DISTRIBUCIN DE ESTOMAS E NDICE ESTOMTICO.

TCNICA DE IMPRESIN

Sergio Jonatan Trejo Dena. Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo, A.C, unidad
Culiacn. Carretera a Culiacn - El Dorado, km. 5.5, Apdo. Postal 32-A, C. P. 80129, Culiacn,
Sinaloa. Sergio.trejo@estudiantes.ciad.mx

ABSTRACT

RESUMEN
La superficie epidrmica de las hojas presenta un gran nmero de poros microscpicos llamados
estomas. La apertura de dichos poros se controla a travs de los cambios en el tamao y forma de
dos clulas especializadas, llamadas clulas guarda, que flanquean la apertura estomtica. Los
estomas se encuentran en todas las partes areas de la planta, pero son ms abundantes en las
hojas. El objetivo del presente trabajo es dominar la tcnica de impresin de estomas y determinar
el ndice estomtico en diferentes especies de plantas. Para lo cual se utiliz el mtodo directo que
incluy la observacin en el microscopio ptico con el objetivo de 40x en tres replicas de la
superficie de cada muestra de hojas de las diferentes especies de plantas. En cada impresin foliar
se realizaron conteos de estomas y clulas epidrmicas al azar. Fueron estimadas la densidad
estomtica (nmero de estomas), la densidad de clulas tabloides (nmero de clulas epidrmicas
tabloides o tabulares) e ndice estomtico. Con los promedios se caracterizaron diferencias entre
hojas as como entre haz y envs con el paquete estadstico SAS. Se detect variacin significativa
para las diferentes variables de morfologa epidrmica foliar entre las diferentes especies de
plantas muestreadas. La mayora de las especies revisadas se clasificaron como hipoestomticas,
a excepcin de las variedades de Eucalipto y Bugambilia que se clasificaron en anfiestomticas por
presentar densidades estomticas en haz y envs.

Palabras clave: estomas, ndice estomtico, especies, densidad, epidermis.

ABSTRACT
The epidermal surface of the leaves has a large number of microscopic pores called stomata. The
opening of these pores is controlled by changes in the size and shape of two specialized
cells called guard cells that flank stomatal opening. Stomata are found on all aerial plant parts,
but are most abundant in the leaves. The aim of this study is to master the printing technique of
stomata and stomatal index to determine the different species of plants. For which the direct
method was used that included the observation in the light microscope with the 40x objective in
three replicates of each sample surface of leaves of different plant species. In
each leaf impression counts were performed stomata and epidermal cells at
random. Stomatal density were estimated (number of stomata), tabloid cell density (number
of tabloids or tabular epidermal cells) and stomatal index. With the averages were
marked differences between leaves and between the beam and back with the statistical
package SAS. Significant variation was detected for the different leaf epidermal morphology
variables among different species of plants sampled. Most species were classified
as hipoestomticas reviewed, except for the varieties of eucalyptus and bougainvillea that were
classified by presenting anfiestomticas stomata density in the beam and back

