EL CALCIO COMO SEGUNDO MENSAJERO Y SU

RELACIN CON LAS CALMODULINAS

INTRODUCCIN
El calcio (Ca) es un elemento esencial, regulador clave del crecimiento y
desarrollo de las plantas (Hepler, 2005; Villegas, et al. 2007), son muchos los
procesos en los que participa este in e involucra a casi todos los aspectos del
desarrollo de la planta. El Ca es un catin divalente relativamente grande, y a
diferencia de otros macronutrientes, una alta proporcin de Ca total se encuentra
en las paredes celulares (apoplasto); mientras que otra porcin es intercambiable
en la membrana plasmtica (Hirschi, 2004).

El contenido de Ca en las plantas vara entre el 0.1 y el 5 % de su peso seco,

dependiendo de la especie, rgano y de las condiciones de crecimiento. Al
cuantificar el total de Ca2+ en las plantas, la concentracin es bastante grande
(mM), pero su requisito es como el de un micronutriente (Evans, 2001); varios
defectos pueden estar asociados con bajos niveles de este in, incluyendo el
desarrollo deficiente de la raz, necrosis foliar y enchinamiento, pudricin apical,
mancha amarga (bitter pit), agrietamiento fruta (Monge et al. 1994).

Hay dos reas dentro de la clula donde el calcio juega un papel clave; en primer
lugar es la pared celular, donde acta en la reticulacin de residuos de pectinas
cidas. El segundo es el sistema de membrana celular, en donde la baja
concentracin de Ca2+, incrementa la permeabilidad de la membrana plasmtica
(Kordyum, 2003; Hirschi, 2004; Hepler, 2005; Jammes et al., 2011; Reyes et al.
2013). El objetivo de este trabajo es identificar que llev a los investigadores a la
idea de que el Ca2+ es un segundo mensajero en el crecimiento celular y desarrollo
de plantas.

ASPECTOS FISIOLGICOS DEL SEGUNDO MENSAJERO

Para entender porque al calcio se le llama segundo mensajero, primero hay que
entender el concepto de que es un segundo mensajero, en bioqumica y biologa
molecular: se denomina segundo mensajero a toda molcula que transduce
seales extracelulares corriente abajo en la clula, hasta inducir un cambio
fisiolgico en un efecto, como, por ejemplo, una quinasa o un factor de
transcripcin (Lodish, 2005). Otra definicin dice que es una molcula que
convierte la seal qumica de una hormona, de un neurotransmisor o de cualquier
otra seal extracelular (el primer mensajero), al prximo estadio en la maquinaria
bioqumica de la clula (Mathews, 2003).

El ion calcio (Ca2+) se denomina como segundo mensajero porque acta como un
mediador de acoplamiento estmulo-respuesta en la regulacin de diversas
funciones celulares tales como las acciones de las hormonas y de factores
ambientales, en los que se incluyen el estrs bitico y abitico en plantas
superiores (Kordyum, 2003; Hepler, 2005). Reyes et al. 2013 mencionan que el
Ca+ est implicado en la regulacin de procesos fundamentales como el
tigmotropismo, gravitropismo, divisin celular, elongacin celular, diferenciacin
celular, polaridad celular, fotomorfognesis, defensa de las plantas y dems
respuestas al estrs (Nrnberger y Scheel, 2001). En respuesta a una variedad de
estmulos (tales como la luz, las hormonas, la temperatura, la salinidad, y
gravedad) la concentracin de Ca2+ citoslico en las plantas se eleva rpidamente
a travs de un aumento del flujo de Ca 2+ y cuando no hay un estmulo en las
clulas vegetales, la concentracin total de Ca2+ en el citosol es mantenido a una
concentracin de 0,1 a 0,2 mM. (Zielinski, 2010); la regulacin del flujo de Ca 2+ es
la base de la integracin de las seales ambientales y su traduccin en las
respuestas fisiolgicas de adaptacin (Jammes et al., 2011). Miles et al., 2004
indican que la entrada de calcio y el aumento de este en el citoplasma son
importantes para la transduccin de seales de ABA en las clulas guarda.

