra necesaria para el examen parasitolgico, as como las
condiciones mediante las cuales debern obtenerse.

El alumno obtendr el conocimiento de los exmenes empleados para el diagnstico parasitolgico dentro
del laboratorio clnico.

Describir las caractersticas diferenciales de los agentes etiolgicos de las enfermedades parasitarias,
para efectuar el diagnstico clnico y de laboratorio correctos.

Explicar los mecanismos de transmisin en las parasitosis humanas, describiendo el ciclo biolgico,
diagnstico, tratamiento y medidas preventivas especficas para cada manifestacin.

Desarrollar un proyecto aplicado el mtodo cientfico en el cual presentar en forma de cartel.

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REGLAMENTO DEL LABORATORIO

1. Todos debern presentarse en el laboratorio con bata blanca limpia, equipo de seguridad personal y
con el material necesario para la prctica.
2. Queda prohibido dentro del laboratorio fumar, comer, beber, pipetear con la boca y en general llevarse
cualquier objeto a la boca.
3. El laboratorio, material y equipo proporcionado deber quedar limpio al final de la prctica.
4. El material biolgico (materia fecal) utilizado durante la prctica deber inactivarse con cal (1:10 p/p),
dejndolo actuar por 30 minutos, para su eliminacin al sanitario.
5. El material de vidrio contaminado con productos biolgico-infecciosos utilizado durante la prctica
deber inactivarse con cloro al 10%, dejndolo actuar por 30 minutos, para su lavado.
6. Los guantes y cubrebocas usados en la prctica, deber ser sanitizado con cloro, antes de su
disposicin final.
7. Todo material punzocortante (lancetas, agujas) ser depositado en los recipientes destinados para
ello.
8. Cada laboratorio cuenta con una bitcora de generacin y eliminacin de residuos biolgico
infecciosos, misma que deber ser llenada al finalizar la prctica.
9. Los microscopios sern revisados antes de ser usados, cualquier anomala detectada (falta de
limpieza, falla ptica, falla elctrica, etc.) ser comunicada inmediatamente al tcnico(a) laboratorista
y al profesor para su ulterior reporte.
10. Al final de la prctica debern desinfectar perfectamente las mesas de trabajo con benzal.
11. Lavarse las manos con agua y jabn despus de la prctica.
12. Todos debern guardar el orden y compostura que merece el laboratorio.

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REPORTE DE LA PRCTICA

El reporte deber realizarse dentro del manual anexando las hojas necesarias al final de cada prctica, las
cuales contendrn:
Actividad de sntesis.
Esquemas de la prctica (observaciones de los parsitos).
Discusin de resultados.
Referencias bibliogrficas.

EVALUACIN DEL LABORATORIO

Primer parcial: 40%


Examen escrito y prctico o Proyecto.

Segundo parcial: 40%


Examen escrito y prctico.

Seminario y responsabilidad de la prctica: 10%


Se expondr el o los temas asignados desde el inicio del curso, dando una breve gua de la prctica y
teniendo la responsabilidad de mantener el orden y limpieza del laboratorio, as como la eliminacin propia
de los RPBI.

Manual: 10%
Se calificar el desarrollo de la prctica y el manual.

Calificacin mnima aprobatoria 6.0

Asistencia Mnima del 85%

EVALUACIN DEL CURSO

Teora 80%
Laboratorio 20%

Nota: Se promediarn slo cuando haya sido acreditado el laboratorio.

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PRCTICA No. 1
"Normas de seguridad e higiene"

OBJETIVO

El alumno conocer las normas de higiene y seguridad indispensables dentro del laboratorio clnico
(NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002), para aplicarlas durante el desarrollo del curso.

Duracin: 2 Hrs.

INTRODUCCIN

El manejo de los residuos peligrosos biolgico-infecciosos en los establecimientos que prestan atencin
mdica constituyen un gran problema a nivel nacional, por lo que es necesario el establecimiento de
requisitos para su control.

La NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 establece los requisitos para la separacin, envasado,


almacenamiento, recoleccin, transporte, tratamiento y disposicin final de los residuos biolgico-
infecciosos que se generen en establecimientos que presten atencin mdica, tales como clnicas y
hospitales, as como laboratorios clnicos, laboratorios de produccin de agentes biolgicos, de
enseanza y de investigacin, tanto humanos como veterinarios en pequeas especies y centros
antirrbicos.

MATERIAL

Lo proporcionar el equipo responsable de la prctica.


Ejemplificar el material que a continuacin se enlista.
Bolsa roja / Bolsa amarilla / Bolsa negra.
Cloro / Recipiente de plstico de1 litro / Recipiente de plstico de 2.5 litros.
Cubeta de plstico de 25 litros / Recipiente rgido hermtico / Recipiente rgido metlico
Jeringa / Lanceta / Aplicadores / Cubrebocas / Guantes
Gasas rotulada AGUA / Gasa rotulada CLORO / Gasa rotulada CONTAMINADA
Papel higinico / Papel estraza rotulado CONTAMINADO / Pepel estraza rotulado PAN
Pipetas pasteur / Cucharilla de vidrio / Cubreobjetos / Copropac
Abatelenguas rotulado CAF / Abatelenguas rotulado MUESTRA
Portaobjetos rotulado ROTO / Portaobjetos rotulado MUESTRA.
Tubo rotulado SANGRE / Tubo rotulado ORINA / Tubo rotulado EXCREMENTO.
Frasco con tapa de rosca con una bola de unicel (pintada de caf) en su interior.
Frasco de vidrio sin tapa con una bola de unicel (pintada de caf) en su interior.

MTODO

Despus de la exposicin, se har una dinmica en la que participarn todos los equipos.
El equipo responsable entregar material para que sea clasificado (tiempo 15 min).
Cada equipo explicar el por qu de su clasificacin y se discutir ante grupo.

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ACTIVIDAD DE SNTESIS

Cmo se clasificaron los residuos biolgico-infecciosos y cmo tienen que ser eliminarlos?

La Facultad de Qumica en qu categora se considera como establecimientos generadores de residuos


biolgico-infecciosos, y bajo que criterios?

Dibuja el smbolo universal de riesgo biolgico

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Diagrama de flujo de la eliminacin de residuos dentro del laboratorio de parasitologa

Propn un plan de contingencias en caso de accidente o derrame de las muestras empleadas en el


laboratorio de parasitologa.

DISCUSION DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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PRCTICA No. 2
"Micrometra"

OBJETIVO

El alumno aprender a determinar coeficientes micromtricos y la calibracin del microscopio, para medir
los parsitos vistos durante el curso.

Duracin: 2 Hrs.

INTRODUCCIN

El micrmetro ocular es un disco de vidrio de 2 cm de dimetro, en el cual puede verse grabada una
escala de 5 mm, dividida en 50 partes y generalmente numerada de 10 en 10. Este disco se coloca sobre
el diafragma de cualquier ocular, transformndose as en un ocular micromtrico, cada divisin de sta
escala mide 10 micras. El ocular micromtrico de fbrica es esencialmente lo mismo, pero su lente ocular
va montado sobre un tubo corto que puede acortarse o alargarse a voluntad por desplazamiento en el
tubo externo, permitiendo as enfocar con precisin la escala micromtrica intercalada en l.

