Qumica Orgnica.

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Prctica VI.- Cromatografa en capa fina.
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a) Concepto de cromatografa. Tipos de cromatografa de adsorcin y
cromatografa de particin. Ejemplos.

Cromatografa: tcnica de anlisis qumico utilizada para separar sustancias puras de

mezclas complejas. Esta tcnica depende del principio de adsorcin selectiva.

La adsorcin es la propiedad que tienen ciertos slidos de aumentar la concentracin en

su superficie de otras sustancias. La separacin se debe a las diferencias de adsorcin de
los componentes de una mezcla sobre la fase estacionaria. La fase estacionaria ha de ser
un slido polar de gran superficie (adsorbente). La fase mvil puede ser un gas o un
lquido dando lugar a la cromatografa gas-slido (CGS) o lquido-slido (CLS).

El grado de adsorcin vara segn la naturaleza y superficie especfica de los adsorbentes

y naturaleza de los solutos. Los enlaces entre molculas adsorbidas y el adsorbente han
de ser dbiles para que su fijacin sea reversible, las uniones son debidas a fuerzas
intermoleculares (interacciones dipolo-dipolo o puentes de hidrgeno). Como regla
general, las polaridades del adsorbente y de los solutos han de ser opuestas.

La cromatografa lquido-lquido, tambin llamada de particin se caracteriza por emplear

una fase estacionaria lquida, anclada a un soporte slido, y una fase mvil tambin
lquida. El soporte slido por lo general es gel de slice, sobre cuya superficie se ha
anclado una fase lquida con la incorporacin de una cadena hidrocarbonada larga,
mediante la transformacin de los grupos silanol (Si-OH) de la gel de slice en grupos
siloxano (Si-O-Si-R), lo que proporciona una fase lquida estacionaria trmicamente
estable y difcil de hidrolizar en condiciones normales.

b)

Fenmeno de adsorcin: unin de los tomos, iones o molculas de un gas o de un

lquido (adsorbato) a la superficie de un slido o lquido (adsorbente). En los slidos
porosos o finamente divididos la adsorcin es mayor debido al aumento de la superficie
expuesta. De forma similar, la superficie adsorbente de una cantidad de lquido se
incrementa si el lquido est dividido en gotas finas. En algunos casos, los tomos del
adsorbato comparten electrones con los tomos de la superficie adsorbente, formando
una capa fina de compuesto qumico. La adsorcin es tambin una parte importante de
la catlisis y otros procesos qumicos. En la absorcin, las molculas de la sustancia
adsorbida penetran en todo el volumen del slido o lquido adsorbente.

Relacin de frente: Una vez que la placa ha sido revelada nos encontramos con una
serie de manchas circulares. Si la separacin ha sido buena cada una de ellas se
corresponder a un nico compuesto de la mezcla inicial. Es importante tener en cuenta
que un mismo compuesto corre siempre de la misma forma en cromatogramas
realizados en las mismas condiciones (mismo soporte y mismo eluyente). Para
describir las propiedades cromatogrficas de cada compuesto se define el factor de
retencin Rf.

E l f a c t o r R f es el cociente de la distancia recorrida por el compuesto (d c) entre

la distancia recorrida por el eluyente (de). Obviamente el Rf toma valores entre 0.0 y
1.0. Siempre ha de indicarse el eluyente y el soporte en el que se ha determinado.

c) Cromatografa en capa fina.

La cromatografa en capa fina (CCF), TLC (Thin layer chromatography) es una tcnica
cromatogrfica. La fase estacionaria es una capa uniforme de un absorbente mantenido
sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte.

La cromatografa en capa fina es una tcnica analtica rpida y sencilla, muy utilizada en
un laboratorio de Qumica Orgnica. Entre otras cosas permite:

- Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar as, por ejemplo,

la efectividad de una etapa de purificacin.

- Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podran ser idnticas. Si,
por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.

- Realizar el seguimiento de una reaccin. Es posible estudiar cmo desaparecen los

reactivos y cmo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber cundo la
reaccin ha acabado.

La muestra a analizar se deposita cerca de un extremo de una lmina de plstico o

aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente (fase
estacionaria). Entonces, la lmina se coloca en una cubeta cerrada que contiene uno o
varios disolventes mezclados (eluyente o fase mvil). A medida que la mezcla de
disolventes asciende por capilaridad a travs del adsorbente, se produce un reparto
diferencial de los productos presentes en la muestra entre el disolvente y el adsorbente.
d) Eluyentes, soportes y reveladores ms comunes para la cromatografa en capa
fina.

Los dos adsorbentes (fase estacionaria) ms ampliamente utilizados son la gel de slice
(SiO2) y la almina (Al2O3), ambas de carcter polar. La almina anhidra es el ms activo
de los dos, es decir, es el que retiene con ms fuerza a los compuestos; por ello se utiliza
para separar compuestos relativamente apolares (hidrocarburos, haluros de alquilo,
teres, aldehdos y cetonas). La gel de slice, por el contrario, se utiliza para separar
sustancias ms polares (alcoholes, aminas, cidos carboxlicos). El proceso de adsorcin
se debe a interacciones intermoleculares de tipo dipolo-dipolo o enlaces de hidrgeno
entre el soluto y el adsorbente. El adsorbente debe ser inerte con las sustancias a
analizar y no actuar como catalizador en reacciones de descomposicin. El adsorbente
interacciona con las sustancias mediante interaccin dipolo-dipolo o mediante enlace de
hidrgeno si lo presentan.

El orden de elucin de un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la fase

mvil o eluyente. El eluyente puede ser un disolvente nico o dos miscibles de distinta
polaridad. En el siguiente recuadro se recoge por orden creciente de fuerza eluyente los
disolventes ms comnmente empleados.

Hexano < tetraclorometano < cloroformo < diclorometano < acetato de etilo < acetona < 2-
propanol < metanol < agua.

En general, estos disolventes se caracterizan por tener bajos puntos de ebullicin y

viscosidad, lo que les permite moverse con rapidez. Raramente se emplea un disolvente
ms polar que el metanol.
Usualmente se emplea una mezcla de dos disolventes en proporcin variable; la polaridad
de la mezcla ser el valor promediado en funcin de la cantidad de cada disolvente
empleada. El eluyente idneo para cada caso ha de encontrarse por "el mtodo del ensayo
y del error".

e) Factores que influyen en una separacin por cromatografa de capa fina.

Hay algunos factores que pueden afectar el factor de retencin en algunos casos. La
temperatura del disolvente y la placa puede hacer pequeos cambios ya que, por ejemplo,
el disolvente puede a menudo disolver mejor los productos qumicos que se transportan a
temperaturas ms altas. La tcnica empleada en la aplicacin de la muestra a la placa
tambin puede cambiar el factor de retencin. Un efecto potencial es que aplicar
demasiadas muestras resultar en grandes y difusas bandas de qumicos ascendiendo en
la placa, dificultando la medicin precisa de la distancia que el qumico ha sido
transportado.
BIBLIOGRAFA.

- Guzmn Daz, David; Zamudio R., Rubn; otros. Introduccin a la tcnica

Instrumental. Primera Edicin. IPN. Mxico, 2001. Pp. 159 167.

- Cromatografa." Microsoft Encarta 2006 [DVD]. Microsoft Corporation, 2005.

- http://www.uam.es/docencia/jppid/documentos/practicas/actuales/guion-p6.pdf