Modelagem livre de calibrao inversa de cromatografia de troca
inica em purificao industrial de anticorpo
Introduo O processamento em escala industrial enfrenta o desafio de purificar eficientemente um produto fora de uma mistura muito heterognea.
Esta abordagem garante desenvolvimento rpido processo e reduz o
tempo de mercado, mas provvel que a explorao reduzida do projeto espao leva a processos de qualidade inferior. Como a integrao de ferramentas de modelagem para o desenvolvimento do processo tambm uma parte essencial da estratgia para a implementao da qualidade de abordagem de design, ferramentas de modelagem esto ganhando cada vez mais a ateno da indstria farmacutica.
Existem protocolos calibrao do modelo de componentes puros, [8],
o que permitem a determinao dos parmetros especficos para cada componente de uma forma consecutiva. Como no temos conhecimento sobre o comportamento dos componentes dentro de misturas, o mtodo inverso uma opo adequada, que altera os parmetros de forma sistemtica para alcanar uma competio de cromatograma medindo e prevendo modelos. Num estudo comparativo [9], foram encontrados na abordagem direta e o mtodo inverso para alcanar a mesma qualidade de predio de tal modo que de tal modo que este ltimo recomendado para o desenvolvimento do processo rpido. O potencial da modelagem matemtica e otimizao numrica de cromatografia foi demonstrada em set-ups acadmicas para as misturas de molculas pequenas [10, 11], protenas modelo [12], e anticorpos [13, 14], bem como para as etapas do processo industrial [15, 16]. Todas as aplicaes tm em comum, que as calibraes do sensor existiam para todos os componentes, permitindo transformar os valores de absoro de UV em concentraes de massa ou molares. Este artigo discute os desafios na aplicao de modelagem mecanicista e otimizao numrica a um conjunto de dados de cromatografia preparativa industrial sem o conhecimento da composio da alimentao em termos de concentraes molares. Experimentos e anlises adicionais so evitados pelo emprego de uma abordagem de modelagem que estima os coeficientes de absoro a partir dos dados UV gravados. O estudo de caso baseia-se em uma permuta catinica cromatogrfica (CEX) etapa do processo (resina Poros 50 HS). A mistura de anticorpo alimentada em CEX eludo uma protena A aps condicionamento e incubao de baixo pH. A mistura contm diversas variantes deanticorpo, diferindo em tamanho e a carga, que todos eluir em um pico comum. Frao de recolha e anlise tem de ser realizada tambm blain obter informaes sobre a localizao das impurezas. Pode ser distinguida usando cromatografia de excluso, o alvo monmero e trs impurezas, duas espcies de um baixo peso molecular (HBPM) e alto peso molecular (HMW). Os parmetros do modelo encontrado foram usados na otimizao de silico e eventualmente coincidam com otimizao convencional pela avaliao do cromatograma.