El micrmetro objetivo es un portaobjetos en cuyo centro se halla grabada una escala de 1 o 2 mm,
dividida en 100 o 200 partes; cada divisin mide, por lo tanto 10 micras.

El COEFICIENTE MICROMTRICO es la cifra que expresa la equivalencia en micrmetros de una


divisin de la escala del micrmetro ocular al emplear cada objetivo del microscopio; suele denominarse
FACTOR y a la operacin para obtenerla CALIBRACIN DEL MICROSCOPIO.

El coeficiente micromtrico es inversamente proporcional al poder de amplificacin de los objetivos.


Usualmente se obtienen tres coeficientes micromtricos para cada microscopio, usando un solo ocular
micromtrico.

MATERIAL

Microscopio
Micrmetro ocular
Micrmetro objetivo
Copia en acetato de la hoja correspondiente al micrmetro ocular (Anexo 1).

MTODO

Coloque el micrmetro objetivo sobre la platina del microscopio casi como si fuera una preparacin
cualquiera.

Centre y enfoque la escala, utilizando el objetivo que va a calibrar.

Sustituya el ocular normal por el micrmetro ocular, o bien intercalndolo sobre el diafragma (colocando la
escala grabada del micrmetro ocular hacia abajo).

Corregir el enfoque de ambas escalas, procurando, a la vez, colocarlas paralelas y muy prximas entre s,
o superpuestas.

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Hacer coincidir exactamente las lneas del cero, la del micrmetro ocular con la del micrmetro objetivo.

Seleccionar un segundo punto, lo ms alejado posible del primero, donde coincidan exactamente otro par
de lneas.

A partir de las lneas superpuestas o coincidentes, se cuentan las divisiones de la escala del ocular y las
del objetivo que midan entre ellas.

Repita el procedimiento una segunda y una tercera vez, seleccionando en cada ocasin un punto ms
cercano al cero.

Calcule el coeficiente micromtrico (C.M.) empleando la siguiente frmula:

Nmero de divisiones Micrmetro Objetivo


C.M. = ------------------------------------------------------------ X 10 micras
Nmero de divisiones Micrmetro Ocular

ACTIVIDAD DE SNTESIS

Qu importancia tiene el calcular el C.M.?

Determina los coeficientes micromtricos, empleando el micrmetro ocular (acetato) y el micrmetro


objetivo.

Primera lectura Segunda lectura Tercera lectura


Objetivo M.Ob. M.Oc. M.Ob. M.Oc. M.Ob. M.Oc.
10X

40X

100X

Objetivo 1 Factor 2 Factor 3 Factor Coeficiente


micromtrico
10X

40X

100X

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Mide los siguientes parsitos a 10X, 40X y 100X, y compralos con los valores tericos.
Parsito 10X 40X 100X Real
1 Ascaris lumbricoides

2 Trichuris trichiura

3 Hymenolepis diminuta

4 Taenia sp

5 Faciolopsis buski

6 Paragonimus mexicanus

Parsitos vistos con objetivo 10X.

1 2 3 4 5 6

Parsitos vistos con objetivo 40X.

1 2 3

4 5 6

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Parsitos vistos con objetivo 100X.

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DISCUSION DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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Micrmetro Ocular

50

40

30

20

10

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Micrmetro Objetivo

10X 40X 100X

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PRCTICA No. 3
"Muestras y exmenes tiles para la bsqueda de parsitos intestinales"

OBJETIVOS

Explicar los procedimientos de obtencin y manejo de material fecal, para realizar estudios microscpicos.
Analizar y describir los procedimientos frecuentemente usados, en el diagnstico de parasitosis
intestinales.
Realizar el examen coproparasitoscpico directo en fresco y por concentracin.

Duracin: 2 Hrs.

INTRODUCCIN

El diagnstico de las parasitosis intestinales depende del hallazgo de huevos, larvas o adultos de
helmintos y quistes o trofozotos de protozoos en heces, por tanto la recoleccin y el manejo adecuado de
las muestras fecales, son indispensables para la identificacin correcta de los parsitos, en el laboratorio.

Son factores que interfieren con el examen de las heces, la ingestin de medicamentos previa a su
recoleccin y las muestras viejas o conservadas de manera inadecuada. La cantidad de materia fecal
suficiente para un examen rutinario, es una muestra del tamao de la nuez o de dos o tres cucharadas
soperas. La materia fecal se deposita en un recipiente de boca ancha, con tapa hermtica y limpia; no
debe contaminarse con agua, orina o cualquier otro material extrao, no debe obtenerse de la taza del
bao, ni del suelo.

En lactantes, la muestra se obtiene mediante la cucharilla rectal, si el examen requerido es el


microscpico en fresco. Las muestras, deben ser etiquetadas con el nombre del paciente, nmero de
muestra, fecha y hora de coleccin. Generalmente se recomienda examinar tres muestras, en das
sucesivos, durante un periodo de 7 a 10 das.

Otras muestra tiles en la bsqueda de parsitos intestinales son el contenido duodenal, raspado
perianal, aspirado rectal o material obtenido por rectosigmoidoscopia.

Existe una diversidad de exmenes tiles en el diagnstico de parasitosis intestinales, la seleccin del
examen adecuado, depender de la consistencia de la materia fecal o de los sntomas del paciente. Los
exmenes frecuentemente utilizados son el directo en fresco y lo de concentracin, que se basan en los
principios fsicos de flotacin o sedimentacin. El examen en fresco es el ms sencillo y se recomienda
para la bsqueda de trofozotos de protozoos, en muestras pastosas, diarreicas o lquidas. Los exmenes
de concentracin se recomiendan para la demostracin de quistes, ooquistes, huevos o larvas.

MATERIAL

Microscopio de campo claro / Centrfuga / Portaobjetos / Cubreobjetos.

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Copropac (coladeras) / Gradilla / Papel higinico / Papel seda / Yodo lugol


Pipetas pasteur / Solucin salina fisiolgica / Sulfato de Zinc (densidad 1.18)
Tubos de ensaye de 13x100 mm / Cucharilla de vidrio / Hipoclorito de sodio al 10%.