INTRODUCCIN (clulas guardas). Un complejo estomtico se

Los estomas son poros formados por un par
de clulas guarda. Se encuentran en la
epidermis de las partes areas de la mayora
de las plantas terrestres.
Convencionalmente, un estoma se acepta
como el poro y las dos clulas que lo rodean
refiere a las clulas vecinas (clulas
subsidiarias). El estudio de los estomas es
uno de los campos ms activos en la
fisiologa vegetal y una de las razones de
gran inters se debe a que los estomas
intervienen en el control de dos de los ms
importantes procesos fisiolgicos en las
plantas: fotosntesis y transpiracin (Larqu
S. A., 1990). Por muchos aos los fisilogos
vegetales creyeron que diversas respuestas
estomticas eran reacciones a la
concentracin de CO2 en el interior de la hoja
(Salisbury y Ross, 1999). Por ello el efecto de
la luz se explicaba como un efecto indirecto,
mediado por el decremento en la
concentracin de CO2, a causa de la
fotosntesis (Salisbury y Ross, 1999). Sin
embargo, Thomas D. Sharkley y Klaus
Raschke en 1981 demostraron que la
respuesta estomtica a la luz era casi directa,
y solo en menor grado se deba en la
concentracin intercelular de CO2 (Salisbury
y Ross, 1999). Usualmente los estomas se
distribuyen al azar en la epidermis de las
plantas (Larqu S. A., 1990). Por lo comn,
se ha reportado que por cada milmetro
cuadrado de superficie foliar se han
encontrado de 100 hasta 2230 estomas
(Salisbury y Ross, 1999). Estudios recientes
como los realizados por Woodward en 1987,
sugieren que la densidad estomtica son
sensibles a la concentracin de CO2, ya que
hay menos estomas por unidad de rea
cuando se incrementa el CO2 (Salisbury y
Ross, 1999). Factores genticos y 40x
ambientales como disponibilidad de agua,
intensidad de luz, temperatura, y estomas
concentracin de CO2 influyen en la
distribucin, frecuencia y morfologa de las
estomas. Debido a que todos estos factores
influyen en la frecuencia, Salisbury, en 1928,
introdujo el trmino ndice estomtico, que
relaciona el nmero de estomas por unidad
de rea con el nmero de clulas
epidrmicas por unidad de rea:
ndice estomtico = Nm. de estomas por
unidad de rea / Nm. De estomas por
unidad de rea + Nm. De clulas
epidrmicas por unidad de rea x 100.
El estudio de los estomas se puede realizar
mediante dos mtodos: los directos y los
indirectos. Los directos incluyen las
observaciones directas en las hojas en el
microscopio o mediante replicas de la
superficie de las hojas. Los mtodos
indirectos incluyen las estimaciones de la
apertura de las estomas mediante
pormetros de resistencia a la difusin,
etctera Larqu S. A., 1990). Por lo cual, el
objetivo del presente trabajo es dominar la
tcnica de impresin de estomas y
determinar el ndice estomtico en diferentes
especies de plantas.
MATERIALES Y MTODOS
Se utilizaron hojas de Bugambilia, Eucalipto,
Ficus, Fresa (Fragaria vesca), Jatropha,
Lima, Limn, Mandarina, Mango, Naranja,
Neem (Azadiracta indica), Pingica y Teresita
obtenidas en Culiacn, Sinaloa, las cuales
fueron procesadas en el laboratorio de
Calidad Poscosecha perteneciente al centro
de investigacin en alimentacin y desarrollo
CIAD, A.C., unidad Culiacn. Se colocaron
tres pelculas delgadas de barniz para uas
con un pincel de aproximadamente 1 cm2
sobre el envs y haz de las hojas, se espero
durante 15 minutos para que la pelcula de
barniz secara. Las muestras se extrajeron
con trozos de cinta adhesiva transparente los
cuales se adhirieron posteriormente a un
portaobjetos de
vidrio y se
procedi a
observar en un
microscopio
ptico (Zweiss),
se enfoco con
un objetivo de
y al
localizar los
y
clulas
epidrmicas se
tomaron
fotografas con
la ayuda del software IMOTIC. En cada
impresin foliar se realizaron conteos de
estomas y clulas epidrmicas al azar.
Fueron estimadas la densidad estomtica
(nmero de estomas), la densidad de clulas
tabloides (nmero de clulas epidrmicas
tabloides o tabulares) e ndice estomtico.
Con los promedios se caracterizaron
diferencias entre hojas as como entre haz y
envs con el paquete estadstico SAS.
RESULTADOS Y DISCUSIN
Para la variable densidad estomtica se
encontraron diferencias estadsticamente
significativas entre los promedios de las
hojas muestreadas (Tabla 1). De acuerdo a
estos datos las especies revisadas se
clasifican como hipoestomticas (Fig.
2,4,5,6,7,8,9 y 10), a excepcin de las
especies de Eucalipto (Fig. 3) y Bugambilia
(Fig. 1) que presentaron caractersticas
anfiestomticas. Los promedios de densidad
estomtica permitieron separar dos grupos,
el primero agrupando a las especies de
Jatropha, Bugambilia 1 y Teresita con baja
cantidad de estomas por unidad de rea, y el
segundo con Naranjo, Mango y Limn
mexicano con mayor densidad estomtica
(Tabla 1). Cabe mencionar que las especies .
de este segundo grupo con mayor densidad A B C
estomtica no presentaron los mayores
Fig. 3. Envs (A y B) y haz (C) de las hojas de Eucalipto,
ndices estomticos, por el contrario las clasificadas como anfiestomticas.
especies de Jatropha, Lima y Teresita con
una densidad estomtica baja, presentaron
los ndices estomticos ms altos. Estos
datos coinciden con lo reportado por Metcalfe
y Chalk (1979) los cuales mencionan que el
tamao de estomas esta a menudo
correlacionado con la densidad estomtica,
como que los estomas pequeos tienen una
alta densidad estomtica y los grandes una
pequea, sin embargo estos ltimos poseen
un alto ndice estomtico relacionado a su A B C
tamao de estoma, sin embargo, de acuerdo Fig. 4. Envs (A y B) y haz (C) de las hojas de Jatropha,
a Weng y Chen (1998) la densidad clasificadas como hipoestomticas.
estomtica se relaciona positivamente con
una mayor capacidad fotosinttica.
Tabla 1. Densidad estomtica, densidad de clulas
tabloides e ndice estomtico.
*Las medias con la misma letra no presentan diferencias
significativas de acuerdo a una prueba de Duncan con
un =0.05.

