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TCNICA DE TOMA DE HEMOCULTIVOS.

OBJETIVO:

Determinar la presencia de microorganismos en sangre obtenida con tcnica

asptica, mediante la siembra de sta en un medio de cultivo. Permite aislar el
agente causal en caso de bacteremia.

DEFINICIN:
Es un examen microbiolgico que permite la deteccin en el laboratorio, de una
bacteremia, lo cual contribuye a adecuar la terapia antimicrobiana de acuerdo al
microorganismo aislado y a la sensibilidad in vitro que est presente, ya que la
terapia, generalmente se plantea en forma emprica.

CARACTERISTICAS GENERALES DE LAS BACTEREMIAS.

La incidencia de la bacteriemia depende de la poblacin estudiada y oscila

entre 5 y 30 casos por cada 1000 pacientes hospitalizados. Se presenta a
cualquier edad y estn especialmente predispuestos a padecerla los pacientes con
graves enfermedades de base y los sometidos a maniobras que causan
alteraciones de los mecanismos generales y locales de defensa frente a la
infeccin.

La bacteremia puede ser una complicacin de infecciones localizadas

como infeccin urinaria, infecciones respiratorias, etc. Puede deberse a la irrupcin
directa de los microorganismos en el torrente cardiovascular como en el caso de
pacientes adictos a drogas, portadores de catteres intravasculares y sometidos a
ciruga cardaca, o bien la puerta de entrada puede ser inaparente.

Las manifestaciones clnicas de las bacteriemias son muy variadas y van

desde un cuadro febril, sin ninguna otra manifestacin clnica, hasta el shock
sptico con fracaso multiorgnico.

ETIOLOGIA DE LAS BACTEREMIAS.

La mayora de los microorganismos son capaces de invadir el torrente

sanguneo. La distribucin de los agentes causales de la bacteremia y la
fungemia ha variado en los ltimos aos y actualmente los microorganismos Gran
positivos, especialmente estafilococos y enterococos, igualan o superan en
frecuencia a los bacilos Gram negativos.

Los motivos de este cambio no se han establecido con exactitud, pero se

atribuyen a la utilizacin de antibiticos de amplio espectro, al uso generalizado de
catteres intravasculares, a la mayor supervivencia de enfermos graves, a la
aparicin de resistencia a los antimicrobianos en microorganismos como
Staphylococcus aureus o Enterococcus que pueden causar brotes de infeccin
hospitalaria, a la mayor agresividad de la ciruga y a la utilizacin de maniobras
teraputicas invasivas.

DIAGNOSTICO DE LAS BACTEREMIAS. El diagnstico definitivo de la

bacteriemia se establece cuando se asla el microorganismo causal en la sangre,
mediante el cultivo de sta

La necesidad de realizar hemocultivos deriva de los siguientes hechos:

El aislamiento de una bacteria en los hemocultivos aporta una valiosa

informacin a la hora de elegir el tratamiento antimicrobiano adecuado.
El hemocultivo no conlleva ningn riesgo para el paciente.
Las caractersticas clnicas de la bacteriemia y las situaciones en que
puede presentarse son tan variadas que no permiten establecer un
diagnstico clnico con suficiente certeza.

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CONDICIONES PARA LA TOMA DE HEMOCULTIVOS:

Usar de tcnica asptica.

Evitar la contaminacin
El retiro de los medios de cultivo en el laboratorio, debe ser realizado en el
momento en que se proceder a realizar la tcnica (no dejar en la sala por
tiempo indeterminado, pues la temperatura ambiente altera las
condiciones aspticas del caldo de cultivo)

MATERIALES

Bandeja con:

3 o 2 frascos con caldo de cultivo que se retirarn previamente del laboratorio;

estos deben estar debidamente rotulados. (Nombre, edad, servicio, temperatura
fecha y hora cuidando no escribir sobre el cdigo de barras).

Jeringas desechables de 10 cc
Guantes estriles
Equipo de hemocultivo :(si la serie es de 3, tendrn que utilizar 3
bandejas)
Pao perforado
Hisopo
Trulas de algodn
1 receptculo para desechos
Alcohol al 70%
Tela adhesiva
Mascarilla.
Ligadura.
Frascos.

TECNICA HEMOCULTIVO: Este procedimiento se debe realizar con ayudante.

OPERADOR AYUDANTE
Informar a paciente del procedimiento. Retira frascos de laboratorio, con orden mdica.
Prepara equipo. Lavado de manos.
Puede controlar temperatura. Controla temperatura axilar.
Selecciona vena a puncionar. Lleva equipo a la unidad.
Puede realizar este paso. Lava zona elegida con agua y jabn, en forma
rotatoria y amplia. Seca con toalla de papel.
Rotula Frascos y se coloca mascarilla
Lavado clnico de manos. Secado con compresa Lavado clnico de manos
estril.
Se coloca guantes estriles Presenta material estril
Arma jeringa y la deja en bandeja estril Abre estuche jeringa
Pincela sitio de puncin amplia y excntricamente con Vierte solucin antisptica en la copela
alcohol al 70% o clohexidina, esperar 20 seg para que
se seque
Coloca pao perforado en sitio elegido. Coloca ligadura por debajo del campo, evitando
contaminar el rea.
Realiza puncin venosa, extrayendo la cantidad de Suelta ligadura.
sangre requerida.
Desinfectar el tapn de goma con alcohol al 70% o Abre cuidadosamente el frasco, sin contaminar la
clohexidina y realiza el cambio de aguja estril. tapa.
Deposita suavemente la muestra en el frasco, Homogeneiza la muestra con movimiento rotatorio
deslizando la sangre por las paredes, cuidando que la suave.
jeringa no toque la boca del frasco.
Controla sitio de puncin. Lleva examen al laboratorio con la orden
respectiva
Elimina material utilizado en receptculo
correspondiente
Retira guantes, los desecha, se lava las manos y
registra la tcnica.