MTODO

Examen en fresco.
Colocar una gota de solucin NaCl al 0.85%, en un portaobjetos.
Con un aplicador, obtener aproximadamente 2 mg de la materia fecal y mezclarla en la gota de
solucin salina.
Hacer una suspensin uniforme y retirar los detritos macroscpicos.
Colocar un cubreobjeto y hacer la observacin microscpica inmediatamente, con los objetivos 10X y
40X.
En otro portaobjeto, colocar una gota de lugol y continuar como con la gota de solucin salina.
Coproparasitoscpico por concentracin: Tcnica de la CLSI (Clinical and Laboratory Standards
Institute).
Colocar en un frasco aproximadamente un gramo de materia fecal de cada recipiente de las
muestras del mismo paciente.
Adicionar aproximadamente 50 ml de solucin salina fisiolgica.
Dejar reposar 30 minutos, con el fin de permitir que las muestras compactas se reblandezcan.
Mezclar bien la muestra.
Tamizar empleando un copropac (en su defecto una coladera y un recipiente de vidrio).
Vertir a los tubos de ensaye 6 ml de la muestra tamizada.
Centrifugar 10 minutos a 500g.
Desechar el sobrenadante.
Agregar 2 ml de sulfato de zinc y resuspender el sedimento del fondo del tubo.
Agregar 5 ml de sulfato de zinc y centrifugar durante 1 minuto a 500g.
Colocar una pipeta pasteur una gota de la pelcula superficial en un portaobjetos, decantar el
sobrenadante y con la misma pipeta colocar una gota del sedimento en el mismo lugar, adicionar una
gota de lugol, mezclar y tapar con un cubreobjetos.
Observar al microscopio con objetivo seco dbil (10X).
Revisar la laminilla comenzando en la esquina superior izquierda en forma de zigzag de izquierda a
derecha.
Posteriormente, observar al microscopio con objetivo seco fuerte (40X).
Revisar la laminilla comenzando en la esquina superior izquierda en forma de zigzag de izquierda a
derecha, y de abajo hacia arriba.
Calibracin de la centrfuga: La g es el nmero de veces la gravedad y se debe determinar la velocidad de
cada centrfuga en r.p.m., para lograr 500 g debes medir la distancia del eje de la centrfuga al fondo
del tubo (cm), sin importar si es de ngulo fijo o de columpio, y consulta la siguiente tabla.
RADIO R.P.M. RADIO R.P.M.
10 2100 20 1500
11 2050 21 1450
12 2000 22 1400
13 1850 23 1400
14 1800 24 1350
15 1700 25 1300
16 1650 26 1300
17 1600 27 1250
18 1550 28 1250
19 1500 29 1200

ACTIVIDAD DE SNTESIS

Cul es el examen de laboratorio de eleccin para la bsqueda de huevos, quistes o larvas en heces?

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Porqu se recomienda se estudien tres muestras seriadas de materia fecal en los exmenes
coproparasitoscpicos por concentracin?

Cul es el examen de laboratorio de eleccin para la bsqueda de trofozotos en heces?

Cules son las indicaciones para el uso de la cucharilla rectal?

Qu otra muestra es til para la bsqueda de parsitos intestinales?

ESQUEMAS DE LA PRCTICA

DISCUSION DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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PRCTICA No. 4
"Protozoarios"

OBJETIVOS

Mencionar las indicaciones de cada uno de los exmenes de laboratorio utilizados en el diagnstico de
amibiasis.
Reconocer microscpicamente de Entamoeba histolytica y otras amibas.
Analizar el tipo de muestras clnicas, en las cuales puede encontrarse Balantidium coli.
Discutir la importancia clnica de las amibas de vida libre.

Duracin: 2 Hrs.

INTRODUCCIN

En el intestino es posible encontrar protozoos u otros elementos que en un examen microscpico de


heces, pueden llegar a confundirse con Entamoeba histolytica tales como: Entamoeba coli, Entamoeba
hartmanni, Endolimax nana o macrfagos, entonces es necesario conocer sus caractersticas
morfolgicas para evitar errores de diagnstico, que en ltima instancia perjudican al enfermo.

El diagnstico tambin se puede realizar durante la bsqueda de antgeno en heces con la tcnica de
ELISA. Pero cuando se aloja fuera del intestino por ejemplo en hgado, pulmn u otros tejidos, no es fcil
su hallazgo por los mtodo de laboratorio rutinarios, sino que se tiene que recurrir a la biopsia o la
deteccin de anticuerpos especficos mediante tcnicas como: contrainmunoelectroforesis,
inmunodifusin, ELISA, inmunoelectroforesis, hemoglutinacin indirecta, inmunofluorescencia o fijacin
del complemento.

Las amibas de vida libre fueron consideradas hasta hace algunas dcadas como una curiosidad de
laboratorio por los protozologos. A pesar, de la baja frecuencia de la infeccin, son en la actualidad de
importancia mdica por la ubicuidad y alta virulencia de los parsitos, la ausencia de un tratamiento
efectivo y porque algunos de ellos producen enfermedades de tipo fulminantes y mortal como la
meningoencefalitis.

Las amibas de vida libre patgenas que afectan al humano son del gnero Acanthamoeba y Naegleria. La
clasificacin taxonmica previa se basaba en la morfologa, las caractersticas de locomocin y el patrn
de la divisin nuclear. Los mtodos actuales utilizan adems, tcnicas serolgicas, fisiolgicas, de
biologa molecular e isoenzimticas. Las especies patgenas de los diferentes gneros se denominan
anfizoicas por mostrar la capacidad de sobrevivir tanto en el ambiente como en el hospedero animal
despus de invadirlo.

La balantidiosis es una protozoosis cuyas manifestaciones clnicas son muy similares a las que se
presentan en la entamoebosis, shigelosis y otras, por lo que debe recurrirse a exmenes de laboratorio
especficos, para la identificacin del agente etiolgico, Balantidium coli. La balantidiosis es quiz la ms
fcil de diagnosticar mediante exmenes de laboratorio sencillos, rpidos y econmicos.

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MATERIAL

Microscopios ptico / Centrfuga / Copropac (coladeras) / Cucharilla de vidrio.


Gradilla / Yodo lugol / Solucin salina fisiolgica.
Sulfato de Zinc (densidad 1.18) / Tubos de ensaye de 13x100 mm. / Aceite para inmersin
Portaobjetos / Cubreobjetos / Papel seda / Papel higinico.
Pipetas Pasteur y bulbos de caucho / Hipoclorito de sodio al 10% / Cal.
Recolectar 3 muestra de heces de cerdo

MTODO

El equipo responsable realizar un examen en fresco y coproparasitoscpico por concentracin de las


muestras recolectadas (Ver mtodo de la practica 3).
Observar al microscopio muestras proporcionadas por el maestro e identificar los parsitos.
Observar microscpicamente las preparaciones fijas proporcionadas por el maestro.

ACTIVIDAD DE SNTESIS

Correlaciona las siguientes columnas anotando la letra correcta en el parntesis correspondiente:


A Examen de eleccin en el diagnstico de ( ) Impronta
amibiasis aguda
B Examen de laboratorio mas adecuado para ( ) Examen directo en fresco
confirmar el diagnstico de absceso heptico
amibiasis
C Es la utilidad para buscar trofozotos de ( ) Coproparasitoscopico por
Entamoeba histolytica en lceras cutneas concentracin
D Para la conformacin diagnstica de una
amibiasis intestinal crnica, es de utilizar ( ) Hemaglutinacin indirecta
realizar:

Cul es la importancia de las amibas de vida libre patgenas en la medicina?

Cules son las diferencias morfolgicas entre los gneros:


Naegleria Acanthamoeba

Cul es el cuadro clnico de una meningo-encefalitis amibiana primaria?

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Complete el siguiente cuadro:

Parsito Gnero y especie Fase Parsito Gnero y especie Fase

ESQUEMAS DE LA PRCTICA

DISCUSION DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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PRCTICA No. 5
"Flagelados intestinales y del aparato genitourinario"

OBJETIVOS

Enlistar los exmenes de laboratorio utilizados para el diagnstico de las giardiosis y tricomoniasis.
Mencionar los productos en que debe buscarse Giardia lamblia y Trichomonas vaginalis.
Reconocer microscpicamente Giardia lamblia y Trichomonas vaginalis.

