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C Reactivo Precipitante
Para la separacin de las lipoprotenas de alta densi-
dad (HDL) en suero o plasma
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fotocolormetro con filtro verde (490-530 nm). 0,40 - 0,60 g/l
- Temperatura de reaccin: 37oC Es recomendable que cada laboratorio establezca sus
- Tiempo de reaccin: 45 minutos propios valores de referencia. No obstante, valores mayo-
- Volumen de muestra: 500 ul res de 0,40 g/l se consideran recomendables y los que se
- Volumen de Reactivo Precipitante: 50 ul encuentren por encima de 0,60 g/l se han considerado como
- Volumen de Sobrenadante: 100 ul protectivos. Por el contrario, valores de HDL colesterol por
- Volumen de Reactivo de Trabajo de Colestat enzimtico debajo de 0,40 g/l se consideran como ndice significativo
o Colestat enzimtico AA/lquida: 2 ml de riesgo de enfermedad cardaca coronaria.
- Volumen final de reaccin: 2,1ml
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA
PROCEDIMIENTO La exactitud y precisin de la determinacin dependen
En un tubo de Kahn medir 0,5ml (500ul) de muestra, y fundamentalmente de la observacin de las condiciones
agregar 50 ul de Reactivo Precipitante. Homogeneizar de precipitacin, por lo que los tiempos y temperaturas es-
agitando (sin invertir) durante 20 segundos y dejar 30- tablecidos, si bien no requieren un control riguroso, deben
40 minutos en refrigerador (2-10oC) o 15 minutos en ser respetados.
bao de agua a la misma temperatura. No colocar en Cuando el HDL colesterol no puede separarse por com-
congelador. Centrifugar 15 minutos a 3000r.p.m. Usar pleto en una centrfuga comn debido a niveles elevados
el sobrenadante lmpido como muestra. de triglicridos puede efectuarse la determinacin de la
En 3 tubos marcados B, S y D colocar: siguiente manera: seguir las instrucciones indicadas en
B S D PROCEDIMIENTO hasta la incubacin a 4-10oC y luego de
la misma, colocar la mezcla de reaccin en tubos capilares
Sobrenadante - - 100 ul y centrifugar en centrfugas de microhematocrito a 10.000
Standard - 20 ul - r.p.m. durante 5 minutos. Cortar el capilar desechando el
precipitado y utilizar el sobrenadante lmpido para la prueba.
Reactivo de Trabajo 2 ml 2 ml 2 ml
Mezclar e incubar 5 minutos a 37oC si se usa el Reactivo PERFORMANCE
de Trabajo de Colestat enzimtico AA/lquida o 15 mi- a) Reproducibilidad: procesando replicados de una misma
nutos a 37oC cuando se usa el de Colestat enzimtico. muestra en el da se obtienen los siguientes valores:
Retirar del bao y enfriar. Leer a 505nm en espectrofo- Nivel D.S. C.V.
tmetro o en colormetro con filtro verde (490-530 nm), 0,29 g/l 0,011 g/l 3,8 %
llevando a cero con el Blanco. 0,63 g/l 0,023 g/l 3,7 %
b) Linealidad: la reaccin es lineal hasta 5 g/l.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL c) Lmite de deteccin: en espectrofotmetro, para una
El color de reaccin es estable 2 horas por lo que la absor- variacin de absorbancia de 0,001 D.O., el cambio mnimo
bancia debe ser leda dentro de ese lapso. de concentracin detectable ser de 0,0063 g/l de colesterol.
C
Este producto cumple con los requerimientos
previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de
productos sanitarios para el diagnstico "in vitro"
M Elaborado por:
P
Xn
Irritante
H Fecha de caducidad
No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biolgico
Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Tc.: Viviana E. Ctola
Bioqumica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Disp. N: 5984/83-319/00 2000 Rosario - Argentina
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