Universidad Catlica Santa Maria

Facultad de Ciencias Farmaceticas, Bioqumicas y Biotecnolgicas

Arequipa

Anlisis del contenido de Taninos en la

corteza de Uncaria tomentosa (Wild.) DC
LENNY ORANA SARMIENTO SNCHEZ

Resumen

Uncaria tomentosa (Wild.) DC (Ua de Gato), es una

especie que aporta cantidades suficientes de
alcaloides. En el presente trabajo se expone la
extraccion, identificacion y cuantificacion de las
sustancias fenolicas presente en los vegetales, asi
tambien pudimos diferenciar dentro del extracto los
taninos galicos y catquicos.

PALABRAS CLAVE: Uncaria Tomentosa, alcaloides,

Taninos Galicos, Taninos Catequicos

Summary

Uncaria Tomentosa (Wild.) DC, (cats claw) is one of the most

important species whose has been able to exhibit alkaloids. In
this paper I report the extraction, identification and
quantification of phenolic substances on plants, to I can
difference in the extract the Gallic tannins of catequics
Tannins.

KEY WORDS: Uncaria Tomentosa, alkaloids, Gallic tannins,

catequics tannins

Introduccin
Uncaria tomentosa (Wild.) DC tiene una amplia distribucin geogrfica, pero esto no
garantiza, en condiciones naturales, la conservacin de la diversidad gentica1 . La
diversidad gentica confiere adaptabilidad y potencial evolutivo a las especies que
llevan tales genes. Por ello en primer lugar hay que mantener los componentes de la
diversidad, despus hay que estudiarlos y finalmente basndose en estos
conocimientos, hay que utilizarlos sosteniblemente 2.
Para aprovechar esta diversidad se requiere de un proceso de domesticacin que facilite
el mejoramiento gentico para propiciar la produccin sostenible de este recurso
forestal no maderable. El problema fundamental radica en que la corteza, como
principal materia prima de Uncaria tomentosa que se encuentra en el comercio, es
significativamente heterognea en cuanto a rendimiento y calidad de sustancias con
actividad biolgica, debido a la variabilidad de factores genticos y de hbitat, que no
son manejados en el proceso de extraccin del bosque natural1 .

La presente investigacin tiene como objeto de estudio la corteza de plantas

desarrolladas en bosques naturales con diferentes condiciones de hbitat,
caracterizados por los niveles altitudinales y de precipitacin en donde se han
desarrollado3 . Bajo esta premisa se ha propuesto el siguiente objetivo: Determinar el
contenido y tipo de alcaloides presentes en la corteza de Uncaria tomentosa (Willd.) DC
proveniente de cuatro condiciones de hbitat seleccionados.

El conocimiento del aspecto ecolgico de la especie es el factor ms importante para el

manejo y la obtencin de materia prima de calidad; pero en este caso es el tema menos
estudiado. Los estudios en este campo se concentran principalmente en la
caracterizacin del medio natural en donde la especie ha sido reportada a nivel de
muestras dispersas de su amplia distribucin. Algunos autores reportan estudios de
determinacin edafo climtica en una sub cuenca de la amazona peruana4 , mientras
que estudios de campo, realizados por otros, determinan una variada y compleja
distribucin y caractersticas de poblaciones de Uncaria tomentosa (Willd.) DC en el
bosque natural1 .

Existen muy pocas experiencias sobre manejo de la ua de gato en bosque primario,

que es de donde proviene la mayor cantidad de corteza para la comercializacin. As, se
describe una experiencia de manejo de la ua de gato para ser desarrollado en bosque
primario5 ; sin embargo, el tipo de extraccin aplicado y las condiciones de baja
luminosidad no garantiza que el rebrote prospere por lo que se puede ocasionar la
muerte de la planta y la disminucin de poblacin que es fuente de semillas y
variabilidad gentica 6. De esta manera an no se cuenta con mecanismos de control
de la extraccin de este recurso que disminuya los riesgos de su extincin por la sobre
explotacin, como tambin la desaparicin del producto ua de gato en el mercado
por la prdida de credibilidad propiciada por la diversidad de calidades1 .