Duracin: 2 Hrs.

INTRODUCCIN

Giardia lamblia es un enteropatgeno flagelado, que se localiza usualmente en las criptas de la mucosa
del duodeno y la porcin inicial del yeyuno. Clnicamente hay datos que permiten sospechar el diagnstico
de giardiosis, sin embargo es recomendable confirmarlos mediante exmenes de laboratorio.

La tricomoniasis en la actualidad es la ms comn de las tres enfermedades transmitidas sexualmente de


origen parasitario. Trichomonas vaginalis el agente causal fue observado por primera vez por Donn
(1836), se transmite principalmente por contacto sexual. Este flagelado se localiza en mucosa vaginal,
vesculas seminales, uretra y glndulas prostticas, donde se reproduce por fisin binaria longitudinal y se
desplaza con movimiento rotatorio mediante sus flagelos.

El diagnstico se basa en el hallazgo de los trofozotos con su movimiento caracterstico y la presencia de


flagelos en laminillas en fresco de secrecin vaginal. Los exmenes mediante tcnicas como ELISA,
cultivo, inmunofluorescencia indirecta o directa, aumentan la sensibilidad del examen directo en fresco de
la secrecin. El cultivo de secrecin vaginal es positivo en el 95% de los casos.

MATERIAL

Microscopio ptico / Gradilla / Papel seda / Papel higinico.


Aceite para inmersin / Portaobjetos / Cubreobjetos / Yodo lugol

MTODO

Observar al microscopio muestras proporcionadas por el maestro e identificar los parsitos.


Observar microscpicamente las preparaciones fijas proporcionadas por el maestro.

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ACTIVIDAD DE SNTESIS

Cual es el fundamento del mtodo de la cpsula de Beal, a que nivel acta.

Cul es el examen de laboratorio de eleccin para el diagnstico de la giardiosis


1. aguda
2. crnica

Menciona gnero y especie del parsito, as como la fase en que se observa.

Describa los factores de patogenicidad de Trichomonas vaginalis

Ante la sospecha clnica de tricomoniasis urogenital, qu examen de laboratorio solicitara y por que?

ESQUEMAS DE LA PRCTICA

DISCUSION DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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PRCTICA No. 6
Trypanosoma

OBJETIVOS

Esquematizar las fases de amastigote, epimastigote y tripomastigote de Trypanosoma cruzi.


Observar al microscopio muestras fijas de Trypanosoma.

Duracin: 2 Hrs.

IINTRODUCCIN

La tripanosomiasis americana o enfermedad de Chagas, es causada por el flagelado Trypanosoma cruzi,


que generalmente es transmitido al humano por las heces de un artrpodo. El parsito en el humano,
afecta clulas del sistema retculoendotelial, particularmente las de miocardio, esfago y colon.

EXAMEN DE SANGRE. Las pruebas clsicas para la deteccin de tripomastigotes, son el examen directo
y los extendidos (delgados o gruesos) teidos con Giemsa; sin embargo, es recomendable hacer tcnicas
de concentracin de sangre mediante los mtodos de Stront o Woo (hematocrito).

AISLAMIENTO. El cultivo de sangre en medios de NNN (Novy-McNeal-Nicole) y la inoculacin en ratones


de laboratorio, permiten el aislamiento del parsito pero el tiempo que requiere (tres a cuatro semanas)
limitan su uso para el diagnstico. En los tejidos de dichos animales es posible observar nidos de
amastigotes.

XENODIAGNSTICO. Es un mtodo til para detectar al parsito durante la fase crnica de la


enfermedad. Se basa en la multiplicacin de Trypanosoma cruzi en el tubo digestivo de triatominas y el
examen posterior de sus heces, durante uno a tres meses.

Trypanosoma (tincin de Romanowsky)

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Trypanosoma (microscopio electrnico)

MATERIAL

Alcohol / Algodn / Gasa / Lancetas desechables / Portaobjetos


Charola y puente de tincin / Microscopio / Aceite para inmersin
Colorante de Wrigth / Buffer de fosfatos para Wright

MTODO

Preparacin del frote


Se limpia bien con alcohol la zona del lbulo de la oreja, donde se pretende hacer la puncin
Se punciona con una lanceta desechable
Se limpia cuidadosamente la primera gota de sangre con una gasa
Se presiona bien el lbulo de la oreja para obtener la segunda gota de sangre que se recoge en un
extremo del portaobjetos, limpio, seco y desengrasado; sin tocar la piel.
Se har un frote con la ayuda de otro portaobjetos, colocndolo cerca de la gota y haciendo un ngulo
de 45, se hace una extensin de 5 mm formando un rectngulo.
Se deja secar a temperatura ambiente
Una vez seco el frote, se coloca en un puente de tincin y se coloca el colorante de Wright durante 3
min.
Despus se cubre el frote con el colorante con solucin buffer y se deja que acte durante 5 min.
Lavar el frote con el chorro de agua suavemente, por tiempo breve
Dejar secar al aire.
Observar con aceite de inmersin al microscopio, con en objetivo 100X.

Observacin de tripomastigote sanguneo de preparaciones fijas en el que se puede observar el flagelo,


membrana ondulantes y el cinetoplasto.

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ACTIVIDAD DE SNTESIS

Anote el nombre y las caractersticas morfolgicas de las fases parasitarias de Trypanosoma cruzy

Amastigote Promastigote

Epimastigote Tripomastigote

Completa el siguiente cuadro

Vector Tratamiento de eleccin

Trypoanosoma cruzi

Trypanosoma gambiense

Historia clnica de un paciente infectado con Trypanosoma cruzi.

ESQUEMAS DE LA PRCTICA

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DISCUSION DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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PRCTICA No. 7
Leishmania

OBJETIVOS

Esquematizar la fase de amastigote y promastigote de Leishmania sp.


Reconocer amastigotes de Leishmania en cortes histolgicos de lesiones cutneas.

Duracin: 2 Hrs.

IINTRODUCCIN

La leishmaniosis es una histoparasitosis producida por protozoos del gnero Leishmania, de localizacin
intracelular; caracterizada por lesiones cutneas, mucocutneas o viscerales y cuyo agente causa es
transmitido por la picadura de mosquitos del gnero Lutzomyia.

En su ciclo biolgico, las especies del gnero Leishmania, presentan una fase de amastigote y otra de
promastigote, son indistinguibles de las diferentes especies de Leishmania.

Por su morfologa son idnticas, por lo que es importante su localizacin para diferenciar la especie:

Localizacin Especie

Cutnea Leishmania tropica

Piel y mucosas Leishmania mexicana y Leishmania brazilensis

Visceral Leishmania donovani o Leishmania chagasi

Amastigote

MATERIAL

Preparaciones fijas de leishmania, teidas con colorante de Romanowsky o Giemsa


Aceite para inmersin / Microscopios

MTODO

Observacin de preparaciones fijas de Leishmania con objetivo de inmersin.

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ACTIVIDAD DE SNTESIS

Menciona dos exmenes de laboratorio empleados para el diagnstico de la leishmaniosis cutnea y que
estructuras espera encontrar para confirmar el diagnstico?

