Diversidad microbiana por

componentes presentes en
su pared celular.
 Pared celular
Componente Principal
Adems hay otros
Peptidoglicana, cuya principal componentes
funcin es evitar la lisis
osmtica, adems de dar polisacridos especficos
forma y rigidez a la tanto en gram (+) como
membrana. en gram (-)

Gram Gram
Las bacterias, con base en positivos negativos
su pared celular, pueden
dividirse en:
 Gram Gram
positivos negativos
Peptidoglicana
Polisacrido formado por un enlace beta 1-4 entre N-acetilglucosamina y cido N-
acetilmurmico y un pequeo grupo de aminocidos (L-alanina, D-alanina, D-glutmico y lisina)
conocido como diaminopimlico (DAP)
Diferenciacin de bacterias por el DAP
A pesar de que el DAP es un componente presente en la pared bacteriana, ste, se encuentra en
todas las gramnegativas pero solo en algunas grampositivas.
Los cocos grampositivos poseen lisina en vez del DAP

En grampositivos:
-90% esta representado por peptidoglicana.
-10% a los cidos teicoicos (polmeros de pared) que son responsables de la carga negativa neta de la
pared celular.
Los cidos teicoicos tambin intervienen uniendo calcio y magnesio para su transporte. Si estos, se
encuentran unidos a lpidos, entonces se les denomina como cidos lipoteicoicos.
 La membrana externa de bacterias
gramnegativas

En bacterias gramnegativas, la
peptidoglicana nicamente
representa el 10% del total de la
pared celular; la mayor parte de esta,
est representada por la membrana
externa, que, a diferencia de la
membrana citoplasmtica, no est
compuesta nicamente por
fosfolpidos y protena, sino que
adems, contiene una bicapa de LPS
LPS (endotoxina)
Porcin polisacrida, consta de:
-Lpido A, que es la porcin ms proximal,
y de carcter hidrofbico.
-El ncleo de polisacrido est compuesto
por cetodesoxioctonato glucosa, galactosa
y N-acetilglucosamina
-Regin distal (cadena lateral especfica,
polisacardica) a base de repeticiones de
unos pocos azcares. Es de carcter
hidroflico y constituye el antgeno
somtico O
Inmuno-PCR
Unin de un microorganismo a un soporte slido utilizando un anticuerpo y una posterior
amplificacin de ADN por PCR. Es una tcnica que combina las ventajas de las tcnicas
inmunolgicas (ELISA) y de las tcnicas moleculares (PCR)
Por ejmplo en la deteccin de Pantoea stewartii, directamente de la semilla de maz. En este
caso fijo un anticuerpo primario a un microtubo, se lav el exceso de anticuerpo y se coloc la
muestra molida de la semilla, la cual se conoca que estaba infectada por Pantoea
stewartii, posteriormente se dej incubando por una hora para la unin antgeno-anticuerpo, se
lav para eliminar la muestra y en el tubo con el antgeno y el anticuerpo se realiz la PCR.
Aglutinacin
Cuando el antgenos se
encuentra unido o formando
parte de clulas, bacterias o
partculas, la reaccin Ag-Ac
se puede detectar y
cuantificar por el aglutinado
celular o bacteriano
formado.
Radioinmunoensayo
En esta tcnica el anticuerpo se une un istopo radiactivo
siendo posible la cuantificacin del complejo Ag-Ac a travs
de la radiactividad emitida.
PRODUCCIN DE NUCLEASA
TERMOESTABLE (TERMONUCLEASA
Se utiliza como una prueba indirecta de la presencia de grandes cantidades de Staphylococcus
aureus en los alimentos, as como de la posible formacin de enterotoxina estafiloccica.
La produccin de esta enzima se inhibe en anaerobiosis y se estimula por la presencia de
oxgeno, requiere iones calcio para su actividad enzimtica, posee un pH ptimo de 8,6 y se
precipita de cultivos fluidos con sulfato de amonio. Su termoestabilidad (resiste temperatura de
130 C) es la nica asociacin con el crecimiento de S. aureus.
PROCEDIMIENTO:
Tomar 2 porciones de un cultivo de 18 horas en
caldo cerebro-corazn; una de ellas se calienta a
100C por 15 minutos y se deja enfriar. Tomar
unas pocas gotas de cada porcin para llenar los
orificios respectivos de una placa con medio TDA.
Incubar a 37C por 4 horas.
RESULTADOS Un resultado positivo para la
termonucleasa estar dado por un halo rosado
alrededor de los reservorios de cultivo, tanto el
calentado como el no calentado.
Lisado de Amebocito de Limulus
(cangrejo herradura)
Es un ensayo cintico y cuantitativo para la
deteccin de endotoxina bacteriana gram negativa.
Se mezcla una muestra con el reactivo LAL, se
coloca en el lector de microplacas de incubacin y
se supervisa automticamente a lo largo del tiempo
para detectar la aparicin de un color amarillo. El
tiempo necesario antes de la aparicin del un color
amarillo (tiempo de reaccin) es inversamente
proporcional a la cantidad de endotoxina existente.
Es decir, con la presencia de una gran cantidad de
endotoxina, la reaccin aparece rpidamente, pero
con una pequea cantidad de endotoxina, aumenta
el tiempo de reaccin
 Espectrometra de masas
La espectrometra de masas MALDI-TOF
permite la tipificacin bacteriana a nivel de
gnero y especie (y en determinados casos
tambin subespecie). Mediante esta tcnica
se obtiene un espectro de masa compuesto
por los diferentes picos obtenidos tras la
ionizacin de los pptidos y pequeas
protenas caractersticos de cada especie
bacteriana.
El espectro con un rango entre 2.000-20.000
Da, representa de manera predominante a
las protenas ribosmicas (conservadas y
abundantes)
Referencias
http://www.madrimasd.org/blogs/alimentacion/2008/02/08/84070
http://multimedia.3m.com/mws/mediawebserver?mwsId=66666UuZjcFSLX
TtMxMy4xTtEVuQEcuZgVs6EVs6E666666--
&fn=HSCC%20Interp%20Guide_sp.pdf
http://gotasmicrobiologicas.blogspot.mx/2011/02/medios-
cromogenicos.html
http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20general/12-
metodos%20de%20recuento.htm
http://www.in-enologia-veritas.com/old/docs/Microbio.pdf
http://www.finagro.com.co/html/cache/HTML/SIS/FOODSAFETY/LinaCarolin
aCruz-DiagnosticoMicrobiologico.pdf