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CONSIDERACIONES DE LA TECNICA DE HEMOCULTIVO

La preparacin de la piel es esencial si se quiere evitar la contaminacin

de las muestras, una vez identificada la vena a puncionar, se debe lavar el
rea con solucin jabonosa.
El vaciar la muestra suavemente, se evita la hemlisis, ya que su
presencia puede interpretarse como positividad del hemocultivo.
El retirar los frascos en el preciso momento de la realizacin de la toma
de muestra, permite obtener resultados fidedignos.
La presencia de fiebre en el paciente indica destruccin bacteriana, por lo
tanto, no es imprescindible que se tome slo bajo esa condicin; se ha
comprobado que el mejor momento para obtener la muestra de sangre es
entre 2 horas a 30 min antes del peak febril, el que generalmente va
precedido de calofros.
Se recomienda obtener dos o tres muestras tomadas, en diferentes sitios
de puncin.
S el paciente est con antibioterapia, el hemocultivo debe tomarse antes
de corresponder la siguiente dosis y consignarlo en la orden,
medicamento, dosis, hora de administracin de la ltima dosis.
(PREFERENTEMENTE REALIZAR UNA VENTANA ANTIBITICA, es
decir no administrar antibioterapia por al menos 48 horas.)
S no se logra obtener sangre en una primera puncin, se debe cambiar la
aguja utilizada y todo material contaminado.

INDICACIONES

Fiebre alta (>38C, especialmente si se acompaa de gran compromiso

importante del estado general sin una causa clara que lo explique).
Existen pacientes en los que la bacteremia puede cursar sin fiebre como
es el caso de los neonatos o ancianos, en los que sta se acompaa de
deterioro de su estado general y en ocasiones de hipotermia.
Estado de shock no explicado por causas hemodinmicas.
Infecciones localizadas que pueden complicarse con bacteremia como
neumona, pielonefritis, meningitis, infeccin del SNC, infecciones
intraabdominales, infecciones complicadas de la piel o tejido celular
subcutneo.
La presencia de leucopenia, leucocitosis o trombocitopenia no relacionada
con procesos hematolgicos.
Sndrome febril de ms de 04 das de evolucin, sin foco clnico evidente.
Paciente inmunodeprimido, con fiebre
Sospecha clnica de septicemia.
Cardiopata, con fiebre, sin foco clnico evidente.
Osteoartritis aguda.

NMERO DE MUESTRAS CULTIVADAS:

Se ha demostrado que en un episodio bactermico la positividad de una,

dos y tres muestras para hemocultivo es de 91%, 98% y 99%
respectivamente, al no existir diferencia significativa al tomar 2 o 3
muestra se indicar:
Paciente con sospecha de Endocarditis bacteriana: obtener 2 muestras
para hemocultivo, si estos van negativos a las 24 horas, obtener un
segundo set de 2 hemocultivos ms.
En ningn momento est recomendada la obtencin de una muestra
de sangre para hemocultivo en forma aislada, disminuye la
positividad diagnstica y la evaluacin de contaminacin.

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VOLUMEN DE MUESTRA:

Adultos:

Se recomienda tomar un volumen total de 20 ml en las 2 muestras, (07-

10ml por muestra).

Nios:

El volumen es variable segn edad:

Recin Nacidos : 1-2 ml
Lactantes de 1mes a 2 aos : 2 a 3 ml
Mayores de 2 aos : 5ml
Adolescentes : 10ml.

La contaminacin de hemocultivo no debe superar el 3%, por lo cual,

siempre se deben considerar las medidas anteriores.

Frascos para hemocultivo:

Sern entregados a cada subdepartamento por Laboratorio Central.

Conservar entre 2C y 25C, en un lugar seco, fuera de la luz directa del
sol.
Se debe examinar cada frasco antes de usarse para ver si presenta
indicios de dao, contaminacin o deterioro como: derrames, turbidez,
decoloracin u oscurecimiento o el tampn hinchado o hundido, si es as,
el frasco se debe devolver a Laboratorio Central.
En el momento de la toma de muestra, el frasco de cultivo debe estar a
temperatura ambiente.
Recepcin de muestras:

La recepcin se realizar las 24 hrs. del da.