En el caso de leishmaniosis visceral cul es el material biolgico ms adecuado para la bsqueda del
agente etiolgico?

Cul es el medio de cultivo para el aislamiento de leishmaniosis y qu fase del parsito se desarrolla en
este medio?

Proponga tres medidas profilcticas para la erradicacin de la leishmaniosis.

Cul es el tratamiento de eleccin para leishmaniosis?

ESQUEMAS DE LA PRCTICA

DISCUSION DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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PRCTICA No. 8
Plasmodium

OBJETIVOS

Describir y realizar en forma correcta un frote y gota gruesa de sangre


Reconocer microscpicamente las diferentes fases de Plasmodium en frotes teidos.

Duracin: 2 Hrs.

INTRODUCCIN

Plasmodium es el agente causal de la malaria; se multiplica a travs de dos mecanismos, uno sexual que
se lleva acabo en el mosco anopheles (husped definitivo) y otro asexual que ocurre en el husped
humano (husped intermediario) en el que presenta una fase exoeritroctica y otra eritrocitica en la que es
considerado un parsito intracelular.

El diagnstico de certeza se establece mediante la demostracin de plasmodios en la sangre, realizando


un frote de gota gruesa se sangre obtenida momentos antes del acceso febril. Es conveniente tomar
varias muestras en cada caso, para tener una mayor seguridad de encontrarlos. Este mtodo permite la
identificacin morfolgica de las fases evolutivas del ciclo eritroctico y la diferenciacin entre las especies
de Plasmodium.

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MATERIAL

Torundas con alcohol / Lancetas desechables estriles / Guantes desechables


Gasas / Portaobjetos desengrasados / Charola y puente de tincin
Frasco gotero con metanol / Frasco gotero con colorante de Giemsa / Buffer
Piceta con agua destilada / Aceite de inmersin / Microscopios / Papel seda
Preparaciones fijas de Plasmodium

MTODO

Preparacin de la gota gruesa


Se usan dos portaobjetos, meticulosamente limpios. Se deben sostener por los bordes de los
extremos, entre el pulgar y el ndice, a fin de evitar contacto con las superficies
Frotar enrgicamente con una torunda con alcohol la regin cutnea del costado del dedo ndice de la
mano izquierda.
Secar con una gasa limpia
Retirar la envoltura de la lanceta
Sujetar firmemente entre el pulgar y el ndice el dedo que se va a puncionar. Se procede a efectuar la
puncin mediante un golpe rpido de la lanceta
La primera gota de sangre se limpia con una gasa seca
Se presiona suavemente el dedo con el fin de obtener otra gota de sangre, cuidando de no apretar el
punto de puncin. Se deja aparecer una gota de sangre esfrica por encima de la piel seca.
Sosteniendo el portaobjetos limpio por los bordes de uno de los extremos, se apoya el otro extremo
contra el dedo ndice recolector (que est apretando el dedo del donante) y se desciende suavemente
hasta que entre en contacto con la capa superior de la gota de sangre. No debe permitirse que el
dedo del donante toque el portaobjetos.
Se coloca rpidamente el portaobjetos boca arriba sobre la superficie de trabajo. Utilizando el ngulo
y los primeros 5 mm del borde longitudinal del segundo portaobjetos, se extiende la sangre de
manera tal que se forme un rectngulo de tamao y grosor apropiado.
Dejar secar e identificar la laminilla

Tincin
Colocar sobre el frote unas gotas de metanol y dejar secar
Colocar sobre el frote seco la solucin de azul de metileno, dejar un segundo
Enjuagar con la solucin amortiguadora, hasta que los bordes de la muestra en la gota gruesa se
tornen de un color gris azulado.
Dejar escurrir el portaobjetos.
Agregar el colorante de Giemsa recin preparado (1 gota de solucin alcohlica de Giemsa en 1 ml.
de solucin amortiguadora)

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Dejar que el colorante actu de 6 a 10 minutos. El tiempo puede variar de un lote a otro de
colorante.
Enjuagar con solucin amortiguadora para eliminar el exceso de colorante de Giemsa
Dejar escurrir y secar mediante calor suave y abanicado.
Examinar la laminilla con objetivo de inmersin.

ACTIVIDAD DE SNTESIS

Cul es el examen de laboratorio de eleccin para realizar el diagnstico de malaria?

Para llevar a cabo el diagnstico de especie de la malaria, en que momento es conveniente tomar la
muestra?

Complete la informacin que falta del clico de vida de plasmodium.

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ESQUEMAS DE LA PRCTICA

DISCUSION DE RESULTADOS

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PRCTICA No. 9
Toxoplasma

OBJETIVOS

Mencionar los exmenes de laboratorio directos e indirectos que se usan para el diagnstico de
toxoplasmosis.
Reconocer microscpicamente trofozotos de Toxoplasma gondii.

Duracin: 2 Hrs.

INTRODUCCIN

El diagnstico clnico de esta protozoosis no es fcil debido entre otra causas a que el agente etiolgico,
Toxoplasma gondii, es el parsito ms diseminado en el mundo. Esto trae como consecuencia que la
toxoplasmosis pueda coexistir con cualquier otra enfermedad, sin una relacin causa-efecto entre esta
parasitosis y la sintomatologa del paciente.

Resulta muy difcil y con frecuencia imposible, establecer el diagnstico sin la ayuda del laboratorio y an
as en muchas ocasiones, tampoco se logra.

Los mtodos de laboratorio pueden ser directos e indirectos. Los primeros ayudan a demostrar la
presencia del parsito y los segundos a detectar anticuerpos especficos.

Bradizotos (Giemsa)

Taquizoto (microscopio electrnico)

Toxoplasma gondii
(Inmunofluorescencia indirecta)

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MATERIAL

Preparaciones fijas teidas con colorante de Romanowsky o Giemsa


Microscopio / Aceite de inmersin

MTODO

Observacin de las preparaciones fijas con el objetivo de inmersin.

ACTIVIDAD DE SNTESIS

Qu exmenes de laboratorio son de utilidad para el diagnstico serolgico de la toxoplasmosis?

Qu examen de laboratorio de tipo serolgico, requiere de toxoplasmas vivos para su realizacin?

Qu resultados espera encontrar en una serologa para la deteccin de anticuerpos en un paciente:

a) Inmunodeprimido con toxoplasmosis

b) Con toxoplasmosis congnita

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Qu tipo de muestra se recomendara para la bsqueda de toxoplasmas congnita por tcnica de


PCR?

ESQUEMAS DE LA PRCTICA

DISCUSION DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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PRCTICA No. 10
Nemtodos I

OBJETIVOS

Identificar macroscpicamente y microscpicamente Ascaris lumbricoides. Trichuris trichiura y Enterobius


vermicularis.
Enlistar los exmenes de laboratorio tiles en el diagnstico geohelmintos.
Describir el mtodo de Graham. Y discutir las condiciones en que se debe practicar el Graham a un
paciente.

Duracin: 2 Hrs.

INTRODUCCIN

Los agentes etiolgicos de las geohelmintosis son: Trichuris. trichiura, Ascaris lumbricoides, Strongyloides
stercolaris, Necator americanus y Ancylostoma duodenale. Todos excepto Trichuris trichiura, tienen ciclo
migratorio por hgado, corazn pulmones para finalmente establecerse en intestino delgado. Trichuris
trichiura se localiza en el ciego.