En productos naturales de uso medicinal el aspecto ms importante que se debe

considerar es el contenido de sustancias qumicas con actividad biolgica representada
por los metabolitos secundarios, entre los que se encuentran alcaloides, glicsidos,
taninos, esencias y resinas. Todos estos componentes (excepto las resinas), se
encuentran almacenados en el interior de la clula vegetal, encerrados en vacuolas
especializadas ubicadas en cualquier parte de la planta7 . As se tiene que los alcaloides
pueden concentrarse en hoja, corteza, tallo, raz, etc.; su presencia depende del
metabolismo del vegetal y ste es variable de una especie vegetal a otra, e inclusive,
de una variedad a otra 7.

En Uncaria tomentosa, ha sido observado que hay tres variedades de corteza que
pueden tener relacin con el clima; as, la variedad gris blanquecina suele estar en
condiciones fras y secas, el tipo rojo oscuro en clima clido y hmedo y la variedad
marrn amarillenta entre ambas condiciones climticas; afirman los autores que no
encontraron correlacin entre el color de la corteza de la raz y su contenido de
alcaloides8 . Comparando las muestras de varias plantas individuales llegan a la
conclusin de que cambian de un patrn alcaloide a otro con el transcurrir del tiempo y
para diferentes pocas del ao; asimismo, muestras de varias plantas individuales
tambin tenan variaciones en sus patrones alcaloides8 .

Otros estudios concluyen que el grosor de tallos no es un factor muy determinante. Sin
embargo, la tendencia es de un mayor contenido de mitrafilina en los tallos jvenes
(ramas con espinas) y mucho mayor en las hojas y peciolos9 .

En el caso de la ua de gato, los anlisis qumicos existentes no han sido en su conjunto

sistemticamente realizados; es por ello que se reportan variadas diferencias en el
contenido fitoqumico; es decir, el material analizado proviene de orgenes diversos, en
donde factores genticos o ambientales pueden estar incidiendo en una mayor o menor
produccin diferenciada de alcaloides, o simplemente las metodologas de anlisis
qumico son diferentes. Esta situacin no permite un anlisis comparativo de resultados
que contribuya con ms eficacia al conocimiento de la especie.(1)

Marco Teorico
Los taninos estn constituidos por un amplio grupo de compuestos hidrosolubles con
estructura polifenlica, capaces de precipitar ciertas macromolculas (protenas,
alcaloides, celulosa, gelatina). Esta capacidad para precipitarlas es la base de dos
propiedades principales: su capacidad de curtir la piel y su poder astringente.
Considerado como Tanino comn se tiene la frmula C14H14O11 , es aproximada
porque son polmeros complejos. (3)

Los taninos son glucsidos de polipptidos solubles en agua presentes en muchas

plantas, con un sabor agrio astringente, confiere sabor y olor indeseable a los
alimentos. Afectan la utilizacin de las protenas debido a que ligan a la lisina,
hacindola indisponible para animales monogstricos.

La prueba del cloruro frrico es utilizada para determinar la presencia o ausencia de

fenoles en una muestra dada. Los enoles tambin dan resultados positivos. La prueba
del bromo es muy til para confirmar los resultados, aunque las tcnicas
espectroscpicas modernas (como la RMN y la espectroscopia IR) son muy superiores
en determinar la identidad de la sustancia desconocida. La cantidad de fenoles totales
puede ser determinada espectroscpicamente por la prueba de Folin-Ciocalteu.(5)

Los taninos estn constituidos por un amplio grupo de compuestos hidrosolubles con
estructura polifenlica, capaces de precipitar ciertas macromolculas (protenas,
alcaloides, celulosa, gelatina). Esta capacidad para precipitarlas es la base de dos
propiedades principales: su capacidad de curtir la piel y su poder astringente.

