Para obtener la mayor precisin en la determinacin de un compuesto de inters en una mezcla, una curva

de calibracin de alturas, reas o pesos de los patrones con relacin a un estndar, contra algn parmetro
de concentracin (mg/l, % en volumen, % en peso, fraccin molar, etc) representa el mejor mtodo.

Procedimiento:

1. Se prepara una serie de patrones (mnimo 4) de diferente concentracin y a cada uno se le adiciona una
cantidad igual del estndar. El estndar interno debe cumplir los mismos requisitos que un estndar
utilizado para anlisis cualitativo (Ver Pgina 88, numeral 3.1.9.3)

2. Se toma un alcuota de la muestra, se le adiciona igual cantidad de estndar que a los patrones y se
afora al mismo volumen de estos.

3. En idnticas condiciones instrumentales se inyecta al cromatgrafo una cantidad igual de cada patrn y
de la muestra.

4. Se mide la altura, el rea o se determina el peso del pico de cada patrn y del estndar y se calculan las
alturas, reas o pesos relativos, igual procedimiento se hace con el pico del compuesto de inters en la
muestra y el estndar.

5. Se construye una tabla de datos la cual nos da una idea aproximada del rango de concentracin en el
cual se encuentra el compuesto en la muestra.

6. Si se requiere mayor precisin se construye una curva de calibracin en cuyo eje de abscisas (eje x) se
coloca la concentracin relativa y en el eje de ordenadas (eje y) las alturas, reas o pesos relativos. Se
ubica cada punto, se traza la grfica y se extrapola a cero. Si quedan puntos por fuera de la lnea, se
puede realizar un ajuste por mnimos cuadrados. Se interpola el valor relativo obtenido para el
compuesto en la muestra problema y se determina su concentracin. La concentracin real del compuesto
en la muestra ser igual a la concentracin leda en la grfica multiplicada por el Factor de dilucin (Fd).

La escogencia de la altura, rea o peso como parmetro relativo depende de la forma del pico y su
tratamiento debe ser igual para todos los patrones y la muestra.

El rango de concentracin para preparar los patrones depende la linealidad de respuesta que presente el
detector para el compuesto de inters, sea el caso de la acetona, utilizando como estndar metiletilcetona y
que se describe en la Tabla 3.2.

La columna 3 (volumen de A en mL) representa el volumen que es necesario tomar de un patrn de 100
mg/l de acetona para preparar 100 mL de cada patrn.

La columna 4 (volumen de B en mL) representa el volumen que es necesario adicionar a cada patrn de
un estndar de 500 mg/l de metil etil cetona, para que la concentracin del estndar en cada patrn sea
de 50 mg/l.

La columna 5 (aforo final) presenta el volumen final al cual se afora cada patrn y el alcuota tomado de la
102
muestra problema.
La columna 6 indica que se inyecta 1 microlitros de cada uno de los patrones y muestra problema al
cromatgrafo.

Observando la tabla de datos podemos concluir que la concentracin de la acetona en la muestra problema
se encuentra en un rango entre 40 y 80 mg/l que resulta de multiplicar el rango entre 20 y 40 mg/l que
nos da las reas relativas del pico de la acetona y el estndar en la muestra multiplicadas por 2 que es el
factor de dilucin de la muestra.

Si requiere mayor precisin se construye la curva de calibracin as: (observar figura 3.10)
--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
No. Concent. Vol.de Vol.de Aforo Cantidad rea de patrn rea Estndar reas Concent.
Patrn mg/l A en ml B en ml Final inyectada en cm2 en cm2 Relativas Relativas
--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
1 20 20 10 100mL 1 L 10 25 10/25 =0.4 20/50=0.4
2 40 40 10 100mL 1 L 20 25 20/25 =0.8 40/50=0.8
3 60 60 10 100mL 1 L 30 25 30/25 = 1.2 60/50=1.2
4 80 80 10 100mL 1 L 40 25 40/25 = 1.6 80/50=1.6
mp 50 ml muestra 10 100mL 1 L 15 25 15/25 = 0.6 x/50=?
--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Tabla 3.2. Datos para construir una curva de calibracin para determinar la acetona contenida en una solucin
utilizando como estndar metil etil cetona

Segn la curva de calibracin la concentracin de acetona en la solucin es de 30 mg/L la cual se debe

multiplicar por un factor de dilucin de 2 para obtener la concentracin real:

30 mg/l X 2 = 60 mg/L concentracin real ya que se tomaron 50 mL de la solucin muestra, se le adi-

cionaron 10 mL del estndar y se afor a 100. Luego:

Vf 100
Ci = Cf------ = 30 mg X ------ = 60 mg/ L
Vi 50

En anlisis de rutina cuando se obtienen grficas lineales y el valor de concentracin de la muestra

problema cae en el rango de patrones, no es necesario construir curva de calibracin, ya que se puede
aplicar directamente la siguiente relacin:

Ap Am
As A
s
Cp Cm
Cs Cs

donde A p representa el rea del pico del patrn, As el rea del pico del estndar, C p concentracin del
patrn, C s concentracin del estndar, Am rea del pico en la muestra, As rea del pico del estndar en

103
la muestra y Cm concentracin de la muestra la cual podemos despejar al conocer los dems datos.

Figura 3.10 Curva de calibracin para la determinacin de acetona por cromatografa de gases.

Tambin se puede hacer uso de la siguiente relacin:

APs Am
s
C p s C ms

Siendo A ps = al rea de patrn con relacin al estndar, C ps = concentracin del patrn con relacin al
estndar, Ams = rea de la muestra con relacin al estndar, C ms = concentracin del patrn con relacin al
estndar.

Para la estandarizacin de un anlisis, se deben aplicar Diferentes mtodos, hacer un tratamiento

estadstico de los datos y determinar cual es el mtodo cuantitativo por cromatografa ms rpido, exacto y
preciso.

104