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Revista Cientfica

ISSN: 0798-2259
revistafcv@gmail.com
Universidad del Zulia
Venezuela

Ramrez Benavides, Gins Fernando; Osorio, Jos Henry


NIVELES SRICOS DE TETRAYODOTIRONINA LIBRE (T4 L), MEDIANTE EL MTODO DE
ELECTROQUIMIOLUMINISCENCIA EN CANINOS
Revista Cientfica, vol. XIX, nm. 3, mayo-junio, 2009, pp. 238-241
Universidad del Zulia
Maracaibo, Venezuela

Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=95911669004

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________________________________________________________Revista Cientfica, FCV-LUZ / Vol. XIX, N 3, 238 - 241, 2009

NIVELES SRICOS DE TETRAYODOTIRONINA LIBRE (T4 L),


MEDIANTE EL MTODO DE ELECTROQUIMIOLUMINISCENCIA
EN CANINOS.
Free tetraiodothyronine (FT4) serum levels by electrochemiluminescence
method in canines.

Gins Fernando Ramrez Benavides 1* y Jos Henry Osorio 2


1 Departamento de salud animal, Hospital Veterinario, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad de Caldas. Manizales.
Colombia. *E-mail: gines.ramirez@ucaldas.edu.co. 2 Departamento de Ciencias Bsicas. Laboratorio de Enfermedades
Metablicas, Facultad de Ciencias para la Salud. Universidad de Caldas. Manizales. Colombia.

RESUMEN cence method for measuring FT4 is valuable diagnostic tool in


canine medicine.
El presente estudio establece valores de referencia para niveles
Key words: Canine, electrochemiluminescence, thyroid hor-
sricos de tetrayodotironina libre (T4L) en caninos mediante el
mones.
mtodo de electroquimioluminiscencia. Se utilizaron 180 caninos
que fueron divididos en grupos segn la edad y el sexo. Se en-
contraron diferencias altamente significativas (P<0,0001) relacio- INTRODUCCIN
nadas con la edad, sin encontrarse diferencias significativas con
respecto al sexo para dicha hormona. Los resultados de este es- La glndula tiroides fue descrita como entidad anatmica
tudio sugieren que las concentraciones sricas de tetrayodotironi- en 1656 por Wharton [1,3] y la denomin glandulae thyroidaeae;
na libre (ng/L) en caninos menores de 1ao, de 1 a 7 aos y ma- pero hasta 1915 no se aisl la sustancia activa, tiroxina, por Ken-
yores de 7 aos, oscilan entre 9,90-11,74 ng/L, 8,51-11,74 ng/L y dall [4,5, 18]. En 1926, Harrigton estableci la estructura qumica
7,48-8,64 ng/L, respectivamente. La determinacin de T4L me- de la tiroxina [7, 17]; a partir de entonces se han ido determinan-
diante electroquimioluminiscencia, puede considerarse til como do los pasos sucesivos de su biognesis, que comienza con la
ayuda diagnstica de posibles alteraciones tiroideas. yodacin del aminocido tirosina y que termina en la tiroxina [7,
Palabras clave: Canino, electroquimioluminiscencia, hormonas 14]. El aumento de volumen de la tiroides en animales con defi-
tiroideas. ciencia de yodo ha servido durante largo tiempo como ejemplo
clsico para el estudio de hipertrofia de un rgano para compen-
sar deficiencias de un material nutritivo hasta el restablecimiento
ABSTRACT
del equilibrio normal. Dicha hipertrofia compensadora (bocio
struma) [8] ha sido reconocida desde tiempos remotos, pues se
The present study establishes references values for free Tetraio- cita en el papiro de Ebers (cuando menos 1500 aos antes de
dotironine (FT4) in canines using eletrochemiluminescence Jesucristo). El advenimiento del yodo radiactivo estimul enorme-
method. Blood samples from 180 canines divided in six groups of mente las investigaciones sobre la funcin tiroidea. Desde enton-
age (males and females), 30 animals for each group were used. ces, el nmero de trabajos dedicados a la glndula tiroides iguala
Significant differences (P<0.0001) was found between age o supera a los llevados a cabo sobre cualquier otra glndula en-
groups but not between sex groups. The canine average values docrina [23]. La funcin principal de la glndula tiroides consiste
for FT4 using this technique were as follow: younger than 1 year en acumular yodo y fijarlo al aminocido tirosina para formar las
of age , 9.9 11.7 ng/L; from 1 to 7 years of age, 8.1 11.7 ng/L; hormonas tirodeas bajo el control de la adenohipfisis mediante
older than 7 years of age 7.4- 8.6 ng/L. The electrochemiluminis- la secrecin de tirotrofina u hormona estimulante de la tiroides
(TSH) [13]. La formacin de dichas hormonas est regulada por
Recibido: 05 / 03 / 2007. Aceptado: 08 / 07 / 2008. un sistema de retroalimentacin o feed-back negativo, a travs