El calcio y la pared celular

Desde un punto de vista fisiolgico, el Ca2+, controla la permeabilidad de la
membrana; durante la formacin de la pared celular (Evans et al., 2001), los
residuos de pectinas acidas (cido galacturnico) son secretadas en forma de
steres metlicos, y slo ms tarde desesterificadas por la pectina metilesterasa,
liberando grupos carboxilo, que se unen al Ca2+. De ello se desprende que la baja
concentracin de Ca2+, debe hacer que la pared celular sea ms flexible y fcil de
romperse, mientras que las concentraciones altas deben rigidez a la pared y
hacerla menos plstica.

La importancia de la interaccin de Ca2+ / pectato como un regulador de

crecimiento alent a los investigadores a incluir un papel para la auxina en este
esquema, en particular debido a que se haca evidente que Ca2+ y auxina tenan
acciones antagnicas. Por lo tanto, la auxina promueve el crecimiento de brotes y
se inhibe el crecimiento de la raz, mientras que Ca2+ inhibe el crecimiento de
brotes y promueve el crecimiento de la raz. No hay que dejar de lado que dentro
del complejo marco de hidratos de carbono y protenas de la pared celular, podra
haber interacciones entre Ca2+ y molculas distintas de pectinas que podran
contribuir a la estructura de la pared celular y la extensibilidad (Hirschi, 2004;
Hepler, 2005; Chvez y Ramrez, 2010). A pesar de la idea de que la pared celular
logra sus efectos a travs de una interaccin Ca2+ / pectatos, hay que reconocer
que no todo puede ser tan fcilmente explicado.

El calcio y la membrana plasmtica

El Ca2+ desde un punto de vista fisiolgico, juega un papel importante en el control
de la estructura y la funcin de la membrana. El Ca2+, mediante la unin a
fosfolpidos, estabiliza bicapas de lpidos y por lo tanto proporciona la integridad
estructural de las membranas celulares. Cuando las clulas se cultivan
concentraciones bajas de Ca2+, especialmente en la presencia de EDTA, se
produce una fuga de iones y metabolitos (Hepler, 2005). En races de la soja y el
maz, Hanson (1960) mostr que una baja concentracin de Ca2+, causa un
marcado descenso en la capacidad de estos tejidos para absorber y retener
solutos. As que para mantener la integridad y el transporte de iones en la
membrana plasmtica es necesario mantener una concentracin 0,1 a 1,0 mM.

Durante la senescencia en discos de hojas de maz y Rumex, demostraron que el

Ca2 + retraso de la prdida de la clorofila, la prdida de la protena, y la prdida de
espacio libre, lo que sugiere que el ion desempea un papel regulador en el
mantenimiento y el control de la estructura y funcin de la membrana. Estudios
recientes demuestran que el aumento de la concentracin de [Ca2] e a 10 mM
inhibe la elongacin del tubo polnico de lirio (Hepler, 2005).

CANALES DE CALCIO-PERMEABLES EN LA MEMBRANA PLASMTICA DE LAS CLULAS

VEGETALES ( White, 2000)
 Inhibidores de
Nombre Tejido Conductancia Permeabilidad
flujo de Ca2
Activadas por despolarizacin
DACC Suspensin de clulas 13 ps (40 mM Ca) Ca, Ba, Sr, Mg
de zanahoria

DACC Races de arabidopsis Ca Mibefradil

Clulas guarda de vicia 10 ps (30 mM Ca) Ca, K

faba
Rca Raz de trigo 29 ps (40 mM Ca) Na, Cs, K, Li, Rb Rutenio rojo,
verapamilo,
Diltiazem,
Ni2+, Al3+, La3+,
Gd3+, TEA+
VDCC2 Raz de ray 40 ps (100 mM Cs, K, Rb, Na Verapamil, La3,
Ca) Ba, Ca TEA+
Maxi- Raz de ray 135 ps (100 mM K, Rb, Cs, Na, Li Rutenio rojo
cation Ca) Ba, Sr, Ca, Mg,
Co, Mn
Activadas por hiperpolarizacin
Mecano Clulas guarda de vicia 3 ps (30 mM Ca) Ca
sensibles faba
Mecano Epidermis del bulbo de 6 ps (200 mM Ca) Ca, K Al, Gd3+, La3+
sensibles cebolla
Clulas guarda de vicia Ca Gd3+,
faba calcicluidine
Races de arabidopsis Ca Al3+