Curtido de la piel: (7)Los taninos se intercalan entre las fibras de colgeno,

estableciendo uniones reversibles (interacciones hidrfobas, enlaces de hidrgeno, etc.)
e irreversibles (enlaces covalentes). Dichas fibras adquieren as una gran resistencia
frente al agua y el calor y la piel se convierta en cuero. Forman slidos amorfos
Solubilidad: Son solubles en agua, forman soluciones coloidales y en disolventes
orgnicos polares (acetona, alcohol, glicerina) pero son insolubles en disolventes
orgnicos polares (ter etlico, cloroformo) Capacidad de precipitar:

Con agua de cal(solucin de hidrxido clcico)

Con agua de barita(solucin de hidrxido barico)
Con wolframato o molibdato amnico
Con alcaloides, protenas, celulosa y otras macromolculas.

Capacidad de formar complejos: Son agentes quelantes con metales pesados como
cobre, mercurio, plomo, etc. Propiedad de Redox: Se oxidan con facilidad, sobre todo en
medio cido y pueden actuar como reductores de ciertos compuestos (cido
fosfowolfrmico, cido fosfomolibdnico, ferricianuro frrico). Estabilidad: Son
moderadamente estables. Los taninos hidrolizables se hidrolizan fcilmente en medio
cido mientras que los taninos condensados son ms resistentes a la hidrlisis. No
obstante algunos de sus enlaces pueden romperse y polimerizan dando productos de
intenso color rojo.

FUENTES NATURALES DE DNDE SE PUEDE OBTENER

Las plantas utilizadas para la extraccin industrial de taninos son:

Los taninos glicos se obtienen a partir de la corteza del castao (Castanea sativa) y de
las agallas de los robles (Quercus sp. pl), que se forman por la picadura en las yemas de
la hembra de insecto Cynips gallae-tinctoriae, llegando a tener hasta un 70% de
taninos. Los taninos condensados se obtienen de la madera de catec (Acacia catechu)
y de la corteza de algunas especies de eucalipto (Eucalyptus rostrata) entre otros.
Los pseudotaninos son cidos orgnicos derivados del cido cafico que muestran una
actividad farmacolgica muy interesante. Destacan en este sentido las hojas de
alcachofa (Cynara scolymus) que contienen cinarina y cido clorognico de accin
colagogocolertica y hepatoreguladora y la sumidad del romero (Rosmarinus officinalis)
con cido rosmarnico, de accin semejante. Los alimentos en los que se encuentran
estas sustancias presentan un sabor spero y amargo. Estn presentes en alimentos
como el t, el caf, las espinacas, las pasas negras y algunas frutas como la granada, la
manzana. En la granada, la corteza y los tabiques internos son las partes del fruto con
ms cantidad de taninos. En el caqui, la presencia de taninos, abundantes en la pulpa,
disminuye con la maduracin. En la manzana, los taninos aparecen cuando se deja
oscurecer la pulpa rallada de una manzana pelada. Son muy abundantes en el
mundo vegetal, especialmente en algunas familias (Fagceas, Rosceas, Fabceas,
Mirtacas, etc) y en diversos orgnicos: races rizomas (ruibarbo), cortezas (quina,
roble), leo (catec), hojas (hamamelis), frutos (cinorrodones). (6)

ESTRUCTURA GENERAL
Considerado como Tanino comn se tiene la frmula C14H14O11, es aproximada porque
son polmeros complejos.
ESTRUCTURAS CARACTERSTICAS DE CADA UNO DEL GRUPO DE
COMPUESTOS
TANINOS CONDENSADOS: (catquicos o proantocianidinas): son dmeros o polmeros
flavnicos con uniones carbono-carbono entre las diferentes unidades de flavan-3-ol. S
e forman por polimerizacin de las Catequinas y leucoantocianos. Adems de
encontrarse en Dicotiledneasse producen tambin en helechos y Gimnospernas.(4)
Son muy resistentes a la hidrlisis cida o enzimtica (que rompe ciertos enlaces) y se
convierten en antocianidinas, los cuales pueden polimerizar para formar los flobfenos
insolubles (color rojo intenso). Por destilacin seca producen catecol (1,2-
dihidroxibenceno). Por este motivo, reciben tambin el nombre de taninos catquicos. Al
tratar los taninos condensados con cloruro frrico (FeCl3) aparece una coloracin verde.