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de la respuesta coordinada del eje hipotalmico-pituitario-tiroi- cia provee la seguridad, sensibilidad, rapidez y menor costo re-
deo [9]. La hormona liberadora de TSH (HLT o TRH) se une a queridos [4]. La Quimioluminiscencia (QL) se define como la emi-
la clula tirotrfica de la hipfisis y estimula la secrecin de ti- sin de radiacin electromagntica producida por una reaccin
rotropina (HET o TSH) que se une a la membrana celular foli- qumica. Cuando esta emisin proviene de organismos vivos o
cular y estimula la sntesis y secrecin de la hormona tiroidea. sistemas derivados de ellos, se denomina bioluminiscencia. Am-
Cuando se producen aumentos sricos de las hormonas tiroi- bos fenmenos son procesos luminiscentes que se han identifi-
deas, se diminuye la produccin de TSH desde la glndula pi- cado tradicionalmente mediante un prefijo que identifica la fuente
tuitaria [18]. Luego de ser transportado activamente hasta el de energa responsable del inicio de la emisin de radiacin elec-
interior de la tiroides, el yodo es oxidado e incorporado dentro tromagntica [7]. En estos procesos se generan especies muy
de la molcula de tiroglobulina (660000 Da) la cual posterior- reactivas a partir de precursores estables en la superficie de un
mente sufre protelisis para producir T3 y T4 [21], la tiroglobulina electrodo. Las especies qumicas altamente reactivas formadas,
contiene aproximadamente 140 molculas de tirosina [19]. Me- reaccionan entre s produciendo luz. El desarrollo de inmunoen-
diante un proceso oxidativo, el yodo es incorporado a la tirosina, sayos basados en ECL se fundamenta en el uso de un complejo
despus de que sta se une a la tiroglobulina [9]; esta unin del de rutenio y de tripropilamina (TPA) [25].
yodo a la tirosina requiere la presencia de tiroperoxidasa (TPO)
El presente trabajo tuvo como objetivo, aportar valores de
protena que necesita perxido de hidrgeno como agente oxi-
referencia para la determinacin de T4 en caninos mediante elec-
dante y a la que Cunningham describe como una enzima clave
troquimioluminiscencia, como herramienta diagnstica de proble-
en la biosntesis de las hormonas tiroideas, ya que sta cataliza
mas tiroideos.
la formacin de las hormonas tiroideas [9]. Sin la presencia de la
TPO, el yodo inorgnico no puede convertirse en yodo organifi-
cado y tampoco pueden producirse las hormonas tiroideas [1]. El MATERIALES Y MTODOS
acoplamiento de una o dos molculas de yodo a la tirosina pro-
duce la monoiodotirosina (T1) o diodotirosina (T2). La unin de Recoleccin de muestras
dos molculas de T2, dar origen a la tetrayodotironina (T4) y el
Se incluyeron en este estudio un total de 180 caninos
de una molcula de T1 y otra de T2, formar la T3 o tiyodotironina
(Canis familiaris) que se seleccionaron en forma aleatoria [15]
[12].La funcin tiroidea est regulada por la hormona estimulan-
y sin discriminacin de tamao, raza y alimentacin. A cada
te de la tiroides TSH, una hormona glicoprotica e hidrosoluble,