Mesfilo hoja de
23 ps (50 mM Ba) Ba, Ca [Ca2+]Cyt
Arabidopsis
Elicitor Suspensin de clulas 4 ps (20 mM Ca) Ba, Ca La3+, nifedipina
activado de tomate
Voltaje-independiente
LEAC Suspensin de clulas 245 ps (50 mM Ca, K La3+, Gd3+
de Perejil Ca)

El calcio en la apertura y cierre de estomas

El Ca2+, directa o indirectamente, regula la actividad de los canales de K+: tanto

los de entrada como los de salida, ya se aada desde el exterior o se inyecte en el
interior de las clulas oclusivas. Un incremento en la concentracin externa de
Ca2+ cierra los estomas a travs de la inhibicin de los canales de entrada de K+
y estimulando la apertura de canales aninicos cuyo flujo natural, al potencial de
membrana de las clulas oclusivas, es de salida. La elevacin citoslica de Ca2+
se logra a travs de dos vas celulares, el influjo de Ca2+ a travs de canales en la
membrana plasmtica y la liberacin de Ca2+ intracelular (Jammes et al., 2011).

Se ha demostrado que el ABA puede provocar una elevacin de la concentracin

de Ca+ citoslico de las clulas guarda. El ABA en los canales de Ca+ puede
activarse y desactivarse varias veces dentro de la clula, dando lugar a
elevaciones transitorias de la concentracin de Ca+ citoslico. Estudios
electrofisiolgicos han mostrado que las plantas tienen canales de Ca+ con
diferentes tipos de mecanismos de sincronizacin: ligantes, de tensin y de
estiramiento activo (Kohler et al., 2003).

Reyes et al (2013) mencionan que en las clulas guarda, las oscilaciones de Ca+
regulan la apertura de los estomas. Se ha demostrado experimentalmente que el
cierre estomtico no solo depende de la frecuencia y la amplitud de las
oscilaciones de Ca+, sino tambin en gran medida de la duracin y el nmero de
picos de Ca+ (Kohler et al., 2003).

McAinsh et al. (1995) mostraron que los canales permeables de calcio en la

membrana plasmtica al estuvieron involucrados en la generacin de oscilaciones
de [Ca2 +] inducidas por la concentracin de iones de calcio fuera de la clula. La
forma en que se generan las oscilaciones de [Ca2 +] citosolico es una de las
claves para entender cmo la especificidad es codificada en los sistemas de
sealizacin a base de calcio (Evans et al. 2001).

Este esquema muestra el mecanismo por el cual la informacin de sealizacin se

codifica en la firma de calcio de clulas guardia. (a) La fuerza del estmulo ([Ca2]
ext, ABA, S1P) se ha correlacionado directamente con el patrn de oscilaciones
de [Ca2] citoslico (es decir, su perodo, frecuencia y amplitud) que a su vez,
determina el estado de equilibrio resultante apertura de los estomas. Las clulas
guardia son capaces de integrar la informacin de sealizacin de una serie de
estmulos, que inducen oscilaciones en la [Ca2] exterior simultneamente para
generar una nueva firma de calcio en la elaboracin definitiva de la abertura de los
estomas. Respuesta III es la nueva firma de calcio producido como resultado de la
aplicacin de estmulos A y B simultneamente (Evans et al, 2001, Reyes et al.
2013).
La siguiente tabla nos muestra las oscilaciones de calcio en las plantas

Oscilaciones en [Ca2 +] cyt en plantas (Evans et al, 2001)