INFORME
Informe final negativo, se enviar al 5 da de cultivo.
Informes positivos, se comunicarn inmediatamente (slo la presencia de
bacterias, no el tipo de bacteria y su resistencia aantibiticos)

DIAGNSTICO DE INFECCIN RELACIONADA CON EL CATTER VENOSO

CENTRAL

A pesar de todos los avances de infecciones intrahospitalarias, diseos de

catteres, la vigilancia epidemiolgica sigue mostrando que las bacteremias
asociados a catteres endovenosos sigue siendo un problema importante. Ante
cuadro febril asociado a catteres venosos centrales y la sospecha de infeccin
corresponde hacer diagnstico.
Existen muchas definiciones para SEPSIS por catter, que incluyen desde la
infeccin de la herida cutnea a nivel de la insercin del catter hasta el shock
sptico. De acuerdo al Consenso Nacional se considera la siguiente definicin:

INFECCION DEL TORRENTE SANGUNEO RELACIONADA CON EL

CATETER:

Bacteremia o fungemia en un paciente con un dispositivo vascular con uno o ms

hemocultivos perifricos positivos, con manifestaciones clnicas de infeccin
(fiebre, calofros y/o hipotensin y sin otra fuente aparente de infeccin del torrente
sanguneo. Al menos una de las siguientes condiciones:

1. Cultivo positivo del extremo del catter: mayor o igual a 15 ufc en su extremo
distal, con identificacin del mismo microorganismo que en la sangre.
2. Hemocultivos simultneos a travs del catter y por veno puncin.

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De acuerdo a lo anterior la confirmacin diagnstica se realiza mediante

diagnstico microbiolgico, por medio de procedimientos:

1. No conservadores: cuando est indicado el retiro del catter.

2. Conservadores: cuando por condiciones tcnicas o clnicas del paciente no se
ha indicado el retiro de catter.

Paciente neutropnico con catteres permanentes.

Catteres de nutricin parenteral.
Implantes vasculares
Catter de dilisis.
Paciente sin otra posibilidad de acceso vascular.

MTODO NO CONSERVADOR:
CULTIVO DE PUNTA DE CATETER (TCNICA DE MAKI):

Sigue siendo el mtodo ms utilizado.

Por equipamiento y es de bajo costo.
Slo recupera microorganismos desde la superficie externa del catter, su
mxima utilidad es para el diagnstico de bacteremia relacionada a
catteres de corta duracin.

INDICACIONES:

Paciente con catter venoso central que presente fiebre mayor de 38 C,

sin foco infeccioso aparente, que lo explique.
Signos de infeccin, a nivel de la herida cutnea

TCNICA
Lavado clnico de manos.
Uso de guantes estriles:
Instalar campo estril.
Cerrar conexin del catter.
Con una pinza y tijera estril cortar punto que fija el catter a la piel y
traccionar suavemente hacia el exterior.
Retirar catter
Cortar con tijera estril 3 cm de la punta del catter, partiendo desde
algunos milmetros bajo el nivel subcutneo del catter.
Guardar la punta del catter en un tubo estril de boca ancha.
Enviar al laboratorio central lo antes posible.
Paralelamente se deben tomar 2 hemocultivos de va perifrica del
paciente.

INTERPRETACIN DE RESULTADOS:

Si se informa desarrollo menor de 15 colonias (15 UFC), se interpreta

como contaminacin del catter al momento de retirarlo.
Si se informa desarrollo igual o mayor de 15 colonias (> o = 15 UFC) se
interpreta como una infeccin del catter, la cual puede ser la causa del
cuadro clnico del paciente, si adems se ha aislado el mismo
microorganismo que en los hemocultivos perifricos.

HEMOCULTIVOS CUANTITATIVOS
Permiten el diagnstico microbiolgico de sepsis, por catter venoso central y est
indicado para no remover el catter venoso central. Por este mtodo se deben
tomar muestras de sangre desde va perifrica y va central, con el fin de comparar
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recuento de microorganismo cuya interpretacin definir si el paciente presenta

una bacteremia asociada a catter venoso central.

TOMA DE MUESTRA

Preparacin de la piel, lavado por arrastre con jabn.

Lavado clnico de manos con jabn antisptico, uso de guantes estriles.
Extraer de vena perifrica 2 hemocultivo de la forma habitual y enviar al
laboratorio.
Identificar con el nombre del paciente, fecha ,hora ,T
Enviar de inmediato al laboratorio.
Extraer 1 ml. de sangre por catter venosos central y eliminar.
Extraer cantidad de sangre correspondiente, llenar frasco de hemocultivo y
luego heparinizar lumen de catter central, luego tapar con tcnica
asptica.
Enviar de inmediato al laboratorio. No refrigerar las muestras.
Lavado de manos
Registrar.

INTERPRETACIN DE RESULTADOS.

Se informa recuento de colonias por 1 ml. en hemocultivo perifrico y

recuento de colonias por hemocultivo central. (UFC/ml = unidades
formadoras de colonias por ml).
Si el recuento de colonias en hemocultivo central es 4 veces superior a
hemocultivo perifrico, se interpreta como bacteremia por catter venoso
central, si adems se ha aislado el mismo microorganismo por ambas
vas. Sensibilidad: 94% y Especificidad: 100%.

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