A B C
Fig. 1. Envs (A y B) y haz (C) de las hojas de
Bugambilia 1, clasificadas como anfiestomticas. A B C
Fig. 5. Envs (A y B) y haz (C) de las hojas de Lima,
clasificadas como hipoestomticas.

Fig. 2. Envs (A y B) y haz (C) de las hojas de

Bugambilia 2, clasificadas como hipoestomticas.
A B C
Fig. 6. Envs (A y B) y haz (C) de las hojas de Limn Fig. 10. Envs (A y B) y haz (C) de las hojas de Teresita,
mexicano, clasificadas como hipoestomticas. clasificadas como hipoestomticas.

CONCLUSIN
Se comprob que la mtodo de impresin es
una tcnica sencilla que permite obtener
impresiones foliares de buena calidad.
Se detect variacin significativa para las
diferentes variables de morfologa epidrmica
foliar entre las diferentes especies de plantas
muestreadas. La mayora de las especies
revisadas se clasificaron como
A B C hipoestomticas, a excepcin de las
variedades de Eucalipto y Bugambilia que se
Fig. 7. Envs (A y B) y haz (C) de las hojas de
clasificaron en anfiestomticas por presentar
Mandarina, clasificadas como hipoestomticas.
densidades estomticas en haz y envs.

REFERENCIAS

LARQU, S. A. 1990. El agua en las plantas:

manual de prcticas de fisiologa vegetal.
Editorial Trillas S.A. de C.V. Mxico. Pp
62-63.

METCALFE, C.R.; CHALK, L. 1976. Anatomy

A B C of the Dicotyledons. Vol. 1. 2nd edition
Clarendon Press. Oxford. P. 102.
Fig. 8. Envs (A y B) y haz (C) de las hojas de Mango,
clasificadas como hipoestomticas. SALISBURY, F.; ROSS, C. 1999. Fisiologa
vegetal. Editorial Iberoamrica. Mxico.
Pp 77-86.

WENG, J.H. and C.Y. CHEN. 1998. Stomatal

frequency associated with an sterase band in
rice genotypes .http://probe.nalusda.gov:800
0/otherdocs/rgn/rgn5/V5IV26.html

A B C
Fig. 9. Envs (A y B) y haz (C) de las hojas de Naranja,
clasificadas como hipoestomticas.

A B C