Una vez establecidos los adultos en el intestino delgado o grueso y cuando alcanzan su madurez sexual,
se eliminan las formas diagnsticas en la materia fecal; as por medio de mtodos de concentracin por
flotacin o sedimentacin se llega al diagnstico.

La enterobiosis es una parasitosis que afecta frecuentemente a grupos de personas que viven en
hacinamiento; se adquiere por la ingestin de huevos de Enterobius vermicularis, a travs de la
contaminacin de las manos al rascarse la regin perianal y posteriormente llevrselas a la boca; otro
mecanismo es por contagio por la convivencia con individuos portadores del parsito o por diseminacin
de huevos por el polvo.

Los gusanos adultos se localizan en la regin leocecal del intestino, donde permanecen adosado por
medio de sus expansiones cuticulares ceflicas (aulas). Para establecer el diagnstico de certeza, es
necesario demostrar los adultos en heces o huevos del parsito en la regin perianal del husped,

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Prolapso rectal por Trichuris trichiura


Adultos de Ascaris lumbricoides

MATERIAL

Diapositivas / Proyector de diapositivas / Preparaciones fijas de nematodos.


Yodo lugol coprolgico / Microscopio / Frasco gotero con lugol.

Tcnica de Kato-Miura.
Papel estraza / Cajas de Petri. / Pipetas Pasteur con bulbo de caucho.
Cuadros de celofn de 22x30 mm, en solucin de verde malaquita-glicerol.
Malla de alambre de acero inoxidable de cuadros de 4 cm. por lado / Pinzas
Aplicadores de madera / Portaobjetos / Cubreobjetos / Muestra de materia fecal

Preparacin de Reactivos:
Solucin de Verde de malaquita al 3% (pesar 0.03 g de verde de malaquita y disolverlos en 1 mL de agua
destilada)
Solucin de verde de malaquita y glicerol: 100 mL de Glicerina pura adicionar 00 mL de agua destilada y 1
mL de la solucin de verde de malaquita al 3%.

Mtodo de Graham
Abatelenguas / Cinta adhesiva transparente / Portaobjetos

MTODO

TCNICA DE FROTIS GRUESO (Kato-Katz) Tcnica para el diagnstico cuantitativo de helmintos.


Fundamento: Se basa en la accin que tiene la glicerina como aclarador de los huevecillos de
helmintos, y el verde de malaquita como colorante de contraste.

Tomar 50 mg de materia fecal con un aplicador de madera y se depositan sobre un portaobjetos, si la


materia fecal contiene fibras o residuos gruesos, se toman de 2 a 3 g de materia fecal y se colocan
sobre una superficie desechable y sobre la muestra se superpone una malla metlica de alambre y se
presiona para tamizar. A continuacin se coloca sobre el portaobjetos los 50 mg de materia fecal
tamizada y se contina.
Una vez que la muestra se encuentra sobre el portaobjetos se coloca un cuadro de celofn previamente
embebido con solucin de glicerol con verde de malaquita. Se invierte la preparacin sobre una hoja
de papel filtro en una superficie lisa y se presiona hasta lograr que la extensin cubra un rea
aproximada de 25 mm.
Se invierte la preparacin y se deja reposar durante una hora a temperatura ambiente o 30 min a 37C.
Se deber observar toda la preparacin en el microscopio y contar todos los huevecillos de helmintos
que en ella aparezcan.

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Clculos: El total de huevecillos observados en la preparacin debern multiplicarse por un factor


constante de 20 y el producto ser la cifra a reportar. El Resultado se expresa en huevecillos por
gramo de heces (h.g.h.)

MTODO DE GRAHAM.
Sobre el extremo de un abatelenguas, colocar 8 cm de cinta adhesiva transparente, con la parte
engomada hacia fuera y sostenerla contra el abatelenguas, con los dedos ndice y pulgar.
Colocar al paciente, de manera que quede expuesta la regin perianal: presionar la cinta adhesiva
contra dicha regin hacia la izquierda y la derecha, tendiendo cuidado de cubrir toda el rea entre la
mucosa y la piel.
Pegar la cinta sobre un porta objetos y rotular con los datos del paciente.
Examinar la preparacin en el microscopio, con los objetivos 10X y 40X.

ACTIVIDAD DE SNTESIS

A cada imagen coloca el nmero que le corresponda de la siguiente lista


1. Huevo infrtil corticado de Ascaris lumbricoides
2. Huevo frtil corticado de Ascaris lumbricoides
3. Huevo frtil decorticado de Ascaris lumbricoides
4. Huevo larvado de Ascaris lumbricoides.
5. Huevo de Tirchuris trichiura
6. Huevo de Enterobius vermicularis
7. Hembra de Trichuris trichiura
8. Macho de Trichuris trichiura
9. Hembra de Enterobius vermicularis.
10. Macho de Enterobius vermicularis

( ) ( ) ( )

( ) ( ) ( ) ( )

( ) ( ) ( )

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Menciona la fase infectante de:


a) Ascaris lumbricoides

b) Trichuris trichiura

c) Enterobius vermicularis

Escribe el tratamiento de eleccin:


a) Ascaris lumbricoides

b) Trichuris trichiura

c) Enterobius vermicularis

Escribe el mtodo de diagnstico de eleccin:


a) Ascaris lumbricoides

b) Trichuris trichiura

c) Enterobius vermicularis

Qu diferencia hay entre las tcnicas de Kato-Katz y Kato-Miura?

ESQUEMAS DE LA PRCTICA

DISCUSION DE RESULTADOS:

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

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PRCTICA No. 11
Nemtodos II

OBJETIVOS

Observacin de la morfologa de Strongyloides stercoralis,, Necator americanus y Ancylostoma duodenale


mediante diapositivas y preparaciones fijas.
Enlistar los procedimientos parasitoscpicos e inmunolgicos, tiles para establecer el diagnstico de
trichinellosis
Identificar larvas de Trichinella spiralis en cortes histolgicos de msculo

INTRODUCCIN

Otros de los agentes etiolgicos de las geohelmintosis mencionados anteriormente son: Strongyloides
stercoralis, Necator americanus y Ancylostoma duodenale. Estos parsitos infectan al hombre cuando la
larva filariforme penetra la piel, migratorio por hgado, corazn pulmones para finalmente establecerse en
intestino delgado.

La trichinellosis es una helmintosis causada por Trichinella spiralis, que se caracteriza por sndrome febril,
edema parpebral, mialgias y eosinofilia. Esta parasitosis usualmente se sospecha por la sintomatologa y
con los antecedentes de haber ingerido carne de cerdo infectada mal cocida, sus derivados.

La toma de la biopsia se recomienda despus del da 25 de iniciada la infeccin, ya que antes de este
tiempo, las larvas pueden no estar enrolladas, lo que dificulta y disminuye la sensibilidad de la prueba. En
estas circunstancias es recomendable realizar digestin con jugo gstrico artificial y lectura del sedimento
al microscopio.