TANINOS HIDROLIZABLES: Son teres formados por una molcula de azcar,

generalmente la glucosa unida a un nmero variable de molculas de cidos fenlicos
(cido glico o su dmero el cido elgico). Los taninos hidrolizables son caractersticos
de dicotiledneas. Se hidrolizan tanto por hidrlisis cida o bsica como por hidrlisis
enzimtica. Por destilacin seca producen pirogalol (1, 2,3trihidroxibenceno). Al tratar
los taninos hidrolizables con cloruro frrico (FeCl3) aparece una coloracin azul.

EXTRACCIN DE TANINOS
Por regla general, la extraccin de los taninos se realiza con una mezcla de agua y
acetona (no se aconseja utilizar metanol porque provoca la metanolisis de los dpsidos
glicos). Se obtiene un rendimiento ptimo con los tejidos frescos o conservados por
congelacin o liofilizacin pues, en las drogas desecadas, una parte de los taninos se
encuentra irreversiblemente combinada con otros polmeros. Despus de eliminar la
acetona por destilacin, de la disolucin acuosa se separan con un disolvente como el
diclorometano, pigmentos y lpidos. Una extraccin de esta disolucin acuosa con
acetato de etilo permite separar los proantocianidoles dmeros y la mayor parte de los
taninos glicos. Los proantocianidoles polmeros y los taninos glicos de masa
molecular elevada permanecen en la fase acuosa. Para obtener molculas puras es
necesario utilizar tcnicas cromatogrficas apropiadas, generalmente una (o varias)
cromatografa(s) de exclusin sobre gel, seguido(s) de cromatografa(s) en fase reversa,
siempre en medio hidroalcohlico o hidroalcohol-acetnico.

APLICACIONES DE LOS TANINOS

EFECTOS ANTINUTRITIVOS
A pesar de todas sus propiedades, los taninos son considerados sustancias anti
nutritivas. Esto se debe a que una concentracin elevada puede provocar que la
absorcin de algunos nutrientes se vea disminuida. En el caso de las protenas, los
taninos se combinan con ellas y alteran su absorcin. En cuanto al hierro, cuando los
taninos estn en elevadas concentraciones, forman con este mineral complejos
insolubles en agua que no pueden ser absorbidos en el epitelio intestinal. Para
contrarrestar esta situacin, conviene saber las combinaciones dietticas que favorecen
la absorcin de hierro vegetal, como acompaar los alimentos con otros ricos en
vitamina C: zumo de naranja, kiwi, pia o ensalada de tomate. (7)
Propiedades Fisicoqumicas, Extraccion,
Caracterizacion, Valoracion de Taninos
Propiedades
Los taninos de disuelven en agua formando disoluciones coloidales, pero su
solubilidad varia segn el grado de polimerizacin, que disminuye conforme este
aumenta.
Como todos los fenoles, los taninos reaccionan con cloruro frrico.
Precipitan sus disoluciones acuosas con sales de metales pesados (Pb)y con
gelatina.
Los taninos hidrolizables y los condensados se pueden diferenciar en base a su
comportamiento en medio acido y en caliente. (2)

Extraccion
Por regla general, la extraccin de taninos se realiza con una mezcla de agua y acetona
(no se aconseja utilizar el metanol porque provoca la metanolisis de los depsidos
galicos). Se obtiene un rendimiento optimo con los tejidos frescos o conservados por
congelacin o liofilizacin pues, en las drogas desecadas como es el caso de este
experimento, una parte de estos taninos se encuentran irreversiblemente combinada
con otros polmeros. Depsues de eliminar la acetona por destilacin, de la disolucin
acuosa se separan con un disolvente como el DCM, pigmentos y lpidos. Una extraccin
de esta disolucin acuosa con acetato de etilo permite separar los proantocianidoles
dimeros y la mayor parte de los taninos galicos. Los proantocianidoles polmeros y los
taninos galicos de masa molecular elevada permanecen en la fase acuosa. Para obtener
molculas puras es necesario utilizar tcnicas cromatogrficas de exclusin sobre gel,
seguido de cromatografa en fase reversa, siempre en medio hidroalcohlico o hidro-
alcohol-acetonico. (2)