paciente se le realiz un examen clnico y fueron selecciona-
con un peso molecular de 28.000 a 30.000 Daltons producida y
dos animales clnicamente sanos, los cuales no estuvieran re-
secretada por las clulas tirtropas adenohipofisiarias [16]. La
cibiendo medicamentos que pudieran alterar la funcin tiroi-
principal funcin de la TSH es estimular el desarrollo de la gln-
dea. Los pacientes fueron divididos en grupos conformados de
dula tiroidea, que aumenta su tamao e incrementa su vasculari-
acuerdo a la edad y al sexo de la siguiente manera: 30 ma-
zacin. La glndula tiroides produce entonces principalmente, la
chos menores de 1 ao y 30 hembras menores de 1 ao; 30
(T3) triyodotironina, la (T4) tetrayodotironina y la calcitonina [18];
machos entre 1 y 7 aos y 30 hembras entre 1 y 7 aos; y 30
las dos primeras hormonas segn Bilezikian mantienen el normal
machos mayores de 7 aos y 30 hembras mayores de 7 aos.
funcionamiento de variados rganos y sistemas, entre los que se
destacan el sistema nervioso central, el circulatorio, el digestivo y Fueron obtenidas muestras de sangre (5 mL) por veno-
el hematopoytico [7]. Tambin regulan la expresin gnica, la puncin y se depositaron en tubos estriles sin anticoagulan-
diferenciacin de los tejidos, el desarrollo general, tambin esti- te debidamente rotulados. Posteriormente fueron centrifuga-
mulan la oxidacin de las grasas (lo que pone de manifiesto la das las muestras a 3500 rpm, durante 5 minutos para la ob-
prdida de condicin corporal), adems de ser reconocidas por tencin de los sueros y se conservaron a -20C hasta el mo-
su importancia en la regulacin general del metabolismo basal mento del anlisis.
debido a la estimulacin de la utilizacin del oxgeno [6, 18]. La
T4 es usualmente la nica hormona evaluada ya que la medicin Procesamiento de las muestras
de T3 es menos confiable y no ofrece ventajas sobre la T4. [19].
Las concentraciones sricas de T4 L en caninos fueron
En los ltimos aos, la evaluacin de la funcin endocrina ha
medidas mediante el kit comercial Elecsys T4 reagent (Ro-
presentado un avance extraordinario. La introduccin del radioin-
che, Bogot), el equipo utilizado fue el Elecsys 2010 de la
munoensayo y tcnicas relacionadas (Quimioluminiscencia y
casa comercial BioVeris (EUA).
Electroquimioluminiscencia) han permitido medios altamente es-
pecficos y sensitivos para medir hormonas en suero, plasma, le-
Anlisis estadstico
che y otros lquidos corporales. Los inmunoensayos han ayudado
a aumentar el conocimiento de eventos endocrinos y metablicos Una vez obtenida la media, la mediana, la desviacin es-
que ocurren durante el estrs, enfermedades, ciclos reproducti- tndar y el intervalo para cada uno de los grupos, se realiz la
vos, crecimiento y desarrollo [11]. Grandes avances se han reali- comparacin estadstica, mediante la prueba de Tukey para lo-
zado en el diagnstico veterinario desde la introduccin del ra- grar establecer si haba diferencia significativa en los niveles
dioinmunoanlisis en 1959 [25]; hoy la electroquimioluminiscen- de la hormona en cuanto a edad y sexo [15].