Tipo de clula Estimulo Caractersticas
Clulas guarda [Ca2+]ext 0.1 mm: period, 8.3 0.8 min; amplitude, 300
560 nm
1.0 mm: period, 13.6 0.6 min; amplitude, 400
850 Nm

Ca2+ capturado Period, 4.5 0.3 min

ABA 10 nm: period, 11.0 0.9 min; amplitude, 200

600 nm
1 m: period, 18.0 0.9 min; amplitude, 200600
nm
H2O2 Repetitiv transients: amplitude, ~700 Nm

Frio Repetitive transients: period, 154 11 s;

amplitude, ~125 nm
Hiperpolarizacion Membrana hiperpolarizacin: oscilaciones y
"olas"
Baja [K +] ext: oscilaciones en clulas 30%
Bajo [K +] ext: transitorios y oscilaciones
ADP-ribosa cclica Period, ~3.75 min; amplitude, ~200 nm
S1P 6 m: period, 3.8 0.4 min; amplitude, 3050 nm
Vstago Circadianos Period, ~22 h; amplitude, 400550 nm
Frio Frequency, ~100 s
Races Manitol Oscilaciones en la endodermis y periciclo
Nacl Oscilaciones en la endodermis y periciclo
Pelos radicales Factores Nod Periodo, ~ 60 s
Pelos Mastorporan Period, ~3 min; amplitude, ~500 nm
estaminales

Ins(1,4,5)P3 capturado Ondas': period, 610 min

Ca2+ capturado Period, 3045 s
Crecimiento Period, ~80 s; amplitude, >1 m
Protoplastos de Luz roja / rojo lejano Frequency, 0.0170.05 s1; amplitude, <0.15 m
avena
Clulas Auxina cido indolacetico: period, ~36 min
epidermales de
maiz
Las algas verdes Estroncio Spiking: frequency, 0.80.2 min1; period, 35 8
unicelulares s;
Amplitude, 367 71 nm
Cafena Frequency, 1.0 0.4 min1; period, 30 2 s

Calmodulinas: Transduccin de seales

Jammes et al., 2011 hacen referencia que la transduccin de las seales de Ca2+
es el mecanismo central por el cual las plantas detectan y responden a los
estmulos endgenos y ambientales.

La calmodulina (CaM) es una protena formada por una cadena polipeptdica con
cuatro sitios de unin al ion Ca2+ de alta afinidad y se encuentra en todas las
clulas eucariotas. Vincula la seal intracelular de Ca2+ a muchos procesos
celulares esenciales mediante la unin y la regulacin de las actividades de ms
de 40 protenas y enzimas diferentes en una manera dependiente de Ca 2+ (Chin,
2000; Bouch et al., 2005; Perochon et al., 2011).
Cuando la concentracin del ion Ca2+ aumenta, la unin del ion Ca2+ a la CaM
provoca un cambio de conformacin. La unin de cuatro iones Ca2+ induce
cambios alostricos en la protena; este cambio de conformacin permite que la
CaM se pueda unir a protenas y de esta manera controlar su actividad (Chin,
2000).

Las calmodulinas inducen Seales por la elevacin de la concentracin de calcio

celular y puede regular la transcripcin de diferentes mecanismos. La siguiente
figura muestra que niveles elevados de Ca2 + resultan en su unin a un sensor de
Ca2 +, que se une directamente a secuencias especficas de ADN y modula la
expresin gnica (a y b). los Sensores de calcio activado (Ca2 + / CaM o Ca2 + /
LMC) interactan con protenas de unin a ADN y modulan su actividad resultante
en la transcripcin alterada (c). Por ltimo, un nivel elevado de calcio activa una
protena quinasa (CDPK, CBK, y / o CCaMK) ya sea directamente o a travs de la
CaM o una protena fosfatasa, que a su vez fosforila o desfosforila un TF,
respectivamente, lo que resulta en la activacin o represin de la transcripcin (d a
f). Las flechas slidas indican vas con evidencia experimental. Rutas que carecen
de pruebas se representan mediante flechas discontinuas. Las flechas Prpura
indican la activacin del gen expresin, las lneas de color azul con una lnea
horizontal representa la represin (Reddy, 2011)
El siguiente diagrama ilustra las funciones conocidas de Ca2 + y Ca2 + / CaM TFS
vinculante en la regulacin de la expresin de genes implicados en la inmuno
respuestas de las plantas a los patgenos. Las Flechas prpuras indican la
activacin de la expresin gnica, con lneas azules una lnea horizontal indica la
represin. Caminos que carecen de pruebas son representados por flechas
discontinuas. Diamantes en el extremo de las lneas indican que no se conoce el
efecto de Ca2 + / CaM, en funcin de TFS.
En el siguiente cuadro se menciona la unin de calmodulinas a las plantas y sus
caractersticas:

UNIN DE LAS CALMODULINAS A LAS PROTEINAS EN PLANTAS (Snedden y Fromm,

1998)
Grupo funcional Protena Caractersticas
Metabolismo Glutamato descarboxilasa Cataliza la conversin de L-glutamato en cido g-
(GAD) aminobutrico, activados por Ca2 + calmodulina
determinada (Ca2 +-calmodulina) y muchos
esfuerzos, forma un complejo de mltiples
subunidades, fuertemente asociados con la
calmodulina

NAD quinasa (gen no Cataliza la conversin de NAD a NADP; activado

clonado) por Ca2 +-calmodulina unida; podran estar
involucrados en la explosin oxidativa.

Apirasa (nuclesido Localizacin subcelular: es regulada la luz, la

 trifosfato) expresin ectpica afecta el metabolismo y el
crecimiento en Arabidopsis.
Fosforilacin Ca2 + union Ca2 + - La visinin-like (tres 'manos EF ") tiene un dominio
quinasa dependiente de de unin Ca2 + y un dominio separado Ca2 +-
calmodulina (CCaMK) calmodulina vinculante, que es auto inhibitorio

Quinasa homlogo El homologo a Ca2 +-calmodulina-quinasa

(MCK1) regulada de otras eucariotas, aislados de las
races del maz, podran estar involucrados en
gravitropismo.
Ion transporte Ca2+ - ATPasa (BCA1 Y Bombas de Ca2 + en las Endomembranas;
ACA 2) dominio de unin a calmodulina es autoinhobitoria;
localizados cerca del extremo N-terminal; la
localizacin en la endomembrana es nica para
las plantas.
Funcin del Kinesin-like (KCBP) Protena motor de dominio; la calmodulina modula
citoesqueleto la asociacin con la tubulina, altamente expresado
durante la mitosis, podran estar involucrados en
husillo acentriolar y formacin de phragmoplast
que participan en la desarrollo de los tricomas.

La calmodulina modula la interaccion del EF-1a

Factor elongacin- 1a con microtubulos in vitro
(EF-1a) Miosina similar a la clase V; contiene repeticiones

IQ con supuestas caractersticas de unin a

Miosina (MYA1) calmodulina.
Unin DNA Protena de cremallera Factor de transcripcin; interacta in vitro con un
de leucina bsica (TGA3) elemento de ADN en el promotor del gen de
calmodulina Cam-3 de Arabidopsis

Perspectivas futuras
Los estudios futuros deberan tratar de diseccionar las funciones especficas, su
distribucin subcelular y la relevancia fisiolgica de su interaccin con las
protenas objetivo. En ciertos procesos de desarrollo, claramente se ha
demostrado una implicacin de la calmodulina (por ejemplo: fotomorfognesis),
pero los mecanismos y objetivos involucrados en estos procesos permanecen sin
caracterizar.
Por lo tanto, la futura caracterizacin de protenas objetivo unidas a la calmodulina
es esencial. Estudios integrados continuos en sistemas modelo como Arabidopsis,
deberan ayudar a acelerar nuestra comprensin de Ca 2+ y calmodulina mediada
por las vas de transduccin de seales.
LITERATURA CITADA

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