Caracterizacion
Con sales frricas los taninos galicos y elagicos dan coloraciones y precipitados
azul negro y los taninos condensados precipitados marron verdoso.
Los taninos galicos dan coloracin rosa con yoduro potsico (el acido galico libre
se colorea en naranja con este reactivo.
Los taninos elagicos se colorean con acido nitroso en medio actico (primero
rosa, despus vira a purpura y a azul).
 Los taninos condensados se colorean en rojo con vainilla clorhdrica.
Para analizar los extractos se recurren a tcnicas habituales; CCF y CLAR.(2)

Valoracion
La valoracin de taninos es delicada: es difcil obtener una extraccin completa y los
mtodos que se basan en el carcter fenlico de estos compuestos no son todos
especficos. Algunos mtodos permiten no obstante una cierta selectividad,
especialmentelos que se refieren nicamente a los taninos condensados.(2)

Valoracion que implica una precipitacin proteica

Metodo de la sangre hemolizada y centrifugada; se basa en la capacidad de los
taninos de combinarse con la hemoglobina y en la posibilidad de valorar
colorimtricamente.
Mtodo de la albumina srica bovina. Esta, solubilizada a su pH isoelctrico se
precipita con los taninos del extracto a valorar, el contenido en protenas del
precipitado se determina, despus de hidrolisis alcalina y reaccin del hidrolizado
con nihidrina, por colorimetra.
Metodo con polvo de piel, se basa en la capacidad de los taninos de unirse a las
protenas. Este mtodo sigue siendo utilizado, especialmente para el control de
ciertas drogas oficinales.

Valoracion de taninos condensados

Para valorar los proantocianidoles se puede evaluar la coloracin obtenida por la
transformacin en antocianidoles al someter los primeros a una ebullicin con n-
butanol clorhdrico. Por adicion de sales de hierro se acelera la despolimerizacin
y se obtiene una mejor reproducibilidad de la reaccin.
Tambin se pueden valorar en funcin del aducto coloreado que forma con la
vainilla en medio metanolico acido (HCl).
La tiolisis, utilizada principalmente en el estudio estructural y en la
determinacin del GP medio, acoplada con la CLAR, puede ser un mtodo de
valoracin.

Valoracion de taninos hidrolizables

En el caso de los taninos galicos, se puede hidrolizar el tanino en medio sulfrico, hacer
reaccionar el acido galico formado con rodamina y medir la absorbancia del producto de
la reaccin. Ocasionalmente se puede utilizar la reaccin del yoduro potsico.

Para valorar los taninso elagicos, se recurre clsicamente a la reaccin con HNO2
despues de hidrolisis sulfrica. Al ser los carbonos no sustituidos del acido elgico
liberado susceptibles de un ataque electrofilico, se forma una quinona oxima.

Valoracin de Fenoles totales

Metodo de Folin y Denis, el ion fenolato formado por la adicion de carbonato sdico, se
oxida con una mezcla de acidos fosfotungstico y fosfomolibdico que simultneamente
se reduce produciendo una disolucin coloreada azul de la que se determina la
absorbancia.
Resultados y discusiones
Discusin de resultados
Conclusiones
La aplicacin del mtodo alcalino de extraccin de alcaloides ha permitido
obtener una mayor cantidad de alcaloides con la depresin de tetracclicos.

La corteza presenta altas concentraciones de alcaloides tetracclicos en relacin

a la presencia de pentacclicos.

Existen diferencias significativas en el contenido de alcaloides de corteza de

diferentes localidades estudiadas.

Anexos
Extraccion
Identificacion cualitativa

Reaccion de diferenciacion
Valoracin por el mtodo de Jean

Bibliografa
1. DOMINGUEZ TORREJON, Gilberto et al . Contenido de alcaloides en corteza de Uncaria tomentosa (Wild.)
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