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Niveles sricos de tetrayodotironina libre (T4 L), mediante el mtodo de electroquimioluminiscencia en caninos / Ramrez, G. y Osorio, J.___

RESULTADOS Y DISCUSIN la propuesta por Murray Spiegel [2,15]. Las concentraciones sri-
cas de tetrayodotironina en los perros menores de 1 ao fluctan
En el presente estudio fueron obtenidos valores de refe- entre 9,90-11,74 ng/L; en perros entre 1 y 7 aos los niveles fluc-
rencia para T4L en sangre de caninos, utilizando la tcnica de tan entre 8,51-11,74 ng/L; y en perros de 7 aos en adelante,
electroquimioluminiscencia (TABLA I). No se encontr diferen- dichos niveles se encuentran entre 7,48-8,64 ng/L.
cia significativa entre los sexos de los diferentes grupos, sin Nelson y Couto [24] afirmaron que, mediante el empleo
embargo fue observada diferencia significativa (P<0,0001) al de kits de radioinmunoanlisis, los valores de T4 L superiores
comparar el grupo de perros mayores de 7 aos con respecto a 10ng/L son compatibles con eutiroidismo. Los resultados
a los otros grupos de edad. del presente estudio por electroquimioluminiscencia, mues-
El organismo no utiliza directamente las hormonas que tran valores similares a los reportados por estos autores [24],
la tiroides produce. Utiliza las hormonas que se producen en el observndose sin embargo, valores significativamente bajos
fraccionamiento de la tiroglobulina; pasan por tanto a la sangre en caninos mayores de siete aos de edad, lo que puede ex-
la T4 y la T3 y estas molculas, que son hormonalmente acti- plicarse de acuerdo al postulado de Ettinger y Feldman [10],
vas, se unen a la protena transportadora de compuestos yo- quienes sealan la existencia de una ligera disminucin de la
dados (PBI). En este caso, la mayor parte de la T4 y la T3 cir- hormona de casi 0,1 g/dL al ao. Debido a una reduccin
culan en sangre en su forma ligada a la protena (99%), y slo del contenido y secrecin hipotalmica basales de TRH, cuya
una proporcin muy pequea en su forma libre (1%) [10]. En sntesis y liberacin est modulada por las hormonas tiroi-
los perros, la cantidad de hormona libre que circula en el plas- deas y mediada por un mecanismo noradrenrgico (NA) a ni-
ma es un poco menor del 1% para T4 y ligeramente mayor del vel del hipotlamo.
1% para T3, debindose esto a una menor afinidad entre las Con la vejez, se produce un descenso de la funcin NA
protenas conjugadoras del plasma y las hormonas tiroideas y del transporte de T3 a travs de la barrera hematoenceflica,
en el plasma canino [9]. Las hormonas T4 y T3 que circulan sin lo cual podra contribuir a la menor produccin de TRH [2]. Los
ligar, se denominan T4 -Libre (T4L) y T3 -Libre (T3L). Esta frac- valores de tetrayodotironina libre, aportados por el presente
cin mnima constituye las autnticas hormonas activas [18]. trabajo se convierten en una ayuda til para la clnica canina
La fraccin de las hormonas tiroideas que circulan ligadas a brindando as mayor precisin en los esquemas teraputicos
protenas sirve como reservorio y de esta manera cuando sea relacionados con alteraciones de la funcin tiroidea.
necesario, el organismo abastece de T3 y T4 a la circulacin
[19]. Existen 2 patrones ontognicos distintos en las concen-
traciones circulantes de triyodotironina T3 y tetrayodotironina CONCLUSIONES
T4 entre los mamferos. En los mamferos precoces, las con-
centraciones circulantes de T3 y T4 se incrementan durante el Es posible utilizar la tcnica de electroquimioluminiscen-
desarrollo fetal, alcanzan el pico inmediatamente despus del cia para la determinacin de T4L en caninos de diferentes eda-
nacimiento, y declinan posteriormente. En contraste, en las de- des. Los valores de referencia aqu aportados, son una herra-
ms especies, las concentraciones circulantes de T3 y T4, con- mienta valiosa, para el anlisis de las posibles alteraciones re-
tinan incrementando durante el desarrollo postnatal y alcan- lacionadas con el funcionamiento de la glndula tiroidea en ca-
zan el pico despus del nacimiento [20, 22]. ninos. A pesar de no encontrar diferencias significativas rela-
cionadas con el sexo, si es notoria una disminucin en los ni-
En el presente trabajo, el intervalo en los niveles de T4 L
veles de T4L en caninos mayores de 7 aos de edad.
para cada uno de los grupos fue calculado con base en la frmu-

TABLA I
VALORES OBTENIDOS PARA T4L MEDIANTE LA TCNICA DE ELECTROQUIMOLUMINISCENCIA EN CANINOS
(SEIS GRUPOS DE EDAD)/ VALUES OBTAINED FOR FT4 BY ELECTROCHEMILUMINESCENCE IN CANINES (SIX GROUPS OF AGES)

Grupo Min. Max. Media Mediana S.D Intervalo


ng / L ng / L
1 4,7 21,9 10,7 10,4 3,8 9,3 - 12,1
2 6,3 20,2 10,8 9,8 3,5 9,6 - 12,1
3 4,1 18,9 9,3 8,8 3,5 8,0 - 10,6
4 3,1 15,3 9,3 9,1 3,1 8,2 - 10,5
5 5,1 13,1 8,7 8,2 2,4 7,8 - 9,6
6 4,0 10,8 7,3 7,7 1,9 6,6 - 8,0
Abreviaturas: T4L: tetrayodotironina Libre;1: hembras menores de un ao; 2: machos menores de un ao; 3: hembras entre uno y siete aos;
4: machos entre uno y siete aos; 5,: hembras mayores de siete aos; 6: machos mayores de siete aos; Min: valor mnimo; Max,: valor mximo;
ng/L: nanogramos por litro; S,D: desviacin estndar.