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MATERIAL

Tcnica de Harada Mori


Tubos de ensaye de tapon de rosca de 25 x 175mm / Abatelenguas o aplicadores de madera
Tiras de papel filtro de 2 cm de ancho y 17 cm de largo / Gradilla / Portaobjetos
Cubreobjetos / Pipetas Pasteur de 25 cm con bulbo de goma / Agua destilada
Material biolgico: Materia fecal / Solucin de yodo lugol coprolgico / Microscopio

Preparaciones fijas de Uncinarias, Strongyloides stercoralis y Trichinella spiralis.

MTODO

TCNICA DE HARADA MORI. El mtodo permite el cultivo de huevecillos para obtener el desarrollo de
larvas de helmintos, las que son ms fcilmente identificables para precisar la especie.
La muestra debe conservarse a temperatura entre 15C y 30C, desde el momento de la recoleccin
hasta su proceso. La exposicin de la muestra al sol o fro intenso, destruye la viabilidad de los
huevecillos.
Las heces formadas pueden reblandecerse con un poco de agua destilada, es recomendable utilizar
cuatro tubos por muestra.
Colocar en un tubo de ensaye 5 ml. de agua destilada
Se extiende un frote delgado (1 a 2 mm) de heces con el abatelenguas o aplicador de madera, en el
tercio medio del papel filtro de un solo lado, respetando as los extremos.
Introducir la tira de papel filtro en un tubo de ensaye, tapar el tubo dejando el tapn flojo.
El cultivo se guarda a temperatura ambiente (24C a 28C) y se deja durante 5 das.
A partir del 5 da se inicia la revisin de los tubos de la siguiente forma:
Mediante el microscopio estereoscpico, se observa la presencia de larvas en el fondo del tubo.
Calentar los tubos en bao mara a 50C por 30 minutos.
Aspirar con la pipeta Pasteur una muestra del fondo del tubo.
Colocar una gota en cada extremo del portaobjetos, agregando una gota de lugol a cada una de ellas.
Cubrir la preparacin con cubreobjetos y observar al microscopio.
Nota: al calentar los tubos a 50C se puede manipular la muestra sin correr riesgos de contaminacin
con material altamente infectante.

Observacin de las preparaciones fijas.

ACTIVIDAD DE SNTESIS

Identifica el parsito y la fase en que se encuentra.

__________________ __________________ ___________________

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Facultad de Qumica

______________________ ____________________________ _____________________

Cul es la forma diagnstica ms frecuentemente encontrada en heces en la strongyloidosis?

Menciona la fase infectante de:


a) Strongyloides stercoralis

b) Trichinella spiralis

c) Necator americanus

Escribir el nombre de las estructuras sealadas

Cual es el examen de laboratorio recomendado para el diagnstico de Trichinella spiralis

Escribe una historia clnica de un paciente:


a) Strongyloidosis

b) Trichinellosis

ESQUEMAS DE LA PRCTICA

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DISCUSION DE RESULTADOS:

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PRCTICA No. 12
"Cstodos"

OBJETIVOS

Enlistar los exmenes de laboratorio utilizados para el diagnstico de cstodos y mencionar ventajas y
limitaciones de las tcnicas empleadas en el diagnstico inmunolgico de cisticercosis.
Reconocer mediante preparaciones fijas, Taenia solium, Taenia. Saginata y Cisticerco
Identificar microscpicamente los huevos de Taeneia sp e Hymenolepis nana

Duracin: 2 Hrs.

INTRODUCCIN

Taenia solium y Taenia saginata son los agentes etiolgicos de la taeniosis; estos cstodos tienen su
hbitat en el intestino delgado del hombre, que es su nico husped definitivo.

La expulsin espontnea de progltides en las heces orienta a la bsqueda de estos cstodos, ya que el
individuo que aloja una Taenia puede eliminar progltides junto con las heces, por lo que es de suma
importancia realizar un tamiz de la materia fecal en bsqueda de progltides, los cuales miden
aproximadamente de 10 a 20 mm de longitud por 5 a 7 mm de ancho y presentan un color blanco.

Los huevecillos de la tenia desarrollados dentro del cuerpo o ingeridos directamente de carne de res o
cerdo, se desarrollan en forma larvaria. La forma larvaria de Taenia solium es el cisticerco, que en el ser
humano y algunos animales causa cisticercosis. El cisticerco se ha encontrado alojado en diferentes
rganos y tejidos causando sintomatologa muy variada, lo que hace difcil establecer un diagnstico
temprano.

La hymenolepiosis es una parasitosis causada por el cestodo Hymenolepis, principalmente de la especie


nana que afecta frecuentemente a nios.

Hymenolepis nana es el cestodo ms pequeo que parasita el intestino delgado (leon) de los seres
humanos, en donde se pueden encontrar hasta miles de estos parsitos. Mide de 3 a 4 cm de longitud por
1 a 2 mm de ancho; presenta un esclex con cuatro ventosas y un rostelo retrctil armado por una corona
de ganchos; la cadena estrobilar la constituyen progltides trapezoidales.

Los huevos salen por las heces al desintegrarse los progltides grvidos que se caracterizan por tener
una corteza gruesa y transparente; y dentro se encuentra el embrin hexacanto.

Huevos de Taenia sp Diagnstico radiolgico Hymenolepis nana Hymenolepis diminuta


de cisticercosis Huevo Huevo

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Facultad de Qumica

MATERIAL

Preparaciones fijas / Portaobjetos / Cubreobjetos / Microscopio / Bistur


Fragmento de carne de cerdo con cisticercos / Caja petri / Solucin salina al 0.85%

MTODO

Observacin macroscpica de los progltides


Observacin de preparaciones fijas de progltides y huevos

ACTIVIDAD DE SNTESIS

Mtodo de laboratorio de eleccin para el diagnstico de


a) Taenia sp

b) Hymenolepis nana

Esquematizar:

Progltide de Taenia solium Progltide de Taenia saginata


con ramas uterinas con ramas uterinas

Huevo de Taenia sp Huevo de Hymenolepis nana

Cuales son las principales pruebas serolgicas y de gabinete que se realizan para el diagnstico de
cisticercosis?

Realizar una historia clnica de un paciente con cisticercosis y los estudios sugeridos para establecer el
diagnstico.

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Facultad de Qumica

Escribe una historia clnica de un paciente parasitado con Hymenolepis nana, y los estudios de
laboratorio necesarios para establecer el diagnstico

ESQUEMAS DE LA PRCTICA

DISCUSION DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

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PRCTICA No. 13
"Tremtodos"

OBJETIVOS

Enlistar los exmenes tiles en el diagnstico de fasciolosis y paragonimosis


Identificar Fasciola heptica y Paragonimus sp a partir de muestras biolgicas, preparaciones fjas y
diapositivas.

Duracin: 2 Hrs.

INTRODUCCIN

La fasciolosis es una zoonosis causada por el tremtodo Fasciola heptica, que tiene como huspedes
definitivos a animales herbvoros y humanos, en los que se localiza en los conductos biliares. La
sospecha clnica de fasciolosis, se establece mediante la sintomatologa del paciente y considerando los
antecedentes epidemiolgicos y hbitos de alimentacin. El diagnstico se debe confirmar mediante
mtodos directos durante la fase de estado o indirectos durante la fase migratoria o de invasin.

