MATERIALES Y METODOS

Materiales:
-Agua destilada.
-Alcohol.
- Algodn.
-Lancetas.
-Muestra de sangre fresca.
-Portaobjetos
-Guantes desechables.
-Sanitas.
-Metanol.
-Aceite especial para el telescopio.
Tcnica del frotis de sangre
Una extensin o frotis sanguneo consiste en recubrir parcialmente un porta
con una gota de sangre, de tal manera que las clulas de sta se dispongan
formando una sola capa de ellas. Despus de colorear las preparaciones se
observa su morfologa al microscopio ptico.
a) Preparacin de la muestra

1. Lave muy bien tres portaobjetos. Si es

necesario lmpielos con etanol/ter utilizando
un trozo de gasa.

2. Ubique el sitio de
toma de la muestra en
la parte lateral del dedo medio o anular de la
mano.
3. Limpie el sitio donde se tomara la muestra de
sangre, utilizando una gasa empapada con
etanol y luego squelo con gasa.
4. Con una lanceta estril con un movimiento firme
y rpido realizar una puncin en un pulgar.

5. Limpie la primera gota de sangre con gasa.

6. Con la mano derecha tome un portaobjeto y sostngalo por los bordes.
Con la mano izquierda presione el dedo y deje fluir una gota pequea
de sangre ( 2mm de dimetro). Coloque una gota de sangre sobre el
portaobjeto en el centro de uno de los extremos de la lmina.
7. Coloque un segundo portaobjeto apoyado sobre el otro por delante de
la gota de sangre en ngulo de 45, y se hace retroceder hasta que el
borde coincida con la gota, que se extender por capilaridad por todo el
borde. Antes de que la sangre se extienda por los extremos del porta,
se hace deslizar por el porta hacia adelante con movimiento firme y
rpido, elevando la mano derecha antes de que el porta que se desliza
llegue al final.
Mientras mayor sea el ngulo que forman las dos lminas, mayor ser
el espesor de la capa de las clulas.
 8. Deje secar la
muestra durante 5
minutos.

9. Fije con metanol (1

minuto). Deje secar
nuevamente (10
minutos).

10. Coloree con colorante Giemsa (15 a 20 minutos).

11.Despus de que se deja secar por 10
minutos, se retira el exceso sacudindola un
poco.

12.Se lava con agua destilada y se deja secar para poder

llevar la muestra al microscopio ptico.

b) Estudio/ observacin del frotis

Examinar la muestra con objetivo de pequeo aumento
observando la distribucin de la muestra, que debe ser
homognea. Cambiar a objetivo de inmersin (100x). Visualizar los eritrocitos,
leucocitos.
Se observan los diferentes leucocitos: Poliformos nucleares o granulocitos
(PMN) debido a la diferente forma de su ncleo y Mononuclreares o
agranulocitos.
 Basfilo

Linfocito