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REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS [12] GREENSPN, F.S. The Thyroid Gland. Basic and Clini-
cal Endocrinology, Norwalk. 160-266pp. 1994.
[1] ADAMS, H. R. Thyroid Drugs and Antithyroid Drugs. Vet- [13] GRIFFIN, J. E.; OJEDA, S. R. Endocrine Physiology.
erinary Pharmacology and Therapeutics. 7th Ed. Iowa: The Thyroid. 2nd Ed. Oxford: Oxford University Press,
H. Richard Adams. 599-64pp. 1995. 61-74pp. 1992.
[2] ANANTH, C.V; KLEINBAUM, D.G. Regression models [14] KALLFELZ, F.A. Thyroid function in the dog. Vet. Clin.
for ordinal responses: a review of methods and applica- North Am. 7(3):497-512. 1977.
tions. Int. J. Epidemiol. 26(6):1323-33. 1997.
[15] KLEINBAUM, D.G.; KUPPER, L.L.; MULLER, K.E. Ap-
[3] ALVAREZ, A.; FRANCO, A, CACABELOS, R. Sistema plied regression analysis and other multivariable meth-
Psiconeuroendocrino y envejecimiento. Anal de Psicol. ods. 2nd Ed. Boston. PWS-Kent. 98-267pp. 1987.
6 (2): 115-146. 1990.
[16] KUROSUMI, K. Ultrastructural immunocytochemistry of
[4] AVILEZ, R. J. Validacin y rangos de referencia de anli- the adenohypophysis in the rat. J. Electron. Microsc.
sis hormonales por electroquimioluminiscencia: testoste- Tech. R.19: 42-56. 1991.
rona en ovinos progesterona en ovinos triyodotironina
[17] LACCOURREYE, O.; WERNER, A. The history of the
y tiroxina en caninos. Universidad Catlica de Temuco.
thyroid gland: diseases and eponyms. J. Chir. (Paris).
Facultad de Acuicultura y Ciencias Veterinarias. Escuela
144(3):256-7. 2007.
de Medicina Veterinaria. Chile, 33pp. 2003.
[18] LEOUTSAKOS, V.A. Short history of the thyroid gland
[5] BAEYENS, W. R.; GARCA, A.M. Miniaturizacin en Qui-
(Athens) Hormon. 3(4):268-71. 2004.
mioluminiscencia: Una interesante alternativa para la deter-
minacin analtica de frmacos y compuestos de inters [19] LEIB, M. S.; MONROE, W. E. Diseases of Thyroid
biomdico. 2004. Universidad de Granada. En lnea. Gland. Practical Small Animal Internal Medicine.
http://www.raf.es/pdf/sesiones/sesion. 29 enero 2004. Chap. 47. 2nd Ed. Philadelphia: Saunders Company.
1028-1041pp. 1997.
[6] BILEZIKIAN, J.P.; LOEB, J. The influence of hyperthy-
roidism and hypothyroidism on alpha and beta adrener- [20] MALINOWSKI, K. Age and breed differences in thyroid
gic receptor systems and adrenergic responsiveness. hormones, Insulin-Like Growth Factor (IGF)-I and IGF
Endocr. Rev. 4: 378-88. 1983. Binding Proteins in Female Horses. J. of Anim Sci.
74(8):1936-1942. 1996.
[7] BOOTH, N. H.; MC DONALD, L. E. Farmacologa del
sistema endocrino. Farmacologa y Teraputica Veteri- [21] MATAMOROS, R; GOMEZ, C; ANDAUR, M. Hormonas
naria: Zaragoza: Acribia, 589-629pp. 1988. de Utilidad Diagnstica en Medicina Veterinaria. Arch.
Med. Vet. 34(2): 167-182. 2002.
[8] BUDRAS, K. D; FRICKE, W; SALAZAR, I. Contribucin
a la Anatoma Funcional y Clnica. Atlas de Anatoma [22] MC DONALD, LD. Glndula tiroides. Reproduccin y
del Perro: Madrid: Mc Graw Hill Interamericana, 73- Endocrinologa Veterinarias: Cap 3. Interamericana,
74pp. 1989. 38-51pp. 1971.
[9] CUNNINGHAM, J. G. Glndulas Endocrinas y su Fun- [23] MC DONALD, LD. Glndula tiroides. Reproduccin y
cin. Fisiologa Veterinaria. Mc Graw Hill Interamerica- Endocrinologa Veterinarias. Cap. 3. 4th Ed. Interameri-
na, 458-464pp. 1999. cana, 56-71pp. 1991.
[10] ETTINGER, S. J.; FELDMAN, E. C. Enfermedades Hipo- [24] NELSON, R. W.; COUTO, C. Enfermedades de la Glndu-
tiroideas. Tratado de Medicina Interna Veterinaria: 4th la Tiroides Manual de Medicina Interna de Pequeos
Ed. Buenos Aires: Interamericana, 1794-1813pp. 1997. Animales. Cap 51. Madrid: Harcourt, 437-454pp. 2000.
[11] FELDMAN, E.C.; NELSON, R.W. The thyroid gland. Ca- [25] PACINI, F.; PINCHERA, A. Serum and tissue thyro-
nine and feline endocrionology and reproduction. 2th globulin measurement: clinical applications in thyroid dis-
Ed. Philadelphia, W.B.Saunders. 67-185pp 1996. ease. Biochimie. 81(5):463-7. 1999.

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