La paragonimosis es una zoonosis causada por el tremtodo Paragonimus sp, se adquiere por ingestin
de cangrejos, langostinos y camarones de agua dulce infectados y mal cocidos. El adulto se localiza en el
pulmn; el diagnstico se hace al identificar los huevos en esputo, lquido pleural y materia fecal.

Fasciola heptica

Adulto Huevo Cercaria

Paragonimus wetermani

Adulto Huevo Metacercaria

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MATERIAL

Preparaciones fijas de Fasciola heptica y Paragonimus sp Diapositivas / Proyector de diapositivas

MTODO

Observar las preparaciones fijas.

ACTIVIDAD DE SNTESIS

Relaciona las imgenes con la siguiente lista


( ) Paragonimus mexicanus metacercaria ( ) Fasciola heptica cercaria
( ) Paragonimus mexicanus huevo ( ) Fasciola heptica huevo
( ) Paragonimus mexicanus adulto ( ) Fasciola heptica adulto

A B C

D E F

Desarrollar una historia clnica de un paciente con Fasciola heptica.

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Facultad de Qumica

Anotar historia clnica de un paciente con Paragonimus sp.

Escribe 2 mtodos de laboratorio se requieren para establecer el diagnstico para:

Fasciola heptica.

Paragonimus sp

Menciona el tratamiento de eleccin para la infeccin por:

Fasciola heptica.

Paragonimus sp

ESQUEMAS DE LA PRCTICA

DISCUSION DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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Facultad de Qumica

PRCTICA No. 14
"Parsitos emergentes"

OBJETIVOS

Reconocer ooquistes de Cryptosporidium, Isospora, Cyclospora y Blastocystis en preparaciones en fresco


o teidas con la tcnica de Kinyoun.

Duracin: 2 Hrs.

INTRODUCCIN

La cryptosporidiosis es una entidad en la que el agente etiolgico se reconoci como patgeno para el
hombre hasta 1976, en esa poca se asoci en pacientes con sndrome de inmunodeficiencia adquirida o
inmunocompremotidos actualmente tambin en individuos inmunocompetentes.

Para reconocer los ooquistes con menos dificultad, se puede recurrir a diferentes tinciones entre otras:
Giemsa, Ziehl-neelsen modificado o Kynyoun.

Isospora belli es un coccidio intestinal cuya presencia en heces de humanos fue descrita por primera vez
en 1890 por Raillet y Lucet. La importancia de su estudio radica en que se ha reconocido como un
oportunista causante de diarrea crnica en pacientes con SIDA.

MATERIAL

Microscopios ptico / Puente de tincin / Solucin salina fisiolgica / Yodo lugol


Metanol absoluto / cido sulfrico al 10% / Carbol-fucsina / Verde brillante al 1%
Aceite para inmersin / Portaobjetos / Cubreobjetos
Recolectar una muestra de heces humanas.

MTODO

Examen en fresco:
En un portaobjetos hacer una suspensin de la muestra con solucin salina.
Adicionar una gota de lugol, mezclar y colocar un cubreobjetos, observar al microscopio.

Tincin de Kinyoun:
Preparar un extendido de heces, dejar secar al aire.
Fijar la preparacin con metanol, durante 1 min. Dejar secar al aire.
Cubrir la preparacin con carbol-fucsina y teir durante 2 min.
Enjuagar con agua de la llave.
Decolorar con cido sulfrico al 10% y lavar con agua de la llave, hasta lograr un rosa plido.
Teir con verde brillante 1% durante 30 segundos; lavar con agua de la llave y dejar secar al aire.

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Examinar la preparacin en el microscopio, con los objetivos 10X, 40X y 100X, los ooquistes se tien
de color cereza.

ACTIVIDAD DE SNTESIS.

Nombre del parsito y fase en la que se encuentra.

Nombre del parsito y fase en la que se encuentra.

Nombre del parsito y fase en la que se encuentra.

Nombre del parsito y fase en la que se encuentra.

Marca cual es el mtodo de diagnstico de eleccin:

Isospora beli

Cryptosporidium parvum

Blastocystis hominis

Cyclospora cayetanensis

Escribe la historia clnica de un paciente infectado con un parsito emergente

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Cul es el tratamiento de eleccin para los parsitos emergentes?

Isospora beli

Cryptosporidium parvum

Blastocystis hominis

Cyclospora cayetanensis

Explica por qu Blastocystis hominis no se tie de color cereza en Kinyoun.

ESQUEMAS DE LA PRCTICA

DISCUSION DE RESULTADOS

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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BIBLIOGRAFA

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Cimermann, B.; Franco, MA. Atlas de parasitologa. Atheneu, 2004.

Dvila GC,Trujillo HB. Prevalencia de parasitosis intestinal en nios de zonas urbanas del estado de
Colima, Mxico. Bol Med Hosp Infant Mex. 2001; 58:2349.

De Carli, G. A. Parasitologia Clnica: Seleccin de Mtodos e Tcnicas de Laboratorio para o

Diagnstico das Parasitosis Humanas. Atheneu, 2001.

Garca TLE, Hernndez RJ, Olivares HKV, Cant LJH. Prevalencia de parasitosis intestinal en nios en
edad preescolar. Bioquimia. 2004; 29 Suppl 1: 99.

Neves, D. P. Parasitologia Humana. 11 ed. Atheneu, 2004.

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Rey, L. Bases da Parasitologia Mdica. 2 ed. Guanabara Koogan, 2002.

Rodrguez GLM, Hernndez JEJ, Rodrguez GR. Parasitosis intestinal en nios seleccionados en una
consulta ambulatoria de un hospital. Rev Mex Pediatr. 2000; 67: 1 1722.

Romero FDE. Actividad trptica en nios asintomticos con giardiasis. Rev Sanid Milit. 2004; 58:2003.

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laboratorios. XXVI. La diversidad en las tcnicas coproparasitoscpicas y la calidad. III LABORATacta.
2000; 12: 13943.

Tood Stanford. El Laboratorio en el Diagnstico Clnico. Vol. 2. Marban. 2005.

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Relacin Teora Laboratorio

Unidad I. Generalidades del parasitismo

Prctica No. 1 Normas de seguridad e higiene (NOM-087)


Prctica No. 2 Micrometra
Practica No. 3 Muestras y exmenes tiles para la bsqueda de parsitos intestinales

Unidad II. Amebas

Prctica No. 4 Protozoarios

Unidad III. Flagelados y Ciliados

Prctica No. 5 Flagelados intestinales y del aparato genitourinario

Unidad IV. Protozoarios de sangre y tejidos

Prctica No. 6 Trypanosoma


Prctica No. 7 Leishmania
Prctica No. 8 Plasmodium
Prctica No. 9 Toxoplasma

Unidad V. Helmintos

Prctica No. 10 Nematodos I (Ascaris, Enterobius, Trichuris)


Prctica No. 11 Nemtodos II (Strongyloides, Uncinarias)
Prctica No. 12 Cstodos (Taenia, Hymenolepis)

Unidad VI. Trematodos y Parsitos emergentes

Prctica No. 13 Tremtodos (Fasciola, Paragonimus)


Prctica No. 14 Parsitos emergentes

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